專利名稱：苦味西葫蘆提取物在制備抗痛風(fēng)藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及苦味西葫蘆提取物在醫(yī)學(xué)中的新用途，尤其是涉及苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物在制備抗痛風(fēng)藥物中的新用途。
背景技術(shù)：
在人體內(nèi)有一種叫嘌呤的物質(zhì)，當(dāng)它的代謝發(fā)生紊亂后就會引起痛風(fēng)。嘌呤經(jīng)過一系列代謝變化，最終形成的產(chǎn)物叫尿酸。尿酸在人體里沒有什么生理功能，在正常情況下，體內(nèi)產(chǎn)生的尿酸2 / 3由腎臟排出 ，I / 3由大腸排出。體內(nèi)的尿酸是在不斷地生成和排泄，因此它在血液中維持一定的濃度。在嘌呤的合成與分解過程中，有多種酶的參與，由于酶的先天性異常代謝發(fā)生紊亂，使尿酸的全成增加或排出減少，均可引起高尿酸血癥。當(dāng)血尿酸濃度過高時，尿酸即以鈉鹽的形式沉積在關(guān)節(jié)、軟組織、軟骨和腎臟中，引起組織的異物炎癥反應(yīng)成了引起痛風(fēng)的禍根。如治療不徹底可致關(guān)節(jié)腫大、畸形、僵硬、關(guān)節(jié)周圍瘀斑、結(jié)節(jié)、并發(fā)痛風(fēng)性腎結(jié)石、痛風(fēng)性腎功能衰竭,痛風(fēng)性冠心病、高血脂、高血壓、泌尿系統(tǒng)結(jié)石等臟腑病癥威脅患者的生命直致生命的終止。流行病學(xué)調(diào)查顯示，痛風(fēng)患病率與日俱增。中國疾病預(yù)防控制中心最新報告顯示，我國人民隨著生活水平的提高和生活節(jié)奏的加快，痛風(fēng)的發(fā)病率高于世界平均水平，全國痛風(fēng)患者超過七千萬人，全球痛風(fēng)病患者高達(dá)I. 3 億?？雇达L(fēng)藥目前品種不多，臨床治療主要以秋水仙堿、非留體類抗炎藥、激素、促進(jìn)尿酸排泄藥(如丙磺舒、磺吡酮及苯溴馬隆)和抑制尿酸合成藥(如別嘌呤醇)為主。急性發(fā)病期主要應(yīng)用飲水仙堿、非留體類抗炎藥、激素，緩解期主要應(yīng)用促進(jìn)尿酸排泄藥、抑制尿酸合成藥。這些藥物在治療上都有缺陷。療效差、副作用大成為其臨床應(yīng)用的瓶頸，而且不能長期使用。現(xiàn)在市場上也常見一些中成藥制劑來治療痛鳳，然而由于藥效低，很難從根本上冶愈通風(fēng)性疾病。所以目前急需研制和開發(fā)選擇性強(qiáng)，無副作用，高效并且不會使通風(fēng)在停藥后產(chǎn)生反彈的全新抗通風(fēng)新藥?？辔段骱J(Cucurbita pepo cv Dayangua),別名大煙瓜，是葫蘆科南瓜屬西葫蘆的一個變種，主要分布于內(nèi)蒙古多倫地區(qū)。其果實(shí)味苦，當(dāng)?shù)孛耖g常用于治療感冒，還有鎮(zhèn)痛、止瀉等功效。當(dāng)?shù)孬F醫(yī)還用其治療羊、豬等的發(fā)熱感冒和羊的痢疾，對家禽的常見傳染性疾病如雞的瘟疫性疾病、傳染性法氏囊炎、傳染性支氣管炎等有很好的療效。現(xiàn)代藥理實(shí)驗研究表明苦味西葫蘆提取物具有抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)離體十二指腸興奮性和消炎解熱等方面作用，在學(xué)術(shù)期刊《動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2004年第25卷第5期的《苦味西葫蘆粗提物抗炎作用的實(shí)驗研究》(作者張艷萍，鄧旭明，祝萬菊，王學(xué)林)、《中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志》2004年第23卷第6期的《苦味西葫蘆抗炎作用機(jī)理的初步研究》(作者張艷萍，鄧旭明，陳志寶)和《臨床醫(yī)藥實(shí)踐》(下半月刊)2009年第18卷第6期的《苦味西葫蘆水提物鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗研究》(作者高立新)均有相關(guān)的記載。從苦味西葫蘆果實(shí)中分離得到的化合物分別為甲級鼠李素的3-蕓香糖苷、異鼠李素的 3_ 蕓香糖式 _4’_ 鼠李糖苷、Kaemp ferol-3-0-neohesp-eridoside>Larisiresinal4，-0_β -D-glucopyranoside、(+)-5，-Methoxy-isolarisiresinol3 α _0_β -D-glucopyranoside>Lyoniside>Isolariciresino1-9-0-β —D_Xylopyranoside、0ct_l_en_3_ylβ —D—arabinopyranosyl-(I — 6)-β -D-Glucopyranoside、葫蘆素E-2-0-葡萄糖苷、山奈酌'-3-0-新橙皮糖苷、乙酸蛇麻脂醇酯、β -香樹脂醇乙酸酯、isomultiflorenol、isomultiflorenone、(+) -Isolarisiresinol 3 α -O- β -D-glucopyranoside>2-0- β -D-葫蘆素 E 葡萄糖苷、D-果糖、硬脂酸三十二烷醇酯、三十三烷、β_谷留醇、豆留醇、胡蘿卜甙、胡蘿卜苷、腦甙、13 (18)-齊墩果烯-3-醇；葫蘆苷A和葫蘆酯。以上所述的關(guān)于從苦味西葫蘆果實(shí)中分離得到的化合物成分的內(nèi)容，在《中國藥學(xué)雜志》2002年第37卷第9期的《苦味西葫蘆化學(xué)成分的研究》(作者丁艷麗，鄧旭明，蔡輝，王芳生，王學(xué)林，張聿梅，楊峻山)和《沈陽藥科大學(xué)學(xué)報》2006年第23卷第I期的《苦味西葫蘆果實(shí)的三萜類化學(xué)成分》(作者葛杉，王大成，向華，祝萬菊，鄧旭明，吳立軍)均有相關(guān)的記載。中國發(fā)明專利公開CN102552370A公開了兩種廣譜抗腫瘤藥物，該藥物以苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物作為有效成分。該發(fā)明成功地將苦味西葫蘆水提取物或醇提取物應(yīng)用于制備抗腫瘤藥物，能廣泛抑制多種類型的人腫瘤細(xì)胞系成長，并進(jìn)一步
誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。在人腫瘤異種移植模型研究中，苦味西葫蘆提取物被證明是一種有效的抗腫瘤劑，能強(qiáng)烈抑制人肝癌、前列腺癌、肺癌等多種癌細(xì)胞以及髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞在體內(nèi)生長。然而，該發(fā)明專利并沒有發(fā)現(xiàn)苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物能夠用于制備抗痛風(fēng)藥物。因此，在現(xiàn)有技術(shù)水平上，苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物仍然具有巨大的開發(fā)潛能。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供苦味西葫蘆提取物在制備抗痛風(fēng)藥物中的新用途。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)苦味西葫蘆提取物在制備抗痛風(fēng)藥物中的用途，所述苦味西葫蘆提取物為苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物。其中，所述抗痛風(fēng)藥物含有有效量的苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物及可藥用載體和/或賦形劑。進(jìn)一步地，所述可藥用載體和/或賦形劑為羧甲基纖維素鈉。優(yōu)選地，所述抗痛風(fēng)藥物是含苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物的口服制劑。優(yōu)選地，所述抗痛風(fēng)藥物是含苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物的注射制劑。所述苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物通過以下制備步驟制備得到( I)取半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加入水煮制，制得糊狀物；(2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得原藥干；(3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存；(4)取原藥粉末，溶解在蒸餾水中，搖動萃取，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到苦味西葫蘆水提物；取原藥粉末，加入乙醇，搖動萃取，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到苦味西葫蘆醇提取物。進(jìn)一步地，所述苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物通過以下制備步驟制備得到(I)取100千克半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加25千克的水，煮制4個小時，制得糊狀物；(2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得3. 4千克原藥干；(3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存；(4)取100克原藥粉末，溶解在1000毫升的蒸餾水中，搖動萃取8個小時，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到11克苦味西葫蘆水提物；取100克原藥粉末，加1000毫升的95%的乙醇，搖動萃取8個小時，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn) 行濃縮干燥，得到10克苦味西葫蘆乙醇提取物。將上述制備步驟得到的苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物分別溶解在O. 5%羧甲基纖維素鈉溶液中制備成不同濃度的抗痛風(fēng)藥口服制劑，通過對8周齡的BALB/c小鼠進(jìn)行給藥觀察和病理分析，結(jié)果顯示，苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物能夠有效降低嗪酸鉀誘導(dǎo)的高尿酸小鼠血清尿酸水平，緩解氧嗪酸鉀誘導(dǎo)小鼠的關(guān)節(jié)腫大程度和改善這些小鼠的行動能力。本發(fā)明的有益效果是苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物能夠有效降低尿酸水平，緩解關(guān)節(jié)腫大程度和改善行動能力，具有抗痛風(fēng)的功效，無副作用，高效并且不會使通風(fēng)在停藥后產(chǎn)生反彈。因此，苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物可用于制備治療痛風(fēng)的藥物，進(jìn)一步地開發(fā)了苦味西葫蘆的巨大應(yīng)用潛能。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明不限于以下實(shí)施例。實(shí)施例I苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆乙醇提取物的制備。具體地，所述苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物通過以下制備步驟制備得到(I)取100千克半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加25千克的水，煮制4個小時，制得糊狀物；(2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得3. 4千克原藥干；(3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存；(4)取100克原藥粉末，溶解在1000毫升的蒸餾水中，搖動萃取8個小時，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到11克苦味西葫蘆水提物；取100克原藥粉末，加1000毫升的95%的乙醇，搖動萃取8個小時，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到10克苦味西葫蘆乙醇提取物。實(shí)施例2苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物對小鼠的急性毒性分析。
取實(shí)施例I制備的苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物分別溶解在O. 5%羧甲基纖維素鈉溶液中制備成不同濃度(苦味西葫蘆水提取物濃度為500mg/mL和IOOmg/mL ;苦味西葫蘆醇提取物濃度為500mg/mL和100mg/mL)的口服液，對小鼠進(jìn)行口服給藥實(shí)驗。取兩組8周齡的BALB/c小鼠(美國Charles river公司),每組10只(5只雄性和5只雌性)，分別以單次劑量5g/kg和多次劑量lg/kg (QD X15)給予苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物，然后分別觀察I周和4周。每兩天稱體重。試驗結(jié)束后，將受試小鼠處死，進(jìn)行病理分析。實(shí)驗結(jié)果顯示，以單次劑量5g/Kg和多次劑量lg/kg (QDX15)給予苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物，均未觀察到毒性，所有受試小鼠生長良好，無一死亡?？辔段骱J水提取物或苦味西葫蘆醇提取物一般口服推薦劑量為每天Ig/體表面積(m2)，連續(xù)三周，休息一周為一療程?？辔段骱J水提取物和苦味西葫蘆醇提取物每天總劑量一次于早餐后半小時口服，具體病例可由醫(yī)師根據(jù)病情調(diào)整。實(shí)施例3苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物對降低氧嗪酸鉀誘導(dǎo)的高尿酸小鼠血清尿酸水平的研究。取實(shí)施例I制備的苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物分別溶解在O. 5%羧甲基纖維素鈉溶液中制備成濃度為5mg/mL和2. 5mg/mL的口服液,對小鼠進(jìn)行口服給藥
實(shí)驗。 取5組8周齡的BALB/c小鼠，每組10只雌性BALB/c小鼠，4組受試小鼠分別給25mg/kg和50mg/kg苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物口服液，對照組按同樣方法給予安慰劑(O. 5%羧甲基纖維素鈉溶液)。小鼠單獨(dú)飼養(yǎng)，允許自由采食。在最后一次喂藥前一小時給BALB/c小鼠腹腔注射280毫克/I公斤體重的氧嗪酸鉀制造高尿酸血癥模型。造模一小時后分別試驗喂藥給造模后的小鼠，在最后一次給藥4個小時后，采用眼眶取血制備血清樣品檢測其血清中尿酸的含量。對血液樣品中尿酸含量的測定是根據(jù)尿酸測定試劑盒制造廠家(美國加洲BioAssay公司)所提供的方法進(jìn)行的。實(shí)驗結(jié)果請參見表I。實(shí)驗結(jié)果顯示苦味西葫蘆水提取物和苦味西葫蘆醇提取物都能有效地降低嗪酸鉀誘導(dǎo)的高尿酸小鼠血清尿酸水平，而且顯現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系。這一結(jié)果暗示苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物是一種很有前景的試驗性抗痛風(fēng)新藥臨床侯選者，值得進(jìn)一步開發(fā)。表I.苦味西葫蘆水提物和醇提物口服液對降低氧嗪酸鉀誘導(dǎo)的高尿酸小血清尿酸水平的作用。
權(quán)利要求
1.苦味西葫蘆提取物在制備抗痛風(fēng)藥物中的用途，所述苦味西葫蘆提取物為苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述抗痛風(fēng)藥物含有有效量的苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物及可藥用載體和/或賦形劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述可藥用載體和/或賦形劑為羧甲基纖維素鈉。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述抗痛風(fēng)藥物是含苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物的口服制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述抗痛風(fēng)藥物是含苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物的注射制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫蘆水提取物通過以下制備步驟制備得到 (1)取半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加入水煮制，制得糊狀物； (2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得原藥干； (3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存； (4)取原藥粉末，溶解在蒸餾水中，搖動萃取，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到苦味西葫蘆水提物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫蘆水提取物通過以下制備步驟制備得到 (1)取100千克半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加25千克的水，煮制4個小時，制得糊狀物； (2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得3.4千克原藥干； (3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存； (4)取100克原藥粉末，溶解在1000毫升的蒸餾水中，搖動萃取8個小時，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到11克苦味西葫蘆水提物。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫蘆醇提取物通過以下制備步驟制備得到 (1)取半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加入水煮制，制得糊狀物； (2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得原藥干； (3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存； (4)取原藥粉末，加入乙醇，搖動萃取，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到苦味西葫蘆醇提取物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫蘆醇提取物通過以下制備步驟制備得到 (1)取100千克半成熟的苦味西葫蘆瓜果，去皮，然后將果肉切成小塊，加25千克的水，煮制4個小時，制得糊狀物； (2)將所述糊狀物撈出，曬干，制得3.4千克原藥干；(3)將原藥干粉碎為原藥粉末，在室溫下保存； (4)取100克原藥粉末，加1000毫 升的95%的乙醇，搖動萃取8個小時，然后進(jìn)行離心、過濾，得到上清液，再進(jìn)行濃縮干燥，得到10克苦味西葫蘆乙醇提取物。
全文摘要
本發(fā)明涉及苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物在醫(yī)學(xué)中的新用途，尤其是涉及苦味西葫蘆水提取物或苦味西葫蘆醇提取物在制備抗痛風(fēng)藥物中的新用途。本發(fā)明的研究發(fā)現(xiàn)苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物能夠有效降低尿酸水平，緩解關(guān)節(jié)腫大程度和改善行動能力，具有抗痛風(fēng)的功效，無副作用，高效并且不會使通風(fēng)在停藥后產(chǎn)生反彈。因此，苦味西葫蘆水提取物或者苦味西葫蘆醇提取物可用于制備治療痛風(fēng)的藥物，進(jìn)一步地開發(fā)了苦味西葫蘆的巨大應(yīng)用潛能。
文檔編號A61P19/06GK102949434SQ20121049954
公開日2013年3月6日 申請日期2012年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月29日
發(fā)明者鐘榮, 張南, 簡志光, 傅建平 申請人:鐘榮, 張南, 簡志光, 傅建平