一種新型達(dá)瑪烷型三萜皂苷類化合物的制備與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及具有下述結(jié)構(gòu)式的新型達(dá)瑪烷型三萜皂苷類化合物：體外藥理證實上述化合物具有心肌保護(hù)的效果。本發(fā)明的化合物制備成藥物制劑，可用于治療缺血性心肌病、心肌梗塞造成的心肌損傷等心血管相關(guān)疾病。
【專利說明】一種新型達(dá)瑪烷型三萜皂苷類化合物的制備與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及通過植物化學(xué)提取分離手段從五加科惚木屬植物遼東楹木(Araliaelata Seem.)抗心肌缺血有效部位分離得到I個新達(dá)瑪燒型三職阜苷，在該有效部位抗心肌缺血活性、新化合物的結(jié)構(gòu)、制備方法及其在制備心血管治療藥物中的應(yīng)用等方面申請專利保護(hù)。
【背景技術(shù)】:
[0002]龍牙惚木(Aralia elata (Miq) Seem)，又名遼東惚木，系五加科惚木屬植物，其性味辛苦，有小毒，藥用部位主要是根皮、樹皮及葉。具有補(bǔ)氣安神、活血化瘀、強(qiáng)精滋腎、健胃利水、利尿消腫、除濕止痛的功效。主要分布在我國東J匕地區(qū)包括黑龍江東北部、南部，吉林中部以東和遼寧東北部等，蘊(yùn)藏量極為豐富，僅延邊地區(qū)就可達(dá)3000噸，除此之外，還有
大量人工栽培。
[0003]我龍牙惚術(shù)的主要有效成分為皂苷類化合物，其含量很高，可達(dá)8%。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，三萜皂苷是遼東惚木抗心肌缺血的主要活性成分。而本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)，通過現(xiàn)代色譜技術(shù)分離制備了遼東惚木皂苷，通過研究發(fā)現(xiàn)了遼東惚木皂苷治療冠心病、心絞痛的新用途，目前以龍牙惚木總皂苷為成分研制的楹木心脈通膠囊已獲得藥物臨床研究批件(批件2003L01111)，并已完成臨床觀察。臨床研究表明龍牙楹木總皂苷在抗心肌缺血及臨床用于氣虛血瘀所致冠心病心絞痛時單獨使用，可明顯改善患者的心電圖，緩解冠心病、心絞痛的癥狀，且服用時間與療效成正比相關(guān)，作用效果明顯強(qiáng)于陽性藥地奧心血康膠囊和諾迪康膠囊。因此，遼東惚木在治療和/或預(yù)防心血管疾病方面具有良好的研究開發(fā)前景。
[0004]本發(fā)明所涉及的是從遼東橡木總皂苷中得到的I個新達(dá)瑪烷型三萜皂苷及其在心肌保護(hù)方面的應(yīng)用。`
[0005]本發(fā)明的有益效果和意義在于:充分利用遼東惚木藥用植物資源，深入研究開發(fā)，尋找具有獨特化學(xué)結(jié)構(gòu)，以期發(fā)現(xiàn)可用于臨床的抗心肌缺血藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本實驗室利用現(xiàn)代分離技術(shù)和結(jié)構(gòu)測定手段對五加科惚木屬植物遼東惚木總皂苷進(jìn)行化學(xué)成分研究過程中，從中分離得到I個新達(dá)瑪烷型三萜皂苷。通過對該化合物進(jìn)行體外抗心肌缺血的藥效學(xué)研究試驗，發(fā)現(xiàn)其具有明顯的抗心肌缺血活性。迄今為止，以上研究成果尚未有專利或文獻(xiàn)報道。
[0007]本發(fā)明還提供制備這個新化合物的方法。
[0008]本發(fā)明的技術(shù)方案據(jù)此包含以下步驟:
[0009]遼東惚木藥材用70%乙醇回流提取3次，過濾，濾液經(jīng)減壓濃縮除去乙醇得到提取液。提取液經(jīng)大孔吸附樹脂柱，先用水洗，再用20%乙醇洗脫，繼續(xù)用80%乙醇洗脫，回收乙醇，減壓干燥(80°C )，得到干浸膏，干浸膏加70 %乙醇溶解，濾過，濾液經(jīng)回收溶劑后減壓干燥，粉碎，制得總皂苷。檍木總皂苷利用硅膠柱色譜進(jìn)行粗分離，以氯仿一甲醇一水不同比例的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，其中氯仿:甲醇:水(8:2:0.2)洗脫所得流分經(jīng)反相ODS柱色譜分離，甲醇-水(60%)洗脫，回收溶劑，經(jīng)反相高壓制備液相色譜以乙腈:水(34:66)制備，得到化合物I(Smg)。其核磁共振氫譜和碳譜數(shù)據(jù)見表1，化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1。
[0010]表1 化合物 I 的 1H-NMlUeOOMHz)和 13C-NMR (150MHz)數(shù)據(jù) *
[0011]
【權(quán)利要求】
1.具有下式結(jié)構(gòu)的達(dá)瑪烷型三萜皂苷類化合物:
2.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，包括下述步驟: (1)醇-水系統(tǒng)提取遼東樽木藥材； (2)濃縮提取液，得到浸膏； (3)將步驟(2)中所得的浸膏溶解于水中，經(jīng)大孔吸附樹脂柱色譜分離； 用蒸餾水先脫至無色，然后用乙醇和水體積比為1:9的溶劑洗脫至無色，然后用乙醇和水體積比為8:2的溶劑洗脫，洗脫液濃縮得到洗脫物。 (4)將步驟(3)中的洗脫物上樣至硅膠色譜柱上，用氯仿:甲醇:水體積比為4:1;0.1的混合溶劑洗脫，對所得的流份進(jìn)行濃縮，得到濃縮物。 (5)將步驟(4)中使用氯仿:甲醇:水體積比為4:1:0.1的混合溶劑洗脫下來的流份上樣至凝膠柱，用甲醇洗脫，按照色帶收集流份，得到細(xì)流份； (6)將步驟(5)中使用甲醇洗脫下來的流份上樣至高效液相色譜，用水:甲醇的體積比為1:1的混合溶劑進(jìn)行洗脫，收集在液相色譜保留時間為22.0min的流份，濃縮得到該化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，藥材提取醇水系統(tǒng)中的醇包括乙醇、甲醇，其中醇的體積是水的2~4倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，還包括使用薄層色譜和/或高效液相色譜檢驗所得的各化合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述步驟(4)中所述的硅膠色譜柱為粒徑50-74μπι的硅膠色譜柱；和/或其中所述步驟(4)中所述的硅膠色譜柱為粒徑10-40gm的硅膠色譜柱。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述步驟(7)中所述的凝膠色譜柱為S印hadexLH-20柱。
7.一種用于治療心肌缺血的組合物,含有至少一種權(quán)利要求1的化合物。
8.權(quán)利要求1的化合物用于制備治療心肌缺血的藥物的用途。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，其中所述心肌缺血為缺血性心肌病、心肌梗塞造成的心肌損傷。
【文檔編號】A61P9/10GK103804455SQ201210458420
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月15日
【發(fā)明者】許旭東, 田瑜, 孫曉波, 孫桂波, 張家鑫 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所