一種調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的方法
【專利摘要】一種調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的方法，本發(fā)明首次提出Reg蛋白能夠調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的假說，采用Real-timeRT-PCR、Westernblot和免疫染色等方法對糖尿病小鼠皮膚傷口中的RegIII?表達(dá)進(jìn)行檢測,為闡述RegIII?蛋白在糖尿病小鼠皮膚傷口愈合中的作用提供有效的實驗數(shù)據(jù)。為進(jìn)一步研究人糖尿病傷口愈合的機(jī)制作理論基礎(chǔ),且為開發(fā)研制治愈糖尿病患者皮膚傷口愈合緩慢的藥物做準(zhǔn)備。本實驗的研究結(jié)果將會對糖尿病傷口愈合緩慢的機(jī)制提供理論依據(jù)，為進(jìn)一步闡明糖尿病并發(fā)癥的原因做好準(zhǔn)備。
【專利說明】一種調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生命科學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種Reg蛋白調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病是威脅人類的重大疾病之一，傷口愈合不良是糖尿病的一個并發(fā)癥，嚴(yán)重時可能導(dǎo)致截肢，已成為糖尿病患者住院率最高的疾病，但是其確切的機(jī)制尚不清楚。目前研究發(fā)現(xiàn)糖尿病發(fā)生時有多種分子和細(xì)胞功能受損，最終導(dǎo)致糖尿病傷口愈合不良。[0003]CN 101293062 A中公開一種治療糖尿病傷口愈合的藥物，是以西洋參、冬蟲夏草、乳香、沒藥、血竭、麝香、三七、川貝母、植物降糖素為原料組方，按常規(guī)制劑方法制成的散劑或膏劑，但是該發(fā)明并未深入探究糖尿病傷口不易愈合的真正影響因素，因此該藥物僅僅能做到活血止痛、排膿抗炎的功效，而對于糖尿病傷口愈合速度上并無太大功效。
[0004]目前國內(nèi)外對糖尿病皮膚傷口愈合速度慢的原因有過相關(guān)報道，但是相對較少，人們對于糖尿病患者傷口愈合速度慢的真正原因還是沒有找到。Spravchikov N報道高血糖可以抑制角質(zhì)形成層細(xì)胞增增殖，促進(jìn)角質(zhì)形成層細(xì)胞分化。高血糖對角質(zhì)形成層細(xì)胞的形態(tài)也會產(chǎn)生影響。
[0005]胰島再生基因(Regenerating islet-derived, Reg)家族是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類C-類凝集素。Regl蛋白可以促進(jìn)胰腺細(xì)胞增生，并且在胃糜爛周圍的ECL細(xì)胞中Reg蛋白表達(dá)量非常高。在受損的胃粘膜上皮細(xì)胞中Reg蛋白表達(dá)量也非常高。但是對皮膚損傷后傷口中Reg蛋白的表達(dá)以及糖尿病病人皮膚傷口中Reg蛋白的表達(dá)是否改變尚無相關(guān)報道。因此研究Reg蛋白在糖尿病皮膚傷口中的表達(dá)非常重要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對以上情況，本發(fā)明首次提出Reg蛋白能夠調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的假說，采用Real-time RT-PCR、Western blot和免疫染色等方法對糖尿病小鼠皮膚傷口中的RegIII表達(dá)進(jìn)行檢測，為闡述RegIII蛋白在糖尿病小鼠皮膚傷口愈合中的作用提供有效的實驗數(shù)據(jù)。為進(jìn)一步研究人糖尿病傷口愈合的機(jī)制作理論基礎(chǔ)，且為開發(fā)研制治愈糖尿病患者皮膚傷口愈合緩慢的藥物做準(zhǔn)備。
[0007]本發(fā)明研究的RegIII在糖尿病小鼠的皮膚傷口愈合中起著關(guān)鍵作用，RegIII能促進(jìn)角質(zhì)形成層細(xì)胞的增殖，能夠加快糖尿病皮膚的愈合。與小鼠中RegIII結(jié)構(gòu)相似的基因在人中為Reg3A，由于本發(fā)明在小鼠中得到了這樣的結(jié)論，就為進(jìn)一步研究Reg3A在人糖尿病皮膚傷口愈合中的作用打下了堅實的研究基礎(chǔ)，如果經(jīng)過后期研究將Reg3A在糖尿病皮膚傷口愈合中的機(jī)制闡明清楚，就可以在后續(xù)的工作中開發(fā)針對這一機(jī)制的治療糖尿病皮膚傷口愈合緩慢的藥物，這將會有廣闊的應(yīng)用前景，產(chǎn)生的社會經(jīng)濟(jì)效益也會是很可觀的?！揪唧w實施方式】
[0008]1、建立模型
利用鏈脲菌素誘導(dǎo)成年雄性BALB/c小鼠，建立糖尿病模型，兩周后在小鼠背部制作傷口，觀察并記錄傷口愈合情況；
2、檢測RegIII mRNA的表達(dá)
用Real-time RT-PCR的方法檢測RegIII mRNA的表達(dá)，用HE染色的方法觀察糖尿病小鼠皮膚傷口組織形態(tài)學(xué)變化。
[0009]3、結(jié)果比照
結(jié)果與對照組小鼠比較，糖尿病小鼠皮膚傷口愈合緩慢，RegIII mRNA的表達(dá)量明顯降低；糖尿病小鼠傷口周圍表皮層變薄。
[0010]可以得出糖 尿病小鼠皮膚傷口愈合緩慢與RegIII有關(guān)，RegIII有利于角質(zhì)形成層細(xì)胞的增殖。
【權(quán)利要求】
1.一種調(diào)節(jié)糖尿病小鼠皮膚傷口愈合的方法，其特征在于，利用鏈脲菌素誘導(dǎo)成年雄性BALB/c小鼠，建立糖尿病模型。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，用Real-timeRT-PCR的方法檢測RegIII mRNA的表達(dá)，用HE染色的方法觀察糖尿病小鼠皮膚傷口組織形態(tài)學(xué)變化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，與對照組小鼠比較，檢測傷口愈合速度、RegIII mRNA的表達(dá)量以及傷口周圍表皮情況。
【文檔編號】A61P3/10GK103908658SQ201310006052
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2013年1月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月8日
【發(fā)明者】張超 申請人:上海市浦東新區(qū)知識產(chǎn)權(quán)保護(hù)協(xié)會