功勞木總生物堿的制備及其在預防和治療胃潰瘍藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種預防和治療胃潰瘍的功勞木總生物堿提取和純化方法，其主要由鹽酸小糪堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀和其它生物堿組成，可單獨或與藥學上可接受載體混合，用于制備預防與治療胃潰瘍的藥物。
【專利說明】功勞木總生物堿的制備及其在預防和治療胃潰瘍藥物中的應用
【技術領域】:
[0001]本發(fā)明涉及功勞木總生物堿的制備，及該總生物堿及其藥物組合物在預防和治療胃潰瘍藥物中的應用。
【背景技術】:
[0002]胃潰瘍是一種臨床常見病、多發(fā)病之一，并發(fā)癥多、愈合較慢且易復發(fā)的消化系統(tǒng)疾病，發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。在流行病學方面，消化性潰瘍?yōu)橐环N常見病，其發(fā)病率在不同時期，不同地區(qū)差別較大，總的發(fā)病率約占人口的10~20%。美國消化性潰瘍病患者約10%，德國為12.3% ;我國根據(jù)少數(shù)地區(qū)調研，消化道疾病發(fā)病率為11.43%，其中消化性潰瘍發(fā)病率為4.54%。胃潰瘍的發(fā)病機制較為復雜，迄今尚未完全闡明。目前，抗胃潰瘍藥物的臨床主要用藥為:酸抑制劑、H2受體拮抗劑、質子泵抑制劑、幽門螺桿菌抑制劑、胃黏膜保護劑、胃動力藥等。臨床治療胃潰瘍時多聯(lián)合用藥，隨著藥物種類的增多，消化道遺瘍治愈率大大提高，用藥周期大幅度縮短，復發(fā)率明顯降低，但聯(lián)合用藥費用高，具有一定的副作用，且易復發(fā)。因此，為克服西藥的這些缺點，有必要尋找研究具有多成分、多靶點、毒副作用小、應用后復發(fā)率低、價廉等優(yōu)點中藥有效部位。
[0003]功勞木為小檗科植物闊葉十大功勞Mahonia bealei (Fort.) Carr.或細葉十大功勞 Mahonia fortunei (Lindl.) Fedde 或華南十大功勞 Mahonia japonica (Thunb.)DC.的干燥莖。其性寒，味苦，具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效，臨床主要用于濕熱瀉痢，黃疸尿赤，目赤腫痛，胃火牙痛，瘡癤癰腫等癥。十大功勞屬植物具有多種藥理活性:抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗炎、抗增值活性、抑制IL-8產生、逆轉腫瘤細胞多藥耐藥作用、擴張血管及抗傳染、抗自由基和抗氧化等作用。十大功勞屬植物的提取物及其化學成分具有抑制脂氧化酶、抑制角質細胞增生、清除氧自由基、抗補體、抗菌和抗突變等多種生物活性。
[0004]經(jīng)檢索，目前國內對于功勞木的研究僅見74篇文獻，主要是對功勞木的化學成分、單一成分小檗堿的提取、生物堿(如鹽酸小檗堿鹽酸巴馬汀和鹽酸藥根堿)的含量的測定、功勞木提取物對腫瘤的逆轉作用的報道，但對于單味功勞木、其中的化學成分及其有效部位對胃潰瘍的治療與預防作用尚未見相關報道及專利。
[0005]為從功勞木中尋找治療胃潰瘍的活性成分，本發(fā)明對功勞木總生物堿進行了提取純化，獲得了純度大于50%的總生物堿有效部位，該有效部位主要為鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸藥根堿，對總生物堿的活性研究證明其具有預防和治療胃潰瘍的作用。

【發(fā)明內容】
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[0006]本發(fā)明解決的技術問題是采用水溶性溶劑提取功勞木中總生物堿，并進一步純化獲得功勞木總生物堿，以及研究該總生物堿在預防和治療胃潰瘍藥物中的應用。
[0007]本發(fā)明解決的技術問題還包括功勞木總生物堿可供工業(yè)化生產的制備方法，以及功勞木總生物堿的組成，鑒于該總生物堿的主要化學成分清楚明確，這將有利于工業(yè)化生產中的質量控制，從而保證療效和制劑質量的穩(wěn)定性。
[0008]本發(fā)明的功勞木總生物堿可以作為藥物活性成分制備成各種臨床藥物制劑，其中含有治療有效量的功勞木總生物堿及藥學上可接受的載體；還可以是功勞木總生物堿與其他中藥或中藥提取物或中藥有效部位或化學成分或輔料共同制備的藥物組合物，用于預防與治療胃潰瘍。
[0009]為解決上述問題，提供如下技術方案:
[0010]一種預防與治療胃潰瘍的功勞木總生物堿，主要由鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿及其他生物堿組成，按重量百分比，含有總生物堿30-99 %。
[0011]所述的總生物堿，來源于含小檗堿類生物堿的藥材，優(yōu)選小檗科闊葉十大功勞木及葉、細葉十大功勞木及葉、華南十大功勞木及葉。
[0012]所述的功勞木總生物堿的制備方法，包括以下步驟:
[0013]方法1:
[0014]藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液加入5-30%氯化鈉，以酸調節(jié)PH值1-7，過濾，沉淀水洗，80°C干燥得干浸膏，將此干浸膏以水溶解，再以0.01-5 %硫酸溶液提取，堿調PH值
7-14，靜置，過濾，濾液加入5-30%氯化鈉，以酸調節(jié)PH1-7，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，SP得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉；
[0015]方法2:
[0016]藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液加入5-30%氯化鈉，以酸調節(jié)PH值1-7，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，得浸膏，以水溶解浸膏，上樣于大孔樹脂層析柱，先用蒸餾水除雜，再以水溶性溶劑洗脫，回收洗脫液，干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉，大孔樹脂優(yōu)選 AB-8、D101、HPD100、HPD722、HPD700 ；
[0017]方法3:
[0018]藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液以酸調PH值1-7，上樣于陽離子交換樹脂層析柱，先用蒸餾水除雜，再以水溶性溶劑洗脫，回收洗脫液，干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉，陽離子交換樹脂優(yōu)選D152、D113、D151 ；
[0019]方法4:
[0020] 藥材以水溶性溶劑于50_100°C條件下提取，回收溶劑后得濃縮液，調節(jié)PH值1-7，上樣于層析柱，用水除雜，酸性水溶性溶劑洗脫，回收溶劑得浸膏，浸膏再以水溶性溶劑溶解，上樣于層析柱，先用蒸餾水除雜，再以水溶性溶劑洗脫，回收溶劑，干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉，層析柱優(yōu)選大孔樹脂或陽離子交換樹月旨，大孔樹脂優(yōu)選AB-8、DlOl、HPD100, HPD722、HPD700,陽離子交換樹脂優(yōu)選D152、Dl 13、D151。[0021]所述的功勞木總生物堿在制備預防和治療胃潰瘍藥物中的應用。
[0022]一種藥用組合物，含有所述功勞木總生物堿，以及含有藥學上可接受的載體。
[0023]所述的功勞木總生物堿或藥用組合物可制備成口服制劑、注射劑、吸入制劑或外用制劑。
[0024]為解決上述問題，提供如下技術方案:
【具體實施方式】:
[0025]實施例1功勞木總生物堿的制備
[0026]稱取100g闊葉功勞木粉末，加入50%乙醇1200ml，90°C回流提取，過濾，回收乙醇，至200ml，再以2%硫酸回流提取，過濾，調節(jié)PH8-9，靜置，過濾，得濾液，加入15%氯化鈉后，調節(jié)PH1-2，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，將此沉淀以蒸餾水溶解后，再以2 %硫酸回流提取，濾液調節(jié)PH8-9，靜置，過濾，得濾液，加入15 %氯化鈉后，調節(jié)PH1-2，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，得純度為52.12% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為21.89%,2.72%,27.51% )的總生物堿。
[0027]實施例2功勞木總生物堿的制備
[0028]稱取100g闊葉功勞木粉末，加入50%乙醇1200ml，90°C回流提取，過濾，回收乙醇，至200ml，再以2 %硫酸提取，過濾，調節(jié)PH8-9，靜置，過濾，得濾液，按15 %加入氯化鈉，攪拌溶解，加鹽酸，調節(jié)PH1-2，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，得浸膏，將此浸膏溶解在蒸餾水中，取等份，分別上于Dl 13和HPD100樹脂柱上，蒸餾水和10%乙醇除雜，50%酸醇洗脫，分別得純度為67.94% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為40.11%、16.58%,11.26% )和59.55% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為
31.22%、17.13%、11.20% )的總生物堿。
[0029]實施例3功勞木總生物堿的制備
[0030]稱取150g闊葉功勞木粉末，加入50%乙醇1800ml，90°C回流提取，過濾，回收乙醇，至300ml，再以2 %硫酸溶液提取，過濾，氨水調節(jié)PH8-9，靜置，過濾，得濾液，分別以鹽酸調PH1-2、PH3-4、PH5-6，分別上于大孔樹脂HPD100上，先以蒸餾水除雜，再以30 %乙醇洗脫，回收洗脫液分別得純度為44.79% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為22.14%U1.91%U0.74% ),43.25% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為21.54%、11.94%、10.22% )、43.90% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為21.69%、11.71 %、10.50% )的總生物堿。
[0031]實施例4功勞木總生物堿的制備
[0032]稱取150g細葉功勞木粉末，加入50%乙醇1800ml，90°C回流提取，過濾，回收乙醇至約為1500ml，調節(jié)PH為2，上樣于陽離子交換樹脂D113柱上，用蒸餾水、10%、30%乙醇除雜，然后用40%酸性乙醇洗脫，回收酸性乙醇溶液，得浸膏，將浸膏溶解于蒸餾水中，上樣于大孔樹脂HPD100上，用蒸餾水除雜，30%乙醇洗脫，回收乙醇得純度為58.27% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為30.67%、16.34%、11.27% )的總生物堿。
[0033]實施例5.功勞木總生物堿的制備
[0034]稱取400g細葉功勞木粉末，加入50%乙醇4800ml，90°C下提取，回收乙醇，調節(jié)濃縮液的PH為2，上樣于大孔樹脂HPDlOO樹脂柱上，用蒸餾水除雜，30%乙醇洗脫，回收溶劑，得浸膏，將此浸膏溶解在蒸餾水中，上樣于陽離交換樹脂D113柱上，依次用蒸餾水、10%、30%、50%乙醇除雜，然后用50%酸醇洗脫，回收洗脫溶液，干燥得純度為61.32% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為28.07%、17.48%、15.77% )的功勞木總生物堿。
[0035] 實施例6.功勞木總生物堿的制備
[0036]稱取150g功勞木粉末，加入50%乙醇1800ml，90°C回流提取，過濾，回收乙醇至約為1500ml，調節(jié)PH為2，上樣于處理好的陽離子交換樹脂0113上，用蒸餾水、10%、30%乙醇除雜，然后用40-50%酸性乙醇洗脫，回收酸性乙醇溶液，干燥得純度純度為52.87% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為30.11 %、12.50%、10.26% )的功勞木總生物堿
[0037]實施例7.功勞木總生物堿的制備
[0038]稱取45g闊葉功勞木葉粉末，加入50%乙醇540ml，90°C回流提取，回收乙醇，調節(jié)PH為3-4，上樣于陽離子交換樹脂D113柱上。用蒸餾水和10%乙醇除雜，然后以50%酸醇洗脫，回收溶劑，干燥即得純度為41.8% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為22.93%U0.68%,8.20% )的總生物堿。
[0039]實施例8.功勞木總生物堿的制備
[0040]稱取45g狹葉功勞木粉末，加入50%乙醇540ml，90°C條件下回流提取兩次，回收乙醇，調節(jié)PH為3-4，上樣于陽離子交換樹脂D151柱上。用蒸餾水、10^^30%乙醇除雜，50%酸醇洗脫，回收酸醇，干燥即得純度為47.75% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為26.32%、12.14%,9.29% )的總生物堿。
[0041]實施例9.功勞木總生物堿的制備
[0042]稱取45g華南功勞木粉末，加入50%乙醇540ml，90°C回流提取，回收乙醇，以鹽酸調節(jié)PH為3-4，上樣于陽離子交換樹脂D151柱上。用蒸餾水、10%、30%乙醇除雜，50%酸醇洗脫，回收酸醇，干燥即得純度為52.69% (其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為28.73%、13.44%、10.52% )的總生物堿。
[0043]實施例10.功勞木總生物堿的制備
[0044]稱取45g功勞木粉末，加入50%乙醇540ml，90°C條件下回流提取兩次，回收乙醇，調節(jié)PH為3-4，上樣于處理好的D113樹脂。用蒸餾水、10%、30%、50%乙醇除雜，50%酸醇洗脫，回收酸醇，干燥得浸膏，干浸膏以100mL蒸餾水溶解后，上樣于HPD100大孔樹脂柱上，用蒸餾水除雜，30%乙醇洗脫，回收洗脫液，干燥即得純度為68.72%其中鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的含量分別為37.20%、18.00%、13.52% )的總生物堿。
[0045]實施例11.功勞木總生物堿對無水乙醇型胃潰瘍的影響
[0046]采用隨機法將小鼠分成7組，每組10只，雌雄各半，分為空白組、模型組、奧美拉唑組、胃康靈膠囊組、藥物低劑量組、藥物中劑量組、藥物高劑量組。每天灌胃給藥I次，連續(xù)7天，末次給藥Ih后無水乙醇(0.lmL/10g)灌胃造模。造模前禁食不禁水24h。誘導Ih后脫頸椎處死小鼠，手術剪打開小鼠腹腔找到胃，分別結扎賁門、幽門后取胃，向胃內注入2 %甲醛溶液1ml，將全胃置于裝有2%甲醛溶液的燒杯中固定30min，沿胃大彎剪開，以生理鹽水沖洗3次，用濾紙吸干水分，展平，以備潰瘍指數(shù)的測定。計算潰瘍抑制率(％)=(模型組潰瘍面積-給藥組潰瘍面積廣100% /模型組潰瘍面積
[0〇47] 表1功勞木總生物喊對無水乙醇型胃潰瘍的影響(x±s, η = 10)
[0048]
【權利要求】
1.一種預防與治療胃潰瘍的功勞木總生物堿，其特征是功勞木總生物堿主要由鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿及其他生物堿組成，按重量百分比，含有總生物堿30-99%。
2.權力要求I所述的總生物堿，其特征在于來源于含小檗堿類生物堿的藥材，優(yōu)選小檗科闊葉十大功勞木及葉、細葉十大功勞木及葉、華南十大功勞木及葉。
3.權利要求1所述的功勞木總生物堿的制備方法，其特征是包括以下步驟: 方法1: 藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液加入5-30 %氯化鈉，以酸調節(jié)PH值1_7，過濾，沉淀水洗，80°C干燥得干浸膏，將此干浸膏以水溶解，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液加入5-30%氯化鈉，以酸調節(jié)PH值1-7，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉； 方法2: 藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液加入5-30%氯化鈉，以酸調節(jié)PH值1-7，過濾，沉淀水洗，80°C干燥，得浸膏，以水溶解浸膏，上樣于大孔樹脂層析柱，先用蒸餾水除雜，再以水溶性溶劑洗脫，回收洗脫液，干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉，大孔樹脂優(yōu)選 AB -8、D101、HPD100、HPD722、HPD700 ； 方法3: 藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后，再以0.01-5%硫酸溶液提取，堿調PH值7-14，靜置，過濾，濾液以酸調PH1-7，上樣于陽離子交換樹脂層析柱，先用蒸餾水除雜，再以水溶性溶劑洗脫，回收洗脫液，干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉，陽離子交換樹脂優(yōu)選D152、D113、D151 ； 方法4: 藥材以水溶性溶劑于50-100°C條件下提取，回收溶劑后得濃縮液，調節(jié)PH值1-7，上樣于層析柱，用水除雜，酸性水溶性溶劑洗脫，回收溶劑得浸膏，浸膏再以水溶性溶劑溶解，上樣于層析柱，先用蒸餾水除雜，再以水溶性溶劑洗脫，回收溶劑，干燥，即得純度大于30%的總生物堿，其中所述的水溶性溶劑優(yōu)選水、乙醇的一種溶劑或兩種溶劑組成的混合溶劑，酸優(yōu)選鹽酸或硫酸，堿優(yōu)選氨水或氫氧化鈉，層析柱優(yōu)選大孔樹脂或陽離子交換樹脂，其中大孔樹脂優(yōu)選 AB-8、DlOl、HPD100、HPD722、HPD700,陽離子交換樹脂優(yōu)選 D152、D113、D151。
4.權利要求1所述的功勞木總生物堿在制備預防和治療胃潰瘍藥物中的應用。
5.一種藥用組合物，其特征在于含有權利要求1所述功勞木總生物堿，以及含有藥學上可接受的載體。
6.權利要求1和4所述在預防和治療胃潰瘍藥物中的應用，其特征在于所述的總生物堿或藥用組合物可制備成口服制劑、注射劑、吸入制劑或外用制劑。
【文檔編號】A61K36/29GK103933100SQ201310016285
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2013年1月17日 優(yōu)先權日:2013年1月17日
【發(fā)明者】何欣 申請人:何欣