用于治療視網(wǎng)膜病癥和疾病的anp(心鈉素)、bnp(腦鈉素)以及cnp(c型利鈉肽)相關(guān)肽及 ...的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供用于治療視網(wǎng)膜病癥和疾病的諸如蛋白質(zhì)、肽、肽模擬物、衍生物和類似物之類的NP化合物。
【專利說(shuō)明】用于治療視網(wǎng)膜病癥和疾病的ANP (心鈉素)、BNP (腦鈉素)以及CNP (C型利鈉肽)相關(guān)肽及其衍生物的方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及基于ANP、BNP和CNP以及其它結(jié)構(gòu)上相關(guān)的肽的蛋白質(zhì)、肽、和肽模擬物、以及它們的衍生物，以及用于治療視網(wǎng)膜病癥和疾病的方法和用途。
相關(guān)申請(qǐng)信息
[0002]本申請(qǐng)要求2011年12月16日提交的、申請(qǐng)序列號(hào):61/576, 720的申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，并且該申請(qǐng)全文通過(guò)引用特別地并入此處。
【背景技術(shù)】
[0003]已經(jīng)觀察到，天然存在的肽、某些藥物、和天然物質(zhì)可以有不止一種觀察到的活性。例如，許多藥物有副作用，其可能出現(xiàn)與藥物的主要預(yù)期效果完全無(wú)關(guān)的效果以及有時(shí)出現(xiàn)對(duì)藥物的主要預(yù)期效果有害的效果。然而，并非所有的這些副作用都對(duì)正在服用這樣的藥物的患者的健康有害。
[0004]在一些情況下，對(duì)天然存在的物質(zhì)的效果的觀察表明，這樣的物質(zhì)可以有一些新功用，但是在活體內(nèi)該物質(zhì)的主要觀察到的效果可能優(yōu)于(overwhelm)任何觀察到的“新活性”。因此這樣的觀察留在體外或者離體探究(cur1sities)中，因?yàn)樗谕男禄钚?效果僅僅是活性物質(zhì)的副作用。 [0005]這樣的觀察的一個(gè)例子是發(fā)現(xiàn)，包括ANP、BNP, CNP、和尿擴(kuò)張素的利鈉肽(NPs)在人類中除了它們主要的心血管作用(例如，血容量、血壓和心臟功能的調(diào)節(jié))還具有生物活性，該生物活性包括代謝作用(例如，脂肪代謝的控制)和細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)(例如，抗增殖的)作用[Potter, et al.Endocrine Rev.27:47(2006)和其中的參考文獻(xiàn)；Vesely, D.L., Curr Heart Fail Rep.4(3): 147 (2007)]。例如，已經(jīng)報(bào)道了，某些 NPs 能殺死癌細(xì)胞或者無(wú)論在人類癌癥的培養(yǎng)物中還是在人類癌癥的動(dòng)物模型中都能減弱它們的生長(zhǎng)[Baldini,et al, Cell Death Diff., 11:S210-S212 (2004) ；Baldini,et al, MelanomaRes.16:501-507 (2006) ；Lelievre, et al.，J.B1l.Chem, 276(47):43668, (2001)；Levin, et al.,Am.J.Phys1l.30:R453-R457 (1991) ；Vesely, D.L., Eur J ClinInvest38(8):562(2008)]。
[0006]事實(shí)上，在NP類似物中已經(jīng)令人驚訝的發(fā)現(xiàn)了抗增殖作用，并且模仿它們的肽模擬物往往表現(xiàn)出NPRC-比活性。其它已知的分子[Baldini，eta I, Cell Death Diff.，11:S2 I 0-S2 I 2 (2004) ；Baldini, et al,MelanomaRes.16:501 (2006) ;Gower,et al., Mol.CelI B1chem, 293:103 (2006) ；Lelievre,etal., J.B1l.Chem, 276 (47):43668 (2001) ；Levin E.R.and Frank, H.J.L., Am.J.Phys1l.30:R453-R457 (1991)]與這一發(fā)現(xiàn)的相關(guān)性很好。此外，NPRC刺激調(diào)節(jié) MAP 激酶(MAPK)信號(hào)通路[Hashim, S.，Li, Y, Anand-Srivastava, M.B.，Am.J.Heart Cir.Phys1l, 29 1: H3 144-H3 153 (2006) ；Lelievre, et al., J.B1l.Chem, 276 (47): 43668 (2001)]。其它類型的MAPK抑制劑已被報(bào)道具有抗癌活性[Dhi I 1n, et al., 0ncogen26:3279 (2007)]。
[0007]研究者已經(jīng)注意到，NP共用共同的結(jié)構(gòu)特征，該共同的結(jié)構(gòu)特征可能對(duì)它們的受體結(jié)合特征和生物活性兩者都有利[He, X-L.et al, Science293:1657 (2001) ；Moffatt, etal, J.B1l.Chem.282:36454(2007) ；Potter et al.Endocrine Rev.27:47 (2006)]? 這些共同的結(jié)構(gòu)特征包括環(huán)結(jié)構(gòu)和共用的氨基酸序列、或基序(motif)。已經(jīng)提出的這種基序的不同版本包括 CFGXXXDRIXXXXGLGC[Potter, et al., Endocrine Rev.27:47(2006)]和CFGXXXDRIXXXXGLGCS [He, et al, Science293:1657 (2001)]。在每種情況下，兩個(gè) C 殘基都被二硫橋連接。由FGXX(L/M)DRI (G/S)組成的NP基序也已經(jīng)被提出[Moffatt，et al, J.B1l.Chem.282:36454(2007)] ο該基序也在其它內(nèi)源性肽中發(fā)現(xiàn)，諸如骨織素(osteocrine)和肌肉素(在后一種情況下，用L殘基替代I殘基)，它們擁有一些NP的代謝作用和細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用，但是缺少它們的心血管作用[Moffatt, et al, J.B1l.Chem.282:36454(2007)；Nishizawa, H., et al., J.B1l.Chem.279: 19391 (2004) ；Potter, et al., EndocrineRev.27:47(2006)和其中的參考文獻(xiàn)]。這種基序已經(jīng)被稱為利鈉肽基序(NM) [Moffatt, etal.，J.B1l.Chem.282:36454(2007)]。NP的環(huán)結(jié)構(gòu)看來(lái)是有必要的，以便結(jié)合NPRA和NPRB,以及為獲得心血管活性[Collinson, P.0., Bus.Brief.Eur.Card1l, 66 (2005)和其中的參考文獻(xiàn)；Potter, et al.Endocrine Rev.27:47 (2006)]，并且 R14 殘基(根據(jù)ANP編號(hào))被認(rèn)為是結(jié)合NPRC所必要的，該R14殘基是所有提出的基序的成分[He，etal, Science293:1657 (2001) ；Lanctot,et al,Patent US2007/0049251A1 ；Moffatt,etal, J.B1l.Chem.282:36454 (2007)]。
[0008]在NPs的情況下，三種特定類型的NP受體(NPR)被認(rèn)為調(diào)節(jié)NPs的行為。A型受體(NPRA)和B型受體(NPRB)被認(rèn)為涉及NP通信，因?yàn)樗鼈冇型暾镍B(niǎo)苷酸環(huán)化酶域[Potter, et al., Endocrine Rev.27:47 (2006)]。沒(méi)有鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶域的C型受體(NPRC)被認(rèn)為是主要的 清除受體(即，通過(guò)再攝取停用NP)，但也有人認(rèn)為它被連接到幾個(gè)細(xì)胞內(nèi)通信通路[Gower, et al., Mol.Cell B1chem, 293:103 (2006) ；Hashimet al.Am.J.Heart Cir.Phys1l,291:H3144-H3153(2006) ；Lelievre,et al.,J.B1l.Chem.，276:43668 (2001) ；Panay1tou et al.Proc.Brit.Pharm.Soc, 41:abs009P (2005)；Prins, et al, J.Bi0.Chem.271:14156 (1996) ；Segawa, et al., Naun.-Schmeid.Arch.Pharmacol.357:70 (1998)]。
[0009]每個(gè)NPs顯示與這些NP受體相互作用，但它們對(duì)NPRA、NPRB和NPRC的親和力各不相同。據(jù)推測(cè)，NP的相對(duì)抗癌效力與它們對(duì)NPRs的結(jié)合親和力有關(guān)[Vesely，D.L.，EurJ Clin Invest38:562 (2008)]。
[0010]視網(wǎng)膜處的新生血管生長(zhǎng)是可對(duì)視力產(chǎn)生極其有害的影響的幾種疾病的共同特征[Alexander, L.J.Primary Care of the Poster1r Segment.Third Edit1n, McGrawHill, New York, 2002,pp94_98 ；Kanski, J.J.Age-related macular degenerat1n.1n:Clinical ophthalmology:a systemic approach ；Butterworth, Heinemann, Elsevier, New York, 2007] 0這些疾病包括增生型糖尿病視網(wǎng)膜病變(I3DR)、視網(wǎng)膜靜脈閉塞、早產(chǎn)兒(prematuria)視網(wǎng)膜病變、“濕性”年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)、彈性假黃瘤、視神經(jīng)盤玻璃疣、極端近視和惡性近視變性。對(duì)于這些疾病中的前三者，新生血管是現(xiàn)有視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)的擴(kuò)張，對(duì)于其余的疾病，是脈絡(luò)膜血管生長(zhǎng)到視網(wǎng)膜(脈絡(luò)膜新生血管；CNV)的結(jié)果。
[0011]無(wú)論是來(lái)自視網(wǎng)膜還是來(lái)自脈絡(luò)膜循環(huán)的新的視網(wǎng)膜血管的增長(zhǎng)都是由血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)刺激的[Ciulla，T.A.，Rosenfeld，P.J.Curr OpinOphthalmol ；20:158 (2009) ；Spaide, R.Et1logy of late-age-related maculardisease.1n:Age related macular degenerat1n:A comprehensive textbook.1lfara
111,D.V., Liggett, P.E., Mieler, ff.F.et al.(eds) 2006 ；Lippincott, Williams andWilkins, Philadelphia, pp23_39]。脈絡(luò)膜血管侵入到視網(wǎng)膜也可能需要打破位于脈絡(luò)膜與包含脈絡(luò)膜內(nèi)膜和視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞層的視網(wǎng)膜神經(jīng)感覺(jué)層之間的屏障。VEGF也能促進(jìn)RPE細(xì)胞之間的連接的弱化[Ablonczy, Z., Crosson, C.E.Exp EyeRes85:762 (2007) ]。VEGF抑制劑對(duì)由AMD (“濕性”AMD)導(dǎo)致的CNV的治療是被認(rèn)可的并且有效的，而且對(duì)PDR的治療的早期結(jié)果已顯示出希望[Ciulla，T.A.，Rosenfeld, P.J.CurrOpin Ophthalmol ；20:158 (2009) ；Simo, R., Hernandez, C.Diabetologia51:1570(2008)]。
[0012]不訴諸或限制本發(fā)明于特定的機(jī)械的基本原理，本文所述的發(fā)明是針對(duì)利鈉肽(NPs)、類似物、其它肽及其衍生物的附加活性/作用。特別地，ANP、BNP和CNP以及其它結(jié)構(gòu)上相關(guān)的蛋白質(zhì)、肽、肽模擬物以及它們的衍生物對(duì)視網(wǎng)膜病癥和疾病的治療是有用的。NPRC-選擇性NP類似物和肽模擬物也能產(chǎn)生NPs的活性/作用[Baldini, et al,CelI Death Diff.,11:S210-S212 (2004) ;Baldini，et al, MelanomaRes.16:501 (2006) ;Gower,et al., Mol.CelIB1chem,293:103 (2006) ；Lelievre,etal., J.B1l.Chem, 276 (47):43668(2001) ；Levin E.R.and Frank, H.J.L., Am.J.Phys1l.30:R453-R457(1991)]。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明提供了對(duì)視網(wǎng)膜病癥和疾病的治療有用的化合物。本文的包括基于ANP、BNPXNP和其它結(jié)構(gòu)上相關(guān)的肽的、諸如ANP、BNP、CNP蛋白質(zhì)、肽和肽模擬物以及它們的衍生物和類似物之類的NPs的、并且在本文中統(tǒng)稱為“NP-化合物”或簡(jiǎn)稱為“化合物”的化合物任選地共享ANP、BNP、CNP和其它結(jié)構(gòu)上相關(guān)的肽之間共同的保守的基序。這樣的NP-化合物能可選地結(jié)合到NPRC，或者可選地調(diào)節(jié)NPRC活性。包含保守的基序但缺乏NPs或者NPRC的其它結(jié)構(gòu)單元的發(fā)明化合物可以選擇性的用于治療視網(wǎng)膜疾病和病癥，以及減少由其它結(jié)構(gòu)單元引起的一種或者多種副作用，例如，減少由其它NPs或者NPRs介導(dǎo)的心血管或者其它副作用的發(fā)生。
[0014]NP-化合物包括含有擁有抗細(xì)胞增殖活性的基序的小肽。這種基序能夠結(jié)合到C-型ANP受體，該C-型ANP受體也可以導(dǎo)致ERK活化的抑制?；诨钚缘慕M合，NP-化合物預(yù)期可有效地抑制活性和/或抑制VEGF的作用，這反過(guò)來(lái)將導(dǎo)致諸如與新血管生長(zhǎng)(例如，血管形成)相關(guān)的視網(wǎng)膜病變之類的視網(wǎng)膜病癥和疾病的治療。NP-化合物在有關(guān)給藥途徑方面相比于目前有效的VEGF抑制劑有優(yōu)勢(shì)。目前抑制劑是大肽，并且因此必須通過(guò)玻璃體內(nèi)注射給藥，這是能引起嚴(yán)重的并發(fā)癥的侵入性操作。諸如NP-化合物之類的較小的肽可能能被口服或局部給藥，從而減少或者避免了玻璃體內(nèi)注射的并發(fā)癥以允許更頻繁的施用，以及除了治療用途外還能起預(yù)防作用?！緦＠綀D】

【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1示出了培養(yǎng)基中的RPE細(xì)胞間的聯(lián)系的由VEGF誘導(dǎo)的、作為它們的跨上皮電阻的減小而測(cè)定的弱化。這種減小因ANP而衰減。
【具體實(shí)施方式】
[0016]本文公開(kāi)了基于諸如ANP、BNP、CNP和其它結(jié)構(gòu)上相關(guān)的肽(統(tǒng)稱為“NP-化合物”或簡(jiǎn)稱為“化合物”)之類的NPs的對(duì)視網(wǎng)膜病癥和疾病的治療有用的蛋白質(zhì)、肽和肽模擬物以及它們的衍生物。這樣的NP-化合物包括具有與抗細(xì)胞增殖活性相關(guān)的對(duì)視網(wǎng)膜病癥和疾病的治療有用的保守的基序的那些化合物。因此，本發(fā)明提供了包括具有該保守的基序的化合物的NP-化合物，以及這樣的化合物的包括例如用于治療視網(wǎng)膜病癥和疾病的方法在內(nèi)的方法和用途。
[0017]在各種實(shí)施方式中，NP-化合物包括保守的基序，即八個(gè)殘基的化合物，表示為(殘基1)-(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)-(殘基6)-(殘基7)-(殘基8)[式I]，其中每個(gè)殘基是連續(xù)的并且鍵合(共價(jià)或非共價(jià))到各自相鄰的殘基。保守的基序的主鏈可以是直鏈或者環(huán)狀鏈，諸如肽鏈或者肽模擬物鏈，一般為氨基酸序列，其可以由一種或者多種天然存在的氨基酸或者非天然氨基酸(包括d-或1-氨基酸，α、β或者Υ氨基酸，等等)組成。附加部分和/或殘留物可以附加到該保守的基序。如本文所列的側(cè)鏈可以附加到主鏈。因此，(殘基1)_(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)-(殘基6)-(殘基7)_(殘基8)可以有與該保守的基序的任何殘基相鄰的附加部分和/或殘留物(例如，氨基酸)，以及附加到該主鏈的側(cè)鏈。
[0018]末端殘基的缺失并沒(méi)有完全抑制活性，而是顯著地降低活性。例如，式I的殘基I和殘基8(兩末端)的缺失有望降低活性比例較多，而不完全抹殺活性。因此，保守的基序也包括含有以下保守的基序化合物、肽和蛋白質(zhì):(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)_(殘基6)-(殘基7)[式2];(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)-(殘基6)-(殘基7)_(殘基8)[式3];以及(殘基1)_(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)-(殘基6)-(殘基7)[式4]。
[0019]每個(gè)殘基(Res),此處指(分別如殘基1、殘基2、殘基3、殘基4、殘基5、殘基6、殘基7和殘基8)，按特異性增加的順序被進(jìn)一步限定如下文。顯而易見(jiàn)的是，保守的基序的某些位置允許有在結(jié)構(gòu)上的顯著變化，而其他位置需要被特別限定。
[0020]殘基I是氨基酸或者其模擬物(mimetic)，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子(linker)，具有選自疏水性的、非極性的以及非離子化的側(cè)鏈的側(cè)鏈，該側(cè)鏈選自少于12個(gè)碳原子的芐基、烷基、亞烴基、烯基、烷基芳基。
[0021]殘基2是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有側(cè)鏈，該側(cè)鏈?zhǔn)莾捎H性側(cè)鏈、親水性側(cè)鏈、兩性離子、甘氨酸(G)、賴氨酸(K)、精氨酸(R)、谷氨酰胺(Q)、和天冬酰胺(N)。
[0022]殘基3是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有少于5個(gè)單元長(zhǎng)的側(cè)鏈、和甘氨酸(G)、組氨酸(H)、天冬酰胺(N)、絲氨酸(S)、亮 氨酸(L)、或丙氨酸(A)，但任何環(huán)其大小可以是5或6個(gè)單元。
[0023]殘基4是5個(gè)或更少原子的連接子或者氨基酸、醚、酯、酮、烷基、亞烴基、酰胺連接子，具有包括從I到約12個(gè)碳原子并且其上具有選自氨基、羥基、酰胺基、羧基、芳基、雜芳基和任何天然存在的氨基酸的成分的側(cè)鏈。
[0024]殘基5是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有選自疏水性的、非極性的、非離子化的、脂肪族的側(cè)鏈的側(cè)鏈以及亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)、丙氨酸(A)、或甲硫氨酸(M)。
[0025]殘基6是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有極性側(cè)鏈，或者氨基酸:絲氨酸(S)、天冬氨酸(D)、精氨酸(R)和谷氨酸(E)。
[0026]殘基7是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有包括從I到約12個(gè)碳原子并且其上具有選自氨基、羥基、酰胺基、羧基、芳基、雜芳基和 任何天然存在的氨基酸的成分的側(cè)鏈。
[0027]殘基8是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有疏水性的、非極性的、和非離子化的側(cè)鏈，以及氨基酸:丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)，具有選自Cl至C12烷基、亞烴基和鏈烯基的側(cè)鏈。
[0028]如本文所限定的某些NP-化合物的保守基序包括“主鏈”，以及一個(gè)或多個(gè)附加到主鏈的“側(cè)鏈”。舉例而言，術(shù)語(yǔ)“主鏈”是由具有由α氨基酸構(gòu)成的聚酰胺主鏈的天然存在的氨基酸構(gòu)成的肽。在自然界中，這些往往是L-α-氨基酸。保守的基序和向其上附加的殘基可以包括一個(gè)或多個(gè)D-氨基酸和非(不)-天然氨基酸，并且這些D-類似物以及任何非(不)_天然氨基酸的主鏈被包含在主鏈的定義內(nèi)。此外，氨基酸或Y氨基酸、δ氨基酸或ε氨基酸類似物也被包含在主鏈的定義中。由于該基序包括肽模擬物、其它部分以模仿聚酰胺主鏈，因此例如，由于例如提高的對(duì)酶促降解的抗性、提高的循環(huán)半衰期、提高的生物利用度、提高的療效、延長(zhǎng)的作用時(shí)間，等等，這種模擬物能賦予改善的生物穩(wěn)定性和生物系統(tǒng)內(nèi)(例如，患者)更長(zhǎng)的半衰期。當(dāng)提到在一個(gè)或多個(gè)殘基上的肽模擬物時(shí)，“主鏈”包括，例如:醚、酯、酮、烷基、亞烴基或酰胺連接子，優(yōu)選為5個(gè)或更少的原子，有附加到其上的“側(cè)鏈”。
[0029]舉例而言，在天然存在的肽中，術(shù)語(yǔ)“側(cè)鏈”是由連接到L-聚酰胺主鏈上的基團(tuán)構(gòu)成，文獻(xiàn)中提到的20“側(cè)鏈”是眾所周知的。此外，不常見(jiàn)的側(cè)鏈存在于自然界中，其中的一些是天然側(cè)鏈的衍生物-這些被包含在“側(cè)鏈”的定義中。不論側(cè)鏈?zhǔn)且訪-構(gòu)型或D-構(gòu)型的形式連接到主鏈，或者不論它們以α-氨基酸、β-氨基酸、Y氨基酸、δ氨基酸或ε氨基酸的形式位于特定的位置是無(wú)關(guān)緊要的，因?yàn)樗械亩及趥?cè)鏈的定義中。術(shù)語(yǔ)側(cè)鏈包括體現(xiàn)在天然存在的氣基酸和它彳丨3的變體中的功能的總稱，因此疏基、諷基、竣基、氣基、酰氨基、羥基、烷基、烷芳基(或雜芳基)、芳基或雜芳基基團(tuán)都包含在這個(gè)定義中。例如，示例性的疏水性側(cè)鏈包括但不限于小于12個(gè)碳原子的芐基，烷基，亞烴基，烯基，烷基芳基。本領(lǐng)域技術(shù)人員鑒于說(shuō)明書(shū)理解該術(shù)語(yǔ)“側(cè)鏈”的廣度和多樣性。當(dāng)涉及到肽模擬物時(shí)，已經(jīng)將如上所定義的作為側(cè)鏈的1-3個(gè)基團(tuán)附到主鏈上。通常每個(gè)殘基上存在多達(dá)2個(gè)側(cè)鏈，并且更通常存在I個(gè)側(cè)鏈(例如，殘基1、殘基2……等)。
[0030]為了說(shuō)明保守的基序，使用已知的氨基酸的寡肽，其舉例說(shuō)明而非限制本發(fā)明，而且為了說(shuō)明非限制性的實(shí)施方式。例如，包含約8個(gè)氨基酸的寡肽形成保守的抗細(xì)胞增殖基序。這樣的基序可以通過(guò)增加的長(zhǎng)度(例如，9、10、11、12、13、14、15、16、17、8、19、20等，
或更多個(gè)殘基)顯示出增加的活性。當(dāng)然，包括在序列的一個(gè)或多個(gè)位置的非天然氨基酸、衍生物和類似物的肽模擬物，無(wú)論是在保守的基序的內(nèi)部或在保守的基序的外部或附加到保守的基序上，都被包含。
[0031]在特定實(shí)施方式中，ANP-相關(guān)肽化合物具有的保守的基序表示為:(殘基1)_(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)-(殘基6)-(殘基7)-(殘基8)，其中殘基I到殘基8中的每一個(gè)定義為:
[0032]殘基1-疏水性的，非極性的，并且非離子化的側(cè)鏈，例如包括苯丙氨酸(F)、丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)的氨基酸。示例性的側(cè)鏈包括烷基，亞烴基，烯基，烷基芳基，和類似物，通常小于12個(gè)碳原子，更通常的是C1-C5烷基或其上有芳基取代基的C1-C3烷基。
[0033]殘基2-是兩親性的或親水性的側(cè)鏈，其可以包括兩性離子，例如包括甘氨酸(G)、賴氨酸(K)、精氨酸(R)、谷氨酰胺(Q)、天冬酰胺(N)的氨基酸。
[0034]殘基3是小尺寸的氨基酸側(cè)鏈，通常為少于5個(gè)單元長(zhǎng)的鏈，如果是烷基更優(yōu)選Cl至C3的長(zhǎng)度，更優(yōu)選為C0-C2，例如包括甘氨酸(G)、組氨酸(H)、天冬酰胺(N)、絲氨酸(S)、亮氨酸(L)、丙氨酸(A)的氨基酸，但任何環(huán)其大小可以是5或6個(gè)單元。
[0035]殘基4-是大約氨基酸大小的連接子，具有可以從C1-C12變化的側(cè)鏈，并具有如通過(guò)在20種天然存在的氨基酸中發(fā)現(xiàn)的多樣性所代表的任何成分。因此其上有與任何氨基酸類似大小的取代基的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或酰胺連接子可能是合適的。 [0036]殘基5-是疏水性的、非極性的、非離子化的、脂肪族的、支鏈的，例如包括亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)、丙氨酸(A)、或甲硫氨酸(M)的氨基酸。
[0037]殘基6-是極性的側(cè)鏈，例如絲氨酸(S)、天門冬氨酸(D)、精氨酸(R)、和谷氨酸(E)這樣的氨基酸。
[0038]殘基7-是約氨基酸大小的連接子，具有可以從C1-C12變化的側(cè)鏈，并具有如通過(guò)在20種天然存在的氨基酸中發(fā)現(xiàn)的多樣性所表征的任何成分。因此其上有與任何氨基酸類似大小的取代基的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或酰胺連接子可能是合適的。
[0039]殘基8-是疏水性的、非極性的、和非離子化的側(cè)鏈，例如包括丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)的氨基酸。示例性的側(cè)鏈將是烷基、亞烴基、烯基、和類似物，通常小于12個(gè)碳原子，更通常的是C1-C5烷基或其上有芳基取代基的C1-C3烷基。
[0040]可以基于如下所選及所示的大小、極性、酸性或堿性、和疏水性，利用已知結(jié)構(gòu)和已知參數(shù)來(lái)選擇合適的側(cè)鏈:
【權(quán)利要求】
1.一種治療需要治療的受試者的視網(wǎng)膜病癥或疾病的方法，其包括向受試者施用化合物，其中所述化合物包含保守的基序:(殘基1)-(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)_(殘基6)-(殘基7)-(殘基8)，其中: 殘基I是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有選自疏水性的、非極性以及非離子化的側(cè)鏈的側(cè)鏈，該側(cè)鏈選自少于12個(gè)碳原子的芐基、烷基、亞烴基、烯基、烷基芳基； 殘基2是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有側(cè)鏈，該側(cè)鏈?zhǔn)莾捎H性側(cè)鏈、親水性側(cè)鏈、兩性離子、甘氨酸(G)、賴氨酸(K)、精氨酸(R)、谷氨酰胺(Q)、和天冬酰胺(N)； 殘基3是氨基酸或者其模擬 物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有少于5個(gè)單元長(zhǎng)的側(cè)鏈、和甘氨酸(G)、組氨酸(H)、天冬酰胺(N)、絲氨酸⑶、亮氨酸(L)、或丙氨酸(A)，但任何環(huán)其大小能為5或6個(gè)單元； 殘基4是5個(gè)或更少原子的連接子或者氨基酸、醚、酯、酮、烷基、亞烴基、酰胺連接子，具有包括從I到約12個(gè)碳原子并且其上具有選自氨基、羥基、酰胺基、羧基、芳基、雜芳基和任何天然存在的20種氨基酸中的成分的側(cè)鏈； 殘基5是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有選自疏水性的、非極性的、非離子化的、脂肪族的側(cè)鏈的側(cè)鏈以及亮氨酸(U、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)、丙氨酸(A)、或甲硫氨酸(M)； 殘基6是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有極性側(cè)鏈，或者氨基酸:絲氨酸(S)、天冬氨酸(D)、精氨酸(R)和谷氨酸(E)； 殘基7是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有包括從I到約12個(gè)碳原子并且其上具有選自氨基、羥基、酰胺基、羧基、芳基、雜芳基和任何天然存在的20種氨基酸中的成分的側(cè)鏈； 殘基8是氨基酸或者其模擬物，其中主鏈選自5個(gè)或者更少原子的醚、酯、酮、烷基、亞烴基或者酰胺連接子，具有疏水性的、非極性的、和非離子化的側(cè)鏈，以及氨基酸:丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)，具有選自Cl至C12烷基、亞烴基和鏈烯基的側(cè)鏈；以及 其中殘基1、殘基2、殘基3、殘基4、殘基5、殘基6、殘基7和殘基8中的每Iv都共價(jià)地或非共價(jià)地結(jié)合到各自相鄰的殘基，并且其中所述化合物具有小于約30個(gè)殘基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的方法，其中: 殘基1-是選自苯丙氨酸(F)、丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、和纈氨酸(V)； 殘基2-是選自甘氨酸(G)、賴氨酸(K)、精氨酸(R)、谷氨酰胺(Q)、和天冬酰胺(N)； 殘基3是選自甘氨酸(G)、組氨酸(H)、天冬酰胺(N)、絲氨酸(S)、亮氨酸(L)、和丙氨酸(A)； 殘基4-是選自任意氨基酸； 殘基5-是選自亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)、丙氨酸(A)、和甲硫氨酸(M)； 殘基6-是選自絲氨酸(S)、天冬氨酸(D)、精氨酸(R)、和谷氨酸(E)； 殘基7-是選自任意氨基酸；以及殘基8是選自丙氨酸(A)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、和纈氨酸(V)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的方法，其中: 殘基1-是選自苯丙氨酸(F)、丙氨酸(A)、和亮氨酸(L)； 殘基2-是選自甘氨酸(G)、和賴氨酸⑷； 殘基3是選自甘氨酸(G)、天冬酰胺(N)、絲氨酸(S)、亮氨酸(L)、和丙氨酸(A)； 殘基4-是選自天然氨基酸； 殘基5-是選自亮氨酸(L)和甲硫氨酸(M)； 殘基6-是選自絲氨酸(S)、天冬氨酸(D)、和精氨酸(R)； 殘基7-是選自天然氨基酸；以及 殘基8是選自亮氨酸(L)和異亮氨酸(I)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3中所述的方法，其中:殘基4-是選自精氨酸(R)、賴氨酸(K)、丙氨酸(A)、和亮氨酸(L);和/或殘基7-是選自精氨酸(R)、脯氨酸(P)、組氨酸(H)、和丙氨酸(A)0
5.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物包含:FGGRMDR1、FGLKLDR1、AGAALSPL、FKNLLDHL、LKSKLRAL、FGKRMDR1、FGGRIDR1、AGAALSPL、或 AGKALSPL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的方法，其中所述化合物包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、856、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、I16、I17、I18、I19、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141 或 142 個(gè)氨基酸殘基，所述氨基酸殘基包括所述(殘基I)-(殘基2)-(殘基3)-(殘基4)-(殘基5)-(殘基6)-(殘基7)-(殘基8)基序，或者共價(jià)地或非共價(jià)地結(jié)合到殘基1、殘基2、殘基3、殘基4、殘基5、殘基6、殘基7或殘基8的位置中的任何位置。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有小于約150個(gè)殘基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有小于約140個(gè)殘基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有介于約10個(gè)與150個(gè)之間的殘基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物具有介于約10個(gè)與125個(gè)之間的殘基。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物具有介于約10個(gè)與100個(gè)之間的殘基。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的方 法，其中所述化合物的殘基1、殘基2、殘基3、殘基4、殘基5、殘基6、殘基7或殘基8的位置中的任何位置是L-氨基酸、D-氨基酸、非天然存在的氨基酸、或氨基酸衍生物或類似物。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述視網(wǎng)膜病癥或疾病包括黃斑變性、增生型糖尿病視網(wǎng)膜病變(TOR)、視網(wǎng)膜靜脈閉塞、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變、彈性假黃瘤、視神經(jīng)盤玻璃疣、極端近視或惡性近視變性。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述黃斑變性包括“濕性”年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述視網(wǎng)膜病癥或疾病是由脈絡(luò)膜血管擴(kuò)展或生長(zhǎng)進(jìn)入視網(wǎng)膜引起的或與脈絡(luò)膜血管擴(kuò)展或生長(zhǎng)進(jìn)入視網(wǎng)膜相關(guān)聯(lián)。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述視網(wǎng)膜病癥或疾病是由現(xiàn)有的視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)擴(kuò)展或脈絡(luò)膜血管生長(zhǎng)進(jìn)入視網(wǎng)膜(脈絡(luò)膜新血管形成；CNV)引起的或與現(xiàn)有的視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)擴(kuò)展或脈絡(luò)膜血管生長(zhǎng)進(jìn)入視網(wǎng)膜(脈絡(luò)膜新血管形成；CNV)相關(guān)聯(lián)。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述視網(wǎng)膜病癥或疾病逐步惡化。
18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述視網(wǎng)膜病癥或疾病處于緩解期。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物施用于受試者的局部、區(qū)域、或全身。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物施用于受試者的一只眼睛或雙眼。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物通過(guò)注射、輸注、口服或局部給藥。
22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物是通過(guò)玻璃體內(nèi)注射施用于受試者。
23.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述治療降低或者抑制視網(wǎng)膜病癥或疾病的一種或多種癥狀的嚴(yán)重程度或持續(xù)時(shí)間，或減少或抑制視網(wǎng)膜病癥或疾病的進(jìn)展或惡化。
24.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述治療降低或者抑制脈絡(luò)膜血管擴(kuò)展或生長(zhǎng)進(jìn)入受試者的視網(wǎng)膜。
25.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述受試者是視網(wǎng)膜病癥的治療或療法的候選者、正在經(jīng)歷視網(wǎng)膜病癥的治療或療法的候選者或者已經(jīng)經(jīng)歷過(guò)視網(wǎng)膜病癥的治療或療法的候選者。
26.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括對(duì)所述受試者施用血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)拮抗劑或抑制劑至所述受試者。
27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述化合物在施用所述血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)拮抗劑或抑制劑之前施用、與所述血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)拮抗劑或抑制劑以混合的方式基本上同時(shí)施用、或在施用所述血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)拮抗劑或抑制劑之后施用。
28.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述受試者是哺乳動(dòng)物。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中所述受試者是人。
【文檔編號(hào)】A61P27/10GK104039341SQ201280062142
【公開(kāi)日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2012年12月17日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月16日
【發(fā)明者】邁克爾·科茲洛夫斯基 申請(qǐng)人:卡樂(lè)斯治療公司