亞氯酸鹽或氯酸鹽脂質(zhì)體組合物的制作方法
【專利摘要】本申請(qǐng)包括包含包封在脂質(zhì)體核心內(nèi)部的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體和脂質(zhì)體組合物、其制備方法和使用方法，特別是作為藥物的使用方法。
【專利說明】亞氯酸鹽或氯酸鹽脂質(zhì)體組合物
[0001] 本申請(qǐng)要求2011年12月22日提交的第61/57, 326號(hào)共同待審（copending)美 國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容以其整體援引加入本文。
[0002] 申請(qǐng)領(lǐng)域
[0003] 本申請(qǐng)涉及含有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體組合物，其制備方法及其 使用方法，例如作為藥物的使用方法。
[0004] 申請(qǐng)背景
[0005] 脂質(zhì)體
[0006] 對(duì)于將脂質(zhì)體作為用于藥物遞送的載體已進(jìn)行了廣泛的研究。已有將脂質(zhì)體 有效用于藥物和疫苗的遞送的報(bào)道（Gregoriadis，G. TIBITECH，1995,13:527-537及其 中所引用的參考文獻(xiàn)）。例如，基于脂質(zhì)體的藥物遞送系統(tǒng)廣泛用于給藥如鹽酸多比柔 星（以Doxil和Myocet的形式上市）的藥物的靜脈內(nèi)抗癌化療（Abraham等人，Methods Enzymol. 2005, 391:71-91)。脂質(zhì)體還可以用于遞送吸入型氣霧劑藥物，例如：1)胰島 素 （Huang等人，J Control Release，2006，113:9-14) ;2)抗生素，特別是革巴向肺泡巨 噬細(xì)胞結(jié)核感染的抗生素 （Vyas等人，Int J Pharm. 2005,296:12-25) ;3)抗癌化療藥 物（Verschraegen 等人 Clin Cancer Res. 2004, 10:2319-2326);以及 4)其它（參見第 5, 049, 388號(hào)美國(guó)專利）。
[0007] 將特定大小的有機(jī)分子包含于脂質(zhì)體中更常見。已知較小的分子（如乙醇、葡萄 糖、氨和乙酸酯）會(huì)滲透穿過脂質(zhì)體的脂雙層。將該行為稱作滲漏。
[0008] 雖然有將脂質(zhì)體成功用作藥物遞送系統(tǒng)的實(shí)例，對(duì)于許多應(yīng)用仍有未滿足的挑 戰(zhàn)?；瘜W(xué)穩(wěn)定性和物理穩(wěn)定性、清除率、包封率和靶向性是其中一些最大的挑戰(zhàn)，特別是當(dāng) 要包封較小的分子時(shí)。
[0009] 亞氯酸鹽、氯酸鹽及其混合物
[0010] 在本文中稱為亞氯酸鹽的亞氯酸根離子（C1CV)已用于多種場(chǎng)景中。亞氯酸鈉是 強(qiáng)氧化劑，其已用于水凈化、消毒以及漂白和除臭。在酸性條件下，亞氯酸鈉產(chǎn)生高毒性的 二氧化氯氣體，因此使用的水性溶液通常以強(qiáng)堿性（大約pH 13)溶液的形式提供，使用如 氫氧化鈉的堿性物質(zhì)調(diào)節(jié)pH。
[0011] 氯酸鹽也已用于多種場(chǎng)景中。在本文中稱為氯酸鹽的氯酸根離子（C1CV)是 強(qiáng)氧化劑，并以用于煙花、消毒和殺蟲藥中。此外，氯酸鹽被用作用于治療皮膚疾病的抗 真菌劑（第5, 427,801號(hào)美國(guó)專利），并已發(fā)現(xiàn)其可逆性抑制沙眼衣原體（Chlamydia trachomatis)感染的細(xì)胞中蛋白聚糖的硫酸化（JMed Microbiol, 2004年2月第53卷第2 期：93-95)。
[0012] 包含亞氯酸鹽和氯酸鹽的混合物的組合物也已用于多種場(chǎng)景中，例如用于治療多 種疾病和病況。穩(wěn)定化的亞氯酸鹽是此類組合物的非限制性例例。例如，第4, 725, 437、 4, 507, 285和4, 851，222號(hào)美國(guó)專利公開了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽用于治療傷口和感染以及使 骨髓再生的用途。在第2011/0076344號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公開中描述了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽用 于抑制抗原特異性免疫應(yīng)答的用途。第2001/017030號(hào)PCT專利申請(qǐng)公開中公開了通過給 藥氧化劑（如穩(wěn)定化的亞氯酸鹽）對(duì)于多種巨噬細(xì)胞相關(guān)的病癥的治療。第7, 105, 183號(hào) 美國(guó)專利描述了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽用于治療巨噬細(xì)胞相關(guān)的神經(jīng)變性（neurogenerative) 疾病的用途。第5, 877, 222號(hào)美國(guó)專利描述了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽在治療AIDS相關(guān)的癡呆 中的用途。第2008/145376號(hào)PCT專利申請(qǐng)公開報(bào)道了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽在治療變應(yīng)性哮 喘、變應(yīng)性鼻炎和遺傳特應(yīng)性皮炎中的用途。第2007/009245號(hào)PCT專利申請(qǐng)公開中公開 了與氟嘧啶組合的穩(wěn)定化的亞氯酸鹽在癌癥治療中的用途。第2001/012205號(hào)PCT專利申 請(qǐng)公開中公開了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽用于治療癌癥和其它受調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能影響的病況 的用途。第255145號(hào)EP專利申請(qǐng)公開了穩(wěn)定化的亞氯酸鹽在眼科學(xué)中的用途。已報(bào)道 了評(píng)估穩(wěn)定化的亞氯酸鹽在對(duì)患有晚期出血性放射性膀胱炎和直腸炎的患者的治療中的 用途的二期研究（Veerasarn，V·等人，Gynecologic Oncology, 2006, 100:179-184)。已證 明穩(wěn)定化的亞氯酸鹽在哨齒動(dòng)物心臟模型（Hansen, A.等人，Pharmacology&Toxicology， 2001,89:92-95)和其它研究（Kemp, Ε·等人，Transplantation Proceedings, 2000,32:1018-1019)中延長(zhǎng)異種移植物的存活。也已報(bào)道穩(wěn)定化的亞氯酸鹽的抗菌 作用(Stoll, P.等人，Zeitschrift fuer Antimikrobielle und Antineoplastische Chemotherapie，1993，11:15-20 ;Stoll，P.等人，Chemotherapy, 1993,39:40-47 ; Hollfelder，K.等人，Reakt.Sauerstoffspezies Med, 1987, 253-262 ;Adamczyk，R.等人， Reakt. Sauerstoffspezies Med, 1987, 247-252 ；Gillissen, G.等人，Arzneimittel-Forsc hung, 1986,36:1778-1782 ;Ullmann，U.等人，Infection, 1985,13:S236-S240 ;Ullmann，U. 等人，Infection，1984,12:225-229)。近期研究表明穩(wěn)定化的亞氯酸鹽能夠刺激自然殺傷 (NK)細(xì)胞對(duì)惡性細(xì)胞的細(xì)胞毒性，這與穩(wěn)定化的亞氯酸鹽增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞免疫的能力有關(guān) (Kuhne, L.等人，Biomedicine and Biotechnology, 2011，ρ· 436587) 〇
[0013] 在上述出版物中，所述亞氯酸鹽是穩(wěn)定化的亞氯酸鹽的可商購(gòu)劑型的形式，其稱 為Oxovasin?(局部劑型）或者WF10(用于靜脈內(nèi)給藥的藥物產(chǎn)品）。Oxovasin?和WF10 為0X0-K993的稀釋液，0X0-K993本身是水性溶液。最初認(rèn)為0X0-K993是含有叫作四氯 十氧（tetrachlorodecaoxygen，TO)0)的化合物作為活性成分的溶液，并且在過去的文 獻(xiàn)中經(jīng)常使用術(shù)語(yǔ)四氯十氧、十氧化四氯（tetrachlorodecaoxide)和TO)0指代WF10和 Oxoferin中的活性劑。但是，隨后的分析測(cè)試測(cè)定0Χ0-Κ993不包含Τ⑶0,而是亞氯酸根 離子、氯離子、氯酸根離子和硫酸根離子及鈉陽(yáng)離子的水性溶液。因此，向患者靜脈內(nèi)給藥 WF10或者局部施用Oxoferin?時(shí)必然（entail)遞送離子的混合物。0X0-K993可得自NUV0 Manufacturing GmbH(Wanzleben, Germany)。在第 4, 507, 285 號(hào)美國(guó)專利中描述 0X0-K993 及其制備。已發(fā)表描述0X0-K993和WF10的綜述文章，其描述了該物質(zhì)在當(dāng)時(shí)已知的多種用 途（Drugs in R&D, 2004, 5:242-244 ;McGrath等人，Current Opinion in Investigational Drugs, 2002, 3:365-373)。
[0014] 包封方法：
[0015] 第5, 269, 979號(hào)美國(guó)專利公開了形成用于包封過客（passenger)分子的叫作溶劑 稀釋微載體（SDMC)的載體的方法。使用多步方法形成包封載體：首先涉及"形成（formed) 溶液"的制備，然后通過構(gòu)建（organization)步驟導(dǎo)致從所述"形成溶液"中生成所述 SDMC。所述"形成溶液"通過以下步驟制備：將兩親性（amphiphatic)物質(zhì)和過客分子在有 機(jī)溶劑中溶解，然后加入水得到渾濁的溶液，然后加入更多的有機(jī)溶劑以得到澄清的"形成 溶液"?？蓪⑿纬扇芤毫⒓词褂没騼?chǔ)存。使用構(gòu)建步驟制備SDMC，所述構(gòu)建步驟可包括：將 所述"形成溶液"稀釋入水性體系中，原位霧化或者再水合。在SDMC中，過客分子包封于雙 分子層自身中，或者與雙分子層的組分結(jié)合，而不是在由球形的雙分子層所生成的空間內(nèi) 部。包封在SDMC中的載體分子有十氧化四氯（TCDO)。注意到在該申請(qǐng)中描述的方法不包 括"純化"步驟，使得在SDMC制備中使用的所有物質(zhì)保留在測(cè)試使用的最終溶液中。
[0016] 第2, 636, 812號(hào)加拿大專利申請(qǐng)公開了用于在水性介質(zhì)中排出包封的物質(zhì)的包 膜（enveloping membrane)。在一個(gè)實(shí)例中，所述包封的物質(zhì)為氧化性的氯氧化合物，特別 是T⑶0。所述包膜在中性水性介質(zhì)中為不溶的并且水可滲透，其通常由陽(yáng)離子或者陰離子 的水不溶性聚合物構(gòu)成。該申請(qǐng)中所制備的組合物可用于液體和基質(zhì)表面的消毒和純化， 以及用于水的消毒。
[0017] 第KR2003/072766號(hào)韓國(guó)專利申請(qǐng)公開中公開了口服衛(wèi)生組合物，其包含亞氯酸 鹽（具體為亞氯酸鈉），以及包封在脂質(zhì)體中的鋅離子。此組合物可另外含有載體或者賦 形劑，其可具有雙相或者單相結(jié)構(gòu)，并且pH為7-8. 5。在一實(shí)例中，所述脂質(zhì)體由卵磷脂制 備。
[0018] 第W0 00/19981號(hào)的PCT專利申請(qǐng)公開中公開了抗菌制劑，其包含與過氧化合物 (例如過氧化氫）組合的亞氯酸鹽，以及使用這些制劑來(lái)對(duì)物品或表面進(jìn)行消毒的方法。所 述制劑可被配制為脂質(zhì)體的形式，其pH可為6. 8-7. 8。亞氯酸鹽和過氧化合物都是對(duì)于微 生物活性所需要的。在該申請(qǐng)中顯然未制備真正的脂質(zhì)體制劑。
[0019] 第2007/0145328號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公開中公開了用于腸胃外、全身或靜脈內(nèi)給藥 的亞氯酸鹽（如亞氯酸鈉）制劑，其含有亞氯酸鹽和pH調(diào)節(jié)劑。所述pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)所述 制劑的pH，使其處于約7至約11. 5的范圍。該申請(qǐng)教導(dǎo)所述制劑的毒性低于WF10。
[0020] Panasenko 等人（Member Cell Biol，1997 ;11 (2) :253-8)公開了次氯酸鈉 (NaCIO)、亞氯酸鈉（NaC102)、氯酸鈉（NaC103)和高氯酸鈉（NaC10 4)引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的 能力。所述脂質(zhì)體由pH為7. 4的卵磷脂酰膽堿在單一的氯化鈉和緩沖液中制備。含氧氯 酸鹽僅加入外相中。沒有進(jìn)行用亞氯酸鹽或者氯酸鹽負(fù)載囊泡或者將含氧氯酸鹽從外相移 除的步驟。
[0021] 第2011/0052655號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公開描述了為了控制水性體系中原生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng) 子和孢囊，將抗微生物劑包封入微囊劑或者納米囊（包括脂質(zhì)體）中。
[0022] 第2011/0177147號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公開描述了為了移除含工業(yè)用水的系統(tǒng)中的生 物污著，將抗菌組合物與至少一種穩(wěn)定劑聯(lián)合包封。所述抗菌組合物可以為非氧化性殺生 物（biocidal)的化合物，如異噻唑林，并且所述穩(wěn)定劑可以為含氯酸鹽的緩沖液。
[0023] 申請(qǐng)概述
[0024] 本申請(qǐng)涉及含有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體組合物，其制備方法以及 使用方法。
[0025] 因此，本申請(qǐng)包括脂質(zhì)體組合物，其包含具有至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯 酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)。通常所述 組合物中具有多個(gè)分離的脂質(zhì)體（亦稱為囊泡）。通常所述囊泡分散于水相中并包封一種 或多種水性組合物。因此，根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物被包封于多個(gè) 囊泡中，所述囊泡的壁含有一個(gè)或多個(gè)脂雙層。本申請(qǐng)還包括包含至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部 包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂 質(zhì)。
[0026] 本申請(qǐng)還包括脂質(zhì)體組合物，其包含包封和未包封的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合 物，其中所述包封的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物在組合物的內(nèi)相中，并且未包封的亞氯酸 鹽、氯酸鹽或其混合物在組合物的外相中。或者，外相可含有除了亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混 合物的物質(zhì)，例如其它的治療劑或者氯化鈉。在一個(gè)實(shí)施方案中，內(nèi)相和外相的pH相同。在 另一實(shí)施方案中，內(nèi)相和外相的pH不同，例如，內(nèi)相中的pH可為約5至約14、約6至約13、 約8至約12. 5或者約10至約12的pH，并且外相的pH可為大約中性，例如約6至8。在本 發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，內(nèi)相和外相的pH通過緩沖液（例如碳酸鹽緩沖液）來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。
[0027] 在另一實(shí)施方案中，脂質(zhì)體包含適合用于包封亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂 質(zhì)，所述亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的pH為約5至約14、約8至約13、約9至約12. 5或 者約10至約12。在一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)選自形成脂質(zhì)體的那些，所述脂質(zhì)體在約5°C 或高于約5°C下不滲透滲漏亞氯酸根離子和/或氯酸根離子。這樣的脂質(zhì)包括例如磷脂，如 具有足夠長(zhǎng)的飽和和/或不飽和脂肪酸鏈的磷酯酰膽堿，和/或鞘脂，如鞘磷脂，或者顯示 期望的性質(zhì)的這樣的脂質(zhì)的合適的混合物。
[0028] 在另一實(shí)施方案中，所述亞氯酸鹽為穩(wěn)定化的亞氯酸鹽組合物，例如0X0-K993或 者含有 1-10%、10-20%、20-30%、30-50%或者 50-90%^八)(《0-1(993 的組合物。在另 一實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽含有10% (w/v)的0X0-K993(以這種方式稀釋的 0Χ0-Κ993 稱作 WF10)。
[0029] 在一實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽含有約2% (w/v)的0Χ0-Κ993 ;在另一 實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽含有約2% (w/v)的0X0-K993、約2% (w/v)的甘油 和約 96% (w/v)的水。這樣的組合物以 Oxovasin? 或 Oxoferin?(Nuvo Manufacturing GmbH, Wanzleben, Germany)的形式商業(yè)出售。
[0030] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物包含以所述組合物中的總包封離子含量的 約 0· 01% (w/w)至約 50% (w/w)、約 0· 1% (w/w)至約 20% (w/w)或約 0· 5% (w/w)至約 10% (w/w)的量存在的包封亞氯酸鹽。
[0031] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物包含以所述組合物中的總包封離子含量的 約 0· 01% (w/w)至約 50% (w/w)、約 0· 1% (w/w)至約 20% (w/w)或約 0· 5% (w/w)至約 10% (w/w)的量存在的包封氯酸鹽。
[0032] 在又一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物包含以所述組合物中的總包封離子含量的 約 0· 01% (w/w)至約 50% (w/w)、約 0· 1% (w/w)至約 20% (w/w)或約 0· 5% (w/w)至約 10% (w/w)的量存在的包封氯酸根離子和亞氯酸根離子的混合物。含有亞氯酸根離子和/ 或氯酸根離子的物質(zhì)的任意組合物也可含有至少一種反荷離子以保持電中性。因此，根據(jù) 本申請(qǐng)中的一個(gè)實(shí)施方案，所述脂質(zhì)體組合物含有一種或多種陽(yáng)離子。可能的陽(yáng)離子的非 限制性實(shí)例包括堿金屬陽(yáng)離子（例如鈉或Na+)和堿土金屬陽(yáng)離子。在另一實(shí)施方案中，所 述脂質(zhì)體組合物含有亞氯酸根離子、氯酸根離子或其混合物，其還含有鈉和/或鉀反荷離 子。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物就個(gè)體體液而言是等滲的。在此方面測(cè)定等滲 性是技術(shù)人員熟知的。
[0033] 本申請(qǐng)還包括制備具有至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合 物的脂質(zhì)體的方法，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)，所述脂質(zhì)可得自天然的、 半合成的或者合成的來(lái)源。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括：
[0034] (a)向內(nèi)表面至少部分具有所述一種或多種脂質(zhì)的薄膜的容器中加入亞氯酸鹽、 氯酸鹽或其混合物的水性溶液；
[0035] (b)在足以全部或者部分移除所述內(nèi)表面的所述薄膜的條件下攪拌所述容器，以 得到含有包封有亞氯酸鹽和/或氯酸鹽的脂質(zhì)體的渾濁溶液；
[0036] (c)對(duì)所述渾濁溶液進(jìn)行處理，以將所述脂質(zhì)體的平均直徑減小至所需的量；以 及
[0037] (d)任選地對(duì)所述脂質(zhì)體進(jìn)行處理，以從所述脂質(zhì)體的外部溶液中移除亞氯酸鹽、 氯酸鹽或其混合物。
[0038] 按照本申請(qǐng)的方法，在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的脂質(zhì)體中的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其 混合物的包合率為約〇. 1 %至約50 %、約0. 5 %至約25 %、約1 %至約15 %、約1 %至約10 % 或者約1 %至約5%。
[0039] 在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體使用乙醇注入法制備。在另一實(shí)施方案中，所 述脂質(zhì)體使用包括交叉流技術(shù)的乙醇注入法制備。
[0040] 該申請(qǐng)還包括包含脂質(zhì)體和至少一種生理學(xué)上可接受的載體或者賦形劑的藥物 組合物。
[0041] 本申請(qǐng)還包括本申請(qǐng)的組合物作為藥物的用途。取決于它們的預(yù)期用途，本申請(qǐng) 的組合物可以為無(wú)菌的或者非無(wú)菌的。本發(fā)明的組合物也可以是無(wú)熱源的。
[0042] 本申請(qǐng)還包括用于治療受益于給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的疾病、病癥或 病況的方法，其包括向需要其的個(gè)體給藥有效量的本申請(qǐng)的組合物。
[0043] 本申請(qǐng)還包括本申請(qǐng)的組合物用于治療受益于給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物 的疾病、病癥或病況的用途。
[0044] 在一個(gè)實(shí)施方案中，使用所述組合物的方法包括告知使用者特定的安全性或臨床 效果。例如，可告知使用者所述脂質(zhì)體組合物比提供或預(yù)計(jì)會(huì)提供類似治療效果的非脂質(zhì) 體組合物更穩(wěn)定、更具靶向特異性或更具治療有效性。也可告知使用者所述組合物比提供 或預(yù)計(jì)會(huì)提供類似治療效果的非脂質(zhì)體制劑在一個(gè)或多個(gè)方面上更安全。例如，用所述脂 質(zhì)體組合物進(jìn)行治療，可以產(chǎn)生更低的副作用（如減少的靜脈刺激（靜脈炎）），從而提高患 者的耐受性和順從性。還可告知使用者與提供或預(yù)計(jì)會(huì)提供類似治療效果的非脂質(zhì)體制劑 相比，脂質(zhì)體組合物可以更快的速率（例如靜脈內(nèi)推注相對(duì)于稀釋輸注）或者以降低的體 積給藥。還可告知使用者所述脂質(zhì)體組合物可使活性成分延長(zhǎng)釋放、控制釋放或延遲釋放。 此外，可告知使用者這種延長(zhǎng)釋放或延遲釋放可根據(jù)脂質(zhì)體中脂質(zhì)的特性和使用者治療處 理所需時(shí)機(jī)進(jìn)行定制或調(diào)整。可以通過公開的材料（如標(biāo)簽或者產(chǎn)品說明書）的方式告知 使用者。
[0045] 從以下詳細(xì)說明會(huì)明確本申請(qǐng)的其它特征和優(yōu)點(diǎn)。但是應(yīng)當(dāng)理解，盡管詳細(xì)說明 和具體的實(shí)施例說明本申請(qǐng)的實(shí)施方案，但其僅作為說明給出，因?yàn)閺脑撛敿?xì)的說明，本領(lǐng) 域技術(shù)人員會(huì)明確本申請(qǐng)的精神和范圍內(nèi)的多種變化和修飾。
[0046] 附圖簡(jiǎn)要說明
[0047] 現(xiàn)將參照所附附圖對(duì)本申請(qǐng)的實(shí)施方案進(jìn)行更詳細(xì)的描述，其中：
[0048] 圖1顯示W(wǎng)F10的稀釋曲線，其用于將測(cè)量的亞氯酸鹽/氯酸鹽的吸光度與實(shí)施例 7的鄰聯(lián)甲苯胺方法B(用于檢測(cè)樣品中的亞氯酸鹽/氯酸鹽）中的特定反稀釋因子相聯(lián) 系。反稀釋因子相對(duì)于在447nm處測(cè)量的吸光度作圖。左手邊的圖表顯示整個(gè)數(shù)據(jù)集，而 右手邊的圖表僅呈現(xiàn)非線性域。頂部和底物的線分別代表數(shù)據(jù)集的線性和非線性部分的擬 合。二者的第一個(gè)交叉點(diǎn)標(biāo)志著兩個(gè)域的轉(zhuǎn)換。
[0049] 圖2為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由1-棕櫚 酰-2-油酰-sn-3-甘油基-3-磷酸膽堿（P0PC)制備，并將其在5°C、23°C和37°C下儲(chǔ)存。
[0050] 圖3為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由鞘磷脂（SM)制 備，并將其在5°C、23°C和37°C下儲(chǔ)存。圖的末尾（大約522h)處的數(shù)據(jù)點(diǎn)的聚集是有目的 地將溫度升高至37°C后的測(cè)量。
[0051] 圖4為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由3:1比率的 P0PC:P0PG(1-棕櫚酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸-(Γ-消旋-甘油））制備，并將其在 5°C、23°C和 37°C下儲(chǔ)存。
[0052] 圖5為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由2:1比率的 P0PC: P0PG制備，并將其在5 °C、23 °C和37 °C下儲(chǔ)存。
[0053] 圖6為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由1:1比率的 P0PC: P0PG制備，并將其在5 °C、23 °C和37 °C下儲(chǔ)存。
[0054] 圖7為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由1，2-二肉豆蘧 酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)制備，并將其在5°C和23°C下儲(chǔ)存持續(xù)1、5和7天。
[0055] 圖8為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由鞘磷脂SM制 備。在5°C (藍(lán)）和23°C (紅）下儲(chǔ)存，然后將溫度升高至37°C (這立即導(dǎo)致滲漏）。 [0056] 圖9為顯示脂質(zhì)體中亞氯酸鹽和氯酸鹽的滲漏的圖，所述脂質(zhì)體由DPPC和DPPC/ DMPC制備，并將其在22°C和38°C下儲(chǔ)存。
[0057] 圖10呈現(xiàn)對(duì)DPPC和DPPC/DMPC脂質(zhì)體的長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究的概況。每條代表樣品 在室溫（約22°C )和冰箱中（約6°C )的溫度下的滲漏實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。X軸代表時(shí)間（以天 計(jì)）。中度灰色標(biāo)志發(fā)現(xiàn)外部介質(zhì)中的WF10含量小于L0D的脂質(zhì)體。更淺的灰色標(biāo)志外部 介質(zhì)中的WF10含量小于L0Q的時(shí)期。深灰色表明WF10的含量高于L0Q。
[0058] 圖11顯示實(shí)施例12中描述的2011年12月12日用SX122進(jìn)行的高分辨率滲漏 (HRL)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。可看見兩個(gè)樣品的圖。溫度曲線參考右手邊的y軸。滲漏的物質(zhì)的量 以總樣品體積的分?jǐn)?shù)的形式提供。所述實(shí)驗(yàn)用于測(cè)定滲漏在數(shù)小時(shí)內(nèi)開始的溫度。
[0059] 圖12顯示實(shí)施例12中描述的2012年1月6日用SX122進(jìn)行的HRL實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。 可看見兩個(gè)樣品的圖。溫度曲線參考右手邊的y軸。滲漏的物質(zhì)的量以總樣品體積的分?jǐn)?shù) 的形式提供。所述實(shí)驗(yàn)檢查38°C下的滲漏特性。所述實(shí)驗(yàn)進(jìn)行數(shù)天，表明在該溫度下非常 慢的滲漏。
[0060] 圖13顯示實(shí)施例12中描述的2012年1月26日用SX126進(jìn)行的HRL實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。 可看見兩個(gè)樣品的圖。溫度曲線參考右手邊的y軸。滲漏的物質(zhì)的量以總樣品體積的分?jǐn)?shù) 的形式提供。從該圖中可見部分滲漏。
[0061] 圖14顯示實(shí)施例12中描述的2012年2月22日用SX126進(jìn)行的HRL實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。 可看見兩個(gè)樣品的圖。溫度曲線參考右手邊的y軸。滲漏的物質(zhì)的量以總樣品體積的分?jǐn)?shù) 的形式提供。
[0062] 圖15顯示實(shí)施例12中描述的2012年1月25日用SX126進(jìn)行的HRL實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。 可看見兩個(gè)樣品的圖。溫度曲線參考右手邊的y軸。滲漏的物質(zhì)的量以總樣品體積的分?jǐn)?shù) 的形式提供。
[0063] 圖16為顯示實(shí)施例14中報(bào)道的釋放的物質(zhì)的量占總樣品體積的分?jǐn)?shù)相對(duì)于實(shí)驗(yàn) 的時(shí)間作圖的圖。大圖顯示整個(gè)實(shí)驗(yàn)，以及滲漏上限（其中所包封的WF10被完全釋放）。 這為整個(gè)樣品體積的大約7. 5%，因此這也表明脂質(zhì)體的包封容量。較小的圖更詳細(xì)地報(bào)告 發(fā)生一些滲漏的時(shí)期。
[0064] 圖17顯示在本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方案中使用乙醇注入法制備脂質(zhì)體的圖示。出鋼 室的脂質(zhì)體包封WF10并分散于含有WF10的外相中。
[0065] 圖18為顯示在使用乙醇注入法制備包含WF10的脂質(zhì)體的滲濾過程期間濾液中收 集的亞氯酸鹽的量的圖。
[0066] 圖19為顯示在使用乙醇注入法制備包含WF10的脂質(zhì)體的滲濾過程期間濾液中收 集的亞氯酸鹽的量的圖（重復(fù)圖18中報(bào)道的實(shí)驗(yàn)）。
[0067] 圖20為顯示在使用乙醇注入法制備包含WF10的脂質(zhì)體的滲濾過程期間濾液中收 集的亞氯酸鹽的量的圖。所述脂質(zhì)體使用與圖18和圖19中報(bào)道的實(shí)驗(yàn)相比兩倍濃度的 WF10來(lái)制備。
[0068] 圖21為顯示小鼠的膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（CIA)的得分的圖，所述小鼠在誘導(dǎo)CIA后 接受WF10、脂質(zhì)體形式的WF10或者NaCl (i. p.)。
[0069] 圖22為顯示接受WF10、脂質(zhì)體形式的WF10或者NaCl(i.p.)的小鼠第16天的CIA 得分的棒圖。
[0070] 申請(qǐng)?jiān)斒?br> [0071] I.定義
[0072] 除非另外說明，如本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)理解，在本部分和其它部分中所描述的定義 和實(shí)施方案意圖可應(yīng)用于它們適合的本文中所描述的本申請(qǐng)的所有實(shí)施方案及方面。
[0073] 本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"a"、"an"和"the"不僅包括具有一員（member)的方面，也 包括具有多于一員的方面。例如，一包括"磷脂"的實(shí)施方案應(yīng)理解為提供具有一種磷脂或 者兩種或更多種額外的磷脂的方面。
[0074] 在含有"額外的/附加（additional) "或者"第二"組分的組合物中，如本文中使 用的第二組分與其它組分或者第一組分化學(xué)上不同。"第三"組分與其它組分、第一組分和 第二組分不同，并且進(jìn)一步列舉的或"額外的/附加"組分類似地不同。
[0075] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"劑/物質(zhì)（agent) "指化合物或者化合物的混合物，當(dāng)將 其加入至組合物中時(shí)，會(huì)對(duì)組合物的性質(zhì)產(chǎn)生特定作用。
[0076] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"亞氯酸鹽"指陰離子"C1CV"。陰離子物質(zhì)通常以離解的 形式存在于水性溶液中，但陰離子經(jīng)常源自含有陰離子和陽(yáng)離子的母體鹽。
[0077] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"氯酸鹽"指陰離子"C1CV"。陰離子物質(zhì)通常以離解的形 式存在于水性溶液中，但陰離子經(jīng)常源自含有陰離子和陽(yáng)離子的母體鹽。
[0078] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"穩(wěn)定化的亞氯酸鹽"指組合物或者物質(zhì)，其含有亞氯酸根 離子（C1CV)，并且其中亞氯酸根離子的濃度、pH和/或活性在使用前保持穩(wěn)定，持續(xù)可接受 的時(shí)期。在穩(wěn)定化的亞氯酸鹽中，在使用前亞氯酸根離子基本上不降解，并且亞氯酸根離子 的活性基本上保持。穩(wěn)定化的亞氯酸鹽可含有緩沖劑，例如碳酸鈉/氫氧化鈉緩沖系統(tǒng)，其 維持制劑的堿性pH?？杀O(jiān)測(cè)亞氯酸根離子的濃度，例如通過高效液相色譜法（HPLC)進(jìn)行。
[0079] 本文中所使用的"WF10"指藥物物質(zhì)0X0-K993的10% (w/v)水性稀釋液，分析上 表征為包含亞氯酸根離子（4. 25%)、氯酸根離子（1.5%)、氯離子（2.0%)、硫酸根離子 (0· 7% )和鈉離子（4. 0% )的溶液。
[0080] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"可接受的時(shí)期"意指至少約1天、至少約1周、至少約30 天、至少約6個(gè)月、至少約1年、至少約2年或者至少約制備和使用之間的時(shí)間。
[0081] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"脂質(zhì)體"指含有至少一個(gè)環(huán)繞內(nèi)部核心的脂雙層的人工 制備的囊泡。內(nèi)相（inner phase或internal phase)或者內(nèi)部核心（在本文中可交換地 使用）含有如亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的物質(zhì)。所述囊泡可用于遞送物質(zhì)，例如局部地 或在體內(nèi)遞送。有三種類型的脂質(zhì)體:MLV (多層囊泡）、SUV (小單層囊泡，直徑25-300nm) 和LUV (大單層囊泡，直徑大于300nm)。囊泡外的物質(zhì)體積稱為外相（external phase或 outer phase)或者連續(xù)相。這些術(shù)語(yǔ)在本文中可交換地使用。脂質(zhì)體組合物會(huì)含有多個(gè)獨(dú) 立的、分離的脂質(zhì)體，并且內(nèi)相和外相通常含有水。
[0082] 鞘脂為一類含有結(jié)合至多種首基（head group)上的鞘氨醇（2-氨基-4-十八 烯-1，3-二醇）主鏈的脂質(zhì)。
[0083] 鞘磷脂（SM)指在動(dòng)物細(xì)胞膜中，特別是在環(huán)繞一些神經(jīng)細(xì)胞軸突的膜狀髓鞘中 發(fā)現(xiàn)的鞘脂類型。鞘磷脂具有神經(jīng)酰胺核心（通過酰胺鍵與脂肪酸鍵連的鞘氨醇）以及極 性首基，所述極性首基為磷酸膽堿或者磷酸乙醇胺。
[0084] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"包封（encapsulated) "或"包封（entrapped) "意指被提 及的物質(zhì)位于脂質(zhì)體的內(nèi)部，或者在脂質(zhì)體的內(nèi)相或核心中。物質(zhì)也可位于外相或者連續(xù) 相中。
[0085] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"包合率"指制備過程期間包封入脂質(zhì)體囊泡中的物質(zhì)或 溶液相對(duì)于原料的百分比。
[0086] "藥物組合物"指藥用物質(zhì)的組合物。術(shù)語(yǔ)"藥物組合物"和"制劑"可相互交換地 使用。
[0087] "多分散性指數(shù)"或者"Pdl"是與溶液中顆粒的粒徑分布相關(guān)的無(wú)量綱 (dimensionless)數(shù)。Pdl可通過對(duì)用稱作動(dòng)態(tài)光散射的技術(shù)測(cè)量的對(duì)比數(shù)據(jù)進(jìn)行分析得 至1J。該指數(shù)為由對(duì)比數(shù)據(jù)的簡(jiǎn)單雙參數(shù)擬合（累積量分析，cumulants analysis)計(jì)算的 數(shù)。Pdl為無(wú)量綱的，并且度量使得除具有高度單分散標(biāo)準(zhǔn)之外幾乎不會(huì)看到小于0. 05的 值。大于〇. 7的值表明該樣品具有非常寬的粒徑分布，并且可能不適合通過動(dòng)態(tài)光散射法 (DLS)技術(shù)進(jìn)行粒徑分布測(cè)量。多種粒徑分布算法可用于這兩個(gè)極值之間的數(shù)據(jù)。這些參 數(shù)的計(jì)算如ISO標(biāo)準(zhǔn)文件13321:1996E和ISO 22412:2008中定義。
[0088] "公開的材料"意指提供信息的介質(zhì)，其包括印刷的、音頻的、可看得見的或者電子 的介質(zhì)，例如傳單、廣告、產(chǎn)品說明書、印刷的標(biāo)簽、互聯(lián)網(wǎng)網(wǎng)站、互聯(lián)網(wǎng)網(wǎng)頁(yè)、互聯(lián)網(wǎng)彈出窗 口、無(wú)線電廣播或者電視廣播、光盤、DVD、播客、錄音或者其它錄制的或電子介質(zhì)。
[0089] "安全性"意指與給藥組合物相關(guān)的不良事件（包括與患者相關(guān)因素相關(guān)的副作 用）的發(fā)病率或嚴(yán)重性。
[0090] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"有效量"意指足以達(dá)到期望的結(jié)果的量，因此其會(huì)取決于 成分及其期望的結(jié)果。但是，一旦已知期望的效果，測(cè)定有效量在本領(lǐng)域技術(shù)人員的技能范 圍內(nèi)。
[0091] 如本文中本申請(qǐng)的組合物的成分中所使用的術(shù)語(yǔ)"水"指藥學(xué)上可接受的水。 [0092] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"水性溶液"意指其中溶劑主要為水，但是可存在少量（例 如小于10、9、8、7、6、5、4、3、2或1% (v/v))的非水性溶劑的溶液。
[0093] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"w/v"意指100mL的溶液中溶質(zhì)的克數(shù)。
[0094] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"w/w"意指100g的溶液中溶質(zhì)的克數(shù)。
[0095] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"渾濁溶液"指由于存在單個(gè)顆粒或者懸浮的固體使外觀 不透明或者混濁的溶液，所述單個(gè)顆?；蛘邞腋〉墓腆w分別通常用裸眼不可見。
[0096] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"相變溫度"指誘導(dǎo)脂質(zhì)的物理狀態(tài)從有序凝膠相（其中 烴鏈完全伸展并緊密堆積）變化為無(wú)序液晶相（其中烴鏈在流體中任意定向）所需的溫 度。
[0097] 通常，圖中的"誤差棒"表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差，而實(shí)心的、陰影的棒的頂部表示單 一數(shù)據(jù)值，其為數(shù)據(jù)值分布的平均值。
[0098] 術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的"意指與動(dòng)物（特別是人）的治療是相容的。
[0099] 如本文中所使用的且本領(lǐng)域所熟知的術(shù)語(yǔ)"治療（treating或treatment) "意指 獲得包括臨床結(jié)果的有益的或者期望的結(jié)果的方法。有益的或者期望的臨床結(jié)果可包括， 但是不限于可檢測(cè)或不可檢測(cè)的一種或多種癥狀或病況的緩和或者改善、病變范圍的縮 小、疾病狀態(tài)的穩(wěn)定化（即不惡化）、疾病傳播的預(yù)防、疾病惡化的延遲或者減慢、疾病狀態(tài) 的改善或者緩和、疾病復(fù)發(fā)的減少和減退（局部或者整體）。"治療"也可意指與如果不接 受治療的預(yù)期存活相比，存活延長(zhǎng)。如本文中所使用的"治療"也包括預(yù)防性治療。治療方 法包括向個(gè)體給藥治療有效量的活性藥劑，并且其任選地由單次給藥組成，或者其包括系 列施用。治療期的長(zhǎng)度取決于多種因素，例如病況的嚴(yán)重性、患者的年齡、活性成分或者藥 劑的濃度、如本文中所述的組合物的活性，和/或其組合。治療期也可包含周期，例如每天 給藥一次，持續(xù)約2-7天，然后停止約1-20天的時(shí)期，以構(gòu)成一個(gè)治療周期。患者可被治療 多于一個(gè)周期，例如至少兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或者五個(gè)周期。也會(huì)理解，在特定的治療或預(yù)防方 案過程中，用于治療或預(yù)防的藥劑的有效劑量可以增加或者減少。通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn) 診斷測(cè)定法可得到劑量的變化，并且其變得清楚。在一些情況種可能需要慢性給藥。例如， 向個(gè)體給藥足以治療患者的量的組合物，并持續(xù)足以治療患者的時(shí)間。
[0100] 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"個(gè)體"包括動(dòng)物界的所有成員，包括哺乳動(dòng)物，并且適合 地指人。
[0101] "使用者"意指?jìng)€(gè)體，如患者、醫(yī)護(hù)工作者或者藥物供應(yīng)者。
[0102] " ζ電位"是與液體中顆粒的表面電荷相關(guān)的量，其指示分散于液體中的固體或者 分散于液體中的液體的勢(shì)穩(wěn)定性。如果懸浮液中所有的顆粒具有大的負(fù)或者正ξ電位， 則它們會(huì)傾向于彼此排斥，并且沒有絮凝的趨勢(shì)。但是，如果顆粒具有低ξ電位值，則會(huì) 存在較小的阻止顆粒聚集的力，并且顆?？赡芫哂懈蟮男跄厔?shì)。關(guān)于ξ電位的更多 信息可參照 Hunter, R. J. (1988)Zeta Potential in Colloid Science:Principles And Applications，Academic Press，UK〇
[0103] 當(dāng)在本申請(qǐng)的治療方法和組合物的用途中使用時(shí)，"需要其的"個(gè)體可以是疑似患 有、已經(jīng)診斷患有或者之前已對(duì)要治療的病況進(jìn)行治療的個(gè)體。
[0104] 在理解本發(fā)明公開的范圍中，如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"包含/包括（comprising)" 及其派生詞意圖是開放式術(shù)語(yǔ)，其說明存在所描述的特征、元素、組分、基團(tuán)、整數(shù)和/或步 驟，但是不排除存在其它未描述的特征、元素、組分、基團(tuán)、整數(shù)和/或步驟。上述內(nèi)容也用 于具有相似含義的詞，如術(shù)語(yǔ)"包含/包括（including)"，具有（having)"及其派生詞。 如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"由…組成（consisting) "及其派生詞意圖為封閉式術(shù)語(yǔ)，其說明存 在所描述的特征、元素、組分、基團(tuán)、整數(shù)和/或步驟，但是排除其它未描述的特征、元素、組 分、基團(tuán)、整數(shù)和/或步驟的存在。如本文中所使用的術(shù)語(yǔ)"基本上由…組成"意圖說明存 在所描述的特征、元素、組分、基團(tuán)、整數(shù)和/或步驟，以及不實(shí)質(zhì)上影響特征、元素、組分、 基團(tuán)、整數(shù)和/或步驟的基本上的和新穎的特征的那些。
[0105] 如本文中所使用的程度的術(shù)語(yǔ)（如"基本上"、"約"和"大約"）意指所修飾術(shù)語(yǔ)的 合理量的偏差，使得最終結(jié)果未顯著變化。如果該偏差不會(huì)否定其修飾的詞語(yǔ)的含義，則這 些術(shù)語(yǔ)應(yīng)被解釋為包含所修飾的術(shù)語(yǔ)的至少±5%的偏差。
[0106] II.脂質(zhì)體組合物
[0107] 本申請(qǐng)涉及含有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體組合物及其制備方法以及 使用方法。
[0108] 因此，本申請(qǐng)包括脂質(zhì)體組合物，其包含具有至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯 酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)。所述脂質(zhì) 體組合物含有許多脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體均含有雙分子層包封的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合 物。所述脂質(zhì)體含有合適的脂質(zhì)，其包括例如磷脂，如具有足夠長(zhǎng)的飽和和/或不飽和脂肪 酸鏈的磷酯酰膽堿，和/或鞘脂，如鞘磷脂，或者顯示期望的性質(zhì)的這樣的脂質(zhì)的合適的混 合物。這些脂質(zhì)可以為天然的、半合成的或者合成的來(lái)源。所述脂質(zhì)體還可包含如膽固醇 或硫酸膽固醇的額外的組分，以使一個(gè)或多個(gè)雙分子層和/或帶電荷的脂質(zhì)的剛性增加并 且滲透性降低，以增強(qiáng)所述脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。
[0109] 本申請(qǐng)還包括脂質(zhì)體，其包含至少一個(gè)脂雙層和包封在脂質(zhì)體內(nèi)部中的亞氯酸 鹽、氯酸鹽或其混合物，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)。
[0110] 本申請(qǐng)還包括脂質(zhì)體組合物，其包含包封和未包封的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合 物，其中所述包封的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物在脂質(zhì)體的內(nèi)相中，并且未包封的亞氯酸 鹽、氯酸鹽或其混合物在脂質(zhì)體的外相中。在另一實(shí)施方案中，包封于至少一個(gè)脂雙層中的 亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物和存在于所述外相中的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的比例 為約100:1至約1:100,或約90:10至10:90。或者，所述外相可含有除了亞氯酸鹽、氯酸鹽 或其混合物的物質(zhì)，例如其它的治療劑和/或氯化鈉。
[0111] 在本申請(qǐng)的一實(shí)施方案中，內(nèi)相和外相的pH相同。在另一實(shí)施方案中，內(nèi)相和外 相的pH不同，例如，內(nèi)相中的pH可為約6至約13、約8至約12. 5或者約10至約12的pH， 并且外相的pH可為大約中性，例如約6至8。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物的內(nèi)部 核心相和外部連續(xù)相之間的pH差異為約1至約7、約1至約5或者約1至約3。
[0112] 在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，脂質(zhì)體的內(nèi)相和外相為等滲的，或者表現(xiàn)相同的滲 量。即內(nèi)相和外相的相互之間的滲量在1、2、3、4、5、6或7%之內(nèi)。在一實(shí)施方案中，通過使 脂質(zhì)體的內(nèi)部和外部的溶液的滲透壓相同或者相似，減少脂質(zhì)體的向內(nèi)或向外滲漏的物質(zhì) 的量。在另一實(shí)施方案中，相對(duì)于個(gè)體的體液，脂質(zhì)體組合物是等張的或等滲的。
[0113] 或者，在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)體內(nèi)相和外相的滲量不同。例如，內(nèi)相和外相之間 的滲量差異可以為約8、10、15、20、25、50、100或200%。
[0114] 在一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物表現(xiàn)約3-48個(gè)月的藥學(xué)上可接受的穩(wěn) 定性。在另一實(shí)施方案中，所述藥學(xué)上可接受的穩(wěn)定性是在約5°C至約50°C或約5°C至約 30°C的溫度下儲(chǔ)存所述組合物實(shí)現(xiàn)的。
[0115] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物可以為凍干的。脂質(zhì)體的凍干技術(shù)是公知 的，例如，Chen 等人（J. Control Release 2010 年 3 月 19 日；142(3) :299-311)總結(jié)了決定 冷凍干燥的脂質(zhì)體的凍干保護(hù)（lyoprotective)效果的關(guān)鍵因素。
[0116] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物包含脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體為平均直徑為約 80至約300nm、約90nm至約200nm或者約100nm至約140nm的單層和/或多層囊泡。在另 一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物包含脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體為平均直徑為約80nm至約15微 米、約300nm至約12微米或者約7微米至約10微米的單層和/或多層囊泡。粒度分布的 性質(zhì)可以為單式的或者多模式的，并且多分散性指數(shù)可以如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的制備方 法進(jìn)行控制，并基于期望的遞送途徑確定。
[0117] 根據(jù)給藥途徑，可期望給藥特定直徑的囊泡。例如，直徑為約80nm至約300nm的 囊泡可用于靜脈內(nèi)給藥，而直徑為約80nm至約10微米的囊泡可以用于通過吸入給藥，如經(jīng) 肺、氣管或者鼻的途徑。
[0118] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物可被滅菌。適合的滅菌技術(shù)的非限制性實(shí) 例包括過濾、高壓滅菌、伽馬射線和凍干（冷凍干燥）。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過使用220nm 的濾器過濾來(lái)進(jìn)行滅菌。
[0119] 考慮到亞氯酸鹽和氯酸鹽分別僅含有3或4個(gè)原子，令人驚奇地發(fā)現(xiàn)可以研發(fā)以 下的脂質(zhì)體：其中形成脂質(zhì)體囊泡的脂雙層對(duì)亞氯酸鹽和/或氯酸鹽是基本上不可滲透的 (即所述囊泡為離子密封（ion-tight)的）。盡管已知其它分子（如乙醇、葡萄糖、氨和乙 酸鹽）滲透通過脂質(zhì)體的脂雙層的事實(shí)。因此，在本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方案中，脂雙層對(duì)亞氯 酸鹽是基本上不可滲透的。在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，脂雙層對(duì)氯酸鹽是基本上不可滲 透的。在另一實(shí)施方案中，脂雙層對(duì)亞氯酸鹽和氯酸鹽是基本上不可滲透的。
[0120] 本申請(qǐng)的離子密封的脂質(zhì)體可以用單壁脂質(zhì)體囊泡實(shí)現(xiàn)。在本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方 案中，所述離子密封的脂質(zhì)體表現(xiàn)商業(yè)上可接受的貯存期（例如在室溫或者冷凍溫度下約 3-48個(gè)月）內(nèi)的穩(wěn)定性。在另一實(shí)施方案中，離子密封的脂質(zhì)體囊泡分散其中的外部（或 者外相）可被設(shè)計(jì)為含有不同于包封的內(nèi)部（或者內(nèi)相）的組合物。例如內(nèi)相和外相可含 有不同濃度的亞氯酸鹽，或者兩相中的任一相可基本上不含亞氯酸鹽。作為另一實(shí)例，內(nèi) 相和外相可含有不同濃度的氯酸鹽，或者兩相中的任一相可基本上不含氯酸鹽。在本申請(qǐng) 的一個(gè)實(shí)施方案中，離子密封的脂質(zhì)體制劑的內(nèi)相和外相的pH不同。例如，外相可含有鹽 水溶液，并且其pH可與可含有亞氯酸鹽和/或氯酸鹽的內(nèi)相基本上不同。在一個(gè)實(shí)施方 案中，外相可含有氯化鈉，基本上不含有亞氯酸鹽和/或氯酸鹽并且pH為大約中性，而內(nèi)相 含有亞氯酸鹽和/或，并且pH高于外相。因此，形成脂質(zhì)體囊泡的脂雙層可以另外對(duì)H+和 0H-是基本上不可滲透的。理論上，可以使用基于 13C-NMR的方法測(cè)量脂質(zhì)體中的pH。本申 請(qǐng)中的離子密封的脂質(zhì)體組合物可基本上不含氯酸鹽，或者可包含含有與外相濃度不同的 氯酸鹽的脂質(zhì)體囊泡。在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，含有脂質(zhì)體組合物的離子密封的囊泡 的直徑分布具有多個(gè)值。在另一實(shí)施方案中，內(nèi)相、外相或其二者含有多種物質(zhì)。在其它實(shí) 施方案中，脂質(zhì)體分散液中的不同脂質(zhì)體中包封的物質(zhì)組成有變化。
[0121] 在一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物不含有過氧化氫、異噻唑啉和/或鋅離 子。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物不含有由卵磷脂制備的脂質(zhì)體。在另一實(shí)施方 案中，所述脂質(zhì)體組合物不含有亞氯酸鹽和/或亞氯酸鹽僅包封在脂雙層的兩層脂質(zhì)之間 的脂質(zhì)體。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物基本上不含降解產(chǎn)物。
[0122] 在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體是穩(wěn)定的，即亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物不 從脂質(zhì)體內(nèi)部滲漏，持續(xù)可接受的貯存期（例如在食品和藥品監(jiān)督管理局（FDA)或者其它 政府管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的產(chǎn)品說明書中所定義）。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體在低于約30、 25、20、15、10、9、8、7或6°C的溫度下穩(wěn)定，持續(xù)足以使其用于預(yù)期目的的時(shí)間。例如，持續(xù)1 分鐘至1小時(shí)、1小時(shí)至24小時(shí)、1天至30天、30天至200天、6個(gè)月至1年或者更久的時(shí) 間。
[0123] A.亞氯酸鹽、氯酸鹽及其混合物
[0124] 本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物包含亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所 述脂質(zhì)體組合物含有亞氯酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有穩(wěn)定化的亞氯 酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有氯酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體 組合物含有亞氯酸鹽和氯酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有亞氯酸鹽，且基 本上不含氯酸鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有氯酸鹽，且基本上不含亞氯酸 鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物為不含氯酸鹽的組合物。在另一實(shí)施方案中，所 述脂質(zhì)體組合物為不含亞氯酸鹽的組合物。
[0125] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有穩(wěn)定化的亞氯酸鹽?；诜€(wěn)定化的亞 氯酸鹽的組合物的非限制性實(shí)例包括在第6, 350, 438、6, 251，372、6, 235, 269、6, 132, 702、 6, 077, 502和4, 574, 084號(hào)美國(guó)專利中描述的那些，其各自的內(nèi)容以其整體援引加入。
[0126] 在另一實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽為含有如0Χ0_Κ993(其包含亞氯酸 鹽和氯酸鹽）的亞氯酸鹽的組合物，或者含有約1-10%、10-20%、20-30%、30-50%或者 50-90% (w/v)0X0-K993的組合物。在另一實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽是含有WF10 的組合物或者是WF10。
[0127] 在一實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽是含有約2% (w/v)0X0_K993的組合 物；在另一實(shí)施方案中，所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽是含有約2% (w/v)0X0-K993、約2% (w/ v)甘油和約96% (w/v)水的組合物。這樣的組合物以O(shè)xovasin?或Oxoferin?(Nuvo Manufacturing, Wanzleben, Germany)的名稱銷售，其中 lmL 的 Oxovasin? 包含在 1. OmL 水 中的約0· 85mg(或者約0· 085% w/v)的亞氯酸鹽。Oxovasin?的pH為10. 75至11. 90。
[0128] 在本申請(qǐng)的一實(shí)施方案中，使用以下方法制備0X0-K993 :
[0129] 將亞氯酸鈉（NaC102)和次氯酸鈉（NaOCl)以4. 8至1的摩爾比在注射用水 (WFI)中混合。溶液的pH應(yīng)大于pH 11.0。向該混合物中加入催化劑、亞氯?；蛩?(chlorylsulfuric acid) [C102+] [HS<V]，然后可觀察到以下反應(yīng)：
[0130] 2C102、0Cr +2H+ - 2C102+Cr +H20 (1)
[0131] 溶液的pH降低。在方程（1)所描述的氧化還原過程中部分亞氯酸鹽被氧化為二 氧化氯（C10 2)。在平衡反應(yīng)中，生成的二氧化氯與過量的未氧化亞氯酸鹽形成強(qiáng)烈的灰色 電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物，如方程（2)所示：
[0132] _ι _ Γ/^1 1 - I ........................... I I
[0133] 然后向溶液中加入9. 65mmol (每kg的反應(yīng)溶液）碳酸鈉過氧化氫（sodium carbonate peroxohydrate, 2Na2C03 ·3Η202)。在加入碳酸鈉過氧化氫時(shí)，部分二氧化氯被還 原為亞氯酸鹽，并且同時(shí)形成氧氣：
[0134] 2C102+H202+20!T - 2C102、02+2H20 (3)
[0135] 合適的時(shí)間（例如15分鐘）后，向溶液中加入102mmol (每kg的反應(yīng)溶液）過氧 化鈉（Na202)，當(dāng)剩下的二氧化氯完全被還原為亞氯酸鹽時(shí)，溶液被完全脫色。在通常需要 至少4周的緩慢過程（方程4)中，由過氧化鈉生成氧氣。同時(shí)形成氫氧根離子，導(dǎo)致溶液 的高pH值（pH> 13)，由此穩(wěn)定化活性物質(zhì)亞氯酸鹽。
[0136] 2022-+2H20 - 02+40!Γ (4)
[0137] 由該合成得到的最終反應(yīng)產(chǎn)物0Χ0-Κ993為穩(wěn)定的水溶液，其含有亞氯酸根陰離 子（4. 25%)、氯陰離子（2.0%)、氯酸根陰離子（1.5%)和硫酸根陰離子（0.7%)，與陽(yáng)離 子形式的鈉，以及維持制劑堿性pH的碳酸鈉/氫氧化鈉緩沖系統(tǒng)。
[0138] 技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到任意化學(xué)上穩(wěn)定的亞氯酸鹽溶液（包括0X0-K993、WF10、 Oxovasin?的衍生物或者其它基于亞氯酸鹽或基于氯酸鹽的溶液及其衍生物）都在本申請(qǐng) 的范圍內(nèi)。這些溶液可在本申請(qǐng)的組合物、方法和用途中使用，這樣，本申請(qǐng)的范圍不一定 限于使用本文中所描述的產(chǎn)物。
[0139] 0X0-K993及其衍生物（WF10、0xoferin、0xovasin)也是含有離子混合物的組合物 的實(shí)例，因?yàn)樗鲋苿┖衼喡人岣x子、氯離子、氯酸根離子、硫酸根離子和鈉離子。在本 申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方案中，含有離子混合物的組合物為含有至少兩種不同種類的陰離子（氯 酸根和亞氯酸根）的組合物。在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，所述組合物可含有至少三種不 同種類的陰離子。在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，所述組合物可含有至少4種、至少5種或者 至少6種不同種類的陰離子。
[0140] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有以所述組合物的總包封離子含量的約 0· 01% (w/w)至約 50% (w/w)、約 0· 1% (w/w)至約 20% (w/w)或約 0· 5% (w/w)至約 10% (w/w)的量存在的包封亞氯酸鹽。
[0141] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有以所述組合物的總包封離子含量的約 0· 01% (w/w)至約 50% (w/w)、約 0· 1% (w/w)至約 20% (w/w)或約 0· 5% (w/w)至約 10% (w/w)的量存在的包封氯酸鹽。
[0142] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有以所述組合物的總包封離子含量的約 0· 01% (w/w)至約 50% (w/w)、約 0· 1% (w/w)至約 20% (w/w)或約 0· 5% (w/w)至約 10% (w/w)的量存在的包封氯酸根離子和亞氯酸根離子的混合物。含有亞氯酸根和/或氯酸根 離子的物質(zhì)的任意組合物也含有至少一種反荷離子以保持電中性。因此，根據(jù)本申請(qǐng)中的 一個(gè)實(shí)施方案，所述脂質(zhì)體組合物含有一種或多種陽(yáng)離子?？赡艿年?yáng)離子的非限制性實(shí)例 包括堿金屬陽(yáng)離子（例如鈉或Na+)和堿土金屬陽(yáng)離子。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組 合物含有亞氯酸根離子、氯酸根離子或其混合物，其還含有鈉和/或鉀反荷離子。
[0143] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有以所述組合物的總包封陰離子含量的 約 0· 1% (w/w)至約 100% (w/w)、約 1% (w/w)至約 90% (w/w)、約 2% (w/w)至約 80%、 約3% (w/w)至約70% (w/w)、約4% (w/w)至約60%或者約5% (w/w)至約50%的量存在 的包封亞氯酸鹽。
[0144] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有以所述組合物的總包封陰離子含量的 約 0· 1% (w/w)至約 100% (w/w)、約 1% (w/w)至約 90% (w/w)、約 2% (w/w)至約 80%、 約3% (w/w)至約70% (w/w)、約4% (w/w)至約60%或者約5% (w/w)至約50%的量存在 的包封氯酸鹽。
[0145] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物含有以所述組合物的總包封陰離子含量的 約 0· 1% (w/w)至約 100% (w/w)、約 1% (w/w)至約 90% (w/w)、約 2% (w/w)至約 80%、 約3% (w/w)至約70% (w/w)、約4% (w/w)至約60%或者約5% (w/w)至約50%的量存在 的包封氯酸根離子和亞氯酸根離子的混合物。
[0146] 技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到所述脂質(zhì)體組合物中的陰離子比例可以基于其預(yù)期用途定性 地或者定量地調(diào)節(jié)。例如，為了治療特定疾病、病癥和病況，可調(diào)節(jié)組合物中的陰離子比例。 在一個(gè)實(shí)施方案中，第一種陰離子與第二種陰離子的比例為約100:1至約1:100、約90:10 至約10:90、約1:1至約3:1 (w/w)或約2:1 (w/w)。在一實(shí)施方案中，第一種陰離子為亞氯 酸根，并且第二種陰離子為氯酸根。
[0147] 在一實(shí)施方案中，所述亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的pH大于約8、大于約9或者 大于約10。在一實(shí)施方案中，所述pH為約8至約14、約8至約13、約9至約12. 5或者約 10至約12。
[0148] 在另一實(shí)施方案中，所述亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的pH小于約8、小于約7或 者小于約6。在一實(shí)施方案中，所述pH為約5至約8、約6至約7或者約7至約7. 5。
[0149] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物可有兩個(gè)pH值，第一個(gè)值與內(nèi)相或者包封 相的pH有關(guān)，第二個(gè)值與外相的pH有關(guān)。例如，脂質(zhì)體組合物內(nèi)相的pH為約6-13,而脂質(zhì) 體組合物外相的pH可為約6-8。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，內(nèi)相和外相之間的pH差異為約 1-7、約 1-6、約 1-5、約 1-4、約 1-3、約 1-2 或者約 1。
[0150] 本申請(qǐng)中所使用的亞氯酸鹽和氯酸鹽可以由任意可用來(lái)源獲得或者是商購(gòu)可得 的。在一實(shí)施方案中，所述亞氯酸鹽或氯酸鹽為鈉鹽，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)理解可以使用 其它金屬鹽。
[0151] 在本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物中的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的量通常為使用制備 方法可包封在脂質(zhì)體中的最大量。在一實(shí)施方案中，所述亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的包 封率或者包合率為約1 %至約50%、約2%至約25%或約5%至約15%。
[0152] B.脂質(zhì)
[0153] 包含于本申請(qǐng)的脂質(zhì)體中的脂質(zhì)選自適合用于包封pH為約5至約14、約6至約 13、約8至約12. 5或約10至約12的離子的脂質(zhì)。決定脂質(zhì)對(duì)于制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體的適 合性的因素包括：（1)在水性介質(zhì)中形成脂雙層的能力；（2)包封可觀的量的離子的能力； (3)形成的脂質(zhì)體不滲透滲漏亞氯酸根離子和/或氯酸根離子；(4)形成的脂質(zhì)體在堿性環(huán) 境（例如，如果內(nèi)部pH為8或者更高）中對(duì)水解作用的抵抗力；和/或（5)形成的脂質(zhì)體 在約5°C至約50°C的范圍內(nèi)的儲(chǔ)存溫度下保持穩(wěn)定持續(xù)可接受的時(shí)間的能力。
[0154] 本文中所提供的實(shí)例說明并非所有的脂質(zhì)都適于制備用于包封如氯酸根或亞氯 酸根的離子的穩(wěn)定脂質(zhì)體。通過本申請(qǐng)的教導(dǎo)，在一個(gè)實(shí)施方案中令人驚奇地發(fā)現(xiàn)合適的 脂質(zhì)選自磷脂和鞘脂。在另一實(shí)施方案中，合適的磷脂選自含有足夠長(zhǎng)的飽和或不飽和脂 肪酰基鏈的磷酯酰膽堿（PC)，所述足夠長(zhǎng)如大于12個(gè)、大于13個(gè)或大于14個(gè)碳原子，并 且合適的鞘脂選自鞘磷脂（SM)。在另一實(shí)施方案中，所述合適的脂質(zhì)選自鞘磷脂（SM)、 1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)、1，2-二肉豆蘧酰-2-sn-甘油基-3-磷 酸膽堿（DMPC)、氫化大豆磷脂或者蛋黃磷脂及其混合物。在另一實(shí)施方案中，所述合適的脂 質(zhì)選自形成在約5°C或更高、約23°C或更高、約37°C或更高或者約50°C或更高的溫度下不 滲透滲漏離子的脂質(zhì)體的脂質(zhì)。在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體在形成它們的脂質(zhì)的 相變溫度（PTT)下或附近溫度下可以是或者不可以是不滲透性的。已知多種脂質(zhì)的PTT， 例如1-棕櫚酰-2-油酰-sn-3-甘油基-3-磷酸膽堿（_2°C )、1，2-二肉豆蘧酰-2-sn-甘 油基-3-磷酸膽堿（23°C )、鞘磷脂（37°C )、1，2_二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿 (41°C )和氫化大豆磷脂或者蛋黃磷脂（如氫化大豆磷脂為50°C )。
[0155] 本申請(qǐng)的脂質(zhì)體可含有兩種或者更多種合適的脂質(zhì)。當(dāng)脂質(zhì)體含有兩種合適的脂 質(zhì)時(shí)，所述脂質(zhì)可以20:1至1:1、15:1至5:1或10:1至9:1的摩爾比存在。在一個(gè)實(shí)施方 案中，所述兩種合適的脂質(zhì)選自鞘磷脂（SM)、1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿 (DPPC)、1，2-二肉豆蘧酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)和氫化大豆磷脂或者蛋黃磷 脂。
[0156] 本申請(qǐng)的組合物還可包含至少一種如膽固醇或硫酸膽固醇的附加組分以提高所 述脂雙層的剛性和/或降低所述脂雙層的滲透性。所述至少一種附加組分可以總脂質(zhì)含量 的約0. 1 %至約50%、約1 %至約30%、約5%至約25%或者約10%至約20%的量存在。
[0157] 在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)組合物還含有至少一種使所述脂質(zhì)體具有減少所述脂 質(zhì)體聚集的ξ電位的附加組分，例如至少大于約+〇. 5mV或者小于約-0. 5mV的ζ電位。在 一實(shí)施方案中，所述ξ電位為約+lmV至+50mV、約+10mV至+40mV或者約+15mV至+30mV。在 另一實(shí)施方案中，所述ζ電位為約 -lmV至_50mV、約-10mV至_40mV或者約_15mV至_30mV。 在另一實(shí)施方案中，所述至少一種使所述脂質(zhì)體具有減少所述脂質(zhì)體聚集的ξ電位的附 加組分為帶電荷的脂質(zhì)。在另一實(shí)施方案中，用于制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體的脂質(zhì)包含至少一 種帶電荷的脂質(zhì)。盡管不希望受理論的限制，帶電荷的脂質(zhì)的存在導(dǎo)致當(dāng)他們相互靠近時(shí)， 臨近的脂質(zhì)體排斥，減少脂質(zhì)體之間的接觸量，因此減少導(dǎo)致脂質(zhì)體尺寸增加的融合和聚 集的量。因此，在本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)體含有提供使脂質(zhì)體互相排斥的ζ電位 的帶電荷的脂質(zhì)，所述ζ電位例如至少大于+lmV、+5mV、+10mV、+15mV、+25mV、+35mV或者 +45mV，或者小于-lmV、-5mV、-10mV、-15mV、-25mV、-35mV 或者-45mV。
[0158] 在一實(shí)施方案中，所述帶電荷的脂質(zhì)為帶負(fù)電荷的脂質(zhì)，例如磷脂酰甘油、磷脂酰 乙醇胺、磷脂酰絲氨酸或者磷脂酸。但是帶電荷的脂質(zhì)不一定為磷脂或者鞘脂。
[0159] 對(duì)于制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體，優(yōu)選帶負(fù)電荷的脂質(zhì)，但是，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體不排除 使用帶正電荷的脂質(zhì)。因此在一個(gè)實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體可包含至少一種帶正電 荷的脂質(zhì)。例如，1，2-二月桂酰-sn-甘油基-3-乙基磷酸膽堿鹽酸鹽EPC(鹽酸鹽）、 N-[l-(2,3-二油酰氧基（dioleyloyx))丙基]-N-N-N-三甲基氯化銨（D0TMA)、二甲基 二十八烷基溴化銨鹽（DDAB)和其它pH敏感的陽(yáng)離子磷脂。但是，帶電荷的脂質(zhì)不一定為 磷脂或鞘脂。例如，其它帶電荷的脂質(zhì)，如N-[l-(2,3-二油酰氧基）丙基]-N，N，N-三甲基 銨硫酸甲酯鹽（DOTAP)可用于制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體。
[0160] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述帶電荷的脂質(zhì)以使未帶電荷的脂質(zhì)：帶電荷的脂質(zhì)的摩 爾比為20:1至1:1、15:1至5:1或10:1至9:1的量存在。在另一實(shí)施方案中，脂質(zhì)體中帶 電荷的脂質(zhì)的存在改善所生成的脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，特別是與除無(wú)帶電荷的脂質(zhì)外相同的脂 質(zhì)體相比。
[0161] 在一實(shí)施方案中，包含于本申請(qǐng)的脂質(zhì)體中的合適的脂質(zhì)選自表1中所列的脂 質(zhì)。
[0162] 在一實(shí)施方案中，合適的脂質(zhì)選自1，2_二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽 堿（DPPC)、1，2-二肉豆蘧酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)、1-肉豆蘧酰-2-硬脂 酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（MSPC)、1-棕櫚酰-2-肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽 堿（PMPC)、1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DSPC)、氫化卵磷脂酰膽堿（HEPC)、 1-棕櫚酰-2-硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（PSPC)、1-硬脂酰-2-肉豆蘧酰-sn-甘 油基-3-磷酸膽堿（SMPC)、1_硬脂酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（S0PC)、1_硬 脂酰-2-棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（SPPC)、二花生?；╝rachidoyl)磷脂酰 膽堿（DAPC)、1，2-二山崳酰（behenoyl) -sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DBPC)、1，2-二芥 酰（erucoyl)-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DEPC)、1，2-二油酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿 (D0PC)、氫化大豆磷脂或蛋黃磷脂及其混合物。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)為鞘磷脂（SM) 或乳鞘磷脂。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)為氫化大豆磷脂或蛋黃磷脂。在另一實(shí)施方案 中，所述合適的脂質(zhì)選自1，2_二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)、1，2-二肉豆 蘧酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)、氫化大豆磷脂或蛋黃磷脂及其混合物與帶電荷的 脂質(zhì)或其它脂質(zhì)的組合。在另一實(shí)施方案中，所述帶電荷的脂質(zhì)為帶負(fù)電荷的磷脂。在另 一實(shí)施方案中，所述帶負(fù)電荷的磷脂為磷脂酰甘油，例如1，2-二棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷 酸甘油（DPPG)、1，2-二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DMPG)、1，2-二油酰-sn-甘油 基-3-磷酸甘油（D0PG)或1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DSPG)的鹽，磷脂酰 乙醇胺如1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺（DSPE)或1，2-二硬脂酰-sn-甘油 基-3-磷酸乙醇胺-甲基-聚乙二醇（MPEG-DSPE)的鹽，或其混合物。在另一實(shí)施方案中， 所述磷脂酰甘油為DPPG或DSPG或其混合物。
[0163] 在本申請(qǐng)的一實(shí)施方案中，當(dāng)在脂質(zhì)體中使用脂質(zhì)的混合物時(shí)，以主要量存在的 脂質(zhì)為PTT大于約5°C至約30°C的脂質(zhì)。這樣的脂質(zhì)為例如含有包含超過12個(gè)連續(xù)的碳 原子的碳鏈的脂質(zhì)。
[0164] 在本申請(qǐng)的一個(gè)實(shí)施方案中，期望特定比率的脂質(zhì)，在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì) 選自摩爾比為9:1的1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)和1，2-二肉豆蘧 酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)選自摩爾比為9:1的 1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)和1，2-二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷 酸甘油（DMPG)。在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)選自摩爾比為9:1的1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘 油基-3-磷酸膽堿（DPPC)和1，2-二棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DPPG)。在另一實(shí) 施方案中，所述合適的脂質(zhì)為純DPPC。
[0165] 也可選擇具有特定PTT的脂質(zhì)來(lái)制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物。因此在本申請(qǐng)的一 實(shí)施方案中，脂質(zhì)體含有PTT 1?于動(dòng)物的體溫的脂質(zhì)。在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，脂質(zhì)體 含有PTT低于動(dòng)物的體溫的脂質(zhì)。
[0166] 這樣的物質(zhì)為可商購(gòu)獲得的，例如得自Avanti Polar Lipids (Alabaster, Alabama USA)、LIPOID GmbH(Germany)，或者可使用本領(lǐng)域已知的方法 制備。
[0167] C.脂質(zhì)體表面修飾劑
[0168] 為了增加本申請(qǐng)的脂質(zhì)體的循環(huán)時(shí)間，在一實(shí)施方案中，用增加親水性的分子修 飾（如用親水聚合物修飾）脂質(zhì)體的表面或者脂雙層。
[0169] 在一實(shí)施方案中，所述親水聚合物為聚乙二醇（PEG)。已證明脂質(zhì)體表面上的PEG 的存在延長(zhǎng)血液循環(huán)時(shí)間，同時(shí)減少單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)（MPS)的攝取。
[0170] 可以數(shù)種方式實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體用PEG的表面修飾：通過將聚合物物理性吸附至囊泡表 面、通過在脂質(zhì)體制備期間摻入PEG-脂質(zhì)綴合物，或者通過將反應(yīng)性基團(tuán)共價(jià)連接至預(yù)先 形成的脂質(zhì)體表面。
[0171] 已證明將PEG接合至脂質(zhì)體具有數(shù)種生物學(xué)上和技術(shù)上的優(yōu)勢(shì)。PEG化囊泡的最 顯著特點(diǎn)為其有力地減少M(fèi)PS的攝取及其延長(zhǎng)的血液循環(huán)，從而改善其在灌注的組織中的 分布。此外，脂質(zhì)體表面上的PEG鏈避免囊泡聚集，改善其穩(wěn)定性。PEG修飾的脂質(zhì)體也常 被稱為"隔離的"脂質(zhì)體。Doxil?(鹽酸多柔比星脂質(zhì)體注射液）為脂質(zhì)體包封的多柔比 星，其利用附屬的聚乙二醇（PEG)來(lái)逃避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES)并延長(zhǎng)藥物循環(huán)時(shí)間（參見 Vail D Μ, Amantea M A, Colbern G T等人,"Pegylated Liposomal Doxorubicin. Proof of Principle Using Preclinical Animal Models and Pharmacokinetic Studies. " Semin Oncol. (2004) 31 (Suppl 13): 16-35)。
[0172] 在由磷脂和膽固醇構(gòu)成的脂質(zhì)體中，發(fā)現(xiàn)PEG增加囊泡循環(huán)壽命的能力取 決于接合的PEG的量和聚合物的長(zhǎng)度或分子量（Allen T Μ等人，Biochim Biophys Acta. 1989, 981:27-35)。在大多數(shù)情況下，長(zhǎng)鏈PEG產(chǎn)生對(duì)于血液滯留時(shí)間的最大改善。在 一實(shí)施方案中，PEG的分子量為約500至約5000。
[0173] 其它可用于本申請(qǐng)的脂質(zhì)體表面修飾的親水性聚合物包括水溶性的、親水性的、 具有彈性主鏈的和生物相容性的聚合物。在一實(shí)施方案中，親水性聚合物選自PEG、聚乙烯 吡咯烷酮（PVP)、聚丙烯酰胺（PAA)、磷脂酰聚甘油、聚[N-(2-羥丙基）甲基丙烯酰胺]、 L-氨基酸系生物可降解聚合物、聚乙烯乙醇（例如分子量為約20, 000的PVA)、聚（2-甲 基-2-噁唑林）、聚（2-乙基-2-噁唑林）及其混合物。
[0174] 在另一實(shí)施方案中，脂質(zhì)體的表面用神經(jīng)節(jié)苷脂和/或唾液酸衍生物（如單唾液 酸神經(jīng)節(jié)苷脂（GM1))修飾。在靜脈內(nèi)注射后脂質(zhì)體的MPS攝取的研究中測(cè)試數(shù)種糖脂： 糖脂GM1 (源自腦組織的單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂）在并入脂質(zhì)體表面時(shí)顯著減少M(fèi)PS攝取，并 且該制劑在血液循環(huán)中保留數(shù)小時(shí)。直徑在90-200nm范圍的GM1接合脂質(zhì)體比不在該尺 寸范圍的脂質(zhì)體具有更長(zhǎng)的血液滯留，由此在腫瘤組織中蓄積。GM包被的脂質(zhì)體可用于口 服給藥和向腦部的遞送，特別地已表明在用作口服藥物載體的脂質(zhì)體制劑中，含有GM1和 GM III型的脂質(zhì)體制劑更可能在通過胃腸道后繼續(xù)存在（TairaMC等人Drug Deliv. 2004; 11:123-8)。此外，在兩個(gè)半球的皮層、基底神經(jīng)節(jié)和中腦中對(duì)于GM1脂質(zhì)體的腦部示蹤劑 攝取比對(duì)于對(duì)照脂質(zhì)體的腦部示蹤劑攝取更高；相反地，在示蹤劑的肝攝取或者血液濃度 中未觀察到顯著變化（Mora Μ等人Pharm Res. 2002 ; 19:1430-8)。
[0175] 除了 PEG修飾的脂質(zhì)體，研究者研發(fā)了多種其它衍生的脂質(zhì)。這些衍生的脂質(zhì)也 可慘入脂質(zhì)體中。參見例如：國(guó)際專利申請(qǐng)W0 93/01828 ;Park Y S，Maruyama K, Huang L. ''Some negatively charged phospholipids derivatives prolong the liposome circulation in vivo.''Biochimica et Biophysica Acta (1992) 1108:257-260 ;Ahl 等 人，Biochimica Biophys. Acta (1997) 1329:370-382。
[0176] D.靶向某閉
[0177] 為了增加脂質(zhì)體藥物在期望的組織中的蓄積，產(chǎn)生更高和更具選擇性的治療活 性，在一個(gè)實(shí)施方案中，通過將細(xì)胞特異性靶向基團(tuán)連接至脂質(zhì)體的表面來(lái)修飾本申請(qǐng)的 脂質(zhì)體，以便于它們和特定的細(xì)胞或組織類型結(jié)合。靶向基團(tuán)包括例如單克隆抗體（MAb) 或片段、多肽、生長(zhǎng)因子、糖蛋白、糖或受體配體，或者其混合物。示例性靶向基團(tuán)包括但不 限于轉(zhuǎn)鐵蛋白、葉酸、葉酸鹽、透明質(zhì)酸、糖鏈（例如半乳糖、甘露糖等）、單克隆抗體的片 段、脫唾液酸糖蛋白等，以及其它技術(shù)人員已知的靶向因子及其混合物。在具體的實(shí)施方案 中，靶向因子為針對(duì)細(xì)胞表面受體的蛋白質(zhì)、肽或者其它分子（如轉(zhuǎn)鐵蛋白、葉酸鹽、葉酸、 脫唾液酸糖蛋白）。
[0178] 含有靶向因子的脂質(zhì)組合物的實(shí)例包括在第5, 049, 390、5, 780, 052、 5, 786, 214、6, 316, 024、6, 056, 973、6, 245, 427、6, 524, 613、6, 749, 863、6, 177, 059、和 6, 530, 944 號(hào)美國(guó)專利；第 2004/0022842、2003/0224037、2003/143742、2003/0228285、 2002/0198164、2003/0220284、2003/0165934 和 2003/0027779 號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公 開；第 TO 95/33841、TO 95/19434、W0 2001037807、W0 96/33698、TO 2001/49266、 TO 9940789、TO 9925320、TO 9104014、W0 92/07959、EP 1369132 和 JP 2001002592 號(hào) 國(guó)際專利申請(qǐng)以及在 Iinuma H 等人 Int J Cancer, 2002, 99:130-137 ;Ishida 0 等人 Pharmaceutical Research, 2001，18:1042-1048 ;Holmberg 等人 Biochem. Biophys. Res. Comm. 1989, 165(3) :1272-1278 ;Nam等人，J.Biochem. Mol. Biol. 1998,31(1) :95-100和Nag 等人 J. Drug Target. 1999,6(6) :427-438 中公開的那些。
[0179] 特別地，Linuma等人（ibid)研發(fā)了 Tf-PEG-脂質(zhì)體，轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合在脂質(zhì)體的表 面，并且證明更大量的脂質(zhì)體結(jié)合至腫瘤細(xì)胞的表面。腫瘤細(xì)胞對(duì)于Tf-PEG-脂質(zhì)體比對(duì) 于PEG脂質(zhì)體具有更高的脂質(zhì)體攝?。↖numa等人，ibid ;Ishida等人，ibid)。
[0180] 特異性靶向基團(tuán)的實(shí)例以及它們的治療靶點(diǎn)如下：抗HER2(曲妥珠單抗）-乳 腺癌/卵巢癌；抗EGF-實(shí)體瘤；抗⑶19-淋巴瘤；抗⑶22-B細(xì)胞淋巴瘤；抗β 1整聯(lián)蛋 白-癌癥細(xì)胞；抗GD2-成神經(jīng)細(xì)胞瘤；抗GAH-胃、結(jié)腸和乳腺癌；葉酸-癌細(xì)胞；轉(zhuǎn)鐵蛋 白-癌細(xì)胞；茴香酰胺-乳腺癌、黑色素瘤和前列腺癌；血管活性腸肽28-mer-乳腺癌細(xì) 胞的成像、RGD-成神經(jīng)細(xì)胞瘤、黑色素瘤和結(jié)腸癌；血管生成歸巢肽（Angiogenic homing peptide) -黑色素瘤、肉瘤和結(jié)腸癌。
[0181] 在一實(shí)施方案中，將本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物注射入個(gè)體中，并加熱相關(guān)身體部位 以使囊泡內(nèi)容物能夠靶向遞送。這對(duì)于在體溫下穩(wěn)定的脂質(zhì)體時(shí)特別有用的。如癌癥的升 溫治療（hyperthermic treatment)的已知方法可受益于本申請(qǐng)的組合物的祀向遞送。
[0182] 在一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體含有表面修飾的親水性肽和靶向基團(tuán)。在另一 實(shí)施方案中，通過將合適的脂質(zhì)的PEG衍生物（在PEG鏈的端頭含有馬來(lái)酰亞胺基團(tuán)）混 合入脂質(zhì)體制劑中來(lái)制備這些脂質(zhì)體。制備脂質(zhì)體后，例如含有親核性的N、0和/或S原 子的靶向基團(tuán)通過表面鍵合結(jié)合至上述PEG脂質(zhì)體的馬來(lái)酰亞胺基團(tuán)，得到穩(wěn)定的鍵?；?者，將市售預(yù)負(fù)載的長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體通過靶向基團(tuán)的后插入進(jìn)行修飾。
[0183] E.其它鉬分
[0184] 在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物和脂質(zhì)體還含有對(duì)于特定應(yīng) 用所期望的其它添加劑或藥劑。這樣的添加劑或藥劑包括但不限于濕潤(rùn)劑、溶劑、抗生素、 著色劑、香料、芳香劑等。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物含有抗氧化劑。在一實(shí)施方案中， 本申請(qǐng)中所使用的抗氧化劑包括丁羥甲苯、丁羥茴醚、抗壞血酸亞油酸酯、抗壞血酸二棕櫚 酸酯、抗壞血酸生育酚馬來(lái)酸鹽、抗壞血酸鈣、類胡蘿卜素、曲酸及其藥學(xué)上可接受的的鹽、 巰基乙酸及其藥物可用的鹽（例如銨鹽）、生育酚、維生素 E、生育酚聚醚（t〇C〇phereth)-5、 生育酚聚醚-12、生育酚聚醚-18或生育酚聚醚-80,或者其混合物。
[0185] III.制備方法
[0186] 本申請(qǐng)的脂質(zhì)體可使用用于制備脂質(zhì)體的任意已知方法來(lái)制備，所述方法例如薄 膜法、超聲法、擠出法、高壓/均質(zhì)法、微流化法、洗滌劑透析法、乙醇注入法、包括交叉流 技術(shù)的乙醇注入法、小脂質(zhì)體囊泡的鈣誘導(dǎo)融合法和乙醚輸注法。這些方法是本領(lǐng)域中 公知的（參見例如"Liposome Technology"，G.Gredoriadis(Ed·)，1991，CRC Press:Boca Raton,Fla. ；D. Deamer and A. D. Bangham, Biochim. Biophys. Acta, 1976, 443:629-634 ； Fraley 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1979, 76:3348-3352 ;F. Szoka 等人，Ann. Rev. Biophys. Bioeng.，1980, 9:467-508 ;Hope 等人，Biochim. Biophys. Acta, 1985, 812:55-65 ; L.D.Mayer 等人，Biochim.Biophys. Acta, 1986,858:161-168 ;Hope 等人，Chem.Phys. Lip. ,1986, 40:89-1-7 ;K.J. Williams 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. ,1988, 85:242-246; Wagner 和 Vorauer-Uhl, Journal of Drug Delivery, 2011，pp. 1-9 ;Wagner 等人，Journal of Liposome Research, 2002, 12(3):259-270 ;Wagner 等人，European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 2002, 54:213-219 以及第 4, 217, 344、4, 235, 871、 4, 241，046、4, 356, 167、4, 485, 054、4, 551，288、4, 663, 161、4, 737, 323、4, 752, 425、 4, 774, 085、4,781，871、4,877, 561、4, 927, 637、4, 946, 787、5, 190, 822、5,206, 027、 5, 498, 420、5, 556, 580 和 5, 700, 482 號(hào)美國(guó)專利）。
[0187] 在一個(gè)實(shí)施方案中，使用傳統(tǒng)的薄膜法制備脂質(zhì)體。在該方法中，將形成雙分子 層的元素與揮發(fā)性的有機(jī)溶劑或者溶劑混合物（例如氯仿、乙醚、甲醇、乙醇、丁醇、環(huán)己烷 等）混合。然后將溶劑蒸發(fā)（例如使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、干燥的氮?dú)饣驓鍤饬骰蛘咂渌椒ǎ?導(dǎo)致干燥脂質(zhì)膜的形成。然后將所述膜用含有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的水性介質(zhì)水 合。所使用的水合步驟影響形成的脂質(zhì)體的類型（例如雙分子層的數(shù)目、囊泡尺寸和包封 體積）。水合的脂質(zhì)薄膜在攪拌過程中分離，自封閉形成不同尺寸的，大的多層囊泡（MLV)。 通過在更劇烈的攪拌條件下水合脂質(zhì)，或者通過加入增溶洗滌劑（如脫氧膽酸鹽），可使所 生成的多層囊泡的尺寸變得更小?；蛘呋蛄硗猓赏ㄟ^超聲法、凍融法或擠出法來(lái)減小囊泡 尺寸（參見下述）。
[0188] 大單層囊泡（LUV)可以由MLV通過使用多種方法中的任一種來(lái)制備。例如，通 過濾器擠出MLV可提供LUV，其尺寸取決于所使用的濾器孔徑。在這樣的方法（例如在 第5, 008, 050號(hào)美國(guó)專利中所描述）中，將MLV脂質(zhì)體懸浮液反復(fù)通過擠出裝置，得到一 群粒徑分布均勻的LUV。當(dāng)使用由凝膠轉(zhuǎn)變?yōu)橐壕У臏囟却笥诃h(huán)境溫度的脂質(zhì)時(shí)，可以使 用具有加熱圓筒的擠出機(jī)（或thermojacket)。如Mayer等人（Biochim.Biophys. Acta, 1985,817:193-196)所描述，在擠出操作前，LUV可接受至少一次冷凍和融化循環(huán)。
[0189] 其它制備單層囊泡的方法依賴于對(duì)脂質(zhì)體的水性分散體應(yīng)用剪切應(yīng)力。這樣的方 法包括超聲法和均質(zhì)法。使用浴式超聲波儀或者探頭超聲波儀（probe sonicator)來(lái)超聲 處理脂質(zhì)體懸浮液導(dǎo)致尺寸逐漸減小為尺寸小于50nm的小單層囊泡?？赏ㄟ^準(zhǔn)彈性光散 射（QELs) (V. A. Bloomfield，Ann. Rev. Biophys. Bioeng.，1981，10:421-450)測(cè)定脂質(zhì)體囊 泡的尺寸。在代表性均質(zhì)方法中，在3, 000-14, OOOpsi，優(yōu)選10, 000-14, OOOpsi的壓力和對(duì) 應(yīng)于具有最高Tc的脂質(zhì)的凝膠-液晶轉(zhuǎn)化溫度下，將多層囊泡反復(fù)通過標(biāo)準(zhǔn)乳液勻化器中 循環(huán)，直至觀察到所選擇的脂質(zhì)體尺寸，通常為約100-500nm。
[0190] 其它用于制備LUV的技術(shù)包括反相蒸發(fā)法（第4, 235, 871號(hào)美國(guó)專利）和輸注法 以及洗滌劑稀釋法。例如，單層囊泡可通過以下制備：將脂質(zhì)在氯仿或者乙醇中溶解，然后 將所述脂質(zhì)注射入緩沖液中，導(dǎo)致脂質(zhì)自發(fā)地聚集并形成單層囊泡?；蛘?，可將磷脂溶解于 洗滌劑（例如膽酸鹽、Triton-X或者正烷基葡糖苷）中。在溶解的脂質(zhì)-清潔劑膠束形成 后，通過透析、凝膠過濾、親和色譜法、離心、超濾或者任意其它合適的方法移除清潔劑。
[0191] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本申請(qǐng)包括制備含有包封于至少一個(gè)脂雙層內(nèi)的亞氯酸鹽、 氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體的方法，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)，所述方 法包括：
[0192] (a)向內(nèi)表面至少部分具有所述一種或多種脂質(zhì)的薄膜的容器中加入亞氯酸鹽、 氯酸鹽或其混合物的水性溶液；
[0193] (b)在足以全部或者部分移除所述內(nèi)表面的所述薄膜的條件下攪拌所述容器，以 得到含有包封有亞氯酸鹽和/或氯酸鹽的脂質(zhì)體的渾濁溶液；
[0194] (c)對(duì)所述渾濁溶液進(jìn)行處理，以將所述脂質(zhì)體的平均直徑減小至所需的量，例如 約50nm至約300nm ;以及
[0195] (d)任選地對(duì)所述脂質(zhì)體進(jìn)行處理，以從所述脂質(zhì)體的外部溶液中移除亞氯酸鹽、 氯酸鹽或其混合物。
[0196] 在另一實(shí)施方案中，使用乙醇注入法制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體，例如Wagner和 Vorauer-Uhl, Journal of Drug Delivery, 2011，ρρ· 1-9)中所述，其有關(guān)部分援引加入本 文。在另一實(shí)施方案中，使用通過交叉流技術(shù)的乙醇注入法制備所述脂質(zhì)體，例如在Wagner 等人，Journal of Liposome Research, 2002, 12 (3) :259-270)中所述，其有關(guān)部分援引加 入本文。
[0197] 在一實(shí)施方案中，在（a)中的所述一種或多種合適的脂質(zhì)與所述亞氯酸鹽、氯酸 鹽或其混合物之間的摩爾比為約〇. 01:1至約10000:1、約〇. 1:1至約5000:1、約0. 5:1至 約 2500:1、約 1:1 至約 1000:1 或約 0. 1:1 至約 100:1。
[0198] 可購(gòu)買溶液形式的用于制備本申請(qǐng)的脂質(zhì)體的脂質(zhì)，特備是購(gòu)自Avanti Lipids。 LIPOID AG提供未稀釋的固態(tài)的脂質(zhì)。在特定實(shí)施方案中，所述溶液的濃度為每毫升的溶液 約10mg至約100mg的脂質(zhì)。用于制備脂質(zhì)體的該溶液的量會(huì)根據(jù)所需脂質(zhì)的量變化，所需 脂質(zhì)的量會(huì)取決于所需的樣品體積。如果使用純的、未溶解的脂質(zhì)，則將它們?cè)诤线m的體積 的氯仿或者其它合適的有機(jī)溶劑中溶解。
[0199] 為了得到內(nèi)表面至少部分具有所述一種或多種脂質(zhì)的薄膜的容器，在一實(shí)施方案 中，將容器在減壓下以及接近或者高于全部一種或多種脂質(zhì)的相變溫度（PTT)的溫度下攪 拌處理，以移除溶劑。注意，在蒸發(fā)步驟中不需要保持高于PTT。對(duì)于氯仿溶液，可使用37°C 的水浴，所述溫度低于DPPC的PTT(41°C )和氫化大豆磷脂的PTT(50°C )。在一實(shí)施方案 中，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，在將容器保持在高于全部一種或多種脂質(zhì)的相變溫度的溫度下，將溶 劑移除。
[0200] 向容器中添加水性溶液，并將容器在足以將薄膜從所述容器的內(nèi)表面移除的條件 下攪拌，以提供含有脂質(zhì)體的渾濁溶液/分散體。在一實(shí)施方案中，足以移除薄膜的條件包 括晃動(dòng)容器，并將容器加熱至高于全部一種或多種脂質(zhì)的脂質(zhì)相變溫度的溫度。在另一實(shí) 施方案中，所述條件還包括在高于全部一種或多種脂質(zhì)的脂質(zhì)相變溫度的溫度下晃動(dòng)，持 續(xù)約1分鐘至約2小時(shí)，或者約5分鐘至約1小時(shí)。在此步驟中，隨著脂質(zhì)體的形成和亞氯 酸鹽、氯酸鹽或者其混合物的溶液的包封，發(fā)生一種或多種脂質(zhì)的再水合。這些所謂的初級(jí) 脂質(zhì)體為在脂質(zhì)體內(nèi)部（內(nèi)相）和外部（外相）均含有所述溶液的大多層囊泡（LMV)。在 該階段，樣品為渾濁的、乳白色溶液/分散體。
[0201] 可使用用于減小脂質(zhì)體尺寸的任意已知方法來(lái)處理所述渾濁溶液，以將脂質(zhì)體的 平均直徑減小至約50nm至約300nm。在本申請(qǐng)的一實(shí)施方案中，使用凍融循環(huán)和擠出法的 組合。在另一實(shí)施方案中，僅使用擠出法。
[0202] 對(duì)于凍融循環(huán)，在一實(shí)施方案中，將樣品轉(zhuǎn)移至合適的容器中（如果需要），例如 凍存管（cryotube)，并將容器浸入液氮中，隨后在高于全部一種或多種脂質(zhì)的脂質(zhì)相變溫 度的水浴中解凍。在一實(shí)施方案中，至少進(jìn)行2、3、4、5、6、7、8、9或10次循環(huán)。盡管不希望 受理論限制，冷凍導(dǎo)致初級(jí)脂質(zhì)體的破壞，并且在高于全部一種或多種脂質(zhì)的脂質(zhì)相變溫 度下解凍導(dǎo)致平均直徑較小的脂質(zhì)體自發(fā)再形成。但是，凍融法是任選的。
[0203] 在本申請(qǐng)的一實(shí)施方案中，擠出法通過使脂質(zhì)體樣品通過至少一個(gè)約50nm至約 200nm的濾片的擠壓下進(jìn)行；在一實(shí)施方案中，通過向含有合適的濾器的擠出機(jī)施加壓力 下進(jìn)行擠壓。在另一實(shí)施方案中，在高于全部一種或多種脂質(zhì)的脂質(zhì)相變溫度的溫度下進(jìn) 行擠出，并且重復(fù)至少2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
[0204] 在一實(shí)施方案中，使用擠出法僅提供平均直徑為約50nm至約150nm或者約100nm 的單層脂質(zhì)體。在另一實(shí)施方案中，可使用超聲法來(lái)減小粒度或者將MLV轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)UV/SUV。
[0205] 在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的方法提供基本上不含降解產(chǎn)物（例如通過 MALDI-T0F監(jiān)測(cè)）的脂質(zhì)體組合物。在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的方法提供含有降解產(chǎn)物的 水平符合由FDA或者其它管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的準(zhǔn)則的脂質(zhì)體組合物。
[0206] 在該階段，樣品含有分散在亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的溶液中的填充有離子 的脂質(zhì)體。在一實(shí)施方案中，含有所述溶液的外相被例如鹽水，使用任選的透析處理來(lái)置 換。在一實(shí)施方案中，將樣品填充至透析室內(nèi)，并將其置于溫度低于全部一種或多種脂質(zhì)的 PTT的鹽水溶液中。在約1小時(shí)后，在攪拌下，交換過量的介質(zhì)，并將該步驟重復(fù)至少1、2、3 或4次。在一實(shí)施方案中，重復(fù)該步驟直到亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的濃度低于鄰聯(lián)甲 苯胺（o-tolidin)法的檢出限。這種用于分析亞氯酸鹽/氯酸鹽的方法基于以下事實(shí)：亞 氯酸根和氯酸根（分別為C1CV和C1CV)與在強(qiáng)鹽酸溶液中的鄰聯(lián)苯甲胺反應(yīng)，產(chǎn)生顏色的 變化，該顏色的變化高度取決于存在于溶液中的ckv和ckv的量。該方法提供單獨(dú)檢測(cè) 兩種物質(zhì)的兩步法。然而，由于WF10中亞氯酸鹽與氯酸鹽的恒定比，僅需要使用一步其中 兩種組分對(duì)顏色的變換都有貢獻(xiàn)的步驟。實(shí)施鄰聯(lián)甲苯胺法的方法在實(shí)施例7中描述。
[0207] 在本申請(qǐng)的實(shí)施方案中，將含有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體和含有這 些脂質(zhì)體的組合物在低于約1〇、9、8、7或者6°C，適合地低于約6°C下儲(chǔ)存。
[0208] 在另一實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)體組合物可被滅菌。適合的滅菌技術(shù)的非限制性實(shí) 例包括過濾、高壓滅菌、伽馬射線和凍干（冷凍干燥）。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過使用220nm 的濾器過濾來(lái)進(jìn)行滅菌。
[0209] IV.治療應(yīng)用
[0210] 亞氯酸鹽和氯酸鹽為公知的強(qiáng)氧化劑。這些物質(zhì)的氧化能力傾向于隨著pH的降 低而增加。因此，用于醫(yī)藥用途的市售穩(wěn)定化的亞氯酸鹽制劑（例如WF10和Oxoferin (用 于治療慢性傷口的治療））通常以高pH水性溶液的形式提供，其含有少量或者不含有可與 亞氯酸鹽反應(yīng)或者由于高pH環(huán)境（例如由于酯基的水解作用）而分解的有機(jī)物質(zhì)?？墒?用該策略確保產(chǎn)品具有商業(yè)上可接受的架存期，但是就產(chǎn)品副作用而言可能是不利的，并 且限制了可研發(fā)的產(chǎn)品的種類。
[0211] 例如，通過靜脈內(nèi)輸注給藥強(qiáng)堿性溶液（例如WF10)可導(dǎo)致靜脈炎（血管炎癥）， 除非緩慢地進(jìn)行輸注，并且僅在WF10用約250-500mL的鹽水稀釋后進(jìn)行。鑒于此，WF10的輸 注通?？赡茉谌?. 5小時(shí)的時(shí)期內(nèi)給藥，這導(dǎo)致患者的不便和大量醫(yī)療資源的使用。類似 地，在數(shù)個(gè)國(guó)家中批準(zhǔn)Oxoferin用于治療傷口，并且不出意料地，考慮到它的高pH，最常見 的副作用之一為疼痛（參見Hinz J, Hautzinger H, Stahl KW. Rationale for and results from a randomised, double-blind trial of tetrachlorodecaoxygen anion complex in wound healing. Lancet. 19864 月 12 日；1 (8485) :825-8)。也預(yù)料到 WF10 和 Oxoferin 的 強(qiáng)堿性本質(zhì)也使其不適合其它部位的給藥，例如給藥至肺部遞送模式所靶向的肺泡的脆弱 上皮細(xì)胞。
[0212] 藥物劑型研發(fā)領(lǐng)域的技術(shù)人員也會(huì)理解亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物與許多有 機(jī)物質(zhì)的共同配制的困難可造成不期望的限制。例如，當(dāng)一些敷料（dressing)材料用 Oxoferin浸透時(shí)不表現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定性，這使研發(fā)如預(yù)負(fù)載有Oxoferin的袋形傷口愈合敷料 的產(chǎn)品是挑戰(zhàn)性的。研發(fā)包含多于一種活性藥物成分的藥物產(chǎn)品也是常見作法，會(huì)預(yù)計(jì)到 如果活性劑與含有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的溶液混合，許多活性劑不會(huì)表現(xiàn)出商業(yè) 上可接受的穩(wěn)定性。
[0213] 認(rèn)為WF10通過其對(duì)巨噬細(xì)胞的作用來(lái)發(fā)揮其治療益處（參見 McGrath，Kodelja，V. Balanced macrophage activation hypothesis: a biological model for development of drugs targeted at macrophage functional states. Pathobiology，67, 277-281 (1999))。另一方面，WF10經(jīng)常以非常接近可能出現(xiàn)毒副 作用的限度的劑量給藥。例如，在WF10對(duì)患有晚期AIDS患者的試驗(yàn)中，使用0. 5mL/ kg的WF10劑量，因?yàn)樵谥暗氖褂?. lmL/kg至1. 5mL/kg的劑量范圍的劑量范圍試驗(yàn) 中，接受大于〇. 5mL/kg的患者中表現(xiàn)靜脈炎、高鐵血紅蛋白水平升高以及紅細(xì)胞（RBC) 谷胱甘肽還原酶水平降低，因此認(rèn)為0. 5mL/kg是最大耐受劑量（參見Raffanti，S. P. , Schaffner, ff. , Federspiel, C. F. , Blackwell, R. B. , Ah Ching, 0. , Kiihne, F. W. Randomized,double blind, placebo-controlled trial of the immune modulator WFlOin patients with abvanced AIDS.Infection,Vol. 26, 4, 201-206(1998)) 〇
[0214] 也已研究（WF10形式的）0X0-K993對(duì)由患有晚期頸板瘤的患者的放射療 法引起的并發(fā)癥的治愈和預(yù)防中的作用（參見Rattka, P.，Hinz, J. Inf luence of TCDO on the results of radiotherapy in advanced collum carcinoma stage IIIB. Abstract:Int. Symp.on Tissue Repair, Pattaya, Thailand,Dec.6-8 (1990) in:Highlights-International Symposium on Tissue Repair, 30-31 (1990)) 〇 在該石開究 中，在照射治療組的患者1.5小時(shí)前給藥WF10,并且該論文作者得到了以下印象：照射前給 予WF10治療顯著增加輻射期間對(duì)腫瘤組織的生物學(xué)作用。對(duì)于這樣的治療，具有將穩(wěn)定化 的亞氯酸鹽制劑靶向至腫瘤組織的方法是期望的，但是不幸地，靜脈內(nèi)給藥穩(wěn)定化的亞氯 酸鹽（如WF10)的溶液制劑是困難的。
[0215] 在其中外相基本上不含這些藥劑的制劑的脂質(zhì)體中包封亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混 合物的能力具有很多優(yōu)勢(shì)。例如，含有脂質(zhì)體的組合物的外相也可含有與亞氯酸鹽、氯酸鹽 或其混合物不相容的物質(zhì)（如有機(jī)物質(zhì)），其包括例如特定活性藥物成分或者賦形劑。所述 脂質(zhì)體制劑也可分散于固體基質(zhì)中，否則所述固體基質(zhì)與如施用于傷口的敷料材料的這些 物質(zhì)不容易相容。類似地，可有利地利用制備大約中性pH的不含亞氯酸鹽或氯酸鹽的外相 的能力以減少當(dāng)向身體靜脈內(nèi)或局部給藥高pH溶液劑時(shí)觀察到的副作用（如靜脈炎和疼 痛）的發(fā)生，并使亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物可以通過新的給藥方式（例如肺部途徑）遞 送。
[0216] 也會(huì)理解可將脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)為優(yōu)選被巨噬細(xì)胞循環(huán)清除，巨噬細(xì)胞被認(rèn)為是 基于亞氯酸鹽或氯酸鹽的藥物的作用部位。例如，脂質(zhì)體可降低亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合 物實(shí)現(xiàn)給定治療效果所必須的劑量，并且可改善藥劑的安全界限?；蛘撸|(zhì)體可用于在不 誘發(fā)不可接受的毒性下，增加亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的藥理作用。
[0217] 或者，可將脂質(zhì)體設(shè)計(jì)為遞送至除巨噬細(xì)胞的靶點(diǎn)。例如，可應(yīng)用如化療藥物 Doxil (鹽酸多柔比星脂質(zhì)體注射劑，Centocor Ortho Biotech Products LP)中所使用的 技術(shù)以靶向患者體內(nèi)的腫瘤。當(dāng)期望使用亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物作為放射療法前的 敏化劑時(shí)，應(yīng)用這樣的靶向作用可以是有利的。
[0218] 因此，本申請(qǐng)還包括本文中所述脂質(zhì)體和含有所述脂質(zhì)體的組合物的所有用途， 以及包括這些實(shí)體的方法。在特定實(shí)施方案中，本申請(qǐng)包括本申請(qǐng)的脂質(zhì)體或組合物作為 藥物的用途。
[0219] 通過將活性物質(zhì)并入脂質(zhì)體中可改善所述活性物質(zhì)的益處。改善的脂質(zhì)體組合物 的特性包括：例如改變的藥物代謝動(dòng)力學(xué)、生物分布和/或?qū)喡人猁}、氯酸鹽或其混合物 的保護(hù)。通過提供持續(xù)釋放制劑，也可降低給藥藥劑的頻率或提供更快的輸注速率。用本 申請(qǐng)的脂質(zhì)體組合物也可向肺部的巨噬細(xì)胞或者向發(fā)炎組織靶向遞送亞氯酸鹽、氯酸鹽或 其混合物。通過向靶位靶向遞送，可以降低劑量，例如，按約1至約1000的系數(shù)降低。益處 還可包括減少當(dāng)向身體靜脈內(nèi)或局部給藥高pH亞氯酸鹽溶液劑時(shí)觀察到的副作用（如靜 脈炎和疼痛）的發(fā)生，并使藥劑可以通過新的給藥方式遞送，例如通常需要較低劑量體積 的肺部途徑或彈丸注射，如在短時(shí)間（例如小于30分鐘、小于15分鐘、小于5分鐘）內(nèi)靜 脈內(nèi)遞送組合物。
[0220] 本申請(qǐng)的脂質(zhì)體的一個(gè)具體優(yōu)勢(shì)為通過改變脂質(zhì)膜的組成調(diào)整所包封的藥劑的 釋放時(shí)間的能力。因此所包封的一種或多種藥劑的釋放時(shí)間可以通過選擇具有期望的溫度 釋放曲線的脂質(zhì)的組合來(lái)控制。例如，對(duì)于傷口愈合應(yīng)用，可選擇脂質(zhì)使得釋放溫度為或者 接近皮膚溫度，并且將脂質(zhì)體向皮膚給藥導(dǎo)致當(dāng)組合物達(dá)到皮膚溫度時(shí)小量或逐步釋放， 此時(shí)大量藥劑釋放。
[0221] 因此，本申請(qǐng)還包括治療給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益的疾病、病癥或 病況的方法，其包括向需要其的個(gè)體給藥有效量的本申請(qǐng)的組合物。
[0222] 本申請(qǐng)還包括本申請(qǐng)的組合物用于治療給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益 的疾病、病癥或病況的用途，以及用于治療給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益的疾 病、病癥或病況的本申請(qǐng)的組合物。
[0223] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本申請(qǐng)包括調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的方法，其包括向需要其的個(gè) 體給藥有效量的本申請(qǐng)的組合物。本申請(qǐng)還包括本申請(qǐng)的組合物用于調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的 用途，以及用于調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的本申請(qǐng)的組合物。
[0224] 不受理論束縛，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能與治療由于不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答產(chǎn)生慢性炎癥的 癥狀的疾病有關(guān)（參見例如第2011/0076344號(hào)美國(guó)專利申請(qǐng)公開）。因此，在一實(shí)施方 案中，所述給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益的疾病、病癥或病況選自可由抗原特異 性免疫應(yīng)答引發(fā)的那些，例如，自身免疫病和由不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答引起的疾病，如重癥肌無(wú) 力、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、血清病、糖尿病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、幼年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕熱、干燥綜 合征（Sjorgen syndrome)、系統(tǒng)性硬化病、椎關(guān)節(jié)病變、萊姆病、結(jié)節(jié)病、自身免疫性溶血、 自身免疫性肝炎、自身免疫性中性粒細(xì)胞減少癥、自身免疫性多腺性疾病、自身免疫性甲狀 腺疾病、多發(fā)性硬化、炎性腸病、結(jié)腸炎、克羅恩氏病、慢性疲勞綜合征等。至少在一些患者 中，慢性阻塞性肺?。–0PD)也可能具有一些自身免疫病因。在自身免疫反應(yīng)中，患者身體 產(chǎn)生過多的細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞（CTL)，或者其它變?yōu)獒槍?duì)自身健康細(xì)胞并破壞它們的細(xì) 胞因子。有接受移植（transplant)或移植（graft)的患者中，由于免疫系統(tǒng)將移植的器官 或者移植物的抗原識(shí)別為外來(lái)的并因此要破壞它們，因此產(chǎn)生不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答。這導(dǎo)致 移植物排斥。同樣地，當(dāng)移植的器官或者移植物的免疫系統(tǒng)將宿主的抗原識(shí)別為外來(lái)的并 要破壞它們，接受移植（transplant)和移植（graft)的患者可產(chǎn)生移植物對(duì)抗宿主的反 應(yīng)。這導(dǎo)致移植物抗宿主病。在變應(yīng)性哮喘、變應(yīng)性鼻炎和特應(yīng)性皮炎中觀察到其它不適 當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答。此外，產(chǎn)生慢性炎癥癥狀的疾病也涉及不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答，其特征在于過度 的巨噬細(xì)胞活化。例如，對(duì)組織損傷（如身體的傷口）或病原性生物（如細(xì)菌或病毒）侵 入的健康反應(yīng)涉及巨噬細(xì)胞的活化（通過"常規(guī)的"促炎途徑）并導(dǎo)致炎癥應(yīng)答。但是，如 果促炎免疫應(yīng)答不能被抑制，該應(yīng)答可能以不適當(dāng)?shù)姆绞?超調(diào)"，導(dǎo)致慢性炎癥。如乙型肝 炎和丙型肝炎、慢性肝炎以及coro的表現(xiàn)（如明顯由長(zhǎng)期暴露于非特異性支氣管和肺部刺 激物所導(dǎo)致的阻塞性支氣管炎和肺氣腫）的疾病的特征在于由過度的巨噬細(xì)胞活化引起 的慢性炎癥（肝炎中肝部的慢性炎癥以及C0PD中肺組織的慢性炎癥）。
[0225] 其它給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益的疾病、病癥或病況選自腫瘤性疾 ?。ò┌Y）、HIV感染、AIDS、神經(jīng)變性疾病、AIDS相關(guān)的癡呆、中風(fēng)、脊髓病狀、微生物感染 及其它病毒感染。
[0226] 神經(jīng)變性疾病的實(shí)例包括例如肌萎縮側(cè)索硬化（ALS)、阿爾茨海默病（AD)、帕金 森氏病（PD)和多發(fā)性硬化（MS)。所述癌癥可為但不限于腎上腺皮質(zhì)癌、直腸癌、再生障礙 性貧血、膽管癌、膀胱癌、骨癌、骨轉(zhuǎn)移、中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS)癌癥、周圍神經(jīng)系統(tǒng)（PNS)癌 癥、乳腺癌、卡斯?fàn)柭?、宮頸癌、兒童非霍奇金氏淋巴瘤、結(jié)腸和直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、食道 癌、尤文氏腫瘤家族（如尤文氏肉瘤）、眼癌、膽囊癌、胃腸道類癌瘤、胃腸道間質(zhì)瘤、妊娠滋 養(yǎng)細(xì)胞疾病、多毛細(xì)胞白血病、霍奇金氏病、卡波西肉瘤、腎癌、喉癌和下咽癌、急性淋巴細(xì) 胞白血病、急性髓性白血病、小兒白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、慢性髓樣白血病、肝癌、肺 癌、肺類癌瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、男性乳癌、惡性間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜 合征、骨髓增生病、鼻腔和鼻側(cè)癌、鼻咽癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、 胰腺癌、陰莖癌、垂體瘤、前列腺癌、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、涎腺癌、肉瘤（成人軟組 織癌）、黑色素皮膚癌、非黑色素皮膚癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲狀腺癌、子宮癌（如子宮 肉瘤）、陰道癌、夕卜陰癌和Waldenstrom's巨球蛋白血癥。
[0227] 在一實(shí)施方案中，所述給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益的疾病、病癥或病 況選自變應(yīng)性哮喘、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、腫瘤性疾病、HIV感染及AIDS。在一實(shí)施方案 中，所述腫瘤性疾病或者癌癥為胃腸道、頭、頸、乳腺或者胰臟的癌癥。
[0228] 其它給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物是有益的治療應(yīng)用包括對(duì)遭受放射綜合征 或者暴露于環(huán)境毒素的患者的治療。所述放射綜合征可包括由放射療法或者如戰(zhàn)斗或恐怖 襲擊中使用的核武器所導(dǎo)致的急性放射綜合征或輻射照射的遲發(fā)效應(yīng)。也考慮到對(duì)于傷口 愈合的治療應(yīng)用，所述傷口愈合包括壓力、術(shù)后的或創(chuàng)傷后的傷口愈合，或者如在如糖尿病 性潰瘍、靜脈潰瘍、動(dòng)脈潰瘍或褥瘡潰瘍中的慢性傷口愈合。
[0229] 可使用任意合適的途徑向個(gè)體給藥本申請(qǐng)的組合物及其制劑，所述合適的途徑例 如靜脈內(nèi)給藥、動(dòng)脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、皮下給藥、真皮內(nèi)給藥、關(guān)節(jié)內(nèi)給藥、鞘 內(nèi)給藥、腦室內(nèi)給藥、直腸給藥、眼部給藥、作為鼻腔噴霧劑通過肺部吸入給藥和口服給藥， 以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它適合的給藥途徑。可使用本申請(qǐng)的方法和用途來(lái)治療的組 織包括但不限于鼻、肺、肝、腎、骨、胰腺、再生性軟組織、肌肉、腎上腺組織和乳腺。可治療的 組織既包括癌性組織，其它患病的或受損（compromised)組織，也包括如果如此期望的健 康組織。
[0230] 進(jìn)一步明確，術(shù)語(yǔ)"本申請(qǐng)的組合物"指本文中所述的脂質(zhì)體組合物，其為所制備 的形式或者與另外的載體和/或其它成分組合。
[0231] 本申請(qǐng)的組合物及其制劑被單獨(dú)使用或者與其它治療形式（例如輔助性癌癥療 法、綜合治療（combined modality treatment))聯(lián)合（例如，之前、與其并行或之后）使用。 例如，與其它治療劑（例如，本文中所述和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的癌癥化療劑（如烷化劑、 抗代謝藥、紫杉烷、代謝抑制物、抗腫瘤抗生素、植物堿、激素治療藥物、分子靶向藥物等））、 外科手術(shù)和/或放射療法組合。如果被治療的病況為癌癥，本文中所述組合物及其制劑可 以與一種或多種如本文中所述和本領(lǐng)域已知的其它抗癌藥或細(xì)胞毒性化合物、一種或多種 用于降低副反應(yīng)和/或其臨床表現(xiàn)的發(fā)生和/或嚴(yán)重性的額外的藥劑、外科手術(shù)（例如用 于移除腫瘤或淋巴結(jié)等）或放射聯(lián)合給藥。其中一種或多種外科手術(shù)或者放射為治療方 案的一部分，所述組合物或者其制劑可在放射療法或者外科手術(shù)之前、與其并行或者之后 給藥。同樣，本文中所述的組合物及其制劑可在給藥一種或多種抗癌藥之前、與其并行或者 之后給藥。本文中所述組合物及其制劑也可與減輕與病況或者治療方案有關(guān)的藥物（如減 少嘔吐、脫發(fā)、免疫抑制、腹瀉、疹、感覺障礙、貧血、疲勞、口炎、手足綜合征等的藥物）聯(lián)合 (例如，之前、與其并行或之后）給藥。所述組合物也可在治療方案（如手術(shù)后，以及與放射 療法并行和之后等）的多于一個(gè)階段（包括全程）給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，將本申請(qǐng)的 組合物或其制劑與5-氟脲嘧啶及其前藥（如卡培他濱）中的一種或兩者聯(lián)合給藥。
[0232] 在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，當(dāng)所述組合物及其制劑用于治療變應(yīng)性哮喘或者變 應(yīng)性鼻炎，或者其它肺部或者呼吸系統(tǒng)疾病、病癥或病況時(shí)，通常將它們通過靜脈內(nèi)途徑或 者跨黏膜（transmucosally)(更具體地，經(jīng)鼻、經(jīng)眼或經(jīng)肺）給藥。例如，可將本申請(qǐng)的組 合物以鼻腔噴霧劑、滴鼻劑和/或滴眼劑的形式給藥。也可使用任意電動(dòng)或者氣動(dòng)噴霧器 通過噴霧療法將本申請(qǐng)的組合物以精細(xì)的霧的形式向肺部給藥。對(duì)于鼻腔粘膜給藥，可使 用任意最先進(jìn)的適合用于制備水性脂質(zhì)體組合物的噴霧的設(shè)備。本申請(qǐng)的組合物及其制劑 被單獨(dú)使用或者與其它用于變應(yīng)性哮喘和變應(yīng)性鼻炎的治療形式聯(lián)合（例如，之前、與其 并行或之后）使用。例如，與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它治療劑（例如類固醇和抗組織胺 藥）組合。也可將本申請(qǐng)的組合物在使用前緩沖或稀釋，例如在通過靜脈內(nèi)輸注前用合適 的稀釋劑（如鹽水）緩沖或稀釋。
[0233] 在本申請(qǐng)的另一實(shí)施方案中，當(dāng)所述組合物及其制劑用于治療特應(yīng)性皮炎或其它 皮膚疾病、病癥或者病況時(shí)，通常將它們例如以洗劑、搽劑、膠凍劑、軟膏劑、乳膏劑、糊劑、 凝膠劑、水凝膠劑、氣霧劑、噴霧劑、散劑、顆粒劑、粒劑（granulate)、錠劑、栓劑、油膏劑 (salve)、口香糖、軟錠劑（pastille)、囊劑、漱口藥、片劑、牙線、硬膏劑、繃帶、板、泡沫劑、 膜劑、海綿、敷料、浸液劑（drench)、生物吸附性貼劑、棒劑（stick)等的形式局部或者經(jīng)皮 給藥。本申請(qǐng)的組合物及其制劑被單獨(dú)使用或者與其它用于特應(yīng)性皮炎的治療形式聯(lián)合 (例如，之前、與其并行或之后）使用。例如，與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它治療劑組合。
[0234] V.制劑和給藥
[0235] 如之前所述，將本申請(qǐng)的組合物和藥物制劑向需要其的個(gè)體按照本文中所述的使 用方法給藥，以治療本文中所述的病況。
[0236] 所述脂質(zhì)體組合物可以其自身給藥，也可以藥物組合物或者制劑的形式給藥。因 此本申請(qǐng)還包括含有包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體與至少一種生理學(xué)上可 接受的載體或者賦形劑混合的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物提供持續(xù) 釋放的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物，因此其包括持續(xù)釋放的制劑。
[0237] 如上所述，將所述脂質(zhì)體組合物或者其藥物組合物或制劑使用任意合適的途徑向 個(gè)體給藥，所述途徑例如靜脈內(nèi)給藥、動(dòng)脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、皮下給藥、真皮 內(nèi)給藥、經(jīng)皮膚給藥、皮內(nèi)（epicutaneous)給藥、關(guān)節(jié)內(nèi)給藥、鞘內(nèi)給藥、腦室內(nèi)給藥、作為 鼻腔噴霧劑通過肺部吸入給藥和口服給藥，以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它合適的給藥途 徑，并將其相應(yīng)地配制。
[0238] 根據(jù)給藥方式，所述藥物組合物可以為液體、固體或者半固體劑型的制劑。例如， 所述組合物可以配制為溶液劑、分散劑、混懸劑、乳劑、合劑、洗劑、搽劑、膠凍劑、軟膏劑、乳 膏劑、糊劑（包括牙膏）、凝膠劑、水凝膠劑、氣霧劑、噴霧劑（包括口噴霧劑）、散劑（包 括牙粉）、顆粒劑、粒劑、錠劑、栓劑、油膏劑（salve)、口香糖、軟錠劑（pastille)、囊劑、 漱口藥、片齊?、牙線、硬膏齊?、繃帶、板、泡沫齊?、膜齊?、海綿、敷料、浸液齊?、生物吸附性貼劑、 棒劑（stick)、片劑、口含片劑、糖錠劑（troches)、膠囊劑、酏劑、混懸劑、糖楽劑、薄片劑 (wafer)、修飾釋放片劑等。
[0239] 本申請(qǐng)的藥物組合物可以根據(jù)一般藥學(xué)實(shí)踐（參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences (2000_20th edition)以及在美國(guó)藥典：國(guó)家處方集（USP 34NF19)中）進(jìn)行配制。
[0240] 本申請(qǐng)的藥物組合物中所使用的生理學(xué)上可接受的載體或者賦形劑可由本領(lǐng)域 技術(shù)人員根據(jù)具體用途常規(guī)選擇。所述載體或賦形劑包括但不限于溶劑、緩沖劑、惰性稀釋 齊喊者填充劑、助懸劑、分散劑或者濕潤(rùn)劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、螯合劑、乳化劑、消泡劑、膠凝 齊?、軟膏基質(zhì)、滲透促進(jìn)劑、致濕劑、軟化劑和護(hù)膚劑。
[0241] 溶劑的實(shí)例為水、醇、植物油、海油和礦物油、聚乙二醇、丙二醇、甘油和液體聚烷 基硅氧烷。惰性稀釋劑和填充劑可以為蔗糖、山梨醇、糖、甘露醇、微晶纖維素、淀粉、碳酸 鈣、氯化鈉、乳糖、磷酸鈣、硫酸鈣或者磷酸鈉。緩沖劑的實(shí)例包括檸檬酸、乙酸、乳酸、氫磷 酸（hydrogenophosphoric acid)和二乙胺。合適的助懸劑為例如天然存在的樹膠（如金 合歡膠、阿拉伯膠、黃原膠和黃蓍膠）、纖維素（如羧甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖 維素和羥丙基甲基纖維素）、藻酸鹽和殼聚糖。分散劑或者濕潤(rùn)劑的實(shí)例為天然存在的磷脂 (如卵磷脂或者大豆卵磷脂）、環(huán)氧乙烷與脂肪酸或者長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物（例如聚氧乙 烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨醇單油酸酯和聚氧乙烯去水山梨糖醇單油酸酯）。
[0242] 可向本申請(qǐng)的藥物組合物中加入防腐劑，以防止可影響制劑的穩(wěn)定性并導(dǎo)致患者 中感染的微生物污染。合適的防腐劑的實(shí)例包括對(duì)羥苯甲酸酯（例如羥苯甲酯、羥苯乙酯、 羥苯丙酯、對(duì)羥基苯甲酸酯、羥苯丁酯、羥苯異丁酯和羥苯異丙酯）、山梨酸鉀、山梨酸、苯甲 酸、苯甲酸甲酯、苯氧乙醇、溴硝丙二醇、bronidox、MDM乙內(nèi)酰脲、碘丙炔正丁胺甲酸酯、苯 扎氯銨（benzalconium chloride)、西三溴胺和苯甲醇。螯合劑的實(shí)例包括EDTA鈉和朽1檬 酸。
[0243] 乳化劑的實(shí)例為天然存在的樹膠、天然存在的磷脂（如大豆卵磷脂、山梨聚糖單 油酸酯衍生物）、山梨坦酯、單脂肪酸甘油酯、脂肪醇和脂肪酸酯（如脂肪酸的甘油三酯）。 消泡劑通常促進(jìn)生產(chǎn)，它們通過使空氣-液體界面不穩(wěn)定并使液體從氣袋中流出來(lái)使泡沫 消散。消泡劑的實(shí)例包括西甲硅油、二甲硅油、乙醇和乙醚。
[0244] 凝膠基質(zhì)或增粘劑的實(shí)例為液狀石蠟、聚乙烯、脂肪油、膠體硅或膠體鋁、甘油、丙 二醇、羧乙烯基聚合物、鎂-鋁硅酸鹽、親水性聚合物（如淀粉或纖維素衍生物）、水可溶脹 的水膠體、角叉菜膠、透明質(zhì)酸鹽和藻酸鹽。適用于本申請(qǐng)的組合物的軟膏基質(zhì)可以為疏 水性的或者親水性的，并且其包括石蠟、羊毛脂、液體聚烷基硅氧烷、鯨蠟醇、鯨蠟醇棕櫚酸 酯、植物油、脂肪酸的山梨坦酯、聚乙二醇和脂肪酸的山梨坦酯、環(huán)氧乙烷之間的縮合產(chǎn)物 (例如聚氧乙烯去水山梨糖醇單油酸酯）以及聚山梨酯。
[0245] 致濕劑的實(shí)例為乙醇、異丙醇甘油、丙二醇、山梨糖醇、乳酸和尿素。合適的軟化劑 包括膽固醇和甘油。護(hù)膚劑的實(shí)例包括維生素 E、尿囊素（allatoin)、甘油、氧化鋅、維生素 和防曬劑。
[0246] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的組合物儲(chǔ)存于低于約10、9、8、7或6°C，合適地低于 約6 °C的溫度下。
[0247] 在另一實(shí)施方案中，本申請(qǐng)的組合物為凍干的或冷凍干燥的。脂質(zhì)體凍干的技術(shù) 是公知的，例如 Chen 等人（J. Control Release 2010 年 3 月 19 日；142(3) :299-311)總結(jié) 了決定冷凍干燥的脂質(zhì)體的凍干保護(hù)效果的關(guān)鍵因素。
[0248] 本申請(qǐng)的組合物通常會(huì)以有效達(dá)到所期望的結(jié)果的量使用，例如，以有效治療或 者預(yù)防所治療的具體病況、疾病或者病癥的量使用。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易確定使用本申請(qǐng) 的組合物和脂質(zhì)體向個(gè)體給藥的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的劑量和/或比例。在一個(gè) 實(shí)施方案中，與使用治療相同疾病或病癥的標(biāo)準(zhǔn)給藥方案所給藥的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其 混合物的有效量相比，所給藥的包封于治療疾病或病癥的脂質(zhì)體制劑中的亞氯酸鹽、氯酸 鹽或其混合物的有效量降低約1至約1000的系數(shù)。
[0249] 在一個(gè)實(shí)施方案中，將本申請(qǐng)的組合物或其制劑在延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)（例如大于約1 分鐘至數(shù)小時(shí)，如2、3、4、6、24個(gè)小時(shí)或者更多個(gè)小時(shí)）靜脈內(nèi)給藥。
[0250] 在一個(gè)實(shí)施方案中，治療為每天給藥一次。在另一實(shí)施方案中，治療為每天給藥兩 次。在另一實(shí)施方案中，治療為每天給藥三次。在另一實(shí)施方案中，治療為每天給藥四次。 在另一實(shí)施方案中，治療為每天給藥1-2次，持續(xù)持續(xù)一、二、三、四、五、六或七天。在另一 實(shí)施方案中，治療為每天給藥至少一次，持續(xù)更長(zhǎng)的時(shí)期，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或 12周。在另一實(shí)施方案中，治療為每天給藥至少一次，直到病況改善至不需進(jìn)一步治療。在 另一實(shí)施方案中，治療提供活性的持續(xù)釋放并需要更低頻率地給藥，例如，每周一次、每月 一次、每六個(gè)月一次、每年一次、每?jī)赡暌淮位蛘呙课迥暌淮巍Ｔ诹硪粚?shí)施方案中，給藥所述 脂質(zhì)體組合物后，疾病或者病癥的持續(xù)時(shí)間減少，例如六個(gè)月、一年或者兩年。
[0251] 在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥至少一次。在另一實(shí)施方案中，治療為每周給 藥兩次。在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥三次。在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥四 次。在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥五次。在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥六次。 在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥一至六次，持續(xù)一、二、三、四、五、六或七周。在另一實(shí) 施方案中，治療為每周給藥至少一次，持續(xù)更長(zhǎng)的時(shí)期，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12 周。在另一實(shí)施方案中，治療為每周給藥至少一次，直到病況改善至不需進(jìn)一步治療。
[0252] 在另一實(shí)施方案中，治療可以使用輸液泵連續(xù)地、間斷地或者患者控制地輸注形 式給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，輸液泵用于靜脈內(nèi)給藥所述治療。
[0253] VI.實(shí)施例
[0254] 實(shí)施例1 :制備鞘磷脂/WF10脂質(zhì)體
[0255] 將 2700 μ L 的鞘磷脂（雞蛋 SM(MW 703. 3)，Avanti Polar Lipids, Alabama, USA) 溶液（在氯仿中的25mg/mL溶液=67. 5mg，0. 095mmol SM)加入至裝有1/3氯仿的圓底燒 瓶（通常為25mL)中。將溶液蒸發(fā)至干燥，以提供在燒瓶?jī)?nèi)表面上的薄的、清晰可見的脂質(zhì) 膜。
[0256] 加入4800yL的WF10(0. 095mmol/4. 8mL)，并將燒瓶在渦旋混合器中，于大約 45°C (高于脂質(zhì)的相變溫度）下?lián)u動(dòng)。當(dāng)薄膜不再可見時(shí)停止渦旋。在該步驟中脂質(zhì)的再 水合導(dǎo)致為大多層囊泡（LMV)的脂質(zhì)體的形成。WF10在脂質(zhì)體的內(nèi)部（內(nèi)相）和外部（外 相）中。
[0257] 為減小初級(jí)脂質(zhì)體的尺寸，將所述混合物反復(fù)凍融。使用液氮作為冷凍劑，并將其 在通常為45°C的水浴中融化，在約30至40分鐘的總持續(xù)時(shí)間內(nèi)，使冷凍/融化循環(huán)重復(fù) 10次。冷凍導(dǎo)致初級(jí)脂質(zhì)體的破壞。融化在高于相變溫度下進(jìn)行。這樣，小于初級(jí)脂質(zhì)體 的脂質(zhì)體再次自發(fā)地形成。由于給定的溫度方案（_180°C/45°C)，所有樣品均遠(yuǎn)高于室溫， 持續(xù)約20分鐘。
[0258] 然后將上述混合物（大約5mL)反復(fù)通過（相同的）100nm孔隙寬度的盤式濾器進(jìn) 行擠壓。使用帶有加熱夾套的不銹鋼隔室和疊放兩層的lOOnm的盤式濾器（但是也可使用 單一濾器）。對(duì)于SM的工作溫度為45°C。使用30bar的氮?dú)鈦?lái)實(shí)現(xiàn)擠壓，重復(fù)擠出10次， 已知這得到為相對(duì)一致的直徑的單層囊泡。包合率為大約2%至3%，理論上可能為7%。
[0259] 將擠出的混合物（外相：WF10,內(nèi)相：WF10)分離至3個(gè)透析室中。將所述室放置以 漂浮在0.9%的氯化鈉溶液中。所用透析室為"Slide-A-Lyzer Dialysis Cassettes, 20K MWC0"，其最大體積為3mL，至多可滲透20kDa。將脂質(zhì)體混合物（lmL)置于內(nèi)室中，并且外部 介質(zhì)為NaCl 0.9% (鹽水，1L)。將該過程用新鮮的鹽水重復(fù)4次。其余的脂質(zhì)體混合物（大 約5mL-3X lmL透析的）用于磷酸酯的測(cè)定和DSC(%i不掃描嚴(yán)熱法#測(cè)定相變溫度）。
[0260] 在透析階段結(jié)束時(shí)，脂質(zhì)體制劑的外相由0. 9%的氯化鈉溶液（鹽水）構(gòu)成。目的 是使外相中的亞氯酸鹽和氯酸鹽的濃度低于定量所使用的方法的檢出限。通過這樣做，可 通過監(jiān)測(cè)這些離子的重現(xiàn)來(lái)測(cè)試脂質(zhì)體的滲漏性質(zhì)。
[0261] 實(shí)施例2 :制備P0PC/WF10脂質(zhì)體
[0262] 使用如實(shí)施例1中所述的方法，并且擠出步驟的工作溫度為室溫（不連接加熱夾 套），制備由P0PC制成的并含有WF10的脂質(zhì)體。
[0263] 實(shí)施例3 :制備P0PC:P0PG/WF10脂質(zhì)體
[0264] 使用如實(shí)施例1中所述的方法，并且冷凍/融化的工作溫度為35°C，擠出步驟的工 作溫度為23°C，制備由1-棕櫚酰-2-油酰-sn_3-甘油基-3-磷酸膽堿（P0PC)和1-棕櫚 酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸-(Γ-消旋-甘油）（P0PG) (3:1、2:1和1:1)制成的并含 有 WF10 的脂質(zhì)體。P0PG 得自 Avanti Polar Lipids, Alabama, USA。
[0265] 實(shí)施例4 :制備DPPC/WF10脂質(zhì)體
[0266] 使用如實(shí)施例1中所述的方法，并且擠出步驟的工作溫度為45°C，制備由1，2-二 棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)制成的并含有WF10的脂質(zhì)體。DPPC得自Avanti Polar Lipids, Alabama, USA。
[0267] 實(shí)施例5 :制備DMPC/WF10脂質(zhì)體
[0268] 使用如實(shí)施例1中所述的方法，并且擠出步驟的工作溫度為30°C，制備由1，2-二 肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)制成的并含有WF10的脂質(zhì)體。DMPC得自Avanti Polar Lipids, Alabama, USA。
[0269] 實(shí)施例6 :另外的制備方法
[0270] (a)脂質(zhì)的蒸發(fā)
[0271] 將溶解于氯仿中的脂質(zhì)加入至100mL的圓底燒瓶中。在多數(shù)情況中，已購(gòu)買的脂 質(zhì)是溶液的形式，代表性濃度為約25mg/mL。通常將以粉末形式遞送的脂質(zhì)在加入燒瓶前溶 解，使其具有相似的濃度。然后將所加入的脂質(zhì)總量通過體積控制。對(duì)于14mL的40mM樣品， 代表性的量為300-400mg。然后，將燒瓶裝在Buchi'Rotavapor? R-210'旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，抽 真空同時(shí)在37°C的水浴中以15rpm旋轉(zhuǎn)。在此操作期間，燒瓶中的壓力降低至約5-15mbar 的值。當(dāng)全部溶劑被移除，并且在燒瓶中不能聞到氯仿的氣味時(shí)，認(rèn)為蒸發(fā)結(jié)束。在該階段 的結(jié)果為瓶壁上有可見的脂質(zhì)膜，并且（取決于脂質(zhì)的量）燒瓶底部有額外的蓄積的松散 粉末。
[0272] (b)水合作用
[0273] 在水合步驟期間，將脂質(zhì)在水性介質(zhì)中懸浮，隨后將其包封于最終的脂質(zhì)體中。已 知在此步驟期間形成多層囊泡（MLV)。首先，將必要量的WF10介質(zhì)加入至圓底燒瓶中。其 體積與所期望的總樣品體積（通常約8_14ml)相當(dāng)。所得到的為含有大脂質(zhì)聚集體的渾濁 溶液。然后，準(zhǔn)備溫度比脂質(zhì)的脂質(zhì)相變溫度（PTT)高5K的水浴，在此期間輕輕搖動(dòng)燒瓶。 一達(dá)燒瓶中的溫度達(dá)到PTT，懸浮液變成均勻的乳白色液體。在高于PTT的溫度下大約5分 鐘后，將脂質(zhì)膜從燒瓶壁移除，并且在底部無(wú)脂質(zhì)粉末殘留。最后，將燒瓶用渦旋混合器搖 動(dòng)數(shù)秒。立即將仍然熱的樣品送至擠出裝置，以開始下一制備步驟或者將其在冰箱溫度下 儲(chǔ)存直到該進(jìn)行下一制備步驟時(shí)。
[0274] (c)擠出
[0275] 在擠出步驟期間，將樣品通過220nm的濾片反復(fù)擠壓。這迫使大囊泡重組，并形成 具有更少層的較小結(jié)構(gòu)。通常這得到單層囊泡，然而，對(duì)于較大的孔徑（如220nm)，仍可能 得到多層囊泡，但其僅具有數(shù)層。在擠出步驟前，將擠出機(jī)裝備上3個(gè)層疊的220nm濾片 (Millipore GPWP，直徑25mm)，并將其加熱至比LPTT高5K的溫度。將脂質(zhì)懸浮液裝入擠出 室，然后向室施加25bar的壓力，迫使樣品通過濾器。通過壓縮氮?dú)馐┘訅毫?。在擠出機(jī)的 排出口處收集樣品。整個(gè)擠出進(jìn)行至少10次。
[0276] (d)透析
[0277] 在該階段，脂質(zhì)體已處于其最終狀態(tài)，但是仍然懸浮于WF10溶液中。為了將外部 WF10介質(zhì)用0. 9%鹽水溶液代替，進(jìn)行了一系列連續(xù)的透析步驟。首先將樣品引入Thermo Scientific Slide-A-Lyzer?透析框架中。所述框架的膜的分子量截留為20, OOODa并且容 量為3-12mL。對(duì)于體積大于6mL的樣品，將樣品分流并分配至兩個(gè)這樣的框架中，將二者放 置在相同的燒杯中。透析裝備包括置于磁力攪拌裝置上的裝有〇. 9%鹽水溶液的1L玻璃燒 杯。鹽水溶液通常由去離子水和標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室NaCl (最低純度99%)制成，并且其體積為 約900-950mL。將所述框架浸沒在透析介質(zhì)中，持續(xù)大約1小時(shí)，然后對(duì)于隨后的步驟，將介 質(zhì)用新鮮的介質(zhì)置換。通常取所述透析介質(zhì)的少量樣品用于"鄰聯(lián)甲苯胺快速檢查"，其與 通常的鄰聯(lián)甲苯胺分析方法相似。當(dāng)樣品呈現(xiàn)深黃色時(shí)，在之前置換介質(zhì)。也進(jìn)行這樣的 快速檢查來(lái)測(cè)定透析系列的終點(diǎn)。當(dāng)測(cè)試期間兩個(gè)連續(xù)的透析步驟未表現(xiàn)可見的顏色變化 時(shí)以及透析持續(xù)一小時(shí)后，認(rèn)為透析完成。在每個(gè)透析步驟后，置換透析介質(zhì)，直至進(jìn)行至 少5個(gè)步驟。在最后的步驟后，將樣品在大約6°C下儲(chǔ)存，以供進(jìn)一步使用。
[0278] 實(shí)施例7 :用于檢測(cè)亞氯酸鹽和氯酸鹽的鄰聯(lián)甲苯胺法
[0279] 方法 A
[0280] 該鄰聯(lián)甲苯胺法包括將50 μ L的155mg鄰聯(lián)甲苯胺在200mL水和67mL 12M鹽酸 的混合物中的溶液加入至200mL的過量介質(zhì)中。將該混合物制備兩次。分別加入250 μ L 的4. 8Μ或12Μ鹽酸，并將混合物孵育5-10分鐘。使用較低濃度的鹽酸僅能檢測(cè)亞氯酸鹽， 而使用較高濃度的鹽酸還能檢測(cè)氯酸鹽。分別在442nm(4. 8Μ HC1)或445nm(12M HC1)下 測(cè)量測(cè)試溶液的吸收。使用由未處理的WF10制備的標(biāo)準(zhǔn)稀釋來(lái)確立校正曲線。
[0281] 方法 B
[0282] 方法B為方法A的改進(jìn)，所述改進(jìn)在于方法B可以檢測(cè)亞氯酸鹽和氯酸鹽二者。 所述方法包括將114mg的鄰聯(lián)甲苯胺在150mL水中溶解，加入50mL的鹽酸（37% )，以制備 鄰聯(lián)甲苯胺溶液。要在首次使用之前至少24小時(shí)制備鄰聯(lián)甲苯胺溶液，并且其可在6°C下 儲(chǔ)存數(shù)月。注意在開始分析步驟后要同時(shí)測(cè)量所有的樣品，以避免在制備分析混合物后立 即發(fā)生的漂白的影響。設(shè)計(jì)分析方案以同時(shí)分析至多96個(gè)樣品，并以確保那些能力的方式 選擇時(shí)間。在分析步驟開始時(shí)，將400 μ L的待分析樣品裝入標(biāo)準(zhǔn)2mL反應(yīng)容器。在時(shí)間、 時(shí)，向各反應(yīng)容器中加入l〇〇yL的鄰聯(lián)甲苯胺溶液。十分鐘（tflOmin)后，加入500yL的 鹽酸（37% )。再過10分鐘（tWOmin)后，將200 μ L的各容器中的樣品轉(zhuǎn)移至標(biāo)準(zhǔn)96孔 板中，用于測(cè)量在447nm波長(zhǎng)下的吸光度。這些測(cè)量在TECAN Infinite 200PR0?酶標(biāo)儀上 進(jìn)行，并且在15分鐘α'βδπ?η)后開始。
[0283] 在計(jì)算中，WF10在儲(chǔ)存介質(zhì)中的濃度由反稀釋因子d表示。該量表示每體積的儲(chǔ) 存介質(zhì)中未稀釋的WF10的體積。因此，它是無(wú)量綱的，對(duì)于未稀釋的WF10, d = 1。
[0284] 為了將所測(cè)量的吸光度值與特定反稀釋因子相關(guān)聯(lián)，記錄WF10的稀釋曲線。所述 曲線如圖1中所示。對(duì)于d大于大約6ΧΚΓ 5的值，數(shù)據(jù)顯示強(qiáng)線性相關(guān)，并且發(fā)現(xiàn)相應(yīng)方 程：
[0285] (KA)=mA+n (1)
[0286] 中的參數(shù)為m= (3. 87±0. 02) Χ1(Γ4并且η = (7±2) Χ10Λ對(duì)于低于所述值的 濃度的非線性域使用以下方程擬合：
[0287] d(A) = α | Α-Α。| Ρ (2)
[0288] 其中 A。= 0·0787±0·0007，α = (3·36±0:05)Χ1(Γ4 并且 p = 0·631±0·009。 在兩種情況中，根據(jù)數(shù)據(jù)點(diǎn)的不確定性對(duì)擬合加權(quán)。為了考慮吸收度值的相對(duì)大的不確定 性，還使用反函數(shù)進(jìn)行反數(shù)據(jù)集的擬合。所呈現(xiàn)的參數(shù)為兩個(gè)結(jié)果的算術(shù)平均值。
[0289] 由所測(cè)定的儲(chǔ)存介質(zhì)中反WF10稀釋因子d，計(jì)算從脂質(zhì)體內(nèi)部釋放的WF10的量 (xmo)。給出樣品體積V樣品以及儲(chǔ)存介質(zhì)的體積V儲(chǔ)存，使用以下方程計(jì)算d的值：
[0290]
[0291] 因此，
【權(quán)利要求】
1. 脂質(zhì)體組合物，其包含具有至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混 合物的脂質(zhì)體，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述組合物含有亞氯酸鹽，并且其中所述亞氯 酸鹽為穩(wěn)定化的亞氯酸鹽。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述組合物含有亞氯酸鹽，并且其中所述亞氯 酸鹽為0X0-K993。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述穩(wěn)定化的亞氯酸鹽含有1-10%、10-20%、 20-30%、30-50%或 50-90%^八）的0父0-1(993。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中以在所述組合物中的總包封離子含量為基礎(chǔ)， 所述組合物含有約0. 01% (w/w)至約50% (w/w)、約0. 1% (w/w)至約20% (w/w)、約0. 5% (w/w)至約10% (w/w)、約0. 3% (w/w)至約3% (w/w)或約1.0% (w/w)的包封亞氯酸鹽。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中以在所述組合物中的總包封離子含量為基礎(chǔ)， 所述組合物含有約0. 01% (w/w)至約50% (w/w)、約0. 1% (w/w)至約20% (w/w)、約0. 5% (w/w)至約10% (w/w)、約0.3% (w/w)至約3% (w/w)或約1.0%的包封氯酸鹽。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中以在所述組合物中的總包封離子含量為基礎(chǔ)， 所述組合物含有約0. 01% (w/w)至約50% (w/w)、約0. 1% (w/w)至約20% (w/w)、約0. 5% (￥/\￥)至約10%(￥/\￥)、約0.3(%(￥/\￥)至約3(%(￥/\￥)或約1.0 (%的包封亞氯酸鹽和氯酸 鹽的混合物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述包封亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的pH為 大于約5、大于約6、大于約8或者大于約10。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述包封亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的pH為 約5至約14、約6至約13、約8至約12. 5或約10至約12。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中包含于所述脂質(zhì)體中的所述脂質(zhì)適合用于包 封pH為約5至約14、約6至約13、約8至約12. 5或約10至約12的亞氯酸鹽、氯酸鹽或其 混合物。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述合適的脂質(zhì)選自磷脂、鞘脂 及其混合物。
12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物，其中所述磷脂為含有足夠長(zhǎng)的飽和或者不飽和脂 肪?；湹牧字Ｄ憠A（PC)，并且所述鞘脂為鞘磷脂（SM)。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述合適的脂質(zhì)選自形成在約 5°C至約50°C的范圍內(nèi)的儲(chǔ)存溫度下保持穩(wěn)定持續(xù)可接受的時(shí)間的脂質(zhì)體的脂質(zhì)。
14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述合適的脂質(zhì)選自形成在約5°C的溫度下 不滲透滲漏離子的脂質(zhì)體的脂質(zhì)。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述脂質(zhì)體含有兩種或者兩種以 上類型的合適的脂質(zhì)。
16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的組合物，其中所述脂質(zhì)體含有兩種類型的合適的脂質(zhì)，并 且所述脂質(zhì)以20:1至1:1、15:1至5:1或10:1至9:1的摩爾比存在。
17. 根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的組合物，其還含有至少一種提高所述脂雙層的 剛性和/或降低所述脂雙層的滲透性的附加組分。
18. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的組合物，其中所述至少一種附加組分以總脂質(zhì)含量的約 0. 1%至約50%、約1%至約30%、約5%至約25%或者約10%至約20%的量存在。
19. 根據(jù)權(quán)利要求17或18所述的組合物，其中所述至少一種附加組分選自膽固醇和硫 酸膽固醇。
20. 根據(jù)權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)所述的組合物，其還含有至少一種使所述脂質(zhì)體具有 減少所述脂質(zhì)體聚集的ξ電位的附加組分。
21. 根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其中所述減少所述脂質(zhì)體聚集的ζ電位至少大于 +5mV或者至少小于-5mV。
22. 根據(jù)權(quán)利要求20或21所述的組合物，其中所述至少一種使所述脂質(zhì)體具有減少所 述脂質(zhì)體聚集的ξ電位的附加組分為帶電荷的脂質(zhì)。
23. 根據(jù)權(quán)利要求22所述的組合物，其中所述帶電荷的脂質(zhì)為帶負(fù)電荷的脂質(zhì)。
24. 根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述帶負(fù)電荷的脂質(zhì)為磷脂酰甘油、磷脂酰 乙醇胺、磷脂酰絲氨酸或者磷脂酸。
25. 根據(jù)權(quán)利要求24所述的組合物，其中所述帶負(fù)電荷的脂質(zhì)選自以下物質(zhì)的鹽： 1，2-二棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DPPG)、1，2-二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸甘 油（DMPG)、1，2-二油酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DOPG)、l，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷 酸甘油（DSPG)、1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺（DSPE)或1，2-二硬脂酰-sn-甘 油基-3-磷酸乙醇胺-甲基-聚乙二醇（MPEG-DSPE)及其混合物。
26. 根據(jù)權(quán)利要求25所述的組合物，其中所述帶負(fù)電荷的脂質(zhì)選自1，2-二棕櫚 酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DPPG)、1，2-二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DMPG) 和1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DSPG)及其混合物。
27. 根據(jù)權(quán)利要求22-25中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述帶電荷的脂質(zhì)以使未帶電 荷的脂質(zhì)：帶電荷的脂質(zhì)的比為20:1至1:1、15:1至5:1或10:1至9:1的量存在。
28. 根據(jù)權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種合適的脂質(zhì)選自 1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)、1，2-二肉豆蘧酰-2-sn-甘油基-3-磷 酸膽堿（DMPC)、1-肉豆蘧酰-2-硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（MSPC)、1-棕櫚酰-2-肉 豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（PMPC)、1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DSPC)、 氫化卵磷脂酰膽堿（HEPC)、1-棕櫚酰-2-硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（PSPC)、1-硬脂 酰-2-肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（SMPC)、1-硬脂酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷 酸膽堿（SOPC)、1_硬脂酰-2-棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（SPPC)、二花生?；字?酰膽堿（DAPC)、1，2-二山崳酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DBPC)、1，2-二芥酰-sn-甘油 基-3-磷酸膽堿（DEPC)、1，2-二油酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DOPC)、氫化大豆磷脂、蛋 黃磷脂、鞘磷脂（SM)、乳鞘磷脂及其混合物。
29. 根據(jù)權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種合適的脂質(zhì)選自 1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)、1，2-二肉豆蘧酰-2-sn-甘油基-3-磷 酸膽堿（DMPC)、氫化大豆磷脂、蛋黃磷脂及其混合物。
30. 根據(jù)權(quán)利要求23-27中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種合適的脂質(zhì) 為摩爾比為9:1的1，2_二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)和1，2_二肉豆蘧 酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DMPC)、摩爾比為9:1的1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷 酸膽堿（DPPC)和1，2-二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油（DMPG)、摩爾比為9:1的 1，2-二棕櫚酰-2-sn-甘油基-3-磷酸膽堿（DPPC)和1，2-二棕櫚酰-sn-甘油基-3-磷酸 甘油（DPPG)，或 DPPC。
31. 根據(jù)權(quán)利要求1-30中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述脂雙層用增加親水性的分子 修飾表面。
32. 根據(jù)權(quán)利要求1-31中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述脂雙層通過將細(xì)胞特異性靶 向基團(tuán)與其表面連接進(jìn)行修飾，以促進(jìn)其與特定細(xì)胞或組織類型結(jié)合。
33. 脂質(zhì)體，其包含至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的，其 中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)。
34. 根據(jù)權(quán)利要求33所述的脂質(zhì)體，其平均直徑為約80nm至約300nm、約90nm至約 200nm、約 100nm 至約 140nm、約 80nm 至約 15 μ m、約 300nm 至約 12 μ m 或約 7 μ m 至約 10 μ m。
35. 根據(jù)權(quán)利要求33或34所述的脂質(zhì)體，其中所述亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的包 封率或者包合率為1 %至約50%、約2%至約25%或約5%至約15%。
36. 制備具有至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體的 方法，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)，所述方法包括： (a) 向內(nèi)表面至少部分具有所述一種或多種脂質(zhì)的薄膜的容器中加入亞氯酸鹽、氯酸 鹽或其混合物的水性溶液； (b) 在足以全部或者部分去除所述內(nèi)表面的所述薄膜的條件下攪拌所述容器，以得到 含有包封有亞氯酸鹽和/或氯酸鹽的脂質(zhì)體的渾濁溶液； (c) 對(duì)所述渾濁溶液進(jìn)行處理，以將所述脂質(zhì)體的平均直徑減小至所需的量；以及 (d) 任選地對(duì)所述脂質(zhì)體進(jìn)行處理，以從所述脂質(zhì)體的外部溶液中移除亞氯酸鹽、氯酸 鹽或其混合物。
37. 根據(jù)權(quán)利要求36所述的方法，其中（a)中所述一種或多種合適的脂質(zhì)與所述亞氯 酸鹽、氯酸鹽或其混合物之間的摩爾比為約〇. 01:1至約10000:1、約〇. 1:1至約5000:1、約 0. 5:1 至約 2500:1、約 1:1 至約 1000:1 或約 0. 1:1 至約 100:1。
38. 制備具有至少一個(gè)脂雙層且內(nèi)部包封有亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的脂質(zhì)體的 方法，其中所述脂雙層含有一種或多種合適的脂質(zhì)，其中所述方法為乙醇注入法。
39. 根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其中所述乙醇注入法使用交叉流技術(shù)進(jìn)行。
40. 藥物組合物，其含有如權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物或者如權(quán)利要 求33-35中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體組合物或者脂質(zhì)體與至少一種生理學(xué)上可接 受的載體或者賦形劑混合。
41. 如權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物、如權(quán)利要求33-35中任一項(xiàng)所述 的脂質(zhì)體或者如權(quán)利要求40所述的藥物組合物作為藥物的用途。
42. 如權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物、如權(quán)利要求33-35中任一項(xiàng)所述 的脂質(zhì)體或者如權(quán)利要求40所述的藥物組合物，其用作藥物。
43. 用于治療受益于給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物的疾病、病癥或病況的方法，其 包括向需要其的個(gè)體給藥有效量的如權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物、如權(quán) 利要求33-35中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體或者如權(quán)利要求40所述的藥物組合物。
44. 調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能的方法，其包括向需要其的個(gè)體給藥有效量的如權(quán)利要求1-32 中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物、如權(quán)利要求33-35中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體或者如權(quán)利要求 40所述的藥物組合物。
45. 根據(jù)權(quán)利要求44所述的方法，其中調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能導(dǎo)致對(duì)于因不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng) 答而產(chǎn)生慢性炎癥癥狀的疾病的治療。
46. 根據(jù)權(quán)利要求43所述的方法，其中所述受益于給藥亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物 的疾病、病癥或病況選自自身免疫病、由不適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答、傷口愈合、放射綜合征或暴露 于環(huán)境毒素引起的疾病。
47. 根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述疾病、病癥或病況選自重癥肌無(wú)力、系統(tǒng)性 紅斑狼瘡、血清病、糖尿病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、幼年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕熱、干燥綜合征、系統(tǒng) 性硬化病、椎關(guān)節(jié)病變、萊姆病、結(jié)節(jié)病、自身免疫性溶血、自身免疫性肝炎、自身免疫性中 性粒細(xì)胞減少癥、自身免疫性多腺性疾病、自身免疫性甲狀腺疾病、多發(fā)性硬化、炎性腸病、 結(jié)腸炎、克羅恩氏病、慢性疲勞綜合征、慢性阻塞性肺?。–OPD)、移植物排斥、移植物抗宿主 病、變應(yīng)性哮喘、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、對(duì)組織損傷的不適當(dāng)反應(yīng)、乙型肝炎、丙型肝炎、 慢性肝炎、阻塞性支氣管炎、肺氣腫、腫瘤性疾?。ò┌Y）、HIV感染、AIDS、神經(jīng)變性疾病、 AIDS相關(guān)的癡呆、微生物感染及其它病毒感染。
48. 根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述疾病、病癥或病況選自變應(yīng)性哮喘、變應(yīng)性 鼻炎、特應(yīng)性皮炎、腫瘤性疾病、脊髓病狀、HIV感染及AIDS。
49. 根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述腫瘤性疾病為胃腸道、頭、頸、胸或者胰腺 的癌癥。
50. 方法，其包括向使用者提供如權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物、如權(quán) 利要求33-35中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體或者如權(quán)利要求40所述的藥物組合物，以及告知所述 使用者特定的安全性或臨床效果。
51. 方法，其包括向使用者提供如權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體組合物、如權(quán) 利要求33-35中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體或者如權(quán)利要求40所述的藥物組合物，以及告知所述 使用者所述脂質(zhì)體組合物比提供或預(yù)計(jì)會(huì)提供類似治療效果的非脂質(zhì)體組合物更穩(wěn)定、更 具靶向特異性或更具治療有效性。
52. 根據(jù)權(quán)利要求50或51所述的方法，其中通過公開的材料的方式告知所述使用者。
53. 根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述公開的材料為標(biāo)簽或者產(chǎn)品說明書。
54. 脂質(zhì)體組合物，其包含外部連續(xù)相和一個(gè)或多個(gè)內(nèi)部核心相，所述內(nèi)部核心相包含 亞氯酸鹽、氯酸鹽或其混合物，并且被包含在多個(gè)脂質(zhì)體囊泡中，其中所述囊泡的壁含有至 少一個(gè)脂雙層，并且所述脂質(zhì)體組合物的外部連續(xù)相基本上不含亞氯酸鹽和氯酸鹽。
55. 根據(jù)權(quán)利要求54所述的組合物，其中所述外部連續(xù)相含有氯化鈉。
56. 根據(jù)權(quán)利要求54所述的組合物，其中所述外部連續(xù)相的pH為約5-8。
57. 根據(jù)權(quán)利要求54-56中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述內(nèi)部核心相的pH為約 8-13。
58. 根據(jù)權(quán)利要求54所述的組合物，其所述內(nèi)部核心相和外部連續(xù)相之間的pH差異為 約1至約7。
59. 根據(jù)權(quán)利要求54所述的組合物，其中所述脂質(zhì)體組合物表現(xiàn)約3-48個(gè)月的藥學(xué)上 可接受的穩(wěn)定性。
60. 根據(jù)權(quán)利要求59所述的組合物，其中所述藥學(xué)上可接受的穩(wěn)定性是在約5°C至約 50°C的溫度下儲(chǔ)存所述組合物實(shí)現(xiàn)的。
61. 根據(jù)權(quán)利要求59所述的組合物，其中所述組合物基本上不含降解產(chǎn)物。
【文檔編號(hào)】A61K33/20GK104125826SQ201280070434
【公開日】2014年10月29日 申請(qǐng)日期:2012年12月21日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月22日
【發(fā)明者】R·馬丁, J·阿恩霍爾德, R·賽弗特, D·金-史密斯, T·德賽, A·華格納 申請(qǐng)人:努沃研究有限責(zé)任公司