粘度降低的制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種降低包含醋酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法以及使用請求保護的方法制得的制劑。本發(fā)明還涉及通過任意本發(fā)明方法制備的穩(wěn)定制劑。本發(fā)明還涉及包含容器的制品，該容器包含本發(fā)明的制劑。
【專利說明】粘度降低的制劑
發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及治療性蛋白的制劑領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及粘度降低的制劑以及制備其的方法。
[0002]發(fā)明背景
[0003]許多包含蛋白的藥品需要高治療劑量以實現(xiàn)有效的患者響應(yīng)。由于治療性蛋白(包括單克隆抗體)體積大以及易于蛋白分解，為了達到血流中的治療濃度，需要將其經(jīng)靜脈內(nèi)或皮下注射給藥。在這兩種給藥途徑中，皮下注射對患者更為便利，因為可在家給予靶向皮下給藥途徑的藥品。存在多種在預(yù)填充注射器中的已經(jīng)重新或作為產(chǎn)品線延伸而開發(fā)的單克隆抗體藥品，用于皮下給藥途徑。通常，由于皮下空間對給藥劑量的體積限制，通過預(yù)填充注射器單次推注給藥(bolus administration)的方式可給藥不超過ImL藥品溶液。然而，給藥總體積和持續(xù)時間由給藥溶液中單克隆抗體的濃度控制。為在更小體積內(nèi)實現(xiàn)輸注或推注給藥更高劑量，需要溶液中高濃度的單克隆抗體。
[0004]多種濃度范圍超過100mg/mL的單克隆抗體以及大多數(shù)濃度為更高的200mg/mL的單克隆抗體具有相對高粘度，導(dǎo)致處置單克隆抗體藥品溶液的問題。諸如用于濃縮抗體至高水平的切向流動過濾以及無菌過濾的制備工藝是困難的并導(dǎo)致高粘度溶液的產(chǎn)量損失。當(dāng)必須達到超過約20牛的力以使用預(yù)填充注射器遞送藥品的皮下劑量時，還可出現(xiàn)患者或醫(yī)療專業(yè)人員藥品處理和注射能力的問題。顯然需要降低粘度的制劑方法，且在制劑開發(fā)期間使用降低粘度的賦形劑是一可行的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明涉及一種降低包含醋酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法。
[0006]在一項實施方案中，該方法包`括(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將甘氨酸和/或精氨酸添加至該制劑中至約1.0%w/v的濃度，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的相同制劑的粘度小。在一項實施方案中，具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%或至少約30%。在一項實施方案中，具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度小于約25cP或小于約20cP。
[0007]在另一項實施方案中，該方法包括(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將甲硫氨酸添加至該制劑中至約0.04%w/v的濃度，其中具有甲硫氨酸的制劑的粘度比不具有甲硫氨酸的相同制劑的粘度小。在一項實施方案中，具有甲硫氨酸的制劑的粘度比不具有甲硫氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%或至少約30%。在一項實施方案中，具有甲硫氨酸的制劑的粘度小于約25cP或小于約20cP。
[0008]在另一項實施方案中，該方法包括(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將苯丙氨酸添加至該制劑中至約0.8%w/v的濃度，其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的相同制劑的粘度小。在一項實施方案中，具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。在一項實施方案中，具有苯丙氨酸的制劑的粘度小于約20cP或小于約15cP。
[0009]在另一項實施方案中，該方法包括(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將色氨酸添加至該制劑中至約0.2%w/v的濃度，其中具有色氨酸的制劑的粘度比不具有色氨酸的相同制劑的粘度小。在一項實施方案中，具有色氨酸的制劑的粘度比不具有色氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。在一項實施方案中，具有色氨酸的制劑的粘度小于約20cP或小于約15cP。
[0010]在另一項實施方案中，該方法包括(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將脯氨酸添加至該制劑中至約4.0%w/v的濃度，其中具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的相同制劑的粘度小。在一項實施方案中，具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%或至少約30%。在一項實施方案中，具有脯氨酸的制劑的粘度小于約25cP或小于約20cP。
[0011]本發(fā)明還涉及通過本發(fā)明任一方法制備的穩(wěn)定制劑。
[0012]本發(fā)明還涉及包含容 器的制品，該容器包含本發(fā)明制劑。
[0013]附圖簡述
[0014]圖1.醋酸鹽緩沖液:在低濃度的直鏈氨基酸(0.5%w/v甘氨酸，0.5%w/v精氨酸，
0.01%w/v甲硫氨酸)，抗IL5mAb樣品的粘度高于不含氨基酸的樣品的粘度；但在高濃度的直鏈氨基酸(1.0%w/v甘氨酸，l%w/v精氨酸以及0.04%甲硫氨酸)，該樣品的粘度低于不含氨基酸的樣品的粘度。
[0015]圖2.醋酸鹽緩沖液:苯丙氨酸、色氨酸和脯氨酸降低了抗IL5mAb制劑的粘度而酪氨酸增加了抗IL5mAb制劑的粘度。
[0016]圖3.醋酸鹽緩沖液:所有測試的氨基酸降低了抗ELR mAb制劑的粘度。脯氨酸實現(xiàn)了最大的粘度降低，然后是色氨酸、苯丙氨酸和甘氨酸。
[0017]發(fā)明詳述
[0018]應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明不限于具體的方法、試劑、化合物、組合物或生物系統(tǒng)，其當(dāng)然可以變化。還應(yīng)當(dāng)理解，本文所用的術(shù)語僅為描述具體的實施方案，而不是為了限制。如本說明書及所附權(quán)利要求書中使用的，除非內(nèi)容明確另有所指，單數(shù)形式“一個”、“一種”和“該”包括所指事物的復(fù)數(shù)形式。因此，例如，提及“多肽”包括兩種或多種多肽的組合等。
[0019]當(dāng)涉及可測量值如量、持續(xù)時間等時，本文所用的“約”是指涵蓋從特定數(shù)值的±20%或±10%的變體(包括±5%、±1%和±0.1%),這樣的變體適于施行所公開的方法。
[0020]除非另有所指，否則本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。盡管任何與本文所述的方法和材料相似或相當(dāng)?shù)姆椒ê筒牧峡捎糜诒景l(fā)明測試的實踐中，但優(yōu)選的材料和方法如本文所述。在描述和請求本發(fā)明中，將用到以下術(shù)語。
[0021]本發(fā)明涉及一種降低包含醋酸鹽和治療性蛋白的制劑的粘度的方法。
[0022]在本發(fā)明的示例性實施方案中，所生產(chǎn)的液體多肽組合物表現(xiàn)出理想的特性，如理想的粘度和表面張力特性。
[0023]術(shù)語“表面張力”是指表面下的分子對表面/空氣界面的分子施加的吸引力，是由于液體的高分子濃度相對氣體的低分子濃度而引起。具有低表面張力值的液體，如非極性液體，比水更容易流動。通常，表面張力值以牛/米或達因/厘米表示。
[0024]本文涉及的“動態(tài)表面張力”是指表面/空氣界面和對表面/表面界面的動態(tài)界面張力。有多種可選的方法測量動態(tài)表面張力，例如，捕泡表面張力計(captivebubble surface tensionometry)或搏動氣泡表面張力計(pulsating bubble surfacetensionometry)。
[0025]術(shù)語“粘度”指的是流體在規(guī)定溫度表現(xiàn)的對流動的內(nèi)部阻力；是切應(yīng)力與剪切速率之比。如果I達因/平方厘米的力導(dǎo)致兩個面積為I平方厘米且相距I厘米的平行液體表面以lcm/s的速度相對運動，則液體具有I泊的粘度。I泊=100厘泊。
[0026]當(dāng)涉及表觀粘度，應(yīng)當(dāng)理解粘度值取決于進行測量的條件，如所采用的溫度、剪切速率和切應(yīng)力。表觀粘度定義為切應(yīng)力與應(yīng)用的剪切速率之比。有多種可選的方法測量表觀粘度。例如，粘度可通過合適的錐和板、平行板或其它類型的粘度計或流變儀測試。
[0027]在一些實施方案中，粘度降低的制劑具有小于約50cP、小于約45cP、小于約40cP、小于約35cP、小于約30cP、小于約25cP、小于約20cP或小于約15cP的粘度。
[0028]本文替換使用的“多肽”、“肽”和“蛋白”是指氨基酸殘基的聚合物。多肽可以是天然(組織衍生的)起源的、重組的或由原核或真核細胞制品天然表達的，或者是經(jīng)由合成方法化學(xué)生產(chǎn)的。該術(shù)語適用于氨基酸聚合物(其中一個或多個氨基酸殘基為相應(yīng)的天然存在的氨基酸的人工化學(xué)模擬物)，也適用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。氨基酸模擬物是指具有與氨基酸的一般的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的結(jié)構(gòu)，但作用的方式與天然存在的氨基酸類似的化學(xué)化合物?？茖W(xué)和專利文獻充分地描述了非天然殘基。一些示例性的用作天然氨基酸殘基模擬物的非天然組合物和指導(dǎo)如下所述。芳香族氨基酸的模擬物可通過由以下替代而生成:例如D-或L-萘基丙氨酸(naphylalanine) ；D-或L-苯基甘氨酸；D_或L-2噻吩基丙氨酸(thieneylalanine) ;D_或L-1, -2，3-,或4-花基丙氨酸(pyreneylalanine) ;D_ 或 L-3 噻吩基丙氨酸(thieneylalanine) ;D_ 或 L-(2_ 吡唳基)-丙氨酸；D-或L- (3-吡啶基)-丙氨酸；D-或L- (2-吡嗪基)-丙氨酸；D-或L- (4-異丙基)-苯基甘氨酸；D- ( 二氟甲基)-苯基甘氨酸；D_ ( 二氟甲基)-苯丙氨酸；D_對-氟-苯丙氨酸；D-或L-對-聯(lián)苯基苯丙氨酸；K-或L-對-甲氧基-聯(lián)苯基苯丙氨酸；D-或L-2-吲哚(烷基)丙氨酸；和D-或L-烷基丙氨酸，其中烷基可以為取代或未取代的甲基、乙基、丙基、己基、丁基、戍基、異丙基、異丁基、sec-1sotyl、異戍基,或非酸性氨基酸。非天然氨基酸的芳香族環(huán)包括，例如噻唑基、噻吩基(thiophenyl)、吡唑基、苯并咪唑基、萘基、呋喃基、吡咯基，和吡啶基芳香族環(huán)。
[0029]本文所用的“肽”包括作為本文具體舉例說明的那些肽的保守變體的肽。本文所用的“保守變體”表示使用另一生物學(xué)上相似的殘基替代氨基酸殘基。保守變體的實例包括但不限于，一個疏水性殘基如異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸、正亮氨酸或甲硫氨酸取代另一個疏水殘基，或一個極性殘基取代另一個極性殘基，如精氨酸取代賴氨酸、谷氨酸取代天冬氨酸或谷氨酰胺取代天冬酰胺等?？苫ハ嗳〈闹行杂H水性氨基酸包括天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸和蘇氨酸?！氨Ｊ刈凅w”還包括使用取代的氨基酸代替未取代的母體氨基酸，條件是取代的多肽的抗體也與未取代的多肽起免疫反應(yīng)。這樣的保守取代在本發(fā)明的肽的種類的定義之內(nèi)。本文所用的“陽離子的”是指在PH7.4時具有凈正電荷的任何肽。肽的生物活性可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的和本文所述的標準方法測定。
[0030]當(dāng)關(guān)于蛋白使用“重組”時，表示該蛋白已通過引入異源核酸或蛋白或者改變天然核酸或蛋白進行修飾。
[0031]本文所用的“治療性蛋白”指的是(例如)研究者或臨床醫(yī)生所尋找的、可向哺乳動物給藥以引出組織、系統(tǒng)、動物或人類的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的任何蛋白和/或多肽。治療性蛋白可引出多于一種生物學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)答。而術(shù)語“治療有效量”是指與未接受該量的相應(yīng)的受試者相比，導(dǎo)致(但不限于)疾病、病癥或副作用痊愈、預(yù)防或減輕，或者疾病或病癥進展速率降低的任何量。該術(shù)語在其范圍內(nèi)還包括有效增強正常生理功能的量以及在患者中有效地引起增強或有助于第二種藥物的治療作用的生理功能的量。
[0032]本文所鑒定的所有“氨基酸”殘基為天然的L-構(gòu)型。與標準多肽命名一致，氨基酸殘基的縮寫如下表所示。
[0033]表1.氨基酸縮寫。
[0034]
【權(quán)利要求】
1.一種降低包含醋酸鹽和治療性多肽的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將甘氨酸和/或精氨酸添加至該制劑中至約1.0%w/v的濃度，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的相同制劑的粘度小。
2.權(quán)利要求1的方法，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%或至少約30%。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的制劑的粘度小于約25cP或小于約20cP。
4.一種降低包含醋酸鹽和治療性多肽的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將甲硫氨酸添加至該制劑中至約0.04%w/v的濃度，其中具有甲硫氨酸的制劑的粘度比不具有甲硫氨酸的相同制劑的粘度小。
5.權(quán)利要求4的方法，其中具有甲硫氨酸的制劑的粘度比不具有甲硫氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%或至少約30%。
6.權(quán)利要求4或5的方法，其中具有甲硫氨酸的制劑的粘度小于約25cP或小于約20cPo
7.一種降低包含醋酸鹽和治療性多肽的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將苯丙氨酸添加至該制劑中至約0.8%w/v的濃度，其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的相同制劑的粘度小。
8.權(quán)利要求7的方法，其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度比不具有苯丙氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
9.權(quán)利要求7或8的方法，`其中具有苯丙氨酸的制劑的粘度小于約20cP或小于約15cP。
10.一種降低包含醋酸鹽和治療性多肽的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將色氨酸添加至該制劑中至約0.2%w/v的濃度，其中具有色氨酸的制劑的粘度比不具有色氨酸的相同制劑的粘度小。
11.權(quán)利要求10的方法，其中具有色氨酸的制劑的粘度比不具有色氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
12.權(quán)利要求10或11的方法，其中具有色氨酸的制劑的粘度小于約20cP或小于約15cP。
13.一種降低包含醋酸鹽和治療性多肽的制劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含醋酸鹽的制劑；以及(b)將脯氨酸添加至該制劑中至約4.0%w/v的濃度，其中具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的相同制劑的粘度小。
14.權(quán)利要求13的方法，其中具有脯氨酸的制劑的粘度比不具有脯氨酸的制劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%或至少約30%。
15.權(quán)利要求13或14的方法，其中具有脯氨酸的制劑的粘度小于約25cP或小于約20cPo
16.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該方法進一步包括測定蛋白制劑的穩(wěn)定性。
17.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑進一步包含蔗糖。
18.權(quán)利要求17的方法，其中該制劑進一步包含濃度為約234mM的蔗糖。
19.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑配制為pH約5.5。
20.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑進一步包含聚山梨酯-80。
21.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該治療性蛋白是抗原結(jié)合多肽。
22.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該抗原結(jié)合多肽是抗體。
23.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該抗原結(jié)合多肽是免疫球蛋白單一可變域。
24.權(quán)利要求21的方法，其中該抗原結(jié)合多肽結(jié)合至白介素5(IL5)。
25.權(quán)利要求24的方法，其中該抗原結(jié)合多肽是抗IL5抗體。
26.權(quán)利要求25的方法，其中該抗IL5抗體包括包含SEQID NO:1的重鏈以及包含SEQID NO:2的輕鏈。
27.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該治療性蛋白的存在濃度為至少約150mg/ml、至少約175mg/ml、至少約200mg/ml、至少約225mg/ml、至少約250mg/ml、至少約275mg/ml或至少約300mg/ml。
28.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該治療性蛋白的存在濃度為至少約150mg/ml至約 300mg/ml。
29.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑是重構(gòu)制劑。
30.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑是液體藥物制劑。
31.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑適于腸胃外給藥。
32.前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該制劑包含約25mM至約75mM醋酸鹽。
33.權(quán)利要求32的方法，其中該制劑包含約55mM醋酸鹽。
34.通過前述權(quán)利要求任一項的方法制備的穩(wěn)定制劑。
35.包含容器的制品，該容器包含權(quán)利要求38的制劑。
36.權(quán)利要求35的制品，其進一步包含用于給藥該制劑的說明書。
【文檔編號】A61K39/00GK103582724SQ201280025770
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年4月6日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月7日
【發(fā)明者】M.A.蒙克, M.Y.王, K.張 申請人:葛蘭素史密斯克萊有限責(zé)任公司