專利名稱：13-甲基十四烷酸在制備治療局灶性腦缺血的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物應(yīng)用，尤其涉及一種13-甲基十四烷酸在制備治療局灶性腦缺血的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
缺血性腦血管病(ischemiccerebrovascular disease, ICVD),是指供應(yīng)腦的血管病變或血流動(dòng)力學(xué)障礙所致的腦部血液供應(yīng)障礙，使相應(yīng)供血區(qū)腦組織由于缺血、缺氧，而引起短暫或持久的局部或彌漫性腦損傷，造成一系列神經(jīng)功能缺損癥候群，并出現(xiàn)腦組織壞死或軟化。具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高、復(fù)發(fā)率高和愈發(fā)愈重的特點(diǎn)，并有不斷升高及年輕化的趨勢(shì)，嚴(yán)重危害人類健康和生活質(zhì)量。臨床上大多數(shù)腦梗死是由于腦動(dòng)脈血栓形成所致，一旦腦動(dòng)脈阻塞，缺血、缺氧區(qū)域的腦組織細(xì)胞即刻發(fā)生一系列的“缺血瀑布樣反應(yīng)”，最后導(dǎo)致細(xì)胞死亡。其中以大腦中動(dòng)脈血栓形成最為常見(jiàn)。我們的實(shí)驗(yàn)采用線栓法制備大鼠右大腦中動(dòng)脈閉塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型，分別復(fù)制不同時(shí)限的局灶性腦缺血，在此基礎(chǔ)上，以不同劑量的13-甲基十四烷酸(13-methyltetradecanoic acid, 13-MTD)干預(yù)，觀察治療結(jié)果。13-MTD是一種末端支鏈飽和脂肪酸，化學(xué)結(jié)構(gòu):C15H3tlO2, MW242.4，天然存在于細(xì)菌和某些真菌的細(xì)胞膜上，是細(xì)菌胞膜的重要成分。本發(fā)明在下述實(shí)驗(yàn)中采用的13-MTD為福建醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院經(jīng)多年實(shí)驗(yàn)研究，通過(guò)化學(xué)合成方法得到的高純度13-MTD，氣相色譜檢測(cè)純度> 98.5%，化學(xué)結(jié)構(gòu)為13-甲基十四烷酸，LD50 口服給藥> 2g /kg。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，13-MTD的幾個(gè)劑量均可有效改善不同時(shí)限的局灶性腦缺血，可能是治療缺血性腦血管疾病很有前途的一種先導(dǎo)化合物，已在深入研究。而目前13-MTD及其同類物對(duì)中樞的作用以及對(duì)缺血性腦血管疾病的影響國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)尚未見(jiàn)報(bào)道。相關(guān)文獻(xiàn)僅見(jiàn)于外周，主要是穩(wěn)定細(xì)胞膜，抗炎抑 菌，抗氧化，防治血栓形成，以及對(duì)腫瘤細(xì)胞的凋亡調(diào)控作用。目前臨床對(duì)腦缺血的藥物治療主要是基于神經(jīng)保護(hù)藥，目的是改善腦代謝和腦循環(huán)。此類藥物有數(shù)十種，但尚缺乏多中心、隨機(jī)、雙盲、和安慰劑對(duì)照試驗(yàn)的檢驗(yàn)，療效很難評(píng)價(jià)。其中依達(dá)拉奉(必存注射劑)，是臨床新型的治療缺血性腦卒中的神經(jīng)保護(hù)藥，其藥理機(jī)制在于通過(guò)清除自由基，抑制腦細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化，以防治神經(jīng)元死亡。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中以依達(dá)拉奉作為陽(yáng)性對(duì)照藥，在MCA012h造成的局灶性腦缺血模型中，應(yīng)用13-MTD80mg/kg與依達(dá)拉奉3mg/kg分別靜脈注射給藥，比較它們對(duì)腦梗塞灶的改善作用，結(jié)果表明，13-MTD組的療效更優(yōu)于依達(dá)拉奉組。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種13-甲基十四烷酸在制備治療局灶性腦缺血的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，所述的13-甲基十四烷酸(13-MTD)，是一種末端支鏈飽和脂肪酸，化學(xué)結(jié)構(gòu)=C15H3tlO2, MW242.4，其天然存在于細(xì)菌和某些真菌的細(xì)胞膜上，是細(xì)菌胞膜的重要成分。本發(fā)明采用的13-MTD，為福建醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院經(jīng)多年實(shí)驗(yàn)研究，通過(guò)化學(xué)合成方法得到的高純度13-MTD，氣相色譜檢測(cè)純度> 98.5%，化學(xué)結(jié)構(gòu)為13-甲基十四烷酸，LD50 口服給藥> 2g /kg。所述的13-甲基十四烷酸在制備治療缺血性腦血管病尤其是局灶性腦缺血的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為:13_MTD是一種末端支鏈飽和脂肪酸，作為細(xì)胞膜成分能嵌入膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)中，可通過(guò)調(diào)節(jié)膜的組成而影響細(xì)胞功能，對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜有膜穩(wěn)定作用。而腦是一個(gè)富含脂質(zhì)的器官，腦缺血后，由于較強(qiáng)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，可使膜磷脂降解，造成腦細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷，對(duì)此，13-MTD應(yīng)具有較好的膜保護(hù)作用，同時(shí)我們進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，13-MTD可通過(guò)抗炎、抗氧化、防治腦細(xì)胞凋亡、保護(hù)血腦屏障(BBB)的作用治療缺血性腦血管病。本發(fā)明在實(shí)驗(yàn)中以不同劑量的13-MTD和溶媒組比較發(fā)現(xiàn)，13-MTD 40、80、120mg/kg均可明顯改善局灶性腦缺血6、12、24h后的神經(jīng)功能缺失癥狀0°〈0.001)，使腦梗死體積明顯縮小0°〈0.01，P<Q.05)。在MCA012h模型中，13-MTD 80mg/kg組比陽(yáng)性對(duì)照藥依達(dá)拉奉3mg/kg組的腦梗死灶縮小更明顯(/X0.01)。13-MTD 40、80、120mg/kg還可明顯減輕腦缺血6、12、24h后的腦水腫程度和腦含水量(/X0.01，/X0.05)，并使損傷側(cè)腦組織EB滲出明顯減少0°〈0.01，K0.05)ο以上藥效均有明確量效依賴性，以13-MTD 80 mg/kg療效最佳。在局灶性腦缺血6、12、24h模型中，13-MTD80mg/kg被證實(shí)可下調(diào)損傷腦星形膠質(zhì)細(xì)胞的AQP4蛋白表達(dá)0°〈0.001)，上調(diào)損傷腦腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的ZO-1蛋白表達(dá)0°〈0.001)，表明13-MTD改善腦細(xì)胞水腫，保護(hù)BBB結(jié)構(gòu)功能的作用，與腦細(xì)胞AQP4蛋白表達(dá)降低和ZO-1蛋白表達(dá)增加有關(guān)。綜上所述，I)本發(fā)明的13-MTD可有效改善局灶性腦缺血，是治療缺血性腦血管疾病很有前途的一種先導(dǎo)化合物。2)不同劑量的13-MTD在不同時(shí)限的局灶性腦缺血中均有明顯的藥效作用。其治療局灶性腦缺血的優(yōu)勢(shì)在于:13-MTD可化學(xué)合成，分子量小，脂溶性強(qiáng)，對(duì)BBB穿透率高，與腦組織脂質(zhì)結(jié)構(gòu)親和力好，可快速高效作用于靶組織。且不良反應(yīng)小，安全范圍較大，可 靜脈給藥，尤其對(duì)危重病程的腦缺血的治療應(yīng)具有更好的臨床適用性。


圖1為13-MTD40，80, 120mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后神經(jīng)功能缺失評(píng)分的比較圖('X ±5，n=5 ) ；6h:aP<0.001 ^Vehicle ； bP<0.01 vs M40, dP〈0.001 vs Ml20 ；eP〈0.001 vs M120 ；12h:aP<0.001 ^Vehicle ； CP<0.05 vs M40，dP〈0.001 vs Ml20 ；eP〈0.001 vs M120 ；24h:aP<0.001 ^Vehicle ； bP〈0.01 vs M40，dP〈0.001 vs Ml20 ；eP<0.001 vs M120。圖2為13-MTD 40，80, 120mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后腦梗塞體積的改善作用圖('X ±5., n=5 )。圖3-1為13-MTD80 mg/kg與依達(dá)拉奉3mg/kg對(duì)大鼠MCAO 12h后腦梗塞體積的改善作用比較圖('X ±5., n=5 ) O圖3-2為13-MTD80 mg/kg與依達(dá)拉奉3mg/kg對(duì)大鼠MCAO 12h后腦梗塞體積的改善作用的柱形比較圖('X ±5., n=5 ) ο圖4為13-MTD 40，80, 120mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后腦梗塞體積改善作用的比較圖('X ±5., n=5 )；
6h: a P〈0.0l ^Vehicle; b P〈0.05 vs M40; CP〈0.01 vs M120 ；
12h: d P〈0.05 ；e P〈0.01 ^Vehicle; f P〈0.05 vs M40; g P〈0.01 vs M120 ；24h: h P<0.01f5 Vehicle; 1 P<0.05vs M40; J P〈 0.01 vs M120。圖5為13-MTD 40，80, 120mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后腦水腫程度改善作用的比較圖('X ±5., n=5)；
6h: aP<0.01κ5 Vehicle; bP<0.01 vs M40; d P<0.01 vs M120 ；
12h: aP〈0.01 ^Vehicle; c P〈0.01 vs M40; dP〈0.01 vs M120 ；
24h: aP<0.01 ^Vehicle; b P<0.01 vs M40; d P<0.01 vs M120o圖6為13-MTD 40，80, 120mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后腦組織含水量改善作用的比較圖('X ±5., n=5)；
6h: a P〈0.01 F^Sharn; b P〈0.01，c P<0.05vs Vehicle; d P〈0.01 vs M40; eP〈0.01 vs M120 ；
12h: a P〈0.01 F^Sharn; b P〈0.01 ^Vehicle; d P〈0.01 vs M40; e P〈0.01 vs M120 ；24h: a P〈0.01 F^Sharn; b P〈0.01 ^Vehicle; d P〈0.01 vs M40; e P〈0.01 vs M120。圖7為 13-MTD 40，80, 120mg/kg 對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后腦組織EB 滲出的影響圖('X ±.5, n=5)。圖8為 13-MTD 40, 80, 120mg/kg 對(duì)大鼠 MCAO 6、12、24h后腦組織 EB滲出量的影響比較圖('X ±5., n=5)；
6h: a P〈0.01 F^Sharn; b P〈0.01，c P<0.05vs Vehicle; d P〈0.01 vs M40; fP〈0.01 vs M120 ；
12h: a P〈0.01 F^Sharn; b P〈0.01 ^Vehicle; d P〈0.01 vs M40; f P〈0.01 vs M120 ；24h: a P〈0.01 F^Sharn; b P〈0.01 ^Vehicle; e P〈0.01 vs M40; f P〈0.01 vs M120。圖9為13-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷側(cè)腦組織AQP4蛋白表達(dá)的影響的免疫組化檢測(cè)結(jié)果圖(X400);圖中:A: Sham-6h; B: Veh-6h ；C: M80-6h ；D:Sham-12h ；E: Veh-12h ；F: M80_12h ;G: Sham_24h ;H: Veh-24h ；1: M80_24h。圖10為13-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷側(cè)腦組織AQP4蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞面積的影響比較圖(i±s, n=5)；
6h: aP〈0.0OlKsSham; bP〈0.0OlrVehicle, CP〈0.0lKsVeh_12h，dP〈0.00lKsVeh_24h;hP〈0.0Iks M80-12h, ^<0.0OIks M80_24h ；
12h: aP<0.001FSham; bP<0.0OlF5Vehicle; eP〈0.0lKsVeh_6h; fP〈0.00lKsVeh_24h;JP<0.0Iks M80-6h, M80_24h ；
24h: aP〈0.001 F5Sham; b P〈0.001 ^Vehicle; gP〈0.001 vs Veh-6h, Veh_12h;kP〈0.001 vs M80-6h; lp〈0.01 vs M80_12h。圖11為13-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷側(cè)腦組織AQP4蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞IOD值的影響比較圖('X ±5., n=5)；
6h: aP<0.001 F1S1Sh am; bP<0.001 F^Veh-12h, Veh_24h; eP<0.001 vs Vehicle;^<0.001 VS M80-12h, M80_24h ；12h: aP<0.0Ol F1S1Sham; P<0.001 F5Veh-6h, Veh_24h; fP<0.05 vs Vehicle;iP〈0.01 vs M80-6h, J P〈0.01 vs M80- 24h ；
24h: aP<0.001 F^Sharn; d P<0.001 vsYeh~6h, Veh-12h; gP<0.01 vs Vehicle;k P<0.001 vs M80-6h, 1 P<0.01 vs M80_12h。圖12為13-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷側(cè)腦組織Z0-1蛋白表達(dá)的影響的免疫組化檢測(cè)結(jié)果圖(X400);圖中:A:Sham-6h; B:Veh-6h; C: M80-6h;D: Sham-12h; E Veh-12h; F: M80_12h;G: Sham_24h; H: Veh-24h; 1: M80_24h。圖13為3-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷側(cè)腦組織Z0_1蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞面積的影響比較圖(.V ±.5，η=5)；
6h: aP<0.001 F5Sham; bP<0.001 ^Vehicle, CP<0.01 F5Veh-12h, dP<0.001KsVeh-24h; hP〈0.001 vs M80-12h, M80_24h
12h: aP<0.001FSham; bP<0.0OlF5Vehicle; eP〈0.0lKsVeh_6h; fP〈0.00lKsVeh_24h;^〈0.0OIks M80-6h; JP〈0.01 vs M80_24h
24h: aP〈0.001 F5Sham; b P〈0.001 ^Vehicle; gP〈0.001 vs Veh-6h, Veh_12h;kP〈0.001 vs M80-6h; lp〈0.01 vs M80-1 2h。圖14為13-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷側(cè)腦組織Z0_1蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞IOD值的影響比較圖('X ±.5，η=5)；
6h: aP<0.001 F5Sham; bP<0.001 ^Vehicle, CP〈0.01 F5Veh-12h, dP<0.001KsVeh-24h; iP<0.001 vs M80-12h, M80_24h
12h: aP〈0.001 F^Sharn; bp〈0.001 ^Vehicle; e P〈0.01 vs Veh-6h, fP〈0.001 vsVeh-24h; iP<0.001 vs M80-6h, M80-24h
24h: aP〈0.001 F^Sharn; b P〈0.001 ^Vehicle; gP〈0.001 vs Veh-6h, hP〈0.001 vsVeh-12h; kP〈0.001 vs M80-6h, M80_12h。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述:
13-甲基十四烷酸(13-MTD)的實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
一、實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
Sprague-Dawley (SD)大鼠，由福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供(SCXK閩2012-0001)，古，體重230 270g，每組5只。線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)模型，缺血時(shí)間分為
6、12、24h，造成不同時(shí)限的局灶性腦缺血，于插入栓線前30min分別尾靜脈注射13-MTD40、80、120mg/kg。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham):即 Sham_6h、Sham-12h> Sham_24h 組。Sham組除不插入線栓，其它相同?？瞻字|(zhì)體對(duì)照組:即溶媒組(Vehicle)，包括Veh_6h、Veh-12h、Veh_24h 組。用藥組:13_MTD40、80、120mg/kg 組(M40、M80、M120)，即 M40_6h、M40-12h、M40-24h 組，M80-6h、M80-12h、M80_24h 組，M120-6h、M120-12h、M120_24h 組。陽(yáng)性對(duì)照藥依達(dá)拉奉(Edaravone)組，即在MCA012h模型中，13_MTD80mg/kg組與依達(dá)拉奉3mg/kg組分別尾靜脈給藥，對(duì)照腦梗死體積。以上，Sham組除不插入線栓，其它相同。假手術(shù)組和溶媒組分別給予等體積脂質(zhì)體，作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照。各組大鼠均于相應(yīng)缺血時(shí)間處死取材，待測(cè)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)以Longa神經(jīng)功能缺失評(píng)分觀察神經(jīng)功能缺失癥狀(O分:無(wú)明顯神經(jīng)損傷癥狀；I分:提尾懸空時(shí)不能完全伸展左前肢；2分:向左側(cè)旋轉(zhuǎn)即追尾征；3分:行走時(shí)向左側(cè)傾倒；4分:不能自行行走)。TTC染色觀察腦梗死體積大小。AutoCAD圖像分析軟件計(jì)算腦水腫程度。腦干濕重測(cè)定腦含水量。伊文思藍(lán)(EB)檢測(cè)血腦屏障(BBB)通透性。免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)損傷側(cè)腦組織星形膠質(zhì)細(xì)胞水通道蛋白-4 (AQP4)蛋白表達(dá)、腦血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白-1 (ZO-1)蛋白表達(dá)。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
(I)13-MTD對(duì)神經(jīng)功能缺失評(píng)分的改善作用
各組大鼠于腦缺血6、12、24h時(shí)分別處死，并進(jìn)行神經(jīng)功能缺失評(píng)分比較。Sham組評(píng)O分。Veh-6h、12h、24h組均有不同程度的神經(jīng)功能缺失癥狀，表現(xiàn)為右側(cè)眼瞼下垂，提尾懸空時(shí)左前肢內(nèi)收及軀干向左側(cè)扭轉(zhuǎn)，運(yùn)動(dòng)時(shí)出現(xiàn)向左側(cè)轉(zhuǎn)圈式行走為追尾征，神經(jīng)功能缺失嚴(yán)重時(shí)向左側(cè)傾倒。各缺血時(shí)段神經(jīng)功能評(píng)分有明顯差異(/X0.001)。與腦缺血各時(shí)段Vehicle組(Veh_6h、12h、24h組)比較，13-MTD 40、80、120mg/kg均可降低各缺血時(shí)段的神經(jīng)功能缺失評(píng)分0°〈0.001)，且存在劑量依賴性0°〈0.001)，以13-MTD80 mg/kg組改善最為明顯0°〈0.05，/X0.01，K0.001)。提示不同劑量的13-MTD均可有效改善腦缺血后的神經(jīng)功能缺失癥狀，保護(hù)腦的正常神經(jīng)功能(見(jiàn)圖1)。(2) 13-MTD對(duì)損傷側(cè)腦梗塞體積的改善作用
Sham組切片經(jīng)2%TTC染色后腦片全紅，色澤均勻。腦缺血各時(shí)段，Veh-6h組損傷側(cè)腦組織色澤度尚可，整體完整，缺血側(cè)腦片2%TTC染色后可見(jiàn)皮層部分有白色梗死灶；Veh-12h組白色梗死灶明顯，累及整個(gè)缺血側(cè)的大腦皮層；Veh-24h組白色梗死灶最為明顯，可累及到整個(gè)缺血側(cè)腦半球并伴有輕度的糜爛。13-MTD 40、80、120mg/kg組均可改善不同時(shí)限腦缺血損傷側(cè)腦組織外觀，使白色梗死灶范圍顯著減少(ΖΧ0.01)，且各組間存在劑量依賴性0°〈0.05，/Χ0.01)， 以 13-MTD80 mg/kg 組治療效果最好(/Χ0.05，/Χ0.01)。腦缺血 12h 模型中，13-MTD 80mg/kg組梗死灶體積較陽(yáng)性對(duì)照藥依達(dá)拉奉3mg/kg組更小0°〈0.01 )。提示不同劑量的13-MTD均可顯著縮小腦缺血后的腦梗塞體積，減輕腦組織腦組織壞死或軟化，保護(hù)腦細(xì)胞功能(見(jiàn)圖2，3，4)。(3) 13-MTD對(duì)損傷側(cè)腦組織水腫程度的改善作用
3.1 AutoCAD軟件測(cè)量腦水腫程度
Sham組大腦體積均勻；各缺血時(shí)段Veh-6h、12h、24h組，左右兩側(cè)腦組織體積不均等，缺血側(cè)腦組織體積稍大，水腫明顯0°〈0.01)。與Veh-6h、12h、24h組相比，13-MTD 40、80、120mg/kg組腦組織水腫減輕0°〈0.01)。各劑量組之間有顯著量效差異0°〈0.01，P<Q.05)，以13-MTD 80mg/kg組腦組織水腫程度減輕更明顯G°〈0.01)。提示不同劑量的13-MTD均可有效減輕腦缺血造成的腦組織水腫，減輕腦損傷(見(jiàn)圖5)。干濕重比較測(cè)定腦組織含水量
與Sham組相比，Veh-6h、12h、24h組腦組織含水量明顯增加G°〈0.01)，Veh_24h組最嚴(yán)重0°〈0.001)。與腦缺血各時(shí)點(diǎn)Vehicle組比較，13-MTD 40、80、120mg/kg組腦組織含水量均明顯下降0°〈0.01，P<Q.05)，并有量效差異0°〈0.01)，以13-MTD 80mg/kg組效果最好0°〈0.01)。此與上述AutoCAD軟件測(cè)量腦水腫程度的情況一致。提示不同劑量的13-MTD可有效降低腦缺血后的腦組織含水量，保護(hù)腦細(xì)胞功能(見(jiàn)圖6)。(4) 13-MTD對(duì)損傷側(cè)血腦屏障(BBB)通透性的保護(hù)作用Sham組腦片肉眼基本看不見(jiàn)藍(lán)色滲出。與Sham組相比,各缺血時(shí)間段Veh_6h、12h、24h組可見(jiàn)明顯的藍(lán)色區(qū)域0°〈0.01)。與各缺血時(shí)段Vehicle組比較，13-MTD 40、80、120mg/kg組腦伊文氏藍(lán)(EB)滲出明顯減少0°〈0.01，/X0.05)，各用藥組間有明顯量效差異0°〈0.01)，以13-MTD 80mg/kg組效果更好。提示不同劑量的13-MTD均可保護(hù)不同時(shí)限的腦缺血后的BBB損傷，防止腦缺血病程進(jìn)一步發(fā)展(見(jiàn)圖7，8)。(5) 13-MTD對(duì)損傷腦星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4蛋白表達(dá)的影響
腦內(nèi)AQP4蛋白表達(dá)呈陽(yáng)性的細(xì)胞，胞膜上呈均勻分布的棕黃色顆粒。AQP4蛋白主要表達(dá)于星形膠質(zhì)細(xì)胞(AST)胞膜上。Sham組有少量AQP4陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。Veh_6、12、24h組AQP4陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)、陽(yáng)性面積、IOD值升高G°〈0.001 )，Veh_24h組IOD值與陽(yáng)性細(xì)胞面積上升最多(7X0.001)，Veh-12h組與Veh_24h組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)無(wú)差別G°>0.05)，陽(yáng)性面積Veh_24h組增大O°〈0.001)。在腦缺血6、12、2處模型中，13-101) 80mg/kg組損傷腦星形膠質(zhì)細(xì)胞的AQP4蛋白陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)、陽(yáng)性面積、IOD值均下降G°〈0.001,^0.01)，以腦缺血6h療效最佳。提示13-MTD80mg/kg可通過(guò)下調(diào)腦缺血6、12、24h時(shí)損傷側(cè)腦組織星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4蛋白表達(dá)，改善不同時(shí)限腦缺血導(dǎo)致的腦水腫。(見(jiàn)表1，圖9，10，11)。表I為13-MTD 80 mg/kg對(duì)大鼠MCAO 6、12、24h后損傷腦AQP4蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的比較U ±5., n=5)。
權(quán)利要求
1.一種13-甲基十四烷酸在制備治療局灶性腦缺血的藥物中的應(yīng)用，所述的13-甲基十四烷酸是一種末端支 鏈飽和脂肪酸。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種13-甲基十四烷酸在制備治療局灶性腦缺血的藥物中的應(yīng)用。所述的13-MTD不同劑量在腦缺血各時(shí)段均有明顯的藥效作用，即減輕神經(jīng)功能缺失癥狀，縮小腦梗死灶，通過(guò)下調(diào)腦組織AQP4蛋白表達(dá)減輕腦水腫，通過(guò)上調(diào)腦組織ZO-1蛋白表達(dá)保護(hù)血腦屏障(BBB)。13-MTD可能是治療缺血性腦血管疾病很有前途的一種先導(dǎo)化合物。其治療腦缺血的優(yōu)勢(shì)在于13-MTD可化學(xué)合成，分子量小，脂溶性強(qiáng)，對(duì)BBB穿透率高，與腦組織脂質(zhì)結(jié)構(gòu)親和力好，可快速高效作用于靶組織。13-MTD作為細(xì)胞膜成分能嵌入膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)中，有膜穩(wěn)定作用。而腦富含脂質(zhì)，腦缺血使膜磷脂降解造成腦細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷，13-MTD可發(fā)揮良好的膜保護(hù)作用。且不良反應(yīng)小，安全范圍較大，可靜脈給藥，尤其對(duì)危重病程的腦缺血的治療應(yīng)具有更好的臨床適用性。
文檔編號(hào)A61P9/10GK103099801SQ201210411848
公開(kāi)日2013年5月15日 申請(qǐng)日期2012年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月23日
發(fā)明者余涓 申請(qǐng)人:福建醫(yī)科大學(xué)