2-羥基馬尿酸衍生物及其它們的合成方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及供新的2-羥基馬尿酸類似物，以及它們的合成和使用方法。這種類似物被設(shè)計有一種被保護(hù)的或自由官能基團(tuán)，例如自由的硫醇（-SH）基團(tuán)或被保護(hù)的硫醇基團(tuán)，為了與靶蛋白，多肽，固相或可檢測的標(biāo)記在溫和條件下偶聯(lián)而提供化學(xué)連接。
【專利說明】2-羥基馬尿酸衍生物及其它們的合成方法和用途
[0001]交叉引用
[0002]本發(fā)明主張美國臨時申請，申請?zhí)?61/540, 940，申請日:2011年9月29日的優(yōu)選權(quán)，該臨時申請的所有內(nèi)容，包括所有表格、附圖和權(quán)利要求都被全部引用。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及新的2-羥基馬尿酸類似物，用于制備尤其包括蛋白質(zhì)，多肽，和標(biāo)記的它的軛合物；該軛合物包括這種2-羥基馬尿酸類似物，和它們的合成方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0004]本發(fā)明背景的陳述僅僅是為了幫助讀者理解本發(fā)明，而不構(gòu)成對本發(fā)明現(xiàn)有技術(shù)的描述或闡述。
[0005]阿司匹林(乙酰水楊酸)屬于非甾體抗炎藥(NSAIDs)物。阿司匹林在體內(nèi)迅速被代謝成水楊酸，然后水楊酸被進(jìn)一步代謝成各種化合物，包括2-羥基馬尿酸和多種葡糖苷酸共軛物。2-羥基馬尿酸(也稱為水楊尿素):
[0006]
【權(quán)利要求】
1.一種化合物或該化合物的鹽，所述的化合物具有如下通式:
2.一種化合物或該化合物的鹽，所述的化合物具有如下通式:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或該化合物的鹽，其中，Rl為硫內(nèi)酯，二硫化合物或硫酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或該化合物的鹽，其中，Rl為具有5個環(huán)的硫內(nèi)酯。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或該化合物的鹽，其中，X是-C(0)-，Y是N(H)-Cch6的烷基和Z是硫內(nèi)酷。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或該化合物的鹽，其中，Rl具有這樣的結(jié)構(gòu):-CH2C(0)N(H) -Z。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或該化合物的鹽，其中，Z是烷基硫醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或該化合物的鹽，其中，該化合物或該化合物的鹽選自以下這些結(jié)構(gòu):

9.一種二聚化合物，該化合物包括權(quán)利要求1-8所述的兩個化合物，其中，該二聚化合物通過所述的兩種化合物中的巰基或受保護(hù)的巰基通過二硫鍵連接形成。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的二聚化合物，該二聚化合物選自以下化合物:
11.一種共軛物質(zhì)，其包括:如權(quán)利要求1-8所述的一種或多種化合物，該化合物質(zhì)與蛋白、多肽、可被檢測的標(biāo)記、核酸或固相共價結(jié)合。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的共軛物質(zhì)，其中，所述的官能團(tuán)為巰基-反應(yīng)基團(tuán)，該基團(tuán)選自:馬來酰亞胺，烷基鹵化物，芳基鹵，α-鹵代?；?，吡啶基二硫化物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的共軛物質(zhì)，其中，所述的官能團(tuán)為巰基-反應(yīng)基團(tuán)，其中，所述的化合物與蛋白、多肽、可被檢測的標(biāo)記、核酸或固相共價結(jié)合形成如下結(jié)構(gòu):

14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的共軛物質(zhì)，其中，可被檢測的標(biāo)記選自于:酶、熒光團(tuán)、生物素、抗生物素的蛋白、鏈球菌生物素，地高辛，麥芽糖，寡聚組氨酸，2，4- 二硝基苯，苯砷酸，和熒光乳膠顆粒，納米金顆粒。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的共軛物質(zhì)，其中，所述的蛋白為血藍(lán)蛋白、牛血清蛋白或牛甲狀腺球蛋白。
16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的共軛物質(zhì)，其中，與化合物結(jié)合的固相選自于:薄膜，纖維素紙，聚合物珠子、乳膠顆粒、順磁性顆粒、金顆粒、玻璃基質(zhì)、硅基質(zhì)、塑料基質(zhì)和多孔盤。
17.一種制備共軛物質(zhì)的方法，包括:讓權(quán)利要求1-8所的一種或多種化合物與蛋白、多肽、可檢測的標(biāo)記、核酸或者固相接觸，所述的蛋白、多肽、可檢測的標(biāo)記、核酸或者固相包括一個或多個巰基-反應(yīng)基團(tuán)，在一定條件下，該通過化合物上的巰基基團(tuán)讓所述的化合物與所述的蛋白、多肽、可檢測的標(biāo)記、核酸或者固相共價結(jié)合。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述的化合物包括保護(hù)的硫醇基團(tuán)，和所述的方法進(jìn)一步包括在接觸步驟之前或接觸的同時進(jìn)行脫保護(hù)。
19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，所所述的方法進(jìn)一步包括，在接觸步驟之前，向所述的蛋白、多肽、可檢測的標(biāo)記、核酸或者固相引入所述的一個或多個巰基-反應(yīng)基團(tuán)。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述的一個或多個巰基-反應(yīng)基團(tuán)選自于:馬來酰亞胺，烷基鹵化物，芳基鹵，α -鹵代酰基，吡啶基二硫化物，和引入步驟包括:讓所述的蛋白、多肽、可檢測的標(biāo)記、核酸或者固相與包括一個或多個巰基-反應(yīng)基團(tuán)的二價交聯(lián)試劑耦合。
21.—種對2-羥基馬尿酸進(jìn)行免疫應(yīng)答刺激的方法，包括:用權(quán)利要求11所述的共軛物來免疫動物。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，進(jìn)一步包括分離特異結(jié)合2-羥基馬尿酸的抗體，其中該抗體與2-羥基馬尿酸的親和力至少10倍大于該抗體與水楊酸的親和力。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，所述的一種或多種抗體直接從動物中分離獲得。
24.一種檢測樣品中2-羥基馬尿酸的方法，包括:執(zhí)行競爭免疫測定，其中共軛物具有如下結(jié)構(gòu):
25.一種檢測樣品中2-羥基馬尿酸的方法，包括:執(zhí)行競爭免疫測定，其中，2-羥基馬尿酸競爭結(jié)合具有如下結(jié)構(gòu)的免疫原產(chǎn)生的抗體:
26.—種診斷主體闌尾炎的方法，包括:對來自主體的樣本執(zhí)行權(quán)利要求24-25之一的競爭免疫測試； 和讓2-羥基馬尿酸的濃度與主體中存在或不存在闌尾炎相關(guān)聯(lián)。
【文檔編號】A61K39/385GK103813803SQ201280043842
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月29日
【發(fā)明者】馬里奧茨·巴啦茨瑞克 申請人:美艾利爾圣地亞哥公司