一種蛛網(wǎng)膜下腔出血及局部缺血的治療方法
【專利摘要】本申請?zhí)峁┝藖碜訮SD-95抑制劑的臨床試驗的數(shù)據(jù)，所述PSD-95抑制劑被施用于正在進(jìn)行中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的動脈瘤的血管內(nèi)修復(fù)的受試者。所述受試者根據(jù)其在執(zhí)行所述血管內(nèi)手術(shù)前所述動脈瘤是否破裂進(jìn)行分類。所述試驗證明，所述試驗對于在執(zhí)行所述血管內(nèi)手術(shù)前所述動脈瘤是否破裂的受試者均有顯著的益處。出人意料的是，從根據(jù)病理學(xué)和神經(jīng)認(rèn)知結(jié)果確定的治療中獲益最多的受試者，是那些導(dǎo)致蛛網(wǎng)膜下腔出血的動脈瘤破裂的受試者。這些數(shù)據(jù)構(gòu)成證據(jù)表明，PSD-95抑制劑不僅在缺血性中風(fēng)和出血性中風(fēng)中有益，而且在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血形式中有益，特別是對蛛網(wǎng)膜下腔出血有益。
【專利說明】—種蛛網(wǎng)膜下腔出血及局部缺血的治療方法
[0001]與相關(guān)申請的交叉引用
[0002]本申請是非臨時專利申請，并享有申請日為2012年3月28日、專利號為US61/617,001，申請日為2011年12月13日、專利號為US 61/570，264和申請日為2011年12月15日、專利號為CA 2762338的專利的優(yōu)先權(quán)。上述每一項申請的全部內(nèi)容以引用的方式并入本申請用作參考。
[0003]序列表
[0004]本申請包括一個以美國信息交換標(biāo)準(zhǔn)碼(ASCII)格式提交給EFS網(wǎng)絡(luò)在線提交系統(tǒng)的序列表，并由此將本申請全部內(nèi)容以引用的方式并入用作參考。ASCII格式的副本已于2012年12月12日生成，文件名為427647SEQLIST.txt，大小為15kb。

【背景技術(shù)】
[0005]在美國每年大約有800，000人中風(fēng)，帶來的每年直接或間接的社會損失達(dá)到400億美元。中風(fēng)位列所有死亡原因的第三位。目前，只有腦局部缺血的再灌注療法是廣泛認(rèn)可的針對急性中風(fēng)的治療手段(例如，阿替普酶(組織型纖溶酶原激活物或者重組組織型纖溶酶原激活劑)溶栓)。這些療法平衡了改善的總體效果和嚴(yán)重并發(fā)癥的潛在風(fēng)險，而現(xiàn)在這些療法并未被充分使用。安全藥理神經(jīng)保護(hù)，是一種通過增強(qiáng)大腦應(yīng)對局部缺血的恢復(fù)力的腦救治方法，能夠顯著增加從急性中風(fēng)治療中受益的患者的數(shù)量。然而，幾十年來，上千次的神經(jīng)保護(hù)治療并未使從細(xì)胞和嚙齒動物上的發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)換為人類應(yīng)用的研究獲得成功，而且推定的神經(jīng)保護(hù)劑的臨床試驗也失敗了。這個科學(xué)危機(jī)導(dǎo)致了一個普遍思維定勢，即藥理神經(jīng)保護(hù)在人體內(nèi)是不可行的或者不具備可操作性的。因此，迫切需要判定藥理神經(jīng)保護(hù)在人體內(nèi)是否可行。
[0006]中風(fēng)可能是局部缺血或者出血導(dǎo)致的結(jié)果。出血性中風(fēng)約占中風(fēng)總數(shù)的17%，但是會導(dǎo)致高得不成比例的死亡和衰弱性損傷。經(jīng)過只有批準(zhǔn)的中風(fēng)藥物的治療，如可恢復(fù)血液流通的組織型纖溶酶原激活劑，出血性中風(fēng)只會惡化而不會緩解。大多情況下，將受試者帶到醫(yī)院、完成一個初步的診斷和實施腦掃描來判別是缺血性中風(fēng)還是出血性中風(fēng)所需要的時間可能使受試者錯過組織型纖溶酶原激活劑的有效時限。因此，很多本可以從組織型纖溶酶原激活劑受益的缺血性中風(fēng)受試者并未接受這種藥物。
[0007]在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)部或者附近也可能發(fā)生并非由缺血性中風(fēng)導(dǎo)致的出血，尤其是蛛網(wǎng)膜下腔出血，以及硬腦膜或硬膜血腫和大腦挫傷。這種出血可能是物理性創(chuàng)傷導(dǎo)致的，比如摔倒或者其他的頭部撞擊或者來自搖晃嬰兒綜合癥。盡管這種出血當(dāng)時的癥狀看似輕重不一，事實上都會迅速變得嚴(yán)重甚至威脅生命。這種出血是一種威脅生命的緊急情況，即使有最好最及時的治療，也經(jīng)常導(dǎo)致死亡和衰弱性損傷。
[0008]蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)的特征在于所出血滲入蛛網(wǎng)膜下腔。蛛網(wǎng)膜下腔出血是一種嚴(yán)重的、急性的和威脅生命的情況，可以導(dǎo)致慢性衰弱性損傷。大約85%的自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血病例是由顱內(nèi)動脈瘤破裂導(dǎo)致的，被定義為動脈瘤蛛網(wǎng)膜下腔出血。動脈瘤蛛網(wǎng)膜下腔出血大多影響年齡從40到60歲的人群，女人更有可能發(fā)病。在美國每年動脈瘤蛛網(wǎng)膜下腔出血的發(fā)病率為每100,000人中有10人。蛛網(wǎng)膜下腔出血的其他的更為少見的原因包括諸如血管畸形的情況。已知的風(fēng)險因素包括高血壓、酗酒、藥物濫用、吸煙和避孕。其他的風(fēng)險因素包括其它血管中的動脈瘤、肌纖維發(fā)育不良和結(jié)締組織疾病，以及多囊腎病史。
[0009]蛛網(wǎng)膜下腔出血是一個多階段事件，開始出血時伴隨有急性腦損傷，緊接著是第二階段潛在損傷，比如腦動脈痙攣和腦積水導(dǎo)致的局部缺血。在急性的蛛網(wǎng)膜下腔出血誘導(dǎo)的損傷中，蛛網(wǎng)膜下腔的血液存在、顱內(nèi)壓升高、腦灌注壓和腦血流量下降導(dǎo)致了急性級聯(lián)損傷，造成短暫性腦缺血、由于顱內(nèi)壓突然升高產(chǎn)生神經(jīng)刺激導(dǎo)致的腦外傷和某些情況下由于腦內(nèi)形成血腫導(dǎo)致的腦損傷。另外，這些最初的情況可以導(dǎo)致直接的微血管損傷、血管堵塞和由于血小板聚集導(dǎo)致的血管活性物質(zhì)釋放。
[0010]第二階段的缺血過程包括厭氧細(xì)胞呼吸、能量耗盡、蛋白質(zhì)合成受損、興奮性中毒、自由基攻擊、神經(jīng)緊張和DNA損傷、細(xì)胞凋亡和壞死，在一氧化氮\ 一氧化氮合酶路徑中轉(zhuǎn)化和脂質(zhì)過氧化。盡管在蛛網(wǎng)膜下腔出血后可能參與造成腦損傷的第二階段過程的范圍已經(jīng)被廣泛認(rèn)知，但是急性損傷時期單一機(jī)制的確切作用還是沒有被完全了解。
[0011]蛛網(wǎng)膜下腔出血中，大腦局部缺血是腦動脈血管痙攣導(dǎo)致的結(jié)果，大約30%病例在臨床過程中有并發(fā)癥。蛛網(wǎng)膜下腔出血中與臨床相關(guān)的血管痙攣最高發(fā)生幾率出現(xiàn)在蛛網(wǎng)膜下腔出血后5到12天，這種并發(fā)癥在蛛網(wǎng)膜下腔出血后前3天內(nèi)發(fā)生的情況相當(dāng)少見。在蛛網(wǎng)膜下腔出血后患者的最終臨床結(jié)果很可能依賴于幾個因素，包括人口因素諸如年齡和并存疾病、蛛網(wǎng)膜下腔出血的嚴(yán)重程度和蛛網(wǎng)膜下腔出血的多種并發(fā)癥，諸如腦積水和血管痙攣。因此，作為瘤破裂后立即產(chǎn)生的癥狀，由血管痙攣導(dǎo)致的腦局部缺血不是導(dǎo)致蛛網(wǎng)膜下腔出血臨床副反應(yīng)的唯一因素。
[0012]現(xiàn)在針對中風(fēng)和相應(yīng)癥狀的另一種不同形式的治療手段在臨床試驗階段(參見 W02010144721 和 Aarts et al.，Science298, 846-850 (2002))。這種治療方法使用了TAT-NR2B9C,也被稱為 Tat_NR2B9c (YGRKKRRQRRRKLSSIESDV ；SEQ ID NO: 6),是一種抑制突觸后致密物質(zhì)-95 (PSD-95)結(jié)合到天冬氨酸受體2 (NMDAR2)族成員的藥劑，可減少由于腦局部缺血誘導(dǎo)產(chǎn)生的興奮性中毒。針對在缺血性中風(fēng)和外傷性腦損傷中減小腦梗塞大小和減少功能性缺陷的治療方法已有報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明提供了一種治療受試者體內(nèi)蛛網(wǎng)膜下腔出血損傷效應(yīng)的方法，包括對有蛛網(wǎng)膜下腔出血癥狀的受試者使用一種抑制突觸后致密物質(zhì)_95(PSD-95)與天冬氨酸受體2(NMDAR2)亞基結(jié)合的藥劑。在某些方法中，蛛網(wǎng)膜下腔出血是物理性創(chuàng)傷導(dǎo)致的結(jié)果。在某些方法中，蛛網(wǎng)膜下腔出血是自發(fā)產(chǎn)生的。在某些方法中，蛛網(wǎng)膜下腔出血是由破裂的動脈瘤導(dǎo)致的。在某些方法中，蛛網(wǎng)膜下腔出血是由動靜脈畸形導(dǎo)致的。在某些方法中，這種藥劑可以抑制受試者體內(nèi)神經(jīng)認(rèn)知缺陷的發(fā)展。在某些方法中，藥劑可以抑制通過MRI成像可檢測到的梗塞的發(fā)展。在某些方法中，受試者接受血管內(nèi)手術(shù)以修復(fù)導(dǎo)致所述蛛網(wǎng)膜下腔出血的破裂血管。在某些方法中，這種藥劑減輕所述血管內(nèi)手術(shù)引起的疼痛。在某些方法中，疼痛是沿著被用于實施所述內(nèi)窺鏡手術(shù)的內(nèi)窺鏡穿過的路徑產(chǎn)生的。在某些方法中，所述藥劑是在導(dǎo)致所述蛛網(wǎng)膜下腔出血的破裂后的第4天施用的。在某些方法中，所述藥劑是在導(dǎo)致所述蛛網(wǎng)膜下腔出血的破裂發(fā)生后的12天內(nèi)多次施用的。在某些方法中，藥劑每天施用兩次至少施用兩天，或每天施用一次至少施用三天。在某些方法中，藥劑的劑量為 l_3mg/kg。
[0014]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療受試者體內(nèi)腦內(nèi)出血的損傷效應(yīng)的方法，包括對具有腦內(nèi)出血癥狀的受試者使用一種抑制突觸后致密物質(zhì)_95(PSD-95)與天冬氨酸受體2 (NMDAR2)亞基結(jié)合的藥劑。在某些方法中，腦內(nèi)出血是由高血壓導(dǎo)致的。在某些方法中，腦內(nèi)出血是由藥物導(dǎo)致的。在某些方法中，這種藥物為抗凝血劑。在某些方法中，這種藥劑可以抑制受試者體內(nèi)神經(jīng)認(rèn)知缺陷的發(fā)展。在某些方法中，這種藥劑可以抑制通過MRI成像可檢測到的梗塞的發(fā)展。在某些方法中，這種藥劑是在以修復(fù)導(dǎo)致所述出血的血管為目的的手術(shù)之前、期間或之后施用的。在某些方法中，這種藥劑是在施用另一種以減輕腦內(nèi)出血的損傷效應(yīng)為目的的藥物之前、期間或之后施用的。
[0015]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種能夠抑制突觸后致密物質(zhì)-95(PSD_95)與天冬氨酸受體2(NMDAR2)亞基結(jié)合，用于減輕受試者中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血或出血的損傷效應(yīng)，以及用于減輕所述受試者接受治療所述局部缺血或出血的手術(shù)時引起的疼痛。在某些方法中，該手術(shù)為血管內(nèi)手術(shù)。在某些方法中，疼痛是沿著被用于實施所述內(nèi)窺鏡手術(shù)的內(nèi)窺鏡穿過的路徑產(chǎn)生的。
[0016]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種減輕疼痛的方法，包括對接受血管內(nèi)手術(shù)的受試者施用抑制突觸后致密物質(zhì)-95(PSD-95)與天冬氨酸受體2 (NMDAR2)亞基結(jié)合的藥劑，所述藥劑減輕所述受試者接受血管內(nèi)手術(shù)時引起的疼痛。在某些方法中，疼痛是沿著被用于實施所述內(nèi)窺鏡手術(shù)的內(nèi)窺鏡穿過的路徑產(chǎn)生的。
[0017]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種抑制受試者中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血或出血的損傷效應(yīng)的方法，包括對受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑的有效方案，所述受試者患有或被懷疑患有在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血或出血，其中，對所述受試者給予所述藥劑時，所述受試者未曾接受掃描以區(qū)分局部缺血和出血。在某些方法中，受試者有中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血的癥狀。在某些方法中，受試者未經(jīng)受接受再灌注治療。
[0018]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部缺血或出血的損傷效應(yīng)的方法，包括對患有或?qū)植咳毖虺鲅谢疾★L(fēng)險的受試者施用一種抑制突觸后致密物質(zhì)-95(PSD-95)與天冬氨酸受體2 (NMDAR2)亞基的結(jié)合的藥劑。在某些方法中，該藥劑與再灌注治療聯(lián)合施用。某些方法治療出血性中風(fēng)的損傷效應(yīng)。在某些方法中，藥劑是在所述出血的血管內(nèi)修復(fù)之前、期間或之后施用的。在某些方法中，藥劑是在施用其他藥物治療影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血之前、期間或之后施用的。
[0019]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種抑制突觸后致密物質(zhì)(PSD-95)與天冬氨酸受體2 (NMDAR2)亞基結(jié)合的藥劑，用于治療由于再灌注而轉(zhuǎn)化為出血性中風(fēng)的缺血性中風(fēng)，其中該藥劑抑制了缺血性中風(fēng)和出血性中風(fēng)的損傷效應(yīng)。
[0020]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療呈現(xiàn)一種或多種局部缺血跡象和/或癥狀的受試者群體的方法，包括施用一種藥劑，該藥劑能夠抑制突觸后致密物質(zhì)_95(PSD-95)抑制劑與天冬氨酸受體2(NMDAR2)亞基或神經(jīng)元型一氧化氮合酶nNOS結(jié)合；其中，對所述受試者進(jìn)行再灌注治療的副作用的不可接受風(fēng)險分析，沒有副作用的不可接受風(fēng)險的受試者接受再灌注治療，而有副作用的不可接受風(fēng)險的受試者不接受再灌注治療，可選地，其中所述藥劑為抑制PSD-95與NMDAR2亞基或nNOS結(jié)合的肽，且所述肽與內(nèi)化肽連接或所述肽被脂化從而便于其穿過細(xì)胞膜或血腦屏障。
[0021]在上述任意一項方法或藥劑中，所述藥劑是具有包含XJSX2V (SEQ ID NO: 7)或由XitSX2V (SEQ ID NO: 7)組成的氨基酸序列的肽，其中，t和S為可替代的氨基酸，X1選自E、Q、A和它們的類似物，X2選自A、Q、D、N、(N-甲基)_A、(N-甲基)-Q、(N-甲基)_D、(N-甲基)-N和它們的類似物，并且所述肽的N端氨基酸與內(nèi)化肽連接。在上述任意一項方法或藥劑中，所述藥劑具有包含 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID NO: 6)或 YGRKKRRQRRRKLSSIETDV (SEQID NO:37)的氨基酸序列，或為具有由 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID NO:6)或YGRKKRRQRRRKLSSIETDV (SEQ ID NO:37)組成的氨基酸序列。在上述任意一項方法中，所述肽或其它藥劑可以被連接到內(nèi)化肽或被脂化，從而促進(jìn)所述肽穿過細(xì)胞膜或血腦屏障。部分肽或其他藥劑被豆蘧?；?yōu)選的，所述肽在其N端被豆蘧酰化。
[0022]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種篩選化合物以獲得益于治療或有效預(yù)防在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中風(fēng)或出血的活性的方法，所述方法包括:對正在經(jīng)受影響所述中樞神經(jīng)系統(tǒng)的血管內(nèi)修復(fù)操作的人施用所述化合物，以及與陰性對照相比，確定所述化合物是否減少了磁共振成像(MRI)觀察到的梗塞數(shù)量。在一些方法中，磁共振成像(MRI)包括磁共振彌散加權(quán)成像(DWIMRI)。在另一些方法中，磁共振成像(MRI)包括液體衰減翻轉(zhuǎn)恢復(fù)磁共振成像(FLAIR MRI)。還有一些方法中，磁共振成像(MRI)包括磁共振彌散加權(quán)成像(DWMRI)和液體衰減翻轉(zhuǎn)恢復(fù)磁共振成像(FLAIR MRI)，且血管內(nèi)操作造成的梗塞是通過識別在DWI成像和FLAIRMRI成像兩者上顯示的梗塞來確定的。
[0023]本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種具有包含XltSX2V(SEQ ID NO:7)或由XltSX2V(SEQ IDNO:7)組成的氨基酸序列的分離的肽，其中t和S為可替代氨基酸，X1選自E、Q和A，X2選自A、Q、D、N、(N-甲基)-A、(N-甲基)-Q、(N-甲基)-D和(N-甲基)-N，其中所述肽在其氨基酸的N端被脂化。部分肽具有包含KLSSIESDV或KLSSIETDV的氨基酸序列，或具有由KLSSIESDV或KLSSIETDV組成的氨基酸序列。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0024]圖1A表示單個患者的采樣DWI成像及LAIRMRI成像的掃描圖，分別拍攝于患者登記時(操作前)和進(jìn)行血管內(nèi)操作第2天后(操作后)。箭頭表示的DW1-陽性栓塞性中風(fēng)(黃色:上圖)的例子與他們的FLAIR-陽性相對應(yīng)(紅色:下圖)。最右邊的區(qū)域(ROIs)顯示了用于計算損傷數(shù)目和計算缺血性損傷體積的可供選擇的感興趣區(qū)域。
[0025]圖1B、C表示通過DWI MRI成像檢測到的損傷數(shù)目和損傷體積的分布情況，一個是對接受第2-4天(day2-4)MRI成像檢查(B ；n = 184)的所有隨機(jī)患者的檢測結(jié)果的分布情況，另一個是對腦出血量<10cc’ s的(C ；n = 182)中風(fēng)患者的檢測結(jié)果的分布情況。由于數(shù)據(jù)的極端偏態(tài)分布，它們的標(biāo)準(zhǔn)偏差預(yù)計會受到異常值的高度影響。圖B中提供了具有代表性的兩名患者的DWI MRI成像掃描圖切片，所述兩名患者曾經(jīng)歷因手術(shù)并發(fā)癥所致的嚴(yán)重中風(fēng)(大中風(fēng)large strokes)(其腦出血量>10cc’ S)。由于損傷數(shù)目(counts ofleisons)不依賴損傷體積,故嚴(yán)重中風(fēng)(大中風(fēng)large strokes)患者對損傷數(shù)目的反應(yīng)不敏感。
[0026]圖2表示經(jīng)篩選、被隨機(jī)分配到一個研究小組、并被納入符合方案(per-protocol)的群體中的患者的數(shù)目。改進(jìn)后的意向性治療群體被定義為登記并隨機(jī)分配到研究組的和接受研究藥物(TAT-NR2B9C或安慰劑)的全部患者。符合方案的群體被定義為接受TAT-NR2B9C或安慰劑的和因重大的協(xié)議違規(guī)而未被排除的隨機(jī)分配的患者，其中包括未能完成血管內(nèi)操作后MRI成像掃描的患者(I例，患者在掃描完成前死亡)，或因死亡或拒絕后續(xù)跟進(jìn)而未參與第30天研究結(jié)束訪問(the30day end-of-study visit)的患者。然而，在隨機(jī)的185名患者中，有184名患者完成了他們第2-4天的操作后的MRI成像掃描，而這些都被納入分析。
[0027]定義
[0028]“嵌合肽”是一種具有雙組分的肽，該雙組分的肽不是通過自然方式相互連接的融合蛋白或化學(xué)鍵。
[0029]“融合”的蛋白或肽是指復(fù)合肽，例如，一個單獨的連續(xù)氨基酸序列，由兩個(或多個)不同的序列組成，異源肽通常不是以單獨的肽序列方式融合的。
[0030]術(shù)語“PDZ結(jié)構(gòu)域”指的是大約90個氨基酸的模塊化蛋白質(zhì)區(qū)域，對腦突觸蛋白PSD-95具有顯著的序列同源性(例如，至少60% )。果蠅的間璧連接蛋白Discs-Large (DLG)，及上皮的緊密連接蛋白ZOl (ZOl)，PDZ結(jié)構(gòu)域也被稱為Discs-Large的同源重復(fù)序列(“DHRs”)和GLGF(SEQ ID NO:68)的重復(fù)序列。PDZ結(jié)構(gòu)域通常表現(xiàn)出持有核心共有序列(Doyle，D.A.，1996，Cell85:1067-76)。典型的包含氨基酸的PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白和PDZ結(jié)構(gòu)域序列已在美國被公開。其申請?zhí)枮?0/714，537，在此將其通過整體引用并入文中。
[0031]術(shù)語“PL蛋白”或“PDZ配體蛋白”是指自然產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，所述蛋白質(zhì)由分子復(fù)合PDZ結(jié)構(gòu)域形成，或至蛋白質(zhì)的羧基末端，當(dāng)將全長蛋白單獨表達(dá)時(例如，作為殘基的肽片段3-25，例如3，4，5，8，9，10，12，14或16個殘基)，即形成這樣的分子復(fù)合物。采用如美國申請?zhí)?0/714537中描述的“A測定法”或“G測定法”，分子復(fù)合物可以在體外或體內(nèi)被觀察到。
[0032]術(shù)語“ NMDA受體”或“ NMDAR ”是指與蛋白結(jié)合的膜，該與蛋白結(jié)合的膜被已知與包括下面描述的各種形式的亞基的NMDA相互作用。這樣的受體可以是人或非人(例如，小鼠，大鼠，兔，猴)。
[0033]“PL基序”是指PL蛋白的C端氨基酸序列(例如，C端3，4，5，6，7，8，9，10，12，14，16，20或25相鄰的殘基)(“C端PL序列”)或已知的結(jié)合PDZ結(jié)構(gòu)域(“內(nèi)部PL序列”)的內(nèi)部序列。
[0034]“PL肽”是含有與PDZ結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合的PL基序的肽，或由與PDZ結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合的PL基序組成的肽，或以其他基于與PDZ結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合的PL基序的肽。
[0035]術(shù)語“分離的”或“純化的”表示該對象種類(例如，肽)已經(jīng)從存在于樣品中的污染物中純化，例如從包含該對象種類的天然來源中獲得的樣品。如果一個對象種類被分離或純化，其主要的大分子(例如，肽)物質(zhì)存在于樣品中(即，以摩爾計它比任何其它單個物種的組合物更豐富)，并且優(yōu)選地，所述對象種類包含至少約50% (以摩爾計)的大分子物質(zhì)。一般來說，分離的、純化的或基本上純的組合物包含超過80%至90%的大分子物質(zhì)。最優(yōu)選地，該對象種類純化至基本上同質(zhì)(即，通過常規(guī)的檢測方法，不能在組合物種中檢測到污染物質(zhì))，所述組合物本質(zhì)上是由單一的大分子種類組成。術(shù)語“分離的”或“純化的”并非一定排除其它存在的旨在充當(dāng)與所分離種類相結(jié)合的組分。例如，內(nèi)化肽可以被描述為分離的，盡管它被連接到活性肽或與藥學(xué)上可接受的賦形劑相結(jié)合。
[0036]“擬肽”是指合成的化合物，其具有與天然氨基酸組成的肽基本相同的結(jié)構(gòu)和/或功能特征。擬肽含有完全合成的非天然的氨基酸類似物，也可以是部分天然肽氨基酸和部分非天然氨基酸類似物的嵌合分子。擬肽也包含保守置換任意量的天然氨基酸的情況，只要這樣的置換大體上不改變該模擬物的結(jié)構(gòu)和/或抑制性或結(jié)合活性即可。
[0037]個別擬肽殘基可以通過肽鍵、其它化學(xué)鍵或者偶聯(lián)方式連接，諸如，例如，戊二醛，N-羥基琥拍酰亞胺酯,雙馬來酰亞胺,NjN- 二環(huán)己基碳二亞胺NjN-dicyclohexylcarbodiimide (DCC)或 N5N-二異丙基碳二亞胺 N5N_diisopropylcarbodiimide (DIC)?？商娲鷤鹘y(tǒng)的酰胺鍵(“肽鍵”)連接的連接基團(tuán)包括如下，比如，酮亞甲基(例如，-c( = o)-ch2-替換為-C ( = O) -NH-))，氨基亞甲基(CH2-NH)，乙烯，烯烴(CH = CH)，醚(CH2-O)，硫醚(CH2-S)，四唑(CN4._),噻唑，逆酰胺(retroamide),硫代酰胺或酯(參見，例如，Spatola(1983)in Chemistry and B1chemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins, Vol.7,pp267-357, A Peptide Backbone Modificat1ns, Marcell Dekker, NY)。
[0038]芳香族氨基酸的類似物可以通過替代物來生成，例如D-或L-萘基丙氨酸；D_或L-苯基甘氨酸；D-或L-2噻吩基丙氨酸；D-或L-1、-2、3-或A-芘基；D_或L-3噻吩基丙氨酸；D-或L- (2-吡啶基)-丙氨酸；D-或L- (3-吡啶基)-丙氨酸；D-或L- (2-吡嗪基)-丙氨酸；D-或L- (4-異丙基)-苯基甘氨酸；D-(三氟甲基)-苯基甘氨酸；D-(三氟甲基)-苯基丙氨酸；D_對氟苯丙氨酸；D-或L-對-二苯基苯基丙氨酸；K-或L-對-甲氧苯丙氨酸；D-或L-2-吲哚(烷基)丙氨酸；和D-或L-丙氨酸烷基，其中烷基可以是替代的或未替代的甲基、乙基、丙基、己基、丁基、戍基、異丙基、異丁基、仲異丁基、異戍基或者非酸性氣基酸。一個非天然氨基酸的芳香環(huán)包括，例如噻唑基、噻吩基、吡唑基、苯并咪唑基、萘基、呋喃基、吡咯基和吡啶基芳環(huán)。
[0039]酸性氨基酸的類似物可以通過替代物而生成，例如，通過保持一個負(fù)電荷的非羧酸氨基酸；(膦)丙氨酸；硫酸化蘇氨酸。羧基側(cè)基(例如，門冬氨酰或谷氨酰)也可以通過與碳二亞胺(R-N-C-N-R =)反應(yīng)來選擇性地改良，所述碳二亞胺(R-N-C-N-R =)諸如1-環(huán)己基_3、2-嗎啉基-(4-乙基)碳二亞胺或者1-乙基-3 (4-氮鎗-4，4- 二甲基戊基)碳二亞胺。門冬氨?；蛘吖劝滨Ｒ部梢酝ㄟ^與銨離子反應(yīng)轉(zhuǎn)化為天冬酰胺和谷氨酰胺酰殘基。
[0040]堿性氨基酸的類似物可以由例如以下物質(zhì)的替代物生成:(除了賴氨酸和精氨酸之外)氨基酸鳥氨酸、瓜氨酸，或者(胍基)-乙酸，或者(胍基)-烷-乙酸，其中烷于上文所定義。腈衍生物(例如，在羧基C00H處包含CN部分的)可以由天冬酰胺或谷氨酰胺所替換。天冬酰胺殘基和谷氨酰胺殘基可以脫氨基成為相應(yīng)的天冬氨酰殘基或谷氨酰殘基。
[0041]精氨酸殘基類似物可以由精氨酸與例如一種或多種常規(guī)試劑反應(yīng)生成，所述常規(guī)試劑包括例如苯甲酰甲醛、2，3-丁二酮、1，2-環(huán)己二酮或者茚三酮，優(yōu)選在堿性條件下進(jìn)行反應(yīng)。
[0042]酪氨酸殘基類似物可以由酪氨酰與例如芳香族重氮化合物或者四硝基甲烷反應(yīng)生成。N-乙酰咪唑和四硝基甲烷可以用來分別形成O-乙?；野滨ｎ惡?-硝基衍生物。
[0043]半胱氨酸殘基類似物可以由半胱氨酰殘基與例如α -鹵代乙酸鹽反應(yīng)生成以提供羧甲基衍生物或者羧氨甲基衍生物，所述α -鹵代乙酸鹽諸如2-氯乙酸或者氯乙酰氨及相應(yīng)的氨類。半胱氨酸殘基類似物也可以由半胱氨酰殘基與例如以下物質(zhì)反應(yīng)生成:溴-三氟丙酮，α -溴-β - (5-咪唑基)丙酸；氯磷酸，N-烷基馬來酰亞胺，3-硝基-2-吡啶基的二硫化物；甲基2-吡啶基的二硫化物；對氯高汞苯甲酸；2_氯汞基-4的硝基苯酚；或者氯-7-硝基苯-乙二酸-1，3- 二唑。
[0044]賴氨酸類似物可以由賴氨酰和例如琥珀酸或者其他羧酸酐反應(yīng)生成(氨基末端殘基可以由賴氨酰和例如琥珀酸或者其他羧酸酐反應(yīng)而發(fā)生改變)。賴氨酸和其他含有α-氨基的殘基類似物也可以由與亞氨酸酯反應(yīng)生成，諸如甲基吡啶亞胺甲酯，吡哆醛磷酸，吡哆醛，氯硼氫化物，三硝基苯磺酸，鄰甲基異脲，2，4-戊二酮，以及與乙醛酸鹽的轉(zhuǎn)酰胺酶催化反應(yīng)。
[0045]蛋氨酸類似物可以由與例如蛋氨酸亞砜反應(yīng)生成。脯氨酸類似物包括例如哌啶酸，噻唑烷羧酸，3-羥基脯氨酸，4-羥基脯氨酸，脫羥脯氨酸(dehydr0pix)line)，3-甲基脯氨酸，4-甲基脯氨酸，或者3，3-二甲基脯氨酸。組氨酸殘基類似物可以由組氨?；c例如焦碳酸二乙酯或者對溴苯甲酰甲基溴反應(yīng)生成。
[0046]其他類似物包括例如由脯氨酸的羥化和賴氨酸的羥化生成的物質(zhì)；絲氨酰殘基或蘇氨酰殘基的羥基的磷酸化；賴氨酸，精氨酸和組氨酸的α -氨基的甲基化；Ν-末端胺的乙?；?；主鏈酰胺殘基的甲基化或者N-甲基氨基酸的替代物；或者C-末端羧基的酰胺化。
[0047]本發(fā)明的擬肽也包括結(jié)構(gòu)類似的殘基，尤其是包括或模擬二級結(jié)構(gòu)的殘基，例如β轉(zhuǎn)彎，β折疊，α螺旋結(jié)構(gòu)，Y轉(zhuǎn)彎等等。舉個例子，用D-氨基酸作為天然氨基酸殘基的替代物；Ν-α -甲基氨基酸；C-a -甲基氨基酸；或者肽內(nèi)脫氫氨基酸可以引起或者穩(wěn)定β轉(zhuǎn)彎，Y轉(zhuǎn)彎，β折疊或者α-螺旋構(gòu)象。β轉(zhuǎn)彎模擬結(jié)構(gòu)已有描述，例如by Nagai (1985)Tet.Lett.26:647-650 ；Feigl (1986) J.Amer.Chem.Soc.108:181-182 ；Kahn (1988) J.Amer.Chem.Soc.110:1638-1639 ；Kemp(1988)Tet.Lett.29:5057-5060 ；Kahn(1988)J.Molec.Recognit1nl: 75-79。B 折疊模擬結(jié)構(gòu)已有描述，例如 by Smith (1992) J.Amer.Chem.Soc.114:10672-10674。舉個例子，由酰胺順式代理及1，5- 二取代四唑誘發(fā)的VI型β轉(zhuǎn)彎在Beusen (1995) B1polymers36:181-200中有描述。非手性的ω-氨基酸殘基作為酰胺鍵的替代物摻入聚甲烯生成單元在Banerjee (1996) B1polymers39:769-777’中有描述。多肽的二級結(jié)構(gòu)可以通過例如高能.sup.1H核磁共振或者二維核磁共振譜得到分析，可參見例如 Higgins (1997) J.Pept.Res.50:421-435。也可以參見 Hruby (1997) B1polymers43:219-266, Balaji, et al., U.S.Pat.N0.5, 612, 895。
[0048]擬肽可以包含非天然結(jié)構(gòu)組件的任意組合，典型的是以下三個結(jié)構(gòu)基團(tuán):a)不同于天然酰胺鍵(“肽鍵”)連接的殘基連接基團(tuán)山)非天然的殘基替代天然存在的氨基酸殘基；或者c)誘導(dǎo)二級結(jié)構(gòu)模擬的殘基，即引起或穩(wěn)定諸如β轉(zhuǎn)彎，Y轉(zhuǎn)彎，β折疊，α-螺旋構(gòu)象等等的二級結(jié)構(gòu)。在嵌合包括活性肽和內(nèi)化肽的擬肽物中，要么活性成分要么內(nèi)化部分或者兩者一起成為肽。
[0049]術(shù)語“特異性結(jié)合”是指兩個分子之間的結(jié)合，例如，配體和受體，其特征在于一個分子(配體)關(guān)聯(lián)另一個特定分子(受體)的能力，即使存在其他許多不同的分子，即展示一個分子在分子的異種混合中對另一個分子的優(yōu)先結(jié)合。配體對受體的特異性結(jié)合也被可檢測標(biāo)記的配體在存在過量未標(biāo)記配體的情況下對受體結(jié)合有所縮減這一情形所證實(即結(jié)合競爭試驗)。
[0050]興奮性毒性是病理過程，通過由受體對興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸的過度激活而使得神經(jīng)元受損及被殺死，諸如NMDA受體，如NMDAR2B。
[0051]術(shù)語“受試者”包括人類和獸醫(yī)動物，比如哺乳動物和實驗室動物模型，如在臨床研究中使用的小鼠或老鼠。
[0052]術(shù)語“試劑”包括任何含有具備或不具備藥物活性的化合物、天然化合物、綜合化合物、小分子、多肽和擬肽的混合物。
[0053]術(shù)語“藥理劑”意指一種具有藥理活性的試劑。藥理劑包括已知的藥物混合物，以及藥理活性已被確定但是正在動物模型和臨床試驗中接受進(jìn)一步的治療評估的混合物。嵌合試劑包括連接內(nèi)化肽的藥理劑。如果制劑在篩選系統(tǒng)中呈現(xiàn)活性，表明該活性劑是或可能在疾病的預(yù)防或治療中是有用的，那么可以說該制劑具有藥理活性。該篩選系統(tǒng)可以在體外，在細(xì)胞內(nèi)，在動物體上或者人體上。盡管需要進(jìn)行進(jìn)一步的測試來建立疾病治療中實際預(yù)防或治療用途，試劑仍可以被稱為具有藥理活性。
[0054]tat 肽意為包括 GRKKRRQRRR(SEQ ID NO:1)或由 GRKKRRQRRR(SEQ ID NO:1)組成的肽，在tat肽中有不超過5個殘基被刪除、取代或插入序列內(nèi)，該tat肽保留著利于連接肽或其他試劑攝取到細(xì)胞內(nèi)的能力。優(yōu)選地，任何氨基酸變化都是保守性代替。優(yōu)選地，在聚集體中任何替換、刪除或內(nèi)部的插入給肽留下了凈陽離子電荷，優(yōu)選類似于上述序列。如此一來不替換或者刪除R殘基和K殘基就可以完成?？梢岳蒙锼鼗蛳嗨品肿訉崿F(xiàn)tat肽的氨基酸的衍生化，以減少炎癥反應(yīng)。
[0055]藥理劑的共同施用意為以試劑的可檢測量在足夠接近的時間內(nèi)施用不同的試劑，以同時呈現(xiàn)在血漿中，和/或該不同試劑對相同的一段疾病產(chǎn)生治療效果，或者在治療相同的一段疾病中各種試劑共同操作地或以協(xié)同方式地進(jìn)行反應(yīng)。舉例來說，當(dāng)以下兩種試劑在足夠接近的時間施用時，抗炎劑配合著一種含有tat肽的試劑反應(yīng)，通過內(nèi)化肽(internat1nalizat1n peptide),該抗炎劑可以抑制炎癥反應(yīng)誘導(dǎo)。
[0056]統(tǒng)計學(xué)上的重大意義指的是P值〈0.05，優(yōu)選地P值〈0.01，最優(yōu)選為p值〈0.001。
[0057]一段疾病意為在一個時間段內(nèi)疾病的跡象和/或癥狀在前后在更長的時間段內(nèi)出現(xiàn)，在所述更長的時間段內(nèi)跡象和/或癥狀消失或較少出現(xiàn)。
[0058]通常，中樞神經(jīng)系統(tǒng)控制著大腦和/或脊髓。如果局部缺血或出血發(fā)生在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，則會影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，立即影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)近端如蛛網(wǎng)膜下腔出血，或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)更遠(yuǎn)端的血管出血。局部缺血或出血影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，如果是這種癥狀而沒有及時治療，則會導(dǎo)致在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的可檢測到的癥狀或神經(jīng)認(rèn)知缺陷。
[0059]在一些情況下，例如由破裂引起的蛛網(wǎng)膜下腔出血，且該破裂發(fā)生的那天被認(rèn)為是第一天。因此，例如，如果破裂是發(fā)生在周一，且在破裂后的四天內(nèi)進(jìn)行治療，即截止周五之前進(jìn)行治療。發(fā)生在破裂后第5-12天的治療是指周六到下周五期間內(nèi)。
[0060]本發(fā)明還提供了治療受試者群體的蛛網(wǎng)膜下腔出血的損傷效應(yīng)的方法，包括:對有蛛網(wǎng)膜下腔出血癥狀的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑，其中，與沒有接受所述藥劑的對照受試者相比，施用所述藥劑的群體的損傷效應(yīng)減輕。所述得到減輕的損傷效應(yīng)為神經(jīng)細(xì)胞死亡或認(rèn)知缺陷。

【具體實施方式】
[0061]1.某本內(nèi)容
[0062]本發(fā)明提供的數(shù)據(jù)是將PSD-95抑制劑應(yīng)用在在臨床試驗中，受試者經(jīng)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的動脈瘤腔內(nèi)修復(fù)的損傷。受試者被分為在血管內(nèi)手術(shù)前動脈瘤破裂和在血管內(nèi)手術(shù)前動脈瘤未破裂兩組。即使受試者存活下來，破裂也會導(dǎo)致更高的死亡率或更嚴(yán)重的虛弱。梗塞的數(shù)量和體積以及神經(jīng)認(rèn)知功能的評價用來對結(jié)果進(jìn)行評估。不管動脈瘤是否在血管內(nèi)手術(shù)前破裂，試驗結(jié)果證明所述試驗對患有顱內(nèi)動脈瘤需要進(jìn)行血管內(nèi)修復(fù)的受試者具有非常顯著的好處，并且副作用最小。然而，令人驚訝的是，從根據(jù)病理學(xué)和神經(jīng)認(rèn)知結(jié)果確定的治療方案中獲益最多的受試者，是那些導(dǎo)致蛛網(wǎng)膜下腔出血的血管內(nèi)操作之前動脈瘤就已破裂的人。這些數(shù)據(jù)結(jié)果表明，PSD-95抑制劑不僅在治療局部缺血性和出血性中風(fēng)方面有益，而且在治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血形式有益，而無論所述出血是否由中風(fēng)導(dǎo)致，所述出血形式包括腦出血、腦內(nèi)出血、顱內(nèi)出血(ICH)、神經(jīng)創(chuàng)傷、創(chuàng)傷性腦損傷、硬膜下和硬膜外出血，特別是蛛網(wǎng)膜下腔出血。施用PSD-95抑制劑的治療在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血性和出血性損傷上有效，并且副作用最小，這就意味著這種抑制劑可以給任何有中風(fēng)或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血的跡象的受試者，而且對受試者的第一次仔細(xì)的診斷沒有延誤，該診斷一般是腦部掃描診斷來識別是局部缺血還是出血。試驗還表明，PSD-95抑制劑可以有效減少疼痛，疼痛是沿著被用于實施腹股溝穿刺的血管內(nèi)手術(shù)的血管內(nèi)導(dǎo)管插入動脈系統(tǒng)和穿過其作用部位的路徑產(chǎn)生的，在這種情況下，則與從腹股溝到大腦區(qū)域(例如，腿，腹股溝，腹部，胸部，頸部，頭部)相關(guān)。雖然先前已有報道PSD-95抑制劑在治療某些疼痛上有效，但結(jié)果是施用相同的PSD-95抑制劑具有雙重作用，即可以抑制由動脈瘤血管內(nèi)手術(shù)修復(fù)引起的損壞，也可以抑制由血管內(nèi)手術(shù)本身產(chǎn)生的疼痛。
[0063]IL PSD-95 抑制劑
[0064]這些試劑抑制PSD-95與一種或多種NMDARs之間相互作用，例如通過特異性結(jié)合PSD-95。優(yōu)選地，抑制PSD-95與一種NMDAR2之間相互作用(例如，2A，2B，2C或2D)。參照這些試劑時，可以單獨參考所述試劑或更通常地參考肽試劑，這些連接到內(nèi)化肽的試劑作為一種嵌合肽。這種試劑對于降低一種或多種損壞效應(yīng)是有效果的，該一種或多種損壞效應(yīng)包括中風(fēng)和通過至少部分由NMDAR興奮毒性引起的其他神經(jīng)疾病。這種試劑包括具有下述氨基酸序列的肽，包括或基于NMDARs或PSD-95的PDZ結(jié)構(gòu)域的PL基序肽。這種肽還可以抑制PSD-95，nNOS和其他谷氨酸受體(例如，鉀鹽鎂礬受體或AMPA受體)之間的相互作用，如KV1-4和GluR6之間的相互作用。優(yōu)選的肽抑制突觸后密度-95蛋白(PSD-95) (human amino acid sequence provided by Stathakism, Genomics44 (I): 71-82 (1997))的PDZ結(jié)構(gòu)域I和2與一種或多種NMDARs2亞基的C末端PL序列之間的相互作用，該一種或多種NMDARs2亞基包括神經(jīng)元N-甲基-D-天冬氨酸受體的NR2B亞基(Mandich etal.，Genomics22, 216-8 (1994))。NMDAR2B 具有基因數(shù)據(jù)庫登記號 4099612，有一個 C 末端20 氨基酸 FNGSSNGHVYEKLSSIESDV (SEQ ID NO: 11)和一個 PL 基序 ESDV (SEQ ID NO: 12)。優(yōu)選的肽抑制人PSD-95和人NMDARs。然而，抑制作用也可以從蛋白質(zhì)的物種變體中顯示出來。如下所示，為一個可以使用NMDA和谷氨酸受體的列表。
[0065]表1:有 PL 序列的 NMDARs
[0066]

【權(quán)利要求】
1.一種治療受試者體內(nèi)蛛網(wǎng)膜下腔出血的損傷效應(yīng)的方法，其中所述方法包括: 對具有蛛網(wǎng)膜下腔出血癥狀的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述蛛網(wǎng)膜下腔出血是物理性創(chuàng)傷導(dǎo)致的結(jié)果。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述蛛網(wǎng)膜下腔出血是自發(fā)產(chǎn)生的。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述蛛網(wǎng)膜下腔出血是由破裂的動脈瘤導(dǎo)致的。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述蛛網(wǎng)膜下腔出血是由動靜脈畸形導(dǎo)致的。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑抑制受試者體內(nèi)神經(jīng)認(rèn)知缺陷的發(fā)展。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑抑制通過MRI可檢測到的梗塞的發(fā)展。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述受試者接受血管內(nèi)手術(shù)以修復(fù)導(dǎo)致所述蛛網(wǎng)膜下腔出血的破裂血管。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述藥劑減輕所述血管內(nèi)手術(shù)引起的疼痛。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述疼痛是沿著被用于實施所述內(nèi)窺鏡手術(shù)的內(nèi)窺鏡穿過的路徑產(chǎn)生的 。
11.一種治療受試者體內(nèi)腦內(nèi)出血的損傷效應(yīng)的方法,所述方法包括: 對具有腦內(nèi)出血癥狀的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述腦內(nèi)出血是由高血壓導(dǎo)致的。
13.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述腦內(nèi)出血是由藥物導(dǎo)致的。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述藥物為抗凝血劑。
15.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑抑制受試者體內(nèi)神經(jīng)認(rèn)知缺陷的發(fā)展。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑抑制通過MRI可檢測到的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中梗塞的發(fā)展。
17.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑是在以修復(fù)導(dǎo)致所述出血的血管為目的的手術(shù)之前、期間或之后施用的。
18.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑是在施用另一種以減輕腦內(nèi)出血的損傷效應(yīng)為目的的藥物之前、期間或之后施用的。
19.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑是在導(dǎo)致所述蛛網(wǎng)膜下腔出血的破裂后的第4天施用的。
20.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑是在導(dǎo)致所述蛛網(wǎng)膜下腔出血的破裂發(fā)生后的12天內(nèi)多次施用的。
21.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑每天施用兩次至少施用兩天，或每天施用一次至少施用三天。
22.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述藥劑的劑量為l_3mg/kg。
23.一種藥劑，其抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合，從而用于減輕受試者中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血或出血的損傷效應(yīng)，以及用于減輕所述受試者在接受治療所述局部缺血或出血的手術(shù)時引起的疼痛。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的藥劑，其中所述手術(shù)為血管內(nèi)手術(shù)。
25.根據(jù)權(quán)利要求23所述的藥劑，其中所述疼痛是沿著被用于實施所述內(nèi)窺鏡手術(shù)的內(nèi)窺鏡穿過的路徑產(chǎn)生的。
26.一種減輕疼痛的方法，所述方法包括對接受血管內(nèi)手術(shù)的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑，其中所述藥劑減輕由所述血管內(nèi)手術(shù)導(dǎo)致的受試者體內(nèi)的疼痛。
27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述疼痛是沿著被用于實施所述內(nèi)窺鏡手術(shù)的內(nèi)窺鏡穿過的路徑產(chǎn)生的。
28.—種抑制受試者中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血或出血的損傷效應(yīng)的方法，所述方法包括: 對受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑的有效方案，所述受試者患有或被懷疑患有在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的局部缺血或出血，其中，對所述受試者給予所述藥劑時，所述受試者未曾接受掃描以區(qū)分局部缺血和出血。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中所述受試者患有在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血。
30.根據(jù)權(quán)利要求28或29所述的方法，其中所述受試者未經(jīng)受再灌注治療。
31.一種治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部缺血或出血的損傷效應(yīng)的方法，所述方法包括:對患有局部缺血或出血的受試者或有患局部缺血或出血風(fēng)險的受試者施用藥劑，所述藥劑抑制PSD-95與NMDAR2亞基或nNos的結(jié)合。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述藥劑與再灌注治療聯(lián)合施用，其中所述藥劑與再灌注治療治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部缺血的損傷效應(yīng)。
33.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述受試者具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)局部缺血的癥狀或風(fēng)險。
34.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述方法治療出血性中風(fēng)的損傷效應(yīng)。
35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述藥劑是在所述出血的血管內(nèi)修復(fù)之前、期間或之后施用的。
36.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的方法，其中所述藥劑是在使用其他藥物來治療影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的出血的治療之前、期間或之后施用的。
37.一種藥劑，其抑制PSD-95與NMDAR2亞基的結(jié)合從而用于治療由于再灌注而轉(zhuǎn)化為出血性中風(fēng)的缺血性中風(fēng)，其中所述藥劑抑制所述缺血性中風(fēng)和出血性中風(fēng)的損傷效應(yīng)。
38.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法或藥劑，其中所述藥劑是具有包含XitSX2V (SEQ ID NO: 7)或由XJSX2V (SEQ ID NO: 7)組成的氨基酸序列的肽，其中，t和S為可替換的氨基酸，X1選自E、Q和A，X2選自A、Q、D、N、(N-甲基)_A、(N_甲基)_Q、(N_甲基)-D和(N-甲基)_N。
39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的藥劑，其中所述肽與內(nèi)化肽連接或所述肽被脂化，從而促進(jìn)所述肽穿過細(xì)胞膜或血腦屏障。
40.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法或藥劑，其中所述藥劑是具有包含 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID NO:6)或 YGRKKRRQRRRKLSSIETDV(SEQ IDNO:37)的氨基酸序列的肽，或是具有由YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID NO:6)或YGRKKRRQRRRKLSSIETDV (SEQ ID NO: 37)組成的氨基酸序列的肽。
41.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法或藥劑，其中所述藥劑為豆蘧酰化肽。
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法或藥劑，其中所述肽具有包含KLSSIESDV或KLSSIETDV的氨基 酸序列，或具有由KLSSIESDV或KLSSIETDV組成的氨基酸序列。
43.根據(jù)權(quán)利要求41或42所述的方法，其中所述豆蘧?；挥谒鲭牡腘端。
44.一種篩選化合物以獲得益于治療或有效預(yù)防在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的或影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中風(fēng)或出血的活性的方法，所述方法包括: 對正在經(jīng)受影響所述中樞神經(jīng)系統(tǒng)的血管內(nèi)修復(fù)手術(shù)的人施用所述化合物，以及 與陰性對照相比，確定所述化合物是否減少了 MRI觀察到的梗塞數(shù)量。
45.根據(jù)權(quán)利要求44所述的方法，其中所述MRI成像包括DWIMRI。
46.根據(jù)權(quán)利要求44所述的方法，其中所述MRI成像包括FLAIRMRI。
47.根據(jù)權(quán)利要求44所述的方法，其中所述MRI成像包括DWIMRI和FLAIR MRI，并且所述血管內(nèi)手術(shù)造成的梗塞是通過識別在DWI MRI和FLAIR MRI兩者上顯示的梗塞來確定的。
48.一種治療呈現(xiàn)一種或多種局部缺血跡象和/或癥狀的受試者群體的方法，所述方法包括:對所述受試者施用抑制PSD-95抑制劑與NMDAR2亞基或nNOS結(jié)合的藥劑；其中，對所述受試者進(jìn)行再灌注治療的副作用的不可接受風(fēng)險分析，沒有副作用的不可接受風(fēng)險的受試者接受再灌注治療，而有副作用的不可接受風(fēng)險的受試者不接受再灌注治療，可選地，其中所述藥劑為抑制PSD-95與NMDAR2亞基或nNOS結(jié)合的肽，且所述肽與內(nèi)化肽連接或所述肽被脂化從而便于其穿過細(xì)胞膜或血腦屏障。
49.一種具有包含XJSX2V(SEQ ID NO:7)或由XJSX2V(SEQ ID NO:7)組成的氨基酸序列的分離的肽，其中，t和S為可替換的氨基酸，X1選自E、Q和A，X2選自A、Q、D、N、(N-甲基)-A、(N-甲基)-Q、(N-甲基)-D和(N-甲基)-N。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的分離的肽，其中所述肽具有包含KLSSIESDV或KLSSIETDV的氨基酸序列，或所述肽具有由KLSSIESDV或KLSSIETDV組成的氨基酸序列。
51.一種治療受試者群體中蛛網(wǎng)膜下腔出血的損傷效應(yīng)的方法，所述方法包括: 對患有蛛網(wǎng)膜下腔出血的受試者施用抑制PSD-95與NMDAR2亞基結(jié)合的藥劑，其中，與沒有接受所述藥劑的對照受試者相比，被施用所述藥劑的群體的損傷效應(yīng)減輕。
52.根據(jù)權(quán)利要求51所述的方法，其中所述得到減輕的損傷效應(yīng)為神經(jīng)元細(xì)胞死亡或認(rèn)知缺陷。
【文檔編號】A61K38/08GK104053448SQ201280061924
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2012年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月13日
【發(fā)明者】邁克爾·蒂米安斯基 申請人:諾諾公司