用于治療癌癥的聯(lián)合脂質(zhì)體組合物的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供使用多組分脂質(zhì)體系統(tǒng)向受試者遞送治療劑的方法。該方法包括給予含有活性劑的治療脂質(zhì)體，接著給予誘導(dǎo)藥物從治療脂質(zhì)體釋放的攻擊脂質(zhì)體。
【專(zhuān)利說(shuō)明】用于治療癌癥的聯(lián)合脂質(zhì)體組合物
[0001]相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002]本申請(qǐng)要求2011年10月31日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/553786的優(yōu)先權(quán)，該申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。
[0003]關(guān)于聯(lián)邦政府資助的研究與開(kāi)發(fā)所作出的發(fā)明其權(quán)利聲明
[0004]不適用。
[0005]序列表、表格或計(jì)算機(jī)程序列表光盤(pán)附件的引用
[0006]不適用。
【背景技術(shù)】
[0007]脂質(zhì)體可用作有效的藥物遞送媒介物，并已經(jīng)開(kāi)發(fā)了用于治療疾病包括癌癥的市售脂質(zhì)體產(chǎn)品(Barenholz, Y.，Curr.0pin.1n Colloid&InterfaceSc1.6(1):66-77(2001))。脂質(zhì)體是一種囊泡，包括至少一個(gè)使內(nèi)部水相與外部水環(huán)境相分離的磷脂雙分子層。脂質(zhì)體能夠同時(shí)攜帶在脂質(zhì)雙層的疏水部分(cargo)和/或在水性核心的親水部分。脂質(zhì)體的大小，通常是在50至250納米范圍內(nèi)，這特別適合于化療藥物通過(guò)在癌組織中增強(qiáng)的滲透性和保 留性而向?qū)嶓w瘤部位靶向遞送(EPR效應(yīng))(Maeda，H.，etal., J.Controlled Release.65 (1-2): 271 (2000))。載藥脂質(zhì)體通過(guò) EPR 而在腫瘤部位的優(yōu)先積累提供一種使藥物局部集中、改善藥物效能并減少對(duì)正常的細(xì)胞或組織的藥物毒性的方法。例如，DoxiI?,即一種FDA批準(zhǔn)的含多柔比星的脂質(zhì)體產(chǎn)品，其與游離藥物相比已顯不出具有降低的毒性(Martin, F.J., et al., “Clinical pharmacology and anti tumorefficacy of D0XIL.”Medical Applications of Liposomes.Ed.D.D.Lasic.Amsterdam:Elsevier,1998, pp635_688)。
[0008]然而，上述脂質(zhì)體藥物遞送載體的益處也是受以下缺陷限制的，包括脂質(zhì)體代謝和由體內(nèi)的排泄，以及由于全身分布和遞送所引起的一定程度的固有毒性和副作用。特別地，優(yōu)化脂質(zhì)體藥物的釋放速率在體內(nèi)半衰期和釋放之間的平衡存在難題。一般情況下，易漏的脂質(zhì)體使被封裝的藥物更容易得到，但會(huì)引起類(lèi)似于游離藥物的毒性風(fēng)險(xiǎn)。另一方面，少漏的脂質(zhì)體可以減少毒性，但它們可能無(wú)法提供針對(duì)如在順鉬制劑(SP1-077)中所示的效能所希望的藥物釋放(Kim, E.S.et al.，Lung Cancer.34 (3): 427-432 (2001))。因此，平衡效能和安全性在脂質(zhì)體藥物產(chǎn)品的研發(fā)和給藥中構(gòu)成了顯著的挑戰(zhàn)。
[0009]因此，有必要制定配方和遞送方法以克服基于單一脂質(zhì)體制劑治療的局限性。本發(fā)明解決上述和其它需求，提供了改善藥物安全性和效能的方法。
[0010]發(fā)明概述
[0011]一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種遞送治療劑至受試者的方法，所述方法包括:
[0012]a)向受試者給予包含治療劑的脂質(zhì)體；和
[0013]b)向受試者給予包含觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆粒；
[0014]由此，相比于未給予脂質(zhì)納米顆粒時(shí)所述治療劑從脂質(zhì)體的釋放，在給予脂質(zhì)納米顆粒后所述治療劑從脂質(zhì)體的釋放增加。[0015]另一方面，本發(fā)明提供用于遞送治療劑至受試者的試劑盒，所述試劑盒包括:
[0016]a)第一組合物，包含含有治療劑的脂質(zhì)體；和
[0017]b)第二組合物，包含含有非離子型觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米粒；
[0018]其中，在向受試者給藥前，所述第一和第二組合物分開(kāi)存儲(chǔ)。
[0019]附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明
[0020]圖1顯示通過(guò)攻擊脂質(zhì)體4460-075在(a) pH = 5.0及(b)pH = 7.4觸發(fā)的奧沙利鉬從治療脂質(zhì)體的釋放。
[0021]圖2顯示通過(guò)不同量的攻擊脂質(zhì)體4460-075在(a)pH = 7.4及(b)pH = 5.0觸發(fā)的順鉬從治療脂質(zhì)體的釋放。
[0022]圖3顯示通過(guò)在pH = 7.4加入攻擊脂質(zhì)體B部分(4460-075)，5_羧基熒光素(5-CF)從治療脂質(zhì)體A部分(4460-090)的釋放。
[0023]圖4顯示通過(guò)混合脂質(zhì)體B部分(4460-075)，5-CF從治療脂質(zhì)體A部分(4460-077)的釋放。 [0024]圖5顯示通過(guò)在pH = 7.4混合脂質(zhì)體B部分(4460-075)，5-CF從脂質(zhì)A部分(4386-143)的釋放。
[0025]圖6顯示通過(guò)在pH = 7.4混合脂質(zhì)體B部分(4460-084)，5-CF從脂質(zhì)A部分(4460-090)的釋放。
[0026]圖7顯示通過(guò)在pH = 7.4混合脂質(zhì)體B部分(4460-084)，5-CF從脂質(zhì)A部分(4460-077)的釋放。
[0027]圖8顯示通過(guò)在pH = 7.4混合脂質(zhì)體B部分(4384-086)，5-CF從脂質(zhì)A部分(4460-090)的釋放。
[0028]圖9顯示通過(guò)在pH = 7.4混合脂質(zhì)體B部分(4384-086)，5-CF從脂質(zhì)A部分(4460-077)的釋放。
[0029]圖10顯示通過(guò)在pH = 5.0混合脂質(zhì)體B部分(4460-075)，5-CF從脂質(zhì)A部分(4460-090)的釋放。
[0030]圖11顯示通過(guò)在pH = 7.4和pH = 5.0加入攻擊脂質(zhì)體4460-104，奧沙利鉬從脂質(zhì)體(NLIC0V003F-02)的釋放。
[0031 ] 圖12顯示通過(guò)在(a) pH = 5.0及(b) pH = 7.4加入攻擊脂質(zhì)體(4460-104)，順鉬從治療脂質(zhì)體(NLI4481101)的釋放。
[0032]發(fā)明詳細(xì)說(shuō)明
[0033]1.概述
[0034]本發(fā)明涉及多種脂質(zhì)組合物用于向受試者遞送藥物或其它藥劑的用途。本發(fā)明的方法包括給予分開(kāi)的脂質(zhì)成分，其包含治療脂質(zhì)體和攻擊劑。治療脂質(zhì)體是一種含有治療劑和/或其它藥物(例如，診斷劑)的脂質(zhì)體成分。攻擊劑是包含可以增加藥物從治療脂質(zhì)體釋放的觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆粒(脂質(zhì)體、膠束或它們的混合物)。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“攻擊劑”和“含有觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆?！笨苫Q使用。在一些實(shí)施方案中，所述治療脂質(zhì)體和攻擊劑統(tǒng)稱(chēng)為“dualsome”。這兩種組分可分開(kāi)存儲(chǔ)，并且為了實(shí)現(xiàn)治療脂質(zhì)體藥物的穩(wěn)定遞送，攻擊劑可以在治療脂質(zhì)體給藥后給予。本發(fā)明的方法包括兩個(gè)步驟:1)給予治療脂質(zhì)體，和2)給予攻擊劑，其相對(duì)于在沒(méi)有攻擊劑的情況下藥物從治療脂質(zhì)體的釋放，可觸發(fā)藥物從治療脂質(zhì)體的釋放增加。本發(fā)明的方法可以防止藥物在到達(dá)受試者的靶點(diǎn)部位前從治療脂質(zhì)體提前釋放。該方法克服了目前單一脂質(zhì)體制劑用于藥物遞送的窘境，從而改善治療的效能和安全性，以及患者依從性。
[0035]I1.定義
[0036]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“遞送”是指使用本發(fā)明的方法治療劑傳送到受試者。遞送可以將其局部集中到受試者的特定位置中，如組織、器官或特定類(lèi)型的細(xì)胞。
[0037]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“治療劑”是指一種化合物或分子，其以有效量存在時(shí)，對(duì)有需要的受試者產(chǎn)生期望的治療效果。本發(fā)明涵蓋了各種治療劑及其與脂質(zhì)體組合物的結(jié)合使用，如本文進(jìn)一步所述。
[0038]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“受試者”是指在生命的任何階段的任何哺乳動(dòng)物，特別是人類(lèi)。
[0039]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“給予”是指給予本發(fā)明的脂質(zhì)體組合物的方法。本發(fā)明的脂質(zhì)體組合物可以以各種不同的方式給予，包括局部、腸胃外、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、肌內(nèi)、結(jié)腸、直腸或腹膜內(nèi)。該脂質(zhì)體組合物也可作為組合物或制劑的一部分給予。
[0040]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)體”涵蓋由脂質(zhì)雙層包圍的任何囊泡。術(shù)語(yǔ)脂質(zhì)體包括單層脂質(zhì)體，它是由單一的脂質(zhì)雙層構(gòu)成，且直徑通常在約20至約400nm范圍內(nèi)。脂質(zhì)體也可以是多層的，它的直徑通常在1-10 μ m范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，脂質(zhì)體可包括多層脂質(zhì)體(MLV)、大 單層脂質(zhì)體(LUV)和小單層脂質(zhì)體(SUV)。
[0041]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“膠束”是指兩親性分子如脂類(lèi)的聚集體，其聚集從而形成具有疏水性?xún)?nèi)部和親水性外部的顆粒。膠束一般是球形聚集體，直徑小于100納米，盡管各種膠束直徑和不同的膠束形狀如盤(pán)狀膠束是本領(lǐng)域已知的。
[0042]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“非離子型觸發(fā)劑”是指缺乏帶電官能團(tuán)的物質(zhì)，包括陰離子官能團(tuán)和陽(yáng)離子官能團(tuán)，其在給予至受試者時(shí)，引起藥物從本發(fā)明治療脂質(zhì)體中的釋放的增加。非離子型觸發(fā)劑的例子包括TPGS和聚氧乙烯40硬脂酸酯。
[0043]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“累積”指的是在給藥后在受試者中給定部位累積的脂質(zhì)體不再在受試者內(nèi)全身循環(huán)。在某些情況下，累積可能是由于在靶點(diǎn)部位通過(guò)包含識(shí)別生物標(biāo)志物的配體的脂質(zhì)體而與特定生物標(biāo)志物結(jié)合。在某些情況下，脂質(zhì)體累積可能是由于某些組織如癌組織的滲透和保留特性的增強(qiáng)。脂質(zhì)體累積可通過(guò)任何合適的手段評(píng)估，例如測(cè)試受試者的代謝區(qū)分析或非侵入性技術(shù)，例如單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像(SPECT)、正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或核磁共振成像(NMR/MRI)。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以規(guī)劃特定受試者的脂質(zhì)體給藥時(shí)間，以允許在靶部位足夠的積累而不用在受試者體內(nèi)直接測(cè)量累積。
[0044]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“靶點(diǎn)部位”是指期望脂質(zhì)體累積和活性劑遞送的部位。在某些情況下，靶點(diǎn)部位可以是特定的組織或細(xì)胞，并且可以與特定疾病狀態(tài)相關(guān)。
[0045]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“接觸”是指第一脂質(zhì)體與第二脂質(zhì)體的相互作用由此破壞第一脂質(zhì)體或以其他方式影響包封劑從第一脂質(zhì)體釋放。
[0046]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“釋放”是指脂質(zhì)體中的活性劑從脂質(zhì)體芯或脂質(zhì)雙層到外部環(huán)境中的移動(dòng)。
[0047]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)”是指脂質(zhì)分子，它們可以包括脂肪、蠟、類(lèi)固醇、膽固醇、脂溶性維生素、甘油單酯、甘油二酯、磷脂、鞘脂、糖脂、陽(yáng)離子或陰離子脂質(zhì)、衍生脂質(zhì)等，如下面詳細(xì)描述。脂類(lèi)可以形成膠束、單層和雙層膜。脂類(lèi)可以自組裝成脂質(zhì)體。[0048]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“摩爾百分?jǐn)?shù)”和“摩爾％ ”指的是脂質(zhì)體中特定脂質(zhì)或表面活性劑成分的摩爾數(shù)除以所有的脂質(zhì)或表面活性劑成分的總摩爾數(shù)。除非另有明確規(guī)定，當(dāng)計(jì)算脂質(zhì)體的脂質(zhì)或表面活性劑組分的摩爾％時(shí)，不包含活性劑、稀釋劑或其它組分的量。
[0049]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“試劑盒”是指使用本發(fā)明的方法所必需的兩個(gè)或多個(gè)組分的組合。試劑盒組分可以包括但不限于，本發(fā)明的脂質(zhì)體、試劑、緩沖液、容器和/或裝置。
[0050]如本文所用，術(shù)語(yǔ)“分開(kāi)存儲(chǔ)”指的是脂質(zhì)體存儲(chǔ)的方式，其防止一種脂質(zhì)體接觸另一種脂質(zhì)體。
[0051]II1.本發(fā)明的實(shí)施方案
[0052]在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種遞送治療劑至受試者的方法。該方法包括:a)向受試者給予包含治療劑的脂質(zhì)體；和b)向受試者給予含有非離子型觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆粒；由此，相比未給予觸發(fā)劑的情況下所述治療劑從脂質(zhì)體的釋放，在觸發(fā)劑給藥后所述治療劑從脂質(zhì)體中的釋放增加。包含治療劑的脂質(zhì)體被稱(chēng)為“治療脂質(zhì)體”。
[0053]本發(fā)明的脂質(zhì)體包括由至少一個(gè)脂質(zhì)雙層包圍的含水室。當(dāng)包括親水頭部的脂質(zhì)分散在水中時(shí)，它們可以自發(fā)地形成被稱(chēng)為片層的雙層膜。片層是由兩個(gè)脂質(zhì)分子單層片組成，它們的非極性(疏水性)表面彼此面對(duì)并且它們的極性(親水性)表面朝向所述水性介質(zhì)中。術(shù)語(yǔ)脂質(zhì)體包括由單一脂質(zhì)雙層組成的單層脂質(zhì)體，且一般具有在約20至約400nm、約50至約300nm或約100至200nm的直徑。脂質(zhì)體也可以是多層的,它的直徑通常在1-10μπι，含有從2到數(shù)百與水相層交替的同心脂質(zhì)雙層。在一些實(shí)施方案中，脂質(zhì)體可包括多層脂質(zhì)體(M LV)、大單層脂質(zhì)體(LUV)和小單層脂質(zhì)體(SUV)。脂質(zhì)體的脂質(zhì)可以是陽(yáng)離子型、兩性離子型、中性或陰離子的或它們的任意混合物。
[0054]脂質(zhì)納米顆粒構(gòu)成了本發(fā)明方法中的“攻擊劑”。在一些實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)納米顆粒選自脂質(zhì)體、膠束或它們的混合物。所述納米顆粒包含一種非離子型觸發(fā)劑，它可以是一種非離子型表面活性劑。適用于本發(fā)明方法的非表面活性劑實(shí)例包括但不限于，乙氧基化的烷基酚、乙氧基化脂肪酯、山梨聚糖衍生物、生育酚衍生物等。
[0055]可以在任何足以增加所述治療劑從所述治療脂質(zhì)體釋放的時(shí)間向受試者給予攻擊劑。在一些實(shí)施方案中，在治療脂質(zhì)體給藥之后向受試者給予攻擊劑。攻擊劑的給予可在例如治療脂質(zhì)體給藥后幾分鐘或幾小時(shí)后發(fā)生。在一些實(shí)施方案中，在治療脂質(zhì)體已經(jīng)在受試者體內(nèi)期望靶點(diǎn)部位累積后(通常在給藥后約72小時(shí)內(nèi))向受試者給予攻擊劑。月旨質(zhì)體在靶點(diǎn)部位的累積通過(guò)任何合適的手段評(píng)估，例如測(cè)試受試者代謝區(qū)分析或者非侵入性技術(shù)，例如單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像(SPECT)、正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或核磁共振成像(NMR/MRI)。如下所述診斷劑，例如，可以針對(duì)滲入治療脂質(zhì)體進(jìn)行選擇從而對(duì)脂質(zhì)體累積進(jìn)行評(píng)估。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到可對(duì)特定受試者的給藥進(jìn)行定時(shí)，以允許治療脂質(zhì)體在靶部位足夠的積累，而不用在受試者體內(nèi)直接測(cè)量累積。
[0056]在一些實(shí)施方案中，在治療脂質(zhì)體接觸攻擊劑后治療劑被誘導(dǎo)釋放。相比不給予攻擊劑，給予任意量的攻擊劑可增加治療劑從脂質(zhì)體中的釋放量。在一些實(shí)施方案中，相比給予脂質(zhì)體而不給予攻擊劑，給予攻擊劑使治療劑從脂質(zhì)體中的釋放增加至少3倍。在一些實(shí)施方案中，相比給予脂質(zhì)體而不給予攻擊劑，給予攻擊劑使治療劑從脂質(zhì)體中的釋放增加至少10倍。在一些實(shí)施方案中，相比給予脂質(zhì)體而不給予攻擊劑，給予攻擊劑使治療劑從脂質(zhì)體中的釋放增加至少25倍。[0057]在本發(fā)明中，受試者可以是任何哺乳動(dòng)物。在一些實(shí)施方案中，受試者是人。在一些實(shí)施方案中，脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆粒通過(guò)腹膜內(nèi)注射遞送。本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到，其他給予方式可以在本發(fā)明中使用。
[0058]脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆粒
[0059]本發(fā)明的脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆粒可以包含任何合適的脂質(zhì)，包括陽(yáng)離子脂質(zhì)、兩性離子脂質(zhì)、中性脂質(zhì)或如上所述的陰離子脂質(zhì)。合適的脂質(zhì)可包括脂肪、蠟、類(lèi)固醇、膽固醇、脂溶性維生素、甘油單酯、甘油二酯、磷脂、鞘脂、糖脂、陽(yáng)離子或陰離子脂質(zhì)、衍生脂質(zhì)等等。[0060]合適的磷脂包括但不限于磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酸(PA)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰絲氨酸(PS)以及磷脂酰肌醇(PI)、二肉豆蘧酰磷脂酰膽堿(DMPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、二油酰磷脂酰膽堿(DOPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二肉豆蘧酰磷脂酰甘油(DMPG)、二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、二油酰磷脂酰甘油(DOPG)、二棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二肉豆蘧酰磷脂酰絲氨酸(DMPS)、二硬脂酰磷脂酰絲氨酸(DSPS)、二油酰磷脂酰絲氨酸(DOPS)、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸(DPPS)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿(POPC)、棕櫚酰油酰-磷脂酰乙醇胺(POPE)和二油?；字Ｒ掖及?-(N-馬來(lái)酰亞胺甲基)-環(huán)己烷-1-羧酸酯(DOPE-MAL)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二肉豆蘧酰基磷酸乙醇胺(DMPE)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、16-0_單甲基PE、16-0- 二甲基PE、18-1-反式PE、1-硬脂酰_2_油?；?磷脂酰乙醇胺(SOPE)、1,2-二反油?；?didaidoyl)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(反式DOPE)和心磷脂。脂質(zhì)提取物，如卵PC、心臟提取液、腦提取物、肝臟提取物和大豆PC，也可用于本發(fā)明中。在一些實(shí)施方案中，大豆PC可包括Hydro大豆PC (HSPC)。在某些實(shí)施方案中，脂質(zhì)可以包括衍生化的脂質(zhì)，例如聚乙二醇化脂質(zhì)。衍生化的脂質(zhì)可以包括，例如，DSPE-PEG2000、膽固醇-PEG2000、DSPE-聚甘油或本領(lǐng)域公知的其他衍生物。
[0061] 本發(fā)明的脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆?？珊蓄?lèi)固醇，其特征在于存在稠合、四環(huán)甾烷環(huán)系。類(lèi)固醇的實(shí)例包括但不限于，膽固醇、膽酸、黃體激素、可的松、醛固酮、雌二醇、睪酮、脫氫表雄酮。也可考慮將合成的類(lèi)固醇和它們的衍生物用于本發(fā)明中。
[0062]陽(yáng)離子脂質(zhì)包含在生理?xiàng)l件下帶正電荷的官能團(tuán)。陽(yáng)離子脂質(zhì)包括但不限于，N，N- 二油基-N，N- 二甲基氯化銨(DODAC)、N, N- 二硬脂酰-N，N- 二甲基溴化銨(DDAB)、N-(1-2，3-二油酰氧基)丙基)-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTAP)、N-(1-(2，3-二油酰氧基)丙基)-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTMA)、N-[1-(2，3-二十四烷基氧基)丙基]-N，N-二甲基-N-羥乙基溴化銨(DMRIE)、N-[1-(2，3 二油酰氧基)丙基]-N，N- 二甲基-N-羥基乙基溴化銨(DORIE)、3 β - [N-(N’，N’ -二甲基氨基乙烷)氨基甲?；鵠膽固醇(DC-CH0L)、二甲基二十八烷基銨(DDAB)和N，N- 二甲基-2，3- 二油酰氧基)丙胺(DODMA)。
[0063]在一些實(shí)施方案中，治療脂質(zhì)體包含一種或多種脂質(zhì)，其可以是磷脂、類(lèi)固醇和/或陽(yáng)離子脂質(zhì)的脂質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇或磷脂酸。在一些實(shí)施方式中，磷脂酰膽堿是DSPC。在一些實(shí)施方式中，磷脂酰甘油是DSPG。在一些實(shí)施方式中，磷脂酰乙醇胺是DSPE-PEG(2000)。在一些實(shí)施方案中，所述類(lèi)固醇為膽固醇。
[0064]如上所述，構(gòu)成“攻擊劑”的脂質(zhì)納米顆粒選自第二脂質(zhì)體、膠束或它們的混合物。在一些實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)納米顆粒是第二脂質(zhì)體。第二脂質(zhì)體被稱(chēng)為“攻擊脂質(zhì)體”。在某些實(shí)施方案中，攻擊脂質(zhì)體包含選自磷脂、類(lèi)固醇和陽(yáng)離子性脂質(zhì)的一種或多種脂質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇或磷脂酸。在一些實(shí)施方案中，磷脂酰膽堿是DPPC。在一些實(shí)施方案中，所述類(lèi)固醇為膽固醇。在一些實(shí)施方案中，陽(yáng)離子脂質(zhì)是DOTAP。在一些實(shí)施方案中，所述非離子型觸發(fā)劑是TPGS。
[0065]任何合適的脂類(lèi)組合物可用來(lái)制備本發(fā)明脂質(zhì)體與脂質(zhì)納米顆粒。脂質(zhì)成分可根據(jù)影響特征調(diào)整，如泄漏率、穩(wěn)定性、粒徑、?電位、蛋白結(jié)合、體內(nèi)循環(huán)和/或在組織或器官的累積。例如，DSPC和/或膽固醇可用于降低由脂質(zhì)體的泄露。負(fù)電或正電脂質(zhì)，如DSPG和/或D0TAP，可以影響脂質(zhì)體或脂質(zhì)納米顆粒的表面電荷。在一些實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)組合物可包括約10個(gè)或更少類(lèi)型的脂質(zhì)，或約5個(gè)或更少類(lèi)型的脂質(zhì)，或約3個(gè)或更少類(lèi)型的脂質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，所存在的特定類(lèi)型脂質(zhì)的摩爾百分比(m0l%)通常占存在于脂質(zhì)體或脂質(zhì)納米顆粒的總脂質(zhì)的約0%至約10%、約10%至約30%、約30%至約50%、約50%至約70%、約70%至約90%、約90%至約100%。在一些實(shí)施方案中，所述治療脂質(zhì)體包含40-80 (mol) %的DSPC、5-50(mol) %的膽固醇、0-30(mol) %的DSPG和0-10 (mol) %的DSPE-PEG (2000)。在一些實(shí)施例中，攻擊脂質(zhì)體包含40-70 (mol) %的DPPC、5-20 (mol) % 的膽固醇、0-20 (mol) % 的 DOTAP 和 20-40 (mol) % 的 TPGS。
[0066]本發(fā)明的脂質(zhì)納米顆?？梢院斜砻婊钚詣┌ǚ请x子表面活性劑，其中一些可以作為觸發(fā)劑，以促進(jìn)治療脂質(zhì)體藥物的釋放。非離子表面活性劑的例子包括，但不限于，乙氧基化的烷基酚類(lèi)、乙氧基化的脂肪酯、山梨糖醇衍生物和生育酚衍生物。在本發(fā)明中使用的表面活性劑可考慮包括D-α -生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)，其可具有不同的聚乙二醇聚合度。在一些實(shí)施方案中，在TPGS中聚乙二醇分子量范圍在400-5000。在其它實(shí)施方案中，在TPGS中聚乙二 醇分子量范圍在800-2000。在其它實(shí)施方案中，在TPGS中聚乙二醇分子量范圍在800-1500。一個(gè)特別有用的TPGS是TPGS (1000)，在其中的D-α -生育酚聚乙二醇琥珀酸酯的總分子量為約1543。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“TPGS”指的是TPGS(1000)，除非提供不同的尺寸/重量。其他有用的非離子表面活性劑包括:聚乙二醇對(duì)-(1，1，3，3-四甲基丁基)-苯基醚、聚氧乙烯⑵異辛基苯基醚、聚氧乙烯(150) 二壬基苯基醚、十二烷酸2，3-二羥基丙基酯、聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單月桂酸酯、聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單棕櫚酸酯、聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯等。
[0067]本領(lǐng)域技術(shù)人員可意識(shí)到，通過(guò)調(diào)整脂質(zhì)組合物從而調(diào)節(jié)釋放特性或給定應(yīng)用所需的脂質(zhì)體的其他特征。
[0068]治療劑
[0069]本發(fā)明的治療脂質(zhì)體包括一種或多種在納米載體內(nèi)、上或周?chē)闹委焺?。例如，治療劑可以嵌入脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙分子層，包封在脂質(zhì)體的水性核或系連于脂質(zhì)體的外部。本發(fā)明使用的所述治療劑或藥物可包括治療受試者病癥的任何藥物。在一般情況下，可以使用本領(lǐng)域已知的任何治療劑，包括但不限于如下所列的藥物:美國(guó)藥典(USP)，Goodmanand Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed.，McGraw Hill, 2001 ；Katzungj Ed., Basic and Clinical Pharmacology, McGraw-Hill/Appleton&Lange, 8thed.，September21，2000 ;Physician’ s Desk Reference (Thomson Publishing ;和 / 或 TheMerck Manual of Diagnosis and Therapy, 18th ed., 2006, Beers and Berkow, Eds., MerckPublishing Group ;或者，在動(dòng)物的情況下，The Merck Veterinary Manual, 9th ed., KahnEd., Merck Publishing Group, 2005 ;所有這些都通過(guò)引用并入本文。
[0070]治療劑可以根據(jù)所需要治療的疾病類(lèi)型來(lái)選擇。例如，某些類(lèi)型的癌癥或腫瘤，例如癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥以及實(shí)體瘤和混合瘤，可涉及給予相同或者可能不同的治療劑。在某些實(shí)施方案中，可以遞送治療劑來(lái)治療或影響受試者癌性病癥，并且治療劑可以包括化學(xué)治療劑，如烷化劑、抗代謝物、蒽環(huán)類(lèi)抗生素、生物堿、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑和其它抗癌劑。在一些實(shí)施方案中，藥物可以包括反義藥物、microRNA,siRNA和/或shRNA藥物。
[0071]治療劑可包括抗癌劑或細(xì)胞毒素劑，包括但不限于阿瓦斯丁、多柔比星、順鉬、奧沙利鉬、卡鉬、5-氟尿嘧啶、吉西他濱或紫杉烷，如紫杉醇和多西紫杉醇。另外的抗癌劑可包括但不限于20-印1-1，25- 二羥基維生素D3，4-甘薯苦醇、5-乙炔基尿嘧啶、9- 二氫紫杉醇、阿比特龍、阿西維辛、阿柔比星、鹽酸阿考達(dá)唑、阿克羅寧、酰基富烯(acylfulvene)、腺環(huán)戊醇、阿多來(lái)新、阿地白介素、all-tk拮抗劑、六甲蜜胺、氨莫司汀、安波霉素、醋酸阿美蒽醌、艾美多(amidox)、氨磷汀、氨魯米特、氨基乙酰丙酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、阿那曲唑、穿心蓮內(nèi)酯、血管發(fā)生抑制劑、拮抗劑D、拮抗劑G、安雷利克斯、安曲霉素、抗背側(cè)化形態(tài)形成蛋白_1 (ant1-dorsalizing morphogenetic protein-1)、抗雌激素藥、抗瘤酮、反義寡核苷酸、阿非迪霉素甘氨酸鹽、凋亡基因調(diào)節(jié)劑、凋亡調(diào)節(jié)劑、脫嘌呤核酸、ARA-⑶P-DL-PTBA、精氨酸脫氨基酶、門(mén)冬酰胺酶、曲林菌素、奧沙那寧(asulacrine)、阿他美坦、阿莫司汀、海洋環(huán)肽1、海洋環(huán)肽2、海洋環(huán)肽3、阿扎胞苷、阿扎司瓊、阿扎毒素、重氮酪氨酸、阿扎替派、阿佐霉素、漿果赤霉素III衍生物、班蘭諾(balanol)、巴馬司他、苯并二氫口卜酹、苯佐替派、苯甲?；宙邏A、β內(nèi)酰胺衍生物、β -阿立辛(beta-alethine)、貝拉霉素B(betaclam ycin B)、樺木酸、BFGF抑制劑、比卡魯胺、比生群、鹽酸比生群、雙Π 丫丙唳基精胺、雙奈法德、甲碘酸雙奈法德、雙曲群A (bistratene A)、比折來(lái)新、博來(lái)霉素、硫酸博來(lái)霉素、BRC/ABL拮抗劑、breflate、布喹那鈉、溴匹立明、布度鈦、白消安、丁硫氨酸亞礬胺、放線(xiàn)菌素C、卡泊三醇、卡弗他丁 C、卡普睪酮、喜樹(shù)堿衍生物、金絲雀痘IL-2 (canarypoxIL-2)、卡培他濱、卡醋胺、卡貝替姆、卡鉬、甲酰胺-氨基-三唑、羧基酰胺基三唑、carestM3、卡莫司汀、cam700、軟骨衍生的抑制劑(cartilage derived inhibitor)、鹽酸卡柔比星、卡折來(lái)新、酪蛋白激酶抑制劑、澳粟精胺、殺菌肽B、西地芬戈、西曲瑞克、苯丁酸氮芥、綠素類(lèi)、氯喹喔啉磺酰胺、西卡前列素、西羅霉素、順鉬、順-卟啉、克拉屈濱、氯米芬類(lèi)似物、克霉唑、克里霉素(collismycin)A、克里霉素B、考布他汀A4、考布他汀類(lèi)似物、conagenin、crambescidin816、克立那托、甲磺酸克立那托、念珠藻素8、念珠藻素A衍生物、curacin A、環(huán)戍蒽醌、環(huán)磷酰胺、cycloplatam、cypemycin、阿糖胞苷、阿糖胞苷燒磷酯(cytarabineocfosfate)、溶細(xì)胞因子、磷酸己烷雌酚、達(dá)卡巴嗪、達(dá)昔單抗、放線(xiàn)菌素D、鹽酸柔紅霉素、地西他濱、脫氫膜海鞘素B(dehydrodidemnin B)、地洛瑞林、右異環(huán)磷酰胺、右?jiàn)W馬鉬(dexormaplatin)、右雷佐生、右維拉帕米、地扎狐寧、甲磺酸地扎狐寧、地Π丫醌、代代寧B、didox、二乙基去甲精胺、二氫-5-氮胞苷、dioxamycin、二苯基螺莫司汀、多西紫杉醇、二十二烷醇、多拉司瓊、去氧氟尿苷、多柔比星、鹽酸多柔比星、屈洛昔芬、檸檬酸屈洛昔芬、丙酸屈他雄酮、屈大麻酹、達(dá)佐霉素、duocarmycin SA、依布硒、依考莫司汀、依達(dá)曲沙、依地福新、依決洛單抗、依氟鳥(niǎo)氨酸、鹽酸依氟鳥(niǎo)氨酸、欖香烯、依沙蘆星、乙嘧替氟、恩洛鉬、恩普氨酯、依匹哌啶、表柔比星、鹽酸表柔比星、愛(ài)普列特、厄布洛唑、紅細(xì)胞基因治療載體體系、鹽酸依索比星、雌莫司汀、雌莫司汀類(lèi)似物、雌莫司汀磷酸酯鈉、雌激素激動(dòng)劑、雌激素拮抗劑、依他硝唑、依托泊苷、磷酸依托泊苷、氯苯乙嘧胺、依西美坦、法倔唑、鹽酸法倔唑、法扎拉濱、芬維A胺、非格司亭、非那雄胺、夫拉平度、氟卓斯汀、氟尿苷、fluasterone、氟達(dá)拉濱、磷酸氟達(dá)拉濱、fluorodaunorunicin鹽酸鹽、氟尿喃唳、fluorocitabine、福酹美克、福美坦、磷喹酮、福司曲星、福司曲星鈉、福莫司汀、釓替沙林、硝酸鎵、加洛他濱、加尼瑞克、明膠酶抑制劑、吉西他濱、鹽酸吉西他濱、谷胱甘肽抑制劑、hepsulfam、heregulin、六亞甲基雙乙酰胺、羥基脲、金絲桃素、伊班膦酸、伊達(dá)比星、鹽酸伊達(dá)比星、吲哚昔酚、伊決孟酮、異環(huán)磷酰胺、ilmofosine、伊洛馬司他、咪唑并吖唳酮、咪喹莫特、免疫刺激劑肽、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體抑制劑、干擾素激動(dòng)劑、干擾素α-2Α、干擾素c1-2B、干擾素α_Ν1、干擾素α-Ν3、干擾素β-ΙΑ、干擾素Y-1B、干擾素、白介素、碘芐胍、碘阿霉素、異丙鉬、伊立替康、鹽酸伊立替康、伊羅普拉、伊索拉定、isobengazole、isohomohalicondrin B、伊他司瓊、jasplakinolide、kahalalide F、lamellarin-N triacetate、蘭瑞妝、醋酸蘭瑞月太、leinamycin、來(lái)格司亭、硫酸蘑燕多糖、leptolstatin、來(lái)曲唑、白血病抑制因子、白細(xì)胞α干擾素、醋酸亮丙瑞林、亮丙瑞林/雌激素/孕酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、利阿唑、鹽酸利阿唑、線(xiàn)性多胺類(lèi)似物、親脂二糖肽、親脂鉬化合物、lissoclinamide7、洛鉬、胍乙基磷酸絲氨酸、洛美曲索、洛美曲索鈉、洛莫司汀、氯尼達(dá)明、洛索蒽醌、鹽酸洛索蒽醌、洛伐他汀、洛索立賓、勒托替康、lutetium texaphyrin、lysofylline、裂解肽、美坦新、mannostatin A、馬立馬司他、馬索羅酚、maspin、基質(zhì)溶解因子抑制劑、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑、美登素、氮芥鹽酸鹽、乙酸甲地孕酮、醋酸美侖孕酮、美法侖、美諾立爾、merbarone、疏基嘌呤、美替瑞林、蛋氨酸酶、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤鈉、甲氧氯普胺、氯苯氨啶、美妥替哌、微藻蛋白激酶C抑制劑、MIF抑制劑、米非司酮、米替福新、米立司亭、錯(cuò)配雙鏈RNA、米丁度胺、米托卡星、絲裂紅素、米托潔林、米托胍腙、二溴衛(wèi)矛醇、米托馬星、絲裂霉素、絲裂霉素類(lèi)似物、米托萘胺、米托司培、米托坦、邁托毒素成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-皂草素、米托蒽醌、鹽酸米托蒽醌、莫法羅汀、莫拉司亭、單克隆抗 體、人絨毛膜促性腺激素、單磷酰脂質(zhì)A/分支桿菌細(xì)胞壁SK、莫哌達(dá)醇、多重抗藥性基因抑制劑、基于多重腫瘤抑制因子I的治療、芥子抗癌劑、印度洋海綿(mycaperoxide)B、分枝桿菌細(xì)胞壁提取物、麥考酹酸、myriaporone、正乙?；啬橇帧⒛欠ㄈ鹆?、nagrestip、納洛酮/噴他佐辛、napavin、萘職二醇、那托司亭、奈達(dá)鉬、奈莫柔比星、奈立膦酸、中性肽鏈內(nèi)切酶、尼魯米特、ni samycin、一氧化氮調(diào)節(jié)劑、硝基氧抗氧化劑(nitroxide antioxidant)、nitrullyn、諾考達(dá)唑、諾拉霉素、η-取代的苯甲酰胺、06-芐基鳥(niǎo)嘌呤、奧曲肽、okicenone、寡核苷酸、奧那司酮、昂丹司瓊、oracin、口腔細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑、奧馬鉬、奧沙特隆、奧沙利鉬、oxaunomycin、奧昔舒侖、紫杉醇、紫杉醇類(lèi)似物、紫杉醇衍生物、palauamine、棕櫚?；顾亍⑴撩琢姿?、人參炔三醇、帕諾米芬、parabactin、帕折普汀、培門(mén)冬酶、培得星、培利霉素、戊氮芥、戊聚硫鈉、噴司他丁、pentrozole、硫酸培洛霉素、全氟溴烷、培磷酰胺、紫蘇醇、phenazinomycin、乙酸苯酯、磷酸酶抑制劑、溶鏈菌素、鹽酸毛果云香堿、哌泊溴燒、哌泊舒凡、吡柔比星、吡曲克辛、鹽酸吡羅蒽醌、placetin A、placetinB、纖溶酶原激活物抑制劑、鉬絡(luò)合物、鉬化合物、鉬-三胺絡(luò)合物、普卡霉素、普洛美坦、口卜吩姆鈉、泊非霉素、潑尼莫司汀、鹽酸丙卡巴肼、丙基雙吖啶酮、前列腺素J2、前列腺癌抗雄激素、蛋白酶體抑制劑、基于蛋白質(zhì)A的免疫調(diào)節(jié)劑、蛋白質(zhì)激酶C抑制劑、蛋白質(zhì)釀氣酸磷酸酶抑制劑、嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑、嘌呤霉素、嘌呤霉素鹽酸鹽、紅紫素、吡唑呋喃菌素、吡唑并吖唆、吡哆醛化血紅蛋白聚氧乙烯綴合物、RAF拮抗劑、雷替曲塞、雷莫司瓊、RAS法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑、RAS抑制劑、RAS-GAP抑制劑、脫甲基瑞替普汀、錸RE186依替膦酸鹽、根霉素、利波腺苷、核酶、RII維甲酰胺(retinamide)、RNA1、羅谷亞胺、羅希吐堿、羅莫肽、羅喹美克、rubiginone B1、ruboxyl、沙芬戈、鹽酸沙芬戈、saintopin、sarcnu、sarcophytol A、沙格司亭、SDIl模擬物、司莫司汀、老化衍生的抑制劑1、正義寡核苷酸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑、辛曲秦、單鏈抗原結(jié)合蛋白質(zhì)、sizofuran、索布佐生、硼卡鈉、苯基乙酸鈉、solverol、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素結(jié)合蛋白質(zhì)、索納明、磷乙酰天冬氨酸鈉、膦門(mén)冬酸、司帕霉素、spicamycin D、鹽酸螺旋鍺、螺莫司汀、螺鉬、脾臟五肽、海綿抑制素1、角鯊胺、干細(xì)胞抑制劑、干細(xì)胞分裂抑制劑、stipiamide、鏈黑菌素、鏈佐星、基質(zhì)分解素抑制劑、sulfinosine、磺氯苯脲、強(qiáng)效血管活性腸肽拮抗劑、suradista、蘇拉明、苦馬豆堿、合成糖胺聚糖、他利霉素、他莫司汀、他莫昔芬甲碘化物、牛磺莫司汀、他扎羅汀、替可加蘭鈉、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制劑、替洛蒽醌鹽酸鹽、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、替羅昔隆、睪內(nèi)酪、四氯十氧化物、tetrazomine、thaliblastine、沙利度胺、硫咪嘌呤、噻可拉林、硫鳥(niǎo)嘌呤、塞替派、血小板生成素、血小板生成素模擬物、胸腺法新、胸腺?lài)姸∈荏w激動(dòng)劑、胸腺曲南、甲狀腺刺激激素、噻唑羧胺核苷、本紫紅素乙酯錫、替拉扎明、二氯環(huán)戊二烯鈦、鹽酸拓?fù)涮婵怠opsentin、托瑞米芬、檸檬酸托瑞米芬、全能干細(xì)胞因子、翻譯抑制劑、醋酸曲托龍、維甲酸、三乙?；蜍?、曲西立濱、磷酸曲西立濱、三甲曲沙、葡萄糖醛酸三甲曲沙、曲普瑞林、托烷司瓊、鹽酸妥布氯唑、妥羅雄脲、酪氨酸激酶抑制劑、酪氨酸磷酸化抑制劑、UBC抑制劑、烏苯美司、尿嘧啶芥子、烏瑞替派、泌尿生殖竇衍生的生長(zhǎng)抑制因子、尿激酶受體拮抗劑、伐普肽、variolin B、維拉雷瑣、藜蘆明、verdins、維替泊芬、硫酸長(zhǎng)春堿、硫酸長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春地辛、 硫酸長(zhǎng)春地辛、硫酸長(zhǎng)春匹定、硫酸長(zhǎng)春甘酯、硫酸長(zhǎng)春羅新、長(zhǎng)春瑞濱、酒石酸長(zhǎng)春瑞濱、硫酸長(zhǎng)春羅定、vinxaltine、硫酸長(zhǎng)春利定、vitaxin、伏氯唑、扎諾特隆、折尼鉬、亞芐維C、凈司他丁、凈司他丁斯酯，或鹽酸佐柔比星。
[0072]在一些實(shí)施方案中，該治療劑可為藥物混合物的部分，其包括給藥兩種或更多種治療劑。例如，可給藥具有順鉬和奧沙利鉬兩者的脂質(zhì)體。此外，該治療劑可在免疫刺激性輔料之前、之后或同時(shí)遞送，所述輔料如鋁凝膠或鹽輔料(例如，磷酸鋁或氫氧化鋁)、磷酸鈣、內(nèi)毒素、Toll樣受體輔料等。
[0073]本發(fā)明的治療劑也可包括用于治療應(yīng)用的放射性核素。例如，Auger電子的發(fā)射體，如mIn,可與螯合劑，如二乙烯三胺五乙酸(DTPA)或1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4，7，10-四乙酸(DOTA)結(jié)合，且包含在用于治療的脂質(zhì)體中。其它合適的放射性核素和/或放射性核素-螯合劑組合可包括但不限于β放射性核素(177Lu、153Sm、88A3°Y)與DOTA、64Cu-TETA、188/186Re (CO) 3_IDA ； 1887l86Re (CO)三胺(環(huán)狀或線(xiàn)狀), 1887l86Re (CO) 3 _ Enpy2和 1887l86Re (CO) 3-DTPA0
[0074]在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述治療劑可以是順鉬、奧沙利鉬、卡鉬、吉西他濱、5-氟尿嘧啶、多柔比星和紫杉烷。在一些實(shí)施方案中，所述治療劑是順鉬或奧沙利鉬。
[0075]治療劑的負(fù)載可通過(guò)本領(lǐng)域已知的多種方式實(shí)現(xiàn)，例如以下文獻(xiàn)中公開(kāi)的:de Villiers, Μ.M.等人，Eds., Nanotechnology in Drug Delivery, Springer (2009)；Gregoriadis，G.，Ed.，LiposomeTechnology:Entrapment of drugs and other materialsinto liposomes, CRC Press (2006)。在一些實(shí)施方案中，一種或多種治療劑可負(fù)載至脂質(zhì)體中。脂質(zhì)體的負(fù)載可通過(guò)例如主動(dòng)或被動(dòng)方式進(jìn)行。例如，治療劑可在溶液中脂質(zhì)體的自組裝過(guò)程中包含在其中，使得治療劑包囊在脂質(zhì)體中。在某些實(shí)施方案中，該治療劑也可嵌入脂質(zhì)體雙層或多層脂質(zhì)體的多層中。在替代性實(shí)施方案中，該治療劑可主動(dòng)負(fù)載至脂質(zhì)體中。例如，該脂質(zhì)體可暴露于條件，如電穿孔，其中使雙層膜對(duì)包含治療劑的溶液可滲透，從而使得治療劑進(jìn)入脂質(zhì)體的內(nèi)部體積。
[0076]診斷劑
[0077]本發(fā)明的治療脂質(zhì)體還可以包含診斷劑。用于本發(fā)明的診斷劑可包括本領(lǐng)域已知的任何診斷劑，例如以下文獻(xiàn)所提供的！Armstrong et al., DiagnosticImaging, 5th Ed., Blackwell Publishing (2004) ；Torchi I in, V.P., Ed., TargetedDelivery of Imaging Agents,CRC Press (1995) ；Vallabhajosula, S., MolecularImaging:Radiopharmaceuticals for PET and SPECT, Springer (2009)。診斷劑可通過(guò)多種方式檢測(cè)，包括提供和/或增強(qiáng)可檢測(cè)信號(hào)的試劑，該信號(hào)包括，但不限于，Y-發(fā)射、放射性、回聲、光學(xué)、螢光、吸收、磁性或斷層攝影信號(hào)。用于成像診斷劑的技術(shù)可包括，但不限于，單光子發(fā)射計(jì)算體層攝影術(shù)(SPECT)、磁共振成像(MRI)、光學(xué)成像、正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(PET)、計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(CT)、X-射線(xiàn)成像、Y射線(xiàn)成像等。
[0078]在一些實(shí)施方案中，診斷劑可包括螯合劑，該螯合劑結(jié)合至金屬離子以用于多種診斷成像技術(shù)。示例性螯合劑包括但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)、[4-(1，4，8，11_四氮雜環(huán)十四烷-1-基)甲基]苯甲酸(CPTA)、環(huán)己烷二胺四乙酸(⑶TA)、乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、二乙烯三胺五乙酸(DTPA)、檸檬酸、羥基乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、亞氨基二乙酸(IDA)、三亞乙基四胺六乙酸(TTHA)、1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4，7，10-四(亞甲基 膦酸)(D0TP)、1，4，8，11-四氮雜環(huán)十二烷_(kāi)1，4，8，11-四乙酸(TETA)U, 4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1, 4，7，10-四乙酸(DOTA)，及其衍生物。
[0079]放射性同位素可摻入本文所述的一些診斷劑中，且可包括發(fā)射Y射線(xiàn)、正電子、β和α顆粒和X-射線(xiàn)的放射性核素。合適的放射性核素包括但不限于225Ac、72As、211At、11B,128Ba^212Bi,75Br,77Br,14C,109Cd,62Cu,64Cu^67Cu,18F,67Ga,68Ga,3H, 1231 , 1251 , 1301 , 131 1 , 111 In,177Lu, 13N, 150,32P,33P,212Pb, 103Pd, 186Re, 188Re,47Sc, 153Sm,89Sr,99mTc,88Y 和 90Y。在某些實(shí)施方案中，放射性試劑可包括 111In-DTPA^99mTc (CO) 3_DTPA、99niTc (CO) 3-ENPy2、62/64/67Cu_TETA、99mTc (CO) 3-1DA、和99mTc (CO)3三胺(環(huán)狀或線(xiàn)狀)。在其它實(shí)施方案中，該試劑可包括DOTA及其具有mIn、177Lu、153Sm、88/90Y、62/64/67Cu、或6V68Ga的多種類(lèi)似物。在一些實(shí)施方案中，該脂質(zhì)體可被放射標(biāo)記，例如，通過(guò)摻入連接至螯合劑的脂質(zhì)，如DTPA-脂質(zhì)，如以下文獻(xiàn)提供:Phillips 等人，Wiley Interdisciplinary Reviews:Nanomedicine andNanobiotechnology,I(I):69-83(2008) ；Torchilin,V.P.&ffeissig,V., Eds.Liposomes2ndEd.: Oxford Univ.Press (2003) ；Elbayoumi, T.A.&Torchilin, V.P., Eur.J.Nuc1.Med.Mol.1maging33:1196 - 1205 (2006) ；Mougin-Degraef, M.等人，Int，I J.Pharmaceutics344:110-117(2007)。
[0080]在其它實(shí)施方案中，該診斷劑可包括光學(xué)試劑如突光劑、磷光試劑、化學(xué)發(fā)光試劑等。多種試劑(例如染料、探針、標(biāo)記或指示劑)是本領(lǐng)域已知的且可在本發(fā)明使用。(參見(jiàn)，例如，Invitrogen，The Handbook—A Guide to Fluorescent Probes and LabelingTechnologies, Tenth Edition(2005))。焚光劑可包括多種有機(jī)和/或無(wú)機(jī)小分子或多種熒光蛋白質(zhì)及其衍生物。例如，熒光劑可包括但不限于花青、酞菁、卟啉、靛青、羅丹明、吩嗪、苯基咕噸、吩噻嗪、吩硒嗪、熒光素、苯并卟啉、方酸菁、二吡咯并嘧啶酮、并四苯(tetracenes)、喹啉、吡嗪、咕啉、克酮酸(croconiums)、Π丫唳酮、菲唳、羅丹明、Π丫唳、蒽醌、
chalcogenopyrylium類(lèi)似物、二氫卟酹、萘酞菁、甲川染料(methine dyes)、吲哚輸:染料
(indolenium dyes)、偶氮化合物、甘菊藍(lán)、氮雜甘菊藍(lán)、三苯基甲燒染料、吲哚、苯并吲哚、口引哚碳菁、苯并11引哚碳菁，和具有4，4- 二氟-4-硼_3a, 4a- 二氮雜-s_ 二環(huán)戍二烯并苯的通用結(jié)構(gòu)的B0DIPY?衍生物，和/或任意這些的綴合物和/或衍生物?？墒褂玫钠渌噭┌?，但不限于，例如，熒光素、熒光素-多天冬氨酸綴合物、熒光素-多谷氨酸綴合物、熒光素-多精氨酸綴合物、靛青綠、靛青-十二天冬氨酸綴合物、靛青-多天冬氨酸綴合物、異舒泛藍(lán)、吲哚二磺酸鹽(indole disulfonates)、苯并吲哚二磺酸鹽、二(乙基羧基甲基)靛青、二(戊基羧基甲基)靛青、多羥基吲哚磺酸鹽、多羥基苯并吲哚磺酸鹽、剛性雜原子吲哚磺酸鹽、靛青雙丙酸、靛青雙己酸、3，6- 二氰基-2，5-[ (N，N，N’，N’ -四(羧基甲基)氨基]吡嗪、3，6-[0州州’，^-四(2-羥基乙基)氨基]吡嗪_2，5-二羧酸、3，6-二(N-氮雜環(huán)丁烷子基(azatedino))吡嗪_2，5_ 二羧酸、3，6_ 二(N-嗎啉代)吡嗪_2，5- 二羧酸、3，6- 二(N-哌嗪子基)吡嗪-2，5-二羧酸、3，6-二(N-硫嗎啉代)吡嗪-2，5-二羧酸、3，6-二(N-硫嗎啉代)吡嗪_2，5- 二羧酸S-氧化物、2，5- 二氰基-3，6- 二(N-硫嗎啉代)吡嗪S，S- 二氧化物、吲哚碳菁四磺酸鹽(indocarbocyaninetetrasulfonate)、氯吲哚碳菁，和3，6_ 二氨基吡嗪-2，5-二羧酸 。
[0081]本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解使用的具體光學(xué)試劑可取決于用于激發(fā)的波長(zhǎng)、皮膚組織下面的深度，和本領(lǐng)域通常眾所周知的其它因素。例如，光學(xué)試劑的最佳的吸收或激發(fā)最大量可根據(jù)使用的試劑的而改變，但通常，本發(fā)明的光學(xué)試劑將吸收以下光或被以下光激發(fā):電磁波譜的紫外(UV)、可見(jiàn)或紅外(IR)范圍的光。對(duì)于成像，在近紅外吸收和發(fā)射的染料(~700-900nm，例如，靛青)是優(yōu)選的。對(duì)于使用內(nèi)窺鏡方法的局部可視化，在可見(jiàn)范圍吸收的任何染料是合適的。
[0082]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法中使用的非電離輻射的波長(zhǎng)范圍可為約350nm至約1200nm。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，該熒光劑可被波長(zhǎng)在電磁波譜的可見(jiàn)部分的藍(lán)色范圍的光激發(fā)(約430nm至約500nm)且以在電磁波譜的可見(jiàn)部分的綠色范圍的波長(zhǎng)(約520nm至約565nm)發(fā)射。例如，
[0083]熒光素染料可被波長(zhǎng)約488nm的光激發(fā)且具有約520nm的發(fā)射波長(zhǎng)。作為另一實(shí)例，3，6- 二氨基吡嗪-2，5- 二羧酸可被波長(zhǎng)約470nm的光激發(fā)且在波長(zhǎng)約532nm發(fā)熒光。在另一實(shí)施方案中，光學(xué)試劑的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)可落在電磁波譜的近紅外范圍。例如，靛青染料，如靛青綠，可被波長(zhǎng)約780nm的光激發(fā)且具有約830nm發(fā)射波長(zhǎng)。
[0084]在其它實(shí)施方案中，該診斷劑可包括但不限于本領(lǐng)域通常已知的磁共振(MR)和X-射線(xiàn)造影劑，包括，例如，基于碘的X-射線(xiàn)造影劑、超順磁氧化鐵(SPIO)、釓或錳的復(fù)合物，等。(參見(jiàn)，例如，Armstrong 等人，Diagnostic Imaging, 5th Ed.，BlackwellPublishing(2004))。在一些實(shí)施方案中，診斷劑可包括磁共振(MR)顯像劑。示例性磁共振試劑包括但不限于順磁劑、超順磁劑，等。示例性順磁劑可包括但不限于釓噴酸、釓特酸、釓雙胺、釓、釓特醇、錳福地吡、釓弗塞胺、檸檬酸鐵銨、釓貝酸、釓布醇或釓塞酸。超順磁劑可包括但不限于超順磁氧化鐵以及氧化鐵和氧化亞鐵復(fù)合物(Ferristene)。在某些實(shí)施方案中，該診斷劑可包括X-射線(xiàn)造影劑，例如，在以下文獻(xiàn)提供:H.S Thomsen, R.N.Mullerand R.F.Mattrey, Eds., Trends in Contrast Media, (Berlin:Springer-Verlag,1999)；P.Dawson, D.Cosgrove and R.Grainger, Eds., Textbook of Contrast Media (ISIS MedicalMedial999) ；TorchiI in, V.P., Curr.Pharm.Biotech.1:183-215(2000) ；Bogdanov,A.A.等 Α? Adv.Drug Del.Rev.37:279-293 (1999) ；Sachse, A.等人，InvestigativeRadiology32(l):44-50(1997)。X_射線(xiàn)造影劑的實(shí)例包括包括，但不限于，碘帕醇、碘美普爾、碘海醇、碘噴托、碘普胺、碘西胺、碘佛醇、碘曲侖、碘酞硫、碘克沙醇、碘西醇、碘葡糖酰胺、碘葡苯胺、iogulamide、碘沙考、碘昔蘭、碘帕醇、甲泛葡胺、碘比醇和碘美醇。在某些實(shí)施方案中，該X-射線(xiàn)造影劑可包括碘帕醇、碘美普爾、碘普胺、碘海醇、碘噴托、碘佛醇、碘比醇、碘克沙醇、碘曲侖和碘美醇。
[0085]對(duì)于上述治療劑，該診斷劑可以多種方式與治療脂質(zhì)體結(jié)合，包括例如嵌入或包封入脂質(zhì)體。類(lèi)似的，診斷劑的負(fù)載可通過(guò)本領(lǐng)域已知的多種方式進(jìn)行，例如以下文獻(xiàn)公開(kāi)的:de Villiers, Μ.Μ.等人，Eds., Nanotechnology in Drug Delivery, Springer (2009)；Gregoriadis, G., Ed., Liposome Technology:Entrapment of drugs and other materialsinto Liposomes, CRC Press (2006)。
[0086]制劑和給藥
[0087]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明可包括脂質(zhì)體組合物和生理學(xué)上(即，藥學(xué)上)可接受的載體。如本文所述，術(shù)語(yǔ)"載體"是指通常的用作藥物如治療劑的稀釋劑或媒介物的惰性物質(zhì)。該術(shù)語(yǔ) 也包括賦予組合物粘聚性的通常的惰性物質(zhì)。通常，生理學(xué)上可接受的載體以液體形式存在。液體載體的實(shí)例包括生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、生理緩沖鹽水(135-150mMNaCl)、水、緩沖水溶液、0.4%鹽水、0.3%甘氨酸、糖蛋白以提供增強(qiáng)的穩(wěn)定性(例如，白蛋白、脂蛋白、球蛋白等)，等。因?yàn)樯韺W(xué)上可接受的載體部分通過(guò)給予的具體組合物以及通過(guò)用于給予組合物的具體方法而決定，因此有很多種本發(fā)明的藥物組合物的合適制劑(參見(jiàn)，例如，Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17th ed.，1989)。
[0088]本發(fā)明的組合物可通過(guò)常規(guī)、眾所周知的滅菌技術(shù)滅菌或可在無(wú)菌條件下制備。水溶液可被包裝使用或在無(wú)菌條件過(guò)濾且凍干，該凍干制劑在給藥前與無(wú)菌水溶液合并。該組合物可按需要包含藥物可接受的輔助物質(zhì)以接近生理?xiàng)l件，如PH調(diào)節(jié)和緩沖劑、張度調(diào)節(jié)劑、濕潤(rùn)劑，等，例如，乙酸鈉、乳酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、脫水山梨醇單月桂酸酯和三乙醇胺油酸鹽。可包含糖以穩(wěn)定該組合物，如用于凍干的脂質(zhì)體組合物的穩(wěn)定劑。
[0089]所選擇的脂質(zhì)體組合物，當(dāng)單獨(dú)或與其它合適的組分組合時(shí)，可制備成氣溶膠制劑(即，它們可被〃霧化〃)以通過(guò)吸入給藥。氣溶膠制劑可置于加壓可接受的推進(jìn)劑中，如二氯二氟甲烷、丙烷、氮?dú)?，等?br> [0090]用于直腸給藥的合適的制劑包括，例如，栓劑，其包含有效量的包裝的脂質(zhì)體組合物以及栓劑基質(zhì)。合適的栓劑基質(zhì)包括天然或合成的甘油三酯或石蠟烴。此外，也可使用明膠直腸膠囊，其包含選擇的脂質(zhì)體組合物與基質(zhì)的組合，基質(zhì)包括，例如，液體甘油三酯、聚乙二醇，和石蠟烴。[0091]適合腸胃外給藥的制劑，例如，通過(guò)關(guān)節(jié)內(nèi)(關(guān)節(jié)中)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、瘤內(nèi)、皮內(nèi)、腹腔內(nèi)、和皮下途徑，包括水性和非水性、等滲無(wú)菌注射溶液，其可包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使得制劑與預(yù)期接受者的血液等滲的溶質(zhì)，和水性和非水性無(wú)菌懸浮液，其可包括助懸劑、增溶劑、增稠劑、穩(wěn)定劑和防腐劑。注射溶液和懸浮液也可由無(wú)菌粉末、顆粒和片齊?制備。在本發(fā)明的實(shí)踐中，組合物可通過(guò)，例如，靜脈內(nèi)輸注、局部、向腹膜內(nèi)、膀胱內(nèi)或鞘內(nèi)給藥。腸胃外給藥和靜脈內(nèi)給藥是優(yōu)選給藥方法。脂質(zhì)體組合物的制劑可存在于單元?jiǎng)┝炕蚨鄤┝棵芊馊萜?，如安瓿和小瓶中?br> [0092]該藥物制劑優(yōu)選以單位劑型形式。以該形式，制劑細(xì)分為包含合適的量的活性成分的單位劑量，例如，脂質(zhì)體組合物。該單位劑型可為包裝的制劑，包含離散量的制劑的包裝。如果需要的話(huà)，該組合也可包含其它相容的治療劑。
[0093]在治療癌癥的治療用途中，本發(fā)明的藥物組合物中使用的包含治療和/或診斷劑的脂質(zhì)體組合物可以初始劑量為每日約0.001mg/kg至約1000mg/kg給藥。可使用日劑量范圍約 0.01mg/kg 至約 500mg/kg,或約 0.lmg/kg 至約 200mg/kg,或約 lmg/kg 至約 100mg/kg,或約10mg/kg至約50mg/kg。然而,該劑量可根據(jù)患者的需求、治療病癥的嚴(yán)重性和使用的脂質(zhì)體組合物而改變。例如，劑量可考慮具體患者中診斷的癌癥的類(lèi)型和階段而憑經(jīng)驗(yàn)地確定。給藥于患者的劑量，在本發(fā)明的上下文，應(yīng)足以隨時(shí)間在患者中實(shí)現(xiàn)有益治療響應(yīng)。劑量大小也將通過(guò)在具體患者中伴隨給藥具體脂質(zhì)體組合物的任何不利副作用的存在、性質(zhì)和程度而確定。對(duì)具體情形的適當(dāng)劑量的確定是醫(yī)生技能范圍內(nèi)的。通常，治療起始于較小劑量，其小于脂質(zhì)體組合物的最佳劑量。之后，劑量通過(guò)小增量增加直到達(dá)到情況下的最佳效果。為方便起見(jiàn)，總?cè)談┝靠煞珠_(kāi)且在一天過(guò)程中分部分給藥，如果需要的話(huà)。 [0094]靶向劑
[0095]在某些情況下，脂質(zhì)體在靶點(diǎn)部位累積，可能是由于某些組織如癌組織的滲透性和保留特性的增強(qiáng)。以該方式累積可能部分由于脂質(zhì)體的大小，并且可能并不需要特殊的靶向功能。在其他情況下，本發(fā)明的脂質(zhì)體還可以含有靶向劑。一般地，本發(fā)明的靶向劑可以與任何感興趣的靶點(diǎn)相關(guān)聯(lián)，如與器官、組織、細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞內(nèi)或區(qū)域相關(guān)聯(lián)。在某些實(shí)施方案中，靶點(diǎn)可以與特定的疾病狀態(tài)相關(guān)聯(lián)，如癌性病癥。在一些實(shí)施方案中，靶向組分可僅對(duì)一個(gè)靶點(diǎn)如受體具有特異性。合適的靶點(diǎn)可包括但不限于核酸，如DNA、RNA或其修飾的衍生物。合適的靶點(diǎn)還可以包括但不限于蛋白質(zhì)，如細(xì)胞外蛋白、受體、細(xì)胞表面受體、腫瘤標(biāo)志物、跨膜蛋白、酶或抗體。合適的靶點(diǎn)可包括糖類(lèi)，例如可以是存在于細(xì)胞表面上的單糖、二糖或多糖。
[0096]在某些實(shí)施方案中，靶向劑可以包括靶向配體(例如含RGD的肽)、靶向配體的小分子模擬物(例如肽模擬物的配體)或特定靶點(diǎn)的特異性抗體或抗體片段。在一些實(shí)施方案中，靶向劑可以進(jìn)一步包括葉酸衍生物、B-12衍生物、整聯(lián)蛋白R(shí)GD肽、NGR衍生物、結(jié)合到促生長(zhǎng)素抑制素受體的生長(zhǎng)抑素衍生物或肽，例如，奧曲肽和octreotate，等等。本發(fā)明的靶向劑也可包括適體。適體可以設(shè)計(jì)成與感興趣靶點(diǎn)相關(guān)聯(lián)或相結(jié)合。適體可包括，例如，DNA、RNA和/或肽，和現(xiàn)有技術(shù)公知的某些適體(參見(jiàn)，例如，Klussman, S., Ed., The Aptamer Handbook, WiIey-VCH(2006) ；Nissenbaum, E.T., Trends inBiotech.26(8):442-449(2008))。
[0097]用于給予活性劑的試劑盒[0098]在另一個(gè)方面，本發(fā)明還提供向受試者給予脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆粒從而治療疾病狀態(tài)的試劑盒。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于將治療劑遞送至受試者的試劑盒，該試劑盒包括:a)第一組合物，其包含含有治療劑的脂質(zhì)體jPb)第二組合物，其包含含有一種非離子型觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆粒；其中所述第一和第二組合物在受試者給藥前被分開(kāi)存儲(chǔ)。
[0099]這樣的試劑盒通常包括用于治療疾病狀態(tài)(如癌性病癥)所必要的兩種或多種組分。所述組分可包括本發(fā)明的脂質(zhì)組合物、試劑、緩沖液、容器和/或裝置。脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆?？梢允莾龈尚问剑湓诮o藥前進(jìn)行重新配制。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的試劑盒可以包括包裝組件，其可以包括用于治療患者疾病狀態(tài)的一個(gè)或多個(gè)組件。例如，包裝組件可包括分開(kāi)的容器，其容納如本文所述的治療脂質(zhì)體和攻擊劑。分開(kāi)的容器可包括在患者給藥前可與該組合物混合的其他賦形劑或藥物。在一些實(shí)施方案中，醫(yī)生可以根據(jù)特定患者所需的治療或診斷選擇和搭配某些組件和/或包裝組件。
[0100]IV.實(shí)施例
[0101]本發(fā)明的實(shí)施如表A實(shí)施例所示，但其并不旨在被其所限定。通過(guò)這些實(shí)施例，清楚地顯示體外攻擊脂質(zhì)體可用于觸發(fā)藥物從具有差的釋放特性的治療脂質(zhì)體釋放。在實(shí)施例1、2和11-12中，治療脂質(zhì)體包含細(xì)胞毒性劑，包括順鉬或奧沙利鉬。在實(shí)施例3-10中，5-羧基熒光素(5-CF)用作治療脂質(zhì)體組合物的標(biāo)記物。這些樣品的特性匯總于下表A中。實(shí)施例1-5和10表明，相同的攻擊脂質(zhì)體(B部分)用于觸發(fā)和/或增強(qiáng)多種具有隱形功能(stealth functionality)或不具有隱形功能的治療脂質(zhì)體組合物(A部分)的釋放。實(shí)施例6-9顯示觸發(fā)劑在攻擊脂質(zhì)體中的關(guān)鍵作用。在實(shí)施例8和9中，攻擊脂質(zhì)體的表面電荷基本上是中性的。
[0102]表A.治療和攻擊脂質(zhì)體的實(shí)施例
[0103]
【權(quán)利要求】
1.一種遞送治療劑至受試者的方法，所述方法包括: a)向所述受試者給予包含治療劑的脂質(zhì)體；和 b)向所述受試者給予含有非離子型觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆粒； 從而相對(duì)于不給予脂質(zhì)納米顆粒時(shí)所述治療劑從脂質(zhì)體中的釋放，在脂質(zhì)納米顆粒給予后所述治療劑從脂質(zhì)體中的釋放增加。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂質(zhì)體包含選自磷脂、類(lèi)固醇和陽(yáng)離子脂質(zhì)的一種或多種脂質(zhì)。
3.如權(quán)利要求2所述的的方法，其中所述磷脂選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇和磷脂酸。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述磷脂酰膽堿是DSPC。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述磷脂酰甘油是DSPG。
6.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述磷脂酰乙醇胺是DSPE-PEG(2000)。
7.如權(quán)利要求 2所述的方法，其中所述類(lèi)固醇為膽固醇。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂質(zhì)納米顆粒選自第二脂質(zhì)體、膠束以及它們的混合物。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述脂質(zhì)納米顆粒是第二脂質(zhì)體。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述第二脂質(zhì)體包含選自磷脂、類(lèi)固醇和陽(yáng)離子脂質(zhì)的一種或多種脂質(zhì)。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述磷脂選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇和磷脂酸。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述磷脂酰膽堿是DPPC。
13.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述類(lèi)固醇為膽固醇。
14.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述陽(yáng)離子脂質(zhì)是DOTAP。
15.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述非離子型觸發(fā)劑是TPGS。
16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂質(zhì)體包含40-80摩爾％的DSPC、5-50摩爾％的膽固醇、0-30摩爾％的DSPG和0-10摩爾％的DSPE-PEG (2000)。
17.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂質(zhì)納米顆粒是包含40-70摩爾5-20摩爾％的膽固醇、0-20摩爾％的DOTAP和20-40摩爾％的TPGS的第二脂質(zhì)體。
18.如上述任何權(quán)利要求所述的方法，其中所述治療劑選自順鉬、奧沙利鉬、卡鉬、吉西他濱、5-氟尿喃唳、多柔比星和紫杉燒。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述治療劑選自順鉬和奧沙利鉬。
20.如上述任何權(quán)利要求所述的方法，其中所述第一脂質(zhì)體和脂質(zhì)納米顆粒通過(guò)腹膜內(nèi)注射遞送。
21.如上述任何權(quán)利要求所述的方法，其中所述受試者是人。
22.如上述任何權(quán)利要求所述的方法，其中在給予所述脂質(zhì)體之后向所述受試者給予所述脂質(zhì)納米顆粒。
23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中在所述脂質(zhì)體已經(jīng)在受試者體內(nèi)的靶點(diǎn)部位累積后，向所述受試者給予所述脂質(zhì)納米顆粒。
24.用于遞送治療劑至受試者的試劑盒，所述試劑盒包括:a)第一組合物，包含含有治療劑的脂質(zhì)體；和b)第二組合物，包含含有非離子型觸發(fā)劑的脂質(zhì)納米顆粒；其中，在向受試者給予 前，所述第一和第二組合物分開(kāi)存儲(chǔ)。
【文檔編號(hào)】A61K47/22GK104023793SQ201280064482
【公開(kāi)日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2012年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2011年10月31日
【發(fā)明者】J.楊, S.H.吳, C.J.赫曼 申請(qǐng)人:馬林克羅特有限公司