專利名稱：一種紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架緩釋制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，更具體地，涉及紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架緩釋制劑，特別是緩釋微囊制劑，本發(fā)明還包括含有這種緩釋微囊的膠囊劑，片劑，顆粒劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架(Nocardiarubra Cell Wall Skeleton , N-CWS)是紅色諾卡氏菌03-P0-8經(jīng)生物發(fā)酵、細(xì)胞破碎、蛋白酶處理和溶媒提取后制得的。其屬生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，N-CWS中含有多種氨基酸、氨基糖所組成的粘肽及阿拉伯糖、半乳糖等，為它們組成的聚合體。具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、增強(qiáng)T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞活性，具有致有絲分裂原活性，并可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生NO等作用。通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究證明它具有抗腫瘤作用及對(duì)細(xì)菌、病毒感染的抗感染作用。在原料來(lái)源上，N-CffS生產(chǎn)菌種為高產(chǎn)易破碎的紅色諾卡氏菌，可充分滿足N-CWS制劑大規(guī)模生產(chǎn)的需要。N-CWS對(duì)動(dòng)物移植性腫瘤的發(fā)生與腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯抑制作用和治療作用，對(duì)致癌劑誘發(fā)腫瘤有明顯的預(yù)防作用，對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移亦有明顯抑制作用。N-CWS的臨床試驗(yàn)表明對(duì)癌性胸腹水及多種實(shí)體瘤均有良好的療效。紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架(N-CWS)，目前市場(chǎng)上有注射劑產(chǎn)品上市。如①紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架凍干粉針劑(商品名胞必佳)，于1998年批準(zhǔn)上市，在抗腫瘤方面得到應(yīng)用。②紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架擦劑(商品名納可佳)，應(yīng)用于抗真菌感染、抗人乳頭瘤病毒和治療宮頸糜爛方面，其中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)?zhí)?00510077407. 5和200510105533. 7。近期的研究發(fā)現(xiàn)，紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架(N-CWS) ロ服給藥對(duì)治療慢性萎縮性胃炎有效，對(duì)于こ肝病毒、人乳頭病毒等均有顯著抑制效果，臨床應(yīng)用價(jià)值高，值得進(jìn)一歩研究開(kāi)發(fā)。但紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架ロ服吸收要求高，即要求穩(wěn)定的吸收，避免局部和短期濃度過(guò)高，又要求ロ感好，穩(wěn)定性好，現(xiàn)有ロ服制劑難以達(dá)到要求。本發(fā)明經(jīng)過(guò)研究，發(fā)現(xiàn)用適當(dāng)?shù)妮o料成分將其制備成緩釋微囊制劑，可以解決現(xiàn)有技術(shù)中的問(wèn)題，但應(yīng)用微囊系統(tǒng)控制釋放N-CWS具有很多不確定性，如緩釋微囊的釋放速率，緩釋微囊的流動(dòng)性，緩釋微囊的大小以及制備エ藝等。由于緩釋微囊是采用成膜材料將藥物活性物質(zhì)包合成的微小粒子。緩釋微囊的粒徑一般在微米范圍，藥物微囊化后，一般形成可流動(dòng)的粉粒，這方面的難點(diǎn)主要有(I)改善微囊制備方法，提高收率；(2)解決微囊制備過(guò)程中N-CWS穩(wěn)定性問(wèn)題；(3)提高藥物載量；(4)降低起始爆釋率，獲得藥物連續(xù)釋放。本發(fā)明經(jīng)過(guò)研究找到ー種 制備紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架緩釋微囊制劑的解決方案，使該產(chǎn)品具有外觀美觀，吸收好、療效高、副作用小，穩(wěn)定性好，釋放均勻的特點(diǎn)，同時(shí)解決了上述問(wèn)題，為此本發(fā)明提供ー種含紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架的緩釋微囊制劑及其制造方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于N-CWS ロ服吋，因其主要成分為諾卡菌酸、阿拉伯半乳聚糖和黏肽，易被胃消化酶破壞，提供ー種能防止N-CWS被消化酶破壞，使之平穩(wěn)釋放、生物利用度高、能夠完全保持其功效的ロ服N-CWS微囊。再以N-CWS微囊與適量輔料混勻，過(guò)篩。裝入膠囊，即得膠囊劑；壓片，即得片劑；制成軟材，過(guò)篩整粒即得顆粒劑，三種新劑型都能徹底解除患者來(lái)自針劑注射的痛苦。為此本發(fā)明提供一種含紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架的緩釋微囊制劑，所述緩釋微囊，其配方及制備方法如下
紅色諾卡氏苗細(xì)胞壁骨架400 1000 (.1g
潤(rùn)濕劑0.01 ~100 mg乳化液0.01~100 mg
聚_離子0.01-100 mg
聚 Pjl 媽子0.01 ~ 100 mg
ft 溶液(101 -200 mg
其制備方法如下I)先將N-CWS原粉制備成N-CWS混懸乳化液，過(guò)濾去除黑色沉淀物和未乳化完全的N-CWS顆粒，得到均勻的N-CWS混懸乳化液，真空冷凍干燥制成凍干粉。2)以N-CWS凍干粉粒為模板粒子，采用兩種帶相反電荷的生物相容性高分子為壁材，依據(jù)異種電荷相互吸引的原理，使這兩種高分子材料一層緊貼一層地結(jié)合在一起，在N-CffS的凍干粉粒的表面形成極薄保護(hù)性外膜，得到N-CWS緩釋微囊。優(yōu)選的，其制備方法如下(I)用油性介質(zhì)將N-CWS潤(rùn)濕，加入乳化液，制備N-CWS混懸乳化液，過(guò)濾去除黑色沉淀物和未乳化完全的N-CWS顆粒，將所得均勻的N-CWS混懸乳化液，經(jīng)真空冷凍干燥制成凍干粉。(2)將N-CWS凍干粉藥物置于含有聚陰離子的鹽溶液中吸附，除去未被吸附的聚陰離子，用鹽溶液洗滌，將制得的微囊置于含有聚陽(yáng)離子的鹽溶液中吸附，除去未被吸附的聚陽(yáng)離子，用鹽溶液洗滌；重復(fù)步驟上述吸附步驟，即得到組裝了不同層數(shù)高分子的N-CWS藥物微囊。其中，所用潤(rùn)濕劑選自純化水其中乳化液選自司盤-80、吐溫-80、甘露醇，以及它們的水溶液。如果是它們的水溶液，其配制方法如下將相應(yīng)乳化劑加于適量純化水中，乳化劑占乳化液的129^25%。聚陽(yáng)離子選自，如殼聚糖、魚精蛋白、聚精氨酸、聚烯丙基銨鹽酸鹽、膠原、多聚賴氨酸、陽(yáng)離子葡聚糖、ニ苯胺-4-重氮樹(shù)脂、取代ニ苯胺重氮樹(shù)脂或其他帶正電荷的高分子材料中的ー種或幾種的混合物。聚陰離子選自，如海藻素鈉、硫酸葡聚糖、肝素、硫酸肝素、聚谷氨酸、羧甲基纖維素鈉、聚陰離子纖維素、聚苯こ烯磺酸鈉、硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸或其他帶負(fù)電荷的高分子材料中的ー種或幾種的混合物。其中，所述鹽溶液選自氯化鈉、氯化銨、硫酸銨、硫酸鉀、硫酸鈉、氯化鉀、磷酸鈉或其他強(qiáng)電解質(zhì)的溶液，優(yōu)選它們的鹽酸溶液，其配制方法如下將相應(yīng)鹽加于適量純化水中，鹽溶液濃度為0. OriOM0優(yōu)選的微囊，其配方如下
紅色諾專氏菌細(xì)跑壞甘架400-1000 JLig
潤(rùn)濕劑0.0100 mg
乳化液0.01 ~100mg
聚 I1:丨離子0.01-100 mg
聚U〗離子0.01 100 mg
鹽溶液0.01-200 mg特別優(yōu)選的微囊，其配方如下
^-1- C* IィI 丨、1-t litil n ィく400-1000
閨涯魏，#1化水O.OMOOmg
乳化液》B±if1-80O.O 卜.1OO mg
聚Pl I離子，ItJS0.0卜 IOO mg
聚11+離子， 1酸軟貨+素O.OMOOmg
ft溶液.鉍化_0.0卜200 mg更優(yōu)選的微囊，其配方如下
紅色諾-k氏菌細(xì)胞《|骨轟400 10OO JLig
潤(rùn)濕劑，純化水OJ ~5 mg
乳化液，吐溫-8010-80 mg
聚W丨離子，膠原10-80 mg
聚PJI離子，硫I俊軟骨尜10 80 mg
鹽溶液，級(jí)化鈉50-200 mg最優(yōu)選的微囊，其配方如下紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架400 Hg
潤(rùn)濕劑^ 純化水0.5 mg
乳化液f tt溫-SO50 mg
聚_離子，膠原60 mg
■ _離子，硫酸軟骨素SOmg
鹽溶液，氣化鈉100 Mg或
紅色*卡氏菌細(xì)Jll壁骨架SOOng
潤(rùn)濕割，德化水1.0 mg
乳化液，Itf1-SO90 mg
聚Pl I離子，膠原80 mg
聚關(guān)離子，疏酸軟骨素60mg
&溶液，氣化她200 mg本發(fā)明的上述緩釋微囊在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，但在中性介質(zhì)中卻能漸漸釋放出N-CWS藥物，從而在ロ服時(shí)可完整保持藥物功效。本發(fā)明的上述緩釋微囊具有如下優(yōu)點(diǎn)I)腸道定位吸附和腸道定位吸收；2) N-CffS的高包封率和高載藥率；3)藥物釋放速度可通過(guò)囊壁的厚度控制；4)エ藝簡(jiǎn)単，易操作，重現(xiàn)性好，具有良好的應(yīng)用前景。本發(fā)明還包括把微米級(jí)或亞微米級(jí)N-CWS藥物緩釋微囊與輔料混合，制備成緩釋微囊制劑，如膠囊劑、片劑、顆粒劑等。以下分別描述制備N-CWS三種新劑型緩釋膠囊劑、片劑和顆粒劑，其中包括了作為有效成分的N-CWS藥物微囊和藥學(xué)上認(rèn)可的緩釋膠囊劑賦形輔料、片劑賦形輔料、顆粒劑賦形輔料。片劑所述的賦形輔料包括微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、聚維酮(聚こ烯吡咯烷酮)、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂。其中N-CWS的含量每片為400 Ug 1000 Ug，片劑每片都是重90 110 mg。片劑制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟將N-CWS藥物微囊、預(yù)膠化淀粉和內(nèi)加的聚維酮共粉碎，然后與無(wú)水粘合劑微晶纖維素一起干混，將上一歩制得的混合物用外加的聚維酮配置成水溶液制軟材，20目篩制粒，將制得的細(xì)粒低溫凍干，18目篩整粒；向顆粒中加入潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，中間體合格后壓片，即得。其中輔料由下列重量百分比的成分組成
權(quán)利要求
1.一種含紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架的緩釋微囊制劑，其特征在于，所述緩釋微囊其配 方如下紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架400 1000 ng潤(rùn)濕劑0,01-100 mg乳化液0.01 100 mg聚陽(yáng)離子0.01-100 mg聚陰離子0,01-100 mg鹽溶液0.0卜200 mg其制備方法如下1)先將N-CWS原粉制備成N-CWS混懸乳化液，過(guò)濾去除黑色沉淀物和未乳化完全的 N-CWS顆粒，得到均勻的N-CWS混懸乳化液，真空冷凍干燥制成凍干粉，2)以N-CWS凍干粉粒為模板粒子，采用兩種帶相反電荷的生物相容性高分子為壁材， 依據(jù)異種電荷相互吸引的原理，使這兩種高分子材料一層緊貼一層地結(jié)合在一起，在N-CWS 的凍干粉粒的表面形成極薄保護(hù)性外膜，得到N-CWS緩釋微囊，其中，所用潤(rùn)濕劑選自純化水其中乳化液選自司盤-80、吐溫-80、甘露醇，以及它們的水溶液，如果是它們的水溶 液，其配制方法如下將相應(yīng)乳化劑加于適量純化水中，乳化劑占乳化液的129^25%，聚陽(yáng)離子選自，如殼聚糖、魚精蛋白、聚精氨酸、聚烯丙基銨鹽酸鹽、膠原、多聚賴氨酸、 陽(yáng)離子葡聚糖、二苯胺-4-重氮樹(shù)脂、取代二苯胺重氮樹(shù)脂或其他帶正電荷的高分子材料 中的一種或幾種的混合物，聚陰離子選自，如海藻素鈉、硫酸葡聚糖、肝素、硫酸肝素、聚谷氨酸、羧甲基纖維素鈉、 聚陰離子纖維素、聚苯乙烯磺酸鈉、硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸或其他帶負(fù)電荷的高分子材料中 的一種或幾種的混合物，其中，所述鹽溶液選自氯化鈉、氯化銨、硫酸銨、硫酸鉀、硫酸鈉、氯化鉀、磷酸鈉或其他強(qiáng)電解質(zhì)的溶液，優(yōu)選它們的鹽酸溶液，其配制方法如下將相應(yīng)鹽加于 適量純化水中，鹽溶液濃度為0. 01~10M.
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，其特征在于，所述緩釋微囊其制備方法如下(1)用油性介質(zhì)將N-CWS潤(rùn)濕，加入乳化液，制備N-CWS混懸乳化液，過(guò)濾去除黑色沉 淀物和未乳化完全的N-CWS顆粒，將所得均勻的N-CWS混懸乳化液，經(jīng)真空冷凍干燥制成 凍干粉，(2)將N-CWS凍干粉藥物置于含有聚陰離子的鹽溶液中吸附，除去未被吸附的聚陰離 子，用鹽溶液洗滌，將制得的微囊置于含有聚陽(yáng)離子的鹽溶液中吸附，除去未被吸附的聚陽(yáng) 離子，用鹽溶液洗滌；重復(fù)步驟上述吸附步驟，即得到組裝了不同層數(shù)高分子的N-CWS藥物微囊。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，其特征在于，所述緩釋微囊其配方如下紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架400-1000 jug潤(rùn)濕劑，純化水0.01 100 mg乳化液，ttil-800.01-100 mg聚陽(yáng)離+,膠原ao 1 ~ 100 mg聚W離子，硫酸軟骨素0.0 100 mg鹽溶液，氣化鈉0.01 -200 mg
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，其特征在于，所述緩釋微囊其配方如下紅色進(jìn)卡氏菌細(xì)胞壁骨藥400-1000 m潤(rùn)濕劑，純化水0.1~5mg乳化液，吐溫-8010-80 mg聚陽(yáng)離子，膠原10-80 mg聚II離子，硫酸軟骨素10 80 mg鹽溶液，氣化鈉50 200 mg。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，其特征在于，所述緩釋微囊其配方如下紅色諾卡氏菌姻胞壁骨架400 m潤(rùn)濕劑，純化水0.5 mg乳化液，吐溫-8050 mg聚陽(yáng)離子，膠Jfl60 mg聚P力離子，硫酸軟骨素80mg鹽溶液，氣化鈉100 mg或紅色諾乍ft菌細(xì)廳壁骨集800 ng潤(rùn)濕劑，純化水1.0 mg 乳化液，90 mg聚陽(yáng)離子，K原80 mg聚圍離子， 酸軟骨素60 mg鹽溶液，氣化偏200 mg#
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，其特征在于，所述制劑選自膠囊劑、片劑、顆 粒劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，所述片劑，配方如下N-CWS藥物微囊、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂，其中N-CWS的含量每片為400 μ g 1000 μ g，片劑每片都是重90 110 mg，其制備方法如下將N-CffS藥物微囊、預(yù)膠化淀粉和內(nèi)加的聚維酮共粉碎，然后與無(wú)水粘合劑微晶纖維素一起干混，將上一步制得的混合物用外加的聚維酮配置成水溶液制軟材，20目篩制粒，將制得的細(xì)粒低溫凍干，18目篩整粒；向顆粒中加入潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，中間體合格后壓片，即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，所述片劑，其中輔料由下列重量百分比的成分組成徵晶纖維素20%~45%- U .1 *, SlMrf φ八頂股HS従W(wǎng)10% 25%聚維醒2% 8%交聯(lián)羧甲坫纖維索鈉4% 10%硬脂酸鎂2% 5%
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，所述膠囊劑，配方如下=N-CWS藥物微囊、乳糖、淀粉、糊精、PEG-2000、薄荷醇，其中N-CWS的含量每粒為400 μ g 1000 μ g，其制備方法如下將N-CWS藥物微囊、輔料一起干混外加的水溶液制軟材，20目篩制粒，將制得的細(xì)粒低溫凍干，18目篩整粒；向顆粒中加入潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，中間體合格后裝膠囊，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋微囊制劑，所述顆粒劑，配方如下N-CWS190-790mg, 碳酸鈉 40-169g ;蔗糖 730-2900g ；5% 聚維酮 K30 65_270mL ;椰子香精 O. 18-0. 75g。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紅色諾卡氏菌細(xì)胞壁骨架緩釋制劑及其制備方法，其中所述緩釋微囊其配方如下
文檔編號(hào)A61P31/04GK103006714SQ201310003550
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月6日
發(fā)明者盧漢祥, 陳仕魁, 楊喜鴻, 蘇葳 申請(qǐng)人:福建廣生堂藥業(yè)股份有限公司