專利名稱：赤芍總苷的一種制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物化學技術領域，具體涉及一種提取純化赤芍總苷的制備方法。
背景技術：
赤茍為毛茛科茍藥(Paeonialactiflora Pali.)或川赤茍(P. veitchii Lynch)的干燥根，味苦，微寒，歸肝經(jīng)，具有清熱涼血，散瘀鎮(zhèn)痛之功效。赤芍總苷(Total PaeonyGlycoside, TPG)為赤芍的總提取物，主要為單萜苷類化合物，包括芍藥苷(3. I %-7. 0% )、芍藥內(nèi)酯苷(O. 1%)、羥基芍藥苷(O. 06%)、苯甲酰芍藥苷(0.01%)等組成。赤芍總苷的藥理作用有以下幾個方面1.對血液的作用，包括抗凝血、抗血栓作用、抗內(nèi)毒素作用、改善微循環(huán)；2.對缺血性損傷的保護作用，TPG對多種組織器官的缺血性損傷有保護作用，包括對腎缺血的保護作用、對缺血心肌的保護作用、對腦缺血性損傷的保護作用；3.抗腫瘤 的作用；4.肝臟保護作用，其作用機制可能與抗脂質(zhì)過氧化有關；5.改善小鼠學習記憶能力；6.抗抑郁作用，因此，赤芍總苷可作為治療多種疾病的原料藥，市場前景廣闊。赤芍總苷質(zhì)量由于受藥材來源、生產(chǎn)工藝及質(zhì)量分析方法等多種因素的影響，以致其質(zhì)量不統(tǒng)一。赤芍總苷提取工藝多為水提或醇提后萃取分離，或以乙醇提取后經(jīng)大孔吸附樹脂分離，這些技術無法完全破壞細胞壁的束縛，無法最大限度地提取出有效成分并進行充分的分離，因而所得產(chǎn)品純度不高。本發(fā)明采用微波輔助提取技術制備赤芍總苷，再經(jīng)微濾和大孔吸附樹脂聯(lián)用精制產(chǎn)品，克服現(xiàn)有技術不足，操作簡單，同時提高產(chǎn)品的純度和產(chǎn)率，有利于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種簡單有效，產(chǎn)品純度高的赤芍總苷的制備方法，以克服現(xiàn)有技術生產(chǎn)率低，產(chǎn)品純度差，不利于推廣生產(chǎn)等問題。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種赤芍總苷的制備方法，具體步驟如下(I)粉碎取赤芍根去雜質(zhì)，干燥，粉碎至60-80目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入5-15倍水，攪拌均勻，功率為250-350W條件下微波提取30-60s ；(3)離心提取液6000-8000r/min離心10_20min,收集上清液；(4)微濾離心后上清液過孔徑為O. 2μπι的無機陶瓷微濾膜，操作壓力
O.08-0. 15Mpa,以錯流速度O. 6-1. Om/s進行循環(huán)微濾,收集濾液；(5)大孔吸附樹脂分離濾液過非極性大孔吸附樹脂，先以蒸餾水4-6BV，再以30%乙醇4-8BV洗脫，洗脫流速3-6ml/min，收集洗脫液；(6)冷凍干燥在-50°C條件下冷凍干燥，得赤芍總苷。本發(fā)明的有益效果為(I)在提取過程中以水為提取溶劑，與傳統(tǒng)的乙醇回流提取相比較，使用加工設備少，同時采用微波輔助技術，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出來，赤芍總苷得率達6. 5%，使提取工藝具有快捷、高效、節(jié)能等特點；(2)采用微濾和大孔吸附樹脂聯(lián)用精制赤芍總苷，與傳統(tǒng)的單一大孔吸附樹脂分離相比較，可以有效地除去雜質(zhì)，選擇性地保留有效成分，提高產(chǎn)品純度，使赤芍總苷純度達88%以上,為大規(guī)|旲生廣提供新的工藝思路。


附圖I是以赤芍為原料，首先將赤芍根粉碎，加適量水，用微波輔助提取，然后將提取液高速離心分離，收集上清液，無機陶瓷膜微濾，濾液上大孔吸附樹脂柱洗脫，冷凍干燥制得赤芍總苷的工藝流程圖。
具體實施方式
提出以下實例用于說明本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。實施例I(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去雜質(zhì)，干燥，粉碎至60目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入5倍水，攪拌均勻，功率280W條件下微波提取30s ；(3)離心提取液8000r/min離心IOmin,收集上清液；(4)微濾離心后上清液過孔徑為O. 2μπι的無機陶瓷微濾膜，操作壓力O. OSMpa,以錯流速度O. 6m/s進行循環(huán)微濾,收集濾液；(5)大孔吸附樹脂分離濾液過非極性大孔吸附樹脂HPD100，先以蒸餾水4BV，再以30%乙醇5BV洗脫，洗脫流速3ml/min，收集洗脫液；(6)冷凍干燥在_50°C條件下冷凍干燥，得赤芍總苷32. 56g，純度88. 9%。實施例2(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去雜質(zhì)，干燥，粉碎至60目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入8倍水，攪拌均勻，功率為300W條件下微波提取40s ；(3)離心提取液7000r/min離心15min,收集上清液；(4)微濾離心后上清液過孔徑為0. 2 μ m的無機陶瓷微濾膜，操作壓力0. OSMpa,以錯流速度0. 8m/s進行循環(huán)微濾，收集濾液；(5)大孔吸附樹脂分離濾液過非極性大孔吸附樹脂HPD100，先以蒸餾水4BV，再以30%乙醇5BV洗脫，洗脫流速3ml/min，收集洗脫液；(6)冷凍干燥在_50°C條件下冷凍干燥，得赤芍總苷34. Ig,純度90. I %。實施例3(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去雜質(zhì)，干燥，粉碎至80目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入10倍水，攪拌均勻，功率為300W條件下微波提取 40s ；(3)離心提取液7000r/min離心15min，收集上清液；(4)微濾離心后上清液過孔徑為0. 2μπι的無機陶瓷微濾膜，操作壓力0. IOMpa,以錯流速度0. 8m/s進行循環(huán)微濾，收集濾液；
(5)大孔吸附樹脂分離濾液過非極性大孔吸附樹脂AB-8，先以蒸餾水5BV，再以30%乙醇6BV洗脫，洗脫流速4ml/min，收集洗脫液；(6)冷凍干燥在_50°C條件下冷凍干燥，得赤芍總苷35. 4g，純度92. 5%。實施例4(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去雜質(zhì)，干燥，粉碎至80目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入10倍水，攪拌均勻，功率為300W條件下微波提取 50s ；(3)離心提取液8000r/min離心12min,收集上清液；
(4)微濾離心后上清液過孔徑為O. 2 μ m的無機陶瓷微濾膜，操作壓力O. IMpa,以錯流速度I. Om/s進行循環(huán)微濾，收集濾液；(5)大孔吸附樹脂分離濾液過非極性大孔吸附樹脂AB-8，先以蒸餾水5BV，再以30%乙醇7BV洗脫，洗脫流速5ml/min，收集洗脫液；(6)冷凍干燥在_50°C條件下冷凍干燥，得赤芍總苷31. 9g，純度90. 4%。實施例5(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去雜質(zhì)，干燥，粉碎至70目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入13倍水，攪拌均勻，功率為320W條件下微波提取 50s ；(3)離心提取液6000r/min離心20min,收集上清液；(4)微濾離心后上清液過孔徑為0. 2μπι的無機陶瓷微濾膜，操作壓力0. 15Mpa，以錯流速度0. 9m/s進行循環(huán)微濾，收集濾液；(5)大孔吸附樹脂分離濾液過非極性大孔吸附樹脂D101，先以蒸餾水4BV，再以30%乙醇6BV洗脫，洗脫流速5ml/min，收集洗脫液；(6)冷凍干燥在_50°C條件下冷凍干燥，得赤芍總苷35. 2g,純度89. 8%。
權(quán)利要求
1.一種赤芍總苷的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)粉碎取赤茍根去雜質(zhì),干燥,粉碎； (2)微波提取加適量水，微波輔助提??； (3)離心將提取液進行高速離心，收集上清液； (4)微濾上清液用微濾機以錯流方式進行循環(huán)微濾，收集濾液； (5)大孔吸附樹脂分離濾液上大孔吸附樹脂柱，用水洗脫，再以一定濃度的乙醇洗脫，收集洗脫液； (6)冷凍干燥濾液冷凍干燥，即得赤芍總苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(I)所述赤芍粉碎至60-80 目。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(2)所述的加水量為5-15 倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(2)所述的微波輔助提取功率為250-350W，時間為30-60s。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(3)所述的離心轉(zhuǎn)速為 6000-8000r/min，處理 10_20min。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(4)所述的無機陶瓷微濾膜孔徑為O. 2 μ m，錯流速度O. 6-1. Om/s，操作壓力O. 08-0. 15MPa。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(5)所述的大孔吸附樹脂選用非極性樹脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(5)所述的大孔吸附樹脂洗脫先以蒸餾水4-6BV，再以30%乙醇4-8BV洗脫，洗脫流速3_6ml/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于步驟(6)所述的冷凍干燥溫度為_50°C。
10.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備赤芍總苷的方法，其特征在于得純度達88%以上的赤芍總苷。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種赤芍總苷的制備方法，以藥材赤芍為原料，采用微波輔助提取技術，再經(jīng)無機陶瓷膜微濾和大孔吸附樹脂聯(lián)用精制，冷凍干燥后制得純度達到88％以上的赤芍總苷。本發(fā)明采用微波輔助技術，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出來，采用微濾和大孔吸附樹脂聯(lián)用精制赤芍總苷，整個工藝具有產(chǎn)品純度高，得率高，操作簡便等特點。
文檔編號A61P9/10GK102861140SQ20121037830
公開日2013年1月9日 申請日期2012年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月9日
發(fā)明者張麗云, 群英措姆 申請人:西藏瑞陽藏藥技術開發(fā)有限公司