兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位，其制備方法及其用途
【專利摘要】公開了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的制備方法，包括如下步驟：A.浸潤：將兩面針葉粗粉用40％或以上濃度的醇溶液，以2～12倍(V/W)的量浸泡8～12小時使之溶脹；B.提?。河门c步驟A中相同濃度的醇溶液對A步驟中的兩面針葉粗粉加熱回流2次或2次以上，醇溶液用量為兩面針葉粗粉的10～25倍(V/W)，每次提取時間為1～4小時，過濾，合并提取液，減壓濃縮，過濾，取濾液，得藥液比重為1.02～1.20；C.大孔樹脂處理：將B步驟中上清液通過大孔樹脂吸附，用10倍柱體積的10％的醇溶液洗脫，繼之用50～85％的醇溶液洗脫，至碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性，收集醇洗脫液，所述大孔樹脂選自AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20和HPD-100；D.干燥：將C步驟獲得的醇洗脫液減壓干燥或噴霧干燥，即得。
【專利說明】兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位，其制備方法及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥活性部位，其制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002]炎癥是一種常見多發(fā)病，是具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子的防御性反應(yīng)，是機(jī)體對各種炎性刺激引起組織損害而產(chǎn)生的一種基本病理過程，也是機(jī)體對損傷或感染產(chǎn)生的一種重要的保護(hù)性反應(yīng)。體表的外傷感染和各器官的大部分常見病和多發(fā)病(如癤、癰、肺炎、肝炎、腎炎等)都屬于炎癥性疾病。疼痛是機(jī)體受到來自內(nèi)外環(huán)境的傷害性刺激時出現(xiàn)的一種伴有情緒反應(yīng)的病理生理過程，它對于機(jī)體的影響是多方面的，既是機(jī)體受到傷害性刺激后的一種防御反應(yīng)，也是多種疾病的一種癥狀。
[0003]抗炎鎮(zhèn)痛藥是一類具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛及抗風(fēng)濕作用的常用藥物，抗炎鎮(zhèn)痛藥物是臨床治療中僅次于抗感染藥物的第二大類藥物，在臨床用藥中占有重要地位。目前，全球止痛藥市場總銷售額估計在400億~450億美元之間，疼痛治療藥物市場仍然明顯沒有滿足臨床需求。在人類對鎮(zhèn)痛藥物的探索研究中，中藥、天然藥已越來越凸顯其藥效良好、無成癮性、不良反應(yīng)少及資源豐富等優(yōu)勢，引起人們的重視。
[0004]中醫(yī)學(xué)治療痛證已有幾千年的歷史，在《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就對病因、病機(jī)、病位、證候、預(yù)后等方面進(jìn)行了系統(tǒng)論述。在復(fù)雜多樣的天然產(chǎn)物化學(xué)成分中，一些化學(xué)成分如生物堿、黃酮類、苷類、揮發(fā)油及有機(jī)酸等，往往具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用。
[0005]兩面針Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.為蕓香科(Rutaceae)花椒屬植物，別名野花椒、入地金牛、蔓椒、雙面針，為廣西道地大宗主產(chǎn)藥材之一，因質(zhì)量好，產(chǎn)量大而著稱，是中醫(yī)藥家首選常用之藥物，廣泛應(yīng)用于中醫(yī)處方、中成藥及精細(xì)化工產(chǎn)品中。全國使用兩面針為原料藥材的中成藥就高達(dá)63種之多，如“三九胃泰”、“金雞膠囊”、“金雞片”、“金雞顆?！?、“復(fù)方兩面針含片”、“兩`面針止痛片”、“正骨水”等；還有日用化工產(chǎn)品“兩面針中藥牙膏”。
[0006]兩面針法定入藥部位為根，有行氣止痛、活血化瘀、祛風(fēng)通絡(luò)之功效。臨床上常用于氣滯血瘀引起的跌撲損傷、風(fēng)濕痹痛、胃痛、牙痛，毒蛇咬傷；外治湯火燙傷。
[0007]實際生產(chǎn)中，非藥用部位葉在規(guī)范化種植生產(chǎn)中一直被當(dāng)成廢棄物白白地浪費(fèi)掉；假如以現(xiàn)代科學(xué)實驗為依據(jù)，結(jié)合民間傳統(tǒng)用藥習(xí)慣，開發(fā)出兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛的活性部位制劑或護(hù)膚品，從兩面針的年產(chǎn)量看，其經(jīng)濟(jì)價值也是相當(dāng)可觀的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本申請的一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的制備方法，其包括如下步驟:
[0009]A.浸潤:將兩面針葉粗粉用40%或以上濃度的醇溶液，以2~12倍(V/W)的量浸泡8~12小時使之溶脹；
[0010]B.提取:用與步驟A中相同濃度的醇溶液對A步驟中的兩面針葉粗粉加熱回流2次或2次以上，醇溶液用量為兩面針葉粗粉的10~25倍(V/W)，每次提取時間為I~4小時，過濾，合并提取液，減壓濃縮，過濾，取濾液，得藥液比重為1.02~1.20 ;
[0011]C.大孔樹脂處理:將B步驟中上清液通過大孔樹脂吸附，用10倍量10%的醇溶液洗脫，繼之用50~85%的醇溶液洗脫，至碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性，收集醇洗脫液，所述大孔樹脂選自 AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和 HPD-100 ；
[0012]D.干燥:將C步驟獲得的醇洗脫液減壓干燥或噴霧干燥，即得。
[0013]本申請的另一實施方案提供了采用上述制備方法制備的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0014]本申請的另一實施方案提供了藥物組合物，其包含本申請的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0015]本申請的另一實施方案提供了保健品，其包含本申請的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0016]本申請的另一實施方案提供了化妝品，其包含本申請的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0017]本申請的另一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備用于抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的用途。
[0018]本申請的另一實施 方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備保健品中的用途。
[0019]本申請的另一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備化妝品中的用途。
【具體實施方式】
[0020]本申請的一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的制備方法，其包括如下步驟:
[0021]A.浸潤:將兩面針葉粗粉用40%或以上濃度的醇溶液，以2~12倍(V/W)的量浸泡8~12小時使之溶脹；
[0022]B.提取:用與步驟A中相同濃度的醇溶液對A步驟中的兩面針葉粗粉加熱回流2次或2次以上，醇溶液用量為兩面針葉粗粉的10~25倍(V/W)，每次提取時間為I~4小時，過濾，合并提取液，減壓濃縮，過濾，取濾液，得藥液比重為1.02~1.20 ;
[0023]C.大孔樹脂處理:將B步驟中上清液通過大孔樹脂吸附，用10倍量10%的醇溶液洗脫，繼之用50~85%的醇溶液洗脫，至碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性，收集醇洗脫液，所述大孔樹脂選自 AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和 HPD-100 ；
[0024]D.干燥:將C步驟獲得的醇洗脫液減壓干燥或噴霧干燥，即得。
[0025]在某些實施方案中，所述醇選自甲醇、乙醇、丙醇或其混合物。在更優(yōu)選的實施方案中，所述醇為乙醇。
[0026]在某些實施方案中，可用慢速滲漉或微波提取替代回流提取。在該實施方案中，醇溶液用量為生藥量的10倍至40倍(v/w)。
[0027]可用于本申請的大孔樹脂選自AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和HPD-1OO0在某些實施方案中，優(yōu)選采用DlOl或AB-8大孔樹脂。[0028]本申請的另一實施方案提供了采用上述制備方法制備的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0029]本申請的另一實施方案提供了藥物組合物，其包含本申請的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0030]本申請的另一實施方案提供了保健品，其包含本申請的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0031]本申請的另一實施方案提供了化妝品，其包含本申請的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
[0032]本申請的另一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備用于抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的用途。藥物的劑型可以是滴丸、片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、合劑或貼膏等。
[0033]本申請的另一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備保健品中的用途。
[0034]本申請的另一實施方案提供了兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備化妝品中的用途。
[0035]本申請的方法操作簡單，重復(fù)性好，樹脂可重復(fù)使用，為兩面針葉活性部位大批量的工業(yè)生產(chǎn)創(chuàng)造了條件。此外，按照本申請的方法制備的兩面針葉活性部位(組分)，有效成分含量高，抗炎鎮(zhèn)痛活性強(qiáng)。 [0036]本發(fā)明制 備的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的棉球肉芽腫脹實驗、二甲苯致耳廓腫脹實驗、角叉菜膠足趾腫脹實驗、熱板法和醋酸扭體法試驗結(jié)果表明，抗炎鎮(zhèn)痛效果顯著，急性毒性試驗表明，兩面針葉活性部位對小鼠無急性毒性。
[0037]實施例
[0038]下面結(jié)合兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的制備方法和藥理實驗，說明本申請的【具體實施方式】。
[0039]實施例1兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的制備
[0040]取兩面針葉干燥藥材200g，粉碎，加1000ml 70%乙醇溶液，攪拌均勻，放置浸泡10小時；然后加入3000ml 70%乙醇溶液加熱回流2.5小時，過濾，重復(fù)兩次，合并提取液。
[0041]將上述提取液減壓濃縮，得藥液比重為1.13(60°C )的浸膏。
[0042]將上述浸膏的一半減壓濃縮成干膏，得18.63克粗提物，另一半浸膏加到裝有DlOl大孔樹脂的層析柱中，用10倍柱體積的10%的乙醇溶液洗脫，繼之用80%乙醇溶液洗脫，至碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性。收集80%乙醇溶液洗脫液，減壓回收溶劑，得80%乙醇洗脫物。
[0043]80%乙醇洗脫后用10倍量95%乙醇洗脫，收集95%乙醇溶液洗脫液，減壓回收溶劑，得95%乙醇洗脫物。
[0044]在以下的實施例中，除熱板法實驗外，實驗動物分組均按如下步驟進(jìn)行:各取110只體重為20±2g的昆明種小鼠(由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號=SCXI^i2009-0002)，隨機(jī)分為11組，每組10只，雌雄各半，設(shè)模型組(0.5% CMC-Na, 0.5ml/天)、阿司匹林組0.5g/kg、兩面針葉的70%乙醇粗提取物組、80%乙醇洗脫物組，95%乙醇洗脫物組。其中，70%乙醇粗提物組、80%乙醇洗脫物組和95%乙醇洗脫物組均設(shè)高、中、低劑量組，對應(yīng)劑量分別為lg/kg、0.5g/kg、0.25g/kg。[0045]統(tǒng)計學(xué)處理:實驗數(shù)據(jù)用SPSS 11.5統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行分析，組間比較采用t檢驗。
[0046]實施例2
[0047]對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響
[0048]11組實驗小鼠連續(xù)灌胃給藥7d，末次給藥30min后，于小鼠右耳正反面均勻涂抹二甲苯50 μ L/只致炎，左耳為對照，30min后將小鼠頸椎脫臼處死，用直徑為6mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圓耳片，精密稱量，右耳與左耳質(zhì)量之差即為腫脹度，并計算小鼠耳廓腫脹抑制率，腫脹抑制率(％)=(模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/模型組平均腫脹度X 100%。
[0049]兩面針葉總提物及各洗脫部位對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響，結(jié)果如表1所
/Jn ο
[0050]表1兩面針葉總提取物及不同洗脫部位對小鼠耳廓腫脹的影響(J ± S，《=10)
【權(quán)利要求】
1.兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的制備方法，其特征在于包括如下步驟: A.浸潤:將兩面針葉粗粉用40%或以上濃度的醇溶液，以2~12倍(V/W)的量浸泡8~12小時使之溶脹； B.提取:用與步驟A中相同濃度的醇溶液對A步驟中的兩面針葉粗粉加熱回流2次或2次以上，醇溶液用量為兩面針葉粗粉的10~25倍(V/W)，每次提取時間為I~4小時，過濾，合并提取液，減壓濃縮，過濾，取濾液，得藥液比重為1.02~1.20 ; C.大孔樹脂處理:將B步驟中上清液通過大孔樹脂吸附，用10倍柱體積的10%的醇溶液洗脫，繼之用50~85%的醇溶液洗脫，至碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性，收集醇洗脫液，所述大孔樹脂選自 AB-8、D101、D201、D140、D141A、D301、D401、HP20 和 HPD-100 ； D.干燥:將C步驟獲得的醇洗脫液減壓干燥或噴霧干燥，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述醇選自甲醇、乙醇、丙醇或其混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步驟B中，用慢速滲漉、或微波提取替代回流提取，醇溶液用量為兩面針葉粗粉的10至40倍(v/w)，過濾，合并提取液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，在步驟C中，用10倍量10%乙醇洗脫后，繼之用80%乙醇洗脫。
5.兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位，其按照權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的方法制備。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位，其為80%乙醇洗脫物。
7.藥物組合物，其包含權(quán)利要求5或6所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
8.保健品，其包含權(quán)利要求5或6所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
9.化妝品，其包含權(quán)利要求5或6所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位。
10.權(quán)利要求5或6所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備用于抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的用途。
11.權(quán)利要求5或6所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備保健品中的用途。
12.權(quán)利要求5或6所述的兩面針葉抗炎鎮(zhèn)痛活性部位在制備化妝品中的用途。
【文檔編號】A61K36/758GK103800509SQ201210452472
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月13日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月13日
【發(fā)明者】馮潔, 賴茂祥, 莫遺盛 申請人:廣西醫(yī)科大學(xué)