專利名稱：組織蛋白酶b抑制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種抑制組織蛋白酶B(Cathepsin B,Cat-Β)的化合物，以及含所述化合物的組合物及抑制Cat-B的方法。
背景技術：
組織蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成員，在生物界已發(fā)現(xiàn)20余種，人體中主要存在11種，人體中的組織蛋白酶主要包括組織蛋白酶B、C、F、H、K、L、O、S、V、W和X，它們與人體的多種生理、病理過程密切相關。自1986年Fong等[Fong D, Calhoun DH7Hsieh WT, et al. Proc Natl Acad Sci USA, 1986,83,9 :2909-2913.]和 Chan 等[Chan SJ, San Segundo B, McCormick MB, et al. Proc Natl Acad Sci USA，1986，83，20 :7721-7725.]分別從肝癌和胎肝中分離出人Cat-B基因起至今，Cat-B是所有半胱氨酸蛋白酶中研究最多的一種，它廣泛存在于哺乳動物的各種組織中。在機體內(nèi)，Cat-B mRNA首先在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成為糖基化的前體酶原，然后釋放至胞漿，再被轉(zhuǎn)運至高爾基體后，其糖基化位點被磷酸化，從而形成可被溶酶體上6-磷酸甘露糖受體特異性識別的甘露糖-6-磷酸蛋白，進而胞飲進入溶酶體[Turk B, Turk D, Turk V. Biochim Biophys Acta, 2000,1477 :98-111.];在溶酶體內(nèi)，其酶原前體通過蛋白水解作用成為有活性的成熟單鏈形式，并被進一步加工成成熟雙鏈形式，酶的活性位點能攻擊其底物肽的羰基碳，通過脫酰基作用使得含羰基的基團離去，從而發(fā)揮其蛋白水解作用。
Cat-B是第一個發(fā)現(xiàn)與乳腺癌相關的溶酶體蛋白酶，除此之外它還與多種人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。腫瘤的發(fā)生是一個多因素、多階段的過程，其侵襲轉(zhuǎn)移包括3個步驟·· (I)粘附，即腫瘤細胞內(nèi)的整合素與細胞外基質(zhì)成分結(jié)合；(2)降解，即腫瘤細胞或其周圍的基質(zhì)細胞分泌蛋白酶降解胞外基質(zhì)成分；(3)穿透，即腫瘤細胞通過胞外基質(zhì)降解處移行[蒯小玲，蕭樹東.國外醫(yī)學消化系統(tǒng)疾病分冊，2002，22 :6 5-67.]，腫瘤病人的主要死因就是因為胞外基質(zhì)、基底膜被降解，使得腫瘤細胞能夠離開腫瘤組織而進行轉(zhuǎn)移。 腫瘤細胞的運動性和趨化性、新生血管的形成是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、生長發(fā)展的兩個關鍵因素， 而Cat-B就是通過這兩個方面來影響腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移、生長發(fā)展等過程。應用反義核苷酸技術發(fā)現(xiàn)，Cat-B表達降低的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞運動能力也隨之下降，Schraufatatter等 [Schraufatatter IU, Trieu K, et al. JImmunol, 2003,171 :6714-6722.]在實驗中發(fā)現(xiàn),抑制Cat-B的作用可以完全阻斷IL-8對由中性粒細胞趨化因子受體2介導的細胞趨化作用， 說明Cat-B可以提高腫瘤細胞的運動遷移能力；Yanamandra等[Yanamandra N, Gumidyala KV, et al. Oncogene, 2004, 23 :2224-2230.]通過反義RNA和RNA干擾技術在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中抑制Cat-B的表達，體外實驗發(fā)現(xiàn)Cat-B表達降低可以使其與腫瘤細胞混合培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細胞間相互作用減少，毛細血管樣結(jié)構(gòu)不能形成，說明Cat-B可以促進新生血管的形成。Cat-B在正常細胞中僅在溶酶體中少量存在，且僅在酸性環(huán)境中具有活性，但在腫瘤細胞中其可通過多種機制被大量分泌、異常轉(zhuǎn)運和分布，這種分泌型的Cat-B由于缺乏 6-磷酸甘露糖受體識別標記，故不能被攝入溶酶體，而多以酶原的形式存在于胞漿和細胞夕卜，由于腫瘤細胞能夠酸化其周圍的環(huán)境，所以能夠激活酶原形成活性Cat-B。在腫瘤組織中，Cat-B被異常分泌至細胞外或到達侵襲細胞表面，從而降解基底膜和胞外基質(zhì)成分，如 I型膠原蛋白、IV型膠原蛋白、纖連蛋白及層黏連蛋白等，并激活尿激酶型纖溶酶原激活劑及其他蛋白水解酶，從而參與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移、新生血管的形成。
利用原位雜交、Western blot及免疫組化等技術研究發(fā)現(xiàn)，胃癌、肺癌、腸癌、乳腺癌、前列腺癌、甲狀腺腫瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、膀胱癌、卵巢癌、黑色素瘤等惡性腫瘤組織中， Cat-B的表達及活性均成倍甚至3 9倍高于鄰近的正常組織[Frohhch E, Schlagenhauff B, MohrleM, et al. Cancer, 2001. 91 :972-982.]，并且在結(jié)腸癌、前列腺癌等多種腫瘤細胞中發(fā)現(xiàn)，Cat-B過表達在腫瘤侵襲邊緣最為顯著,細胞周圍基質(zhì)染色明顯[Fernandez PL, Farre X, Nadal A, et al.1ntJ Cancer, 2001,95 :51-55. ], Premzl 等將癌基因 C-Ha-ras 轉(zhuǎn)染到正常的乳腺上皮細胞，發(fā)現(xiàn)Cat-B表達水平與未轉(zhuǎn)染細胞相比明顯升高，且使其侵襲能力增強[Premzl A, Zavasnik Bergant V, TurkV, et al. Exp Cell Res, 2003,283 206-214. ]，Staack等認為Cat-B活性和濃度的增高是移行性細胞癌變病人腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移以及預后較差的一個危險因子[StaackA, Koenig F, Daniltchenko D, et al. Urology, 2002，59 :308-312. ]jondi等[Gondi CS，Lakka SS,et al.Oncogene,2004，23 :8486-8496] 通過RNA干擾技術將Cat-B RNAi轉(zhuǎn)染神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系后，明顯抑制了腫瘤血管的生成和腫瘤的侵襲性。Tummalapalli 等[Tummalapalli P, Spomar D, et al.1nt J Oncol, 2007, 31 :1039-1050.]用RNAi干擾腦膜瘤細胞系中Cat-B的表達，也得出了相同的結(jié)論。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供具有通式(I)所示結(jié)構(gòu)化合物，
權利要求
1.式⑴的化合物，
2.式(II)的化合物
3.選自以下的化合物
4.包含權利要求1-3中任意一權利要求所述化合物在制備通過抑制體內(nèi)組織蛋白酶B 表達而治療腫瘤藥物中的應用。
5.包含權利要求1-3中任意一權利要求所述化合物，或其對映異構(gòu)體和可藥用載體的組合物，在制備用于抑制組織蛋白酶B藥物中的應用。
6.包含權利要求1-3中任意一權利要求所述化合物，或其對映異構(gòu)體和可藥用載體的組合物，在制備通過抑制體內(nèi)組織蛋白酶B表達而治療腫瘤藥物中的應用。
7.權利要求4或6所述的應用，其中所述腫瘤是神經(jīng)膠質(zhì)瘤或腦膜瘤。
8.包含權利要求1-3中任意一權利要求所述化合物，或其對映異構(gòu)體和可藥用載體的組合物，在腫瘤常規(guī)治療中作為輔助藥物的應用。
9.權利要求5或6中所述組合物，進一步包括至少一種另外的具有治療腫瘤的藥物。
10.權利要求9所述的組合物，其中所述的至少一種另外的具有治療腫瘤的藥物是選自烷化劑類、抗代謝藥類、抗腫瘤生素類、抗腫瘤植物藥類、抗腫瘤激素類、或抗腫瘤輔助藥類。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種對組織蛋白酶B具有抑制作用的化合物，以及含有所述化合物的組合物對組織蛋白酶B的抑制作用，本發(fā)明所述化合物可用于制備通過抑制體內(nèi)組織蛋白酶B表達而治療腫瘤的藥物中，所述的腫瘤是神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦膜瘤。
文檔編號A61K31/015GK103006621SQ20121041458
公開日2013年4月3日 申請日期2012年10月26日 優(yōu)先權日2012年10月26日
發(fā)明者黃璐琦, 高偉, 蘇平 申請人:中國中醫(yī)科學院中藥研究所