專利名稱：一種卡佩他濱藥物載體及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于化學合成技術領域，特別涉及一種卡佩他濱藥物載體及其制備方法。
背景技術：
卡佩他濱(商品名希羅達)是一種對腫瘤細胞具有選擇性作用的口服細胞毒性制齊U，是由瑞士羅氏公司研制的一種新型5-氟尿嘧啶(5-FU)的前體藥物。作為前體藥物，卡佩他濱本身無活性，對腫瘤組織有靶向性，且代謝生成活性物質較其他組織及血漿濃度高，可口服給藥，是一種安全、有效、經(jīng)濟、適應性強的抗腫瘤藥。由于卡佩他濱的藥物用途廣以及較好的療效，其臨床用途及研究近年來成為熱點。其中研究最廣泛的是以卡佩他濱作為單一藥物或者協(xié)同其他藥物如紫杉醇、阿霉素等用于治療原發(fā)性或轉移性乳腺癌或者轉移性結腸直腸癌。單一的抗腫瘤藥物是通過從患者血液濃度分布于全身而產(chǎn)生治療作用。這種體內藥物行為缺乏選擇性，而且因為抗腫瘤藥物多數(shù)為疏水性小分子化合物，藥物在體內的溶解度較低、分散性高，因此臨床中抗腫瘤化學藥物的有效利用率低于30%，不僅造成藥物浪費，而且大劑量的化療藥物對患者正常體細胞的傷害較大。5-FU作為卡佩他濱三步代謝的產(chǎn)物之一，其對腫瘤細胞的作用更為直接，是抗腫瘤藥物的重要選擇。但是由于激活5-FU的酶不具選擇性，故對正常細胞有較大損害。盧寧寧等人對卡佩他濱單獨或聯(lián)合其他藥物對腫瘤患者進行了治療，癌癥治療效果雖然得到穩(wěn)定和客觀緩解，但用藥頻繁，過程持續(xù)時間長，而且不可避免的出現(xiàn)一些腹瀉、中性粒細胞減少及惡心嘔吐等不良反應。因此，要發(fā)揮卡佩他濱在腫瘤治療上的作用，需要對卡佩他濱進行一些靶向功能的改性。

發(fā)明內容
本發(fā)明的首要目的在于克服 現(xiàn)有技術的缺點與不足，提供一種卡佩他濱藥物載體的制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供由上述制備方法得到的卡佩他濱藥物載體。本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，包括如下步驟(I)將聚乙二醇(PEG)與丁二酸酐(Succinic anhydride)按摩爾量1:2 3于室溫下反應8 12小時，得到混合反應液，將混合反應液進行純化處理，得到端羧基聚乙二醇(H0-PEG-C00H)；(2)將步驟(I)得到的端羧基聚乙二醇活化后加入等物質的量的帶有羥基末端的聚合物進行酯化反應，反應在室溫下進行12 24小時，將得到的混合液純化處理，得到兩嵌段化合物；(3)將步驟(2)得到的兩嵌段化合物活化后，按摩爾比1:1. 2 1. 5加入卡佩他濱，于室溫反應48 72小時，得到反應液，將反應液純化處理，得到卡佩他濱藥物載體。步驟(I)中
所述的聚乙二醇的分子量優(yōu)選為2000 IOOOODa ；所述的反應優(yōu)選采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDOHCl)作為縮合劑劑、4-二甲氨基吡啶(DMAP)作為催化劑以及三乙胺(TEA)作為pH調節(jié)劑；所述的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與聚乙二醇的物質的量的比為1. 2 1. 5 :1，4-二甲氨基吡啶與聚乙二醇的物質的量的比為I 1. 2 :1，4_二甲氨基吡啶與三乙胺物質的量的比為1:0.1 0. 5 ;所述的反應優(yōu)選在三氯甲烷溶劑中進行；所述的聚乙二醇在三氯甲烷中的濃度為0. 25 0. 5g/mL ；所述的純化處理優(yōu)選采用以下方法進行將混合反應液于50 55°C蒸干溶劑，冷卻至室溫，取殘留固體用30 50mL飽和NaHC03溶解后抽濾，取濾液，用氯仿萃取2 3次，取水相用0.1 0. 2mol/L鹽酸調節(jié)pH至2 4后用氯仿萃取2 3次,合并有機相,加無水Na2S04干燥后過濾，取濾液于50 55°C濃縮至3 5mL，冷卻至室溫，加20 30倍濃縮液體積的無水乙醚結晶，放入_4°C冰箱冷藏24h后過濾，取濾渣于25 30°C真空干燥8 12小時，得到端羧基聚乙二醇；步驟(2)中

所述的活化優(yōu)選采用以下方法進行將端羧基聚乙二醇溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的物質的量為端羧基聚乙二醇的1. 2 1. 5倍；所述的羥基聚合物優(yōu)選為聚(乳酸-羥基乙酸)、聚乳酸、殼聚糖或聚己內酯；所述的酯化反應優(yōu)選在4- 二甲氨基吡啶和三乙胺中進行，4- 二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質的量的比為I 1. 2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質的量的比為
0.1 0. 5 :1 ;所述的純化處理優(yōu)選采用以下方法進行將混合液于冰無水乙醚中結晶，冰無水乙醚體積為混合液體積的2 5倍，過濾，再次溶解于二氯乙烷，然后于冰無水乙醚中沉淀，過濾，取結晶固體，于25 30°C真空干燥8 12小時，得到兩嵌段化合物；步驟(3)中所述的活化優(yōu)選采用以下方法進行將兩嵌段化合物溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL,加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與兩嵌段化合物的物質的量的比為1. 2 1. 5 :1 ;所述的反應優(yōu)選在4-二甲氨基吡啶和三乙胺中進行，4-二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質的量的比為I 1. 2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質的量的比為
0.1 0. 5 :1 ;所述的純化處理優(yōu)選采用以下方法進行將反應液用2 5倍體積的冰無水乙醚沉淀，過濾，取濾出物，再次溶解于二氯乙烷，然后于冰無水乙醚中沉淀，過濾，最后所得濾出物于25 30°C真空干燥8 12小時，得到高分子鍵合卡佩他濱藥物載體；所述的步驟(I)、步驟(2)和步驟(3)均在氮氣氛圍中進行；所述的卡佩他濱藥物載體，由上述方法制備得到；
本發(fā)明的發(fā)明機理本發(fā)明基于酯化反應的基礎上，將卡佩他濱與生物相容性好的高分子相連接?？ㄅ逅麨I分子中含有兩個活性羥基，其中一羧基的位阻較另一個小，為主要反應位點。該羥基在催化作用下能與高分子化合物活化的的羧基進行酯化反應。反應體系中采用的縮合劑1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽，其具有高效脫水縮合、促進酯化反應的效果，催化劑4-二甲氨基吡啶以及三乙胺都能加速酯化反應的進行。其副產(chǎn)物可以用水洗。本發(fā)明的第一步端羧基化聚乙二醇的反應是基于聚乙二醇在與酸酐在催化劑作用下，會先生成一端羧基化產(chǎn)物，然后另一端羥基發(fā)生酯化反應；而且溫度低，傾向于生成一端羧基化產(chǎn)物；而溫度高時則會生成兩端羧基化產(chǎn)物。本發(fā)明正是通過控制反應條件和反應時間，得到最高產(chǎn)率的一端羧基化聚乙二醇的產(chǎn)物。本發(fā)明的機理反應方程式如下
權利要求
1.一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于包括如下步驟 (1)將聚乙二醇與丁二酸酐按摩爾比1:2 3于室溫下反應8 12小時，得到混合反應液，將混合反應液進行純化處理，得到端羧基聚乙二醇； (2)將步驟(I)得到的端羧基聚乙二醇活化后加入等物質的量的帶有羥基末端的聚合物于室溫反應12 24小時，得到混合液；將混合液純化處理，得到兩嵌段化合物； (3)將步驟(2)得到的兩嵌段化合物活化后，按摩爾比1:1. 2 1. 5加入卡佩他濱，于室溫反應48 72小時，得到反應液，將反應液純化處理，得到卡佩他濱藥物載體。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的聚乙二醇的分子量為2000 lOOOODa。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的反應采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽作為縮合劑劑、4-二甲氨基吡啶作為催化劑以及三乙胺作為PH調節(jié)劑； 所述的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與聚乙二醇的物質的量的比為1. 2 1. 5 :1，4-二甲氨基吡啶與聚乙二醇的物質的量的比為I 1. 2 :1，4-二甲氨基吡啶與三乙胺物質的量的比為1:0.1 0. 5。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的反應在三氯甲烷溶劑中進行，所述的聚乙二醇在三氯甲烷中的濃度為0. 25 0. 5g/mLo
5.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的純化處理采用以下方法進行將混合反應液于50 55°C蒸干溶劑，冷卻至室溫，取殘留固體用30 50mL飽和NaHCO3溶解后抽濾，取濾液，用氯仿萃取2 3次，取水相用0.1 0. 2mol/L鹽酸調節(jié)pH至2 4后用氯仿萃取2 3次,合并有機相,加無水Na2SO4干燥后過濾，取濾液于50 55°C濃縮至3 5mL,冷卻至室溫,加20 30倍濃縮液體積的無水乙醚結晶，放入_4°C冰箱冷藏24h后過濾，取濾渣于25 30°C真空干燥8 12小時，得到端羧基聚乙二醇。
6.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述的活化采用以下方法進行將端羧基聚乙二醇溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL,加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與端羧基聚乙二醇的物質的量的比為1. 2 1.5 :1。
7.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述的羥基聚合物為聚(乳酸-羥基乙酸)、聚乳酸、殼聚糖或聚己內酯；所述的酯化反應在4- 二甲氨基吡啶和三乙胺中進行，4- 二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質的量的比為I 1.2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質的量的比為0.1 0.5 :1。
8.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述的活化采用以下方法進行將兩嵌段化合物溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL,加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與兩嵌段化合物的物質的量的比為1. 2 1. 5 :1。
9.根據(jù)權利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述的反應在添加4-二甲氨基吡啶和三乙胺的體系中進行，4-二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質的量的比為I 1. 2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質的量的比為0.1 .0.5 :1o
10.一種卡佩他濱藥物載體，由權利要求1 9任一項所述的方法制備得到。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種卡佩他濱藥物載體及其制備方法。本發(fā)明將卡佩他濱與生物相容性好的高分子相連接，卡佩他濱分子中的胞苷結構中存在兩個羥基官能團，其中一個羥基官能團因為位阻較小而顯示一定活性，在堿性條件下，通過催化劑催化其與活化了的羧基化合物發(fā)生酯化反應，在與雙親性化合物化學鍵接后，形成一端疏水和一端親水的雙親性化合物；該化合物可用于制備載藥微球或者載藥納米粒。當連接有藥物的高分子化合物另一端連接有腫瘤靶向功能的單抗、葉酸、轉鐵蛋白等，可引導藥物向腫瘤部位集中，減少藥物的突釋，也能在藥物釋放后期補充釋藥，使得藥物釋放能長時間保持在適中的水平。
文檔編號A61K31/7068GK103055323SQ201210560598
公開日2013年4月24日 申請日期2012年12月20日 優(yōu)先權日2012年12月20日
發(fā)明者魏坤, 彭小敏 申請人:華南理工大學