專利名稱：龍眼核多酚的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種龍眼的加工方法，尤其是涉及龍眼加工行業(yè)廢料龍眼核中提取龍眼核多酚的エ藝方法。
背景技術(shù)：
我國2010年的龍眼產(chǎn)量為131. 2萬U2010年我國主要水果產(chǎn)量分省(區(qū)，市)分布情況。中國果業(yè)信息，2012，(12) : 56)，而與上世紀(jì)90年代的高價(最高價為12 14元/公斤)相比，卻一直保持著低迷狀態(tài)(平均收購價格O. 8 2元/公斤)，這之間的巨大反差，是許多果農(nóng)無法接受的，再加上年年虧本，果農(nóng)種植龍眼的積極性受到嚴(yán)重挫傷(陳恩海.2009年漳州熱區(qū)典型南亞熱帶水果生產(chǎn)情況及2010年生產(chǎn)形勢預(yù)測.中國熱帶農(nóng)業(yè)，2010，(01):39-40)。因此如何提高龍眼產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟效益，促進龍眼產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，是當(dāng)前國內(nèi)龍眼產(chǎn)業(yè)函待解決的問題。由于龍眼鮮果不易存放，貨架期短，再加上保鮮技術(shù)還不成熟，約有1/3的龍眼鮮果是通過各種方式深加工后出售。而在龍眼果的深加工過程中，作為加工廢棄物的龍眼核目前的利用率幾乎為零。龍眼核系龍眼的種仁，重量約占龍眼果實鮮重的17%，由于沒有進行綜合利用，大量廢棄的龍眼核不僅造成環(huán)境的污染，同時也造成資源的白白浪費(李升鋒，肖更生，陳衛(wèi)東，等.龍眼果實資源研究與開發(fā)利用.四川食品與發(fā)，2004，40 (4) : 35-39)。龍眼核含有豐富的淀粉、還原糖、粗纖維、蛋白質(zhì)、果膠、多酚等天然產(chǎn)物，同時還含有多種礦物元素、維生素以及人體必須氨基酸等營養(yǎng)素。其中淀粉含量為60. 88%，還原糖含量為9. 67%，粗纖維含量為6. 85%，蛋白質(zhì)含量為5. 58%，果膠含量為5. 19%，多酚含量為4. 72%，脂肪含量為3. 23%(劉釋文.龍眼核綜合利用的基礎(chǔ)研究.福建農(nóng)林大學(xué)，2007)。而其中的多酚又被稱為“第七類營養(yǎng)素”，大量實驗研究結(jié)果表明，植物多酚具有抗氧化性、抗癌、抗衰老、抑菌等作用，適量攝取植物多酚能有預(yù)防和抑制疾病發(fā)生的作用(宋立江，狄瑩，石碧.植物多酚研究與利用的意義及發(fā)展趨勢.化學(xué)進展，2000，12 (2): 161-169)。過剩的自由基會引發(fā)癌癥、中風(fēng)、冠心病等疾病，而植物多酚能夠有效清除人體內(nèi)過剩的自由基，且其清除能力強于 VE(Yogesh Baravalia, Mital Kaneria, Yogeshkumar Vaghasiya, et.al. Antioxidant and antibacteriaiactivity ofdiospyros ebenum Roxb. Leaf ExtractsTurk J Biol, 2009, (33) : 159-164)。同時多酚具有增強人體的免疫功能、防止貧血、降低血液粘度、預(yù)防血栓等效果(趙揚帆，鄭寶東.植物多酚類物質(zhì)及其功能學(xué)研究進展.福建輕紡，2006，(11):107-109.)。國外研究從龍眼核的丙酮提取物中利用柱色譜法分離出こ酰甲基-老鸛草素(acetonylgeraniin),該化合物屬于水解類多酹(HsuF L, Lu F H, Cheng Ji. Influence οι acetonylgerannn, a hydrolysable tannin from Euphorialongana, onorthostatic hypotension in a rat model. Planta Medica, 1994，60:297 - 300. X 隨府又利用高效液相色譜-電噴霧-質(zhì)譜(HPLC-ESI-MS)技術(shù)對龍眼核50%こ醇提取物中酚類化合物的結(jié)構(gòu)進行了分析。發(fā)現(xiàn)其中含有沒食子酸(gallic acid, GA)、鞋花酸(ellagicacid, EA)、單沒食子酰基葡萄糖(monogalloyl-glucose)、單沒食子酰基ニ葡萄糖式(!1101108311071-(1丨8111(3086)、二倍沒食子酰基二葡萄糖式((1丨8311071-(1丨8111(3086)、五倍至七倍沒食子酰基葡萄糖(penta-toheptagalloyl-glucose)、鞋花酸-戍糖共軛物(ellagicacid-pentose conjugate)、沒食子酰基-六元聯(lián)苯-卩比喃葡萄糖(galloyl-HHDP (Hexahydroxydiphenoyl) -glucopyranose)、六倍沒食子酰基-六元聯(lián)苯-卩比喃葡萄糖(pentagalloy-HHDP-glucopyranose)、原花青素 A 類ニ聚物(procyanidin A-type dimmer)、原花青素 B2 (procyanidin B2)和懈皮素-3-0-鼠李糖苷(quercetin-3-O-rhamnoside)等多種酹類化合物，這些化合物大部分屬于水解類多酹(SoongY Y, Barlow P J. Quantificationof gallic acid and ellagic acid from longan seed and mango kerneland theireffects on antioxidant activity. Food Chemistry,2006, 97:524 - 530;Soong Y Y,Barlow P J. Isolation and structure elucidation of phenolic compounds fromlongan seed by mgh-performanceliquid c hromatography - electrospray ionizationmass spectrometry. Journal of ChromatographyA, 2005, 1085:270-277) 國內(nèi)主要針對對龍眼核多酚的提取エ藝，以及產(chǎn)品的活性進行了進ー步的研究，其中對龍眼核多酚的こ醇提取エ藝和超聲輔助提取エ藝進行了優(yōu)化，得到こ醇提取法的最佳エ藝條件是提取時間106min，こ醇濃度58%，提取溫度64°C，液料比9:1，在此條件下龍眼核粗多酚提取量為42. 690mg/g ;超聲輔助提取法的最佳エ藝條件是提取溫度69°C，提取時間52min，超聲功率162W，在此條件下龍眼核粗多酚提取量為42. 209mg/g。并采用DM21大孔吸附樹脂純化龍眼核多酚，確定了最佳柱層析條件為pH值4. 2，上樣濃度lmg/mL，上樣流速5BV/h，洗脫劑70%こ醇，洗脫流速I. 5BV/h。在此條件下，龍眼核多酚純品的得率為5. 2%，純度為74. 14%。龍眼核多酚HPLC譜圖表明，龍眼核多酚中含有表兒茶素和蘆丁，其中表兒茶素的含量高達21. 35%。龍眼核多酚清除DPPH.、· 0H、02'三種自由基的IC50值分別為O. 4326mg/mL、142. 4mg/mL、99mg/mL，對照品 Vc 清除三種自由基的 IC5tl 值分別為 O. 7292mg/mL、63. 94mg/mL、15. 91mg/mL,龍眼核多酹對DPPH.自由基的清除效果明顯優(yōu)于Vc。另有采用SephadexLH-20柱層析對龍眼核丙酮提取物進行純化，得到6個餾分，其中GA和EA主要分別存在于餾分3和餾分2 4中，其含量分別為36. 75mg/g和81. 22mg/g，利用HPLC-ESI-MS對各餾分中多酚結(jié)構(gòu)的分析檢測出包括GA和EA在內(nèi)的17種已知和10種未知酚類化合物。還有對龍眼核提取液降血糖作用的研究，以常規(guī)降血糖藥(格列苯脲)為陽性對照，通過對正常小鼠和糖尿病小鼠進行降血糖治療試驗，發(fā)現(xiàn)龍眼核提取液能有效地緩解經(jīng)四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病小鼠體內(nèi)的高血糖癥狀，降血糖率達77.4%，具有良好的降血糖效果(黃儒強，鄒宇曉，劉學(xué)銘.龍眼核提取液的降血糖作用.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，(06) :991-992)。同時在對龍眼核提取物提高小鼠抗氧化功能的研究發(fā)現(xiàn)，龍眼核提取物可顯著增強小鼠血清超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，降低脂質(zhì)過氧化物丙ニ醛(MDA)含量，從而提高了小鼠的抗氧化功能。(黃儒強，劉學(xué)銘.龍眼核提取物提高小鼠抗氧化功能的研究.華南師范大學(xué)學(xué)報，2008，(01) : 108-111)。對龍眼深加工的廢棄物龍眼核的開發(fā)利用，已成為近幾年兩廣、福建等龍眼主要產(chǎn)地的食品、農(nóng)產(chǎn)品加工方向的ー個研究熱點。龍眼核中含量相對較高的多酚類化合物，其作為ー類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚類化合物，具有良好的抗氧化和清除自由基的活性，極具作為天然抗氧化劑以及食品，保健品、化妝品活性原料的潛力，具有巨大的開發(fā)價值和廣闊的市場前景。而現(xiàn)階段對于龍眼核多酚提取及純化工藝研究，仍未見有具有實際生產(chǎn)意義的エ藝方法的報道，這主要是由于目前絕大多數(shù)的研究其目的只是為了進行物質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物活性分析，所述規(guī)模仍只停留在實驗室階段，并且設(shè)備投入、生產(chǎn)成本偏高，エ藝復(fù)雜，引入的添加、雜質(zhì)成分較多，成品的純度和活性也有待進ー步的提高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有的國內(nèi)龍眼加工行業(yè)廢棄龍眼核的利用問題，提供一種可提高龍眼行業(yè)的經(jīng)濟效益，増加果農(nóng)收入的龍眼核多酚的提取方法。本發(fā)明的具體步驟如下I)將洗凈的龍眼核烘干；2)將原料龍眼核粉碎，得龍眼核粉；
3)在龍眼核粉中加入磷酸鈉緩沖液，得浸出液；4)將浸出液傾出，過濾，去除浸渣，回收浸液；5)將步驟4)得到的濾液濃縮，得濃縮液；6)在濃縮液中加入鹽酸，攪拌后靜置沉淀，得沉淀液；7)將沉淀液離心，棄去上清液，沉淀用鹽酸洗滌后，干燥成龍眼核多酚細粉。在步驟I)中，所述烘干可采用鼓風(fēng)干燥后在恒定溫度下烘干，使原料龍眼核的最終失水率達到34% 36% ;所述烘干的溫度可為40 60°C，烘干的時間可為20 48h。在步驟2)中，所述龍眼核粉的粒度可在20目以下，所述龍眼核粉的含水率可為9% 11%。在步驟3)中，所述磷酸鈉緩沖液的溫度可為60 80°C，所述龍眼核粉與磷酸鈉緩沖液的質(zhì)量體積比(料液比)可為I: (35 45)，其中龍眼核粉以質(zhì)量kg計算，磷酸鈉緩沖液以體積L計算，維持磷酸鈉緩沖液溫度的時間可為10 40min ;所述磷酸鈉緩沖液的pH值可為9 11，濃度可為10 20mM。在步驟4)中，所述浸出液的溫度可為60 80°C，所述過濾的條件可在O. 06 O. 08MPa真空度條件下過濾。在步驟5)中，所述濾液濃縮的條件可將濾液在真空度O. 08 O. IMPa，溫度40 50°C條件下濃縮3 5倍。在步驟6)中，所述鹽酸的濃度可為O. 26M O. 6M，所述濃縮液與硫酸的體積比可為 5:1。在步驟7)中，所述鹽酸的濃度可為I 2mM，所述干燥可采用真空干燥。本發(fā)明的優(yōu)勢在于合理控制龍眼核的烘干水平，降低龍眼核內(nèi)多酚氧化酶活性，減少多酚在生產(chǎn)過程中的損失，利用低成本、低濃度的弱堿性磷酸鈉緩沖液作為浸取溶剤，替代高成本的有機溶剤，降低產(chǎn)品潛在毒性，采用稀酸沉淀ー步分離多酚類物質(zhì)，收率高，損耗低，產(chǎn)物通過簡單的真空干燥即可得到流動性良好的多酚產(chǎn)品。整個エ藝的エ序少，エ時短，設(shè)備投入、生產(chǎn)成本低，廢液、廢渣污染低，特別適宜于大規(guī)模的生產(chǎn)加工。


圖I為本發(fā)明實施例中龍眼核烘干水平對龍眼核多酚浸出率的影響。在圖I中，橫坐標(biāo)為烘干條件，縱坐標(biāo)為浸取率(mg/g)。
圖2為發(fā)明實施例15 17中對稀鹽酸濃度及浸出液濃縮比對龍眼核多酚沉淀分離率的影響。在圖2中，橫坐標(biāo)為鹽酸濃度(M)，左縱坐標(biāo)為多酚含量(mg/L)，右縱坐標(biāo)為多酚收率；a為上清液中多酚含量，b為沉淀中多酚含量；▲為多酚收率。圖3為發(fā)明實施例18 20中對稀鹽酸濃度及浸出液濃縮比對龍眼核多酚沉淀分離率的影響。在圖3中，橫坐標(biāo)為鹽酸濃度(M)，左縱坐標(biāo)為多酚含量(mg/L)，右縱坐標(biāo)為多酚收率；a為上清液中多酚含量，b為沉淀中多酚含量；▲為多酚收率。圖4為發(fā)明實施例21 23中對稀鹽酸濃度及浸出液濃縮比對龍眼核多酚沉淀分離率的影響。在圖4中，橫坐標(biāo)為鹽酸濃度(M)，左縱坐標(biāo)為多酚含量(mg/L)，右縱坐標(biāo)為多酚收率；a為上清液中多酚含量，b為沉淀中多酚含量；▲為多酚收率。
具體實施例方式以下實施例將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進ー步的說明。實施例I 3將洗凈的龍眼核浙干水分，加入鼓風(fēng)干燥箱中在不同條件下烘干，分別為400C 48h，50°C 23h，60°C 20h。將烘干不同條件下處理得到的龍眼核粉碎后倒入提取罐中，以1:50的料液比，加入70°C，濃度10mM，pH值為7的浸取溶劑PB，攪拌器攪拌，浸取I. 5h，將浸取液傾出，在O. 06 O. 08Mpa真空度條件下過濾，去除浸渣，回收浸液，以福林酚法測定浸液中的多酚含量，比較不同烘干條件下處理得到的龍眼核粉的浸出率，結(jié)果如圖I所
/Jn ο實施例4將洗凈的龍眼核浙干水分，加入鼓風(fēng)干燥箱中在50°C 30h條件下烘干。將處理得到的龍眼核粉碎后倒入提取罐中，以1:40的料液比，加入70°C，濃度10mM，pH值為11的浸取溶劑PB，攪拌器攪拌，浸取25min，將浸取液傾出，在O. 06 O. 08Mpa真空度條件下過濾，去除浸渣，回收浸液，以福林酚法測定浸液中的多酚含量，龍眼核多酚的浸出率為46. 86mg/g°實施例5 6如實施例4所述之浸取操作條件，采用不同pH的磷酸鈉緩沖液浸取龍眼核多酚。其區(qū)別在于磷酸鈉緩沖液pH分別為9，10。實施例7 8如實施例4所述之浸取操作條件，采用不同濃度的磷酸鈉緩沖液浸取龍眼核多酚。其區(qū)別在于磷酸鈉緩沖液濃度分別為20mM，15mM。實施例9 10如實施例4所述之浸取操作條件，采用不同溫度的磷酸鈉緩沖液浸取龍眼核多酚。其區(qū)別在于磷酸鈉緩沖液溫度分別為60°C，80°C。實施例11 12如實施例4所述之浸取操作條件，采用不同的料液比浸取龍眼核多酚。其區(qū)別在于料液比分別為1:35，1:45。實施例13 14如實施例4所述之浸取操作條件，采用不同的浸取時間浸取龍眼核多酚。其區(qū)別在于浸取時間分別為IOmin,40min。實施例15 17將由實施例4得到的浸出液，在真空度O. 08 O. IMpa，溫度40 50°C條件下，濃縮3倍。向濃縮液中以5:1體積比加入濃度分別為O. 26M，0. 29M，0. 32M的鹽酸，攪拌混勻，靜置數(shù)分鐘后將沉淀液離心，棄上清液，將沉淀用濃度ImM 2mM的稀鹽酸洗滌兩次，將沉淀物真空干燥。用福林酚法測定收率，結(jié)果如圖2所示。實施例18 20
如實施例15 17所述之沉淀操作條件，浸出液濃縮比為4倍，向濃縮液中加入不同濃度的鹽酸。其區(qū)別在于加入的鹽酸濃度分別為O. 3M，0. 4M，0. 5M，結(jié)果如圖3所示。實施例21 23如實施例15 17所述之沉淀操作條件，浸出液濃縮比為5倍，向濃縮液中加入不同濃度的鹽酸。其區(qū)別在于加入的鹽酸濃度分別為O. 4M，0. 5M，0. 6M，結(jié)果如圖4所示。
權(quán)利要求
1.龍眼核多酚的提取方法，其特征在于其具體步驟如下 1)將洗凈的龍眼核烘干； 2)將原料龍眼核粉碎，得龍眼核粉； 3)在龍眼核粉中加入磷酸鈉緩沖液，得浸出液； 4)將浸出液傾出，過濾，去除浸渣，回收浸液； 5)將步驟4)得到的濾液濃縮，得濃縮液； 6)在濃縮液中加入鹽酸，攪拌后靜置沉淀，得沉淀液； 7)將沉淀液離心，棄去上清液，沉淀用鹽酸洗滌后，干燥成龍眼核多酚細粉。
2.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟I)中，所述烘干采用鼓風(fēng)干燥后在恒定溫度下烘干，使原料龍眼核的最終失水率達到34% 36% ;所述烘干的溫度可為40 60°C，烘干的時間可為20 48h。
3.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟2)中，所述龍眼核粉的粒度在20目以下，所述龍眼核粉的含水率可為9% 11%。
4.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟3)中，所述磷酸鈉緩沖液的溫度為60 80°C。
5.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟3)中，所述龍眼核粉與磷酸鈉緩沖液的質(zhì)量體積比為1:35 45，其中龍眼核粉以質(zhì)量kg計算，磷酸鈉緩沖液以體積L計算，維持磷酸鈉緩沖液溫度的時間可為10 40min ;所述磷酸鈉緩沖液的pH值可為9 11，濃度可為10 20mM。
6.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟4)中，所述浸出液的溫度為60 80°C，所述過濾的條件可在O. 06 O. OSMPa真空度條件下過濾。
7.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟5)中，所述濾液濃縮的條件是將濾液在真空度O. 08 O. IMPa，溫度40 50°C條件下濃縮3 5倍。
8.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟6)中，所述鹽酸的濃度為 O. 26M O. 6M。
9.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟6)中，所述濃縮液與硫酸的體積比可為5: I。
10.如權(quán)利要求I所述龍眼核多酚的提取方法，其特征在于在步驟7)中，所述鹽酸的濃度為I 2mM，所述干燥可采用真空干燥。
全文摘要
龍眼核多酚的提取方法，涉及一種龍眼的加工方法。供一種可提高龍眼行業(yè)的經(jīng)濟效益，增加果農(nóng)收入的龍眼核多酚的提取方法。將洗凈的龍眼核烘干；將原料龍眼核粉碎，得龍眼核粉；在龍眼核粉中加入磷酸鈉緩沖液，得浸出液；將浸出液傾出，過濾，去除浸渣，回收浸液；將得到的濾液濃縮，得濃縮液；在濃縮液中加入鹽酸，攪拌后靜置沉淀，得沉淀液；將沉淀液離心，棄去上清液，沉淀用鹽酸洗滌后，干燥成龍眼核多酚細粉。
文檔編號A61K36/77GK102961486SQ201210570380
公開日2013年3月13日 申請日期2012年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月24日
發(fā)明者李清彪, 李翔南, 何寧, 彭雅娟, 黃加樂, 王海濤, 王遠鵬 申請人:廈門大學(xué)