專利名稱：一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于防治仔豬大腸桿菌病類藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是一種用于防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
仔豬黃痢、白痢是由致病性大腸桿菌引起的仔豬腸道傳染病。仔豬黃痢是出生后幾小時(shí)到I周齡仔豬的一種急性高度致死性腸道傳染病，以劇烈腹瀉，排出黃色或黃白色水樣糞便以及迅速脫水死亡為特征，是集約化豬場(chǎng)的主要腸道疾病之一；仔豬白痢是10-30日齡仔豬多發(fā)的一種急性腸道傳染病，以排出灰白色粘稠稀糞為特征，普遍發(fā)生于世界各國(guó)，常弓丨起大批仔豬發(fā)育不良或死亡。仔豬黃白痢潛伏期短、發(fā)病率高，尤其黃痢的死亡率高，給畜牧業(yè)造成重大損失。目前，對(duì)于該病主要有菌苗的免疫，抗生素、化學(xué)藥物、中藥等方式進(jìn)行預(yù)防和治療。其中菌苗免疫，因腸道微生物抗原和抗原決定簇復(fù)雜，免疫機(jī)制略有差異，免疫效果不確切。抗生素和化學(xué)藥物的治療仍是防治該病的主要手段，且大多數(shù)為抗生素類。但隨著抗菌藥物在臨床上的濫用，導(dǎo)致大腸桿菌等細(xì)菌的耐藥性十分普遍，如臨床上常用的慶大霉素、土霉素、氟哌酸、諾氟沙星等藥物療效降低。與其它預(yù)防、治療方法比較，中草藥具有非特異性抗菌作用.殘留毒性較低，并且動(dòng)物一般對(duì)它不易產(chǎn)生耐藥性。再者，中藥治療仔豬黃白痢的種類較多，成本低，治愈率較高，用中藥防治仔豬黃白痢也成為科研、臨床防治的主要方法。但目前臨床應(yīng)用純中藥制劑尤其是中藥散劑存在療效慢，劑量大等弊端。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)目前獸醫(yī)臨床上抗生素的不合理使用，提供一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑及其制備方法，該復(fù)方制劑選擇中藥有效成份提取物，與西藥進(jìn)行科學(xué)配伍，通過聯(lián)合用藥以減少細(xì)菌耐藥性和藥物用量，其臨床防治仔豬大腸桿菌病效果優(yōu)于單純用中藥或西藥，具有良好的市場(chǎng)前景。本發(fā)明的技術(shù)方案是一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑，分為大袋藥物和小袋藥物部分；其中，小袋藥物的組分及其重量份為黃藤素提取物5 12份、穿心蓮提取物5 12份、痢菌凈2 5份，淀粉加至100份；大袋藥物的組分及其重量份為八面體蒙脫石900份，2袋合計(jì)總量1000份。優(yōu)選配比為小袋藥物黃藤素提取物Sg、穿心蓮提取物Sg、痢菌凈2g、淀粉82g ；大袋藥物八面體蒙脫石900g，2袋合計(jì)總量1000g。所述黃藤素提取物系采用黃藤經(jīng)提取、純化、濃縮、干燥制得中藥提取物，主要有效成分為黃藤素，含黃藤素(鹽酸巴馬汀C21H21NO4)不少于90.0%(w/w);所述穿心蓮提取物系采用穿心蓮經(jīng)提取、純化、濃縮、干燥制得中藥提取物，主要有效成份為穿心蓮內(nèi)酯，本品含穿心蓮內(nèi)酯(C2tlH3tlO5)不低于95%(w/w) ο本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑的制備方法。
小袋藥物的制備方法是按上述配比稱取原料藥、輔料淀粉，采用等量遞加稀釋法，先稱取與原料藥等量的淀粉放入混合機(jī)的混料罐中，然后將已稱量好的各種原料藥加到以上已放有淀粉的混料罐中，開機(jī)攪拌3 20分鐘形成一混物；再加入與一混物等量的淀粉后再攪拌3 20分鐘形成二混物；打開混合機(jī)的混料罐進(jìn)料口，將處方量淀粉的剩余部分加到混料罐中，關(guān)閉進(jìn)料口，與二混物攪拌10 30分鐘，從混合機(jī)出料口放出已攪勻的均一性的物料，分裝，封口，即得。大袋藥物制備方法取八面體蒙脫石樣品，用九號(hào)篩試篩，應(yīng)全部通過九號(hào)篩，如不符合要求，則按生產(chǎn)工藝要求，粉碎至規(guī)定細(xì)度，并用振蕩篩進(jìn)行過篩。如符合要求，則可不粉碎；取蒙脫石樣品檢測(cè)水分，水分應(yīng)不大于10% (w/w)，若水分超標(biāo)，將處方量八面體蒙脫石平鋪在不銹鋼烘干盤中，一般I. 5 2cm厚，然后將烘干盤架推到熱風(fēng)循環(huán)烘干箱中，開機(jī)進(jìn)行干燥，控制溫度80 110°C需I 2h時(shí)間，取樣檢測(cè)水分，如水分不超過10%，則合格，可進(jìn)行分裝，封口。將大袋藥物與上述小袋藥物合裝在一個(gè)大包裝中，即得。用法與用量 治療混飼，每Ikg體重豬每日服用2. 5 5mg (小袋，以痢菌凈計(jì))，連用3天；停用小袋藥品24小時(shí)后，飼料中開始添加蒙脫石，按每Ikg體重豬每日服用O. 5 Ig(大袋，以八面蒙脫石計(jì))，連用2 3天。重癥者可將小袋藥品加適量牛奶、白糖，調(diào)成膏劑直接喂養(yǎng)仔豬，隔24小時(shí)后將蒙脫石粉倒入溫水中，混勻，直接灌服仔豬。各原料藥來源及藥理作用黃藤防已科植物黃藤Fibraurea recisa Pierre.的干燥藤莖。清熱解毒，灣火通便。用于熱毒內(nèi)盛，便秘，瀉痢，咽喉腫痛，目赤紅腫，癰腫瘡毒。黃藤素提取物具有廣譜抑菌抗病毒作用、明顯增加白細(xì)胞吞噬細(xì)菌的多重藥理作用、良好的抗炎和增強(qiáng)機(jī)體免疫力作用。穿心蓮為爵床科植物穿心蓮(Andrographispaniculata (Burm. f.) Nees)的全草或葉，清熱解毒，涼血消腫，燥濕。主治細(xì)菌性痢疾、尿路感染、急性扁桃體炎、腸炎、咽喉炎、肺炎和流行性感冒等，外用可治療瘡癤腫毒、外傷感染等。穿心蓮提取物，具有祛熱解毒，消炎止痛之功效，對(duì)細(xì)菌性與病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊療效，被譽(yù)為天然抗生素藥物。痢菌凈(C11HltlO3N2),又名乙酰甲喹、甲喹甲酮，化學(xué)名稱3-甲基-2-乙?；瓙哼?1，4-二氧化物，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院中獸醫(yī)研究所于二十世紀(jì)八十年代研制，是國(guó)內(nèi)首創(chuàng)的獸用抗菌新藥。曾獲國(guó)家科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，是目前唯一獲得國(guó)家級(jí)獎(jiǎng)的畜禽專用新獸藥。痢菌凈能抑制細(xì)菌的脫氧核糖核酸(DNA)的合成，對(duì)多數(shù)細(xì)菌有較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)革蘭氏陰性菌作用更強(qiáng)，對(duì)密螺旋體也有效。對(duì)豬痢疾、仔豬下痢、犢牛腹瀉、犢牛傷寒及禽霍舌L、雛雞白痢等均有獨(dú)特療效。由于該藥抗菌譜廣，抑菌活性強(qiáng)，且價(jià)格低廉，臨床證明是目前治療豬下痢(包括黃痢、白痢和不明病因引起的豬腹瀉)的較好藥物，但其治療劑量接近中毒劑量，臨床應(yīng)用易中毒，而且由于該藥在獸醫(yī)臨床上的長(zhǎng)期濫用，臨床上發(fā)現(xiàn)已經(jīng)產(chǎn)生一定程度的耐藥性。蒙脫石具有層紋狀結(jié)構(gòu)及非均勻性電荷分布，對(duì)消化道內(nèi)的病毒、病菌及其產(chǎn)生的毒素有固定、抑制作用；對(duì)消化道粘膜有覆蓋能力，并通過與粘液糖蛋白相互結(jié)合，從質(zhì)和量?jī)煞矫嫘迯?fù)、提高粘膜屏障對(duì)攻擊因子的防御功能?？删S護(hù)消化道的正常生理功能，同時(shí)還具有降低結(jié)腸過分敏感性的作用。促進(jìn)損傷的消化道粘膜上皮再生，修復(fù)損傷的細(xì)胞間橋，促使細(xì)胞緊密連接，平衡正常菌群，提高消化道的免疫功能，對(duì)消化道局部有止血作用。蒙脫石不進(jìn)入血液循環(huán)，連同所固定的攻擊因子隨消化道自身蠕動(dòng)排出體外，無殘留，是一種綠色獸藥飼料添加劑。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明根據(jù)中獸醫(yī)基礎(chǔ)理論，結(jié)合仔豬大腸桿菌病的發(fā)病機(jī)理，針對(duì)大腸桿菌血清型復(fù)雜易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)，通過體外藥敏試驗(yàn)結(jié)合臨床應(yīng)用進(jìn)行組方篩選，將中藥提取物與痢菌凈聯(lián)合應(yīng)用，體外抗菌效果顯示，具有良好的協(xié)同作用；本發(fā)明根據(jù)仔豬黃白痢的發(fā)病特點(diǎn)，在治療方案上，采取在發(fā)病急性期，先用抗菌藥物發(fā)揮它的強(qiáng)效快速殺菌效果，治療中后期，配合應(yīng)用八面蒙脫石，不僅進(jìn)一步徹底清除致病因子，而且修復(fù)、提高消化道粘膜屏障對(duì)攻擊因子的防御功能，促進(jìn)損傷的消化道粘膜上皮再生，維護(hù)消化道的正常生理功能。對(duì)仔豬大腸桿菌病的臨床防治效果表明，該發(fā)明有效率達(dá)100%以上，治愈率達(dá)90%以上，明顯優(yōu)于單用西藥或中藥。總之，本研究將中西藥物聯(lián)合應(yīng)用，不但可以減少痢菌凈用藥量，并且可以降低細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，從而降低用藥成本、減少藥物殘留。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I配比小袋黃藤素提取物(含鹽酸巴馬汀91%) 8g、穿心蓮提取物(含穿心蓮內(nèi)酯95%) 8g、痢菌凈2g、淀粉82g ;大袋八面體蒙脫石900g，兩袋總量1000g。制備方法小袋采用等量遞加稀釋法，先稱取與原料藥等量的淀粉18g放入混合機(jī)的混料罐中，然后將已稱量好的原料藥(黃藤素提取物Sg、穿心蓮提取物Sg、痢菌凈2g)加到以上已放有淀粉的混料罐中，開機(jī)攪拌5分鐘形成一混物；再加入與一混物等量的淀粉36g后再攪拌5分鐘形成二混物；打開混合機(jī)的混料罐進(jìn)料口，將處方量淀粉的剩余部分28g加到混料罐中，關(guān)閉進(jìn)料口，與二混物攪拌15分鐘，從混合機(jī)出料口放出已攪勻的均一性的物料，分裝，封口，即得。大袋取八面體蒙脫石樣品，用九號(hào)篩(200目)試篩，應(yīng)全部通過九號(hào)篩，如不符合要求，則按生產(chǎn)工藝要求，粉碎至規(guī)定細(xì)度，并用振蕩篩進(jìn)行過篩。如符合要求，則可不粉碎；取蒙脫石樣品檢測(cè)水分，水分應(yīng)不大于10% (w/w)，若水分超標(biāo)，將處方量八面體蒙脫石平鋪在不銹鋼烘干盤中，一般I. 5 2cm厚，然后將烘干盤架推到熱風(fēng)循環(huán)烘干箱中，開機(jī)進(jìn)行干燥，控制溫度105°C約需Ih時(shí)間，取樣檢測(cè)水分，如水分不超過10%，則合格，可進(jìn)行分裝，封口，將大袋與上述小袋合裝在一個(gè)大包裝中，即得。以下結(jié)合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明其治療效果。—、聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大腸桿菌抗菌效果實(shí)驗(yàn)I材料及方法I. I 材料I. I. I試驗(yàn)藥物痢菌凈(含量98. 5%，批號(hào)060509)，成都華康動(dòng)物藥業(yè)有限公司；黃藤素提取物(含鹽酸巴馬汀91%)，批號(hào)20110911，山東濰坊永和藥業(yè)公司；穿心蓮提取物(含穿心蓮內(nèi)酯95%)，批號(hào)20110310，山東濰坊永和藥業(yè)公司。
I. I. 2試驗(yàn)菌株豬大腸桿菌O81株，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)參考菌為大腸桿菌ATCC25922，中國(guó)藥品生物制品檢定所。I. I. 3 培養(yǎng)基Muller — Hinton(MH)肉湯和 Muller — Hinton(MH)瓊脂培養(yǎng)基，浙江杭州天和微生物試劑有限公司。I. 2 方法1.2. I藥物儲(chǔ)備液的配制無菌精確稱取痢菌凈、黃藤素提取物(以鹽酸巴馬汀計(jì))、穿心蓮提取物(以穿心蓮內(nèi)酯計(jì))，用無菌蒸餾水溶解并稀釋成2048μ g/mL的溶液，均于-20°C保存?zhèn)溆?。I. 2. 2菌懸液的制備從過夜培養(yǎng)的瓊脂培養(yǎng)基平板上挑取3個(gè)菌落，接種于MH肉湯中35°C增菌16h。以平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)后，用MH肉湯稀釋I. 5X 105CFU/mL。I. 2. 3最小抑菌濃度的測(cè)定(MIC)參照微量肉湯稀釋法測(cè)定各藥物單用的最小 抑菌濃度(MIC)。將痢菌凈等3種抗菌藥物以滅菌MH肉湯倍比稀釋成23個(gè)濃度，分別為
2048、1024......O. 0005 μ g/mL,分別取 100 μ L 依次加入 96 孔板，再將 I. 5 X 105CFU/mL 菌液
100 μ L加入孔中，37°C過夜培養(yǎng)，觀察結(jié)果，以無菌生長(zhǎng)的最低濃度為該藥單用最小抑菌濃度MIC，同時(shí)以標(biāo)準(zhǔn)菌ATCC25922做質(zhì)量控制。I. 2. 4痢菌凈與黃藤素提取物聯(lián)合應(yīng)用對(duì)豬大腸桿菌O81株的FIC指數(shù)測(cè)定將痢菌凈和黃藤素提取物分別用滅菌MH肉湯倍比稀釋，按棋盤法設(shè)計(jì)兩兩組合加入一次性96孔板至第11列、第7行(第12列和第8行為空白對(duì)照)。根據(jù)最小抑菌濃度的測(cè)定，使最高濃度為單藥MIC的2倍?？咕幬锇礉舛忍荻雀魅?0 μ L，再加入I. 5 X IO5CFU/mL菌液100 μ L，37°C過夜培養(yǎng)，觀察結(jié)果，選擇兩藥聯(lián)合應(yīng)用FIC指數(shù)最小時(shí)作為兩種藥物的最佳組合，并且以該FIC指數(shù)判定兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的效果。痢菌凈與穿心蓮提取物FIC指數(shù)測(cè)定試驗(yàn)方法同上。I. 2. 5判斷標(biāo)準(zhǔn)FIC指數(shù)=(MIC甲藥聯(lián)用/MIC甲藥單用)+(MIC乙藥聯(lián)用/MIC乙藥單用)。FIC指數(shù)< O. 5，為協(xié)同作用；FIC指數(shù)在O. 5 I范圍，為相加作用；FIC指數(shù)在I 2范圍，為無關(guān)作用；FIC指數(shù)> 2，為拮抗作用。2結(jié)果與分析2. 13種抗菌藥物單用的最小抑菌濃度痢菌凈等3種抗菌藥物對(duì)大腸桿菌O81體外最小抑菌濃度如表I所示，可以看到痢菌凈對(duì)大腸桿菌O81株MIC值為32 μ g/mL，與標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌ATCC25922對(duì)照可知，豬致病性大腸埃希菌對(duì)其已經(jīng)產(chǎn)生較高的抗藥性。穿心蓮提取物沒有測(cè)得MIC，說明它的MIC >2048 μ g/mL。表I三種藥物對(duì)大腸桿菌O81的MIC結(jié)果(μ g/mL)
權(quán)利要求
1.一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑，其特征是，分為大袋藥物和小袋藥物兩部分；其中，小袋藥物的組分及其重量份為黃藤素提取物5 12份、穿心蓮提取物5 12份、痢菌凈2 5份，淀粉加至100份；大袋藥物的組分及其重量份為八面體蒙脫石900份，2袋合計(jì)總量1000份。
2.如權(quán)利要求I所述的一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑，其特征是，所述黃藤素提取物含黃藤素不少于90. 0%(w/w);所述穿心蓮提取物含穿心蓮內(nèi)酯不低于95%(w/w)。
3.如權(quán)利要求I或2所述的一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑，其特征是，所述八面體蒙脫石過九號(hào)篩，水分彡10% (w/w)0
4.如權(quán)利要求I或2所述的一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑，其特征是，所述小袋藥物的組分及其重量為黃藤素提取物8g、穿心蓮提取物8g、痢菌凈2g、淀粉82g ;大袋藥物的組分及其重量為八面體蒙脫石900g，2袋合計(jì)總量1000g。
5.一種制備權(quán)利要求I或2所述的復(fù)方制劑的方法，其特征是， 小袋藥物采用等量遞加稀釋法，先稱取與原料藥等量的淀粉放入混合機(jī)的混料罐中，然后將已稱量好的原料藥加到以上已放有淀粉的混料罐中，開機(jī)攪拌3 20分鐘形成一混物；再加入與一混物等量的淀粉后再攪拌3 20分鐘形成二混物；打開混合機(jī)的混料罐進(jìn)料口，將剩余淀粉加到混料罐中，關(guān)閉進(jìn)料口，與二混物攪拌10 30分鐘，從混合機(jī)出料口放出已攪勻的均一性的物料，分裝，封口 ；得到小袋藥物；所述原料藥為黃藤素提取物、穿心蓮提取物和痢菌凈； 大袋藥物將過九號(hào)篩且水分不超過10% (w/w)的八面體蒙脫石分裝，封口 ； 將上述大袋藥物與小袋藥物合裝在一個(gè)大包裝中，即得。
6.權(quán)利要求I或2所述的復(fù)方制劑的應(yīng)用方法，其特征是，混飼，每Ikg體重豬每日服用2. 5 5mg小袋藥物，連用3天；停用小袋藥品24小時(shí)后，按每Ikg體重豬每日服用O. 5 Ig大袋藥物，連用2 3天；所述小袋藥物以痢菌凈計(jì)，所述大袋藥物以八面蒙脫石計(jì)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種防治仔豬大腸桿菌病的復(fù)方制劑及其制備方法。該復(fù)方制劑分為大袋藥物和小袋藥物兩部分；小袋藥物由黃藤素提取物、穿心蓮提取物、痢菌凈和淀粉采用等量遞加稀釋法制備而成，大袋藥物為八面體蒙脫石。本發(fā)明根據(jù)仔豬黃白痢的發(fā)病特點(diǎn)，采取在發(fā)病急性期，先用小袋的抗菌藥物發(fā)揮它的強(qiáng)效快速殺菌效果，治療中后期，配合應(yīng)用大袋的八面蒙脫石，不僅進(jìn)一步徹底清除致病因子，而且修復(fù)、提高消化道粘膜屏障對(duì)攻擊因子的防御功能，促進(jìn)損傷的消化道粘膜上皮再生，維護(hù)消化道的正常生理功能。對(duì)仔豬大腸桿菌病的臨床防治效果表明，該發(fā)明有效率達(dá)100%以上，治愈率達(dá)90%以上，明顯優(yōu)于單用西藥或中藥。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102872170SQ201210377610
公開日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2012年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月8日
發(fā)明者張傳津 申請(qǐng)人:張傳津