皮膚病學(xué)病狀的治療的制作方法
【專(zhuān)利摘要】通過(guò)將一種藥用組合物給予人受試者來(lái)減輕該受試者的皮膚炎癥，該藥用組合物包含一種藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的、選擇性結(jié)合IL-1ααα的一種藥劑。
【專(zhuān)利說(shuō)明】皮膚病學(xué)病狀的治療
相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0001]本申請(qǐng)要求于2011年4月I日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/470，538的優(yōu)先權(quán)。 關(guān)于聯(lián)邦資助研究的聲明
[0002]不適用。
發(fā)明領(lǐng)域
[0003]本發(fā)明總體上涉及醫(yī)學(xué)、皮膚病學(xué)、以及免疫學(xué)領(lǐng)域。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及特異性結(jié)合白細(xì)胞介素-1 a (IL-1 α )的抗體(Ab)減輕皮膚炎癥并且治療炎癥性皮膚疾病(包括尋常型牛皮癬和尋常型痤瘡)的用途。
發(fā)明背景
[0004]炎癥性皮膚病癥痤瘡、酒渣鼻、以及牛皮癬折磨著數(shù)百萬(wàn)人。這些病狀雖然通常不是致命的，但可以引起身體不適并且影響情緒健康。目前存在大量不同的用于炎癥性皮膚病癥的治療，包括皮質(zhì)類(lèi)固醇類(lèi)、維生素D類(lèi)似物、煤焦油、紫外線(xiàn)、類(lèi)視黃醇類(lèi)、甲氨蝶呤、環(huán)孢菌素、羥基脲、抗生素類(lèi)、以及生物劑如TNFa抑制劑。雖然這些療法已證實(shí)對(duì)許多患者有用，但許多引起不希望的副作用并且沒(méi)有一個(gè)是對(duì)每種情況都是理想的。 概述
[0005]本發(fā)明是基于這樣的發(fā)現(xiàn):特異性結(jié)合IL-1 α的mAb對(duì)于減輕皮膚炎癥、以及治療炎癥性皮膚疾病有用，這些炎癥性皮膚疾病包括尋常型牛皮癬和尋常型痤瘡。出于許多原因這個(gè)發(fā)現(xiàn)是令人意外的，這些原因包括在牛皮癬性皮膚中IL-1a水平降低的先前報(bào)道(例如，博尼法蒂(Bonifati)等人，《生物調(diào)節(jié)劑與內(nèi)衡劑雜志》(J Biol Regul HomeostAgents)，1997年10月-12月；11 (4): 133-6)以及暗示阿那白滯素(IL-1受體拮抗劑)為牛皮癬發(fā)展中的病原體的報(bào)道薩雷斯洛佩斯(Gonzalez-Lopez)等人,《英國(guó)皮膚病學(xué)雜志》(British Journal of Dermatology),158:1146-1148，2008)。
[0006]因此，本發(fā)明的特征在于一種減輕人受試者的皮膚炎癥的方法。這種方法可以包括將一種藥用組合物給予該受試者的步驟，該藥用組合物包含一種藥學(xué)上可接受的載體和有效減輕該受試者的皮膚炎癥的量的、選擇性結(jié)合IL-1a的一種藥劑。該藥劑可以是一種抗IL-1a抗體，如一種單克隆抗體(例如，是IgGl同種型)、一種包含MABpl的一個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)的單克隆抗體、或MABpl。該皮膚炎癥可能與尋常型痤瘡和/或?qū)こＰ团Ｆぐ_相關(guān)。
[0007]例如，本發(fā)明的一方面的特征在于一種通過(guò)將一種藥用組合物給予人受試者來(lái)減輕該受試者的皮膚炎癥的方法，該藥用組合物包含一種藥學(xué)上可接受的載體和，如通過(guò)任何標(biāo)準(zhǔn)皮膚病學(xué)測(cè)試所測(cè)量，對(duì)于將該受試者的皮膚炎癥的癥狀(例如，發(fā)紅、腫脹、白細(xì)胞浸潤(rùn)、或病變發(fā)展)減輕至少約10%(例如，至少8%、9%、10%、15%、17%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、或100%)有效的量的抗IL-1a Ab (或特異性和/或選擇性結(jié)合IL_1 α的其他藥劑)。該抗IL-1 a Ab可以是一種mAb,如一種IgGl。該抗IL_1 a Ab可以是指定為MABpl的mAb或者是包括MABpI的一個(gè)或多個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)的mAb。皮膚炎癥可能與痤瘡或牛皮癬相關(guān)?？梢酝ㄟ^(guò)皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮內(nèi)注射而將該藥用組合物給予該受試者。在該方法中，劑量可以為至少0.25 (例如，至少0.2,0.5,0.75、l、2、3、4、*5)mg/ml。
[0008]在其他方面，本發(fā)明包括選擇性結(jié)合IL-1 α的藥劑治療受試者的皮膚炎癥的用途以及一種用于治療受試者的皮膚炎癥的藥用組合物，該組合物包含選擇性結(jié)合IL-1 α的藥劑。在上文中，該藥劑可以是一種抗IL-1 α抗體，如一種單克隆抗體(例如，是IgGl同種型)、一種包含MABpl的一個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)的單克隆抗體、或MABpl ;并且該皮膚炎癥可能與尋常型痤瘡和/或?qū)こＰ团Ｆぐ_相關(guān)。
[0009]除非另外定義，否則在此所使用的所有技術(shù)術(shù)語(yǔ)均具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。通常理解的生物學(xué)術(shù)語(yǔ)的定義可以在里格爾(Rieger)等人，《經(jīng)典分子遺傳學(xué)詞匯表》(Glossary of Genetics:Classical and Molecular),第5版，施普林格出版社:紐約(Springer-Verlag:New York), 1991 ;和勒溫(Lewin),吉恩.V(Genes V),牛津大學(xué)出版社:紐約(Oxford University Press:New York), 1994 中找到。通常理解的醫(yī)學(xué)術(shù)語(yǔ)的定義可以在《斯特德曼醫(yī)學(xué)辭典》(Stedman’ s Medical Dictionary),第27版，利平科特(Lippincott),威廉姆斯和威爾金斯出版社(Williams & Wilkins),2000中找到。
[0010]如在此所使用，一種“抗體”或“Ab”是一種免疫球蛋白(Ig)、相同的或異源的Ig的一種溶液、或具有多種Ig的一種混合物。一種“Ab”還可以指Ig的片段和工程化形式，如Fab、Fab’以及F(ab’ )2片段；和scFv’ S、異源偶聯(lián)Ab、以及采用Ig衍生的CDR以賦予抗原特異性的類(lèi)似的人工分子。一種“單克隆抗體”或“mAb”是由一種克隆B細(xì)胞系表達(dá)的一種Ab、或僅含有能夠與一種特定抗原的特定表位發(fā)生免疫反應(yīng)的抗原結(jié)合位點(diǎn)的一個(gè)種類(lèi)的Ab分子群。一種“多克隆Ab”是具有多種異源Ab的一種混合物。典型地，一種多克隆Ab將包括結(jié)合特定抗原的大量不同的Ab分子，其中這些不同Ab中的至少一些與該抗原的不同表位發(fā)生免疫反應(yīng)。如在此所使用，一種多克隆Ab可以是兩種或更多種mAb的混合物。
[0011]一種Ab的“抗原結(jié)合部分”包含在一種Ab的Fab部分的可變區(qū)內(nèi)，并且是該Ab的賦予該Ab抗原特異性的部分(即，典型地由該Ab的重鏈和輕鏈的CDR形成的三維口袋(three-dimensional pocket))。“Fab部分”或“Fab區(qū)”是木瓜蛋白酶消化的Ig的蛋白水解片段，該片段含有該Ig的抗原結(jié)合部分?！胺荈ab部分”是不在該Fab部分內(nèi)的Ab部分，例如“Fe部分”或“Fe區(qū)”。Ab的“恒定區(qū)”是在可變區(qū)外的Ab部分。通常涵蓋在恒定區(qū)內(nèi)的是Ab的“效應(yīng)子部分”，該效應(yīng)子部分是負(fù)責(zé)結(jié)合促進(jìn)免疫應(yīng)答的其他免疫系統(tǒng)組分的Ab部分。因此，例如在一種Ab上的、結(jié)合補(bǔ)體組分或Fe受體(未經(jīng)由抗原結(jié)合部分)的位點(diǎn)為該Ab的效應(yīng)子部分。
[0012]當(dāng)提及一種蛋白分子如一種Ab時(shí)，“純化的”指從天然伴隨這類(lèi)分子的組分中分離。典型地，當(dāng)一種Ab或蛋白質(zhì)按重量計(jì)至少約10%(例如，9%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%、99%、99.9%、以及100%)不含與其天然相關(guān)聯(lián)的非Ab蛋白或其他天然存在的有機(jī)分子時(shí)，它是純化的?？梢酝ㄟ^(guò)任何適當(dāng)?shù)姆椒?，例如柱色譜法、聚丙烯酰胺凝膠電泳或HPLC分析來(lái)測(cè)量純度。一種化學(xué)合成的蛋白或在一種細(xì)胞類(lèi)型(不是該蛋白天然存在的細(xì)胞類(lèi)型)中產(chǎn)生的其他重組蛋白是“純化的”。
[0013]“結(jié)合”(“bind”、“binds”)或“與......反應(yīng)”是指一個(gè)分子識(shí)別并粘附于樣品
中的一個(gè)特定的第二分子，但基本上不識(shí)別或粘附于該樣品中的其他分子。通常，“特異性結(jié)合”另一分子的Ab具有對(duì)那個(gè)其他分子的大于約105、106、107、108、IO9、1010、IO11或IO12升/摩爾的Kd。“選擇性結(jié)合” 一個(gè)第一分子的Ab在一個(gè)第一表位處特異性結(jié)合該第一分子，但不特異性結(jié)合不具有該第一表位的其他分子。例如，選擇性結(jié)合IL-1a的Ab特異性結(jié)合IL-1a上的表位，但不特異性結(jié)合IL-1 β (其不具有該表位)。
[0014]“治療有效量”是能夠在治療的動(dòng)物或人體內(nèi)產(chǎn)生醫(yī)學(xué)上希望的效果(例如，一種疾病或一種疾病癥狀的改善或預(yù)防)的量。
[0015]雖然類(lèi)似或等同于在此所述的那些的方法和材料可用于本發(fā)明的實(shí)踐或測(cè)試，但以下描述了適合的方法和材料。在此提及的所有申請(qǐng)和公開(kāi)通過(guò)引用以其全文結(jié)合在此。在發(fā)生沖突的情況下，將以本說(shuō)明書(shū)(包括定義)為準(zhǔn)。另外，以下所討論的具體實(shí)施例僅僅是說(shuō)明性的而不旨在是限制性的。
詳細(xì)說(shuō)明
[0016]本發(fā)明涵蓋用于減輕受試者的皮膚炎癥、包括改善皮膚病學(xué)病狀的一個(gè)或多個(gè)癥狀的組合物和方法。以下描述的優(yōu)選實(shí)施例說(shuō)明了這些組合物和方法的調(diào)適。雖然如此，根據(jù)這些實(shí)施例的說(shuō)明，基于以下提供的說(shuō)明可以完成和/或?qū)嵺`本發(fā)明的其他方面。
一般方法
[0017]在此描述了涉及常規(guī)免疫學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的方法。免疫學(xué)方法(例如，用于抗原Ab復(fù)合物的檢測(cè)和定位的測(cè)定法、免疫沉淀法、免疫印跡法等)通常在本領(lǐng)域是已知的，并且描述于方法學(xué)專(zhuān)著如《當(dāng)代免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》(Current Protocols in Immunology),科爾根(Coligan)等人編，約翰威利父子出版公司(John Wiley & Sons),紐約中。分子生物學(xué)技術(shù)詳細(xì)描述于以下專(zhuān)著中，如《分子克隆:實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》(Molecular Cloning:ALaboratory Manual),第2版,第1_3卷,薩姆布魯克(Sambrook)等人編,冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press),冷泉港，紐約，2001 ;以及《當(dāng)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》(Current Protocols in Molecular Biology),奧蘇貝爾(Ausubel)等人編,格林出版與威利國(guó)際科學(xué)出版社(Greene Publishing and Wiley-1nterscience),紐約。Ab方法描述于《治療性Ab手冊(cè)》(Handbook of Therapeutic Abs),杜貝爾*S (Dubel, S.)編，威利-VCH出版社(Wiley-VCH)，2007中。醫(yī)學(xué)治療的一般方法描述于麥克菲(McPhee)和帕帕扎基斯(Papadakis),《當(dāng)代醫(yī)學(xué)診斷與治療》(Current Medical Diagnosis andTreatment)2010,第49版,麥格勞-希爾醫(yī)學(xué)出版社(McGraw-Hill Medical), 2010 ；以及福西(Fauci)等人，《哈里森內(nèi)科學(xué)》(Harrison，s Principles of Internal Medicine),第 17版，麥格勞-希爾專(zhuān)業(yè)出版社(McGraw-Hill Professional), 2008中。皮膚病學(xué)方法被描述于詹姆斯(James)等人,《安德魯斯皮膚疾病:臨床皮膚病學(xué)專(zhuān)家會(huì)診》(Andrews’ Diseasesof the Skin:Clinical Dermatology-Expert Consult),第 11 版，桑德斯(Saunders),2011 ;以及彭斯(Burns)等人,《魯克皮膚病學(xué)教程》(Rook’s Textbook of Dermatology),第8版，威利-布萊克威爾出版社(WiIey-BIackwelI )，2010中。
皮膚炎癥的治療
[0018]在此描述的組合物和方法對(duì)于通過(guò)向一位哺乳動(dòng)物受試者給予一種藥用組合物來(lái)治療該受試者的皮膚炎癥有用，該皮膚炎癥例如，與酒渣鼻、濕疹、牛皮癬、干燥癥、皮炎、痤瘡、壞疽性膿皮病、蕁麻疹、苔癬樣病癥、大皰性疾病如大皰性類(lèi)天皰瘡、皮膚血管炎、以及肉芽腫性皮膚疾病相關(guān)，該藥用組合物包含有效改進(jìn)該受試者的炎癥的至少一種特征(例如，減少病變的數(shù)目或尺寸、減輕發(fā)紅、并且減輕發(fā)癢)的量的抗IL-1 a Ab。該哺乳動(dòng)物受試者可以是患有皮膚炎癥的任何受試者，包括人、狗、貓、馬、牛、綿羊、山羊以及豬。人受試者可以是男性、女性、成人、兒童、老年人(65歲或更老)、以及患有其他疾病的那些。特別優(yōu)選的受試者是疾病已進(jìn)展的或用其他消炎或抗微生物劑治療后不能應(yīng)答的那些，這些其他消炎或抗微生物劑如類(lèi)視黃醇類(lèi)、抗生素類(lèi)、類(lèi)固醇類(lèi)或細(xì)胞因子抑制劑如TNFa抑制劑。當(dāng)該抗IL-1a Ab是真正的人Ab (例如，在人受試者中天然表達(dá)的Ab)如MABpl時(shí)，由于在先給予治療抗體而已發(fā)展人抗-人抗體應(yīng)答的受試者是優(yōu)選的。對(duì)用抗IL-1 a Ab的治療敏感的任何類(lèi)型的炎癥性皮膚疾病都可以作為靶標(biāo)。抗IL-1 a Ab給藥被認(rèn)為對(duì)治療尋常型痤瘡和尋常型牛皮癬特別有效。
靶向IL-1 α的抗體和其他藥劑
[0019]在本發(fā)明中可以使用任何適合類(lèi)型的特異性結(jié)合IL-1 α并且減輕受試者的皮膚炎癥和/或炎癥性皮膚疾病如尋常型痤瘡或?qū)こＰ团Ｆぐ_的特征的Ab。例如，所使用的抗IL-1 α可以是mAb、一種多克隆Ab、具有多種mAb的一種混合物、或一種Ab片段或工程化Ab樣分子如scFv。該Ab的Ka優(yōu)選至少是1 X IO9M4或更大(例如，大于9 X IOkT1J X 0O10M-17X 1010M-1、6x1010m-1、5x1010m-1、3x1010m-1、2x1010m-1'或 IXlO1H 在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，本發(fā)明利用一種全人mAb，該全人mAb包括(i)展示出對(duì)人IL-1a的非常高的結(jié)合親和力(例如，至少納摩爾級(jí)或皮摩爾級(jí))的抗原結(jié)合可變區(qū)和(ii)恒定區(qū)。該人Ab優(yōu)選地是一種I gGI，但它也可以是不同的同種型，如I gM、I gA、或I gE，或亞類(lèi)如I gG2、I gG3、或IgG4。特別有用的mAb的一個(gè)實(shí)例是MABpl，一種在2009年6月I日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)序列號(hào)12/455，458中描述的IL-1 α特異性IgGl mAb。其他有用的mAb是包括MABpl的多個(gè)⑶R的至少一種但優(yōu)選所有⑶R的那些。
[0020]由于表達(dá)對(duì)人IL-1 α具有特異性的Ig的B淋巴細(xì)胞在人類(lèi)中天然存在，所以目前用于產(chǎn)生mAb的優(yōu)選方法是:首先從受試者中分離這樣一種B淋巴細(xì)胞，并且然后使其永生化以使得它可以在培養(yǎng)物中連續(xù)復(fù)制。可以用一種或多種人IL-1a抗原使缺乏大量天然存在的表達(dá)對(duì)人IL-1 α具有特異性的Ig的B淋巴細(xì)胞的受試者免疫，以便提高這類(lèi)B淋巴細(xì)胞的數(shù)目。人mAb是通過(guò)使一種人Ab分泌細(xì)胞(例如，一種人漿細(xì)胞)永生化而制備的。參見(jiàn)，例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，634，664。
[0021 ] 在一個(gè)示例性方法中，從一個(gè)或多個(gè)(例如5個(gè)、10個(gè)、25個(gè)、50個(gè)、100個(gè)、1000個(gè)
或更多)人類(lèi)受試者中篩選這種人IL-1a特異性Ab在其血液中的存在。然后，那些表達(dá)希望的Ab的受試者可以被用作B淋巴細(xì)胞供體。在一個(gè)可能的方法中，從擁有表達(dá)人IL-1a特異性Ab的B淋巴細(xì)胞的人供體中獲得外周血。然后，從該血樣中分離這類(lèi)B淋巴細(xì)胞，例如通過(guò)細(xì)胞分選(例如熒光激活細(xì)胞分選，“FACS” ；或磁珠細(xì)胞分選)來(lái)選擇表達(dá)人IL-1 α特異性Ig的B淋巴細(xì)胞。然后，根據(jù)已知的技術(shù)，通過(guò)病毒轉(zhuǎn)化(例如使用EBV)或通過(guò)與另一種永生化細(xì)胞(如人骨髓瘤細(xì)胞)融合來(lái)使這些細(xì)胞永生化。然后，可以通過(guò)有限稀釋法(例如選擇并繼代培養(yǎng)在微量滴定板的孔中的對(duì)對(duì)人1L-1 α具有特異性的Ig呈陽(yáng)性的細(xì)胞，并且重復(fù)該過(guò)程直到可以分離希望的克隆系為止)分離表達(dá)對(duì)人1L-1 α具有特異性的Ig的在此群內(nèi)的B淋巴細(xì)胞。參見(jiàn)，例如，戈丁(Goding)，《單克隆抗體:原理與實(shí)踐》(MAbs:Principles and Practice),第 59-103 頁(yè)，學(xué)術(shù)出版社(Academic Press), 1986。那些表達(dá)對(duì)人IL-1 α具有至少納摩爾級(jí)的或皮摩爾級(jí)的結(jié)合親和力的Ig的克隆細(xì)胞系是優(yōu)選的?？梢酝ㄟ^(guò)常規(guī)Ig純化程序如鹽截留(salt cut)、尺寸排阻、離子交換分離、以及親和色譜法從培養(yǎng)基或體液(例如腹水)中純化由這些克隆細(xì)胞系分泌的MAb。
[0022]雖然永生化的B淋巴細(xì)胞可以用于體外培養(yǎng)以直接產(chǎn)生mAb，但在某些情況下，可能令人希望的是使用異源表達(dá)系統(tǒng)來(lái)產(chǎn)生mAb。參見(jiàn)，例如美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/754,899中描述的方法。例如，可以將編碼對(duì)人IL-1a具有特異性的mAb的基因克隆并且引入到表達(dá)載體(例如，基于質(zhì)粒的表達(dá)載體)中以用于在異源宿主細(xì)胞(例如，CHO細(xì)胞、COS細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、以及大腸桿菌細(xì)胞)中表達(dá)。由于Ig包括重(H)鏈和輕(L)鏈(在一種H2L2構(gòu)型中)，所以可以將編碼每個(gè)鏈的基因分別分離并在不同載體中表達(dá)。
[0023]雖然由于受試者將發(fā)展一種抗Ab應(yīng)答的可能性更大所以通常是次優(yōu)選的，但嵌合mAb (例如，“人源化”mAb)可以在本發(fā)明中使用，該嵌合mAb是具有源于不同動(dòng)物種類(lèi)的不同部分(例如，與一種人Ig的恒定區(qū)融合的一種小鼠Ig的可變區(qū))的抗原結(jié)合分子。這類(lèi)嵌合Ab可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法來(lái)制備。參見(jiàn),例如莫里森(Morrison)等人，《美國(guó)科學(xué)院院刊》(Proc.Nat，1.Acad.Sc1.USA), 81:6851, 1984 ;紐伯格(Neuberger)等人，《自然》(Nature)，312:604，1984 ;武田(Takeda)等人，《自然》(Nature)，314:452，1984。類(lèi)似地，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法將Ab人源化。例如，可以通過(guò)不同供應(yīng)商或如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，693，762 ;5，530，101 ;或5，585，089中所述，將具有希望的結(jié)合特異性的mAb人源化。
[0024]可以通過(guò)已知的方法使在此所述的mAb親和力成熟，以增強(qiáng)或以另外的方式改變它們的結(jié)合特異性，這些方法如VH和VL結(jié)構(gòu)域改組(馬克思(Marks)等人，《生物/技術(shù)》(Bio/Technology) 10:779-783，1992)、高變區(qū)(HVR)和/或框架殘基的隨機(jī)突變(巴巴斯(Barbas)等人，《美國(guó)科學(xué)院院刊》，91:3809-3813，1994 ;施爾(Schier)等人，《基因》(Gene) 169:147-155，1995 ;耶爾頓(Yelton)等人，《免疫學(xué)雜志》(J.1mmunol.)155:1994-2004, 1995 ; 杰克遜(Jackson)等人，《免疫學(xué)雜志》154 (7): 3310-9，1995 ;以及霍金斯(Hawkins)等人，《分子生物學(xué)雜志》(J.Mol.Biol.>226:889-896, 1992)。一種Ab的氨基酸序列變體可以通過(guò)將適當(dāng)?shù)淖兓刖幋a該Ab的核苷酸序列中來(lái)制備。此外，可以改變編碼mAb的核酸序列的修飾(例如，不改變?cè)搈Ab的氨基酸序列)以用于增強(qiáng)該mAb在某些表達(dá)系統(tǒng)中的產(chǎn)生(例如，針對(duì)一種給定的表達(dá)系統(tǒng)的內(nèi)含子去除和/或密碼子優(yōu)化)。還可以通過(guò)與另一種蛋白(例如，另一種mAb)或非蛋白分子偶聯(lián)來(lái)修飾在此所述的mAb。例如，可以將一種mAb與一種水溶性聚合物(如聚乙二醇)或碳納米管偶聯(lián)(參見(jiàn)，例如卡姆(Kam)等人，《美國(guó)科學(xué)院院刊》102:11600-11605,2005)。參見(jiàn)，美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/754,899。
[0025]優(yōu)選地，為了確保伴隨最小的副作用將高效價(jià)的人IL-1 α特異性mAb給予受試者，本發(fā)明的mAb組合物的純度按重量計(jì)為至少0.5%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、99.9%或更高百分比(不包括任何賦形劑)。本發(fā)明的mAb組合物可以?xún)H包括單一類(lèi)型的mAb (B卩，由單個(gè)克隆B淋巴細(xì)胞系產(chǎn)生的mAb)或可以包括兩種或更多種(例如，2、
3、4、5、6、7、8、9、10或更多種)不同類(lèi)型的mAb的混合物。
[0026]為了修飾或增強(qiáng)它們的功能，人IL-1a mAb可以與另一種分子(如細(xì)胞毒素)偶聯(lián)。一種人IL-1 α特異性mAb可以與一種或多種細(xì)胞毒素偶聯(lián)以更有效地殺死表達(dá)IL-1 a的細(xì)胞。用于本發(fā)明的細(xì)胞毒素可以是可以與人IL-1 α特異性mAb偶聯(lián)的任何細(xì)胞毒性齊U(例如，在接觸細(xì)胞后可以殺死該細(xì)胞的分子)。細(xì)胞毒素的實(shí)例包括但不限于:放射性核素(例如，35S、14C、32P、1251、m1、9°Y、89Zr、2CllTl、186Re、188Re、57Cu、213B1、以及 211At)、偶聯(lián)的放射性核素、以及化學(xué)治療劑。細(xì)胞毒素另外的實(shí)例包括但不限于:抗代謝藥(例如，5-氟尿嘧啶(5-FU)、甲氨蝶呤(MTX)、氟達(dá)拉濱，等)、抗微管劑(例如，長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、秋水仙堿、紫杉烷(如紫杉醇和多西他賽)，等)、烷化劑(例如，環(huán)磷酰胺、美法侖、雙氯乙基亞硝基脲(BCNU)，等)、鉬劑(例如，順鉬(也稱(chēng)為cDDP)、卡鉬、奧沙利鉬、JM-216、C1-973，等)、蒽環(huán)類(lèi)(例如，多柔比星、柔紅霉素，等)、抗生素劑(例如，絲裂霉素C)、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如，依托泊苷、替尼泊苷、和喜樹(shù)堿)、或其他細(xì)胞毒性劑如蓖麻毒素、白喉毒素(DT)、假單胞菌外毒素(PE) A、PE40、相思豆毒素、肥皂草素、美洲商陸病毒蛋白、溴化乙錠、糖皮質(zhì)激素、炭疽毒素以及其他。參見(jiàn)，例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，932，188。
[0027]雖然上述IL-1 α特異性Ab優(yōu)選用于本發(fā)明，但在一些情況下可以使用特異性靶向IL-1ci的其他藥劑，只要給予它們引起炎癥性皮膚疾病的特征的改進(jìn)即可。這些其他藥劑可以包括引起抗IL-1a Ab的產(chǎn)生的疫苗、結(jié)合IL-1a的蛋白質(zhì)或肽、以及特異性靶向IL-1a的小有機(jī)分子。不特異性結(jié)合特異性靶向IL-1 β的其他藥劑的那些是優(yōu)選的。
藥用組合物和方法
[0028]可以在藥學(xué)上可接受的載體(例如，無(wú)菌生理鹽水)中向動(dòng)物或人給予該抗IL-1 aAb組合物(以及特異性靶向IL-1a的其他藥劑)，這些載體是基于給藥的模式和途經(jīng)以及標(biāo)準(zhǔn)藥物規(guī)程而選擇的。藥學(xué)上可接受的載體連同藥物配制品的清單可以在本領(lǐng)域內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)文本的《雷明頓氏藥物科學(xué)》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)以及在USP/NF中找到。可以向這些組合物中添加其他物質(zhì)，并且采取其他步驟來(lái)穩(wěn)定和/或保存這些組合物、和/或促進(jìn)將它們對(duì)受試者的給藥。
[0029]例如，這些Ab組合物可以是凍干的(參見(jiàn)德拉波爾(Draber)等人，《免疫學(xué)方法期刊》(J.1mmunol.Methods.) 181:37，1995 ;和 PCT/US90/01383);溶于包含鈉離子和氯離子的溶液中；溶于包含一種或多種穩(wěn)定劑(如白蛋白、葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、山梨醇、聚乙二醇、和甘氨酸)的溶液中；過(guò)濾(例如，使用0.45μπι和/或0.2μπι過(guò)濾器)；與β-丙內(nèi)酯相接觸；和/或溶于包 含一種殺微生物劑(例如，一種去污劑、一種有機(jī)溶劑、以及一種去污劑與有機(jī)溶劑的混合物)的溶液中。
[0030]可以通過(guò)任何適合的技術(shù)向動(dòng)物或人給予該Ab組合物。典型地，這種給予將是腸胃外的(例如，靜脈內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、或者腹膜內(nèi)引入)。還可以通過(guò)例如局部施用直接向目標(biāo)部位(例如皮膚)給予這些組合物。其他遞送方法，例如脂質(zhì)體遞送或從浸潰有該組合物的一種裝置擴(kuò)散，在本領(lǐng)域中是已知的。該組合物可以按單次團(tuán)注、多次注射、或通過(guò)連續(xù)輸注(例如，靜脈內(nèi)或通過(guò)腹膜透析)來(lái)給予。
[0031]治療有效量是能夠在治療的動(dòng)物或人體內(nèi)產(chǎn)生醫(yī)學(xué)上希望的結(jié)果的量。抗IL-1aAb組合物的有效量是如通過(guò)皮膚炎癥的一個(gè)或多個(gè)癥狀的改進(jìn)所測(cè)量的在患者中顯示出臨床功效的量。如在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域所熟知的，對(duì)于任何一種動(dòng)物或人的劑量取決于很多因素，包括受試者的體型、體表面積、年齡、待給予的具體組合物、性別、給予的時(shí)間和途徑、全身健康狀況、以及同時(shí)給予的其他藥物。優(yōu)選劑量的范圍是從約0.1至5(例如，0.05,0.1,0.15、
0.2、0.3、0.4、0.5、1、2、3、4、5、或6) mg/kg體重。在一些情況下，單次劑量對(duì)于解決皮膚炎癥事件有效。在其他情況下，可以例如，每半周一次、每周一次、每?jī)芍芤淮巍⒚咳芤淮?、每半月一次、每三周一次、每月一次、每?jī)稍乱淮位虬凑招枰?如果皮膚炎癥復(fù)發(fā))來(lái)重復(fù)給予劑量。
實(shí)例
[0032]實(shí)例l-Xilonix?
[0033]Xilonix?是一種在 穩(wěn)定的等滲緩沖液(ρΗ6.4)中的15mg/mL的MABpl的無(wú)菌可注射液體配制品。每個(gè)IOmL的I型硼硅玻璃血清瓶含有5mL該配制品，并用一種20mm的Daikyo Flurotec的丁基橡膠塞和翻轉(zhuǎn)鋁密封件密封。將該產(chǎn)品儲(chǔ)存在5°C ±3°C下，允許偏移至室溫。該藥品的確切組成如下所 示:
【權(quán)利要求】
1.選擇性結(jié)合IL-1α的藥劑治療受試者的皮膚炎癥的用途。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中該藥劑是一種抗IL-1a抗體。
3.如權(quán)利要求2所述的用途，其中該抗IL-1a抗體是一種單克隆抗體。
4.如權(quán)利要求3所述的用途，其中該單克隆抗體是一種IgGl。
5.如權(quán)利要求3所述的用途，其中該單克隆抗體包含MABpl的一個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)。
6.如權(quán)利要求3所述的用途，其中該單克隆抗體是MABpl。
7.如權(quán)利要求1所述的用途，其中該皮膚炎癥是與尋常型痤瘡相關(guān)的。
8.如權(quán)利要求1所述的用途，其中該皮膚炎癥是與尋常型牛皮癬相關(guān)的。
9.一種用于治療受試者的皮膚炎癥的藥用組合物，該組合物包含選擇性結(jié)合IL-1 α的一種藥劑。
10.如權(quán)利要求9所 述的藥用組合物，其中該藥劑是一種抗IL-1d抗體。
11.如權(quán)利要求10所述的藥用組合物，其中該抗IL-1α抗體是一種單克隆抗體。
12.如權(quán)利要求11所述的藥用組合物，其中該單克隆抗體包含MABpl的一個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)。
13.如權(quán)利要求12所述的藥用組合物，其中該單克隆抗體是MABpl。
14.如權(quán)利要求9所述的藥用組合物，其中該皮膚炎癥是與尋常型痤瘡相關(guān)的。
15.如權(quán)利要求9所述的藥用組合物，其中該皮膚炎癥是與尋常型牛皮癬相關(guān)的。
【文檔編號(hào)】A61P29/00GK103442733SQ201280014013
【公開(kāi)日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2012年4月2日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月1日
【發(fā)明者】J·西馬德 申請(qǐng)人:?？怂股锟萍脊?br>