專(zhuān)利名稱(chēng)：一種仿生腱鞘膜及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種仿生材料，尤其涉及一種仿生腱鞘膜及其制備方法。
背景技術(shù)：
肌腱粘連是臨床常見(jiàn)疾患，由于缺乏有效的粘連防治措施，常常使治療陷入“粘連-松解-再粘連”的惡性循環(huán)，嚴(yán)重影響了患者的肢體功能。在肌腱和周?chē)M織之間放置防粘連膜具有一定減少肌腱粘連的作用，但是它們不具有促進(jìn)肌腱愈合和滑動(dòng)的功能。此夕卜，由于材料或結(jié)構(gòu)的原因，包裹肌腱后只能起到物理阻隔作用，可能出現(xiàn)的排異以及干擾肌腱愈合等現(xiàn)象嚴(yán)重影響肌腱功能的恢復(fù)。因此，尋找合適的防粘連膜材料和結(jié)構(gòu)，負(fù)載防粘連藥物，通過(guò)藥物的不斷釋放促進(jìn)肌腱愈合，達(dá)到防止肌腱粘連的目的，具有重要意義。早期應(yīng)用的防粘連膜多采用非生物材料(如硅橡膠)制成，但存在組織反應(yīng)大、排異明顯、無(wú)通透性、影響肌腱的內(nèi)源性愈合與需二期手術(shù)取出等不足，嚴(yán)重時(shí)可因?yàn)樽韪袅思‰斓臓I(yíng)養(yǎng)而使其發(fā)生變性。因此，目前這種材料構(gòu)成的防粘連膜已基本不用。近年來(lái)，由可降解高分子材料制成的防粘連膜已經(jīng)問(wèn)世，在這一類(lèi)物質(zhì)中，既有天然的高分子材料，如纖維素衍生物、透明質(zhì)酸、幾丁質(zhì)及其衍生物等，也有合成的高分子聚合物，如聚乳酸(polylactic acid, PLA)、聚己內(nèi)酯(polycaprolactone, PCL)、聚輕基乙酸及它們的共聚物
坐寸ο目前，研究較多的防粘連膜以單層納米纖維膜為主。納米結(jié)構(gòu)的薄膜孔隙率高且孔徑小，能夠阻止細(xì)胞長(zhǎng)入的同時(shí)允許營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的滲透，并且通過(guò)控制納米材料的親水角抑制細(xì)胞粘附，從而達(dá)到肌腱愈合的要求[7]。靜電紡工藝是近年來(lái)廣泛應(yīng)用的制備組織工程納米纖維的技術(shù)，其設(shè)備相對(duì)簡(jiǎn)單、操作性強(qiáng)，且易于控制材料的化學(xué)組分和物理性能。目前已有超過(guò)100種不同高分子聚合物成功地通過(guò)該方法實(shí)現(xiàn)了納米紡絲，包括聚乳酸及透明質(zhì)酸(hyaluronic acid, HA)。Yang等應(yīng)用靜電紡絲的方法以聚乳酸為主要材料制備了單層的納米電紡纖維膜，發(fā)現(xiàn)這種結(jié)構(gòu)不僅具有物理阻隔作用，還能抑制細(xì)胞或組織在膜表面粘附，但是其不能促進(jìn)肌腱的滑動(dòng)。然而，李新松等發(fā)明了一種可吸收纖維增強(qiáng)多層膜材料(申請(qǐng)?zhí)?2138480.0)，此種膜包含三層結(jié)構(gòu)，中間一層是可吸收纖維網(wǎng)或布，上下兩層是可吸收高分子材料多孔結(jié)構(gòu)，可以阻止細(xì)胞通過(guò)，和包含潤(rùn)滑肌腱的物質(zhì)，但是材料比較復(fù)雜且制造過(guò)程比較繁瑣，而且三層膜緊緊貼附在一起在一定程度上減少了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的滲透，而且三層膜緊緊貼附在一起在一定程度上減少了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的滲透，離臨床應(yīng)用尚有較遠(yuǎn)的距離。理想的防粘膜不僅要有效地起到阻隔腱周組織的作用，還要通過(guò)材料的復(fù)合或藥物的負(fù)載達(dá)到促進(jìn)肌腱組織愈合的目的，并為肌腱提供長(zhǎng)效潤(rùn)滑作用的環(huán)境。抗炎類(lèi)、去纖維蛋 白類(lèi)藥物乃至抗代謝藥都具有防止肌腱粘連的作用，但這些藥物在防止肌腱粘連的同時(shí)會(huì)對(duì)肌腱的內(nèi)在愈合速度和質(zhì)量產(chǎn)生影響，甚至有全身毒副作用，使其在臨床上的應(yīng)用受到限制。作為一種天然的線性大分子酸性粘多糖，透明質(zhì)酸廣泛存在于正常滑液中，也是腱鞘滑液的主要組成成分，對(duì)肌腱營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的滲透和維持肌腱在腱鞘內(nèi)的滑動(dòng)有積極作用。作為藥物載體和助劑，在臨床上透明質(zhì)酸已被廣泛應(yīng)用于關(guān)節(jié)疾病的治療、眼科手術(shù)、燙傷治療、預(yù)防術(shù)后粘連等。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在屈肌腱損傷修復(fù)與肌腱粘連松解術(shù)中應(yīng)用透明質(zhì)酸鈉，可以減少肌腱的粘連，臨床效果明顯。Tuncay等將鼠的肌腱橫行切斷后重新縫合，再將透明質(zhì)酸注射于肌腱修復(fù)部位的腱周組織，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組肌腱愈合好，周?chē)尺B較對(duì)照組明顯減輕。黃漢偉等人對(duì)透明質(zhì)酸防治損傷肌腱粘連的作用進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)高分子透明質(zhì)酸能夠促進(jìn)肌腱內(nèi)源性愈合、提高肌腱愈合質(zhì)量、減少與周?chē)M織的粘連、改善肌腱術(shù)后功能，同時(shí)對(duì)肌腱周?chē)M織無(wú)明顯副作用。除機(jī)械屏障外，透明質(zhì)酸鈉還具有明顯抑制白細(xì)胞的趨化、減少纖維蛋白的滲出和肉芽組織的形成的特性。但是，由于透明質(zhì)酸鈉的體內(nèi)存留時(shí)間較短，機(jī)械強(qiáng)度及穩(wěn)定性差，難以保證其在體內(nèi)的長(zhǎng)期存留以達(dá)到防粘連的持續(xù)效應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足，提供了一種仿生腱鞘膜，具有雙層結(jié)構(gòu)，滑膜層能長(zhǎng)時(shí)間釋放HA或其 金屬鹽，為肌腱提供長(zhǎng)效潤(rùn)滑作用的環(huán)境，促進(jìn)肌腱內(nèi)源性愈合，纖維層能有效減少肌腱與周?chē)M織的粘連，防止外源性愈合。本發(fā)明提供了一種仿生腱鞘膜，所述仿生腱鞘膜為雙層結(jié)構(gòu)，包括纖維層和滑膜層，其中:所述纖維層的組成材料包括可降解高分子材料，并且不含有透明質(zhì)酸或其金屬鹽；所述滑膜層的組成材料包括可降解高分子材料；還包括透明質(zhì)酸或其金屬鹽，所述滑膜層中透明質(zhì)酸或其金屬鹽和可降解高分子材料的質(zhì)量比為1: (1-1000)。優(yōu)選地，所述纖維層的厚度為10-1000 μ m，所述滑膜層的厚度為10-1000 μ m。優(yōu)選地，所述纖維層的厚度為80 μ m，所述滑膜層的厚度為150μπι。優(yōu)選地，所述纖維層纖維直徑為0.1-10 μ m,所述滑膜層纖維直徑為0.1-10 μ m。優(yōu)選地，所述可降解高分子材料可以選自羥基羧酸均聚物、幾種羥基羧酸的共聚物、羥基羧酸與多元醇共聚物、聚羥基羧酸與聚多元醇共混物、聚酯、聚磷酸酯、聚碳酸酯或聚酸酐等中的一種或幾種。其中，羥基羧酸優(yōu)選為α-羥基羧酸，所述α-羥基羧酸指的是所述羧酸中，至少有一個(gè)羥基位于與羧基相鄰的碳原子上，分子結(jié)構(gòu)為R1-C(Ra) (OH)-COOH，其中R1選自H或C-ClO的烷基，更優(yōu)選為H或C1-C5的烷基，更優(yōu)選為H或C1-C3的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基等，R1最優(yōu)選為甲基(即α-羥基羧酸為乳酸)。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是，本發(fā)明所述羥基羧酸也可以用內(nèi)酯替代，如己內(nèi)酯替代羥基己酸，由于本發(fā)明中，內(nèi)酯與羥基羧酸所起作用相同，因此，內(nèi)酯也包括在本發(fā)明羥基所述的范圍內(nèi)。其中，所述多元醇優(yōu)選為二元醇，如乙二醇、丙二醇，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是，本發(fā)明所述二元醇也可以用環(huán)氧化合物替代，如環(huán)氧乙烷替代乙二醇、環(huán)氧丙醇替代丙二醇，由于本發(fā)明中，環(huán)氧烷化合物與多元醇所起作用相同，因此，環(huán)氧烷化合物也包括在本發(fā)明羥基所述的范圍內(nèi)。優(yōu)選地，所述可降解高分子材料的具體舉例如聚乳酸、聚己內(nèi)酯、乳酸與乙二醇共聚物、乳酸與輕基乙酸共聚物、乳酸與己內(nèi)酯共聚物，最優(yōu)選為聚己內(nèi)酯。優(yōu)選地，所述可降解高分子材料分子量為20KDa_200KDa。
本發(fā)明還提供了一種上述仿生腱鞘膜的制備方法，包括以下步驟:步驟 1，制備纖維層溶液:將可降解高分子材料溶解于有機(jī)溶劑中形成混合溶液，控制有機(jī)溶劑質(zhì)量為可降解高分子材料質(zhì)量的2-50倍；步驟2，制備滑膜層溶液:將透明質(zhì)酸或其金屬鹽完全溶解在水中制得透明質(zhì)酸或其金屬鹽凝膠，控制水的質(zhì)量為透明質(zhì)酸質(zhì)量的10-50倍；將可降解高分子材料溶解于有機(jī)溶劑中形成混合溶液A，再將透明質(zhì)酸或其金屬鹽凝膠與混合溶液A混合制得滑膜層溶液，控制滑膜層溶液中可降解高分子材料的含量小于或等于99.9wt%，可降解高分子材料的質(zhì)量為透明質(zhì)酸或其金屬鹽質(zhì)量的1-1000倍；步驟3，分別將纖維層溶液和滑膜層溶液制成纖維層和滑膜層，并且將纖維層和滑膜層復(fù)合得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜。優(yōu)選地，步驟2中，控制滑膜層溶液中可降解高分子材料的含量為l_90wt%。優(yōu)選地，步驟2中，控制滑膜層溶液中可降解高分子材料的含量為10_40wt%。優(yōu)選地，步驟2中所述有機(jī)溶劑至少包括水溶性溶劑。優(yōu)選地，步驟2中將透明質(zhì)酸凝膠、混合溶液A和水溶性溶劑混合，制得滑膜層溶液。優(yōu)選地，所述水溶性溶劑為醇類(lèi)或酸類(lèi)等有機(jī)溶劑中的一種或多種。醇類(lèi)有機(jī)溶劑的例子包括:甲醇、乙醇、乙二醇、丙醇、異丙醇、丙二醇、叔丁醇、甘油、丁二醇、戊二醇、乙二醇單甲醚、乙二醇單乙醚、乙二醇單丁醚、三氟乙醇、六氟異丙醇
坐寸ο酸類(lèi)有機(jī)溶劑的例子包括:甲酸、乙酸、三氟乙酸等。優(yōu)選地，所述水溶性溶劑選自三氟乙酸、乙酸、三氟乙醇、六氟異丙醇、甲醇、乙醇、正丁醇、異丙醇等中的一種或多種。優(yōu)選地，步驟I中所述有機(jī)溶劑可以為甲醇、乙醇、正丁醇、正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、四氫呋喃、異丙醇、三氟乙醇或六氟異丙醇等中的一種或幾種。優(yōu)選地，步驟3為纖維層溶液和滑膜層溶液分別以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到纖維層和滑膜層，并且將纖維層和滑膜層復(fù)合得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜。優(yōu)選地，步驟3為:相繼對(duì)纖維層溶液和滑膜層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜。優(yōu)選地，步驟3為:相繼對(duì)滑膜層溶液和纖維層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜。優(yōu)選地，所述可降解高分子材料可以選自羥基羧酸均聚物、幾種羥基羧酸的共聚物、羥基羧酸與多元醇共聚物、羥基羧酸與多元酸共聚物、聚酯、聚磷酸酯、聚碳酸酯或聚酸酐等中的一種或幾種。其中，羥基羧酸優(yōu)選為α-羥基羧酸，所述α-羥基羧酸指的是所述羧酸中，至少有一個(gè)羥基位于與羧基相鄰的碳原子上，分子結(jié)構(gòu)為R1-C(Ra) (OH)-COOH，其中R1選自H或C-ClO的烷基，更優(yōu)選為H或C1-C5的烷基，更優(yōu)選為H或C1-C3的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基等，R1最優(yōu)選為甲基(即α-羥基羧酸為乳酸)。其中，所述多元醇優(yōu)選為二元醇，如乙二醇、丙二醇，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是，本發(fā)明所述二元醇也可以用環(huán)氧化合物替代，如環(huán)氧乙烷替代乙二醇、環(huán)氧丙醇替代丙二醇。優(yōu)選地，所述可降解高分子材料的具體舉例如聚乳酸、聚己內(nèi)酯、乳酸與乙二醇共聚物、乳酸與輕基乙酸共聚物、乳酸與己內(nèi)酯共聚物，最優(yōu)選為聚己內(nèi)酯。優(yōu)選地，所述可降解高分子材料分子量為20KDa_200KDa。優(yōu)選地，步驟3中，靜電紡工藝參數(shù)條件為:電壓20-40kV，流速0.01-0.lmL/min,接受臺(tái)離噴絲頭的距離10-20cm。本發(fā)明提供的仿生腱鞘膜模擬生物腱鞘結(jié)構(gòu)，為雙層結(jié)構(gòu)，包括纖維層和滑膜層?；雍蠬A或其金屬鹽，能實(shí)現(xiàn)HA或其金屬鹽的控制釋放，模擬生物腱鞘內(nèi)層分泌HA的功能，為肌腱提供長(zhǎng)效潤(rùn)滑作用的環(huán)境，促進(jìn)肌腱內(nèi)源性愈合，提高肌腱愈合質(zhì)量，改善肌腱術(shù)后功能；纖維層主要充當(dāng)物理屏障，減少腱周組織粘連，預(yù)防外源性愈合。而且生物可降解高分子材料可自行降解，本制劑無(wú)毒、無(wú)免疫原性，生物相容性好，提高療效，減少副作用，在臨床上具有重要意義。


圖1為實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜的掃描電鏡圖；圖2為實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜的體外藥物釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖；圖3為實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)增生結(jié)果圖；圖4為實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)形態(tài)圖；圖5為實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)細(xì)胞活性圖；圖6為實(shí)施例3所得仿生腱鞘膜的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)整體觀察結(jié)果圖；圖7為實(shí)施例3所得仿生腱鞘膜的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的組織切片圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，以更好地理解本發(fā)明。實(shí)施例1稱(chēng)取2.4gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中，制得纖維層溶液。稱(chēng)取0.1gHA完全溶解在1.5g水中形成透明質(zhì)酸凝膠，同時(shí)稱(chēng)取2.4gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中；將透明質(zhì)酸凝膠加入到PCL的四氫呋喃溶液，使用漩渦混合器混合，然后加入2.5g六氟異丙醇，使用漩渦混合器混合，制得滑膜層溶液(HA占HA和PLC總量的4%)。相繼對(duì)纖維層溶液和滑膜層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜(PCL-HA4%)，其中，靜電紡工藝參數(shù)條件為:電壓30kV，流速為0.04mL/min,接受臺(tái)離噴絲頭的距離為15cm。實(shí)施例2稱(chēng)取2.3gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中，制得纖維層溶液。稱(chēng)取0.2gHA完全溶解在3g水中形成透明質(zhì)酸凝膠，同時(shí)稱(chēng)取2.3gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中；將透明質(zhì)酸凝膠加入到PCL的四氫呋喃溶液，使用漩渦混合器混合，然后加入2.5g六氟異丙醇，使用漩渦混合器混合，制得滑膜層溶液(HA占HA和PLC總量的8%)。相繼對(duì)纖維層溶 液和滑膜層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜(PCL-HA8%)，其中，靜電紡工藝參數(shù)條件為:電壓30kV，流速為0.04mL/min,接受臺(tái)離噴絲頭的距離為15cm。實(shí)施例3稱(chēng)取2.2gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中，制得纖維層溶液。稱(chēng)取0.3gHA完全溶解在4.5g水中形成透明質(zhì)酸凝膠，同時(shí)稱(chēng)取2.3gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中；將透明質(zhì)酸凝膠加入到PCL的四氫呋喃溶液，使用漩渦混合器混合，然后加入2.5g六氟異丙醇，使用漩渦混合器混合，制得滑膜層溶液(HA占HA和PLC總量的12%)。相繼對(duì)纖維層溶液和滑膜層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜(PCL-HA12%)，其中，靜電紡工藝參數(shù)條件為:電壓30kV，流速為0.04mL/min，接受臺(tái)離噴絲頭的距離為15cm。實(shí)施例4稱(chēng)取2.2gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中，制得纖維層溶液。稱(chēng)取0.23gHA完全溶解在4.5g水中形成透明質(zhì)酸凝膠，同時(shí)稱(chēng)取2.3gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中；將透明質(zhì)酸凝膠加入到PCL的四氫呋喃溶液，使用漩渦混合器混合，然后加入2.5g六氟異丙醇，使用漩渦混合器混合，制得滑膜層溶液。相繼對(duì)纖維層溶液和滑膜層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜，其中，靜電紡工藝參數(shù)條件為:電壓30kV，流速為0.04mL/min,接受臺(tái)離噴絲頭的距離為15cm。實(shí)施例5`
稱(chēng)取2.4gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中，制得纖維層溶液。稱(chēng)取0.17gHA完全溶解在4.5g水中形成透明質(zhì)酸凝膠，同時(shí)稱(chēng)取2.3gPLC溶于7g四氫呋喃溶液中；將透明質(zhì)酸凝膠加入到PCL的四氫呋喃溶液，使用漩渦混合器混合，然后加入2.5g六氟異丙醇，使用漩渦混合器混合，制得滑膜層溶液。相繼對(duì)纖維層溶液和滑膜層溶液以靜電紡絲的方法進(jìn)行紡絲得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜，其中，靜電紡工藝參數(shù)條件為:電壓30kV，流速為0.04mL/min,接受臺(tái)離噴絲頭的距離為15cm。對(duì)照例參照實(shí)施例1的制備工藝，制備雙層結(jié)構(gòu)膜，其不同之處置于，滑膜層中不含HA，即纖維層與滑膜層均為PLC的仿生腱鞘膜。掃描電鏡(SEM)觀察對(duì)照例(PLC-HA0%)和實(shí)施例1_3所得仿生腱鞘膜，結(jié)果如圖1所示，HA被成功地封裝到PLC中，纖維大小均一，形成無(wú)規(guī)相互連接的結(jié)構(gòu)，纖維層直徑約為3.66±0.57 μ m，對(duì)照組和實(shí)施例1_3的滑膜層直徑分別為3.89 土 0.59,3.42 土
0.62,2.99 ±0.54和2.86 土 0.71μπι。橫斷面SEM觀察結(jié)果(圖1Α)表明，滑膜層厚度約為150 μ m,纖維層約為80 μ m。實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜各取IOOmg建立體外藥物釋放模型，結(jié)果如圖2所示。實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜初期突釋分別為65.8、79.6和88.6%。實(shí)施例1_3所得仿生腱鞘膜具有相同最終釋放累積百分率，14天內(nèi)分別釋放HA約397 μ g、798 μ g和1191 μ g。取對(duì)照例和實(shí)施例1-3所得仿生腱鞘膜進(jìn)行體外細(xì)胞增生實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖3所示，隨著滑膜層中HA含量的增加，細(xì)胞生長(zhǎng)更好。觀察細(xì)胞形態(tài)，如圖4所示，纖維層上細(xì)胞面積明顯低于其他樣品，表明纖維層阻止細(xì)胞粘連，而且隨著滑膜層中HA含量的增加，細(xì)胞面積增大。測(cè)試細(xì)胞活性，結(jié)果如圖5所示，PLC纖維中HA含量越多，死/活細(xì)胞率越低，表明HA利于細(xì)胞粘連與增生。進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，將對(duì)照例(PCL)和實(shí)施例3 (PLC-HA12%)所得仿生腱鞘膜用于肌腱損傷，防治肌腱周?chē)M織粘連，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖6和7所示。圖6中，空白組(control)出現(xiàn)嚴(yán)重腱周粘連，需要銳器剝離來(lái)分離；對(duì)照例組(PCL)粘連區(qū)域可以通過(guò)鈍器剝離來(lái)分離，但檢測(cè)到疏松纖維組織束；實(shí)施例3組(PLC-HA12%)沒(méi)有出現(xiàn)腱周粘連。圖7中，空白組(control)腱周組織和肌腱之間布滿了纖維組織束；對(duì)照例組(PCL)在腱周組織和肌腱邊界處觀察到疏松纖維組織束；實(shí)施例3組(PLC-HA12%)未出現(xiàn)腱周粘連。結(jié)果表明，實(shí)施例3所得仿生腱鞘膜能有效地減少腱周組織粘連，預(yù)防外源性愈合。將實(shí)施例1、2、4、和5所得仿生腱鞘膜進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與實(shí)施例3類(lèi)似，均能有效地減少腱周組織粘連，預(yù)防外源性愈合。

掃描電鏡(SEM)觀察實(shí)施例4和5所得仿生腱鞘膜，結(jié)果與實(shí)施例1_3類(lèi)似；將實(shí)施例4和5所得仿生腱鞘膜進(jìn)行體外細(xì)胞增生實(shí)驗(yàn)，結(jié)果也表明HA利于細(xì)胞粘連與增生。綜上，可以看出，本發(fā)明提供的仿生腱鞘膜模擬生物腱鞘為雙層結(jié)構(gòu)，包括纖維層和滑膜層。滑膜層含有HA或其金屬鹽，能實(shí)現(xiàn)HA或其金屬鹽的控制釋放，模擬生物腱鞘內(nèi)層分泌HA的功能，為肌腱提供長(zhǎng)效潤(rùn)滑作用的環(huán)境，促進(jìn)肌腱內(nèi)源性愈合，提高肌腱愈合質(zhì)量，改善肌腱術(shù)后功能；纖維層主要充當(dāng)物理屏障，減少腱周組織粘連，預(yù)防外源性愈合。以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實(shí)施例。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，任何對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種仿生腱鞘膜，其特征在于，所述仿生腱鞘膜為雙層結(jié)構(gòu)，包括纖維層和滑膜層，其中: 所述纖維層的組成材料包括可降解高分子材料，并且不含有透明質(zhì)酸或其金屬鹽； 所述滑膜層的組成材料包括可降解高分子材料；還包括透明質(zhì)酸或其金屬鹽，所述滑膜層中透明質(zhì)酸或其金屬鹽和可降解高分子材料的質(zhì)量比為1: (1-1000)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述仿生腱鞘膜，其特征在于，所述纖維層的厚度為IO-1OOOymi述滑膜層的厚度為10-1000 μ m。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述仿生腱鞘膜，所述纖維層的厚度為80μ m,所述滑膜層的厚度為150 μ m0
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述仿生腱鞘膜，其特征在于，所述纖維層纖維直徑為0.1-10 μ m，所述滑膜層纖維直徑為0.1-10 μ m。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述仿生腱鞘膜，其特征在于，所述可降解高分子材料選自聚羥基羧酸、乳酸-乙醇酸共聚物、乳酸-乙二醇共聚物、乳酸-己內(nèi)酯共聚物、聚己內(nèi)酯、聚磷酸酯、聚碳酸酯或聚酸酐中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述仿生腱鞘膜，其特征在于，所述可降解高分子材料為聚己內(nèi)酯。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、5或6所述仿生腱鞘膜，其特征在于，所述可降解高分子材料分子量為 20KDa-200KDa。
8.—種如權(quán)利要求1所述仿生腱鞘膜的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 步驟1，制備纖維層溶液:將可降解高分子材料溶解于有機(jī)溶劑中形成混合溶液，控制有機(jī)溶劑質(zhì)量為可降解高分子材料質(zhì)量的2-50倍； 步驟2，制備滑膜層溶液:將透明質(zhì)酸或其金屬鹽完全溶解在水中制得透明質(zhì)酸或其金屬鹽凝膠，控制水的質(zhì)量為透明質(zhì)酸質(zhì)量的10-50倍；將可降解高分子材料溶解于有機(jī)溶劑中形成混合溶液A，再將透明質(zhì)酸或其金屬鹽凝膠與混合溶液A混合制得滑膜層溶液，控制滑膜層溶液中可降解高分子材料的含量小于或等于99.9wt%，可降解高分子材料的質(zhì)量為透明質(zhì)酸或其金屬鹽質(zhì)量的1-1000倍； 步驟3，分別將纖維層溶液和滑膜層溶液制成纖維層和滑膜層，并且將纖維層和滑膜層復(fù)合得到雙層結(jié)構(gòu)的仿生腱鞘膜。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，步驟2中所述有機(jī)溶劑至少包括水溶性溶劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，步驟2中將透明質(zhì)酸或其金屬鹽凝膠、混合溶液A和水溶性溶劑混合，制得滑膜層溶液。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的制備方法，其特征在于，所述水溶性溶劑為醇類(lèi)或酸類(lèi)有機(jī)溶劑中的一種或多種。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述水溶性溶劑選自三氟乙酸、乙酸、三氟乙醇、六氟異丙醇、甲醇、乙醇、正丁醇和異丙醇中的一種或多種。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種仿生腱鞘膜，所述仿生腱鞘膜為雙層結(jié)構(gòu)，包括纖維層和滑膜層，其中，纖維層的組成材料包括可降解高分子材料，且不含有透明質(zhì)酸(HA)或其金屬鹽；滑膜層的組成材料可降解高分子材料，還包括HA或其金屬鹽。該仿生腱鞘膜的滑膜層含有HA或其金屬鹽，能實(shí)現(xiàn)HA或其金屬鹽的控制釋放，模擬生物腱鞘內(nèi)層分泌HA的功能，為肌腱提供長(zhǎng)效潤(rùn)滑作用的環(huán)境，促進(jìn)肌腱內(nèi)源性愈合，提高肌腱愈合質(zhì)量，改善肌腱術(shù)后功能；纖維層主要充當(dāng)物理屏障，減少腱周組織粘連，預(yù)防外源性愈合。而且生物可降解高分子材料可自行降解，無(wú)毒、無(wú)免疫原性，生物相容性好，提高療效，減少副作用。
文檔編號(hào)A61L27/20GK103071185SQ20121058537
公開(kāi)日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2012年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月28日
發(fā)明者范存義, 劉珅, 崔文國(guó) 申請(qǐng)人:范存義, 劉珅, 崔文國(guó)