降低隱形眼鏡存儲(chǔ)盒中微生物生長(zhǎng)的方法
【專利摘要】一種對(duì)具有蓋子(101)的隱形眼鏡存儲(chǔ)盒(104)進(jìn)行消毒的方法(300)，該方法包括如下步驟：用所述蓋子封閉所述盒子的所述空腔(113)的步驟(313)；以及在大約60攝氏度下對(duì)所述盒子進(jìn)行大約3小時(shí)的加熱而主動(dòng)地干燥所述盒子的步驟(315)。
【專利說明】降低隱形眼鏡存儲(chǔ)盒中微生物生長(zhǎng)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明一般涉及一種隱形眼鏡、它們相關(guān)的存儲(chǔ)盒以及衛(wèi)生處理方式，并且特別地，涉及一種用于降低隱形眼鏡存儲(chǔ)盒(下文中被稱為隱形眼鏡存儲(chǔ)盒、存儲(chǔ)盒或者盒子)中微生物生長(zhǎng)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隱形眼鏡(下文中簡(jiǎn)稱為眼鏡)變得越來越普遍。而伴隨其的是細(xì)菌性角膜炎和其它眼睛傳染病的發(fā)生相應(yīng)增加。
[0003]不適當(dāng)?shù)暮凶有l(wèi)生已經(jīng)被確定為是與發(fā)展眼睛傳染病的顯著增加的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的一個(gè)因素，并且目前使用若干方法以改善盒子衛(wèi)生。
[0004]一種這樣方法是使用消毒液來降低附著到隱形眼鏡上的微生物和其它雜質(zhì)粒子的水平。在另一方案中，將隱形眼鏡用銀離子浸泡以降低在盒子表面上的污染。另一方式(參見W02010/111744A1)涉及主動(dòng)地干燥盒子，蓋子定位在與盒子鄰近的夾子中，以防止在干燥過程期間以及在隨后的盒子的使用之間的存儲(chǔ)周期期間空氣浮塵、微生物和霉菌孢子進(jìn)入盒子中，從而降低盒子中植物群和動(dòng)物群的生長(zhǎng)。術(shù)語(yǔ)“主動(dòng)地干燥”是指通過加熱盒子至一定的溫度而對(duì)隱形眼鏡存儲(chǔ)盒進(jìn)行干燥，當(dāng)與在環(huán)境溫度和濕度下被動(dòng)地干燥盒子相比時(shí)，這顯著降低了盒子和相關(guān)的蓋子的干燥時(shí)間。
[0005]然而，盡管上述方案的可用性，以及由醫(yī)學(xué)和眼鏡專家常規(guī)地告知眼鏡佩戴者關(guān)于如何護(hù)理他們的盒子的 建議，但是研究證明76%~92%的盒子被污染達(dá)到使眼睛傳染病發(fā)生的程度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于基本上克服或者至少改善現(xiàn)有方案的一個(gè)或者多個(gè)缺點(diǎn)。
[0007]公開了被稱為封閉盒子干燥(即0CD)裝置的裝置，其設(shè)法通過用盒子的蓋子封閉隱形眼鏡盒的空腔同時(shí)主動(dòng)地干燥盒子來解決上述問題。
[0008]本說明書中的術(shù)語(yǔ)“封閉”包括:在其范圍內(nèi)，將蓋子擱在盒子上，從而阻擋或者隱藏盒子的空腔，部分地將蓋子和盒子接合，以及完全地將蓋子和盒子接合。
[0009]根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了一種對(duì)具有蓋子的隱形眼鏡存儲(chǔ)盒進(jìn)行消毒的方法，所述方法包括如下步驟:用所述蓋子封閉所述盒子的空腔；并且然后通過在大約60攝氏度下對(duì)所述盒子進(jìn)行大約3小時(shí)的加熱而主動(dòng)地干燥所述盒子。
[0010]也公開了本發(fā)明的其它方面。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]現(xiàn)在將參照附圖和附錄描述本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施方式，附圖中:
[0012]圖1A至圖1C示出了用于主動(dòng)地干燥眼鏡盒的現(xiàn)有技術(shù)設(shè)備；
[0013]圖2示出了根據(jù)公開的OCD方法的用于對(duì)隱形眼鏡存儲(chǔ)盒進(jìn)行消毒的設(shè)備；[0014]圖3是根據(jù)本公開的用于對(duì)具有蓋子的隱形眼睛存儲(chǔ)盒進(jìn)行消毒的方法的流程圖；
[0015]圖4是圖2所繪的O⑶裝置的藝術(shù)再現(xiàn)；
[0016]附錄A是來自于一項(xiàng)臨床研究的報(bào)告， 申請(qǐng)人:在多種條件下對(duì)存儲(chǔ)盒內(nèi)的微生物污染水平進(jìn)行測(cè)試；以及
[0017]附錄B列出了臨床研究協(xié)議的流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018]其中，參考附圖中的任一個(gè)或多個(gè)附圖中的步驟和/或特征，其具有相同的附圖標(biāo)記，為了描述目的那些步驟和/或特征具有相同的功能或者操作，除非出現(xiàn)相反的意圖。
[0019]圖1A至IC示出了用于主動(dòng)地干燥眼鏡盒的現(xiàn)有技術(shù)設(shè)備。
[0020]圖1A描述了隱形眼鏡存儲(chǔ)盒104和相關(guān)的蓋子101。當(dāng)要存儲(chǔ)眼鏡時(shí)，隱形眼鏡(未示出)可被放入盒子104的井部(也稱為空腔)113中。蓋子101具有螺紋102，當(dāng)蓋子101附著到盒子104上時(shí)，螺紋102與盒子104上的螺紋103接合以便封閉盒子104。
[0021]圖1B描繪了具有空腔108的設(shè)備110，其表面與盒子104的外部表面共形。因此，當(dāng)加熱元件109由設(shè)備110中的電源/控制系統(tǒng)111啟動(dòng)時(shí)，在盒子104已經(jīng)插入空腔108之后，期望數(shù)量的加熱能量能夠精確地且重復(fù)地被施加至盒子104，以便主動(dòng)地干燥盒子104。垂直構(gòu)件107、114附著到設(shè)備110的側(cè)面，垂直構(gòu)件107、114具有各自的水平構(gòu)件106和105，這些水平構(gòu)件充當(dāng)用于支撐盒子104的蓋子101的環(huán)架，如關(guān)于圖1C和圖4更詳細(xì)地描述的。
[0022]圖1C描繪了具有盒子104的設(shè)備110，所述盒子插入設(shè)備110的空腔108中。蓋子101的邊緣被支撐在由水平構(gòu)件106形成的環(huán)架上，為了清楚起見已經(jīng)從圖1C省除了另一個(gè)垂直構(gòu)件114和相關(guān)的水平構(gòu)件105。該裝置方便地將蓋子101支撐在盒子104中的空腔113的上方，以便允許蓋子通過對(duì)流進(jìn)行干燥，并且以便保護(hù)盒子104免于進(jìn)入空氣浮塵、微生物以及霉菌孢子。
[0023]圖4示出了在圖1C中所示的裝置的藝術(shù)再現(xiàn)。
[0024]要注意的是，包含在“【背景技術(shù)】”部分的討論和上面與現(xiàn)有技術(shù)裝置相關(guān)的段落涉及通過它們各自的公布和/或使用而可以形成公知常識(shí)的文件或者裝置的討論。這樣的討論并不通過本
【發(fā)明者】或者專利 申請(qǐng)人:表示:這樣文件或者裝置以任何方式形成本領(lǐng)域公知常識(shí)的一部分。
[0025]本 申請(qǐng)人:已進(jìn)行了臨床研究以測(cè)試已被主動(dòng)干燥的存儲(chǔ)盒內(nèi)的微生物污染水平。所述研究包括的如下實(shí)驗(yàn):
[0026]確定加熱存儲(chǔ)盒的最有效的操作溫度以便顯著降低微生物活性；
[0027]1.比較在相同的操作溫度下操作的主動(dòng)干燥裝置(諸如110)與培養(yǎng)箱的性能；
[0028]2.比較在蓋子離開容器時(shí)對(duì)比在蓋子擱在其頂部上，部分地或者完全地與它們相應(yīng)的螺紋接合時(shí)，主動(dòng)干燥存儲(chǔ)盒的殺菌效果；
[0029]3.比較主動(dòng)干燥存儲(chǔ)盒對(duì)比使用市場(chǎng)上可買到的多功能隱形眼鏡消毒液(MPDS)的控制的殺菌效果；以及
[0030]4.在遵循多功能消毒液生產(chǎn)商推薦的處理方式之后，確定主動(dòng)地干燥存儲(chǔ)盒的殺囷效果；
[0031]附錄B列出了臨床研究協(xié)議的流程圖。
[0032]來自于臨床研究的結(jié)果(完工報(bào)告合并在附錄A中)確定如下:
[0033]1.根據(jù)所測(cè)試的3個(gè)溫度(14°C、45°C以及60°C)的預(yù)期值，在3個(gè)小時(shí)的時(shí)段內(nèi)將存儲(chǔ)盒加熱到60°C是顯著降低微生物活性的最有效的溫度；
[0034]2.根據(jù)預(yù)期，雖然利用主動(dòng)干燥裝置干燥的盒子沒有獲得與培養(yǎng)箱在降低微生物活性方面相同的非常高水平的功效，培養(yǎng)它們確實(shí)顯著降低了微生物的活性；
[0035]3.出乎意料地，在蓋子離開的情況下干燥存儲(chǔ)盒不與在蓋子擱在其頂部上、部分地或完全地與它們的相應(yīng)的螺紋接合的情況下干燥存儲(chǔ)盒一樣有效；
[0036]4.如所期望預(yù)期的，與市場(chǎng)上可得到買到的多功能隱形眼鏡消毒液相比，主動(dòng)存儲(chǔ)盒干燥裝置在降低微生物活性方面更加有效；以及
[0037]5.出乎意料地，將生產(chǎn)商推薦的、市場(chǎng)上可買到的MPDS治理方案和主動(dòng)干燥方法結(jié)合，導(dǎo)致在降低微生物活性方面顯著改善的效果；而并不能預(yù)期其降低的水平。
[0038]結(jié)果1、2和4很大程度上滿足預(yù)期。結(jié)果3和5是令人驚訝的且是完全想不到的。
[0039]更特別地，與分別干燥存儲(chǔ)盒和相關(guān)的蓋子相比，干燥其上帶有蓋子的存儲(chǔ)盒顯著地更加有效。此外，將MPDS方式的使用和隨后的主動(dòng)干燥結(jié)合導(dǎo)致顯著改善的性能；從而將微生物活性降低至可測(cè)閾值以下。
[0040]圖2示出了根據(jù)OCD方法用于對(duì)隱形眼鏡存儲(chǔ)盒進(jìn)行消毒的設(shè)備208。所述設(shè)備208與圖1中所繪的設(shè)備相似，然而，如下所述，在使OCD方法能夠?qū)嵤┓矫?，存在顯著差異。所述設(shè)備208具有空腔207，該空腔207的表面與盒子205的外部表面共形。因此，當(dāng)加熱元件204由設(shè)備208中的電源/控制系統(tǒng)啟動(dòng)時(shí)，在盒子205已插入空腔207之后，期望數(shù)量的加熱能量能夠精確地并且重復(fù)地施加至盒子205，以便對(duì)盒子205進(jìn)行消毒。與圖1B中的設(shè)備110形成對(duì)比，不存在具有水平構(gòu)件的垂直構(gòu)件，該水平構(gòu)件充當(dāng)用于保持盒子205的蓋子201的環(huán)架。相反地，通過(a)將蓋子201擱在盒子205的頂部，或者(b)部分地或者(c)完全地將蓋子201的螺紋203與盒子205的相應(yīng)的螺紋202接合，可以將蓋子201定位成“封閉”盒子205的空腔209。
[0041]已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，出乎意料地，對(duì)具有如上所述封閉盒子205的空腔209的蓋子201的盒子205進(jìn)行消毒大大地改善了 MPDS的功效，并且導(dǎo)致將微生物活性降低至可測(cè)閾值以下。此外，在使用MPDS處理方式之后，根據(jù)OCD方法對(duì)盒子進(jìn)行消毒顯著改善了 MPDS對(duì)盒子的抗菌效果。更特別地，通過在60°C的溫度下對(duì)具有封閉盒子205的空腔的蓋子201的盒子205進(jìn)行大約3個(gè)小時(shí)的時(shí)段的加熱而對(duì)盒子進(jìn)行消毒是非常有效的。其它的時(shí)間段和溫度設(shè)定也能夠用于O⑶方法。[0042]圖3是用于根據(jù)公開的O⑶方法對(duì)具有蓋子201的隱形眼鏡存儲(chǔ)盒205進(jìn)行消毒的方法300的流程圖。所述方法300從開始步驟301開始，然后跟隨箭頭302進(jìn)入步驟303。在步驟303中，用戶將隱形眼鏡放入盒子205的空腔209中。根據(jù)推薦的程序，在步驟303中，在盒子的空腔中沉積預(yù)定體積的MPDS。所述過程300然后跟隨箭頭304進(jìn)入步驟305。在步驟305中，用戶將蓋子201緊緊地固定到盒子205。然后，所述過程300跟隨箭頭306進(jìn)入步驟307。在步驟307中，盒子、盒子中的隱形眼鏡、消毒液和蓋子經(jīng)受由消毒液的生產(chǎn)商指定的時(shí)間/溫度曲線圖。然后，所述過程300跟隨箭頭308進(jìn)入步驟309。在步驟309中，用戶從盒子中移除隱形眼鏡。然后，所述過程300跟隨箭頭310進(jìn)入步驟311。在步驟311中，用戶搖出消毒液。用戶沒有沖洗干凈盒子，或者手動(dòng)地干燥盒子。然后，所述過程300跟隨箭頭312進(jìn)入步驟313。在步驟313中，用戶通過將蓋子擱在盒子的頂部，或者部分地或完全地將蓋子的螺紋與盒子上的它們相應(yīng)的螺紋接合，來封閉盒子的空腔。然后，所述過程300跟隨箭頭314進(jìn)入步驟315。在步驟315中，在大約60°C下對(duì)盒子進(jìn)行大約3個(gè)小時(shí)的時(shí)段的消毒。然后，所述過程300跟隨箭頭316進(jìn)入步驟317，在這個(gè)時(shí)候盒子準(zhǔn)備好重新使用。
[0043]附錄A是來自于臨床研究的報(bào)告，在多種條件下 申請(qǐng)人:對(duì)存儲(chǔ)盒內(nèi)的微生物污染水平進(jìn)行了測(cè)試。
[0044]附錄B列出了臨床研究協(xié)議的流程圖。
[0045]工業(yè)應(yīng)用性
[0046]上述裝置可應(yīng)用于隱形眼鏡工業(yè)。
[0047]上文僅僅描述了本發(fā)明的一些實(shí)施方式，并且在不偏離本發(fā)明的范圍和精神的條件下，可以對(duì)其進(jìn)行修改和/或改變，所述實(shí)施方式是說明性的而不是限制性的。
[0048]因此，能夠指定其它溫度范圍和時(shí)間間隔，以便在特殊情況下使OCD過程優(yōu)化。除其它的考慮因素外，所述情況可能取決于針對(duì)MPDS指定的處理方式，所利用的主動(dòng)干燥裝置等等。此外，為了封閉盒子的空腔，盒子和蓋子的接合能夠利用如所述的螺紋或者其它接合方法(諸如互補(bǔ)的壓配合表面)而實(shí)現(xiàn)。
[0049]附錄A`[0050]臨床研究報(bào)告
[0051]加溫隱形眼鏡(warm contact)報(bào)告
[0052]
報(bào)告ID:__終稿I__
研究題目:測(cè)試“加溫隱形眼鏡裝置”在降低隱形眼鏡盒中活菌數(shù)量方
__面的有效性_
贊助商:__Warm Contact Pty Ltd_
調(diào)查研究產(chǎn)品的名市場(chǎng)上可買到的隱形眼鏡盒
M__
研究的指示為確定加溫隱形眼鏡裝置殺死綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌
__的生物膜的能力_
研究開始日期:2010年11月
研究完成日期:2011年3月_
報(bào)告日期2011年3月
制表人:__Ajay Kumar Vijay、Hua Zhu、Mark Willcox_
[0053]目錄
[0054]目錄................................................................2
[0055]執(zhí)行摘要............................................................3
[0056]前言................................................................4
[0057]材料和方法..........................................................5
[0058]細(xì)菌菌株的生長(zhǎng)...................................................5[0059]實(shí)驗(yàn)1:確定在隱形眼鏡中生成堅(jiān)固生物膜的最佳培養(yǎng)時(shí)間..............5
[0060]實(shí)驗(yàn)2:確定用于引起堅(jiān)固生物膜的最佳介質(zhì)..........................5
[0061]實(shí)驗(yàn)3:生物膜形成之后，在14°C、45°C或者60°C溫度下培養(yǎng)的效果......5
[0062]實(shí)驗(yàn)4:在干燥期間覆蓋隱形眼鏡盒的效果............................5
[0063]實(shí)驗(yàn)5:與加溫隱形眼鏡裝置相比，在培養(yǎng)器中在60°C下的培養(yǎng)的效果....6
[0064]實(shí)驗(yàn)6:與多功能消毒液(Alcon Optifree RepleniSH)結(jié)合的加溫隱形眼鏡裝置后的效果...........................................................6
[0065]從生物膜回收細(xì)菌細(xì)胞.............................................6
[0066]統(tǒng)計(jì)分析..........................................................6
[0067]結(jié)果:.............................................................7
[0068]確定在隱形眼鏡盒中生成堅(jiān)固生物膜的最佳培養(yǎng)時(shí)間...................7
[0069]圖1是在24或者48小時(shí)培養(yǎng)期間通過金黃色葡萄球菌31的生物膜形成........7
[0070]確定引起堅(jiān)固生物膜的最佳介質(zhì).....................................7
[0071]圖2介質(zhì)(TSB的 稀釋物)對(duì)由金黃色葡萄球菌生成的生物膜的量的影響.......8
[0072]生物膜形成之后，在50°C或者60°C下培養(yǎng)的效果.......................8
[0073]圖3干燥溫度對(duì)金黃色葡萄球菌31的可回收的活菌細(xì)胞的數(shù)量的影響........8
[0074]在干燥期間覆蓋隱形眼鏡盒的效果...................................9
[0075]與加溫隱形眼鏡裝置相比，在培養(yǎng)器中在60°C下在培養(yǎng)的效果.............9
[0076]圖4是在60°C下與培養(yǎng)器相比的加溫隱形眼鏡裝置的有效性的比較..........9
[0077]與多功能消毒液結(jié)合的加溫隱形眼鏡裝置后的效果....................10
[0078]圖5是與多功能消毒液結(jié)合的加溫隱形眼鏡裝置后的有效性...............10
[0079]結(jié)論..............................................................11
[0080]參考文獻(xiàn)..........................................................12
[0081]附錄-原始數(shù)據(jù).....................................................14
[0082]執(zhí)行摘要
[0083]已經(jīng)設(shè)定了適當(dāng)?shù)脑O(shè)定條件，該研究顯示出:當(dāng)設(shè)定成在60°C下輸送3小時(shí)時(shí)，加溫隱形眼鏡裝置能夠顯著改善多功能消毒液(Optifree RepleniSH)的性能,從而給予全部殺死隱形眼鏡盒中的綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌的生物膜。然而，隱形眼鏡衛(wèi)生的常規(guī)程序是:即，移除溶液、并且在較低的溫度(14°C )下干燥、在眼鏡盒井部中留下兩種細(xì)菌類型的超過1000菌落形成單位。所使用的研究臨床分離綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌，在前述研究中所述兩種菌已經(jīng)被示出用于生成堅(jiān)固的生物膜。另外，加溫隱形眼鏡裝置在整個(gè)測(cè)試程序中可靠地執(zhí)行。
[0084]前言
[0085]在眼鏡佩戴期間，隱形眼鏡的微生物污染，特別是細(xì)菌污染，將隱形眼鏡佩戴者置于發(fā)生不良事件的危險(xiǎn)中。這些不良事件的范圍從嚴(yán)重的且罕見的細(xì)菌性角膜炎(眼角膜感染；在日常佩戴日程1_5中，如果佩戴眼鏡，則這發(fā)生的概率為大約4/10000佩戴者)，到不太嚴(yán)重而更加常見的隱形眼鏡誘發(fā)的急性紅眼病(CLARE)和隱形眼鏡誘發(fā)的外周性潰瘍(CLPU)，它們發(fā)生的概率分別達(dá)到12/100佩戴者和12/100佩戴者5_9。引發(fā)這些事件的微生物最常見的是細(xì)菌，其中綠膿桿菌通常與細(xì)菌性角膜炎的盒子隔離，革蘭氏陰性菌和金黃色葡萄球菌與CLPU7’8’^1隔離，是革蘭氏陽(yáng)性菌。
[0086]流行病學(xué)調(diào)查顯示出，在日常佩戴隱形眼鏡期間，對(duì)于細(xì)菌性角膜炎，與該疾病相關(guān)的危險(xiǎn)因素包括罕見的眼鏡消毒1(1_12、不遵照衛(wèi)生方式13、以及盒子清潔減少14。較差的存儲(chǔ)盒衛(wèi)生與發(fā)生細(xì)菌性角膜炎的3.7倍的增加的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)15。此外，隱形眼鏡存儲(chǔ)盒的微生物污染也與眼角膜中的無菌滲透物相關(guān)16。[0087]在給予隱形眼鏡佩戴者關(guān)于如何護(hù)理他們的眼鏡盒的建議中存在差異17，并且這可能歸因于缺乏盒子衛(wèi)生。實(shí)際上，研究表明，當(dāng)在臨床研究或者在社區(qū)中從眼鏡佩戴者收集時(shí)，在53%~92%之間的盒子受到感染17_22。即使在多功能消毒液中使用較新的雙消毒系統(tǒng)(例如，美國(guó)德克薩斯州沃斯堡的Alcon Laboratories Inc.的OptifreeRepleniSH)，并且即使在臨床試驗(yàn)的緊密地可控條件下，也會(huì)發(fā)生這些水平的眼鏡盒污染23O與隱形眼鏡盒隔離的細(xì)菌數(shù)量的范圍為從每眼鏡盒幾百至超過每眼鏡盒60000菌落形成單位23。
[0088]因此，需要提供更好性能的消毒液和/或衛(wèi)生系統(tǒng)，其將會(huì)降低在正常使用期間眼鏡盒的污染，并且可能降低由微生物激勵(lì)的不良事件的發(fā)生概率。Warm Contact PtyLtd(澳大利亞堪培拉)已經(jīng)開發(fā)了一種專利的加熱裝置，其可用于加熱隱形眼鏡盒。在盒子未用于對(duì)隱形眼鏡進(jìn)行消毒時(shí)(即，當(dāng)眼鏡被佩戴時(shí))的時(shí)段期間，該裝置用于加熱眼鏡盒。此處，我們調(diào)查研究了這一假設(shè)，即，該加溫程序?qū)?huì)導(dǎo)致增加的滅菌水平。
[0089]材料和方法:
[0090]菌株的生長(zhǎng):
[0091]綠膿桿菌071 (入選理由:其與細(xì)菌性角膜炎隔離并且其是良好的生物膜生產(chǎn)者)24和金黃色葡萄球菌31 (入選理由:其與隱形眼鏡誘發(fā)的外周性潰瘍隔離，并且其是良好的生物膜的生產(chǎn)者)25從凍存原種重新生長(zhǎng)到巧克力血瓊脂(CBA;0Xoid，澳大利亞，阿德萊德市，SA)板上并且在37°C下培養(yǎng)一整夜。隨后，使用無菌環(huán)從板中刮掉細(xì)菌，并且使細(xì)菌在無菌磷酸鹽緩沖鹽水(PB5 ;NaC18g/L、KC10.2g/L、Na2HPO4L 15g/L、KH2PO40.2g/L ；pH7.2)中重新懸浮，并且通過離心分離洗滌細(xì)菌。小球然后重新懸浮在胰酶解大豆酪蛋白肉湯的濃縮物(TSB ;0xoid，澳大利亞):PBS中。然后，細(xì)菌細(xì)胞的數(shù)量被調(diào)整至0.100(其等于1.0X IO8菌落形成單位)CFU/ml的光密度(OD)。然后，其連續(xù)地在TSB/PBS溶液中進(jìn)行稀釋以獲得針對(duì)每個(gè)菌株的1.0X106CFU/ml的最終接種物強(qiáng)度。
[0092]實(shí)驗(yàn)1:確定在隱形眼鏡盒中生成堅(jiān)固生物膜的最佳培養(yǎng)時(shí)間
[0093]為了誘發(fā)通過細(xì)菌的菌株在隱形眼鏡盒的表面上形成的生物膜，將細(xì)菌細(xì)胞(參見上述，2ml的1.0X 106CFU/ml)添加至新眼鏡盒的井部中(Alcon Laboratories Inc.(Alcon實(shí)驗(yàn)室公司))，眼鏡盒被松散地覆蓋并且在溫和搖動(dòng)的情況下在37°C下培養(yǎng)24或者48小時(shí)。初始測(cè)試針對(duì)金黃色葡萄球菌31僅使用的1: 10的TSB: PBS0在形成生物膜之后，介質(zhì)被移除并且眼鏡盒用PBS沖洗或者被允許在50°C下干燥3小時(shí)。實(shí)驗(yàn)也在I: 100的TSB: PBS中利用綠膿桿菌71運(yùn)行，并且生物膜形成僅24小時(shí)。針對(duì)每種細(xì)菌類型的每種處理檢驗(yàn)四種隱形眼鏡盒。
[0094]實(shí)驗(yàn)2:誘發(fā)堅(jiān)固生物膜的最佳介質(zhì)[0095]細(xì)菌細(xì)胞在1.0X 106CFU/ml的密度下懸浮在針對(duì)金黃色葡萄球菌31的1: 10、I: 20、I: 50或者1: 100的TSB: PSB中，或者針對(duì)綠膿桿菌71的1: 100或1: 1000的TSB: PSB中。細(xì)胞然后被添加至新眼鏡盒的井部(Alcon Laboratories Inc.),眼鏡盒被松散地覆蓋，并且在溫和搖動(dòng)的情況下在37°C下培養(yǎng)24小時(shí)。在形成生物膜之后，介質(zhì)被移除并且眼鏡盒用PBS進(jìn)行沖洗，或者被允許在50°C下干燥3小時(shí)。針對(duì)每種細(xì)菌類型的每種處理檢驗(yàn)四種隱形眼鏡盒。
[0096]實(shí)驗(yàn)3:生物膜形成之后，在14°C、45°C或者60°C下培養(yǎng)的效果
[0097]細(xì)菌細(xì)胞在1.0 X 106CFU/ml的密度下懸浮在針對(duì)金黃色葡萄球菌31的1: 10的TSB: PSB中，或者針對(duì)綠膿桿菌71的1: 100的TSB: PSB中。細(xì)胞然后被添加至新眼鏡盒的井部中(Menicon，日本)，眼鏡盒被松散地覆蓋，并且在溫和搖動(dòng)的情況下在37°C下培養(yǎng)24小時(shí)。在形成生物膜之后，介質(zhì)被移除并且眼鏡盒用PBS進(jìn)行沖洗，或者被允許在14°C、45°C、或者60°C下干燥3小時(shí)。針對(duì)每種細(xì)菌類型的每種處理檢驗(yàn)四種隱形眼鏡盒。
[0098]實(shí)驗(yàn)4:在干燥期間覆蓋隱形眼鏡盒的效果
[0099]細(xì)菌細(xì)胞在1.0X 106CFU/ml的密度下懸浮在針對(duì)金黃色葡萄球菌31的1: 100的TSB: PSB中，或者針對(duì)綠膿桿菌71的1: 1000的TSB: PSB中。細(xì)胞然后被添加至新眼鏡盒的井部中(Alcon Labortories Inc.),眼鏡盒被松散地覆蓋,并且在溫和搖動(dòng)的情況下在37°C下培養(yǎng)24小時(shí)。在形成生物膜之后，介質(zhì)被移除并且眼鏡盒用PBS進(jìn)行沖洗，或者被允許在60°C下干燥3小時(shí)。針對(duì)每種細(xì)菌類型的每種處理檢驗(yàn)四種隱形眼鏡盒。
[0100]實(shí)驗(yàn)5:與加溫隱形眼鏡裝置相比，培養(yǎng)器中在60°C下的培養(yǎng)效果
[0101]細(xì)菌細(xì)胞在1.0X 106CFU/ml的密度下懸浮在針對(duì)金黃色葡萄球菌31的1: 100的TSB: PSB中，或者針對(duì)綠膿桿菌71的1: 1000的TSB: PSB中。細(xì)胞然后被添加至新眼鏡盒的井部中(Alcon Labortories Inc.)，眼鏡盒被松散地覆蓋，并且在溫和搖動(dòng)的情況下在37°C下培養(yǎng)24小時(shí)。在形成生物膜之后，眼鏡盒用PBS進(jìn)行沖洗，或者被松散地覆蓋，并且被允許在60°C下在培養(yǎng)器或者加溫隱形眼鏡裝置中干燥3小時(shí)。作為控制，生物膜在14°C下培養(yǎng)3小時(shí)。針對(duì)每種細(xì)菌類型的每種處理檢驗(yàn)四種隱形眼鏡盒。對(duì)于利用加溫隱形眼鏡裝置在14°C和60°C下運(yùn)行的實(shí)驗(yàn)，所述實(shí)驗(yàn)也被重復(fù)4次(即，針對(duì)每種菌體對(duì)于每種溫度共計(jì)16種隱形眼鏡盒)。
[0102]實(shí)驗(yàn)6:與多功能消毒液結(jié)合的加溫隱形眼鏡裝置的效果(Alcon OptifreeRepleniSH)
[0103]細(xì)菌細(xì)胞在1.0X 106CFU/ml的密度下懸浮在針對(duì)金黃色葡萄球菌31的1: 100的TSB: PSB中，或者針對(duì)綠膿桿菌71的1: 1000的TSB: PSB中。細(xì)胞然后被添加至新眼鏡盒的井部中(Alcon Labortories Inc.),眼鏡盒被松散地覆蓋,并且在溫和搖動(dòng)的情況下在37°C下培養(yǎng)24小時(shí)。在形成生物膜之后，眼鏡盒用PBS進(jìn)行沖洗或者用OptifreeR印IensiSH培養(yǎng)6小時(shí)(制造商推薦的消毒時(shí)間)，然后被允許在60°C下干燥3小時(shí)。針對(duì)每種細(xì)菌類型的每種處理檢驗(yàn)四種隱形眼鏡盒。所述實(shí)驗(yàn)每隔幾天重復(fù)進(jìn)行3次或者4次。
[0104]從生物膜回收細(xì)菌細(xì)胞
[0105]在每個(gè)實(shí)驗(yàn)(1-7)結(jié)束時(shí)，通過與小的磁性攪拌棒一起添加2ml的PBS將細(xì)菌細(xì)胞從眼鏡盒中逐出。通過在渦流混合物中以最大的速度混合I分鐘將細(xì)胞從眼鏡盒逐出。此后，所得到的懸浮液在D/E培養(yǎng)基中(Oxiod澳大利亞)中連續(xù)稀釋(I: 10)，并且覆蓋在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上(Oxiod澳大利亞)。然后，營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板在37°C下培養(yǎng)18小時(shí)，并且計(jì)數(shù)所形成的菌落形成單位，并且根據(jù)稀釋信息計(jì)算出在生物膜中的原始細(xì)菌細(xì)胞的數(shù)量。
[0106]統(tǒng)計(jì)分析:
[0107]t檢定用于確定測(cè)試和控制條件之間的差異。
[0108]結(jié)果:
[0109]確定在隱形眼鏡盒中生成堅(jiān)固生物膜的最佳培養(yǎng)時(shí)間:
[0110]在37°C下對(duì)金黃色葡萄球菌31進(jìn)行24小時(shí)的培養(yǎng)生成了由3，267±2，498CFU/ml構(gòu)成的生物膜，而進(jìn)行48小時(shí)的培養(yǎng)生成了由240±193CFU/ml構(gòu)成的生物膜(P =0.052;圖1)。在50°C下進(jìn)行3小時(shí)的培養(yǎng)后(P = 0.08)，從生物膜中未回收活菌。對(duì)于綠膿桿菌71而言，由20，566，667±2，398，456CFU/ml構(gòu)成的生物膜。在50°C下進(jìn)行3小時(shí)的培養(yǎng)，使得生物膜中的綠膿桿菌71的數(shù)量降低至9，930±9，682 (P = 0.0004)。
[0111]圖1是在24或者48小時(shí)的培養(yǎng)期間由金黃色葡萄球菌31形成的生物膜
【權(quán)利要求】
1.一種對(duì)具有蓋子的隱形眼鏡存儲(chǔ)盒進(jìn)行消毒的方法，所述方法包括如下步驟: 用所述蓋子封閉所述盒子的空腔；以及 通過在大約60攝氏度下對(duì)所述盒子進(jìn)行大約3小時(shí)的加熱而主動(dòng)地干燥該盒子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中:封閉所述盒子的所述空腔的步驟包括如下步驟中的一個(gè)步驟: 將所述蓋子擱在所述盒子上，從而隱藏所述盒子的所述空腔； 將所述蓋子和所述盒子部分地接合；以及 將所述蓋子和所述盒子完全接合。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其中:將所述蓋子和所述盒子部分地接合的步驟包括將所述蓋子和所述盒子的各自的螺紋部分地接合。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其中:將所述蓋子和所述盒子部分地接合的步驟包括將所述蓋子和所述盒子的各自的壓配合表面部分地接合。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中:將所述蓋子和所述盒子完全地接合的步驟包括將所述蓋子和所述盒子的各自的螺紋完全地接合。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中:將所述蓋子和所述盒子完全接合的步驟包括將所述蓋子和所述盒子的各 自的壓配合表面完全地接合。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，在所述封閉步驟和所述主動(dòng)地干燥步驟之前，所述方法包括如下更多步驟: 將隱形眼鏡和大量消毒液沉積到所述盒子的所述空腔中； 將所述蓋子和所述盒子完全接合； 使所述盒子經(jīng)受針對(duì)所述消毒液所指定的時(shí)間/溫度制度； 移除所述隱形眼鏡；以及 手動(dòng)地?fù)u出所述消毒液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述主動(dòng)地干燥步驟包括通過在60攝氏度下對(duì)具有由所述蓋子封閉的所述空腔的所述盒子進(jìn)行I到4小時(shí)的加熱而對(duì)所述盒子進(jìn)行主動(dòng)地干燥。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述主動(dòng)地干燥步驟包括通過在55攝氏度到65攝氏度之間對(duì)具有由所述蓋子封閉的所述空腔的所述盒子進(jìn)行I到4小時(shí)的加熱而對(duì)所述盒子進(jìn)行主動(dòng)地干燥。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述主動(dòng)地干燥步驟包括通過在50攝氏度到70攝氏度之間對(duì)具有由所述蓋子封閉的所述空腔的所述盒子進(jìn)行I到4小時(shí)的加熱而對(duì)所述盒子進(jìn)行主動(dòng)地干燥。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述主動(dòng)地干燥步驟包括通過在45攝氏度到75攝氏度之間對(duì)具有由所述蓋子封閉的所述空腔的所述盒子進(jìn)行I到4小時(shí)的加熱而對(duì)所述盒子進(jìn)行主動(dòng)地干燥。
【文檔編號(hào)】A61L2/04GK103608044SQ201280020593
【公開日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2012年4月26日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月27日
【發(fā)明者】J·S·克里斯普, M·D·P·威爾科克斯, A·庫(kù)馬爾·維賈伊, 朱華 申請(qǐng)人:溫柔接觸私人有限公司