制備忍冬純化提取物的方法以及用于預(yù)防和治療敗血癥和敗血性休克的含該提取物的組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于制備忍冬的純化提取物的方法以及用于預(yù)防和治療敗血癥和敗血性休克的含有該提取物的組合物。忍冬的純化提取物顯示出在重度敗血癥CLP模型試驗(yàn)中有效的抗敗血癥活性，對(duì)MODS的效果，和對(duì)各種促炎性細(xì)胞因子如TNF-α、IL-1β、IFN-γ、HMGB-1等的抑制效果，同時(shí)，在與可商業(yè)獲得的抗菌劑、例如廣譜抗生素組合的情況下，它還出乎本領(lǐng)域技術(shù)人員意料地顯示出對(duì)敗血癥和敗血性休克的治療的協(xié)同效應(yīng)，因此，它可以作為藥物和健康功能食品用于治療和預(yù)防敗血癥和敗血性休克。
【專利說明】制備忍冬純化提取物的方法以及用于預(yù)防和治療敗血癥和 敗血性休克的含該提取物的組合物

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種制備忍冬（LoniceraJaponicaTHUNBERG)的純化提取物的方法 以及用于預(yù)防和治療敗血癥和敗血性休克的含有該提取物的組合物。

【背景技術(shù)】
[0002] 重度敗血癥是致命的疾病，其具有由伴隨有器官功能衰竭和灌注不足的敗血癥病 情引起的高死亡率，所述灌注不足導(dǎo)致系統(tǒng)需氧和供氧之間的不平衡，這迅速進(jìn)展成敗血 性休克和多器官功能障礙綜合征（MODS)。該疾病的典型癥候群為高熱、低體溫癥、正性變 時(shí)（positivechronotrophy)、增加的心輸出量、降低的體循環(huán)抵抗力、呼吸性堿中毒、不正 常增加或減少量的WBC等，這引起導(dǎo)致致命死亡的迅速的器官功能障礙。已經(jīng)報(bào)道患有重 度敗血癥和敗血性休克的患者的死亡率在美國(guó)為29%，在歐洲為27%，這是重癥監(jiān)護(hù)病房 的患者中的主要死亡原因（Jean-LouisVincent，EdwardAbraham，TheLastlOOyearsof S印sis，AmJRespirCritCare]^(1，2006，173，第256-263頁(yè)）。在美國(guó)，每年多于750000 名患者患有敗血性綜合征，其中每年多于210000患者死于該疾病。而且，在歐洲在重癥監(jiān) 護(hù)病房住院的約37 %的患者患有重度敗血癥，15 %的患者患有敗血性休克，在韓國(guó)由重度 敗血癥導(dǎo)致的死亡率為65%。
[0003] 敗血癥可能會(huì)因非傳染性來源，例如除傳染性來源如細(xì)菌、病毒、真菌等之外 的創(chuàng)傷而惡化，并加重成敗血性休克或MODS(Deitch，E.A.Multipleorganfailure. Pathophysiologyandpotentialfuturetherapy,Ann.Surg. ,1992,216 (2),第 117-134 頁(yè)）。敗血癥發(fā)病機(jī)理的最明顯的特征為在初始階段體內(nèi)炎癥系統(tǒng)的過度活化，即識(shí)別外 來污染物如細(xì)菌內(nèi)毒素并被該外來污染物激活的促炎性細(xì)胞因子的過度分泌，這被稱為 "細(xì)胞因子風(fēng)暴"并從敗血癥發(fā)病起維持10至12小時(shí)。在細(xì)胞因子中，在血液中在初始 階段最開始所檢測(cè)到的細(xì)胞因子TNG-a不僅刺激其他細(xì)胞因子如IL-5、IL-8的分泌，也 促進(jìn)中性粒細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中的細(xì)胞黏附分子以及導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加重的其他細(xì)胞因 子的表達(dá)（WadaH.等人，Increasedplasmalevelofinterleukin_6indisseminated intravascularcoagulation,BloodCoagul.Fibrinolysis, 1993,4(4);第 583-590 頁(yè)； Qin,S.等，RoleofHMGBlinapoptosis-mediatedsepsislethality,J.Exp.Med. ,2006, 203 (7)，第1637-1642頁(yè)）。從淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌的炎性細(xì)胞因子IL-6在敗血癥發(fā)病 后 6 小時(shí)達(dá)到最高水平（Hotchkiss，R.S.，等，Apoptosisandcaspasesregulatedeath andinflammationinsepsis.Nat.Rev.Immunol. ,2006,6(11),第 813-822 頁(yè)）。
[0004] 因此，已經(jīng)有抑制伴隨并刺激炎癥的炎性介質(zhì)如TNF-a、IL-6、IL-1、IL-8等的 大量嘗試，例如抗炎劑如NSAIDS;或者抑制細(xì)胞因子的釋放的大量嘗試，例如TLR4選擇性 抑制劑如來自TakedaPharm.CompanyLimited的TAIC-242?和來自EisaiCo.Ltd?的 Eritorail?。但是治療具有一些缺點(diǎn)，例如有限的功效等。
[0005] 最近美國(guó)和歐洲批準(zhǔn)的重度敗血癥的單一治療劑Xigris?(Elilillyand company)已經(jīng)用來治療重度敗血癥，但是它也具有缺點(diǎn)，例如有限的適應(yīng)癥和功效、不良反 應(yīng)如嚴(yán)重的出血或中風(fēng)等（R.PhillipDellinger等，Importantissuesinthedesign andreportingofcinicaltrilasinseveresepsisasacutelunginjury,Journal ofCriticalCare.，23,第 493-499 頁(yè)，2008 ;www.fda.gov。）
[0006] 因此，目前仍需要開發(fā)具有強(qiáng)效和較小毒性的新的抗敗血癥藥物，并且嘗試由在 韓國(guó)因?yàn)闊o毒性而頻繁被開處方和使用的自然資源開發(fā)有效的藥物。
[0007] 已經(jīng)報(bào)道分布于韓國(guó)的忍冬的花包含木犀草素、肌醇、皂苷、單寧、異綠原酸、綠原 酸等（B.S.CHUNG等，Dohaehyangyakdaesajeon，Youngrimpress，第 939-940 頁(yè)，1998)。
[0008] 但是，在以上所引用文獻(xiàn)的任何一個(gè)中都未報(bào)道或公開忍冬的純化花提取物對(duì)敗 血癥的治療性效果或改善性效果，上述文獻(xiàn)的公開通過引用并入本文。
[0009] 為了研究用于制備含有大量活性成分、如綠原酸及其衍生物的忍冬的純化花提取 物的新方法，和研究忍冬的純化花提取物對(duì)敗血癥的治療效果，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)深入 地進(jìn)行了組分分析以及一些動(dòng)物模型試驗(yàn)，例如重度敗血癥CLP模型試驗(yàn)，對(duì)MODS的效果， 對(duì)各種促炎性細(xì)胞因子如TNF-a、IL-1P、IFN-y等的抑制效果，最終通過確認(rèn)花 提取物的純化提取物包含大量活性成分并顯示出對(duì)敗血癥和敗血性休克有效地治療效果 完成了本發(fā)明。
[0010] 通過下文中提供的本發(fā)明的詳細(xì)公開，本發(fā)明的這些及其他目的會(huì)變得明顯。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 技術(shù)問題
[0012] 因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種用于制備忍冬的純化提取物的方法，其包括 以下步驟：在第一步驟，利用提取溶劑對(duì)忍冬的干花材料進(jìn)行提??；在第二步驟，使粗制提 取物經(jīng)受選自過濾法、離心或其組合的至少一種處理，優(yōu)選過濾法以提供忍冬的粗制提取 物；在第三步驟，通過添加水使粗制提取物懸浮于水中以制備懸浮溶液，然后將該溶液分級(jí) 成非極性溶劑可溶部分和極性溶劑可溶部分以除去非極性可溶物質(zhì)并通過收集剩余物提 供第一純化提取物；在第四步驟，將水添加至第一純化提取物以使其經(jīng)受選自使用與水的 量相等的量的吸附樹脂的吸附色譜、離子柱色譜或其組合的至少一種純化過程，和用清洗 溶劑反復(fù)地清洗以提供忍冬的第二純化提取物；和真空下對(duì)該提取物進(jìn)行濃縮，并干燥以 提供忍冬的純化提取物，所述提取物含有大量的活性成分，具體地，含有基于干燥的純化提 取物的重量的2. 0%至30. 0% (重量/重量）、優(yōu)選5. 0%至20. 0% (重量/重量）、更優(yōu) 選7.0%至15.0% (重量/重量）的量的綠原酸及其衍生物。
[0013] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，上述方法中第一步驟的提取溶劑包括基于花材 料重量的約1至100倍、優(yōu)選2至20倍、更優(yōu)選5至15倍體積（體積/重量）的至少一種 溶劑，該至少一種溶劑選自水、酒精制劑、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、己烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、 DMS0、氯仿和二氯甲烷，優(yōu)選地選自水、甲醇、乙醇、丙醇和丁醇，更優(yōu)選水，最優(yōu)選使基于花 材料的重量的〇. 1 %至5%、優(yōu)選0. 2%至2%重量（重量/重量）的量的弱堿如NaHC03、 NaC03等溶解于水中以提高提取效率的堿性溶液。
[0014] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過選自熱水回流提取、花香提取、索氏提取、 超聲波提取及其組合的至少一種方法，優(yōu)選在20°C至120°C、優(yōu)選30°C至10(TC持續(xù)約1至 72小時(shí)、優(yōu)選2至12小時(shí)的熱水回流提取來進(jìn)行上述方法中第一步驟的提取過程。
[0015] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過選自過濾法、離心或其組合的至少一種處 理，優(yōu)選過濾法來進(jìn)行上述方法中第二步驟的提供忍冬的粗制提取物的處理。
[0016] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過以下過程來進(jìn)行上述方法中第三步驟的提 供第一純化提取物的過程：添加約0. 005至5倍體積、優(yōu)選0. 05至3倍體積的水（體積/ 重量，基于粗提取物的重量）以制備懸浮溶液；和通過添加約〇. 1至50倍體積、優(yōu)選0. 5至 10倍體積的非極性溶劑（體積/體積，基于懸浮溶液的體積）將溶液分級(jí)成非極性溶劑可 溶部分和極性溶劑可溶部分以除去非極性可溶物質(zhì)，所述非極性溶劑例如是己烷、二氯甲 烷、氯仿、乙酸乙酯等，優(yōu)選己烷、二氯甲烷、或乙酸乙酯，更優(yōu)選己烷或二氯甲烷。
[0017] 通過第三步驟的純化過程，可以從提取物中有效地移出提取物中的非極性可溶物 質(zhì)，例如精油如十六烷酸、亞油酸甲酯、芳樟醇、香芹酚、棕櫚酸甲酯等，和留醇類化合物如 3谷留醇等。
[0018] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過以下過程來進(jìn)行上述方法中第四步驟的提 供忍冬的第二純化提取物的過程：將1至30倍重量、優(yōu)選2至15倍重量、更優(yōu)選5至10倍重 量的水（重量/重量，基于第一純化提取物的重量）添加至第一純化提取物以使其經(jīng)受吸 附色譜來進(jìn)一步純化，所述吸附色譜使用與水的量相等的量的吸附樹脂，優(yōu)選選自SP207、 HP20SS、DiaoionHP20、SP-850 樹脂、活性炭、或AmberliteXAD-2,4 的至少一種樹脂，更 優(yōu)選選自DiaionHP20、SP-850樹脂或AmberliteXAD-2,4的至少一種樹脂。
[0019] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過經(jīng)受離子柱色譜來進(jìn)行上述方法中第四步 驟的提供忍冬的第二純化提取物的過程，所述離子柱色譜使用與水的量相等的量的離子樹 月旨，例如，選自AG50W-x8、AmberlteIR-120、AmberliteIRA-400、Dowex50W-X8 或SK1B 的至少一種強(qiáng)酸性樹脂，或者選自AmberlteIRC-50、Bi〇-Rex70、Duolite-436或WK40的 至少一種弱酸性樹脂，或者選自AmberlteIR-67或Dowex3-x4的至少一種弱堿性樹脂，優(yōu) 選選自AmberlteIR_120、AmberliteIRA-400或SK1B的至少一種強(qiáng)酸性樹脂，更優(yōu)選選自 AmberlteIR-120 或AmberliteIRA-400 的至少一種強(qiáng)酸性樹脂。
[0020] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過重復(fù)地用選自水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或 其混合物的至少一種清洗溶劑，優(yōu)選水與甲醇的混合溶劑清洗吸附到樹脂的吸附物質(zhì)來進(jìn) 行上述方法中第四步驟的提供忍冬的第二純化提取物的清洗過程。
[0021] 通過第四步驟的純化，可以從提取物中有效地移出不顯示藥理活性的非活性物 質(zhì)，例如氨基酸如脯氨酸等，和糖類如葡萄糖、蔗糖、肌醇等。
[0022] 在本發(fā)明的一個(gè)替代實(shí)施方案中，優(yōu)選進(jìn)行除上述方法中第四步驟的純化步驟外 的另外的純化步驟，例如葡聚糖凝膠柱色譜，葡聚糖凝膠柱色譜使用選自Sephadex LH-20 樹脂、Sephadex G15樹脂或Sephadex G35等的至少一種葡聚糖凝膠樹脂。
[0023] 在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，通過以下過程進(jìn)行上述方法中第五步驟的提供 忍冬的純化提取物的濃縮過程和干燥過程以提供忍冬提取物的創(chuàng)造性純化提取物（下文 中表示為"HS-23提取物"）：在10°C至80°C的溫度、優(yōu)選小于60°C的溫度，在真空下濃縮提 取物，并通過選自室溫干燥法、冷凍干燥法、熱空氣干燥法或其組合的至少一種干燥方法， 優(yōu)選冷凍干燥法來干燥提取物。
[0024] 通過以上的創(chuàng)造性純化過程，本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過上述方法制備的忍冬的創(chuàng) 造性純化提取物含有大量的活性成分，具體地，約5. 8倍產(chǎn)率的綠原酸和約5. 2倍產(chǎn)率的 包括綠原酸及其衍生物的總綠原酸衍生物，例如基于干燥純化提取物的重量的2. 0%至 30. 0% (重量/重量）、優(yōu)選5. 0%至20. 0% (重量/重量）、更優(yōu)選7. 0%至15. 0% (重 量/重量）的量的3, 5-0-咖啡酰奎寧酸、3, 5-二-0-咖啡?？鼘幩峒柞サ?，其產(chǎn)率是通過 本領(lǐng)域中用于制備忍冬提取物的眾所周知的提取方法的產(chǎn)率的5倍以上。
[0025] 此外，HS提取物顯示出在重度敗血癥CLP模型試驗(yàn)中的抗敗血癥活性、對(duì)MODS的 效果、和對(duì)各種促炎性細(xì)胞因子如TNF-a、IL-1 0、IFN-y等的抑制效果，同時(shí)，對(duì) 于本領(lǐng)域技術(shù)人員，在與可商業(yè)獲得的抗菌劑、例如廣譜抗生素組合的情況下，它還出乎本 領(lǐng)域技術(shù)人員意料地顯示出對(duì)敗血癥和敗血性休克的治療的協(xié)同效應(yīng)（在誘發(fā)重度敗血 癥的動(dòng)物模型中，與單一治療組相比約120%增加的存活率）。
[0026]技術(shù)方案
[0027]因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是一種忍冬的純化HS-23提取物，其含有基于干燥的純 化提取物的重量的2. 0%至30. 0% (重量/重量）、優(yōu)選5. 0%至20. 0% (重量/重量）、 更優(yōu)選7.0%至15.0% (重量/重量）的量的綠原酸及其衍生物，所述干燥的純化提取物 是通過以下步驟制備的：在第一步驟，利用提取溶劑對(duì)忍冬的干花材料進(jìn)行提取；在第二 步驟，使粗提取物經(jīng)受選自過濾法、離心或其組合的至少一種處理，優(yōu)選過濾法以提供忍冬 的粗提取物；在第三步驟，通過添加水使粗提取物懸浮于水中以制備懸浮溶液，然后將該溶 液分級(jí)成非極性溶劑可溶部分和極性溶劑可溶部分以除去非極性可溶物質(zhì)并通過收集剩 余物提供第一純化提取物；在第四步驟，將水添加至第一純化提取物以使其經(jīng)受選自使用 與水的量相等的量的吸附樹脂的吸附色譜、離子柱色譜或其組合的至少一種純化過程，和 用清洗溶劑反復(fù)地清洗以提供忍冬的第二純化提取物；和真空下對(duì)該提取物進(jìn)行濃縮，并 干燥以提供用于治療和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的忍冬的純化提取物。
[0028]因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種藥物組合物，其包含通過上述方法純化的忍 冬的純化HS-23提取物作為用于治療和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的活性成分。
[0029] 具有與通過眾所周知的提取方法制備的提取物相比更有效的藥理學(xué)作用的創(chuàng)造 性純化HS-23提取物可以含有基于干燥純化提取物的重量的2. 0%至30. 0% (重量/重 量）、優(yōu)選5. 0%至20. 0% (重量/重量）、更優(yōu)選7. 0%至15. 0% (重量/重量）的量的 綠原酸及其衍生物。
[0030] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物用于制 備用于治療和預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或敗血性休克的治療劑的用途。
[0031] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種治療或預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或 敗血性休克的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物施用有效量的通過上述方法純化的忍冬的純化 HS提取物以及其藥學(xué)可接受的載體。
[0032] 本文中所公開的術(shù)語(yǔ)"敗血癥"包括但不限于各種敗血癥，例如中度敗血癥，重度 敗血癥，或由燒傷、急性咽喉炎、潰瘍性結(jié)腸炎、IBS(腸道易激綜合征）、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、退 行性關(guān)節(jié)炎、急性肝炎、慢性肝炎等引起的敗血癥或感染癥狀，優(yōu)選地，中度敗血癥、重度敗 血癥、或由燒傷引起的敗血癥或感染癥狀。
[0033] 本文中所公開的術(shù)語(yǔ)"MODS(多器官功能障礙綜合征）"包括但不限于發(fā)生在受損 器官中的各種MODS，例如發(fā)生在由中度敗血癥、重度敗血癥、或由燒傷引起的敗血癥或感染 癥狀，優(yōu)選重度敗血癥導(dǎo)致的選自肝、腎、心臟、肺、小腸、大腸、十二指腸、胃、胰、脾等的受 損器官中，優(yōu)選肝、腎、或心臟中的MODS。
[0034] 在本文中所公開的術(shù)語(yǔ)"敗血性休克"包括但不限于各種敗血性休克，例如由中度 敗血癥、重度敗血癥、或由燒傷引起的敗血癥或感染癥狀導(dǎo)致的敗血性休克。
[0035] 顯示有效抗敗血癥活性的HS提取物可以與可商業(yè)獲得的抗菌劑組合以獲得治療 和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的協(xié)同效應(yīng)。
[0036] 因此，本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物組合物，其包含通過上述方法純化的 忍冬的純化HS-23提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合作為用于治療和預(yù)防敗血癥、MODS 或敗血性休克的活性成分。
[0037] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與可商 業(yè)獲得的抗菌劑的組合用于制備用于治療和預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或敗 血性休克的治療劑的用途。
[0038] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種治療或預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或 敗血性休克的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物施用有效量的通過上述方法純化的忍冬的純化 HS-23提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合以及其藥學(xué)可接受的載體。
[0039] 本文中所公開的術(shù)語(yǔ)"通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與可商業(yè)獲 得的抗菌劑的組合"包括（a)通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與（b)可商業(yè) 獲得的抗菌劑以按重量計(jì)〇. 1至10:0. 1至10 (重量/重量）、優(yōu)選按重量計(jì)1至10:1至 10 (重量/重量）、更優(yōu)選按重量計(jì)1至5:1至5 (重量/重量）的混合比混合的的組合。
[0040] 本文中所公開的術(shù)語(yǔ)"可商業(yè)獲得的抗菌劑"包括但不限于各種可商業(yè)獲得的抗 菌劑，例如選自以下的至少一種抗菌劑：抗生素，如青霉素、喹諾酮、氨曲南（monobactam)、 氨基糖苷類、頭孢菌素、四環(huán)素、糖肽類、碳青霉烯等；抗炎劑，如甲滅酸、吲哚美辛、異丁苯 丙酸、吡羅昔康、雙氯芬酸等；抗真菌劑，如兩性霉素B、制真菌素、灰黃霉素、唑類抗真菌劑 等；抗過敏劑，如西替利嗪、非索非那定、氯苯卩比胺（chlroropeniramine)等；優(yōu)選選自抗 生素如青霉素、喹諾酮、氨曲南、氨基糖苷類、頭孢菌素、四環(huán)素、糖肽類、碳青霉烯等的抗菌 齊U;更優(yōu)選選自阿莫西林、氨節(jié)西林、萬古霉素、阿米卡星、亞胺培南（imipenam)等的抗菌 劑。
[0041] 本發(fā)明的藥物組合物可以含有基于組合物總重量的約0. 01重量％至50重量％的 上述提取物。
[0042] 根據(jù)本領(lǐng)域中眾所周知的使用方法，該創(chuàng)造性組合物可以另外包含常規(guī)的載體、 佐劑或稀釋劑。優(yōu)選的是所述載體是根據(jù)使用和應(yīng)用方法作為合適的物質(zhì)使用的，但其不 受限制。在Remington' s Pharmaceutical Science (Mack Publishing co, Easton PA)的 書面文本中列出了合適的稀釋劑。
[0043] 在下文中，以下配制方法及賦形劑僅僅是示例性的，并且不以任何方式限制本發(fā) 明。
[0044] 含有本組合物的藥物制劑可以以任何形式制備，例如口服給藥形式，如作為固體 口服制劑的凍干劑型、散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、酏劑藥丸、袋裝制劑等，作為 液體口服制劑的懸浮劑、溶液、乳劑、糖漿、含水藥物等；局部用劑型，如霜?jiǎng)?、藥膏劑、洗劑?凝膠劑、香膏劑、貼劑、糊劑、噴霧溶液、氣霧劑等；或腸胃外給藥形式，例如栓劑或可注射劑 型，如無菌溶液、懸浮劑、凍干劑型、無水型注射劑、或含水型注射劑，優(yōu)選無菌的可注射劑 型。
[0045] 根據(jù)本發(fā)明的組合物可以作為藥物組合物提供，所述藥物組合物含有藥學(xué)可接受 的載體、佐劑或稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚醇、麥芽糖 醇、淀粉、阿拉伯膠、海藻酸、明膠、磷酸鈣、硅酸鈣、纖維素、甲基纖維素、聚乙烯卩比咯烷酮、 水、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂和礦物油。制劑可以另外包括溶劑、 添加劑、稀釋劑、緩沖劑、等滲劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、鎮(zhèn)痛劑、乳化劑、填充劑、抗凝劑、潤(rùn)滑 齊IJ、濕潤(rùn)劑、調(diào)味劑、防腐劑等。特別地，所述溶劑、添加劑、或稀釋劑包括無菌蒸餾水、生理 鹽水溶液、pH調(diào)節(jié)劑、白蛋白、氯化鈉、甘露醇、林格氏溶液（Ringer'ssolution)、葡萄糖 等。固體口服制劑，如散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、酏劑藥丸、袋裝制劑等可以通 過將創(chuàng)造性提取物與至少一種佐劑混合來制備，所述佐劑例如是淀粉、碳酸鈣、蔗糖、乳糖、 明膠等，如果必要的話，與作為將被配制的另一添加劑的潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、滑石等混合。 液體口服制劑，如懸浮劑、溶液、乳劑、糖漿、含水藥物等可以通過將創(chuàng)造性提取物與待配制 的至少一種佐劑混合來制備，所述佐劑例如是濕潤(rùn)劑、調(diào)味劑、甜味劑、防腐劑，而不與待配 制的常用稀釋劑如水或液態(tài)石蠟混合來制備。作為腸胃外給藥形式，例如，在本發(fā)明中，可 注射劑型，如無菌溶液、懸浮劑、凍干劑型、無水型注射劑、或含水型注射劑可以使用丙二 醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油、可注射的酯如油酸乙酯（ethylolate)等作為基體；而栓 劑可以使用whitepsol、macrogol、吐溫（tween) 61、可可油、月桂油、甘油明膠等作為基體。
[0046] 可以配制本發(fā)明的組合物以提供在通過采用本領(lǐng)域中眾所周知的過程中的任何 一種對(duì)患者施用活性成分后，活性成分的快速、持續(xù)或延遲的釋放。
[0047] 例如，本發(fā)明的組合物可以溶解于常用于制備注射劑的油、丙二醇或其他溶劑中。 載體的合適的實(shí)例包括生理鹽水、聚乙二醇、乙醇、植物油、肉豆蘧酸異丙酯等，但不限于 此。為了局部施用，本發(fā)明的提取物可以以軟膏劑和霜?jiǎng)┑男问脚渲啤?br> [0048]藥學(xué)給藥形式的本發(fā)明的組合物可以以它們藥學(xué)可接受的鹽的形式使用，并且也 可以單獨(dú)使用或者以合適的組合使用，以及與其他藥學(xué)活性的化合物組合使用。
[0049]創(chuàng)造性提取物或組合物的期望劑量根據(jù)對(duì)象的病情和體重、嚴(yán)重程度、藥物形式、 施用途徑及周期而變化，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以選擇劑量。然而，為了獲得期望的效果，通常 建議施用1微克/天至5毫克/天、優(yōu)選8微克/天至2毫克/天、更優(yōu)選16微克/天至 1毫克/天的量的本發(fā)明的創(chuàng)造性提取物。劑量可以每天單次施用或分成多次施用；周期 性施用，例如2天至一周的周期一次，但是不打算限制于此。本發(fā)明的范圍可以包括任何修 改，或者給藥的任何量和次數(shù)方面的變化，和本領(lǐng)域技術(shù)人員可想到的任何施用途徑。在組 合物方面，創(chuàng)造性提取物的量可以是基于組合物總重量的以重量計(jì)0.01%至50%、優(yōu)選以 重量計(jì)0.5%至40%。
[0050] 本發(fā)明的藥物組合物可以通過各種途徑施用至對(duì)象動(dòng)物，如哺乳動(dòng)物（大鼠、小 鼠、家畜或人類）。考慮施用的所有方式，例如施用可以是口服、經(jīng)直腸、或通過靜脈內(nèi)注射、 肌肉內(nèi)注射、皮下注射、皮內(nèi)注射、鞘內(nèi)注射、腦膜外注射或腦室內(nèi)注射來完成。
[0051] 本發(fā)明的創(chuàng)造性提取物沒有毒性和不良反應(yīng)，因此，它們可以安全使用。
[0052] 本發(fā)明提供了一種健康功能食品，其包含通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23 提取物作為用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的活性成分。
[0053]本發(fā)明提供了一種健康功能食品，其包含通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23 提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合作為用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的活 性成分。
[0054]本發(fā)明還提供了一種健康功能食品，其包含通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物和飲食學(xué)可接受的添加劑用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克。
[0055]本發(fā)明還提供了一種健康功能食品，其包含通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合，和飲食學(xué)可接受的添加劑用于緩解和預(yù)防敗 血癥、MODS或敗血性休克。
[0056]在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種保健食品，其包含用于 緩解或預(yù)防敗血癥、MODS、或敗血性休克的通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物， 以及飲食學(xué)可接受的添加劑。
[0057]在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種保健食品，其包含用于 緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的通過上述方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與 可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合，以及飲食學(xué)可接受的添加劑。
[0058]創(chuàng)造性健康功能食品或保健食品的粗制藥物組合物是以其粉末狀形式、從其中提 取的形式或其干燥提取物形式使用的。
[0059] 以此公開的術(shù)語(yǔ)"飲食學(xué)可接受的添加劑"包括可以是本領(lǐng)域中眾所周知的可常 規(guī)獲得的添加劑，例如美國(guó)食品藥品管理局所公布的食品添加劑列表（參見WWW. fda. gov/ food)。
[0060]用于預(yù)防和改善目標(biāo)疾病的健康功能食品可以含有基于組合物總重量的約0.01重量％至95重量％、優(yōu)選0. 5重量％至80重量％的上述粗制提取物。
[0061]其中上述粗制藥物組合物可以添加至食品、添加劑或飲料用于預(yù)防和改善目標(biāo)疾 病。為了預(yù)防和改善目標(biāo)疾病的目的，其中，在食品或飲料中上述粗制藥物組合物的量對(duì)于 健康食品組合物一般可以是食品總重量的約0. 1重量％至15重量％，優(yōu)選1重量％至10 重量％,對(duì)于健康飲料組合物可以是l〇〇ml健康飲料組合物中1至30g，優(yōu)選3至10g。 [0062]假設(shè)本發(fā)明的健康飲料組合物含有所示比例的上述提取物作為主要組分，對(duì)其他 液體組分沒有特別限制，其中所述其他組分可以是與常規(guī)飲料一樣的各種除臭劑或天然碳 水化合物等。前述天然碳水化合物的實(shí)例是單糖，如葡萄糖、果糖等；二糖，如麥芽糖、蔗糖 等；常規(guī)糖，如糊精、環(huán)糊精；和糖醇，如木糖醇和赤蘚醇等。至于除前述實(shí)例外的其他除 臭劑，可以有力地使用天然除臭劑，如索馬甜（taumatin);甜葉菊提取物，如levaudioside A、甘草甜素等；以及合成除臭劑，如糖精、阿斯巴甜等。上述天然碳水化合物的量一般為 100ml本飲料組合物中約lg至20g，優(yōu)選5g至12g。
[0063] 除前述組合物外的其他組分在奶酪、巧克力等的情況下是各種營(yíng)養(yǎng)素、維生素、礦 物質(zhì)或和電解質(zhì)、合成調(diào)味劑、著色劑和改良劑，在碳酸飲料等中使用的果膠酸及其鹽、海 藻酸及其鹽、有機(jī)酸、保護(hù)性膠體黏合劑、pH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、酒精、碳化劑。除 前述組分外的其他組分可以是用于制備天然果汁、果汁飲料和蔬菜飲料的果汁，其中所述 組分可以獨(dú)立地使用或組合地使用。組分的比例不是那么重要，但一般為每100重量％本 組合物約0至20重量％。
[0064] 對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯的是，在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的條件下，可以在本 發(fā)明的組合物、用途以及制備物中進(jìn)行各種修改和變化。
[0065] 有益效果
[0066] 本發(fā)明提供一種用于制備包含大量活性成分的忍冬的純化提取物的方法。
[0067] 本發(fā)明提供一種藥物組合物，其包含有效量的忍冬的純化提取物作為活性成分用 于預(yù)防和治療敗血癥和敗血性休克。
[0068] 本發(fā)明還提供上述提取物用于制備治療和預(yù)防哺乳動(dòng)物或人類中敗血癥和敗血 性休克的藥物組合物的用途。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0069] 根據(jù)結(jié)合附圖的以下詳細(xì)描述，會(huì)更清楚地理解本發(fā)明的以上和其他目的、特征 和其他優(yōu)勢(shì)，其中：
[0070]圖 1 示出了CGA(A)、HS-23(b)和SL-101 (c)的HPLC數(shù)據(jù)（* 保留時(shí)間-18 分鐘 (CGA)，9&21 分鐘-CGA衍生物）；
[0071] 圖2示出了在重度敗血癥CLP模型中亞胺培南治療組和亞胺培南與HS-23組合治 療組中存活率的變化。

【具體實(shí)施方式】
[0072] 對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯的是，在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的條件下，可以在本 發(fā)明的組合物、用途以及制備物中進(jìn)行各種修改和變化。
[0073] 本發(fā)明提供一種用于制備包含大量活性成分的忍冬的純化提取物的方法。
[0074] 本發(fā)明提供一種藥物組合物，其包含有效量的忍冬的純化提取物作為活性成分用 于預(yù)防和治療敗血癥和敗血性休克。
[0075] 本發(fā)明還提供上述提取物用于制備治療和預(yù)防哺乳動(dòng)物或人類中敗血癥和敗血 性休克的藥物組合物的用途。
[0076] 通過以下實(shí)施例更具體地說明本發(fā)明。然而，應(yīng)理解，本發(fā)明不以任何方式受限于 這些實(shí)施例。
[0077]實(shí)施例
[0078] 以下的參照實(shí)施例、實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)實(shí)施例旨在進(jìn)一步說明本發(fā)明而不限制其范 圍。
[0079] 發(fā)明的實(shí)施方式
[0080] 比較例1忍冬的常規(guī)粗制提取物（SL-101)的制備
[0081] 將忍冬的干花添加至10倍體積的蒸餾水，用熱水回流提取法在l〇〇°C進(jìn)行提取3 小時(shí)。過濾溶液，用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000，EYELALtd.日本）在低于60°C下濃縮濾 液，并用凍干器（FDCF-12012,OperonCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥，以獲得忍冬的干燥粗制花提取 物（產(chǎn)率：40.0%，下文中表示為"SL-101"）。該干燥粉末在以下實(shí)驗(yàn)中用作比較試驗(yàn)樣 品。
[0082] 實(shí)施例1 :忍冬的純化提取物（HS_23a. 23b)的制備
[0083] 1-1?使用5倍重量的HP-20樹脂（HS_23a)
[0084] 將忍冬的干花添加至10倍體積的蒸餾水，用熱水回流提取法在100°C進(jìn)行提取3 小時(shí)。過濾溶液，用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000，EYELALtd.日本）在低于60°C下濃縮濾 液，并用凍干器（FDCF-12012,OperonCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥，以獲得忍冬的干燥粗制花提取 物。使提取物懸浮于1. 5倍體積的水中（體積/重量，基于粗制提取物的重量），用等體積 的乙酸乙酯使懸浮液分級(jí)三次以移出乙酸乙酯可溶部分以提供第一純化提取物。向提取 物添加5倍重量的水（重量/重量，基于第一純化提取物的重量），再向其中添加等重量的 HP-2樹脂（MitsubishiChemical)并攪拌5小時(shí)以移出水溶性物質(zhì)。向剩余部分添加10 倍體積的水和等量的30%甲醇作為清洗溶劑并攪拌5小時(shí)以提供第二純化提取物。用真空 蒸發(fā)器（EYELAN-1000，EYELALtd.日本）在低于60°C的真空下濃縮吸附的吸附物質(zhì)，并用 凍干器（FDCF-12012,OperonCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥，獲得忍冬的純化花提取物（最終產(chǎn)率： 3. 1%，下文中表示為"HS-23a"）。該干燥粉末在以下實(shí)驗(yàn)中用作試驗(yàn)樣品。
[0085] 1-2.使用 10 倍重量的HP-20 樹脂（HS-23b)
[0086] 除了HP-21樹脂的使用量為水的10倍重量外（重量/重量，基于第一純化提取物 的中重量），所有的純化過程與實(shí)施例1-1中公開的程序相同，以獲得忍冬的純化花提取物 (最終產(chǎn)率：3. 1%，下文中表示為"HS-23b"）。該干燥粉末在以下實(shí)驗(yàn)中用作試驗(yàn)樣品。
[0087] 實(shí)施例2:忍冬的純化提取物（HS-23c)的制備
[0088] 將忍冬的干花添加至10倍體積的蒸餾水，用熱水回流提取法在100°C進(jìn)行提取3 小時(shí)。過濾溶液，用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000,EYELALtd.日本）在低于60°C下濃縮濾 液，并用凍干器（FDCF-12012,OperonCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥，以獲得忍冬的干燥粗制花提取 物。使提取物懸浮于1.5倍體積的水中（體積/重量，基于粗制提取物的重量），用等體積 的乙酸乙酯使懸浮液分級(jí)三次以移出乙酸乙酯可溶部分以提供第一純化提取物。向提取物 添加10倍重量的水（重量/重量，基于第一純化提取物的重量），再向其中添加等重量的 SP-850樹脂（MitsubishiChemical)并攪拌5小時(shí)以移出水溶性物質(zhì)。向剩余部分添加 10倍體積的水作為清洗溶劑，同時(shí)檢查剩余的水溶性物質(zhì)。向剩余部分加3倍體積的10% 甲醇，攪拌5小時(shí)，并用相似的方法向剩余樹脂添加3倍體積的20%甲醇，在真空下進(jìn)行濃 縮，并干燥。使用30%甲醇重復(fù)清洗過程，洗脫液與來自使用10%、20%和30%甲醇的清洗 過程的洗脫液一起收集。用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000，EYELALtd.日本）在低于60°C的 真空下濃縮收集的第二純化提取物，并將濃縮物溶解于3倍體積的30%甲醇。用Sephadex LH樹脂（GEHealthcare，美國(guó)）進(jìn)一步純化溶液以移出分子量小于2. 5kD的剩余無效成分， 例如類固醇、萜類、脂類、多元酚、生物堿、氨基酸等。用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000,EYELA Ltd.日本）在低于60°C的真空下濃縮用30%甲醇溶劑作為流動(dòng)相流出的剩余洗脫液，并 用凍干器（FDCF-12012,OperonCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥以獲得忍冬的純化花提取物（最終產(chǎn) 率：1. 6%，下文中表示為"HS-23C"）。該干燥粉末在以下實(shí)驗(yàn)中用作試驗(yàn)樣品。
[0089] 實(shí)施例3:忍冬的純化提取物（HS_23d)的制備
[0090] 將忍冬的干花添加至10倍體積的蒸餾水，用熱水回流提取法在100°C提取3小 時(shí)。過濾溶液，用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000，EYELALtd.日本）在低于60°C下濃縮濾液， 并用凍干器（FDCF-12012,OperonCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥，以獲得忍冬的干燥粗制花提取物。 使提取物懸浮于1. 5倍體積的水中（體積/重量，基于粗制提取物的重量），用等體積的 乙酸乙酯使懸浮液分級(jí)三次以移出乙酸乙酯可溶部分以提供第一純化提取物。向提取物 添加10倍重量的水（重量/重量，基于第一純化提取物的重量），再向其中添加等重量的Amberlite-XAD-2樹脂（Rohm&HaasCo.，美國(guó)）并攪拌5小時(shí)以移出水溶性物質(zhì)。向剩余 部分添加10倍體積的水和等量的30%甲醇作為清洗溶劑，并攪拌5小時(shí)以提供第二純化提 取物。用真空蒸發(fā)器（EYELAN-1000，EYELALtd.日本）在低于60°C的真空下濃縮吸附的 吸附物質(zhì)，并用凍干器（FDCF-12012,0peronCo.韓國(guó)）進(jìn)行干燥以獲得忍冬的純化花提取 物（最終產(chǎn)率：2. 8%，下文中表示為"HS-23d")。該干燥粉末在以下實(shí)驗(yàn)中用作試驗(yàn)樣品。
[0091] 實(shí)施例4組分分析
[0092] 用根據(jù)表1中公開的條件的HPLC分析在比較例和實(shí)施例中制備的提取物的組分， 結(jié)果不于表2。
[0093] 1-1?試劑
[0094]在實(shí)驗(yàn)中使用了CGA(綠原酸> 96%，Aldrich C3878)、TFA(三氟乙酸，Sigma Aldrich 299537)、HP_20樹脂（Mitsubishi Chemicals)、乙臆（Burdick&Jackson，HPLC 用）、水（Burdick&Jackson，HPLC用）和乙酸乙酯（Junsei)。
[0095] 1-2?樣品處理
[0096] 將100mg在比較例和實(shí)施例中制備的三種提取物溶解于70ml蒸餾水，通過超聲提 取進(jìn)行提取。過濾提取物，將蒸餾水添加至濾液以使其為100ml，通過HPLC分析各個(gè)濾液的 組分以確定各提取物中的組分模式以及活性成分的量。
[0097][表 1]HPLC條件
[0098]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于制備忍冬的純化提取物的方法，其包括以下步驟：在第一步驟，利用提取 溶劑對(duì)忍冬的干花材料進(jìn)行提??；在第二步驟，使粗制提取物經(jīng)受選自過濾法、離心或其組 合的至少一種處理，以提供忍冬的粗制提取物；在第三步驟，通過添加水使所述粗制提取物 懸浮于水中以制備懸浮溶液，和將該溶液分級(jí)成非極性溶劑可溶部分和極性溶劑可溶部分 以除去非極性可溶物質(zhì)并通過收集剩余物提供第一純化提取物；在第四步驟，將水添加至 所述第一純化提取物以使其經(jīng)受選自使用與水的量相等的量的吸附樹脂的吸附色譜、離子 柱色譜或其組合的至少一種純化過程，和用清洗溶劑反復(fù)地清洗以提供忍冬的第二純化提 取物；和真空下對(duì)所述提取物進(jìn)行濃縮，并干燥，以提供含有大量的活性成分的忍冬的純化 提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中第一步驟的所述提取溶劑包括基于花材料重量的 1至100倍體積（體積/重量）的至少一種溶劑，所述至少一種溶劑選自水、酒精制劑、甲 醇、乙醇、丙醇、丁醇、己烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、DMSO、氯仿和二氯甲烷。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中第一步驟的所述提取溶劑包括1至100倍體積的 堿性溶液，所述堿性溶液是使基于花材料重量的0. 1 %至5 %重量（重量/重量）的量的弱 堿，例如NaHC03、NaC03等溶解于水以提高提取效率。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過選自熱水回流提取、花香提取、索氏提取、超 聲波提取及其組合的至少一種提取方法來進(jìn)行第一步驟的提取過程。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過選自過濾法、離心或其組合的至少一種處理 來進(jìn)行第二步驟的提供忍冬的粗制提取物的所述處理。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過以下過程來進(jìn)行第三步驟的提供第一純化提 取物的過程：添加約0. 005至5倍體積的水（體積/重量，基于所述粗制提取物的重量）以 制備所述懸浮溶液；和通過添加約〇. 1至50倍體積的非極性溶劑（體積/體積，基于所述 懸浮溶液的體積），例如己烷、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯，將該溶液分級(jí)成非極性溶劑可溶 部分和極性溶劑可溶部分以除去非極性可溶物質(zhì)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過以下過程來進(jìn)行第四步驟的提供忍冬的第 二純化提取物的過程：將1至30倍重量的水（重量/重量，基于所述第一純化提取物的重 量）添加至所述第一純化提取物以使其經(jīng)受吸附色譜來進(jìn)一步純化，所述吸附色譜使用選 自 SP207、HP20SS、Diaoion HP20、SP-850 樹脂、活性炭、或 Amberlite XAD-2,4 的至少一種 樹脂并且吸附樹脂的量與水的量相等。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過經(jīng)受離子柱色譜來進(jìn)行第四步驟的提供 忍冬的第二純化提取物的過程，所述離子柱色譜使用選自AG50W-X8、Amberlte IR-120、 Amberlite IRA-400、Dowex 50W_x8 或 SK1B 的至少一種強(qiáng)酸性樹脂，選自 Amberlte IRC-50、Bio-Rex 70、Duolite-436或WK40的至少一種弱酸性樹脂，或者選自Amberlte IR-67或Dowex 3_x4的至少一種弱喊性樹脂，優(yōu)選選自Amberlte IR-120、Amberlite IRA-400或SK1B的至少一種強(qiáng)酸性樹脂，并且離子樹脂的量與水的量相等。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過重復(fù)地用選自水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或其 混合物的至少一種清洗溶劑清洗吸附到樹脂的吸附物質(zhì)來進(jìn)行第四步驟的提供忍冬的第 二純化提取物的所述清洗過程。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中第四步驟的提供忍冬的第二純化提取物的所述 清洗過程進(jìn)行至除第四步驟的純化過程外的另外的葡聚糖凝膠柱色譜，所述葡聚糖凝膠柱 色譜使用選自Sephadex LH-20樹脂、Sephadex G15樹脂或Sephadex G35的至少一種葡聚 糖凝膠樹脂。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過以下過程進(jìn)行第五步驟的提供忍冬的純化 提取物的濃縮過程和干燥過程以提供忍冬提取物的創(chuàng)造性純化提取物：在10°c至80°C的 溫度在真空下濃縮所述提取物，和通過選自室溫干燥法、冷凍干燥法、熱空氣干燥法或其組 合的至少一種干燥方法來干燥所述提取物。
12. -種忍冬的純化HS-23提取物，其含有基于干燥的純化提取物的重量的2. 0 %至 30.0% (重量/重量）的量的綠原酸及其衍生物，所述忍冬的純化HS-23提取物是通過以 下步驟制備的：在第一步驟，利用提取溶劑對(duì)忍冬的干花材料進(jìn)行提?。辉诘诙襟E，使粗 制提取物經(jīng)受選自過濾法、離心或其組合的至少一種處理以提供忍冬的粗制提取物；在第 三步驟，通過添加水使粗提取物懸浮于水中以制備懸浮溶液，和將該溶液分級(jí)成非極性溶 劑可溶部分和極性溶劑可溶部分以除去非極性可溶物質(zhì)并通過收集剩余物提供第一純化 提取物；在第四步驟，將水添加至第一純化提取物以使其經(jīng)受選自使用與水的量相等的量 的吸附樹脂的吸附色譜、離子柱色譜或其組合的至少一種純化過程，和用清洗溶劑反復(fù)地 清洗以提供忍冬的第二純化提取物；和真空下對(duì)所述提取物進(jìn)行濃縮，并干燥以提供用于 治療和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的忍冬的純化提取物。
13. -種藥物組合物，其包含通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的忍冬的純化HS-23 提取物作為用于治療和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的活性成分。
14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中所述敗血癥是中度敗血癥，重度敗血癥， 或由燒傷、急性咽喉炎、潰瘍性結(jié)腸炎、IBS(腸道易激綜合征）、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、退行性關(guān)節(jié) 炎、急性肝炎、慢性肝炎引起的敗血癥或感染癥狀。
15. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中所述MODS發(fā)生在由中度敗血癥、重度 敗血癥、或由燒傷引起的敗血癥或感染癥狀導(dǎo)致的受損器官中，所述器官選自肝、腎、心臟、 肺、小腸、大腸、十二指腸、胃、胰、脾。
16. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中所述敗血性休克是由中度敗血癥、重度 敗血癥、或由燒傷引起的敗血癥或感染癥狀導(dǎo)致的敗血性休克。
17. -種藥物組合物，其包含通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的忍冬的純化HS-23 提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合作為用于治療和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的活 性成分。
18. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的藥物組合物，其中所述組合是（a)通過根據(jù)權(quán)利要求1 所述的方法純化的忍冬的純化HS提取物與（b)可商業(yè)獲得的抗菌劑以按重量計(jì)0. 1至 10:0. 1至10 (重量/重量）的混合比混合的組合。
19. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的藥物組合物，其中所述可商業(yè)獲得的抗菌劑是選自以下的 至少一種抗菌劑：抗生素，如青霉素、喹諾酮、氨曲南、氨基糖苷類、頭孢菌素、四環(huán)素、糖肽 類、碳青霉烯等；抗炎劑，如甲滅酸、吲哚美辛、異丁苯丙酸、吡羅昔康、雙氯芬酸等；抗真菌 齊?，如兩性霉素 B、制真菌素、灰黃霉素、唑類抗真菌劑等；抗過敏劑，如西替利嗪、非索非那 定、氯苯吡胺等。
20. -種健康功能食品，其包含通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法純化的忍冬的純化 HS-23提取物作為用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的活性成分。
21. -種健康功能食品，其包含通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法純化的忍冬的純化 HS-23提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合作為活性成分，其用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS 或敗血性休克。
22. -種保健食品，其包含用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的通過根據(jù)權(quán) 利要求1所述的方法純化的忍冬的純化HS-23提取物以及飲食學(xué)可接受的添加劑。
23. -種保健食品，其包含用于緩解和預(yù)防敗血癥、MODS或敗血性休克的通過根據(jù)權(quán) 利要求1所述的方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合以及飲 食學(xué)可接受的添加劑。
24. 通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法純化的忍冬的純化HS-23提取物用于制備用于治 療和預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或敗血性休克的治療劑的用途。
25. 通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法純化的忍冬的純化HS-23提取物與可商業(yè)獲得的 抗菌劑的組合用于制備用于治療和預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或敗血性休克 的治療劑的用途。
26. -種治療或預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或敗血性休克的方法，其包 括向所述哺乳動(dòng)物施用有效量的通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法純化的忍冬的純化HS提 取物以及其藥學(xué)可接受的載體。
27. -種治療或預(yù)防包括人類的哺乳動(dòng)物的敗血癥、MODS或敗血性休克的方法，其包 括向所述哺乳動(dòng)物施用有效量的通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法純化的忍冬的純化HS-23 提取物與可商業(yè)獲得的抗菌劑的組合以及其藥學(xué)可接受的載體。
【文檔編號(hào)】A61K36/355GK104244963SQ201280072577
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2012年11月1日 優(yōu)先權(quán)日:2012年4月27日
【發(fā)明者】尹圣泰, 金楨熏, 林芳虎, 金映睦, 延成欽, 金炫銹, 李善美 申請(qǐng)人:休恩有限公司