(3s,3s’）4，4’-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）和第二抗高血壓藥的組合的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其在至少一種可藥用的載體或賦形劑中包含（3S，3S’）4，4’-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥用的鹽或溶劑合物和選自血管緊張素I轉換酶抑制劑(ACEIs)和血管緊張素II1型受體拮抗劑的第二活性成分的組合。所述組合物特別可用于治療高血壓和相關疾病與病癥。
【專利說明】(3S, 3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）和 第二抗高血壓藥的組合 發(fā)明領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其在至少一種可藥用的載體或賦形劑中包含 (3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥用的鹽或溶劑合物和選自 血管緊張素 I轉換酶（EC 3. 4. 15. 1)抑制劑（ACEIs)和血管緊張素 II 1型受體（AT1R)拮 抗劑的第二活性成分的組合。所述組合物特別可用于治療高血壓和相關疾病與病癥。 技術背景
[0002] 高血壓是其原因通常仍未知的一種動脈疾病?？赡軈⑴c的外在因素包括肥胖、缺 乏鍛煉的生活方式、過量飲酒或攝入鹽，以及壓力。提議發(fā)揮作用的內在因素包括液體潴 留、交感神經(jīng)系統(tǒng)活性和血管收縮。動脈高血壓可以直接或間接導致心臟、周圍血管系統(tǒng)和 心腦血管系統(tǒng)、大腦、眼睛和腎臟的疾病。血糖控制和/或降低血壓（BP)是預防糖尿病并 發(fā)癥如腎病、視網(wǎng)膜病和神經(jīng)病變的主要治療策略。
[0003] 抗高血壓藥已經(jīng)廣泛用于治療高血壓和相關疾病與病癥。
[0004] 盡管可以使用超過75種抗高血壓藥，在普通人群中的BP控制及其相伴的風險因 素仍難以控制。事實上，65%的確診為高血壓的患者并不具有受控的高BP (<140/90mmHg)。 許多患者需要超過一種藥物以成功實現(xiàn)他們的目標BP水平，在許多情況下開出兩種或甚 至三種藥物組合的處方。目前的抗高血壓藥在非洲裔患者或患有糖尿病或腎功能不全（其 高BP與低血漿腎素水平和高血漿精氨酸升壓素（AVP)水平相關）的患者中也不那么有效。 最后，對至少三種抗高血壓藥（包括利尿劑）的耐藥性高血壓的總發(fā)病率估計為高血壓人 口的15%。因此，存在未滿足的醫(yī)療需求以開發(fā)具有不同作用機制的新的抗高血壓療法作 為替代或補充療法以進一步改善患者的BP控制和相關心血管風險。
[0005] 抗高血壓藥降低血壓BP，盡管不同組中作用機理相差巨大。在該治療分類中，存在 幾個亞類，包括非常大量的藥物，其中尤其在下文中列舉藥物，這些藥物是代表性的但是并 非是其分類中僅有的成員。動脈高血壓的治療包括使用噻嗪類利尿劑、β_腎上腺素能阻 斷劑（" β阻滯劑")、α / β -腎上腺素能阻斷劑、非特異性腎上腺素能阻斷劑、血管緊張素 轉換酶抑制劑（ACEIs)、AT1R拮抗劑（或血管緊張素 II 1型受體阻斷劑[ARBs])、鈣通拮 抗劑或阻滯劑（CCBs)和直接血管擴張劑。
[0006] 噻嗪類利尿劑包括氯噻嗪、氫氯噻嗪（或HCTZ)、氯噻酮、吲達帕胺、多噻嗪和氫氟 噻嗪。該分類中的藥物經(jīng)幾種機理降低BP。通過促進鈉流失，它們降低血容量。同時，降低 了血管壁壓力和外周血管阻力。噻嗪類利尿劑通常用作降低輕度高血壓的首選，并通常與 其它抗高血壓藥組合使用。特別地，氫氯噻嗪以及較小程度的氯噻酮與特定ACEIs、ARBs、 β阻滯劑和其它利尿劑的組合目前是用于抗高血壓的可用組合。
[0007] 理想的是識別進一步的組合以治療動脈高血壓。
[0008] ACEIs通過已知血管緊張素 II的產(chǎn)生來起作用，血管緊張素 II是一種肽物質，其 通過作用于ATI受體來誘發(fā)血管收縮和鈉滯留，導致水潴留和提高的血容量。存在許多目 前可以在市場上獲得的ACEIs，包括卡托普利、雷米普利、喹那普利、依那普利、培哚普利和 貝那普利。這些藥物之間的主要差別在于它們起作用的開始與持續(xù)時間。
[0009] ARB類，如氯沙坦、坎地沙坦、厄貝沙坦、替米沙坦、纈沙坦、奧美沙坦和依普羅沙坦 阻斷血管緊張素 II對ATI受體的作用而非阻斷其生產(chǎn)（如ACEIs)。
[0010] ACEIs和ARBs由此通過經(jīng)由ACE抑制作用防止其形成或通過防止血管緊張素 II 結合到ATI受體來針對全身腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS)，更特別針對血管緊張素 II。在 兩種情況下，抑制導致血管擴張和BP降低。
[0011] 最近的證據(jù)支持在大腦中也存在功能性RAS，其控制心血管功能和體液平衡 (Llorens-Cortes C. and Mendelsohn FA. Organisation and functional role of the brain angiotensin system. J Renin Angiotensin Aldosterone Syst 2002 年 9 月； 3Suppl 1:S39-S48)。腦RAS且特別是氨基肽酶A(APA)--分別涉及體內腦血管緊張 素 II(Angll)和血管緊張素 III(Anglll) (Zini等人PNAS1996)的膜結合鋅金屬蛋白 酶--的過度活躍在各種高血壓動物模型中調節(jié)高血壓方法起到了至關重要的作用 (Marc Y. and Llorens-Cortes C. The role of the brain renin-angiotensin system in hypertension:Implications for new treatment. Prog Neurobiol. 2011 年 7 月 7 日； 95(2) :89-103)。一些研究指出，在大腦中，Anglll而非在神經(jīng)末梢周圍建立的Ang II構成 了在BP控制和AVP釋放方面腦RAS主要效應肽之一（Zini等人PNAS1996, Reaux等人PNAS 1999)。此外，腦Anglll對于在高血壓動物體內控制BP起到了緊張性刺激作用（Reaux等人 PNAS 1999, Fournie-Zaluski 等人 PNAS 2004)。因此，腦 APA，在腦 RAS 中生成 Amglll 的 酶，構成了治療動脈高血壓的治療目標，中樞活性APA抑制劑代表了新一類抗高血壓藥。在 這些新型抗高血壓藥中，特別可以提及（3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺 酸），其是選擇性氨肽酶A (APA)抑制劑3-氨基4-巰基丁烷磺酸（也稱為EC33)的前藥。
[0012] 除了在使用可用的整套藥物治療的高血壓患者體內改善BP控制之外，流行病學 研究支持了對開發(fā)新一類抗高血壓藥如（3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺 酸）和新藥物組合的需要，所述新一類抗高血壓藥和新藥物組合可以干擾涉及在不受控制 和/或耐藥性患者體內高BP的發(fā)生和維持的機理，與現(xiàn)有治療相比表現(xiàn)出降低的副作用并 降低了心血管疾病如心肌梗死、心跳停止、中風或腎功能不全的相關風險。
[0013] 發(fā)明概沭
[0014] 發(fā)明人確定了能獲得顯著降壓效果的極有前途的藥物組合。更特別地，這種顯著 的降壓效果在口服抗高血壓藥后早期（特別是小于2小時）發(fā)生并以令人滿意的方式保 持。
[0015] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其在至少一種可藥用的載體或 賦形劑中包含（3S，3S'）4, 4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥用的鹽或溶 劑合物和選自ACEIs與ARBs的第二活性成分的組合。
[0016] 所述組合物特別可用于治療動脈高血壓或間接或直接相關疾病。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的另一實施方案，公開了用于治療高血壓和間接或直接相關疾病的方 法。該方法和本發(fā)明的用途包括向需要此類治療的對象施用有效量的藥物組合物，所述藥 物組合物在至少一種可藥用的載體或賦形劑中包含（3S，3S'）4, 4'-二硫烷二基雙（3-氨基 丁烷1-磺酸）或其可藥用的鹽或溶劑合物和選自ACEIs與ARBs的第二活性成分的組合。
[0018] 發(fā)明描沭
[0019] 該ACEIs更特別包括賴諾普利、依那普利、喹那普利、雷米普利、貝那普利、卡托普 利、西拉普利、福辛普利、咪達普利、莫昔普利、群多普利和培哚普利。根據(jù)一個優(yōu)選實施方 案，該ACEI選自依那普利、卡托普利、雷米普利和喹那普利。更具體而言，該ACEI是依那普 利。
[0020] 該ARBs更特別包括氯沙坦、坎地沙坦、厄貝沙坦、替米沙坦、纈沙坦、奧美沙坦和 依普羅沙坦。根據(jù)一個優(yōu)選實施方案，該ARB選自氯沙坦、坎地沙坦、纈沙坦和奧美沙坦。更 具體而言，該ARB是纟顏沙坦。
[0021] (35,35'）4,4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）是選擇性氨基肽酶八(八?八） 抑制劑3-氨基4-巰基丁烷磺酸（也稱為EC33)的二聚物，通常通過在兩個3-氨基4-巰基 丁烷磺酸分子的硫醇基之間產(chǎn)生二硫鍵而生成。二聚化提供了更容易穿過腸胃和血-腦屏 障的分子作為前藥。（33,35'）4,4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）（也稱為1?150) 已經(jīng)證實是有效的抗高血壓藥，如Fournie-Zaluski等人PNAS 2004和Bodineau等人在 Hypertension 200851，1318-1325 中描述的那樣。
[0022] (3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）及其作為抗高血壓藥的用 途已經(jīng)公開在專利申請W0 2004/007441中。
[0023] 還可以使用其可藥用的鹽或溶劑合物。
[0024] 事實上，有機化合物可以與溶劑形成復合物，在該溶劑中它們反應，或它們從該 溶液中沉淀或結晶。這些復合物稱為"溶劑合物"。例如，與水的復合物稱為"水合物"。 (3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）的溶劑合物在本發(fā)明的范圍內。有 機化合物可以以超過一種結晶形式存在。例如，各溶劑合物的結晶形式可能不同。由此 (3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥用的溶劑合物的所有結晶 形式在本發(fā)明的范圍內。
[0025] 本領域技術人員還要理解的是，（3S，3S'）4,4'_二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺 酸）還可以以其可藥用鹽的形式使用。（3S，3S'）4,4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺 酸）的可藥用鹽包括由可藥用的無機或有機酸或堿形成的常規(guī)鹽以及季銨鹽。合適的酸 式鹽的更具體的實例包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、乙酸、丙酸、琥珀 酸、羥基乙酸、甲酸、乳酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、雙羥萘酸鹽（palmoic)、丙二酸、羥基馬 來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羥 萘甲酸、氫碘酸、蘋果酸、steroic、鞣酸等等。其它酸如草酸，雖然本身不可藥用，但可用于 制備可用作獲得本發(fā)明化合物及其可藥用鹽的中間體的鹽。合適的堿式鹽的更具體實例 包括鈉、鋰、鉀、鎂、鋁、鈣、鋅、Ν，Ν'-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、 Ν-甲基葡糖胺和普魯卡因的鹽。下文中提到（3S，3S'）4,4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷 1-磺酸）包括酸形式及其可藥用的鹽和溶劑合物。
[0026] 在優(yōu)選的實施方案中，與高血壓間接或直接相關的疾病選自心臟、周圍血管系統(tǒng) 和心腦血管系統(tǒng)、大腦、眼睛和腎臟的疾病。特別地，疾病包括原發(fā)性和繼發(fā)性動脈高血壓、 猝發(fā)、心肌缺血、心衰竭、腎衰竭、心肌梗死、周圍血管疾病、糖尿病蛋白尿、X綜合征和青光 眼。其還可以更特別包括高血壓糖尿病患者的腎病、視網(wǎng)膜病和神經(jīng)病變。
[0027] 在本發(fā)明的情況下，術語治療是指根治治療、癥狀治療和預防治療。本發(fā)明的組合 物可用于患有現(xiàn)有高血壓的人類。本發(fā)明的組合物不一定能夠治愈患有高血壓的患者，但 是可以以令人滿意的方式控制BP，由此延遲或減緩其進展，或由此進一步預防高血壓的并 發(fā)癥，如上述的直接或間接疾病。這將會因此改善患者的病情。本發(fā)明的組合物還可以施 用于那些不具有間接或直接疾病但是通常會發(fā)展此類疾病或具有提高的所述疾病風險的 患者，它們將不會發(fā)展所述疾病。治療還包括在因年齡、家族史、遺傳或染色體異常而最終 將發(fā)展所述疾病或具有所述疾病風險的個體中延緩間接或直接疾病的發(fā)展。通過延緩間接 或直接疾病的開始，本發(fā)明的組合物在其中該個體通常已罹患該疾病的時期內防止該個體 罹患該疾病，或施用本發(fā)明的組合物直到該個體最終罹患該疾病為止降低了疾病或其某些 效果的發(fā)展速率。
[0028] 在治療高血壓時，本發(fā)明的組合物以治療有效量施用。
[0029] 在本發(fā)明的一個方面，（3S，3S'）4,4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）和 第二抗高血壓藥的量足以產(chǎn)生協(xié)同降壓作用。
[0030] 在更優(yōu)選的實施方案中，該第二抗高血壓藥是如上文定義的ACEI。
[0031] 本發(fā)明的藥物組合物可用于治療高血壓或間接或直接相關疾病。
[0032] 本發(fā)明的藥物組合物有利地含有一種或多種可藥用的載體或賦形劑。更優(yōu)選地， 該組合物意在口服，該可藥用的載體或賦形劑由此適于口服。作為實例，可以提及與藥物用 途相容并且是本領域技術人員已知的鹽水、生理學溶液、等滲溶液、緩沖溶液等等。
[0033] 包含活性成分，S卩（3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可 藥用的鹽或溶劑合物和選自ACEIs與ARBs的第二活性成分的組合的藥物組合物可以通過 將活性成分一起全部或單獨地與生理可接受的載體、賦形劑、粘合劑或稀釋劑等等混合在 一起來制備。本發(fā)明的藥物組合物更具體用于同時、單獨或順序施用所述活性成分，優(yōu)選用 于同時施用所述活性成分。
[0034] 該藥物組合物隨后口服施用或非口服施用，例如經(jīng)由胃腸外、靜脈內、皮膚、經(jīng)鼻、 直腸途徑或經(jīng)由氣溶膠輸送至肺。如果活性成分獨立配制，相應制劑可以使用例如稀釋劑 臨時混合在一起并隨后施用，或者可以彼此獨立地、連續(xù)或順序地施用。
[0035] 優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物口服施用。
[0036] 本發(fā)明的藥物組合物包括制劑，如顆粒、粉劑、片劑、凝膠膠囊、糖漿、乳劑和混懸 齊U，以及用于非口服施用的形式，例如注射劑、噴霧劑或栓劑。
[0037] 該藥物劑型可以經(jīng)由已知的常規(guī)技術來制備。
[0038] 口服固體藥物劑型的制備將通過下列方法進行：將賦形劑（例如乳糖、蔗糖、淀 粉、甘露醇等）、崩解劑（例如碳酸鈣、羧甲基纖維素鈣等）、粘合劑（例如淀粉、阿拉伯膠、 羧甲基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、羥丙基纖維素等）和潤滑劑（例如滑石、硬脂酸鎂等） 例如添加到該活性成分中并隨后將獲得的混合物壓片。如果需要的話，可以經(jīng)由已知技術 將該片劑包衣以掩蓋味道（例如用可可粉、薄荷等）或允許活性成分的腸溶或持續(xù)釋放。可 以添加可藥用著色劑。藥物劑型如片劑、粉劑、囊劑和凝膠膠囊可用于口服。
[0039] 用于口服的液體藥物劑型包括溶液、混懸劑和乳劑?？梢酝ㄟ^在水中溶解該活性 成分并隨后在必要時添加調味劑、著色劑、穩(wěn)定劑和增稠劑來獲得該水溶液。為了改善溶解 度，可能加入乙醇、丙二醇或其它可藥用的非水性溶劑。用于口服施用的水性混懸劑可以通 過用粘性產(chǎn)品如天然或合成樹膠、樹脂、甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉將細碎的活性成分 分散在水中來獲得。
[0040] 可以通過例如下列方法獲得用于注射的藥物劑型。將該活性成分與分散劑、防腐 齊IJ、等滲劑以及其它添加劑如在需要的情況下的增溶劑或穩(wěn)定劑一起溶解、懸浮或乳化在 水性介質（例如蒸餾水、生理鹽水、林格氏溶液等）或在油性介質（例如植物油，如橄欖油、 芝麻油、棉籽油、玉米油等，或丙二醇）中。
[0041] 可以由含有該活性成分的固體、半固體或液體組合物獲得用于外用的藥物劑型。 例如，為了獲得固體劑型，將活性成分單獨或混合地與賦形劑和增稠劑一起處理以將其轉 化為粉末。液體藥物組合物以與如前所述的注射劑型基本相同的方式制備。半固體藥物劑 型優(yōu)選為水性或油性凝膠形式或為香膏劑形式。這些組合物可以任選含有pH調節(jié)劑以及 其它添加劑。
[0042] 由本領域技術人員確定本發(fā)明的組合物或活性成分的治療有效量（即有效劑 量）。更具體而言，有效量是能夠降低和保持BP以控制BP，特別是建議〈140/90毫米汞柱 的BP目標的量。更優(yōu)選地，（3S，3S'）4,4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）和第二 抗高血壓藥的量足以產(chǎn)生協(xié)同降壓作用。本發(fā)明的組合物可以每周施用至少一次，但也可 以每天一次或每2、3、4、5或6天一次。
[0043] 此外，要理解的是，用于治療所需的本發(fā)明的活性成分的量將隨著待治療的病癥 的性質以及對象的年齡與條件而改變，并最終取決于主治醫(yī)生或獸醫(yī)。但是，通常，用于成 人治療的劑量通常為每天或每隔一天〇. 02-5000毫克,優(yōu)選每天或每隔一天1-1500毫克的 (3S，3S'）4, 4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）。對于第二抗高血壓藥，用于成年人 治療的劑量將考慮其推薦劑量。所需劑量將方便地以單一劑量或以適當間隔敷用的分次劑 量（例如每天或每隔一天的兩個、三個、四個或更多個分劑量）呈現(xiàn)。本發(fā)明的組合物對于 片劑和膠囊可以含有〇. 1-99%的各活性成分，方便地為30-95%，對于液體制劑為3-50%。
[0044] 活性成分的相對比例可以根據(jù)對象條件和根據(jù)第二所選活性成分而改變。例如， (3S，3S'）4,4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）相對于依那普利的重量比可以為 10/1 至 300/1，優(yōu)選為 25/1 至 200/1。（3S，3S，）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷 1-磺 酸）相對于纈沙坦的重量比可以為5/1至500/1，優(yōu)選為10/1至200/1。施用本發(fā)明的活 性成分的頻率優(yōu)選為每天或每隔一天施用一次到兩次。
[0045] 根據(jù)本發(fā)明，對象可以是人類或動物。
[0046] 本發(fā)明的目的還在于提供如上定義的方法或組合物，其中共同施用兩種活性成 分。本發(fā)明涉及經(jīng)由共同施用有效量的（3S，3S'）4, 4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺 酸）或其可藥用的鹽或溶劑合物和選自ACEIs與ARBs的第二活性成分進行治療的如上定 義的方法或組合物，以及允許這種共同施用的試劑盒。
[0047] 本發(fā)明還涉及適于通過上述方法進行治療的試劑盒。這些試劑盒包含含有 (3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥用的鹽或溶劑合物的組合 物和含有選自ACEIs與ARBs的第二活性成分的第二組合物，以便同時、單獨或順序施用，優(yōu) 選用于同時施用。
[0048] 該藥物組合物可以與施用說明書一起包含在容器、包裝或分配器中。
[0049] 術語"共同施用"指的是經(jīng)最多2小時或甚至最多6小時的時段向同一對象或患 者同時、單獨或順序施用兩種活性成分。例如術語共同施用包括（1)同時施用兩種活性成 分，（2)施用第一活性成分，接著在2小時后施用第二活性成分，（3)施用第一活性成分，接 著在6小時后使用第二活性成分。
[0050] 根據(jù)一個優(yōu)選實施方案，兩種活性成分同時共同施用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0051] 圖1 :通過口服途徑單獨或組合給出的RB150和依那普利對警戒自發(fā)性高血壓大 鼠（急性期治療）的BP的效果--H p〈〇, 05vs RB150 ;*p〈0, 05vs依那普利；對于依那普 利和依那普利+RB150, η = 4,對于RB150, n>7。
[0052] 圖2 :在口服RB150或依那普利后清醒SHR的平均動脈血壓（MABP)變化。在服藥 (B)后在不同時間處在清醒小鼠體內在緊急口服RB150(15-150毫克/千克）或依那普利 (3毫克/千克）后在平均動脈BP的峰值變化（ΛΜΑΒΡ，以毫米汞柱為單位，平均值土 SEM)。 非配對t檢驗，*P〈0. 05 ;#P〈0. 01 ;#*P〈0. OOlvs在口服生理鹽水后在SHR中獲得的相應 MABP值的變化。
[0053] 圖3 :在緊急口服單獨或組合給出的RB150 (100毫克/千克）或纈沙坦（1毫克/ 千克）后在清醒小鼠體內的平均動脈血壓（MABP)變化。在服藥后不同時間處（對每劑量 的η = 3至5)的MABP的峰值變化（ΛΜΑΒΡ，以毫米汞柱為單位，平均值土SEM)。
[0054] 圖4 :在緊急口服單獨或組合給出的RB150 (100毫克/千克）或纈沙坦（0. 3毫克 /千克）后在清醒小鼠體內的平均動脈血壓（MABP)變化。在服藥后不同時間處（對每劑量 的η = 3)的MABP的峰值變化（Λ MABP，以毫米汞柱為單位，平均值土 SEM)。
[0055] 給出本發(fā)明的組合物的下列實例作為非限制性例示。 實施例
[0056] 除非另行說名，量基于重量表示。
[0057] 材料和方法
[0058] 活件成分
[0059] 將 RB150、ACEI、依那普利（由 Merck Sharp and Dohme research Lab 提供）和 八1?、纈沙坦（518111&41(11^(*)溶解在無菌鹽水中并調節(jié)至？!17.4用于體內施用。
[0060] 動物
[0061] 雄性自發(fā)性高血壓大鼠（SHR)，稱重250至350克，獲自Charles River Laboratories (L' Arbresle, France)，并將動物關在人造光源下（12小時光照/12小時黑 暗周期），給予正常飲食標準，水無限供應。根據(jù)National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals 進行試驗。
[0062] 外科方法和血壓記錄
[0063] 十二周雄性SHR用戊巴比妥鈉（60毫克/千克，腹膜內，Centravet)麻醉。在股動 脈中植入導管。股動脈導管在皮膚下輸送并在頸背處出現(xiàn)。在手術后，各大鼠給予腹膜內 注射0. 1暈升青霉素-鏈霉素（50, 000單位/暈升；Sigma)并在試驗前令其恢復至少24小 時。通常，在清醒的、自由活動的小鼠中經(jīng)口施用鹽水、RB150(100毫克/千克）或依那普利 (1毫克/千克）或纈沙坦（〇. 3毫克/千克）。例如，為了制備口服溶液，首先將RB150加 依那普利、RB150和依那普利在無菌鹽水中分別稀釋至15毫克/毫升和6毫克/毫升。隨 后對稱重為300克的大鼠，將0. 05暈升的依那普利（6暈克/暈升）與2暈升的RB150 (15 毫克/毫升）混合，并將通過管飼法將2毫升最終溶液口服給予SHR。在治療后，在試驗的 第一天連續(xù)監(jiān)控動脈血壓（MABP)和心率（HR) 6小時。在給藥后24小時進行另一次1小時 記錄。通過使用連接到由MacLab硬件單元和在Macintosh計算機上運行的圖表軟件組成的 MacLab系統(tǒng)（Phym印）上的C0BE⑶X III壓力傳感器監(jiān)控各試驗。通過BP信號計算MABP 和HR。
[0064] 數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計
[0065] 對口服RB150后的MABP與HR進行配對或非配對t檢驗。進行方差的階乘雙向分 析（AN0VA)以測試時間和治療對ΛΜΑΒΡ的不同變量的相互作用。通過階乘單因素方差分 析和Fisher PLSD測試在每個時間處比較各次治療中的治療組和鹽水組。如果P值〈0. 05， 則被認為差異顯著。
[0066] 益果
[0067] 聯(lián)合緊急口服RB150與依那普利對自由運動的SHR的BP與HR的作用
[0068] 在清醒的SHR中，聯(lián)合口服RB150(100毫克/千克）與依那普利（1毫克/千克） 顯著和引人注意地降低了 MABP (圖1)，而沒有顯著改變HR(未顯示）。在施用后一小時，BP 的降低（_24±2. 9毫米汞柱）已經(jīng)非常明顯（圖1)。在使用后6小時觀察到MABP的最大 降低（_42±3.6毫米汞柱）。對每個時間，RB150(100毫克/千克，po)加依那普利（1毫克 /千克，P〇)的組合引發(fā)的降壓效果明顯不同于單獨施用的各化合物的降壓效果。這在給藥 后一小時特別明顯。事實上，在服藥后1小時，甚至更高劑量的單獨的RB150(即150毫克/ 千克，口服）或依那普利（即3毫克/千克，口服）也沒有在SHR中引發(fā)任何顯著的BP降 低（圖2)。
[0069] 聯(lián)合緊急口服RB150與纈沙坦對自由運動的SHR的BP與HR的作用
[0070] 在清醒的SHR中，相伴口服RB150(100毫克/千克）與纈沙坦（1毫克/千克）顯 著降低了 MABP (圖3)。但是在該劑量的纈沙坦下，由該組合引發(fā)的B0降低并未顯著不同于 單獨施用的各化合物引發(fā)的B0降低。有趣的是，聯(lián)合口服RB150(100毫克/千克）與較低 劑量的纈沙坦（即0. 3毫克/千克）也在清醒SHR中顯著降低了 MABP(圖4)。在施用后4 至6小時之間觀察到最大BP降低（-40至-45毫米萊柱）。在施用后4至6小時之間，通過 RB150 (100毫克/千克，口服）和纈沙坦（0.3毫克/千克）的組合引發(fā)的降壓效果不同于 單獨施用的各化合物的降壓效果。這在施用后4小時特別明顯。表明RB150與纈沙坦的組 合可以改善BP控制，同時減少纈沙坦的劑量。
[0071] 配制實施例：
[0072] 可以制備以50/1重量比混合（3S，3S'）4, 4' -二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺 酸）和依那普利的下列藥物組合物用于治療單位制劑。該藥物組合物可以調節(jié)至玻璃小瓶 中。粉末在口服使用前臨時用1〇〇毫升水重構。
[0073]

【權利要求】
1. 藥物組合物，其在至少一種可藥用的載體或賦形劑中包含（3S，3S'）4, 4'-二硫烷二 基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥用的鹽或溶劑合物和選自血管緊張素轉換酶抑制劑 和血管緊張素 II 1型受體拮抗劑的第二活性成分的組合。
2. 根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其中該血管緊張素轉換酶抑制劑選自依那普 利、卡托普利、雷米普利和喹那普利。
3. 根據(jù)權利要求1或2所述的藥物組合物，其中該血管緊張素轉換酶抑制劑是依那普 利。
4. 根據(jù)前述權利要求任一項所述的藥物組合物，其中該血管緊張素 II 1型受體拮抗 劑選自氯沙坦、坎地沙坦、纈沙坦和奧美沙坦。
5. 根據(jù)權利要求1或4所述的藥物組合物，其中該血管緊張素 II 1型受體拮抗劑是纈 沙坦。
6. 根據(jù)前述權利要求任一項所述的藥物組合物，其中該可藥用的載體或賦形劑適于口 服。
7. 根據(jù)權利要求3所述的藥物組合物，其中（3S，3S'）4, 4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁 烷1-磺酸）相對于依那普利的重量比為25/1至300/1，優(yōu)選為50/1至200/1。
8. 根據(jù)權利要求5所述的藥物組合物，其中（3S，3S'）4, 4'-二硫烷二基雙（3-氨基丁 烷1-磺酸）相對于纈沙坦的重量比為5/1至500/1，優(yōu)選為10/1至200/1。
9. 根據(jù)前述權利要求任一項所述的藥物組合物，用于治療動脈高血壓或間接或直接相 關疾病，尤其是心衰竭。
10. 根據(jù)權利要求7或8所述的藥物組合物，其中兩種活性成分共同施用，優(yōu)選同時共 同施用。
11. 試劑盒，包含含有（3S，3S'）4,4'_二硫烷二基雙（3-氨基丁烷1-磺酸）或其可藥 用的鹽或溶劑合物的組合物和含有選自血管緊張素轉換酶抑制劑與血管緊張素 II 1型受 體拮抗劑的第二活性成分的第二組合物，用于同時、單獨或連續(xù)施用，優(yōu)選用于同時施用。
【文檔編號】A61K31/255GK104220062SQ201280069935
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2012年12月21日 優(yōu)先權日:2011年12月21日
【發(fā)明者】凱瑟琳·洛朗-科特斯, 亞尼·馬克, 吉·高-德利昂, 法布里斯·巴拉瓦納, 萊昂內爾·塞加爾 申請人:量子基因公司, 法國國家健康醫(yī)學研究院