單特異性和雙特異性抗igf-1r和抗erbb3抗體的制作方法
【專利摘要】本文提供適用作抗贅生劑且特異性結(jié)合人IGF-IR和人ErbB3的新穎單特異性和雙特異性抗體。示例性抗體抑制經(jīng)由IGF-IR和ErbB3中的任一者或兩者進(jìn)行的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。示例性多價(jià)蛋白質(zhì)包含至少一個(gè)抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)和至少一個(gè)抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)。在某些實(shí)施方案中，結(jié)合位點(diǎn)可經(jīng)由免疫球蛋白恒定區(qū)連接。還提供新穎抗ErbB3和抗IGF-1R抗體(例如，單克隆抗體)。
【專利說(shuō)明】單特異性和雙特異性抗IGF-1R和抗ERBB3抗體
[0001]相關(guān)申請(qǐng)
[0002]本申請(qǐng)要求2011年4月19日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/477，089、2011年9月26日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/539，297、2011年11月10日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/558，192和2012年4月2日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/619，244的優(yōu)先權(quán)。在允許的情況下，前述申請(qǐng)各自的全文以引用的方式并入本文用于任何及所有目的。
[0003]序列表
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[0005]背景
[0006]腫瘤細(xì)胞表達(dá)刺激細(xì)胞增殖的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的受體。針對(duì)所述受體的抗體可有效阻斷由生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子介導(dǎo)的細(xì)胞增殖刺激，且可由此抑制腫瘤細(xì)胞增殖和腫瘤生長(zhǎng)。祀向癌細(xì)胞上的受體的市售治療性抗體包括例如曲妥珠單抗(trastuzumab),其革巴向HER2受體(也稱為ErbB2)，用于治療乳癌；和西妥昔單抗(cetuximab)，其靶向表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR，也稱為HERl或ErbBl)，用于治療結(jié)腸直腸癌和頭頸癌。
[0007]單克隆抗體已顯著提高我們治療癌癥的能力，然而臨床研究顯示許多患者對(duì)單特異性療法反應(yīng)并不充分。這部分歸因于癌癥的多基因性質(zhì)，其中癌細(xì)胞依賴于多種且通常冗余的增殖路徑。能夠一次 阻斷多種生長(zhǎng)和存活路徑的雙特異性或多特異性抗體有可能更好地滿足阻斷癌癥生長(zhǎng)的挑戰(zhàn)，并且實(shí)際上其中多種正在進(jìn)行臨床開(kāi)發(fā)。然而，雙特異性抗體因在其設(shè)計(jì)和優(yōu)化中需要考慮的變量的數(shù)量大為增加以及其與天然存在的抗體的結(jié)構(gòu)差異而存在實(shí)質(zhì)性設(shè)計(jì)難題。
[0008]單克隆抗體如曲妥珠單抗、西妥昔單抗、貝伐單抗(bevacizumab)和盤尼圖單抗(panitumumab)在臨床上已顯著改善患者結(jié)果,且當(dāng)前在臨床開(kāi)發(fā)中有超過(guò)兩百種治療性單克隆抗體正在進(jìn)行測(cè)試。然而，顯而易見(jiàn)受單個(gè)致癌基因促成的腫瘤并非常態(tài)，并且治療通常導(dǎo)致抗性機(jī)制活化，這轉(zhuǎn)而還需要靶向介入。舉例來(lái)說(shuō)，在曲妥珠單抗抗性的多種臨床前模型中，抑制IGF-1R使對(duì)曲妥珠單抗的敏感性恢復(fù)。已在臨床上嘗試靶向劑的組合，但迄今為止其僅獲得有限的臨床成功并且組合時(shí)可能過(guò)于昂貴。因抗性或因腫瘤受多個(gè)生長(zhǎng)因子路徑促成而需要抑制多個(gè)靶標(biāo)使得對(duì)雙特異性抗體的關(guān)注增加。當(dāng)前開(kāi)發(fā)的雙特異性抗體通常以經(jīng)驗(yàn)方式設(shè)計(jì)。此外，這些雙特異性抗體的藥用性質(zhì)幾乎總是不如單克隆抗體。這些因素造成開(kāi)發(fā)雙特異性抗癌療法的主要難題。由靶向多種癌癥存活路徑獲得的重要附加效益可由在鑒別和工程改造具有最佳特征的雙特異性抗體之前增加的工作得出。其需要由計(jì)算模擬以鑒別最佳靶向策略和設(shè)計(jì)規(guī)格、工程改造具有這些特征的抑制劑和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證治療假設(shè)組成的疊代方法。我們將此工程改造框架分為兩個(gè)類別:選擇具有穩(wěn)固藥用性質(zhì)的適當(dāng)分子格式，和計(jì)算模擬以鑒別最佳靶標(biāo)和最佳治療設(shè)計(jì)特征，例如在IgG樣雙特異性抗體中(圖8)。
[0009]抗體的一個(gè)主要優(yōu)勢(shì)為其緊密結(jié)合幾乎任何細(xì)胞外靶標(biāo)的能力。此性質(zhì)由抗體可變區(qū)(VR)的兩個(gè)特征促成:六個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)的大平坦表面和抗體實(shí)際上具有可同時(shí)靶向兩個(gè)分子的兩個(gè)結(jié)合臂。在雙特異性抗體中，雙重靶標(biāo)結(jié)合導(dǎo)致更緊密親和力，這是因?yàn)橐坏┛贵w一個(gè)臂結(jié)合于細(xì)胞外靶標(biāo)，第二臂即被局限于質(zhì)膜上方的狹窄區(qū)域(約100埃)且因此在細(xì)胞表面附近濃縮。這產(chǎn)生快得多的次級(jí)結(jié)合事件，所述事件不受擴(kuò)散限制。需要對(duì)次級(jí)結(jié)合事件進(jìn)行加速。親和力和親合性均為可合理工程改造的性質(zhì)，因?yàn)榍罢呖山?jīng)由計(jì)算機(jī)化親和力成熟進(jìn)行改良且后者可通過(guò)工程改造針對(duì)細(xì)胞表面上存在的相同或不同抗原的其它靶向臂而增強(qiáng)。除結(jié)合能力外，抗體還可具有由其Fe結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的多種效應(yīng)功能:在人中通過(guò)與活化型Fe Y R1、Fc Y RIIa/c、Fc y RIIIa和抑制性Fe y RIIb受體相互作用而確定的抗體依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)和抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用(ADCP);由抗體結(jié)合于補(bǔ)體系統(tǒng)的組分而觸發(fā)的補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC);和經(jīng)由新生兒Fe受體(FcRn)的主動(dòng)再循環(huán)而介導(dǎo)的長(zhǎng)半衰期。所有這些功能均可調(diào)節(jié)以使抗癌療法的有效性優(yōu)化且可保留以有益于雙特異性蛋白質(zhì)。
[0010]由IgG抗體的重鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH)和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)構(gòu)成的可變片段(Fv)為顯示完整抗原結(jié)合的最小抗體片段。這些可變結(jié)構(gòu)域可成功地融合成單鏈構(gòu)建體(scFv)，不過(guò)親和力與完整原生抗體相比通常在一定程度上降低。大部分當(dāng)前雙特異性格式的特征在于一個(gè)或若干個(gè)scFv模塊經(jīng)由低復(fù)雜度接頭連接于IgG重鏈或IgG輕鏈的N端或C端。另一雙特異性抗體格式為雙可變結(jié)構(gòu)域免疫球蛋白(DVD-1g)。DVD-1g由在N端有第二 VH結(jié)構(gòu)域經(jīng)由短接頭連接的第一 IgG重鏈和在N端有第二 VL結(jié)構(gòu)域類似地連接的第一 IgG輕鏈組成。第二 VH/VL結(jié)構(gòu)域形成對(duì)一種抗原具有特異性的對(duì)，而第一 VH/VL形成對(duì)不同抗原具有特異性的單獨(dú)結(jié)合位點(diǎn)。
[0011]IgG樣抗體的二價(jià)格式具有一個(gè)潛在限制；其可交聯(lián)細(xì)胞表面抗原，所述抗原中的一些會(huì)因二聚化而活化，從而以不受控方式觸發(fā)不當(dāng)信號(hào)傳導(dǎo)事件。為解決此難題，已開(kāi)發(fā)出可調(diào)節(jié)單價(jià)雙特異性抗體格式。通過(guò)將不對(duì)稱“鈕-孔(knobs and holes)”并入Fe片段中產(chǎn)生的單臂 抗c-Met治療性抗體MetMab已顯示在胰腺癌模型中有效且正在多個(gè)臨床試驗(yàn)中進(jìn)行研究。最近已對(duì)此“鈕-孔”格式進(jìn)行擴(kuò)充以并入靶向EGFR的抗體片段，產(chǎn)生革巴向EGFR/ErbBl和c_Met/HGFR的功能性單價(jià)雙特異性蛋白質(zhì)。Gunasekaran等已描述通過(guò)將互補(bǔ)性帶電表面工程改造至Fe片段中實(shí)施的“鈕-孔”構(gòu)想的替代實(shí)施方案。Davis等已描述“SEED”方法，其使用含有來(lái)自人IgG和IgA的片段的修飾的不對(duì)稱Fe來(lái)形成異聚單價(jià)抗體。最后，Bostrom等已描述構(gòu)建可以高親和力結(jié)合HER2或VEGF的雙功能Fab片段的新穎工程改造方法。在組合于典型抗體分子中時(shí)，這些Fab片段將以不同價(jià)數(shù)嚙合HER2或VEGF，所述價(jià)數(shù)將取決于細(xì)胞環(huán)境和生長(zhǎng)因子濃度。
[0012]雙特異性抗體設(shè)計(jì)的另一重要組分為藥用性質(zhì)的優(yōu)化。為在臨床上適用，治療性蛋白質(zhì)須穩(wěn)定，保持長(zhǎng)時(shí)間可溶且具有穩(wěn)固的可制造性概況。雙特異性抗體通常不如單克隆抗體穩(wěn)定，且最初可能不具有足以用于開(kāi)發(fā)的藥用性質(zhì)。其可經(jīng)由分子工程改造、經(jīng)由下游配制活動(dòng)或如最通常所實(shí)施的經(jīng)由兩種方法的組合加以穩(wěn)定化。
[0013]已長(zhǎng)期認(rèn)識(shí)到使小分子藥物候選物中的化學(xué)制造和控制不利條件降至最低的重要性并且已提出預(yù)測(cè)藥物相似性的準(zhǔn)則。許多組使用概念上類似的方法通過(guò)評(píng)估以下不利序列特征來(lái)評(píng)定基于IgG的蛋白質(zhì)的適合性:如非典型二硫鍵和未配對(duì)半胱氨酸、另外的糖基化位點(diǎn)、酪氨酸硫酸化基元、溶劑可接近的甲硫氨酸、天冬酰胺去酰胺化基元和酸裂解位點(diǎn)。另外的糖基化位點(diǎn)和天冬酰胺去酰胺化位點(diǎn)為天然抗體序列中十分常見(jiàn)的特征。實(shí)際上據(jù)報(bào)導(dǎo)，超過(guò)20%的重鏈可變結(jié)構(gòu)域被糖基化且超過(guò)5%的生殖系基因含有天冬酰胺-甘氨酸去酰胺化基元?？贵w中的去酰胺化速率可使用Robinson提出的方法可靠地估算，Robinson提出結(jié)構(gòu)限制性環(huán)形成丁二酰亞胺中間體的效率并不高且因此為穩(wěn)定的。
[0014]雖然典型N連接型糖基化基元(NXS和NXT，其中X為除脯氨酸以外的任何氨基酸)可在抗體序列中容易地檢測(cè)到，但O連接型位點(diǎn)(其因也可以負(fù)面影響藥用性質(zhì)而為不利條件)較難以識(shí)別。最近已報(bào)導(dǎo)抗體輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的若干O連接型修飾，主要在富含GS的序列基元附近。存在在發(fā)現(xiàn)階段改良候選蛋白質(zhì)的親和力和穩(wěn)定性的許多方法，包括結(jié)構(gòu)指導(dǎo)的設(shè)計(jì)、聚焦文庫(kù)篩選和酵母展示；因此，我們發(fā)現(xiàn)在早期概念驗(yàn)證蛋白質(zhì)中移除具有風(fēng)險(xiǎn)的所述潛在不利條件為有益的。
[0015]其它不利條件，如聚集和免疫原性根據(jù)工程改造的觀點(diǎn)更具挑戰(zhàn)性。所述兩種性質(zhì)不僅為多方面性質(zhì)，而且還難以在小規(guī)模生物化學(xué)和生物物理學(xué)測(cè)試中對(duì)其進(jìn)行充分評(píng)估，且因此其傾向于首先在開(kāi)發(fā)的后期檢測(cè)。如所證明，降低抗體免疫原性的最佳方法為進(jìn)行人源化。此方法已由多種在臨床上良好耐受的人源化抗體廣泛驗(yàn)證。最近提出的“超人源化”方法將人生殖系序列引入⑶R中以產(chǎn)生‘完全人’抗體。此方法需要將⑶R中的各氨基酸(“aa”)突變以便確定其在抗原結(jié)合中的貢獻(xiàn)；所得抗體可具有較低免疫原性。除基于序列的特征外，抗體和抗體樣蛋白質(zhì)的免疫原可取決于其聚集穩(wěn)定性。有趣的是，抗體模塊(諸如scFv)中的“人性”和穩(wěn)定性可經(jīng)由在知識(shí)基礎(chǔ)上的方法共同工程改造。
[0016]蛋白質(zhì)抗體溶解性的工程改造為另一項(xiàng)令人生畏的任務(wù)，因?yàn)樗鲂再|(zhì)還綜合涉及若干項(xiàng)物理-化學(xué)參數(shù)。然而，已提出多種減輕不溶性的方法。Pepinsky等使用糖基工程改造、同型轉(zhuǎn)換和結(jié)構(gòu)指導(dǎo)的誘變來(lái)增強(qiáng)單克隆抗體的溶解性。Chennamsetty等已描述依賴于分子動(dòng)力學(xué)模擬來(lái)計(jì)算稱為表面聚集傾向的參數(shù)，從而相對(duì)于聚集改良溶解性的無(wú)偏方法，并且應(yīng)用此技術(shù) 在抗體的易聚集區(qū)中引入穩(wěn)定化氨基酸(“aas”)。有趣的是，在其抗體分析中，易聚集區(qū)通常與賦予Fe受體或抗原結(jié)合的功能上重要的區(qū)共定位，并且因此不能輕易移除。
[0017]抗體中分子功能與藥用性質(zhì)之間的這種聯(lián)系為常見(jiàn)的。其可使得雙特異性抗體的優(yōu)化變得極為復(fù)雜，因?yàn)槠湫蛄械纳踔粮蟮牟糠忠参挥诠δ苌现匾膮^(qū)中。因此，為能夠成功進(jìn)行工程改造，鑒別關(guān)鍵分子功能和最佳設(shè)計(jì)特征為重要的。
[0018]計(jì)算模擬以鑒別最佳靶標(biāo)和最佳治療設(shè)計(jì)特征
[0019]計(jì)算模擬為在實(shí)驗(yàn)室和臨床上指導(dǎo)藥物開(kāi)發(fā)決定的極有用工具。群體藥物動(dòng)力學(xué)模擬為使用模型來(lái)優(yōu)化劑量時(shí)程和臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)的成熟實(shí)例。對(duì)于具有已知靶標(biāo)的療法，可在設(shè)計(jì)過(guò)程中的極早期利用計(jì)算模擬。多任務(wù)高通量定量蛋白質(zhì)測(cè)量技術(shù)的進(jìn)展使得能夠觀測(cè)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中存在的復(fù)雜動(dòng)力學(xué)。這些數(shù)據(jù)允許建立捕捉與諸如癌癥等疾病相關(guān)的生物系統(tǒng)的機(jī)理行為的網(wǎng)絡(luò)模型。通過(guò)經(jīng)由網(wǎng)絡(luò)建模模擬潛在治療劑，可以加快的速度設(shè)計(jì)更有效的治療劑和更精確地預(yù)測(cè)設(shè)計(jì)參數(shù)。
[0020]傳統(tǒng)上，用于靶向療法的藥用藥劑的選擇始于自大量分子、生物學(xué)和生理學(xué)數(shù)據(jù)選擇的已知靶標(biāo)。然而，甚至在已充分研究和大量靶向的生物系統(tǒng)中，仍存在新發(fā)現(xiàn)的機(jī)會(huì)，其可自模擬路徑或網(wǎng)絡(luò)模型得到幫助。
[0021]因此，用于癌癥治療的其它治療方法，并且尤其是經(jīng)過(guò)工程改造以具有優(yōu)良生物物理學(xué)和治療性質(zhì)的基于多特異性抗體的蛋白質(zhì)難以獲得，但對(duì)其仍有需要以克服當(dāng)前抗體療法的限制和提供其它效益。
[0022]概述
[0023]本文提供多價(jià)雙特異性抗體(PBA)，所述抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，所述兩對(duì)中的各對(duì)包含重鏈通過(guò)至少一個(gè)重鏈-輕鏈鍵聯(lián)結(jié)于輕鏈；其中(a)各對(duì)包含至少一個(gè)抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)和至少一個(gè)抗ErB3結(jié)合位點(diǎn)；和(b)各對(duì)包含含有PBA重鏈的N端部分和PBA輕鏈的N端部分的第一結(jié)合位點(diǎn)，和為完全由PBA的重鏈包含的C端scFv的第二結(jié)合位點(diǎn)，所述C端scFv含有重鏈VR通過(guò)scFv接頭聯(lián)結(jié)于輕鏈VR ;且抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)經(jīng)由由PBA的重鏈包含的重鏈免疫球蛋白(HC Ig)恒定區(qū)(CR)連接于抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)，且所述兩對(duì)由各對(duì)的HC Ig CR之間的至少一個(gè)鍵聯(lián)接。在優(yōu)選實(shí)施方案中，抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域，所述重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VH互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)，所述CDR包含(a)具有包含選自由SEQ ID NO: K SEQ ID N0:8_31和SEQ ID NO: 384-385組成的組的SEQ ID NO (中所示)的氨基酸序列的氨基酸序列的重鏈的VHCDRl (氨基酸編號(hào)26-35)、VHCDR2(氨基酸編號(hào)51-66)和VHCDR3 (氨基酸編號(hào)99-111)；或(b) —組三個(gè)VH互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)，所述⑶R包含含有SEQ ID NO: 302的VHCDRl、含有SEQ ID N0:303的VHCDR2和含有SEQ ID NO: 304的VHCDR3，和輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域，所述輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VIXDR，所述VIXDR包含(c)具有包含選自由SEQ IDNO:2-3,SEQ ID NO:32-133和SEQ ID NO:386-387組成的組的SEQ ID NO的氨基酸序列的氨基酸序列的輕鏈的VLCDRl (氨基酸編號(hào)24-34)、VLCDR2 (氨基酸編號(hào)50-56)和VLCDR3 (氨基酸編號(hào)89-97);或(d) —組三個(gè)VLCDR，所述VLCDR包含含有SEQ ID NO: 305的VLCDRl、含有 SEQ ID N0:306 的 VLCDR2 和含有 SEQ ID NO: 307 或 SEQ ID NO: 308 的 VLCDR3，且各⑶R進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的⑶R在相應(yīng)重鏈或輕鏈中按⑶R1、⑶R2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，或其中VHCDRl、VHCDR2和VHCDR3的序列包含獨(dú)立地表示在圖1中的相 應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，且VIXDRl、VIXDR2和VIXDR3的序列包含獨(dú)立地表示在圖2中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，條件為PBA(i)不包含抗IGF-1R SF模塊與抗ErbB3C8模塊兩者；或(ii)包含一個(gè)或多個(gè)氨基酸分別不同于SF或C8模塊的⑶R或FR的至少一個(gè)⑶R或FR。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含VH結(jié)構(gòu)域，所述VH結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VH⑶R，所述⑶R包含(e)具有包含選自由 SEQ ID NO:4-5,SEQ ID NO: 134-165 和 SEQ ID NO: 388 組成的組的 SEQ ID NO 的氨基酸序列的氨基酸序列的重鏈的VHCDRl (氨基酸編號(hào)26-35)、VHCDR2(氨基酸編號(hào)51-66)和VHCDR3(氨基酸編號(hào)99-111);或(f) 一組三個(gè)VH CDR，所述CDR包含含有SEQ ID NO: 309的 VHCDR1、含有 SEQ ID NO:310 的 VHCDR2 和含有 SEQ ID NO:311 的 VHCDR3，和輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域，所述輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VLCDR，所述VLCDR包含(g)具有包含選自由SEQ ID N0:6-7和SEQ ID NO: 166-200組成的組的SEQ ID NO的氨基酸序列的氨基酸序列的輕鏈的VLCDRl (氨基酸編號(hào)23-33)、VLCDR2 (氨基酸編號(hào)49-55)和VLCDR3 (氨基酸編號(hào)88-98);或(h)輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域，所述輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VLCDR，所述 VLCDR 包含含有 SEQ ID NO: 312 的 VLCDRl、含有 SEQ ID NO: 313 的 VLCDR2 和含有SEQ ID N0:314或SEQ ID NO:315的VLCDR3，且各CDR進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的⑶R在抗體中按⑶R1、⑶R2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，或其中VHCDRl、VHCDR2和VHCDR3的序列包含獨(dú)立地表示在圖3中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，且VIXDRl、VIXDR2和VIXDR3的序列包含獨(dú)立地表示在圖4中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，其中PBA(i)不包含含有包含SEQ ID N0:35的輕鏈和包含SEQ ID NO: 11的重鏈的抗IGF-1R模塊和b)含有包含SEQ ID NO: 175的輕鏈和包含SEQID N0:145的重鏈的抗ErbB3C8模塊。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R VLCDR3包含SEQ IDN0:308或抗ErbB3VLCDR3包含SEQ ID N0:315。在某些實(shí)施方案中，兩對(duì)多肽鏈具有基本上一致的序列。HC Ig CR鍵之間的至少一個(gè)鍵中的至少一者為二硫鍵且可為二硫鍵或范德華鍵(van der Waals bond),或所述至少一個(gè)重鏈-輕鏈鍵中的至少一者為二硫鍵且可為二硫鍵或范德華鍵。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)為C端scFv，且在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)為C端scFv。PBA的抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)、HC Ig CR和抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)可包含由單一連續(xù)多肽鏈包含的那一對(duì)的重鏈。
[0024]PBA可(i)在體外在ΙμΜ或ΙμΜ以下、或IOOnM或IOOnM以下、或IOnM或IOnM以下、或InM或InM以下的濃度下抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，或ii)以IOnM或IOnM以下、或InM或InM以下、或IOOpM或IOOpM以下的IC50，或至少70%、或至少80%、或至少90%的最大抑制百分比抑制異調(diào)蛋白(heregulin)和IGFl誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的任一者或兩者，如pErbB3和PlGF-1R中的任一者或兩者磷酸化的抑制所指示。生長(zhǎng)抑制可在培養(yǎng)物中在DU145細(xì)胞中以CTG測(cè)定進(jìn)行測(cè)量。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制可在培養(yǎng)物中在BxPC-3細(xì)胞中在以80ng/ml的IGF-1和20ng/ml的異調(diào)蛋白刺激15分鐘后測(cè)定。
[0025]在某些實(shí)施方案中，PBA的各HC Ig CR包含介導(dǎo)與另一對(duì)的CH3結(jié)構(gòu)域接合的CH3結(jié)構(gòu)域。各HC Ig CR還可包含CH2結(jié)構(gòu)域、鉸鏈和CHl結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，PBA的CHl結(jié)構(gòu)域以其C端連接于鉸鏈的N端，所述鉸鏈以其C端連接于CH2結(jié)構(gòu)域的N端，所述CH2結(jié)構(gòu)域以其C端連接于CH3結(jié)構(gòu)域的N端。
[0026]各第一結(jié)合位 點(diǎn)可包含第一 VH結(jié)構(gòu)域，且PBA的各CHl結(jié)構(gòu)域可以其N端連接于第一 VH結(jié)構(gòu)域的C端。PBA的各CH3結(jié)構(gòu)域可以其C端連接于scFv的N端。PBA的各CH3結(jié)構(gòu)域可以其C端連接于連接型接頭的N端，所述接頭以其C端連接于scFv的N端。各輕鏈可包含第一 VL結(jié)構(gòu)域，所述第一 VL結(jié)構(gòu)域與第一 VH結(jié)構(gòu)域締合形成第一結(jié)合位點(diǎn)。各第一 VL結(jié)構(gòu)域可以其C端連接于CL結(jié)構(gòu)域的N端。各第一結(jié)合位點(diǎn)可為抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)且各scFv可為抗ErbB3scFv。各第一結(jié)合位點(diǎn)可為抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)且各scFv可為抗 IGF-1R scFv。PBA 的 HC Ig CR 可為 IgG CR，例如 IgGl 或 IgG2CR。
[0027]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含 SEQ ID N0:8 的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 9的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO:33的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗IGF-1R VHCDRUVHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 10 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且 PBA 的抗 IGF-1R VLCDR1、VIXDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO: 34的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 11 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且 PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 35的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗IGF-1RVHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO:32的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0028]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 167的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且 PBA 的抗 ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且 PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 172的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且 PBA 的抗 ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且 PBA的抗ErbB3VLCDR l、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0029]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含 SEQ ID N0:8 的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；且(a)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(b) PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 167 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 168 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(d)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(e)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 170 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(f)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(g) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(h) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(i)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(j)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 143的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含 SEQ ID NO: 175 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(k)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0030]在某些實(shí)施方案中，PBA 的抗 IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含 SEQ ID N0:9 的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；且(a)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(b) PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 167 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 168 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(d)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸 序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(e)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 170 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(f)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(g) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(h) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(i)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(j)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 143的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含 SEQ ID NO: 175 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(k)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0031]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 34的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；且(a) PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 166 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(b)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 167 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 168 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(d)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(e)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 170 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(f)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(g) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(h) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(i)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(j)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 143的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含 SEQ ID NO: 17 5 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(k)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0032]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 11的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 35的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；且(a) PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 166 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(b)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 167 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 168 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(d)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(e)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 170 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(f)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(g) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(h)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 173 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(i)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含 SEQ ID NO: 174 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(j)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0033]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含 SEQ ID N0:8 的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；且(a)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(b) PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 167 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 168 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(d)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(e)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 170 的相應(yīng) CDR 的 氨基酸序列；或(f)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(g) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(h) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(i)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(j)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 143的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含 SEQ ID NO: 175 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(k)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0034]在某些實(shí)施方案中，PBA的抗 IGF-1R VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；且(a) PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 166 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(b)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 167 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)PBA的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 168 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(d)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 169 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(e)PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ IDNO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 170 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(f)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(g) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172 的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(h) PBA 的抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(i)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(j)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含SEQ ID NO: 143的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含 SEQ ID NO: 175 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列；或(k)PBA 的抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0035]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖1中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，和/或PBA的各抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 2 (或3)的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包 含獨(dú)立地表示在圖2中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
[0036]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID N0:4(或5)的序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖3中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，和/或PBA的各抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID N0:6(或7)的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖4中的相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
[0037]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID N0:2(或3)的序列的VL結(jié)構(gòu)域，且PBA的各抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID N0:4(或5)的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID N0:6(或7)的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
[0038]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中Xl不為T、X2不為V、X6不為R、X8不為D或XlO不為I，或含有SEQID NO: 3的氨基酸序列的VL結(jié)構(gòu)域，或PBA的各抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 5的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域或含有SEQ ID N0:7的序列的VL結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中Xl不為T、X2不為V、X6不為R、X8不為D或XlO不為I，含有SEQ ID NO: 3的序列的VL結(jié)構(gòu)域；且PBA的各抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 5的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQID NO:7的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
[0039]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有選自由SEQ ID NO:8-31組成的組的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域和/或含有選自由SEQ ID NO: 32-133組成的組的氨基酸序列的VL結(jié)構(gòu)域，和/或各抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含選自由SEQ ID NO: 134-165組成的組的VH氨基酸序列；和/或選自由SEQ ID NO: 166-200組成的組的VL氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，(a)各第一 VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID N0:8_31組成的組的氨基酸序列，各第一 VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO:32-133組成的組的氨基酸序列，各第二 VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 134-165組成的組的氨基酸序列且各第二 VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 166-200組成的組的氨基酸序列，或(b)各第一 VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ IDNO: 134-165組成的組的氨基酸序列，各第一VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 166-200組成的組的氨基酸序列，各第二 VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO:8-31組成的組的氨基酸序列且各第二 VL結(jié)構(gòu)域由選自包含SEQ ID NO: 32-133的組的氨基酸序列組成。
[0040]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:32的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:33的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:34的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 11的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:35的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 8的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:33的 氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 32的氨基酸序列。
[0041]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 135的氨基酸序列且PBA的抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
[0042]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 32的氨基酸序列；且(a)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 166的氨基酸序列；或(b)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:135的氨基酸序列且PBA的ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或(c) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或(d)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或(e) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或(f)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或(g) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或(h)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或(i)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或(j)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或(k)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
[0043]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 33的氨基酸序列；且(a)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 166的氨基酸序列；或(b) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:135的氨基酸序列且PBA的ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或(c) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或(d)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:169的氨基酸序列；或(e) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或(f)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或(g)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或(h)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或(i) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或(j)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或(k)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
[0044]在某些實(shí)施方案中，各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 34的氨基酸序列；且(a)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或(b)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 135的氨基酸序列且PBA的ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或(c)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或(d)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或(e)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或(f)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或(g) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或(h)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或(i)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或(j)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或(k)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
[0045]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 11的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 35的氨基酸序列；且(a)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 166的氨基酸序列；或(b) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:135的氨基酸序列且PBA的ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或(c) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或(d)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:169的氨基酸序列；或(e) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或(f)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或(g) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或(h)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或(i) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或(j)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
[0046]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 33的氨基酸序列；且(a)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 166的氨基酸序列；或(b) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:135的氨基酸序列且PBA的ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或(c) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或(d)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:169的氨基酸序列；或(e) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或(f)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或(g)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或(h)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:173的氨基酸序列；或(i) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或(j)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或(k)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
[0047]在某些實(shí)施方案中，PBA的各抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且PBA的各抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 32的氨基酸序列；且(a)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 166的氨基酸 序列；或(b) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:135的氨基酸序列且PBA的ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或(c) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或(d)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或(e) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或(f)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或(g) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或(h)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或(i)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或(j)PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或(k) PBA的各抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且PBA的各抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。[0048]在某些實(shí)施方案中，(a)PBA的各重鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SF-Gl-Pl(SEQ ID N0:212) ；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO:214) ；SF-G1-M27(SEQ ID N0:216)；SF-G1-P6(SEQ ID NO:218) ;SF-G1_B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222)；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224) ；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228)；P4-G1-P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234)；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ；M78-G1-M27(SEQ ID NO:240)；M78-G1-P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246)；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252)；M57-G1-P6 (SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69 (SEQ ID NO:256)和 / 或 PBA 的各輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列=SFk輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ輕鏈(SEQ ID NO:204)；Μ78κ 輕鏈(SEQ ID NO:206) JPM57k 輕鏈(SEQ ID NO:208);或(b) PBA 的各重鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268) ;P1-G1_M57 (SEQ ID NO:270)；P1-G1-M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274) ;M27-G1_M57(SEQ ID NO:276)；M27-G1-M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280) ;M7-G1_M57(SEQ ID NO:282)；M7-G1-M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4 (SEQ ID NO:286) ;B72-G1_M57(SEQ ID NO:288)；B72-G1-M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292) ;B60-G1_M57(SEQ ID NO:294)；B60-G1-M78 (SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78 (SEQ ID NO: 355)和M7-G2-M78 (SEQ ID NO:357)和/或PBA的各輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:Ρ1λ輕鏈(SEQ ID NO: 258)；Μ27λ 輕鏈(SEQ ID NO: 260) ；Μ7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262) ；Β72 λ 輕鏈(SEQ ID NO:264)；和 Β60λ 輕鏈(SEQ ID NO:266)。
[0049]在某些實(shí)施方案中，(a)PBA的各重鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自由以下組成的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:SF-Gl-Pl (SEQ ID N0:212)；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO: 214) ;SF-G1_M27(SEQ ID N0:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID N0:218)；SF-G1-B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224)；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228) ;P4-G1_P6(SEQ ID NO:230)；P4-G1-B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1 (SEQ ID NO:236)；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ;M78-G1_M27(SEQ ID NO:240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:242)；M78-G1-B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248)；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和M57-G1-B69 (SEQ ID NO:256)且PBA的各輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SFk 輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ 輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ ID NO:206);和Μ57κ輕鏈(SEQ ID NO:208);或(b) PBA的各重鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SF-Gl-Pl(SEQ ID N0:212) ；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO:214) ;SF-G1_M27(SEQ ID N0:216)；SF-G1-P6(SEQ ID NO:218) ;SF-G1_B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222)；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224) ；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228)；P4-G1-P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234)；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ;M78-G1_M27(SEQ ID NO:240)；M78-G1-P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246)；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252)；M57-G1-P6 (SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69 (SEQ ID NO:256);且 PBA 的各輕鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自由以下組成的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:SFk 輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ 輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ ID NO:206)；和Μ57κ輕鏈(SEQ ID NO:208);或(c)PBA的各重鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自包含以下的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:P1-G1_P4(SEQ ID NO:268)；P1-G1-M57(SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274)；M27-G1-M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280)；M7-G1-M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ ID NO:286)；B72-G1-M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292)；B60-G1-M57(SEQ ID NO:294) ;B60-G1_M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQ ID NO:355)和M7-G2-M78 (SEQ ID NO: 357)且PBA的各輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:Pl λ 輕鏈(SEQ ID NO: 258) ；Μ27 λ 輕鏈(SEQ ID NO:260) ；Μ7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262)；Β72λ 輕鏈(SEQ ID NO:264);和 B60 λ 輕鏈(SEQ ID NO:266);或(d) PBA 的各重鏈包含選自包含以下的組的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268) ;P1-G1_M57 (SEQ ID NO:270)；P1-G1-M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274) ;M27-G1_M57(SEQ ID NO:276)；M27-G1-M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280) ;M7-G1_M57(SEQ ID NO:282)；M7-G1-M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4 (SEQ ID NO:286) ;B72-G1_M57(SEQ ID NO:288)；B72-G1-M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292) ;B60-G1_M57(SEQ ID NO:294)；B60-G1-M78 (SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78 (SEQ ID NO: 355)和M7-G2-M78 (SEQ ID NO:357)且PBA的各輕鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自由以下組成的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:Ρ1 λ輕鏈(SEQ ID NO: 258) ；Μ27 λ輕鏈(SEQ ID NO:260) ；M7 λ輕鏈(SEQ ID NO:262) ；B72 λ 輕鏈(SEQ ID NO:264);和 B60 λ 輕鏈(SEQ ID NO: 266)，其中PBA在至少一個(gè)氨基酸、⑶R或可變結(jié)構(gòu)域方面與16F不同。
[0050] 在某些 實(shí)施方案中，(a)通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于PBA的另一重鏈的PBA的各重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列=SF-Gl-Pl (SEQ ID N0:212) ;SF-G1_M1.3 (SEQID NO:214) ；SF-G1-M27(SEQ ID NO:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:218) ;SF-G1_B69(SEQ IDNO:220) ；P4-G1-C8(SEQ ID NO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224) ；P4-G1-M1.3(SEQ IDNO:226) ；P4-G1-M27(SEQ ID NO:228) ;P4-G1_P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ IDNO:232) ；M78-G1-C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ IDNO:238) ；M78-G1-M27(SEQ ID NO:240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ IDNO:244) ；M57-G1-C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ IDNO:250) ；M57-G1-M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69(SEQID N0:256)，和(b)通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于(a)的一個(gè)重鏈的PBA的各輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SFk 輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ 輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ輕鏈(SEQ ID NO:206) JPM57k輕鏈(SEQ ID NO:208);或(c)通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于PBA的另一重鏈的PBA的各重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ IDNO:268) ；P1-G1-M57(SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ IDNO:274) ；M27-G1-M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ IDNO:280) ；M7-G1-M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ IDNO:286) ；B72-G1-M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ IDNO:292) ；B60-G1-M57 (SEQ ID NO:294);和 B60-G1-M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQID NO:355)和M7-G2-M78 (SEQ ID NO: 357)，和(d)通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于(c)的一個(gè)重鏈的PBA的各輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:Pl λ輕鏈(SEQ ID NO:258) ；Μ27 λ輕鏈(SEQ ID NO:260) ；M7 λ 輕鏈(SEQ ID NO: 262) ；B72 λ 輕鏈(SEQ ID NO:264);和部0入輕鏈(SEQ ID NO:266)。
[0051]在某些實(shí)施方案中，(a)PBA的各重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SF-Gl-Pl(SEQ ID N0:212) ；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO:214) ;SF-G1_M27(SEQ ID N0:216)；SF-G1-P6(SEQ ID NO:218) ;SF-G1_B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222)；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224) ；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228)；P4-G1-P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234)；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ；M78-G1-M27(SEQ ID NO:240)；M78-G1-P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246)；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252)；M57-G1-P6 (SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69 (SEQ ID NO: 256)，和(b) PBA 的各輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SFk輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ輕鏈(SEQ ID NO:204)；Μ78κ 輕鏈(SEQ ID NO:206) JPM57k 輕鏈(SEQ ID NO:208);或(c) PBA 的各重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268) ;P1-G1_M57 (SEQ ID NO:270)；P1-G1-M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274) ;M27-G1_M57(SEQ ID NO:276)；M27-G1-M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280) ;M7-G1_M57(SEQ ID NO:282)；M7-G1-M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4 (SEQ ID NO:286) ;B72-G1_M57(SEQ ID NO:288)；B72-G1-M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292) ;B60-G1_M57(SEQ ID NO:294)；和 B60-G1-M78(SEQ ID NO:296) ；B60-G2-M78(SEQ ID NO:355)和 M7-G2-M78(SEQ IDNO: 357)，和(d)PBA的各輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95% —致或因1_10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:Ρ1λ輕鏈(SEQ IDNO: 258) ；Μ27λ 輕鏈(SEQ ID NO: 260) ；Μ7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262) ；Β72 λ 輕鏈(SEQ IDNO:264) ；Β60λ 輕鏈(SEQ ID NO:266)。
[0052]示例性PBA包括以下:(a)包含以下的SF-G1-P1PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ IDNO: 212的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 202的輕鏈序列；(b)包含以下的SF-G1-M1.3PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 214的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:202的輕鏈氨基酸序列；(c)包含以下的SF-G1-M27PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:216的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:202的輕鏈氨基酸序列；(d)包含以下的SF-G1-P6PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID N0:218的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:202的輕鏈氨基酸序列；(e)包含以下的SF-G1-B69PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 220的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID勵(lì):202的輕鏈氨基酸序列；&)包含以下的？4-61-08?84:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:222的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 204的輕鏈氨基酸序列；(g)包含以下的P4-G1-P1PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 224的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID勵(lì):204的輕鏈氨基酸序列；01)包含以下的？4-61^1.3?8八:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:226的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ IDN0:204的輕鏈氨基酸序列；(i)包含以下的P4-G1-M27PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ IDNO: 228的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 204的輕鏈氨基酸序列；(j)包含以下的P4-G1-P6PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 230的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:204的輕鏈氨基酸序列；(h)包含以下的P4-G1-B69PBA兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:232的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:204的輕鏈氨基酸序列；(i)包含以下的M78-G1-C8PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:234的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 206的輕鏈氨基酸序列；(j)包含以下的M78-G1-P1PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 236的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 206的輕鏈氨基酸序列；(k)包含以下的M78-G1-M1.3PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:238的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:206的輕鏈氨基酸序列；(I)包含以下的M78-G1-M27PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID N0:240的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列；(m)包含以下的M78-G1-P6PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:242的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 206的輕鏈氨基酸序列；(η)包含以下的M78-G1-B69PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:244的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID Ν0:206的輕鏈氨基酸序列；(ο)包含以下的M57-G1-C8PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID ΝΟ:246的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列；(P)包含以下的M57-G1-P1PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 248的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列；(r)包含以下的M57-G1-M1.3PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:250的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:208的輕鏈氨基酸序列；(s)包含以下的M57-G1-M27PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:252的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列；(t)包含以下的M57-G1-P6PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:254的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列；(U)包含以下的M57-G1-B69PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:256的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:208的輕鏈氨基酸序列；(V)包含以下的P1-G1-P4PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:268的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列；(w)包含以下的P1-G1-M57PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 270的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列；(X)包含以下的P1-G1-M78PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:272的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列；(y)包含以下的M27-G1-P4PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:274的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:260的輕鏈氨基酸序列；(z)包含以下的M27-G1-M57PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:276的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:260的輕鏈氨基酸序列；(aa)包含以下的M27-G1-M78PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:278的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID N0:260的輕鏈氨基酸序列；(ab)包含以下的M7-G1-P4PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:280的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列；(ac)包含以下的M7-G1-M57PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:282的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 262的輕鏈氨基酸序列；(ad)包含以下的M7-G1-M78PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:284的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列；(ae)包含以下的B72-G1-P4PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:286的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 264的輕鏈氨基酸序列；(af)包含以下的B72-G1-M57PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 288的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO: 264的輕鏈氨基酸序列；(ag)包含以下的B72-G1-M78PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:290的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:264的輕鏈氨基酸序列；(ah)包含以下的B60-G1-P4PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:292的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:266的輕鏈氨基酸序列；(ai)包含以下的B60-G1-M57PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO: 294的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:266的輕鏈氨基酸序列；和(aj)包含以下的B60-G1-M78PBA:兩條重鏈，各自包含SEQ ID NO:296的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，各自包含SEQ ID NO:266的輕鏈氨基酸序列。
[0053]本文還提供單特異性抗體。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R單克隆抗體包含按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO:202中加點(diǎn)狀下劃線所示SFk輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列的第一序列，抗體進(jìn)一步包含按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID N0:210中分別前 三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示SF重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列的第二序列，其中第一序列與第二序列不重疊。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID N0:204中加點(diǎn)狀下劃線所示Ρ4κ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO:222中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示P4重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO: 206中加點(diǎn)狀下劃線所示M78 κ輕鏈的VLCDRl序列、VLCDR2序列和VLCDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO: 234中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示M78重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO:208中加點(diǎn)狀下劃線所示M57 κ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO: 246中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示M57重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
[0054]在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體包含含有一組三個(gè)包含VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3的VH CDR的VH結(jié)構(gòu)域，和/或含有一組三個(gè)包含VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3的VLCDR 的 VL 結(jié)構(gòu)域，CDR 分別包含 SEQ ID NO: 302、303、304、305、306 和 307 的序列，且各 CDR進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的⑶R在抗體中按⑶R1XDR2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，其中CDR包含獨(dú)立地表示圖1(VH)或圖2 (VL)中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，且抗體不包含SF模塊。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3、VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 分別包含 SEQ ID NO: 302、303、304、305、306 和308的序列。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:8-10和12-31中任一者的相應(yīng)氨基酸序列，且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 32-34和36-133中任一者的相應(yīng)氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，(a)抗IGF-1R抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(b)抗IGF-1R抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 9的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng)CDR 的氨基酸序列；或(c)抗 IGF-1R 抗體的 VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 10 的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 34的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(d)抗IGF-1R抗體的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 11的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 35的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(e)抗IGF-1R抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 33的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或(f)抗IGF-1R抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO:32的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0055]在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:1的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示圖1中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸；抗IGF-1R抗體的VL結(jié)構(gòu)域包含S EQ ID NO: 2 (或3)的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示圖2中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸；或抗IGF-1R抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列且抗IGF-1R抗體的VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 2或3的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 8_10和12-31組成的組的氨基酸序列且VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 32-34和36-133組成的組的氨基酸序列。
[0056]在某些實(shí)施方案中，(a)抗IGF-1R抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID N0:8_10和12-31中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:8-10和12-31中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)抗IGF-1R抗體的VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO: 32-34和36-133中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:32-34和36-133中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，(a)抗IGF-1R抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO:8_10和12-31中任一者的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO: 8_10和12-31中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO:32-34和36-133中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO: 32-34和36-133中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。[0057]抗IGF-1R抗體可為IgGl抗體，例如分離的和/或單克隆IgGl抗體。
[0058]在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中(a)各重鏈包含SEQ ID NO:359,360或361的氨基酸序列；和/或(b)各輕鏈包含SEQ ID NO:204、206或208的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗IGF-1R抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中(a)各重鏈包含與SEQ ID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)各輕鏈包含與SEQ ID NO: 204、206或208中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少90%—致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:204、206或208中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，(a)抗IGF-1R抗體的各重鏈包含與SEQ ID NO:359、360或361中任一者的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)各輕鏈包含與SEQ ID NO:204,206或208中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ IDNO:204,206或208中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
[0059]示例性抗體包括(a)包含各自含有SEQ ID NO: 359的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體P4;(b)包含各自含有SEQ ID NO:360的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ IDNO: 206的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體M78 ; (c)包含各自含有SEQ ID NO:361的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID N0:208的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體M57 ;(d)包含各自含有SEQ ID NO: 361的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID N0:206的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體M 57/M78 ;和(e)包含各自含有SEQ ID NO: 359的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO: 208的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗IGF-Rl單克隆IgGl 抗體 P4/M57。
[0060]抗IGF-1R抗體可包含一個(gè)或多個(gè)其它結(jié)合位點(diǎn)，例如抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)。
[0061]還提供抗ErbB3單克隆抗體,例如單克隆抗ErbB3抗體。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID NO:258中加點(diǎn)狀下劃線所示Pl λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:268中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Pl重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID NO:260中加點(diǎn)狀下劃線所示M27 λ輕鏈的VLCDRl序列、VLCDR2序列和VLCDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO: 274中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Μ27重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID NO: 262中加點(diǎn)狀下劃線所示M7 λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO: 280中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Μ7重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID NO:264中加點(diǎn)狀下劃線所示B72 λ輕鏈的VLCDRl序列、VLCDR2序列和VIXDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID NO:286中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示B72重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3單克隆抗體按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID N0:266中加點(diǎn)狀下劃線所示B60 λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO: 292中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Β60重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
[0062]在某些實(shí)施方案中，特異性結(jié)合人ErbB3的分離的抗ErbB3抗體包含含有一組三個(gè)包含VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3的VH CDR的VH結(jié)構(gòu)域，和/或含有一組三個(gè)包含VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 的 VL CDR 的 VL 結(jié)構(gòu)域，CDR 分別包含 SEQ ID NO: 309、310、311、312、313和314的序列，且各⑶R進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的⑶R在抗體中按⑶Rl、⑶R2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，其中⑶R包含獨(dú)立地表示圖3 (VH)或圖4 (VL)中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，且抗體不包含CS模塊。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3 抗體的 VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3、VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 分別包含 SEQ ID NO: 309、310、311、312、313和315的序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的相應(yīng)氨基酸序列，且抗體的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166-174和176-200中任一者的相應(yīng)氨基酸序列。
[0063]在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3 抗體的 VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 166的相應(yīng)CDR的 氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 167的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDR1、VIXDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO: 168的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 171的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗體的VLCDR1、VLCDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO: 172的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ IDNO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且抗ErbB3抗體的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列。
[0064]在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:4(或5)的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示圖3中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，和/或抗ErbB3抗體的VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:6(或7)的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示圖4中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 134-142和144-165組成的組的氨基酸序列且抗ErbB3抗體的VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 166-174和176-200組成的組的氨基酸序列。
[0065]在某些實(shí)施方案中，(a)抗ErbB3抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)抗ErbB3抗體的VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ IDNO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，(a)抗ErbB3抗體的VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ IDNO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
[0066]抗ErbB3抗體可為IgGl抗體，例如分離的單克隆IgGl抗體。
[0067]在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中(a)各重鏈包 含SEQ ID NO: 362、363、364、365或366的氨基酸序列；和/或(b)各輕鏈包含SEQ ID N0:258、260、262、264或266的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中(a)各重鏈包含與SEQID N0:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1_30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和/或(b)各輕鏈包含與SEQ ID N0:258、260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:258、260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。在某些實(shí)施方案中，抗ErbB3抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中(a)各重鏈包含與SEQ ID N0:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，和(b)各輕鏈包含與SEQ ID NO:258,260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少95% —致或因1_10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:258、260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
[0068]抗ErbB3抗體可包含一個(gè)或多個(gè)其它結(jié)合位點(diǎn)，例如抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)。
[0069]示例性抗ErbB3抗體包括:(a)包含各自含有SEQ ID NO: 362的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗ErbB3單克隆IgGl抗體Pl ；(b)包含各自含有SEQ ID NO: 363的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO: 260的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗ErbB3單克隆IgGl抗體M27 ； (c)包含各自含有SEQ ID NO:364的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗ErbB3單克隆IgGl抗體M7 ； (d)包含各自含有SEQ ID NO: 365的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO:264的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗ErbB3單克隆IgGl抗體B72 ； (e)包含各自含有SEQ ID NO: 366的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO: 266的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗ErbB3單克隆IgGl抗體B60;和(f)包含各自含有SEQ ID NO: 363的重鏈氨基酸序列的兩條重鏈和各自含有SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列的兩條輕鏈的抗ErbB3單克隆IgGl抗體M27/M7。
[0070]還提供scFv，其可為單克隆scFv。示例性scFv包括(a)包含SEQ ID NO: 367的氨基酸序列的抗IGF-RlscFv抗體P4 ； (b)包含SEQ ID NO: 368的氨基酸序列的抗IGF-RlscFv抗體M57 ； (c)包含SEQ ID NO: 369的氨基酸序列的抗IGF-RlscFv抗體M78 ； (d)包含SEQ IDNO:370的氨基酸序列的抗ErbB3scFv抗體C8 ； (e)包含SEQ ID N0:371的氨基酸序列的抗ErbB3scFv 抗體 Pl ； (f)包含 SEQ ID NO: 372 的氨基酸序列的抗 ErbB3scFv 抗體 Ml.3 ； (g)包含SEQ ID N0:373的氨基酸序列的抗ErbB3scFv抗體M27 ;(h)包含SEQ ID NO:374的氨基酸序列的抗ErbB3scFv抗體P6 ;和(i)包含SEQ ID NO:375的氨基酸序列的抗ErbB3scFv抗體B69。
[0071]還提供包含PBA ;抗IGF-1R抗體；或抗ErbB3抗體和藥學(xué)上可接受的載劑的組合物。包含抗IGF-1R抗體的組合物可進(jìn)一步包含抗ErbB3抗體。包含抗ErbB3抗體的組合物可進(jìn)一步包含抗IGF-1R抗體。
[0072]還提供例如包含至少一個(gè)編碼序列的核酸分子，至少一個(gè)編碼序列編碼如本文所述的抗體或其鏈。核酸分子可包含啟動(dòng)子核苷酸序列和強(qiáng)化子核苷酸序列中的任一者或兩者，所述核苷酸序列可操作 地連接于至少一個(gè)編碼序列且促進(jìn)或增強(qiáng)抗體的表達(dá)。還涵蓋載體，例如包含一種或多種本文提供的核酸分子的載體，以及包含一個(gè)或多個(gè)本文提供的載體的宿主細(xì)胞。還提供產(chǎn)生本文提供的PBA、抗IGF-1抗體或抗ErbB3抗體的方法，其包含在適于表達(dá)PBA、抗IGF-1抗體或抗ErbB3抗體的條件下培養(yǎng)包含一種或多種編碼本文提供的抗體(例如PBA)或其鏈的核酸的細(xì)胞。進(jìn)一步提供治療患有癌癥的受試者的方法，所述方法包括向受試者施用治療有效量的一種或多種本文提供的抗體或PBA或組合物。
[0073]本文還提供抗IGF-1R+抗ErbB3PBA,其中當(dāng)PBA以等于或高于5mg/kg的劑量靜脈內(nèi)施用時(shí)，PBA在食蟹稱猴(Cynomolgus monkey)體內(nèi)具有至少45小時(shí)的半衰期。在某些實(shí)施方案中，PBA在為小鼠或食蟹獼猴的生物體體內(nèi)具有比另一結(jié)合相同表位的多價(jià)雙特異性抗體在相同生物體體內(nèi)的半衰期在統(tǒng)計(jì)上顯著較長(zhǎng)(例如長(zhǎng)50%、2倍或2倍以上)的半衰期，其中抗原結(jié)合特異性的方向在fab與scfv之間相反。
[0074]PBA可使細(xì)胞(例如癌細(xì)胞)中異調(diào)蛋白誘導(dǎo)的pAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或 100%。PBA可使細(xì)胞(例如癌細(xì)胞)中 IGF-1 誘導(dǎo)的 pAKT 信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%。PBA可使細(xì)胞(例如癌細(xì)胞)中胰島素誘導(dǎo)的pAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99% 或100%O PBA可使細(xì)胞(例如癌細(xì)胞)中IGF-2誘導(dǎo)的pAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%、99% 或 100%。
[0075]PBA在體內(nèi)或體外抑制腫瘤細(xì)胞中的mTOR活化(磷酸化)的程度可大于單特異性抗IGF-1R AbM或與PBA結(jié)合IGF-1R上的相同表位的單特異性抗IGF-1R Ab。PBA在體內(nèi)或體外降低腫瘤細(xì)胞中的mTOR蛋白水平的程度可大于單特異性抗IGF-1R AbM或與PBA結(jié)合IGF-1R上的相同表位的單特異性抗IGF-1R Ab。在某些實(shí)施方案中，相對(duì)于單特異性抗IGF-1R AbM或相對(duì)于與PBA結(jié)合IGF-1R上的相同表位的單特異性抗IGF-1R Ab, PBA在體內(nèi)或體外使腫瘤細(xì)胞中的mTOR活化或mTOR蛋白水平至少降低50%倍，或降至1/2倍、1/3倍、1/4倍或1/5倍或低于1/5倍。在某些實(shí)施方案中，PBA在nu/nu小鼠中的人異種移植物模型中比等摩爾量的抗IGF-1R IgG更有效地抑制腫瘤生長(zhǎng)。在一些實(shí)施方案中，異種移植物模型包含人DU145、BxPC-3、SK-ES-l或Cak1-1細(xì)胞異種移植物。在另一實(shí)施方案中，多價(jià)雙特異性抗體在nu/nu小鼠中的人異種移植物模型中比等摩爾量的抗IGF-1R IgG與等摩爾量的抗ErbB3IgG組合的組合更有效地抑制腫瘤生長(zhǎng)。
[0076]附圖簡(jiǎn)述
[0077]圖1A-B:示例性IGF-1R VH序列(SEQ ID NO:8-31和384-385，自上至下連續(xù)編號(hào))與其所來(lái)源的共同序列(SEQ ID NO:1)的比對(duì)。⑶R加有下劃線且⑶R的SEQ ID NO作為方括號(hào)中的編號(hào)(例如“[S.302]”)提供于CDR上方。
[0078]圖2A-E:示例性IGF-1R VL序列(SEQ ID NO: 32-133和386-387，自上至下連續(xù)編號(hào))與其所來(lái)源的兩個(gè)共同序列(SEQ ID N0:2和3)的比對(duì)。SEQ IDN0:2包括16F的VL結(jié)構(gòu)域，而SEQ ID NO: 3不包括。⑶R加有下劃線且⑶R的SEQ ID NO作為方括號(hào)中的編號(hào)提供于⑶R上方。
[0079]圖3A-B:示例性ErbB3VH序列(SEQ ID NO: 134-165和388，自上至下連續(xù)編號(hào))與其所來(lái)源的兩個(gè)共同序列(SEQ ID N0:4和5)的比對(duì)。SEQ ID NO:4包括16F的VH結(jié)構(gòu)域，而SEQ ID NO: 5不包括。⑶R加有下劃線且⑶R的SEQ ID NO作為方括號(hào)中的編號(hào)提供于⑶R上方。
[0080]圖4A-B:示例性ErbB3VL序列(SEQ ID NO: 166-200，自上至下連續(xù)編號(hào))與其所來(lái)源的兩個(gè)共同序列(SEQ ID N0:6和7)的比對(duì)。SEQ ID NO:6包括16F的VL結(jié)構(gòu)域，而SEQ ID N0:7不包括。⑶R加有下劃線且⑶R的SEQ ID NO作為括號(hào)中的編號(hào)提供于⑶R上方。
[0081]圖5:示例性抗 IGF-1R-1gGl-抗 ErbB3(圖 5A)和抗 ErbB3_IgGl_ 抗 _IGF_1R(圖5B)多價(jià)雙特異性抗體的輕鏈和重鏈的氨基酸序列。
[0082]圖5A示出以下抗IGF-1R-1gGl-抗ErbB3雜交重鏈的氨基酸序列:SF_G1_C8(即16F-SEQ ID N0:210) ；SF-Gl-Pl(SEQ ID N0:212) ；SF-G1-M1.3(SEQ ID N0:214)；SF-G1-M27(SEQ ID NO:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:218) ;SF-G1_B69(SEQ ID NO:220)；P4-G1-C8(SEQ ID NO:222) ;P4-G1_P1(SEQ ID NO:224) ；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226)；P4-G1-M27(SEQ ID NO:228) ;P4-G1_P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ ID NO:232)；M78-G1-C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238)；M78-G1-M27(SEQ ID NO:240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ ID NO:244)；M57-G1-C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250)；M57-G1-M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69 (SEQ IDNO:256)。
[0083]圖5B示出以下抗ErbB3-1gGl-抗IGF-1R雜交重鏈的氨基酸序列:P1_G1_P4 (SEQID NO:268) ；P1-G1-M57(SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ IDNO:274) ；M27-G1-M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ IDNO:280) ；M7-G1-M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ IDNO:286) ；B72-G1-M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ IDNO:292) ；B60-G1-M57(SEQ ID NO:294) ;B60-G1_M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQ IDNO:355)和 M7-G2-M78(SEQ ID NO:357)。
[0084]圖圖5A和5B的這些雜交重鏈各自包含三個(gè)命名模塊且各自根據(jù)其模塊組成(參見(jiàn)圖8)進(jìn)行命名，其中左邊第一個(gè)名稱為氨基端模塊，中間第二個(gè)名稱為中間模塊(如所示，在序列提供于圖圖5A和5B中的多價(jià)雙特異性抗體中，始終為Gl或G2)且右邊第三個(gè)名稱為羧基端模塊。各第一氨基端模塊包含自左至右包含各自由點(diǎn)狀下劃線所指示的VHCDRU VHCDR2和VHCDR3的重鏈VR。各第二中間模塊命名為Gl或G2且包含IgGlCR，且不形成多價(jià)雙特異性抗體中的抗原結(jié)合位點(diǎn)。Gl或G2模塊序列的鉸鏈、CH2和CH3部分加有單底線。CHl部分始于ASTK(SEQ ID N0:392)。連接Gl模塊與第三模塊的Gly-Ser接頭序列加有雙底線。各第三羧基端模塊出現(xiàn)在此Gly-Ser接頭序列的右側(cè)且包含scFv，所述scFv包含自左至右包含VHCDRl、VHCDR2和VHCDR3 (各自加有點(diǎn)狀下劃線)的重鏈VR、Gly-Ser scFv接頭(加有雙波狀底線)和包含VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3 (各自加有點(diǎn)狀下劃線)的輕鏈VR。
[0085]各氨基端或羧基端重鏈模塊的結(jié)合特異性與圖5A或5B的相應(yīng)命名輕鏈相同。
[0086]圖5A示出以下成熟抗IGF-Rl κ輕鏈的氨基酸(“aa”)序列:SF(SEQ ID NO: 202)、P4 (SEQ ID N0:204)、M78(SEQ ID NO:206)和 M57(SEQ ID NO:208)。
[0087]圖5B示出以下成熟抗ErbB3A輕鏈的氨基酸序列:P1 (SEQ ID NO: 258)、M27 (SEQID N0:260)、M7(SEQ ID NO:262),B72 (SEQ ID NO:264)和 B60(SEQ ID NO:266)。
[0088]圖圖5A和5B的各輕鏈自左至右包含VIXDRl、VIXDR2和VIXDR3 (各自加點(diǎn)狀下劃線)。CL結(jié)構(gòu)域在抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域中始于“RTVAA”(SEQ ID NO: 393)且在抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域中始于 “QPKAA”(SEQ ID NO:394) ?
[0089]為形成包含圖圖5A和5B的重鏈和輕鏈的完整多價(jià)雙特異性抗體，將各重鏈與共享重鏈的氨基端模塊的名稱的輕鏈共表達(dá)。所得各多價(jià)雙特異性抗體采取IgG抗體的形式(其如同原生IgG抗體，包含兩個(gè)基本上相同的抗原結(jié)合位點(diǎn))，具有scFv附接于IgG的兩條重鏈各自的羧基端。
[0090]圖6:示例性6A)抗IGF-1R IgGl抗體和6B)抗ErbB3IgGl抗體的氨基酸序列；和6C)抗IGF-1R scFv和6D)抗ErbB3scFv的氛基酸序列。
[0091]圖7:SF-G1-C8(16F)的7A)重鏈和7B)輕鏈的氨基酸序列，各自具有在成熟抗體中不存在的前導(dǎo)序列。重鏈氨基酸序列(SEQ ID NO: 300)為具有附加N端前導(dǎo)序列的SF-G1-C8 (SEQ ID NO: 210)的重鏈氨基酸序列。輕鏈氨基酸序列(SEQ ID NO: 298)為具有附加N端前導(dǎo)序列的SFk輕鏈(SEQ ID NO:202)的輕鏈氨基酸序列。前導(dǎo)序列以粗體加下劃線顯示；加有點(diǎn)狀下劃線的序列為如上所示的CDR ;接頭(鉸鏈、連接型接頭和scFv接頭)在其粗體序列上方說(shuō)明，且個(gè)別CH3氨基酸殘基E356和M358以黑體顯示(其為可如下取代為E356D和M358L的氨基酸)。圖7A中的CH1、CH2、CH3、VH和VL結(jié)構(gòu)域和圖7B中的CL結(jié)構(gòu)域的身份在各結(jié)構(gòu)域的上方說(shuō)明，各自的起點(diǎn)由直角箭頭指示。
[0092]圖8:示出得到Ig樣四價(jià)雙特異性抗體的模塊的示意圖。結(jié)合結(jié)構(gòu)域(“N端模塊”和“C端模塊”)所來(lái)源的抗體標(biāo)記為單克隆抗體I和單克隆抗體2。圖和模塊在本質(zhì)上為概念性的；聯(lián)結(jié)在一起以制備這種雙特異性抗體的實(shí)際DNA片段可能與模塊的限制不一致，但最終結(jié)果基本上如所示。此外，單克隆抗體I和單克隆抗體2可能不呈所示的IgG格式，例如任一者或兩者可為scFv。如果使用scFv作為N端模塊的來(lái)源，那么通過(guò)移除編碼scFv接頭的DNA序列以產(chǎn)生分別由重鏈和輕鏈多肽鏈包含的VH和VL區(qū)來(lái)將其由scFv格式轉(zhuǎn)變?yōu)镕v格式。
[0093]圖9:模擬ErbB網(wǎng)絡(luò)以預(yù)測(cè)最佳ErbB3治療劑的設(shè)計(jì)。9A)圖解描繪ErbB網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性:配體結(jié)合、受體二聚化、受體運(yùn)輸和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)各自表述于基于質(zhì)量-作用的動(dòng)力學(xué)1旲型中。9B)使用ErbB網(wǎng)絡(luò)中各蛋白質(zhì)的I旲擬擾動(dòng)來(lái)鑒別在異調(diào)蛋白或乙胞素(betacellulin)刺激下下游信號(hào)磷酸化Akt對(duì)各蛋白質(zhì)的敏感性。9C)經(jīng)由解離速率的變化檢查Akt對(duì)抗ErbB3抗體的劑量反應(yīng)性的多種親和力結(jié)合常數(shù)。各圖自上至下所列Kd的順序?qū)?yīng)于各圖中自左至右曲線的順序。
[0094]圖10:預(yù)測(cè)雙特異性抗體共抑制兩條路徑的能力取決于相對(duì)受體水平。計(jì)算模擬表達(dá)三種不同摩爾比的各受體:另一受體的細(xì)胞中計(jì)算模擬的雙特異性抗體對(duì)A)IGF-1R、B)ErbB3和C)共有下游信號(hào)傳導(dǎo)路徑成分Akt (Akt激酶)的活性水平的影響。各圖中的三條曲線可由其右手末端各自與圖邊框相交的相對(duì)位置加以鑒別。最左邊X軸/最下邊I軸交線=IGF-1R為ErbB310倍多的模擬，中間交線=等量IGF-1R與ErbB3的模擬，最右邊x軸/最上邊I軸交線=ErbB3為IGF-1R10倍多的模擬。歸因于雙特異性劑對(duì)IGF-1R的親和力較低，因此當(dāng)ErbB3 水平降低時(shí)IGF-1R抑制的效力降低，表明親合性的作用。未能有效抑制IGF-1R導(dǎo)致抑制pAkt的能力降低(右)。因雙特異性劑對(duì)ErbB3的親和力較強(qiáng)，因此抑制ErbB3的能力不受IGF-1R水平影響。
[0095]圖11:通過(guò)共價(jià)酵母展示對(duì)scFv親和力和穩(wěn)定性進(jìn)行同時(shí)優(yōu)化。11A)通過(guò)熒光活化細(xì)胞分選測(cè)量的熱激發(fā)后分離的酵母展示scFv模塊對(duì)可溶性GFR2 (ErbB3) -Fe的親和力。11B)對(duì)共價(jià)連接于酵母表面的優(yōu)化scFv模塊進(jìn)行的熱激發(fā)測(cè)定證實(shí)其較高熱穩(wěn)定性。通過(guò)熒光活化細(xì)胞分選測(cè)量65°C下熱應(yīng)激5分鐘后殘留的對(duì)ErbB3-Fc的殘余結(jié)合活性。MFI=平均熒光強(qiáng)度。
[0096]圖12:可使用微差掃描熒光來(lái)估算血清穩(wěn)定性。12A)通過(guò)微差掃描熒光測(cè)定法獲得的微觀穩(wěn)定性測(cè)量值。12B)根據(jù)在37°C下在小鼠血清中孵育前(100%)和3天后的結(jié)合活性百分比測(cè)量的宏觀穩(wěn)定性。概念驗(yàn)證雙特異性蛋白質(zhì)在微觀(A)與宏觀(B)性質(zhì)兩方面均顯示與穩(wěn)定化類似物相比較低的穩(wěn)定性。
[0097]圖13:優(yōu)化的雙特異性抗體顯示與概念驗(yàn)證雙特異性抗體相比較強(qiáng)的細(xì)胞結(jié)合。與表達(dá)IGF-1R與ErbB3兩者的BxPC_3細(xì)胞的結(jié)合通過(guò)熒光活化細(xì)胞分選進(jìn)行測(cè)量。
[0098]圖14:與ADRr和MCF7細(xì)胞的結(jié)合。14A)與ADRr細(xì)胞的結(jié)合。如此圖和以下圖圖14B、18、19、20A和20B中所用，“模塊2_21的IgG”是指具有與ILE-12中相同的抗ErbB3VR的抗ErbB3抗體?！澳K2-3的IgG”是指具有與EL1-7和ILE-10中相同的抗ErbB3VR的抗ErbB3抗體?！澳K5-7的IgG”是指具有與ELI_7、ILE_10和ILE-12中相同的抗IGF-1RVR的抗IGF-1R抗體。14B)與MC7細(xì)胞的結(jié)合。
[0099]圖15:ILE-7 和 EL1-7 對(duì) pAKT 的抑制。
[0100]圖16:EL1-7對(duì)DU145細(xì)胞生長(zhǎng)的影響(通過(guò)CTG測(cè)定測(cè)量)。RLU=相對(duì)發(fā)光單位。
[0101]圖17:通過(guò)CTG測(cè)定測(cè)量的EL1-7對(duì)BxPC_3細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制。
[0102]圖18:異種移植腫瘤生長(zhǎng)曲線。IgG抗體的描述提供于圖14A的圖例中。
[0103]圖19:第41天時(shí)的BxPC-3最終異種移植腫瘤體積。
[0104]圖20:異種移植腫瘤生長(zhǎng)速率和尺寸。20A)DU145腫瘤生長(zhǎng)曲線。20B)第36天時(shí)的DU145腫瘤體積。
[0105]圖21:多價(jià)雙特異性抗體在寬泛的ErbB3和IGF-1R受體水平范圍內(nèi)抑制信號(hào)傳導(dǎo)。EL1-7顯示在經(jīng)過(guò)修飾以含有寬泛范圍的IGFlR和ErbB3受體水平的BxPC-3細(xì)胞系中抑制pAkt?！癇xPC-3對(duì)照”是指具有不變IGF-1R和ErbB3水平的BxPC-3細(xì)胞?！癇xPC-3-1GFlR-Modl” 是指 IGF-1R 水平降低 37% 的 BxPC-3 細(xì)胞?！癇xPC-3-ErbB3-Modl”是指ErbB3水平降低48%的BxPC-3細(xì)胞。“BxPC-3-ErbB3_Mod2”是指ErbB3水平降低88%的BxPC-3細(xì)胞。
[0106]圖22:在BcPC3細(xì)胞中由16F (SF-G1-C8) “再工程改造雙特異性劑”和EL1-7 “原始雙特異性劑”所致的Pl GF-1R水平降低。
[0107]圖23:BxPC-3 細(xì)胞中 16F (SF-G1-C8)、抗 IGF-1R Ab#B(西妥木單抗(cixutumumab) ；SEQ ID324+SEQ ID325)、抗ErbB3Ab#A (SEQ ID336+SEQ ID337)或抗 IGF-1RAb#B+ 抗 ErbB3Ab#A 對(duì) 23A) IGF1R、23B)ErbB3 和 23C)AKT 的磷酸化的抑制，和 DU145 細(xì)胞中 16F(SF-G1-C8)、抗 IGF-lRAb#B (西妥木單抗；SEQ ID324+SEQ ID325)、抗ErbB3Ab#A (SEQID 336+SEQ ID337)或抗 IGF-1R Ab#B+ 抗 ErbB3Ab#A 對(duì) 23D) IGF1R、23E) ErbB3 和 23F)AKT的磷酸化的抑制。
[0108]圖 24:24A) 16F(SF-G1-C8)與 24B)抗 IGF-1R Ab#A (加尼圖單抗(ganitumab) ；SEQID327+SEQ ID328)、抗 ErbB3Ab#A(SEQ ID336+SEQ ID 337)和抗 IGF-1R Ab#A+抗 ErbB3Ab#A的信號(hào)傳導(dǎo)抑制的比較。在24A與24B各圖中，IGFlR磷酸化的抑制于上圖中示出，ErbB3磷酸化的抑制于中圖中示出，且AKT磷酸化的抑制于下圖中示出；所有均在BxPC-3細(xì)胞中。
[0109]圖25:雙特異性抗體顯示與BxPC-3細(xì)胞強(qiáng)結(jié)合。如通過(guò)FACS所測(cè)量，在將指定抗體與BxPC-3細(xì)胞一起孵育后產(chǎn)生結(jié)合曲線。
[0110]圖26:雙特異性抗體顯示與重組ErbB3蛋白強(qiáng)結(jié)合，指定抗體在ErbB3_His涂布的盤中孵育且通過(guò)ELISA測(cè)量結(jié)合抗體水平后產(chǎn)生結(jié)合曲線。
[0111]圖27:雙特異性抗體顯示對(duì)雙重路徑信號(hào)傳導(dǎo)的強(qiáng)抑制。pIGFlR、pErbB3和pAKT產(chǎn)生的BxPC-3信號(hào)抑制如所示。
[0112]圖28:指定雙特異性抗體在血清中在37°C下72小時(shí)的穩(wěn)定性百分比。
[0113]圖29 =A-D示出如FACS所測(cè)量，各種雙特異性抗體(如所示)與BxPC_3細(xì)胞的結(jié)合。在 29A)中，M27/M7-1gG-P4、M27/M7-1gG-M57 和 M27/M7_IgG_M78 雙特異性抗體的 N 端模塊含有M27重鏈和M7輕鏈。
[0114]圖30 =A-E吃出如根據(jù)PlGFlR水平的變化所測(cè)量，各種雙特異性抗體(如所示)的BxPC-3信號(hào)抑制數(shù)據(jù)。[0115]圖31:A-F示出如根據(jù)pErbB3水平的變化所測(cè)量，各種雙特異性抗體(如所示)的BxPC-3信號(hào)抑制數(shù)據(jù)。
[0116]圖32 =A-E示出如根據(jù)pAKT水平的變化所測(cè)量，各種雙特異性抗體(如所示)的BxPC-3信號(hào)抑制數(shù)據(jù)。
[0117]圖33 =A-D示出如根據(jù)PlGFlR水平的變化所測(cè)量，各種雙特異性抗體(如所示)與抗 ErbB3Ab#A (SEQ ID N0:336+SEQ ID NO:337)和抗 IGF-1R Ab#A(加尼圖單抗；SEQ IDN0:327+SEQ ID NO:328)的組合的BxPC-3信號(hào)抑制數(shù)據(jù)的比較。
[0118]圖34 =A-D示出如根據(jù)pErbB3水平的變化所測(cè)量，各種雙特異性抗體(如所示)與抗 ErbB3Ab#A (SEQ ID N0:336+SEQ ID NO:337)和抗 IGF-1R Ab#A(加尼圖單抗；SEQ IDN0:327+SEQ ID NO:328)的組合的BxPC-3信號(hào)抑制數(shù)據(jù)的比較。
[0119]圖35 =A-D示出如根據(jù)pAKT水平的變化所測(cè)量，各種雙特異性抗體與抗ErbB3Ab#A (SEQ ID N0:336+SEQ ID NO:337)和抗 IGF-1R Ab#A (加尼圖單抗；SEQ IDN0:327+SEQ ID NO:328)的組合的BxPC-3信號(hào)抑制數(shù)據(jù)的比較。
[0120]圖36 =A-B示出各種雙特異性抗體(如所示)在小鼠血清中在37°C下5天的校正穩(wěn)定性。
[0121]圖37:根據(jù)本文的公開(kāi)內(nèi)容可并入多價(jià)雙特異性抗體中的抗IGF-1R抗體的重鏈、輕鏈和scFv的公布氨基酸序列。
[0122]圖38:根據(jù)本 文的公開(kāi)內(nèi)容并入多價(jià)雙特異性抗體中的抗ErbB3抗體的重鏈、輕鏈和scFv的公布氨基酸序列。
[0123]圖39:A-B 示出在 DU145 細(xì)胞中由 PBA A)M7_G1_M78 ( “M7-M78”)、P4-G1-M1.3( “P4-M1.3”)、P4-G1-C8 ( “P4-C8”)和 B)SF_G1_C8( “SF-C8”)與不存在PBA ( “IGF1+HRG”)；不存在誘導(dǎo)劑和 PBA ( “無(wú) Tx”)；僅有抗 EGFlR mAB ;僅有抗 ErbB3mAb ；和抗IGF-1R+抗ErbB3的組合的情況下對(duì)IGFl和異調(diào)蛋白(HRG)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制的比較，如根據(jù)對(duì)AKT磷酸化的抑制所測(cè)量。C-D示出與A-B中類似，但在BxPC-3細(xì)胞中獲得的抑制數(shù)據(jù)。此圖和圖圖40-44和51中的抗IGFlR和抗ErbB3mAb分別為抗IGF-1R Ab#A(加尼圖單抗；SEQ ID N0:327+SEQ ID NO: 328)和抗ErbB3Ab#A(SEQ ID N0:336+SEQ ID NO: 337) ?
[0124]圖40:A-C示出如通過(guò)對(duì)AKT磷酸化的抑制所測(cè)量，PBA M7-G1-M78、P4-M1.3、P4-C8和SF-C8在具有A-D)野生型水平的IGF-1R和ErbB3 ；B-E)水平降低約50%的IGF-1R ；或C-F)水平降低約50%的ErbB3的BxPC-3細(xì)胞中對(duì)IGFl和異調(diào)蛋白(HRG)誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制。
[0125]圖41 =A-D示出如根據(jù)AKT磷酸化的抑制所測(cè)量，BxPC-3細(xì)胞中PBAM7-G1-M78、P4-M1.3、P4-C8 和 SF-C8 對(duì)由 A-B)40ng/ml IGFl 或 C-D)400ng/ml IGFl 誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制。
[0126]圖42 =A-D示出如根據(jù)AKT磷酸化的抑制所測(cè)量，BxPC-3細(xì)胞中PBAM7-G1-M78、P4-M1.3、P4-C8 和 SF-C8 對(duì)由 A-B) 20ng/ml IGFl 或 C_D) 200ng/ml 異調(diào)蛋白(HRG)誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制。
[0127]圖43:A-B 示出 A)與 PBA M7_G1-M78、P4_ML 3、P4_C8 和 SF-C8 —起孵育 15 分鐘后；或B)與PBA —起孵育2小時(shí)后A549細(xì)胞中基本信號(hào)傳導(dǎo)的抑制。C-D示出C)與PBAM7-G1-M78、P4-M1.3、P4-C8和SF-C8 —起孵育15分鐘后；或D)與PBA —起孵育2小時(shí)后BsPC-3細(xì)胞中基本信號(hào)傳導(dǎo)的抑制。所有信號(hào)傳導(dǎo)均通過(guò)測(cè)量pAKT水平來(lái)測(cè)定。
[0128]圖44 4-8示出用？4-61-03或？4-61-]?1.3處理24小時(shí)后4)4549細(xì)胞和抝81?(:-3細(xì)胞中的總IGFlR水平。
[0129]圖45:示出血清饑餓(“饑餓”)或僅用IGFl或IGF2處理或在PBA P4-M1.3或P4-C8存在下用IGFl或IGF2處理的DU145或MIA PaCa-2 (高IR)細(xì)胞中pIGFlR、pAKt和B-肌動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)水平的蛋白質(zhì)印跡。
[0130]圖46:示出血清饑餓(“饑餓”)或用IGFl處理；在P4-M1.3存在下用IGFl處理；用胰島素處理或在P4-M1.3存在下用胰島素處理的DU145細(xì)胞中pIGFIR、pAKt和B-肌動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)水平的蛋白質(zhì)印跡。
[0131]圖47:示出在不存在配體下(泳道1-3)或在存在IGFl和異調(diào)蛋白(HRG)下(泳道4-6)和在不存在PBA下或在存在PBA M7-78或P4-C8下孵育的BxPC-3細(xì)胞中IGF1R、pIGFIR、ErbB3、pErbB3、pAkt和B-肌動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)水平的蛋白質(zhì)印跡。
[0132]圖48 =A-F示出小鼠或食蟹獼猴血清中孵育O或5天后所存在的A-B)M7_G1_M78 ；C-D) P4-G1-M1.3 ;E_F) P4-G1-C8 的量。G-H 示出在涂有 IGF-1R(G)或 ErbB3 (H)的盤中人血清中O或6天后所存在的P4G1-M1.3的量。
[0133]圖 49:A-F 示出 PBA P4-C8 (A、D)、P4-M1.3 (B、E)和 M7-M78 (C、F)與 A-C)人、小鼠、大鼠和食蟹獼猴ErbB3以及D-F)人、小鼠、大鼠和食蟹獼猴EGF-1R的結(jié)合的水平。未提供M7-M78與大鼠和食蟹獼猴IGF-1R的結(jié)合。
[0134]圖50 =A-B示出 使A) IGFl和B) IGF2自與盤結(jié)合的IGF-1R脫離所必需的PBAP4-G1-M1.3 的濃度。
[0135]圖 51:A-F 示出在體外在經(jīng)過(guò) IGF-1+HRG 或 IGF-1+HRG+P4-G1-M1.3 處理的 BxPC-3細(xì)胞中隨時(shí)間每毫克總蛋白質(zhì)中磷酸化IGF-1R(A)、磷酸化ErbB3(B)、磷酸化Akt (C)、磷酸化 ERK (p44/p42 ；D)、磷酸化 mT0R(Ser2448, E)和磷酸化 S6 (Ser235/236 ；5F)的 ng 數(shù)。
[0136]圖 52:在用血清、IGF1、IGFl 與 P4M1.3(P4-G1-M1.3)、IGF2、IGF2 與P4M1.3 (P4-G1-M1.3)、胰島素和胰島素與 P4M1.3 (P4-G1-M1.3)處理的 BxPC-3 和 A673 細(xì)胞中pIGFIR、pAKT和B肌動(dòng)蛋白的水平。
[0137]圖53:A-B示出在注射了 PBS、P4-G1_M1.3或抗IGF-1R Ab#A之一的小鼠的研究結(jié)束B(niǎo)xPC-3腫瘤中mTOR(A)和磷酸化mT0R( “pmTOR”)的水平。
[0138]圖 54:A-F 示出在注射了 PBS、P4-G1-M1.3、抗 IGF-1R Ab#A+抗 ErbB3IgG 和 mTOR抑制劑依維莫司(everolimus)之一的小鼠的研究結(jié)束Cak1-1腫瘤中，IGF-1R和胰島素受體 A)、ErbB3 和 EGFR(B)、在殘基 S473 上磷酸化的 AKT ( “pAKT S473”)和 Τ308 ( “ρΑΚΤΤ308” ) (C)、磷酸化 FoxOl 和 Fox03a(D, “磷酸化 FoxOl (Thr24) /Fox03a (Thr32) ” )、在殘基S2448和S2481上磷酸化的mTOR(E)以及在殘基S235/236和S240/244上磷酸化的S6 (F，“PS6S235/236” 和 “pS6S240/244”)的水平。
[0139]圖55:A-C示出在注射了 PBS、P4-G1-M1.3或抗IGF-1R Ab#A之一的小鼠的研究結(jié)束 BxPC-3 腫瘤中，IGF-1R 和 ErbB3 (A)、磷酸化 EGFR(B，“pEGFR”)以及磷酸化 mTOR (“pmTORS2448”)和磷酸化 S6( “pS6S235/236”)(C)的水平。
[0140]圖56示出在盤用IGF-1R-His涂布且向各孔中添加了 P4-G1-M1.3的連續(xù)稀釋液的ELISA測(cè)定中IGF-1 ( “IGF1”，左圖)和IGF-2 ( “IGF2”，右圖)的水平。[0141]圖57:A-D 示出在 DU145 ⑷、BxPC-3 (B)、SK-ES-1 (C)和 Cak1-1 ⑶異種移植物模型中隨時(shí)間的平均腫瘤體積。向小鼠注射以下之一:PBS、500l.! gP4-Gl-Ml.3、100 μ gP4-G1-M1.3,500 μ g P4-G1-C8 或 100 μ g P4-G1-C8(A) ;PBS、500 μ g P4-G1-M1.3,300 μ gP4-G1-M1.3,100 μ g P4-G卜Ml.3、500μ gP4-Gl_C8、300μ g P4-G1-C8、100 μ g P4-G1-C8、375yg 抗 IGF-1R Ab#A(加尼圖單抗；SEQ ID N0:327+SEQ ID NO: 328)、225 μ g 抗 IGF-1RAb#A(加尼圖單抗；SEQ ID N0:327+SEQ ID NO: 328)或 75 μ g 抗 IGF-1R Ab#A(加尼圖單抗；SEQ ID N0:327+SEQ ID NO:328) (B) ;PBS、500yg P4-G1-M1.3、300 μ gP4-Gl_Ml.3或 100 μ g P4-G1-M1.3(C)；或 PBS,500 μ g P4-G1-M1.3、300μ gP4-Gl_Ml.3、100 μ gP4-G1-M1.3、以等暴露量給藥的抗IGF-1R+抗ErbB3或以等摩爾量給藥的抗IGF-1R+抗ErbB3(D)。
[0142]圖58示出靶標(biāo)介導(dǎo)的藥物處置模型與由來(lái)自注射了 Ml.3_G1_P4的小鼠的小鼠血液獲得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的擬合。實(shí)線為給予500yg劑量的小鼠的擬合，而點(diǎn)線為給予IOOyg劑量的小鼠的擬合。
[0143]序列簡(jiǎn)沭:
[0144]本文提及和序列表中所列的氨基酸(“aa”)序列說(shuō)明如下。
[0145]SEQ ID NO:1為來(lái)源于示例性IGF-1R VH序列的氨基酸共同序列。
[0146]SEQ ID N0:2為來(lái)源于示例性IGF-1R VL序列的氨基酸共同序列。
[0147]SEQ ID NO:3為來(lái)源于示例性IGF-1R VL序列的氨基酸共同序列，所述示例性IGF-1R VL序列不包括16 F的IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)的VL序列。
[0148]SEQ ID N0:4為來(lái)源于示例性ErbB3VH序列的氨基酸共同序列。
[0149]SEQ ID N0:5為來(lái)源于示例性ErbB3VH序列的氨基酸共同序列，所述示例性ErbB3VH序列不包括16F的ErbB3結(jié)合位點(diǎn)的VH序列。
[0150]SEQ ID N0:6為來(lái)源于示例性ErbB3VL序列的氨基酸共同序列。
[0151]SEQ ID N0:7為來(lái)源于示例性ErbB3VL序列的氨基酸共同序列，所述示例性ErbB3VL序列不包括16F的ErbB3結(jié)合位點(diǎn)的VL序列。
[0152]SEQ ID N0:8_31 為圖1 的 IGF-1R VH 氨基酸序列。
[0153]SEQ ID NO:32-133 為圖 2 的 IGF-1R VL 氨基酸序列。
[0154]SEQ ID NO: 134-165 為圖 3 的 ErbB3VH 氨基酸序列。
[0155]SEQ ID NO: 166-200 為圖 4 的 ErbB3VL 氨基酸序列。
[0156]SEQ ID NO:201-256 為圖 5A 中提供的抗 IGF-1R/抗 ErbB3IgGl (scFv)2 的成熟輕鏈和重鏈的核苷酸序列(奇數(shù)編號(hào))和氨基酸序列(偶數(shù)編號(hào))，其序列ID編號(hào)如下。κ 輕鏈:SF (SEQ ID NO:201 和 202) ；P4(SEQ ID NO:203 和 204) ；M78 (SEQ ID NO:205和 206)；和 M57 (SEQ ID NO: 207 和 208)。重鏈 scFv 融合物(雜交體):SF-G1_C8 (即16F ；SEQ ID NO: 209 和 210) ; SF-G 卜PI (SEQ IDN0:211 和 212) ；SF-G1-M1.3 (SEQ IDNO:213 和 214) ；SF-G1-M27(SEQ IDN0:215 和 216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:217 和 218)；SF-G1-B69(SEQ ID N0:219 和 220) ;P4-G1_C8 (SEQ ID N0:221和 222) ；P4-G1-P1(SEQ IDNO:223 和 224) ；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:225 和 226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:227 和 228)；P4-G1-P6(SEQ ID N0:229 和 230) ;P4-G1_B69(SEQ ID N0:231和 232) ;M78-G1_C8(SEQ IDNO:233 和 234) ；M78-G1-P1 (SEQ ID NO:235 和 236) ；M78-G1-M1.3 (SEQ ID NO:237 和 238)；M78-G1-M27(SEQ ID NO:239 和 240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:241 和 242) ;M78-G1_B69(SEQID NO:243 和 244) ;M57-G1_C8 (SEQ ID NO:245 和 246) ；M57-G1-P1 (SEQ ID NO:247 和 248)；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:249和250) ;M57-G1_M27 (SEQ ID NO:251 和 252) ;M57-G1_P6 (SEQID NO:253 和 254)和 M57-G1-B69(SEQ ID NO:255 和 256)。
[0157]SEQ ID NO: 257-296 為圖 5B 中提供的抗 ErbB3/抗 IGF-1R IgGl (scFv)2 的成熟輕鏈和重鏈的核苷酸序列(奇數(shù)編號(hào))和氨基酸序列(偶數(shù)編號(hào))，其序列ID編號(hào)如下。λ輕鏈:Pl (SEQ ID NO: 257 和 258) ；M27 (SEQ ID NO: 259 和 260) ；M7 (SEQ ID NO: 261 和 262)；B72 (SEQ ID NO: 263 和 264) jPB60(SEQ ID NO: 265 和 266)。重鏈 scFv 融合物(雜交體):P1-G1-P4(SEQ ID NO:267 和 268) ;P1-G1_M57(SEQ ID NO:269 和 270) ;P1-G1_M78(SEQ IDN0:271和 272) ;M27-G1_P4(SEQ ID N0:273 和 274) ;M27-G1_M57(SEQ ID N0:275 和 276)；M27-G1-M78 (SEQ ID NO:277 和 278) ;M7-G1_P4 (SEQ ID NO:279 和 280) ;M7-G1_M57 (SEQ IDN0:281和 282) ;M7-G1_M78(SEQ ID N0:283 和 284) ;B72-G1_P4(SEQ ID N0:285 和 286)；B72-G1-M57(SEQ ID NO:287 和 288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:289 和 290) ;B60-G1_P4(SEQID NO: 291 和 292) ;B60-G1_M57 (SEQ ID NO: 293 和 294);和 B60-G1-M78 (SEQ ID NO: 295 和296)。
[0158]SEQ ID NO: 297和298為如圖7B中所示具有信號(hào)序列的16F的輕鏈的核苷酸和氨
基酸序列。
[0159]SEQ ID NO: 299和300為如圖7A中所示具有信號(hào)序列的16F的重鏈的核苷酸和氨
基酸序列。
[0160]SEQ ID NO: 301為示例性重鏈結(jié)構(gòu)域的一部分，其中在CH3結(jié)構(gòu)域的C端與接頭的N端之間插入賴氨酸SLSLSPGKGGGGS (SEQ ID NO: 301-附加賴氨酸加有下劃線)。
[0161]SEQ ID NO:302-304 分別為抗 IGF-1R VHCDRUVHCDR2 和 VHCDR3 結(jié)構(gòu)域的共同序列，其為SEQ ID NO:1的和圖1中所示的VH共同序列的⑶R序列。
[0162]SEQ ID NO:305-307 分別為抗 IGF-1R VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 的共同序列，其為SEQ ID NO: 2的和圖2中所示的VL共同序列的⑶R序列。
[0163]SEQ ID NO: 308為抗IGF-1R VLCDR3的共同序列，其為SEQ ID NO: 3的和圖2中所示的VL共同序列的⑶R3序列。
[0164]SEQ ID NO: 209-311 分別為抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2 和 VHCDR3 結(jié)構(gòu)域的共同序列，其為SEQ ID N0:4的和圖3中所示的VH共同序列的⑶R序列。
[0165]SEQ ID NO: 312-314 分別為抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 結(jié)構(gòu)域的共同序列，其為SEQ ID N0:6的和圖4中所示的VL共同序列的⑶R序列。
[0166]SEQ ID N0:315為抗ErbB3VLCDR3的共同序列，其為SEQ ID N0:7的和圖4中所示的VL共同序列的⑶R3序列。
[0167]SEQ ID NO:316為抗ErbB3/抗IGF-1R IgG2四價(jià)雙特異性蛋白EL1-7的重鏈的氨基酸序列。
[0168]SEQ ID NO:317為抗ErbB3/抗IGF-1R IgG2四價(jià)雙特異性蛋白EL1-7的輕鏈的氨基酸序列。
[0169]SEQ ID NO:318為抗IGF-1R/抗ErbB3四價(jià)雙特異性蛋白ILE-10的重鏈的氨基酸序列。[0170]SEQ ID NO:319為抗IGF-1R/抗ErbB3四價(jià)雙特異性蛋白ILE-12的重鏈的氨基酸序列。
[0171]SEQ ID NO:320為抗IGF-1R/抗ErbB3四價(jià)雙特異性蛋白ILE-10和ILE-12的輕鏈的氨基酸序列。
[0172]SEQ ID NO: 321-335 為表 1 的抗 IGF-1R 抗體的 Fab 重鏈(Fab HC)、Fab 輕鏈(FabLC)和scFv的氨基酸序列，所述序列列于圖37中。
[0173]表1-抗 IGF-1R 抗體
[0174]
【權(quán)利要求】
1.一種多價(jià)雙特異性抗體(PBA)，所述抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，所述兩對(duì)中的各對(duì)包含通過(guò)至少一個(gè)重鏈-輕鏈鍵聯(lián)結(jié)于輕鏈的重鏈；其中 各對(duì)包含至少一個(gè)抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)和至少一個(gè)抗ErB3結(jié)合位點(diǎn)；且各對(duì)包含含有所述PBA的所述重鏈的N端部分和所述PBA的所述輕鏈的N端部分的第一結(jié)合位點(diǎn)以及為完全由所述PBA的所述重鏈包含的C端scFv的第二結(jié)合位點(diǎn)，所述C端scFv含有通過(guò)scFv接頭聯(lián)結(jié)于輕鏈可變區(qū)的重鏈可變區(qū)；且 所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)經(jīng)由由所述PBA的所述重鏈包含的重鏈免疫球蛋白(HC Ig)恒定區(qū)連接于所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)，且 所述兩對(duì)由各對(duì)的所述HC Ig恒定區(qū)之間的至少一個(gè)鍵聯(lián)接，且 (i)所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域，所述重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VH互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)，所述VH互補(bǔ)決定區(qū)(OTR)包含(a)具有包含選自由SEQID NO:USEQ ID N0:8_31和SEQ ID NO: 384-385組成的組的SEQ ID NO的氨基酸序列的氨基酸序列的重鏈的VHCDRl (氨基酸編號(hào)26-35)、VHCDR2 (氨基酸編號(hào)51-66)和VHCDR3 (氨基酸編號(hào)99-111);或(b) —組三個(gè)VH互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)，所述VH互補(bǔ)決定區(qū)(OTR)包含含有 SEQ ID NO:302 的 VHCDRl、含有 SEQ ID NO:303 的 VHCDR2 和含有 SEQ ID NO:304的VHCDR3 ;和輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域，所述輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VIXDR，所述VLCDR包含(c)具有包含選自由 SEQ ID NO: 2-3,SEQ ID NO: 32-133 和 SEQ ID NO: 386-387組成的組的SEQ ID NO的氨基酸序列的氨基酸序列的輕鏈的VIXDRl (氨基酸編號(hào)24-34)、VLCDR2 (氨基酸編號(hào)50-56)和VLCDR3 (氨基酸編號(hào)89-97);或(d) —組三個(gè)VLCDR，所述VLCDR 包含含有 SEQ ID NO: 305 的 VLCDRl、含有 SEQ ID NO: 306 的 VLCDR2 和含有 SEQ IDNO:307 或 SEQ ID NO:3 08 的 VLCDR3，且 各CDR進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組CDR的所述CDR在相應(yīng)重鏈或輕鏈中按⑶R1、⑶R2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，且 (ii)所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域，所述重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VH CDR，所述VH CDR包含(e)具有包含選自由SEQ ID NO:4-5, SEQ IDNO: 134-165和SEQ ID NO: 388組成的組的SEQ ID NO的氨基酸序列的氨基酸序列的重鏈的VHCDRl (氨基酸編號(hào)26-35)、VHCDR2(氨基酸編號(hào)51-66)和VHCDR3 (氨基酸編號(hào)99-111)；或(f) 一組三個(gè)VH CDR，所述VH CDR包含含有SEQ ID NO: 309的VHCDRl、含有SEQ IDN0:310的VHCDR2和含有SEQ ID NO: 311的VHCDR3 ;和輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域，所述輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VLCDR，所述VLCDR包含(g)具有包含選自由SEQ ID N0:6_7和SEQ ID NO: 166-200組成的組的SEQ ID NO的氨基酸序列的氨基酸序列的輕鏈的VLCDRl (氨基酸編號(hào)23-33)、VLCDR2(氨基酸編號(hào)49-55)和VLCDR3(氨基酸編號(hào)88-98);或(h)輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域，所述輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域包含一組三個(gè)VLCDR，所述VLCDR包含含有SEQ ID NO: 312 的 VLCDRl、含有 SEQ ID NO: 313 的 VLCDR2 和含有 SEQ ID NO: 314 或 SEQ IDNO:315 的 VLCDR3，且 各⑶R進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的所述⑶R在所述抗體中按⑶R1、⑶R2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列， 且(iii)其中所述PBA不包含以下兩者:a)包含含有SEQ ID NO: 35的輕鏈和含有SEQID NO: 11的重鏈的抗IGF-1R模塊，和b)包含含有SEQ ID NO: 175的輕鏈和含有SEQ IDNO: 145的重鏈的抗ErbB3模塊。
2.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVIXDR3包含SEQ IDN0:308 或所述抗 ErbB3VLCDR3 包含 SEQ ID N0:315。
3.如權(quán)利要求1或2所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述兩對(duì)多肽鏈具有基本上一致的序列。
4.如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述HCIg恒定區(qū)之間的所述至少一個(gè)鍵中的至少一者為二硫鍵或所述至少一個(gè)重鏈-輕鏈鍵中的至少一者為二硫鍵。
5.如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述HCIg恒定區(qū)之間的所述至少一個(gè)鍵中的至少一者為范德華鍵(van der Waals bond)或所述至少一個(gè)重鏈-輕鏈鍵中的至少一者為范德華鍵。
6.如權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體,其中所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)為所述C端scFv。
7.如權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)為所述C端scFv。
8.如權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)、所述HC Ig恒定區(qū)和所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含由單一連續(xù)多肽鏈包含的那一對(duì)的所述重鏈。
9.如權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其: (i)在體外在I μ M或I μ M以下、或IOOnM或IOOnM以下、或IOnM或IOnM以下、或InM或InM以下的濃度下抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，或 ii)如pErbB3和pIGF_lR中任一者或兩者磷酸化的抑制所指示，以IOnM或IOnM以下、或InM或InM以下、或IOOpM或IOOpM以下的IC50，或至少70%、或至少80%、或至少90%的最大抑制百分比抑制異調(diào)蛋白(heregulin)和IGFl誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的任一者或兩者。
10.如權(quán)利要求9所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中生長(zhǎng)抑制在培養(yǎng)物中在DU145細(xì)胞中以CTG測(cè)定進(jìn)行測(cè)量。
11.如權(quán)利要求9所述的PBA，其中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制在培養(yǎng)物中在BxPC-3細(xì)胞中在以80ng/ml的IGF-1和20ng/ml的異調(diào)蛋白刺激15分鐘后測(cè)定。
12.如權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIg恒定區(qū)包含介導(dǎo)與另一對(duì)的CH3結(jié)構(gòu)域的聯(lián)接的CH3結(jié)構(gòu)域。
13.如權(quán)利要求12所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIg恒定區(qū)包含CH2結(jié)構(gòu)域。
14.如權(quán)利要求13所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIg恒定區(qū)包含鉸鏈。
15.如權(quán)利要求14所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIg恒定區(qū)包含CHl結(jié)構(gòu)域。
16.如權(quán)利要求15所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述CHl結(jié)構(gòu)域以其C端連接于鉸鏈的N端，所述鉸鏈以其C端連接于CH2結(jié)構(gòu)域的N端，所述CH2結(jié)構(gòu)域以其C端連接于CH3結(jié)構(gòu)域的N端。
17.如權(quán)利要求16所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述第一結(jié)合位點(diǎn)包含第一VH結(jié)構(gòu)域，且其中各所述CHl結(jié)構(gòu)域以其N端連接于所述第一 VH結(jié)構(gòu)域的C端。
18.如權(quán)利要求17所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述CH3結(jié)構(gòu)域以其C端連接于所述scFv的N端。
19.如權(quán)利要求18所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述CH3結(jié)構(gòu)域以其C端連接于連接型接頭的N端,所述連接型接頭以其C端連接于所述scFv的N端。
20.如權(quán)利要求19所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述輕鏈包含第一VL結(jié)構(gòu)域，所述第一 VL結(jié)構(gòu)域與所述第一 VH結(jié)構(gòu)域締合形成所述第一結(jié)合位點(diǎn)。
21.如權(quán)利要求20所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述第一VL結(jié)構(gòu)域以其C端連接于CL結(jié)構(gòu)域的N端。
22.如權(quán)利要 求21所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述第一結(jié)合位點(diǎn)為抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)且各所述scFv為抗ErbB3scFv。
23.如權(quán)利要求21所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述第一結(jié)合位點(diǎn)為抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)且各所述scFv為抗IGF-1R ScFv0
24.如權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIg恒定區(qū)為IgG恒定區(qū)。
25.如權(quán)利要求24所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIgG恒定區(qū)為HC IgGl恒定區(qū)。
26.如權(quán)利要求24所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述HCIgG恒定區(qū)為HC IgG2恒定區(qū)。
27.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.所述抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO:8 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO:9 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 10 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 34的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 11 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 35的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO:8 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述抗IGF-1R VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 10 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或i.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 k.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 l.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 m.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 η.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 ο.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 P.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 q.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
28.如權(quán)利要求1至27中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述抗IGF-1RVLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ IDNO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；且 a.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 c.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗Er bB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或i.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 k.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
29.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO:9的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO:33的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列；且 a.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 d.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或
h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或i.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 k.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
30.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO: 34的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列；且 a.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 e.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或i.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 k.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
31.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 11的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDR1、VLCDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO: 35的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列；且 a.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 f.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 i.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
32.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO:33的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列；且 a.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQIDNO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQIDNO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或i.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 k.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
33.如權(quán)利要求1所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗IGF-1RVHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述抗IGF-1R VLCDRl、VLCDR2和VIXDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)⑶R的氨基酸序列；且 a.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 134 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 135 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 137 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 138 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 139 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 140 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 h.所述抗ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQID NO: 141 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序 列；或 i.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 142 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 143 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 175的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 k.所述抗 ErbB3VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3 包含 SEQ ID NO: 136 的相應(yīng) CDR 的氨基酸序列，且所述抗ErbB3VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
34.如權(quán)利要求1至33中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖1中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
35.如權(quán)利要求1至34中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 2的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖2中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
36.如權(quán)利要求35所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:2的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖1(VH)和圖2 (VL)中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
37.如權(quán)利要求1至36中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 3的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖2中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
38.如權(quán)利要求37所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:3的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
39.如權(quán)利要求1至38中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID N0:4的序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖3中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
40.如權(quán)利要求1至39中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:6的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖4中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
41.如權(quán)利要求40所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:4的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:6的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
42.如權(quán)利要求1至41中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 5的序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖3中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
43.如權(quán)利要求1至42中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 7的序列的VL結(jié)構(gòu)域，其中所述序列包含獨(dú)立地表示在圖4中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
44.如權(quán)利要求43所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:5的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:7的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
45.如權(quán)利要求41所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:2的序列的VL結(jié)構(gòu)域，且各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:4的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:6的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
46.如權(quán)利要求44所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO: 3的序列的VL結(jié)構(gòu)域，且所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 5的序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO: 7的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
47.如權(quán)利要求1至46中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中Xl不為T、X2不為V、X6不為R、X8不為D或XlO不為I，或含有SEQ ID NO: 3的氨基酸序列的VL結(jié)構(gòu)域，或其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO: 5的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域或含有SEQ ID NO: 7的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
48.如權(quán)利要求47所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID ΝΟ:1的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域，其中Xl不為T、X2不為V、X6不為R、X8不為D或XlO不為I，或含有SEQ ID NO: 3的序列的VL結(jié)構(gòu)域，且各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含含有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域和含有SEQ ID NO:7的序列的VL結(jié)構(gòu)域。
49.如權(quán)利要求1至48中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有選自由SEQ ID NO:8-31組成的組的氨基酸序列的VH結(jié)構(gòu)域。
50.如權(quán)利要求1至49中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)包含含有選自由SEQ ID NO:32-133組成的組的氨基酸序列的VL結(jié)構(gòu)域。
51.如權(quán)利要求1至50中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含選自由SEQ ID NO: 134-165組成的組的VH氨基酸序列。
52.如權(quán)利要求1至51中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)包含選自由SEQ ID NO: 166-200組成的組的VL氨基酸序列。
53.如權(quán)利要求1至52中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.各所述第一VH結(jié)構(gòu)域包含選自包含SEQ ID NO:8-31的組的氨基酸序列，各所述第一 VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 32-133組成的組的氨基酸序列，各所述第二 VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 134-165組成的組的氨基酸序列，且各所述第二 VL結(jié)構(gòu)域包含選自包含SEQ ID NO: 166-200的組的氨基酸序列，或 b.各所述第一VH結(jié)構(gòu)域包含選自包含SEQ ID NO: 134-165的組的氨基酸序列，各所述第一 VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 166-200組成的組的氨基酸序列，各所述第二 VH結(jié)構(gòu)域包含選自包含SEQ ID NO:8-31的組的氨基酸序列，且各所述第二 VL結(jié)構(gòu)域包含選自包含SEQ ID NO:32-133的組的氨基酸序列。
54.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.各所述抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 8的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列；或b.各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 9的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；或 c.各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；或 d.各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 11的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；或 e.各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 8的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；或 f.各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或`1.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 k.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 ` 1.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 m.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 η.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或 ο.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或 P.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或 q.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
55.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列；且 a.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 b.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或C.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 d.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 e.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 f.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或i.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或 j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或 k.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
56.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1R VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；且 a.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 b.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或 c.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 d.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 e.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 f.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或 l.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 143的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或 k.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
57.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且各所述抗IGF-1RVL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；且 a.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 b.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或 c.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 d.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 e.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 f.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或 1.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或 j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 143的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或 k.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
58.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 11的氨基酸序列且各所述抗IGF-1RVL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；且 a.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 b.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或 c.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 d.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 e.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 f.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或i.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或 j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
59.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列且各所述抗IGF-1R VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；且 a.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 b.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或 c.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 d.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 e.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 f.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或 i.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的氨基酸序列；或 j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 143的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或 k.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ IDNO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
60.如權(quán)利要求1至53中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中各所述抗IGF-1RVH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 10的氨基酸序列且各所述抗IGF-1RVL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列；且 a.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 134的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166的氨基酸序列；或 b.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 135的氨基酸序列且所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 167的氨基酸序列；或 c.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 168的氨基酸序列；或 d.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 137的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列；或 e.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 138的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 170的氨基酸序列；或 f.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 139的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 171的氨基酸序列；或 g.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 140的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 172的氨基酸序列；或 h.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO: 141的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 173的氨基酸序列；或i.各所述抗ErbB3VH結(jié) 構(gòu)域包含SEQID NO: 142的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 174的 氨基酸序列；或 j.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 143的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 175的氨基酸序列；或 k.各所述抗ErbB3VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 136的氨基酸序列且各所述抗ErbB3VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 169的氨基酸序列。
61.如權(quán)利要求1至60中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.各所述重鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SF-Gl-Pl(SEQ ID NO:212)；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO:214) ;SF-G1_M27(SEQ ID NO:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:218)；SF-G1-B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224)；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228) ;P4-G1_P6(SEQ ID NO:230)；P4-G1-B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236)；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ;M78-G1_M27(SEQ ID NO:240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:242)；M78-G1-B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248)；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和M57-G1-B69 (SEQ ID NO:256)，且各所述輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SFk 輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ 輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ ID NO:206)；和 Μ57κ 輕鏈(SEQ ID NO:208);或 b.各所述重鏈包含選自包含以下的組的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQID NO:268)；P1-G1-M57(SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274)；M27-G1-M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280)；M7-G1-M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ ID NO:286)；B72-G1-M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292)；B60-G1-M57(SEQ ID NO:294) ;B60-G1_M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQ ID NO:355)和M7-G2-M78 (SEQ ID NO:357)，且各所述輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:Pl λ 輕鏈(SEQ ID NO: 258) ；Μ27 λ 輕鏈(SEQ ID NO:260) ；Μ7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262)；Β72λ 輕鏈(SEQ ID NO:264);和 B60 λ 輕鏈(SEQ ID NO: 266)。
62.如權(quán)利要求1至61中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.各所述重鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自由以下組成的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列=SF-Gl-Pl (SEQ ID NO:212) ;SF-G1_M1.3 (SEQ IDNO:214) ；SF-G1-M27(SEQ ID NO:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:218) ；SF-G1-B69(SEQ IDNO:220) ；P4-G1-C8(SEQ ID NO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224) ;P4_G卜Ml.3(SEQ IDNO:226) ；P4-G1-M27(SEQ ID NO:228) ；P4-G1-P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ IDNO:232) ；M78-G1-C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ IDNO:238) ；M78-G1-M27(SEQ ID NO:240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ IDNO:244) ；M57-G1-C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ IDNO:250) ；M57-G1-M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69(SEQID NO:256)，且各所述輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SFk輕鏈(SEQ IDNO: 202) ；Ρ4κ 輕鏈(SEQ ID NO: 204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ ID NO:206);和 M57 κ 輕鏈(SEQID NO:208);或 b.各所述重鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:SF-Gl-Pl(SEQ ID NO:212)；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO:214) ;SF-G1_M27(SEQ ID NO:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:218)；SF-G1-B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224)；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228) ;P4-G1_P6(SEQ ID NO:230)；P4-G1-B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236)；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ;M78-G1_M27(SEQ ID NO:240) ；M78-G1-P6(SEQ ID NO:242)；M78-G1-B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248)；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和M57-G1-B69 (SEQ ID NO:256);且各所述輕鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自由以下組成的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:SFk輕鏈(SEQ ID NO:202)；Ρ4κ 輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ ID NO:206) JPM57k 輕鏈(SEQ ID NO: 208)；或 c.各所述重鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自包含以下的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268) ;P1-G1_M57 (SEQ ID NO:270)；P1-G1-M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274) ;M27-G1_M57(SEQ ID NO:276)；M27-G1-M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280) ;M7-G1_M57 (SEQ ID NO:282)；M7-G1-M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ ID NO:286) ;B72-G1_M57(SEQ ID NO:288)；B72-G1-M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292) ;B60-G1_M57(SEQ ID NO:294)；B60-G1-M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQ ID NO:355)和 M7-G2-M78(SEQ IDNO:357)，且各所述輕鏈包含選自由以下組成的組的氨基酸序列:Pl λ輕鏈(SEQ IDNO:258) ；Μ27λ 輕鏈(SEQ ID NO:260) ；M7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262) ；B72 λ 輕鏈(SEQ IDNO:264) #ΡΒ60λ 輕鏈(SEQ ID NO:266);或 d.各所述重鏈包含選自包含以下的組的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268)；P1-G1-M57(SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274)；M27-G1-M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280)；M7-G1-M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ ID NO:286)；B72-G1-M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4 (SEQ ID NO:292)；B60-G1-M57(SEQ ID NO:294) ;B60-G1_M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQ ID NO:355)和M7-G2-M78 (SEQ ID NO:357)，且各所述輕鏈包含因至少一個(gè)氨基酸添加、缺失或取代而與選自由以下組成的組的氨基酸序列不同的氨基酸序列:Ρ1λ輕鏈(SEQ ID NO:258)；Μ27λ 輕鏈(SEQ ID NO: 260) ；Μ7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262) ；Β72 λ 輕鏈(SEQ ID NO:264)；和 Β60λ 輕鏈(SEQ ID NO:266)。
63.如 權(quán)利要求62所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于另一重鏈的各所述重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SF-Gl-Pl (SEQ ID NO:212) ；SF-G1-M1.3 (SEQ ID NO:214) ;SF-G1_M27 (SEQID NO:216) ；SF-G1-P6(SEQ ID NO:218) ;SF-G1_B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ IDNO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224) ；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ IDNO:228) ；P4-G1-P6(SEQ ID NO:230) ;P4-G1_B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8 (SEQ IDNO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236) ；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ;M78-G1_M27(SEQ IDNO:240) ；M78-G1-P6(SEQ ID NO:242) ;M78-G1_B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ IDNO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248) ；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ IDNO:252) ；M57-G1-P6(SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69(SEQ ID NO:256)，且 b.通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于(a)的一條重鏈的各所述輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SFk 輕鏈(SEQ ID NO: 202) ；Ρ4 κ 輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ IDNO:206) JPM57k 輕鏈(SEQ ID NO:208);或 c.通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于另一重鏈的各所述重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268) ;P1-G1_M57 (SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78 (SEQ IDNO:272) ；M27-G1-P4(SEQ ID NO:274) ;M27-G1_M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ IDNO:278) ；M7-G1-P4(SEQ ID NO:280) ;M7-G1_M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ IDNO:284) ；B72-G1-P4(SEQ ID NO:286) ;B72-G1_M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ IDNO:290) ；B60-G1-P4(SEQ ID NO:292) ；B60-G1-M57(SEQ ID NO:294);和 B60-G1-M78(SEQID NO:296) ；B60-G2-M78(SEQ ID NO:355)和 M7-G2-M78(SEQ ID NO:357)，且 d.通過(guò)至少一個(gè)鍵結(jié)合于(c)的一條重鏈的各所述輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:Ρ1 λ 輕鏈(SEQ ID NO:258) ；Μ27 λ 輕鏈(SEQ ID NO:260) ；M7 λ 輕鏈(SEQ IDNO:262) ；Β72λ 輕鏈(SEQ ID NO:264);和 B60 λ 輕鏈(SEQ ID NO: 266)。
64.如權(quán)利要求63所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中 a.各所述重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SF-Gl-Pl (SEQ ID NO:212)；SF-G1-M1.3(SEQ ID NO:214) ;SF-G1_M27(SEQ ID NO:216) ;SF-G1_P6(SEQ ID NO:218)；SF-G1-B69(SEQ ID NO:220) ;P4-G1_C8(SEQ ID NO:222) ；P4-G1-P1(SEQ ID NO:224)；P4-G1-M1.3(SEQ ID NO:226) ;P4-G1_M27(SEQ ID NO:228) ;P4-G1_P6(SEQ ID NO:230)；P4-G1-B69(SEQ ID NO:232) ;M78-G1_C8(SEQ ID NO:234) ；M78-G1-P1(SEQ ID NO:236)；M78-G1-M1.3(SEQ ID NO:238) ;M78-G1_M27(SEQ ID NO:240) ;M78-G1_P6(SEQ ID NO:242)；M78-G1-B69(SEQ ID NO:244) ;M57-G1_C8(SEQ ID NO:246) ；M57-G1-P1(SEQ ID NO:248)；M57-G1-M1.3(SEQ ID NO:250) ;M57-G1_M27(SEQ ID NO:252) ;M57-G1_P6(SEQ ID NO:254)和 M57-G1-B69(SEQ ID NO:256)，且 b.各所述輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:SFk輕鏈(SEQ ID NO:202) ；Ρ4 κ輕鏈(SEQ ID NO:204) ；Μ78 κ 輕鏈(SEQ ID NO:206) JPM57k 輕鏈(SEQ ID NO:208);或 c.各所述重鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:P1-G1-P4(SEQ ID NO:268)；P1-G1-M57(SEQ ID NO:270) ;P1-G1_M78(SEQ ID NO:272) ;M27-G1_P4(SEQ ID NO:274)；M27-G1-M57(SEQ ID NO:276) ;M27-G1_M78(SEQ ID NO:278) ;M7-G1_P4(SEQ ID NO:280)；M7-G1-M57(SEQ ID NO:282) ;M7-G1_M78(SEQ ID NO:284) ;B72-G1_P4(SEQ ID NO:286)；B72-G1-M57(SEQ ID NO:288) ;B72-G1_M78(SEQ ID NO:290) ;B60-G1_P4(SEQ ID NO:292)；B60-G1-M57(SEQ ID NO: 294)；和 B60-G1-M78(SEQ ID NO:296) ;B60-G2_M78(SEQ IDNO:355)和 M7-G2-M78(SEQ ID NO:357)，且 d.各所述輕鏈包含與以下氨基酸序列之一至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸取代、缺失和/或添加而與以下氨基酸序列之一不同的氨基酸序列:Pl λ輕鏈(SEQ ID NO:258)；Μ27λ 輕鏈(SEQ ID NO: 260) ；Μ7 λ 輕鏈(SEQ ID NO:262) ；Β72 λ 輕鏈(SEQ ID NO:264)；和 Β60λ 輕鏈(SEQ ID NO:266)。
65.一種SF-Gl-Pl多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:212的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID N0:202的輕鏈序列。
66.一種SF-G1-M1.3多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:214的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:202的輕鏈氨基酸序列。
67.一種SF-G1-M27多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 216的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:202的輕鏈氨基酸序列。
68.一種SF-G1-P6多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 218的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:202的輕鏈氨基酸序列。
69.一種SF-G1-B69多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 220的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:202的輕鏈氨基酸序列。
70.—種P4-G1-C8多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 222的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列。
71.—種P4-G1-P1多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:224的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列。
72.一種P4-G1-M1.3多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 226的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列。
73.一種P4-G1-M27多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 228的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列。
74.一種P4-G1-P6多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包 含SEQ ID NO: 230的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列。
75.一種P4-G1-B69多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 232的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:204的輕鏈氨基酸序列。
76.一種M78-G1-C8多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:234的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列。
77.一種M78-G1-P1多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 236的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列。
78.一種M78-G1-M1.3多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 238的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列。
79.一種M78-G1-M27多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 240的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列。
80.一種M78-G1-P6多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 242的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列。
81.一種M78-G1-B69多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:244的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:206的輕鏈氨基酸序列。
82.一種M57-G1-C8多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 246的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列。
83.一種M57-G1-P1多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 248的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列。
84.一種M57-G1-M1.3多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 250的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列。
85.一種M57-G1-M27多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 252的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列。
86.一種M57-G1-P6多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:254的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列。
87.一種M57-G1-B69多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 256的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:208的輕鏈氨基酸序列。
88.一種P1-G1-P4多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 268的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列。
89.一種P1-G1-M57多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 270的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列。
90.一種P1-G1-M78多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 272的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:258的輕鏈氨基酸序列。
91.一種M27-G1-P4多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:274的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:260的輕鏈氨基酸序列。
92.一種M27-G1-M57多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 276的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:260的輕鏈氨基酸序列。
93.一種M27-G1-M78多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 278的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:260的輕鏈氨基酸序列。
94.一種M7-G1-P4多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 280的重鏈氨基酸序列；和兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列。
95.一種M7-G1-M57多價(jià)雙特異性抗體，其包含:兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 282的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列。
96.一種M7-G1-M78多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:284的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:262的輕鏈氨基酸序列。
97.一種B72-G1-P4多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 286的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:264的輕鏈氨基酸序列。
98.一種B72-G1-M57多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 288的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:264的輕鏈氨基酸序列。
99.一種B72-G1-M78多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 290的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:264的輕鏈氨基酸序列。
100.—種B60-G1-P4多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 292的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:266的輕鏈氨基酸序列。
101.一種B60-G1-M57多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO:294的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:266的輕鏈氨基酸序列。
102.一種B60-G1-M78多價(jià)雙特異性抗體，其包含: 兩條重鏈，其各自包含SEQ ID NO: 296的重鏈氨基酸序列；和 兩條輕鏈，其各自包含SEQ ID NO:266的輕鏈氨基酸序列。
103.一種抗IGF-1R單克隆抗體，其包含按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ IDNO: 202中加點(diǎn)狀下劃線所示SF κ輕鏈的VLCDRl序列、VLCDR2序列和VLCDR3序列的第一序列，所述抗體進(jìn)一步包含按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID N0:210中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示SF重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列的第二序列，其中所述第一序列與所述第二序列不重疊。
104.一種抗IGF-1R單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO: 204中加點(diǎn)狀下劃線所示P4 κ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQID NO: 222中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示P4重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
105.一種抗IGF-1R單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO: 206中加點(diǎn)狀下劃線所示M78 κ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO:234中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示M78重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
106.一種抗IGF-1R單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO: 208中加點(diǎn)狀下劃線所示M57 κ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5A的SEQ ID NO:246中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示M57重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
107.一種分離的抗IGF-1R抗體，其特異性結(jié)合人IGF-1R，其中 a.所述抗IGF-1R抗體包含含有一組三個(gè)包含VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3的VHCDR的VH結(jié)構(gòu)域,和含有一組三個(gè)包含VIXDRl、VIXDR2和VIXDR3的VL⑶R的VL結(jié)構(gòu)域，所述⑶R分別包含SEQ ID N0:302、303、304、305、306和307的序列，且各CDR進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的所述⑶R在所述抗體中按⑶R1XDR2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，其中 b.所述CDR包含獨(dú)立地表示在圖1(VH)或圖2(VL)中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，且 c.所述抗體不包含SF模塊。
108.如權(quán)利要求107所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 分別包含 SEQ ID NO:302、303、304、305、306 和 308 的序列。
109.如權(quán)利要求108所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VHCDRl、VHCDR2和VHCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:8-10和12-31中任一者的相應(yīng)氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 32-34和36-133中任一者的相應(yīng)氨基酸序列。
110.如權(quán)利要求109所述的抗IGF-1R抗體，其中 a.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述VHCDR1、VHCDR2 、VHCDR3包含SEQID NO:9的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 34的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 d.所述VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 11的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 35的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO:8的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 33的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 10的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 32的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
111.如權(quán)利要求110所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID ΝΟ:1的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖1中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
112.如權(quán)利要求107至111中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖2中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
113.如權(quán)利要求112所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID ΝΟ:1的氨基酸序列，且所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列。
114.如權(quán)利要求107至113中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 3的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖2中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
115.如權(quán)利要求114所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID NO:1的氨基酸序列，且所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 3的氨基酸序列。
116.如權(quán)利要求115所述的抗IGF-1R抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQIDNO: 8-10和12-31組成的組的氨基酸序列且所述VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ ID NO: 32-34和36-133組成的組的氨基酸序列。
117.如權(quán)利要求107至116中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，其中 a.所述VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 8_10和12-31中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:8-10和12-31中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.所述VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 32-34和36-133中任一者的氨基酸序列至少90%一致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:32-34和36-133中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
118.如權(quán)利要求117所述的抗IGF-1R抗體，其中 a.所述VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 8_10和12-31中任一者的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:8-10和12-31中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.所述VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 32-34和36-133中任一者的氨基酸序列至少95%一致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:32-34和36-133中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
119.如權(quán)利要求103至118中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，其為IgGl。
120.如權(quán)利要求107至119中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，所述抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各所述對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中 a.各所述重鏈包含SEQID N0:359、360或361的氨基酸序列；或 b.各所述輕鏈包含SEQID NO:204、206或208的氨基酸序列。
121.如權(quán)利要求120所述的抗IGF-1R抗體，其中 a.各所述重鏈包含SEQID NO:359、360或361的氨基酸序列，且 b.且各輕鏈包含SEQID NO:204、206或208的氨基酸序列。
122.如權(quán)利要求107至121中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，所述抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各所述對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中 a.各所述重鏈包含與SEQID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列至少90%—致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.各所述輕鏈包含與SEQID NO: 204、206或208中任一者的氨基酸序列至少90%—致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:204、206或208中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
123.如權(quán)利要求122所述的抗IGF-1R抗體，其中 a.各所述重鏈包含與SEQID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:359、360或361中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.各所述輕鏈包含與SEQID N0:204、206或208中任一者中的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID N0:204、206或208中任一者中的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
124.—種抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體P4，其包含兩條各自包含SEQ ID NO:359的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 204的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
125.—種抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體M78，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 360的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 206的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
126.—種抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體M57，其包含兩條各自包含SEQ ID NO:361的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 208的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
127.一種抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體M57/M78，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 361的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 206的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
128.—種抗IGF-Rl單克隆IgGl抗體P4/M57，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 359的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 208的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
129.如權(quán)利要求103至128中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體，其包含一個(gè)或多個(gè)其它結(jié)合位點(diǎn)。
130.如權(quán)利要求129所述的抗IGF-1R抗體，其包含抗ErbB3結(jié)合位點(diǎn)。
131.一種抗ErbB3單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5B的SEQ ID NO:258中加點(diǎn)狀下劃線所示Pl λ輕鏈 的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:268中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Pl重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
132.一種抗ErbB3單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:260中加點(diǎn)狀下劃線所示M27 λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:274中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Μ27重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
133.一種抗ErbB3單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:262中加點(diǎn)狀下劃線所示M7 λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:280中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Μ7重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
134.一種抗ErbB3單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:264中加點(diǎn)狀下劃線所示B72 λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:286中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Β72重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
135.一種抗ErbB3單克隆抗體，其按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:266中加點(diǎn)狀下劃線所示B60 λ輕鏈的VIXDRl序列、VIXDR2序列和VIXDR3序列，所述抗體進(jìn)一步按氨基至羧基順序包含如圖5Β的SEQ ID NO:292中分別前三個(gè)加點(diǎn)狀下劃線序列所示Β60重鏈的VHCDRl序列、VHCDR2序列和VHCDR3序列。
136.—種分離的抗ErbB3抗體，其特異性結(jié)合人ErbB3，其中 a.所述抗IGF-1R抗體包含含有一組三個(gè)包含VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3的VH CDR的VH結(jié)構(gòu)域,和含有一組三個(gè)包含VIXDRl、VIXDR2和VIXDR3的VL⑶R的VL結(jié)構(gòu)域，所述⑶R分別包含SEQ ID N0:309、310、311、312、313和314的序列，且各CDR進(jìn)一步包含氨基端和羧基端，其中各組⑶R的所述⑶R在所述抗體中按⑶R1XDR2和⑶R3的線性氨基至羧基順序排列，其中 b.所述CDR包含獨(dú)立地表示在圖3(VH)或圖4(VL)中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸，且 c.所述抗體不包含CS模塊。
137.如權(quán)利要求136所述的抗ErbB3抗體，其中所述VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3、VLCDRl、VLCDR2 和 VLCDR3 分別包含 SEQ ID N0:309、310、311、312、313 和 315 的序列。
138.如權(quán)利要求137所述的抗ErbB3抗體，其中所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的相應(yīng)氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 166-174和176-200中任一者的相應(yīng)氨基酸序列。
139.如權(quán)利要求138所述的抗ErbB3抗體，其中 a.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 134的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 166的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 b.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 135的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 167的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 c.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 168的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或
d.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 137的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 e.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 138的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 170的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 f.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 139的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 171的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 g.所述VHCDRl、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 140的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 172的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 h.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 141的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 173的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 1.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQID NO: 142的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 174的相應(yīng)CDR的氨基酸序列；或 j.所述VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3包含SEQ ID NO: 136的相應(yīng)CDR的氨基酸序列，且所述VLCDRl、VLCDR2和VLCDR3包含SEQ ID NO: 169的相應(yīng)CDR的氨基酸序列。
140.如權(quán)利要求136至139中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖3中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
141.如權(quán)利要求136至140中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其中所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖4中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
142.如權(quán)利要求141所述的抗ErbB3抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQIDNO:4的氨基酸序列，且所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列。
143.如權(quán)利要求136至142中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:5的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖3中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
144.如權(quán)利要求136至143中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其中所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO: 7的氨基酸序列，所述序列包含獨(dú)立地表示在圖4中相應(yīng)位置所示的任何氨基酸的可變氨基酸。
145.如權(quán)利要求144所述的抗ErbB3抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含SEQID N0:5的氨基酸序列，且所述VL結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID N0:7的氨基酸序列。
146.如權(quán)利要求145所述的抗ErbB3抗體，其中所述VH結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQID NO: 134-142和144-165組成的組的氨基酸序列且所述VL結(jié)構(gòu)域包含選自由SEQ IDNO: 166-174和176-200組成的組的氨基酸序列。
147.如權(quán)利要求136至146中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其中 a.所述VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.所述VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ IDNO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
148.如權(quán)利要求147所述的抗ErbB3抗體，其中 a.所述VH結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列至少95%—致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO: 134-142和144-165中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.所述VL結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ IDNO: 166-174和176-200中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
149.如權(quán)利要求131至149中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其為IgGl。
150.如權(quán)利要求136至149中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，所述抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各所述對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中 a.各所述重鏈包含SEQID NO:362、363、364、365或366的氨基酸序列；或 b.各所述輕鏈包含SEQID NO:258、260、262、264或266的氨基酸序列。
151.如權(quán)利要求150所述的抗ErbB3抗體，其中 a.各所述重鏈包含SEQID NO:362、363、364、365或366的氨基酸序列，且 b.且各輕鏈包含SEQID NO:258、260、262、264或266的氨基酸序列。
152.如權(quán)利要求136至151中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，所述抗體為包含兩對(duì)多肽鏈的蛋白質(zhì)，各所述對(duì)包含重鏈和輕鏈；其中 a. 各所述重鏈包含與SEQID NO:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.各所述輕鏈包含與SEQID N0:258、260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少90% —致或因1-30個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:258、.260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
153.如權(quán)利要求152所述的抗ErbB3抗體，其中 a.各所述重鏈包含與SEQID NO:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:362、363、364、365或366中任一者的氨基酸序列不同的氨基酸序列，且 b.各所述輕鏈包含與SEQID N0:258、260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列至少95% —致或因1-10個(gè)氨基酸的氨基酸取代、添加或缺失而與SEQ ID NO:258、.260、262、264或266中任一者的氨基酸序列的氨基酸序列不同的氨基酸序列。
154.如權(quán)利要求131至153中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體，其包含一個(gè)或多個(gè)其它結(jié)合位點(diǎn)。
155.如權(quán)利要求154所述的抗ErbB3抗體，其包含抗IGF-1R結(jié)合位點(diǎn)。
156.一種抗ErbB3單克隆IgGl抗體Pl，其包含兩條各自包含SEQ ID NO:362的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 258的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
157.一種抗ErbB3單克隆IgGl抗體M27，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 363的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 260的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
158.一種抗ErbB3單克隆IgGl抗體M7，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 364的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 262的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
159.一種抗ErbB3單克隆IgGl抗體B72，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 365的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 264的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
160.一種抗ErbB3單克隆IgGl抗體B60，其包含兩條各自包含SEQ ID NO: 366的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 266的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
161.一種抗ErbB3單克隆IgGl抗體M27/M7，其包含兩條各自包含SEQ ID NO:363的重鏈氨基酸序列的重鏈和兩條各自包含SEQ ID NO: 262的輕鏈氨基酸序列的輕鏈。
162.一種抗IGF-Rl單克隆scFv抗體P4，其包含SEQ ID NO: 367的氨基酸序列。
163.一種抗IGF-Rl單克隆scFv抗體M57，其包含SEQ ID NO: 368的氨基酸序列。
164.一種抗IGF-Rl單克隆scFv抗體M78，其包含SEQ ID NO: 369的氨基酸序列。
165.一種抗ErbB3單克隆scFv抗體C8，其包含SEQ ID NO: 370的氨基酸序列。
166.一種抗ErbB3單克隆scFv抗體P1，其包含SEQ ID NO: 371的氨基酸序列。
167.一種抗ErbB3單克隆scFv抗體Ml.3，其包含SEQ ID NO: 372的氨基酸序列。
168.一種抗ErbB3單克隆scFv抗體M27，其包含SEQ ID NO: 373的氨基酸序列。
169.一種抗ErbB3單克隆scFv抗體P6，其包含SEQ ID NO: 374的氨基酸序列。
170.一種抗ErbB3單克隆scFv抗體B69，其包含SEQ ID NO: 375的氨基酸序列。
171.—種組合物，其包含如權(quán)利要求1至102中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體和藥學(xué)上可接受的載劑。
172.一種組合物，其包含如權(quán)利要求103至130中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體和藥學(xué)上可接受的載劑。
173.如權(quán)利要求172所述的組合物,其進(jìn)一步包含抗ErbB3抗體,所述抗ErbB3抗體任選地為如權(quán)利要求131至161中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體。
174.—種組合物，其包含如權(quán)利要求131至161中任一項(xiàng)所述的抗ErbB3抗體和藥學(xué)上可接受的載劑。
175.如權(quán)利要求174所述的組合物，其進(jìn)一步包含抗IGF-1R抗體，所述抗IGF-1R抗體任選地為如權(quán)利要求103至130中任一項(xiàng)所述的抗IGF-1R抗體。
176.一種核酸分子，其包含至少一個(gè)編碼序列，所述至少一個(gè)編碼序列編碼如權(quán)利要求I至170中任一項(xiàng)所述的抗體。
177.如權(quán)利要求176所述的核酸分子，所述核酸分子包含啟動(dòng)子核苷酸序列和強(qiáng)化子核苷酸序列中的任一者或兩者，所述核苷酸序列可操作地連接于所述至少一個(gè)編碼序列且促進(jìn)或增強(qiáng)所述抗體的表達(dá)。
178.—種載體,其包含一個(gè)或多個(gè)如權(quán)利要求176或177所述的核酸分子。
179.—種分離 的細(xì)胞，其包含一個(gè)或多個(gè)如權(quán)利要求178所述的載體。
180.一種產(chǎn)生如權(quán)利要求1至170中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體、抗IGF-1R抗體或抗ErbB3抗體的方法,其包括在適于表達(dá)所述多價(jià)雙特異性抗體、抗IGF-1R抗體或抗ErbB3抗體的條件下培養(yǎng)如權(quán)利要求179所述的細(xì)胞。
181.一種治療患有癌癥的受試者的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的以下一者或多者:(a) —種或多種如權(quán)利要求103至170中任一項(xiàng)所述的抗體，或(b)至少一種如權(quán)利要求1至102中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，或(c)如權(quán)利要求171至175中任一項(xiàng)所述的組合物。
182.如權(quán)利要求1至102中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗體當(dāng)以等于或高于5mg/kg的劑量靜脈內(nèi)施用時(shí)在食蟹稱猴(Cynomolgus monkey)體內(nèi)具有至少45小時(shí)的半衰期。
183.如權(quán)利要求1至102和182中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述抗體在為小鼠或食蟹獼猴的生物體體內(nèi)的所述半衰期在統(tǒng)計(jì)上長(zhǎng)于結(jié)合相同表位的另一多價(jià)雙特異性抗體在相同生物體體內(nèi)的半衰期，其中抗原結(jié)合特異性的方向在所述fab與所述SCfv之間相反。
184.如權(quán)利要求1至102和182至183中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其使癌細(xì)胞中異調(diào)蛋白誘導(dǎo)的PAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少50%。
185.如權(quán)利要求1至102和182至184中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其使癌細(xì)胞中IGF-1誘導(dǎo)的pAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少50%。
186.如權(quán)利要求1至102和182至185中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其使癌細(xì)胞中胰島素誘導(dǎo)的pAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少50%。
187.如權(quán)利要求1至102和182至185中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其使癌細(xì)胞中IGF-2誘導(dǎo)的pAKT信號(hào)傳導(dǎo)抑制至少50%。
188.如權(quán)利要求1至102和182至187中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其在體內(nèi)或體外抑制腫瘤細(xì)胞中mTOR活化的程度大于單特異性抗IGF-1R AbM0
189.如權(quán)利要求188所述的多價(jià)雙特異性抗體，其在體內(nèi)或體外降低腫瘤細(xì)胞中mTOR蛋白水平的程度大于單特異性抗IGF-1R AbM。
190.如權(quán)利要求188或189所述的多價(jià)雙特異性抗體，其在體內(nèi)或體外使腫瘤細(xì)胞中的mTOR活化或蛋白水平降至相對(duì)于單特異性抗IGF-1R AbM的至多1/2。
191.如權(quán)利要求190所述的多價(jià)雙特異性抗體，其在體內(nèi)或體外使腫瘤細(xì)胞中的mTOR活化或蛋白水平降至相對(duì)于單特異性抗IGF-1R AbM的至多1/3。
192.如權(quán)利要求1至102中任一項(xiàng)所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述多價(jià)雙特異性抗體在nu/nu小鼠中的人異種移植物模型中比等摩爾量的抗IGF-1R IgG更有效地抑制腫瘤生長(zhǎng)。
193.如權(quán)利要求192所述的多價(jià)雙特異性抗體，其中所述異種移植物模型包含人DU145、BxPC-3、SK-ES-1 或 Cak1-1 細(xì)胞異種移植物。
194.如權(quán)利要求193所述的多價(jià)雙特異性抗體,其中所述多價(jià)雙特異性抗體在nu/nu小鼠中的人異種移植物模型中比等摩爾量的抗IGF-1R IgG與等摩爾量的抗ErbB3IgG組合的組合更有效地抑制腫瘤生 長(zhǎng)。
【文檔編號(hào)】A61K39/395GK103703026SQ201280028639
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2012年4月19日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月19日
【發(fā)明者】J·鮑姆, B·約翰遜, A·A·盧戈夫斯科, 徐俐暉, N·科利, J·B·費(fèi)茲格拉德, S·亞當(dāng)斯 申請(qǐng)人:梅里麥克制藥股份有限公司