專利名稱：多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑。
背景技術(shù)：
多烯紫杉醇(Docetaxel)是ー種用于治療卵巣、乳房、結(jié)腸、頭、頸和非小細(xì)胞肺癌很有效的應(yīng)用于臨床的化學(xué)療法藥物。當(dāng)前的產(chǎn)品，泰素帝含有吐溫-80/こ醇溶劑來(lái)提高多烯紫杉醇的水溶性。然而，過(guò)敏性和一些與以吐溫-80為基底的制劑有關(guān)的副作用可能會(huì)在臨床應(yīng)用中發(fā)生。脂質(zhì)體和利用納米技術(shù)負(fù)載多烯紫杉醇的納米粒子已經(jīng)在減少以吐溫-80為基底的媒介的毒性方面日漸成熟。人的轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf，分子量80kDa)是帶有非血紅素鐵并 對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體有高親和力的糖蛋白，在腫瘤細(xì)胞上頻繁地高表達(dá)并且通過(guò)以轉(zhuǎn)鐵蛋白受體為媒介的內(nèi)吞細(xì)胞進(jìn)行內(nèi)化作用。所以，轉(zhuǎn)鐵蛋白被認(rèn)為是ー種有前景的配合基，并已經(jīng)作為腫瘤細(xì)胞靶向治療藥物的標(biāo)記物和造影剤介導(dǎo)而被廣泛研究。脂質(zhì)體(Liposomes)由天然的和合成的可生物降解、生物相客、無(wú)毒、無(wú)免疫排斥的磷脂質(zhì)和膽固醇制備。一些脂質(zhì)體產(chǎn)品已經(jīng)用于臨床實(shí)踐和臨床前實(shí)驗(yàn)。作為ー種靶向轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的配體，轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合于脂質(zhì)體粒子的表面，從而產(chǎn)生受體介導(dǎo)的靶向治療作用。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制齊U，及其制備方法。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的—種多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，是通過(guò)以下制備方法制備得到的取55 95重量份的磷脂，3 40重量份的膽固醇，與O. 05 20重量份的多烯紫杉醇混合，溶于こ醇中，真空旋蒸(除去こ醇)，加入O. 5 I. 5ml磷酸鹽緩沖液(pH 7. 4)水合得到脂質(zhì)體，然后應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，即得多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其平均粒徑在60 lOOnm，界面電勢(shì)在-10 20mVo所述應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面的具體步驟如下將轉(zhuǎn)鐵蛋白硫醇鹽化,在羥こ基哌嗪こ硫磺酸緩沖鹽(HBS，pH8. O)中加入Trauf s試劑到轉(zhuǎn)鐵蛋白中(Mft:MTf = 10:1)，充分反應(yīng)后得混合物，將此含有轉(zhuǎn)鐵蛋白亞巰基(Tf-SH)的混合物通過(guò)ro-ΙΟ柱并用HBS緩沖液(pH 6. 5)沖洗除去未反應(yīng)的Traut’s試劑，然后添加ニ硬脂酰磷脂酰膽堿-N-馬來(lái)酰亞胺聚こニ醇2000 (MAL-PEG-DSPE)水溶液(MTf_SH :Mm_PEe_DSPE=10:l)，充分反應(yīng)后，收集含巰基的轉(zhuǎn)鐵蛋白部分(常規(guī)方法收集)，然后與載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體Uif :m|旨=5:95)混合，在37°C下保溫一小吋，即得。
所述磷脂選自天然磷脂、合成磷脂中的任ー種或兩種以上。所選天然磷脂選自氫化大豆卵磷脂、卵磷脂或大豆磷脂。所選合成磷脂類選自聚こニ醇-ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺、合成ニ棕櫚酰磷脂酰膽堿或合成磷脂酰絲氨酸。優(yōu)選的，所述磷脂是由以下組分組成的氫化大豆卵磷脂、卵磷脂和聚こニ醇- ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺。所述多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制備方法，同上。多烯紫杉醇水溶性差，現(xiàn)有的注射劑采用吐溫80和こ醇溶液作為混合溶媒，應(yīng)用 時(shí)常引發(fā)嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)，不利于臨床用藥，因而研發(fā)具有良好溶解性能的多烯紫杉醇藥物輸送系統(tǒng)一直是研究的熱點(diǎn)。多烯紫杉醇是高親脂性的藥物，容易被包裹或分散于脂質(zhì)雙分子層中，且其包封率高達(dá)96%。因此，本發(fā)明研究的是具有高藥物包封率和穩(wěn)定性的多烯紫杉醇的ー種新型的靶向于轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的脂質(zhì)體制劑。該轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體相比于非靶向脂質(zhì)體，顯示了更強(qiáng)的細(xì)胞攝取作用及動(dòng)物體內(nèi)更長(zhǎng)的循環(huán)時(shí)間。本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑在4°C條件下儲(chǔ)藏超過(guò)六個(gè)月顯示出良好的穩(wěn)定性。細(xì)胞毒性研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體與非靶向脂質(zhì)體相比，可明顯提高多烯紫杉醇對(duì)KB細(xì)胞的毒性。本發(fā)明的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體將來(lái)有望成為癌癥治療的新型藥物制劑。


圖I :在RPMI1640培養(yǎng)液(10%胎牛血清)中37°C下，多烯紫杉醇分別從轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體(三角形)與非靶向脂質(zhì)體(方形)中的釋放曲線。圖2 :靜脈注射多烯紫杉醇后血漿濃度對(duì)時(shí)間的曲線圖。小鼠給予多烯紫杉醇15mg/kg，三條曲線分別代表在吐溫-80/こ醇中的多烯紫杉醇(方形)，非靶向脂質(zhì)體(三角形)或者靶向轉(zhuǎn)鐵蛋白受體脂質(zhì)體(菱形)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步的說(shuō)明。實(shí)施例I :制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑步驟如下稱取氫化大豆卵磷脂13. 56mg、卵磷脂35. 34mg、膽固醇35. 45mg、聚こニ醇-ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺5. 3mg,與多烯紫杉醇(5. 67mg)混合旋蒸，加入磷酸鹽緩沖液(pH 7. 4，下同)水合得多室脂質(zhì)體，用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，凍干，即得。所述應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面的具體步驟如下(以下實(shí)施例皆同)將轉(zhuǎn)鐵蛋白硫醇鹽化，在羥こ基哌嗪こ硫磺酸緩沖鹽(HBS，pH8. O)中加入Traut，s試劑到轉(zhuǎn)鐵蛋白中(MTr:MTf=10:1)，充分反應(yīng)后得混合物，將此含有轉(zhuǎn)鐵蛋白亞巰基(Tf-SH)的混合物通過(guò)ro-ΙΟ柱并用HBS緩沖液(pH 6. 5)沖洗除去未反應(yīng)的Traut’ s試劑，然后添加ニ硬脂酰磷脂酰膽堿-N-馬來(lái)酰亞胺聚こニ醇 2000 (MAL-PEG-DSPE)水溶液(購(gòu)自 Avanti Polar Lipids 聯(lián)合公司(Alabaster. AL))(MTf_SH :Mm_PEe_DSPE=10:l)，充分反應(yīng)后，收集含巰基的轉(zhuǎn)鐵蛋白部分(常規(guī)方法收集)，然后與載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體Uif :m|旨=5:95)混合，在37°C下保溫一小吋，即得。
實(shí)施例2 :制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑步驟如下稱取氫化大豆磷脂14. 66mg、大豆磷脂46. 75mg、膽固醇55. 34mg、合成磷脂酰絲氨酸5. 4mg,與多烯紫杉醇(5. 64mg)混合旋蒸，加入磷酸鹽緩沖液水合得多室脂質(zhì)體，用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，凍干，即得。實(shí)施例3 :制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑步驟如下稱取氫化大豆卵磷脂50. 44mg、卵磷脂70. 45mg、膽固醇70. 89mg、合成ニ棕櫚酰磷脂酰膽堿5. 44mg,與多烯紫杉醇(10. 55mg)混合旋蒸，加入磷酸鹽緩沖液水合得多室脂質(zhì)體，用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配配體連接于載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，凍干，即得。實(shí)施例4 :制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑步驟如下稱取氫化大豆卵磷脂25. 43mg、卵磷脂34. 67mg、膽固醇34. 50mg、聚こ ニ醇-ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺5. 67mg,與多烯紫杉醇(2. 54mg)混合旋蒸，加入磷酸鹽緩沖液水合得多室脂質(zhì)體，用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，凍干，即得。實(shí)施例5 :制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑步驟如下稱取氫化大豆卵磷脂12. 56mg、卵磷脂17. 75mg、膽固醇17. 67mg、聚乙ニ醇-ニ硬脂酰磷脂酰こ醇胺2. 45mg,與多烯紫杉醇(3. 46mg)混合旋蒸，加入磷酸鹽緩沖液水合得多室脂質(zhì)體，用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，凍干，即得。取上述制備的脂質(zhì)體適量，用動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)定其粒度分布，界面電位分析儀測(cè)定脂質(zhì)體樣品的界面電位。用蒸餾水稀釋脂質(zhì)混懸劑(100 μ I)到I. 5ml并在45°C下測(cè)定界面電位。相比于非靶向脂質(zhì)體，將轉(zhuǎn)鐵蛋白加入到脂質(zhì)體中會(huì)導(dǎo)致平均粒徑變小(從90. 7nm到75. 6nm)并且界面電勢(shì)變小(從-9. 64mV到-12. 15mV)。試驗(yàn)例I :按照實(shí)施例5制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體，4°C下存儲(chǔ)，根據(jù)包封率和粒子大小推測(cè)其穩(wěn)定性。結(jié)果該脂質(zhì)體制劑在4°C條件下儲(chǔ)存6個(gè)月后，水化得到的脂質(zhì)體混懸劑，其平均直徑及包封率與新鮮制備的脂質(zhì)體制劑相比無(wú)顯著變化。試驗(yàn)例2 按照實(shí)施例5制備多烯紫杉醇的靶向轉(zhuǎn)鐵蛋白受體脂質(zhì)體，在磷酸鹽緩沖液(pH7. 4)和裝載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體制劑的血清中研究藥物釋放。脂質(zhì)體劑型以1:2.5倍稀釋在含有30%的胎牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)液中(RPMI1640)。然后將此混懸劑轉(zhuǎn)移至透析袋中，37°C條件下在500ml磷酸鹽緩沖液中(pH7. 4)透析,姆12h更新一次透析液。在不同時(shí)間點(diǎn)，用高效液相色譜法測(cè)定在脂質(zhì)體中的多烯紫杉醇。結(jié)果如圖I所示，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體和非靶向脂質(zhì)體都顯示多烯紫杉醇在磷酸鹽緩沖液(PH7. 4)中37°C下培養(yǎng)96h后釋放大約30%，在細(xì)胞培養(yǎng)液中(含有10%胎牛血清)，釋放大約50%，顯示出良好的緩釋特性。試驗(yàn)例3 按照實(shí)施例5制備的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體，用3- (4，5- ニ甲基-2-噻唑基)-2，5-聯(lián)苯四唑溴化物(MTT)實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定細(xì)胞毒性。在藥物治療前24小時(shí)將KB細(xì)胞轉(zhuǎn)移至96孔培養(yǎng)板中，每孔放6X 10~3個(gè)細(xì)胞。不同的多烯紫杉醇制劑包括轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體、非靶向脂質(zhì)體或者是吐溫-80/こ醇溶液，將其用培養(yǎng)液稀釋到ー系列濃度后以每孔100 μ I加入到KB細(xì)胞中。細(xì)胞在37°C下培養(yǎng)2h后，除去含有不同多烯紫杉醇制劑的培養(yǎng)液。所有細(xì)胞用磷酸鹽緩沖液(pH 7. 4)洗兩次后，加入新的培養(yǎng)液再培養(yǎng)72h。將四甲基偶氮唑鹽(MTT)原液(50mg/ml，20y I)加入到每孔中在37°C下培養(yǎng)4h。除去培養(yǎng)液，加入ニ甲基亞砜(DMSO)溶解MTT中藍(lán)色結(jié)晶物。所得溶液用酶標(biāo)儀在570nm處測(cè)定吸光度，推測(cè)細(xì)胞的存活率。結(jié)果如表I所示，多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的細(xì)胞半數(shù)抑制率比非靶向脂質(zhì)體和吐溫-80/こ醇制劑分別低3. 6、I. 7倍。但是，2mg/ml游離轉(zhuǎn)鐵蛋白在兩種不同脂質(zhì)體制劑中對(duì)細(xì)胞毒性的影響程度不同，顯示細(xì)胞毒性的大小與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體介導(dǎo)的作用相關(guān)。
表IMTT實(shí)驗(yàn)測(cè)試多西紫杉醇在KB細(xì)胞系中的細(xì)胞毒性
制劑IC50土 s. d, (nM) ( η = 3)
轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾的脂質(zhì)體說(shuō)9土 4.2
轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾的脂質(zhì)體+2 mg/'ml的游離轉(zhuǎn)鐵蛋白54. 2士 11.7
非靶向脂質(zhì)體70. 3 土 20.9
吐溫-80/乙醇溶劑33.3±9. I試驗(yàn)例4 按照實(shí)施例5制備多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體，使用雄性昆明鼠研究其藥物動(dòng)力學(xué)。將小鼠分五只一組，通過(guò)尾靜脈按15mg/kg體重靜脈注射不同劑型的多烯紫杉醇。在不同的時(shí)間點(diǎn)(O. 083，O. 33，I, 3，8，16和24h)用肝素抗凝的試管收集血液樣品，3000r/min離心IOmin,分離血衆(zhòng),在_20°C下儲(chǔ)藏。將叔丁基甲基醚(3ml)加入到血衆(zhòng)樣品中渦流混合三分鐘提取多烯紫杉醇，氮?dú)獯蹈?。用甲?100μ I)溶解殘留物，50μ I注入液相色譜儀中測(cè)定血藥濃度。計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)包括曲線下的面積(AUC)、平均滯留時(shí)間(MRT)、機(jī)體總清除率(CL)和血漿分布和清除階段的半衰期。結(jié)果在吐溫-80/こ醇中游離的多烯紫杉醇顯示了雙相性的血漿清除率模型，此模型有ー個(gè)迅速的分布階段(t1/2a=0. 12h)和之前短期的最終消除階段(t1/2i3為0.94h)。如圖2所示，300min后血漿中游離多烯紫杉醇的濃度在檢測(cè)限(O. 05 μ g/ml)之下。包裹在脂質(zhì)體中的多烯紫杉醇相比于游離的多烯紫杉醇產(chǎn)生了不同的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。當(dāng)非靶向和靶向轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的脂質(zhì)體制劑靜脈給藥后，脂質(zhì)體中的藥物比游離多烯紫杉醇的分布和消除更慢。非靶向、靶向轉(zhuǎn)鐵蛋白受體脂質(zhì)體比游離藥物的平均消除率(大約11. 16h)低7. 32倍。結(jié)果顯示，脂質(zhì)體制劑的消除率減弱與研究中脂質(zhì)體更長(zhǎng)的半衰期相符合。
權(quán)利要求
1.一種多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其特征在于是通過(guò)以下制備方法制備得到的 取55 95重量份的磷脂，3 40重量份的膽固醇，與O. 05 20重量份的多烯紫杉醇混合，溶于乙醇中，真空旋蒸，加入O. 5 I. 5ml磷酸鹽緩沖液水合得到脂質(zhì)體，然后應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，即得多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑； 所述應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面的具體步驟如下將轉(zhuǎn)鐵蛋白硫醇鹽化，在輕乙基哌嗪乙硫磺酸緩沖鹽中加入Traut’ s試劑到轉(zhuǎn)鐵蛋白中，充分反應(yīng)后得混合物，將此含有轉(zhuǎn)鐵蛋白亞巰基的混合物通過(guò)PD-10柱并用HBS緩沖液沖洗除去未反應(yīng)的Traut’ s試劑，然后添加二硬脂酰磷脂酰膽堿-N-馬來(lái)酰亞胺聚乙二醇2000水溶液，充分反應(yīng)后，收集含巰基的轉(zhuǎn)鐵蛋白部分，然后與載有多烯紫杉醇的脂 質(zhì)體混合，m轉(zhuǎn)m脂=5:95,在37°C下保溫一小時(shí)，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述磷脂選自天然磷脂、合成磷脂中的任一種或兩種以上；所選天然磷脂選自氫化大豆卵磷脂、卵磷脂或大豆磷脂；所選合成磷脂類選自聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、合成二棕櫚酰磷脂酰膽堿或合成磷脂酰絲氨酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述磷脂是由以下組分組成的氫化大豆卵磷脂、卵磷脂和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述在輕乙基哌嗪乙硫磺酸緩沖鹽中加入Traut’ s試劑到轉(zhuǎn)鐵蛋白中時(shí)，Mft MTf=10:l。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述添加二硬脂酰磷脂酰膽堿-N-馬來(lái)酰亞胺聚乙二醇2000水溶液時(shí)，MTf_SH:Mial-PEG-DSPE-IO · I。
6.一種多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于步驟如下 取55 95重量份的磷脂，3 40重量份的膽固醇，與O. 05 20重量份的多烯紫杉醇混合，溶于乙醇中，真空旋蒸，加入O. 5 I. 5ml磷酸鹽緩沖液水合得到脂質(zhì)體，然后應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，即得多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑； 所述應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面的具體步驟如下將轉(zhuǎn)鐵蛋白硫醇鹽化，在輕乙基哌嗪乙硫磺酸緩沖鹽中加入Traut’ s試劑到轉(zhuǎn)鐵蛋白中，充分反應(yīng)后得混合物，將此含有轉(zhuǎn)鐵蛋白亞巰基的混合物通過(guò)PD-10柱并用HBS緩沖液沖洗除去未反應(yīng)的Traut’ s試劑，然后添加二硬脂酰磷脂酰膽堿-N-馬來(lái)酰亞胺聚乙二醇2000水溶液，充分反應(yīng)后，收集含巰基的轉(zhuǎn)鐵蛋白部分，然后與載有多烯紫杉醇的脂質(zhì)體混合，m轉(zhuǎn)m脂=5:95,在37°C下保溫一小時(shí)，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于所述磷脂選自天然磷脂、合成磷脂中的任一種或兩種以上；所選天然磷脂選自氫化大豆卵磷脂、卵磷脂或大豆磷脂；所選合成磷脂類選自聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、合成二棕櫚酰磷脂酰膽堿或合成磷脂酰絲氨酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于所述磷脂是由以下組分組成的氫化大豆卵磷脂、卵磷脂和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于所述在輕乙基哌嗪乙硫磺酸緩沖鹽中加入Traut’s試劑到轉(zhuǎn)鐵蛋白中時(shí),Mft : Mlf=10:I。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于所述添加二硬脂酰磷脂酰膽堿-N-馬來(lái)酰亞胺聚乙二醇2000水溶液時(shí)，MTf_SH Mmal-PEG-DSPE-IO I
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，是通過(guò)以下制備方法制備得到的取55～95重量份的磷脂，3～40重量份的膽固醇，與0.05～20重量份的多烯紫杉醇混合，溶于乙醇中，真空旋蒸，加入0.5～1.5ml磷酸鹽緩沖液水合得到脂質(zhì)體，然后應(yīng)用后嵌入技術(shù)將轉(zhuǎn)鐵蛋白配體連接于包含多烯紫杉醇的脂質(zhì)體表面，即得多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向脂質(zhì)體制劑，其平均粒徑在60～100nm，界面電勢(shì)在-10～20mV。細(xì)胞毒性研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體與非靶向脂質(zhì)體相比，可明顯提高多烯紫杉醇對(duì)KB細(xì)胞的毒性。本發(fā)明的多烯紫杉醇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體靶向的脂質(zhì)體將來(lái)有望成為癌癥治療的新型藥物制劑。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102836127SQ20121037003
公開(kāi)日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月28日
發(fā)明者翟光喜, 張海群, 竇金鳳 申請(qǐng)人:山東大學(xué)