血必凈注射液對電離輻射誘導小鼠造血損傷的保護作用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及血必凈注射液用于預防和治療輻射誘導造血系統(tǒng)損傷。通過現(xiàn)代藥理學實驗證明，小鼠在受照前后注射血必凈注射液，可對輻射誘導的造血系統(tǒng)損傷具有一定的緩解作用，提示該藥物可用于治療輻射誘導的造血系統(tǒng)損傷。對于放療患者，進行血必凈注射液注射治療，有利于保護骨髓細胞功能，緩解造血系統(tǒng)損傷。
【專利說明】血必凈注射液對電離輻射誘導小鼠造血損傷的保護作用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及血必凈注射液在預防治療輻射誘導造血系統(tǒng)疾病中的用途。
【背景技術】
[0002]人體中造血系統(tǒng)對輻射高度敏感，其輻射損傷是急性放射病中感染、除血、貧血等并發(fā)癥發(fā)生的重要基礎，是急性放射病預防診治研究中的關鍵問題。研究表明急性放射病在接受放療或核輻射暴露后很快發(fā)生，主要是快速增殖的造血祖細胞損傷所致，而照射對處于靜止期的造血干細胞的影響程度較輕。電離輻射照射后造血功能損傷嚴重，形成急性骨髓抑制，由此引發(fā)的感染和出血等并發(fā)癥可導致輻射暴露者較高的發(fā)病率和死亡率。
[0003]近年來研究和臨床試驗結(jié)果證實，機體在受到輻射照射后，只要體內(nèi)殘留有少量的造血干/祖細胞，就可以用各種造血生長因子刺激造血干/祖細胞增殖、分化，加速骨髓造血功能的重建，減少急性骨髓抑制的發(fā)病率和死亡率。目前已有多種造血生長因子如粒細胞集落刺激因子，粒細胞/巨噬細胞集落刺激因子，白細胞介素_3，白細胞介素11、促紅細胞生成素和促血小板生成素等應用于大劑量放、化療病人和Y射線照射所致事故性急性放射病病人的臨床救治工作，但療效有待進一步確認。
[0004]中藥血必凈注射液是在中醫(yī)藥理論指導下，從36組中藥復方中篩選組方而成。該藥由紅花、丹參、赤芍、川穹、當歸五味中藥組成，臨床上用于治療呼吸系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)炎癥及多器官功能障礙綜合癥等多種疾病?，F(xiàn)代藥理學研究表明，其單味紅花、丹參和赤芍均可作用于細胞的凋亡通路，影響bcl-2, bax及caspase3蛋白的表達。丹參，當歸和川穹有抗炎作用，能影響Cox-2酶及炎癥因子IL-10，TGF-β等的表達。在治療胃腸方面，僅有張云杰等發(fā)現(xiàn)血必凈注射液可減輕小腸缺血再灌注所致腸黏膜損傷，尚未見血必凈注射液對造血系統(tǒng)輻射損傷防護研究的報`道。
[0005]本發(fā)明人在實驗中首次發(fā)現(xiàn):血必凈注射液在防治輻射誘導的造血損傷中具有明顯的保護作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明要解決的技術問題是尋找能夠有效預防保護輻射誘導造血系統(tǒng)損傷的藥物。
[0007]因此，本發(fā)明的目的在于提供血必凈注射液在預防或治療輻射誘導造血系統(tǒng)損傷中的應用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1血必凈注射液對輻射暴露小鼠骨髓細胞CFU-GM能力的影響。小鼠照射劑量為2Gy。照射后分別給予生理鹽水、血必凈注射液(0.4ml/kg，)，每處理組5只，所有小鼠在照射前給藥3天，照射后繼續(xù)給藥5天。照射6天后，取骨髓細胞，進行CFU-GM能力檢測。結(jié)果表明血必凈注射液對小鼠骨髓細胞的克隆形成能力有顯著保護作用。[0009]圖2血必凈注射液對輻射暴露小鼠存活率的影響(9Gy)。前期利用ICR雄性小鼠，建立了輻射誘導腸道損傷模型。照射劑量為9Gy，劑量率為0.73Gy/min。血必凈組ICR小鼠建模后腹腔注射0.4mg/kg血必凈注射液，每日一次，持續(xù)8天。觀察ICR小鼠15天生存率，血必凈可顯著提高小鼠15d生存率，表明血必凈注射液對小鼠腸道輻射損傷有防護作用。
【具體實施方式】
[0010]血必凈注射液在預防和治療輻射誘導造血系統(tǒng)損傷中的應用。所述的輻射誘導造血系統(tǒng)損傷，包括:接受放射治療的腫瘤患者、輻射暴露的工作人員、意外輻射性同位素暴
露人員。
[0011]本發(fā)明所述的造血系統(tǒng)損傷，包括外周血白細胞下降、骨髓增生不良或再生障礙性貧血等。
[0012]本發(fā)明對輻射誘導造血系統(tǒng)損傷的實驗內(nèi)容主要包括以下幾個方面:
[0013]1.血必凈注射液可顯著提高全身照射的小鼠生存率
[0014]2.血必凈注射液對接收全身照射的小鼠造血系統(tǒng)功能損傷有保護作用
[0015]下面通過藥效學 實驗進一步說明血必凈注射液在預防或治療輻射誘導造血系統(tǒng)損傷作用的藥理實驗情況。
[0016]一、實驗方法
[0017]1、骨髓單個核細胞分離
[0018]無菌取小鼠股骨，含2% FCS的Hanks液沖洗骨髓，F(xiàn)icoll分離，制備單個核細胞懸液，洗滌，計數(shù)調(diào)整所需的細胞濃度后待用。
[0019]2、集落形成(克隆)能力測定
[0020]分裝甲基纖維素培養(yǎng)基，_20°C保存。用前置于2-8°C冰箱內(nèi)或室溫下解凍；分離小鼠骨髓細胞，胎盤藍染色計數(shù)細胞調(diào)整細胞濃度加入M3534，振蕩器充分混勻，靜置待氣泡消失，用3ml注射器連接16#平頭注射器針頭，加入24孔板放入濕盒，置入37°C，5% C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14天。
[0021]從培養(yǎng)第5天開始在倒置顯微鏡下進行觀察。低倍觀察集落形成情況，細胞數(shù)^ 30為陽性集落，集落形成率以每105個細胞形成的集落數(shù)表示。
[0022]3、外周血常規(guī)參數(shù)測定小鼠照射后第6日，小鼠稱重，眼球取血200 μ 1，EDTA-K3抗凝，用三分類血細胞計數(shù)儀測定外周血白細胞數(shù)(WBC)、紅細胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白含量(HGB)、血小板計數(shù)(PLT)等指標。
[0023]4、全身照射小鼠生存率測定全身照射后，定期稱重，每日觀察小鼠死亡情況。
[0024]二、實驗結(jié)果與討論
[0025]1、血必凈注射液對輻射暴露小鼠外周血計數(shù)的影響
[0026]小鼠按照射劑量為2Gy，分為三組，5只/組。照射前后分別給予生理鹽水、血必凈注射液(0.4ml/kg，)，腹腔注射，照射前給藥3天，照射后連續(xù)給藥5天。照射后第6天，取骨髓細胞及外周血。結(jié)果發(fā)現(xiàn)如表1所示，2Gy照射對小鼠外周血白細胞計數(shù)有抑制作用，而血必凈注射液在2Gy照射后對小鼠外周血白細胞有明顯的保護作用，與照射組相比，P < 0.05.[0027]表1血必凈注射液對受照小鼠外周血的影響
[0028]
【權利要求】
1.血必凈注射液在治療和預防輻射誘導造血系統(tǒng)損傷中的應用。
2.在權利要求1所述的應用，其中所述輻射誘導的造血系統(tǒng)損傷，包括接受放射治療的腫瘤患者、輻射暴露的工作人員、意外輻射性同位素暴露的人員。
3.在權利要求1所述的應用，其特征在于所述的造血系統(tǒng)損傷，包括外周血白細胞下降、骨髓增生不良或再生障礙性貧血 等造血系統(tǒng)疾病。
【文檔編號】A61P7/06GK103800454SQ201210458076
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月15日 優(yōu)先權日:2012年11月15日
【發(fā)明者】李德冠, 姚小青, 孟愛民, 王月英, 吳紅英, 路璐, 王小春, 王營營, 常建輝 申請人:中國醫(yī)學科學院放射醫(yī)學研究所, 天津紅日藥業(yè)股份有限公司