一種隱丹參酮提取物的純化方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種隱丹參酮提取物的純化方法，包括如下步驟：?（1）取隱丹參酮含量為20-40%的隱丹參酮提取物，加入高醇溶液加熱溶解，得混合液；（2）混合液放置、降溫，固液分離，得液體；（3）濃縮，得濃縮液；（4）濃縮液加入乙醇，調(diào)節(jié)混合液含醇量，加熱回流，得混合回流液；（5）放置、降溫，固液分離，得固體；（6）干燥，得隱丹參酮提取物。
【專利說明】一種隱丹參酮提取物的純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物的提取與分離純化【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及從低含量的隱丹參酮提取物中提取純化隱丹參酮的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]丹參為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根莖,為多年生草本植物，是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的常用藥之一，具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效。臨床主要用于治療腎病、肝病、心腦血管疾病等，有著廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域。
[0003]隱丹參酮(Cryptotanshinone)為丹參中的一種藥物成分,具有抗氧化、抗衰老功能，對治療冠心病、心絞痛、心肌損害有一定療效，且具有抑菌作用，lmg/ml對金黃色葡萄球菌及綠膿桿菌均有抑制作用，對溶血性鏈球菌亦有一定抑制作用。
[0004]隱丹參酮提取物為丹參通過溶劑提取得到的含有一定量隱丹參酮的丹參提取物，目前，多數(shù)報道可產(chǎn)業(yè)化的隱丹參酮提取物多采丹參經(jīng)高醇提取，柱層析法純化等方式獲得，但存在含量低、工藝復(fù)雜等缺陷；也有研究采用制備色譜等手段獲取較高含量的隱丹參酮提取物，但此方法均存在產(chǎn)業(yè)化成本高、多使用人體有害的有機試劑、產(chǎn)品得率低等問題。
[0005]因此，以低含量的隱丹參酮提取物為原料開發(fā)能有效提高隱丹參酮含量且易產(chǎn)業(yè)化的方法具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明利用隱丹參酮在一定濃度乙醇中的溶解度與溫度的關(guān)系，采用降溫析晶的辦法從低含量的隱丹參酮提取物中獲得進一步提高含量的隱丹參酮提取物，即提供一種從20-40%含量的隱丹參酮提取物中制備較高含量的隱丹參酮提取物的方法。20-40%含量的隱丹參酮提取物加入高醇溶液加熱溶解，放置降溫，固液分離，液體濃縮調(diào)節(jié)含醇量，加熱回流，放置降溫，固液分離，收集固體，干燥，粉碎等工藝過程得到較高含量的隱丹參酮提取物，提取物中隱丹參酮含量提高30%以上，轉(zhuǎn)移率達到60%以上，其中20-40%含量的隱丹參酮提取物可以由市場購買而來，如本公司、陜西漢中天然谷生物科技有限公司、合肥標(biāo)品生物技術(shù)有限公司均有銷售，也可自行通過常規(guī)方式生產(chǎn)得到。
[0007]本發(fā)明通過下述技術(shù)方案予以實施。
[0008]本發(fā)明的一種隱丹參酮提取物的純化方法，按順序包括如下步驟:
[0009]( I)取含量為20-40%的隱丹參酮提取物，加入高醇溶液加熱溶解，得混合液；
[0010](2)混合液放置、降溫，固液分離，得液體；
[0011](3)所得液體濃縮，得濃縮液；
[0012](4)濃縮液加入乙醇，調(diào)節(jié)混合液含醇量，加熱回流,得混合回流液；
[0013](5)回流液放置、降溫，固液分離，得固體；
[0014](6)所得固體干燥，得隱丹參酮提取物。[0015]所述步驟(1)中的高醇選自含醇量為92-100%的乙醇溶液，用量選自20-70倍原料量。
[0016]所述步驟(2)或步驟(5)中的放置降溫是將混合液放置在0_35°C環(huán)境下，降溫至10-40°C，放置時間為4-36小時，步驟(2)或步驟(5)中的固液分離方式選自管式離心或碟式離心或膜過濾或線隙過濾或板框過濾或濾布過濾或紙漿板過濾或濾紙過濾或直接移取上清液。
[0017]所述步驟(3)中的濃縮采用減壓濃縮；濃縮溫度為40_80°C ;濃縮液體積控制為原料量的8-13倍。
[0018]所述步驟(4)中的調(diào)節(jié)混合液含醇量至70-80% ;加熱回流時間10-50min。
[0019]所述步驟(6)中的干燥溫度為20_60°C，方式選自常壓或減壓或通風(fēng)處晾置，步驟(6 )中的隱丹參酮提取物可以為干燥后的固體或粉碎至不同程度的顆粒或粉末。
[0020]優(yōu)選的，其中:[0021 ] 所述步驟(1)中的高醇選自含醇量為93-96%的乙醇溶液，用量為30_50倍原料量。
[0022]所述步驟(2)或步驟(5)中的放置降溫為在15_35°C環(huán)境下降溫至10_40°C，放置時間為8-36小時，步驟(2)或步驟(5)中的固液分離方式選自管式離心或膜過濾或板框過濾或濾布過濾或紙漿板過濾或濾紙過濾。
[0023]所述步驟(3)中的濃縮采用減壓濃縮；濃縮溫度為40_60°C ;濃縮液體積控制為原料量的9-12倍。
[0024]所述步驟(4)中的調(diào)節(jié)混合液含醇量至73-77% ;加熱回流時間為20_40min。
[0025]所述步驟(6)中的干燥溫度為40_60°C，方式選自常壓或減壓，步驟(6)中的隱丹參酮提取物可以為干燥后的固體或粉碎至不同程度的顆粒或粉末。
[0026]另一優(yōu)選的本發(fā)明的純化方法如下:
[0027](I)取含量為20-40%的隱丹參酮提取物，40-60倍95%乙醇加熱至完全溶解，得混合液；
[0028](2)混合液室溫放置12-24小時，板框過濾，得液體；
[0029](3)濾液60°C以下減壓濃縮至10倍原料量，得濃縮液；
[0030](4)濃縮液加入乙醇，調(diào)節(jié)混合液含醇量為75%，加熱回流30min，，得混合回流液；
[0031](5)混合液室溫放置12-24小時，濾布抽濾，得固體；
[0032](6)固體50±2°C減壓干燥、粉碎，得隱丹參酮提取物。
[0033]本發(fā)明最優(yōu)選的純化方法如下:
[0034](I)取20-40%含量的隱丹參酮提取物，加入60倍原料量的95%乙醇溶液，回流加熱使溶解成混合液；
[0035](2)混合液于20_26°C環(huán)境下放置15小時，降溫至26°C，紙漿板抽濾，得濾液；
[0036](3)濾液于50_60°C濃縮至體積為原料量的10倍，得濃縮液；
[0037](4)濃縮液中加入95%乙醇調(diào)節(jié)混合液含醇量為75%，加熱回流30min，得混合液；
[0038](5)混合液于20_26°C環(huán)境下放置15小時，降溫至26°C，濾布抽濾，得固體物；
[0039](6)固體物于50±2°C加壓干燥，粉碎，過篩，得隱丹參酮提取物。
[0040]為檢測隱丹參酮提取物中隱丹參酮含量，本發(fā)明對所述提取物進行了含量測定，測定方法如下:[0041]照高效液相色譜法(中國藥典2010版一部附錄VI D)測定。
[0042]色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(75:25)為流動相；檢測波長為265nm。理論板數(shù)按隱丹參酮峰計算應(yīng)不低于2000。
[0043]對照品溶液的制備精密稱取隱丹參酮對照品10 mg,置50ml棕色量瓶中，用甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取2ml至25ml容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，即得。制成每1ml含約16 μ g的溶液，即得。
[0044]供試品溶液的制備取本品粉末約20mg，精密稱定，置50ml容量瓶中，用甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取Iml至25ml容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
[0045]測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0046]用本發(fā)明方法制備的隱丹參酮提取物中隱丹參酮含量相對提高30%以上，轉(zhuǎn)移率達到60%以上。
[0047]
【權(quán)利要求】
1.一種隱丹參酮提取物的純化方法，其特征在于，包括如下步驟: (O取含量為20-40%的隱丹參酮提取物，加入醇量為92-100%的乙醇溶液，用量為20-70倍原料量加熱溶解，得混合液； (2)混合液放置、降溫，固液分離，得液體； (3)所得液體濃縮溫度為40-80°C;濃縮液體積控制為原料量的8-13倍，得濃縮液； (4)濃縮液加入乙醇，調(diào)節(jié)混合液含醇量至70-80%，加熱回流10-50min，得混合回流液； (5)回流液放置、降溫，固液分離，得固體； (6)所得固體干燥，得隱丹參酮提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(2)或步驟(5)中的放置降溫是將混合液放置在0-35°C環(huán)境下，降溫至10-40°C，放置時間為4-36小時，步驟(2)或步驟(5)中的固液分離方式選自管式離心或碟式離心或膜過濾或線隙過濾或板框過濾或濾布過濾或紙漿板過濾或濾紙過濾或直接移取上清液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(6)中的干燥溫度為20-60°C，方式選自常壓或減壓或通風(fēng)處晾置，步驟(6)中的隱丹參酮提取物可以為干燥后的固體或粉碎至不同程度的顆?；?粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(1)中的高醇選自含醇量為93-96%的乙醇溶液，用量為30-50倍原料量。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(2)或步驟(5)中的放置降溫為在15-35°C環(huán)境下降溫至10-40°C，放置時間為8_36小時，步驟(2)或步驟(5)中的固液分離方式選自管式離心或膜過濾或板框過濾或濾布過濾或紙漿板過濾或濾紙過濾。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(3)中的濃縮采用減壓濃縮；濃縮溫度為40-60°C ;濃縮液體積控制為原料量的9-12倍。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(4)中的調(diào)節(jié)混合液含醇量至 73-77% ;加熱回流時間為20-40min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，所述步驟(6)中的干燥溫度為40-60°C，方式選自常壓或減壓，步驟(6)中的隱丹參酮提取物可以為干燥后的固體或粉碎至不同程度的顆?；蚍勰?。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，步驟如下: (O取含量為20-40%的隱丹參酮提取物，40-60倍95%乙醇加熱至完全溶解，得混合液； (2)混合液室溫放置12-24小時，板框過濾，得液體； (3)濾液50-60°C以下減壓濃縮至10倍原料量，得濃縮液； (4)濃縮液加入乙醇，調(diào)節(jié)混合液含醇量為75%，加熱回流30min，，得混合回流液； (5)混合液室溫放置12-24小時，濾布抽濾，得固體； (6)固體50±2°C減壓干燥、粉碎，得隱丹參酮提取物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的純化方法，其特征在于，步驟如下: (I)取20-40%含量的隱丹參酮提取物，加入60倍原料量的95%乙醇溶液，回流加熱使溶解成混合液；(2)混合液于20-26°C環(huán)境下放置15小時，降溫至26°C，紙漿板抽濾，得濾液；(3)濾液于50-60°C濃縮至體積為原料量的10倍，得濃縮液；(4)濃縮液中加入95%乙醇調(diào)節(jié)混合液含醇量為75%，加熱回流30min，得混合液；(5)混合液于20-26°C環(huán)境下放置15小時，降溫至26°C，濾布抽濾，得固體物；(6)固體物于50±2°C加壓干燥，粉碎，過篩，得隱丹參酮提取物。
【文檔編號】A61P9/04GK103919849SQ201310015109
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2013年1月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月15日
【發(fā)明者】范開, 黃松, 劉巖, 黃靜 申請人:天津天士力現(xiàn)代中藥資源有限公司