專利名稱：一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，屬于功能材料和生物材料領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
組織工程學(xué)應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)原理和方法，從認(rèn)識(shí)正常和病理組織結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系出發(fā)，研究開發(fā)生物替代品，以恢復(fù)、維持或改善受損組織和器官的形態(tài)和功能，達(dá)到修復(fù)重建的目的。組織工程學(xué)的關(guān)鍵技術(shù)之一是制備具有生物相容性且可降解吸收的細(xì)胞支架。水凝膠為在水中溶脹并保持大量水分而又不溶解的聚合物，與充盈有大量水性液體的機(jī)體組織極其相似。柔軟、潤濕的表面以及與組織的親和大大減少了材料對(duì)周圍組織的刺激性，使得水凝膠聚合物具有良好的生物相容性。因此，水凝膠作為組織工程細(xì)胞支架材料被大量使用功能高分子學(xué)報(bào)，2004，04 :689-697。

海藻酸鈉是一種從褐藻中提取出的陰離子線性多糖，它極易和二價(jià)陽離子如Ca2+鍵合形成水凝膠，并且離子交聯(lián)的海藻酸鹽水凝膠具有反應(yīng)條件溫和，簡單易行，且可注射、原位凝膠化等優(yōu)點(diǎn)，因其生物相容性、低毒性和相對(duì)低廉的價(jià)格而被廣泛地研究應(yīng)用于藥物釋放體系和組織工程領(lǐng)域。Yan等用Ca2+交聯(lián)海藻酸鈉_明膠形成水凝膠，并用細(xì)胞組裝機(jī)將肝細(xì)胞種植于凝膠中形成細(xì)胞-凝膠三維結(jié)構(gòu)，細(xì)胞能夠在凝膠中保持活性長達(dá)12天并正常表達(dá)其生物功能化工進(jìn)展，2008，11 :1743-1749。Paige等研究緩慢聚合的海藻酸鈣水凝膠作為可注射軟骨細(xì)胞的載體。他們把剛從牛前肢取得的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞與海藻酸鹽水溶液混合，然后注射到無胸腺小鼠體內(nèi)。6周后，在注射部位附近取下新形成的組織，進(jìn)行組織學(xué)分析，結(jié)果表明有透明軟骨的形成暨南大學(xué)，2008，博士論文。由于其很強(qiáng)的親水性，海藻酸鹽對(duì)蛋白質(zhì)吸附較差，缺乏細(xì)胞特異性作用位點(diǎn)。Chone課題組研究了經(jīng)冷凍干燥法制備的由Ca2+交聯(lián)形成的海藻酸鹽多孔支架，由于對(duì)細(xì)胞的粘附力差，在植入肝細(xì)胞體外培養(yǎng)24小后發(fā)現(xiàn)90%的細(xì)胞發(fā)生團(tuán)聚，細(xì)胞成球形，但繼續(xù)培養(yǎng)4天后，細(xì)胞分泌纖維粘連蛋白，表明盡管肝細(xì)胞不粘附于海藻酸鹽水凝膠，但細(xì)胞能正常表達(dá)其功能。許多研究者對(duì)海藻酸進(jìn)行改性，如Mooney課題組將RGD共價(jià)鍵合到海藻酸鹽凝膠以改進(jìn)其對(duì)細(xì)胞的粘附性，促進(jìn)其增殖Biomaterials，1999，20 :45_53。Glickli S等人制備出具有相互貫穿多孔海綿結(jié)構(gòu)的海藻酸鈉水凝膠，將它作為肝細(xì)胞組織工程的三維支架材料，提高了肝細(xì)胞的聚集性，從而為提高細(xì)胞活性以及合成纖連蛋白能力提供了良好的環(huán)境。分子印跡聚合物因制備簡單、穩(wěn)定性好、且具有分子識(shí)別功能使其在色譜分離、固相萃取、化學(xué)傳感、模擬酶催化、藥物緩釋等方面有了廣泛的應(yīng)用。目前，其對(duì)小分子的特異識(shí)別作用的研究已經(jīng)取得了很大的進(jìn)步，例如氨基酸類、糖及其衍生物和藥物等。但是關(guān)于生物大分子的印跡，如多肽、蛋白質(zhì)的研究，遠(yuǎn)不如小分子印跡研究的系統(tǒng)和深入。蛋白質(zhì)分子印跡聚合物由于在醫(yī)學(xué)診斷、生物分離及藥物傳遞等領(lǐng)域的潛在應(yīng)用前景而成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)化學(xué)進(jìn)展.2008，20 (8) :957-968。由于蛋白質(zhì)分子體積龐大、容易變性、空間結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，對(duì)蛋白質(zhì)大分子印跡的研究思路和實(shí)驗(yàn)手段都還處于摸索階段。近年來，人們?cè)絹碓蕉嗟赜镁酆衔锼z來進(jìn)行蛋白質(zhì)分子印跡的研究。水凝膠的精巧結(jié)構(gòu)使其能在外界PH值、離子強(qiáng)度、溫度等因素的刺激下表現(xiàn)出反復(fù)的溶脹變化。相對(duì)于硬質(zhì)的材料，水凝膠更適于蛋白質(zhì)的印跡。海藻酸鹽溫和的凝膠條件有利于保持生長因子和蛋白質(zhì)的生物活性，海藻酸鹽凝膠的軟濕特性有利于生長因子和蛋白質(zhì)保持其構(gòu)象、有利于模板分子的洗脫和識(shí)別過程中對(duì)模板分子的再吸附，海藻酸鹽凝膠對(duì)于環(huán)境參數(shù)諸如離子強(qiáng)度、PH值等的可響應(yīng)性也給分子印跡海藻酸鹽凝膠的設(shè)計(jì)參數(shù)提供了較寬的選擇余地。直接采用帶有功能基團(tuán)的天然聚合物海藻酸鈉代替?zhèn)鹘y(tǒng)分子印跡體系中的功能單體，簡化了印跡聚合物的合成過程。張鳳菊等首次以海藻酸鹽為大分子單體制備了 BSA印跡水凝膠，但是只用海藻酸鹽做印跡材料，其印跡效率較低Reactive and Functional Polymers, 2006,66, (7)712-719。趙孔銀等制備了蛋白質(zhì)印跡聚丙烯酸/海藻酸鈣、磷酸/海藻酸鈣雜化凝膠微球200710057640. 6,200710057639. 3，然而在制備過程中需要用到有機(jī)物和分散劑，可能引起蛋白質(zhì)的變性，而殘留的有機(jī)物和分散劑不利于生物領(lǐng)域的應(yīng)用。Peppas等采用針管將BSA與海藻酸鈉的混合溶液滴加入氯化鈣溶液中，不使用任何有機(jī)溶劑，制備了包埋BSA的膠囊Ind. Eng. Chem. Res. 2010，49，9811-9814，在隨后的研究中，他們以BSA與海藻酸鈉的混合溶液在平面皿中自然延流程成膜，得到厚度在3mm左右的海藻酸鈣分子印跡膜，發(fā)現(xiàn)其對(duì)模板BSA具有較好的緩釋效果Journal of Biomaterials Science, 2011, 22 1523-1534。但是P印pas等制備的膜厚度不均勻，膜上也沒有孔，不利于細(xì)胞的培養(yǎng)。目前，絕大部分的分子印跡聚合物都是以微球的形式存在，而近年來結(jié)合了新興分子印跡技術(shù)的預(yù)定性、選擇性和專一性與傳統(tǒng)膜技術(shù)的穩(wěn)定性、連續(xù)性和節(jié)能性的優(yōu)點(diǎn)的分子印跡膜成為分離、催化和傳感等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一，具有良好的科學(xué)和應(yīng)用前景華東理工大學(xué)，2010，博士論文。專利CN200910273432. 9報(bào)道了一種蛋白質(zhì)分子印跡膜的方法，可用于檢測(cè)蛋白質(zhì)的 顯色芯片。由于分子印跡膜具有不需要有機(jī)物分散劑，易于操作和在膜表面形成細(xì)胞片層等優(yōu)勢(shì)，可能成為將來組織工程培養(yǎng)的支架材料。但是目前還沒有見到用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的報(bào)道。本發(fā)明以生長因子、多肽、蛋白質(zhì)等生物活性分子為模板分子，以具有良好生物相容性并可降解吸收的天然高分子海藻酸鈉為基體，以水溶性高分子或無機(jī)鹽為致孔劑，采用綠色環(huán)保的水相印跡方法，制備厚度可控制在20-1000 μ m的分子印跡多孔凝膠膜。本發(fā)明方法操作簡單，不使用任何有毒有害溶劑，使用的材料本身生物相容性好，可以根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的需要，獲得對(duì)不同模板分子具有識(shí)別和緩釋性能的細(xì)胞培養(yǎng)多孔凝膠膜支架，用于調(diào)控細(xì)胞的生長，在組織工程領(lǐng)域有很好的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明擬解決的技術(shù)問題是水凝膠膜厚度不可控、組織工程材料缺乏識(shí)別性和選擇緩釋能力等問題。本發(fā)明解決所述水凝膠膜厚度不可控、組織工程材料缺乏識(shí)別性和選擇緩釋能力等問題的技術(shù)方案是設(shè)計(jì)一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜。
本發(fā)明提供了一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是包括以下步驟a)配制質(zhì)量百分比為1% -5%的海藻酸鈉、質(zhì)量百分比為0-5%的改性劑、質(zhì)量百分比為0-5%的模板分子和質(zhì)量百分比為0-3%的致孔劑的混合水溶液，靜置消泡后待用；同時(shí)配制質(zhì)量百分比濃度為O. 5% -15%的氯化鈣水溶液；b)取步驟a)得到的含改性劑、模板分子和致孔劑的海藻酸鈉混合水溶液l_5g，倒入表面干潔的平放的玻璃片上，用厚度為20-1000 μ m的刮膜棒刮平，形成均勻厚度的膜，然后立即連同玻璃片一起浸泡入步驟a)配制的氯化鈣水溶液中，繼續(xù)浸泡O. 5-12小時(shí)，用去離子水沖洗3-5遍，得到包埋模板分子的海藻酸鈣基凝膠膜；c)將步驟b)得到的包埋模板分子的海藻酸鈣基凝膠膜用去離子水振蕩洗脫8-48小時(shí)，除去水溶性高分子致孔劑，用pH = 2-4的稀鹽酸浸泡8-24小時(shí)除去無機(jī)鹽致孔劑，然后用洗脫液振蕩洗脫8-48小時(shí)除去模板分子，得到分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜；d)將步驟c)得到的分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜經(jīng)過交聯(lián)劑增強(qiáng)處理和滅菌消毒處理，得到用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜。本發(fā)明所述的模板分子生長因子為表皮生長因子、神經(jīng)生長因子、血管內(nèi)表皮生長因子、血小板來源生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、類胰島素生長因子、白細(xì)胞介素類生長因子、紅細(xì)胞生長素的中一種或兩種以上混合物；所述的模板分子多肽為粘菌素、桿菌肽、萬古霉素、三環(huán)糖肽的中一種或兩種以上混合物；所述的模板分子蛋白質(zhì)為牛血清白蛋白、牛血紅蛋白、肌紅蛋白、卵白蛋白、胃蛋白酶、溶菌酶、細(xì)胞色素C、過氧化氫酶、Y球蛋白中的一種或兩種以上混合物。本發(fā)明所述的水溶性高分子致孔劑為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚乙烯基吡咯烷酮、水溶性淀粉中的一種或兩種以上混合物，所述的無機(jī)鹽致孔劑為磷酸三鈉、磷酸氫二銨、碳酸鈉、磷酸鈣、碳酸鈣中的一種或兩種以上混合物。本發(fā)明所述的改性劑為聚氧乙烯醚、羧甲基殼聚糖、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、硅酸鈉中的一種或兩種以上混合物。

本發(fā)明所述的洗脫液為PBS緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液、生理鹽水、SDS緩沖溶液、草酸水溶液中的一種。本發(fā)明所述的交聯(lián)劑為戊二醛、京尼平、碳二亞胺、琥珀酸酐中的一種或兩種以上混合物。所述的滅菌消毒處理方法包括紫外線滅菌消毒、濕熱滅菌消毒和環(huán)氧乙烷滅菌消毒。
具體實(shí)施例方式下面介紹本發(fā)明的具體實(shí)施例，但本發(fā)明不受實(shí)施例的限制。實(shí)施例1. 一種用于組織工程的表皮生長因子分子印跡多孔凝膠膜的制備方法a)配制質(zhì)量百分比為1%的海藻酸鈉，質(zhì)量百分比為O. 5%的羧甲基殼聚糖，質(zhì)量百分比為O. 01%的表皮生長因子和質(zhì)量百分比為O. 5%的聚乙二醇的混合水溶液，靜置消泡后待用；同時(shí)配制質(zhì)量百分比濃度為15%的氯化鈣水溶液；b)取步驟a)得到的含羧甲基殼聚糖、表皮生長因子和聚乙二醇的海藻酸鈉混合水溶液lg，倒入表面干潔的平放的玻璃片上，用厚度為20 μ m的刮膜棒刮平，形成均勻厚度的膜，然后立即連同玻璃片一起浸泡入步驟a)配制的氯化鈣水溶液中，繼續(xù)浸泡12小時(shí)，用去離子水沖洗3-5遍，得到包埋表皮生長因子的海藻酸鈣基凝膠膜；c)將步驟b)得到的包埋表皮生長因子的海藻酸鈣基凝膠膜用去離子水振蕩洗脫24小時(shí)，除去水溶性高分子致孔劑聚乙二醇，然后用Tris-HCl緩沖溶液振蕩洗脫24小時(shí)除去表皮生長因子，得到分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜；d)將步驟c)得到的分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜經(jīng)過戊二醛交聯(lián)劑增強(qiáng)處理和紫外線滅菌消毒處理，得到用于組織工程的表皮生長因子分子印跡多孔凝膠膜。實(shí)施例2. —種用于組織工程的成纖維細(xì)胞生長因子分子印跡多孔凝膠膜的制備方法a)配制質(zhì)量百分比為5%的海藻酸鈉，質(zhì)量百分比為O.1 %的聚丙烯酸，質(zhì)量百分比為O. 01%的成纖維細(xì)胞生長因子和質(zhì)量百分比為O. 5%的聚乙烯醇的混合水溶液，靜置消泡后待用；同時(shí)配制質(zhì)量百分比濃度為O. 5%的氯化鈣水溶液；b)取步驟a)得到的含聚丙烯酸、成纖維細(xì)胞生長因子和聚乙烯醇的海藻酸鈉混合水溶液5g，倒入表面干潔的平放的玻璃片上，用厚度為1000 μ m的刮膜棒刮平，形成均勻厚度的膜，然后立即連同玻璃片一起浸泡入步驟a)配制的氯化鈣水溶液中，繼續(xù)浸泡12小時(shí)，用去離子水沖洗3-5遍，得到包埋成纖維細(xì)胞生長因子的海藻酸鈣基凝膠膜；c)將步驟b)得到的包埋成纖維細(xì)胞生長因子的海藻酸鈣基凝膠膜用去離子水振蕩洗脫48小時(shí)，除去水溶性高分子致孔劑聚乙烯醇，然后用PBS緩沖溶液振蕩洗脫48小時(shí)除去成纖維細(xì)胞生長因子，得到分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜；d)將步驟c)得到的分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜經(jīng)過京尼平交聯(lián)劑增強(qiáng)處理和紫外線滅菌消毒處理，得到用于組織工程的成纖維細(xì)胞生長因子分子印跡多孔凝膠膜。

實(shí)施例3. —種用于組織工程的萬古霉素分子印跡多孔凝膠膜的制備方法a)配制質(zhì)量百分比為2%的海藻酸鈉，質(zhì)量百分比為I %的聚甲基丙烯酸，質(zhì)量百分比為O. 05%的萬古霉素和質(zhì)量百分比為2%的聚乙烯基吡咯烷酮的混合水溶液，靜置消泡后待用；同時(shí)配制質(zhì)量百分比濃度為2%的氯化鈣水溶液；b)取步驟a)得到的含聚甲基丙烯酸、萬古霉素和聚乙烯基吡咯烷酮的海藻酸鈉混合水溶液2g，倒入表面干潔的平放的玻璃片上，用厚度為200 μ m的刮膜棒刮平，形成均勻厚度的膜，然后立即連同玻璃片一起浸泡入步驟a)配制的氯化鈣水溶液中，繼續(xù)浸泡12小時(shí)，用去離子水沖洗3-5遍，得到包埋萬古霉素的海藻酸鈣基凝膠膜；c)將步驟b)得到的包埋萬古霉素的海藻酸鈣基凝膠膜用去離子水振蕩洗脫12小時(shí)，除去水溶性高分子致孔劑聚乙烯基吡咯烷酮，然后用PBS緩沖溶液振蕩洗脫24小時(shí)除去萬古霉素，得到分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜；d)將步驟c)得到的分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜經(jīng)過碳二亞胺交聯(lián)劑增強(qiáng)處理和濕熱滅菌消毒處理，得到用于組織工程的萬古霉素分子印跡多孔凝膠膜。實(shí)施例4. 一種用于組織工程的牛血清白蛋白分子印跡多孔凝膠膜的制備方法a)配制質(zhì)量百分比為5%的海藻酸鈉，質(zhì)量百分比為I %的硅酸鈉，質(zhì)量百分比為5%的牛血清白蛋白和質(zhì)量百分比為2%的磷酸鈣的混合水溶液，靜置消泡后待用；同時(shí)配制質(zhì)量百分比濃度為2%的氯化鈣水溶液；b)取步驟a)得到的含硅酸鈉、牛血清白蛋白和磷酸鈣的海藻酸鈉混合水溶液2g，倒入表面干潔的平放的玻璃片上，用厚度為600 μ m的刮膜棒刮平，形成均勻厚度的膜，然后立即連同玻璃片一起浸泡入步驟a)配制的氯化鈣水溶液中，繼續(xù)浸泡12小時(shí)，用去離子水沖洗3-5遍，得到包埋牛血清白蛋白的海藻酸鈣基凝膠膜；c)將步驟b)得到的包埋牛血清白蛋白的海藻酸鈣基凝膠膜用去離子水振蕩洗脫24小時(shí)，用pH = 3的稀鹽酸浸泡8小時(shí)除去無機(jī)鹽致孔劑磷酸鈣，然后用SDS緩沖溶液振蕩洗脫48小時(shí)除去牛血清白蛋白，得到分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜；d)將步驟c)得到的分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜經(jīng)過京尼平交聯(lián)劑增強(qiáng)處理和環(huán)氧乙烷滅菌消毒，得到 用于組織工程的牛血清白蛋白分子印跡多孔凝膠膜。
權(quán)利要求
1.一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是以生長因子、多肽、 蛋白質(zhì)等生物活性分子為模板分子，以具有良好生物相容性并可降解吸收的天然高分子海藻酸鈉為基體，以水溶性高分子或無機(jī)鹽為致孔劑，采用綠色環(huán)保的水相印跡方法，制備厚度可控的分子印跡多孔凝膠膜，可以根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的需要，獲得對(duì)不同模板分子具有識(shí)別和緩釋性能的細(xì)胞培養(yǎng)多孔凝膠膜支架，用于調(diào)控細(xì)胞的生長。
2.如權(quán)利要求1所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是包括以下步驟a)配制質(zhì)量百分比為1%-5%的海藻酸鈉、質(zhì)量百分比為0-5%的改性劑、質(zhì)量百分比為0-5%的模板分子和質(zhì)量百分比為0-3%的致孔劑的混合水溶液，靜置消泡后待用；同時(shí)配制質(zhì)量百分比濃度為O. 5% -15%的氯化鈣水溶液；b)取步驟a)得到的含改性劑、模板分子和致孔劑的海藻酸鈉混合水溶液l_5g，倒入表面干潔的平放的玻璃片上，用厚度為20-1000 μ m的刮膜棒刮平，形成均勻厚度的膜，然后立即連同玻璃片一起浸泡入步驟a)配制的氯化鈣水溶液中，繼續(xù)浸泡O. 5-12小時(shí)，用去離子水沖洗3-5遍，得到包埋模板分子的海藻酸鈣基凝膠膜；c)將步驟b)得到的包埋模板分子的海藻酸鈣基凝膠膜用去離子水振蕩洗脫8-48小時(shí)，除去水溶性高分子致孔劑，用pH = 2-4的稀鹽酸浸泡8-24小時(shí)除去無機(jī)鹽致孔劑，然后用洗脫液振蕩洗脫8-48小時(shí)除去模板分子，得到分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜；d)將步驟c)得到的分子印跡海藻酸鈣基多孔凝膠膜經(jīng)過交聯(lián)劑增強(qiáng)處理和滅菌消毒處理，得到用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜。
3.如權(quán)利要求1所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是所述的模板分子生長因子為表皮生長因子、神經(jīng)生長因子、血管內(nèi)表皮生長因子、血小板來源生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、類胰島素生長因子、白細(xì)胞介素類生長因子、紅細(xì)胞生長素的中一種或兩種以上混合物；所述的模板分子多肽為粘菌素、桿菌肽、萬古霉素、三環(huán)糖肽的中一種或兩種以上混合物；所述的模板分子蛋白質(zhì)為牛血清白蛋白、牛血紅蛋白、肌紅蛋白、卵白蛋白、胃蛋白酶、溶菌酶、細(xì)胞色素C、過氧化氫酶、Y球蛋白中的一種或兩種以上混合物。
4.如權(quán)利要求1所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是所述的水溶性高分子致孔劑為聚乙二醇、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚乙烯基吡咯烷酮、水溶性淀粉中的一種或兩種以上混合物，所述的無機(jī)鹽致孔劑為磷酸三鈉、磷酸氫二銨、碳酸鈉、磷酸鈣、碳酸鈣中的一種或兩種以上混合物。
5.如權(quán)利要求2所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是所述的改性劑為聚氧乙烯醚、羧甲基殼聚糖、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、硅酸鈉中的一種或兩種以上混合物。
6.如權(quán)利要求2所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是所述的洗脫液為PBS緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液、生理鹽水、SDS緩沖溶液、草酸水溶液中的一種。
7.如權(quán)利要求2所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是所述的交聯(lián)劑為戊二醛、京尼平、碳二亞胺、琥珀酸酐中的一種或兩種以上混合物。
8.如權(quán)利要求2所述的一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法，其特征是所述的滅菌消毒處理`方法包括紫外線滅菌消毒、濕熱滅菌消毒和環(huán)氧乙烷滅菌消毒。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于組織工程的分子印跡多孔凝膠膜的制備方法。以生長因子、多肽、蛋白質(zhì)等生物活性分子為模板分子，以具有良好生物相容性并可降解吸收的天然高分子海藻酸鈉為基體，以水溶性高分子或無機(jī)鹽為致孔劑，采用綠色環(huán)保的水相印跡方法，制備厚度可控制在20-1000μm的分子印跡多孔凝膠膜。本發(fā)明方法操作簡單，不使用任何有毒有害溶劑，使用的材料本身生物相容性好，可以根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的需要，獲得對(duì)不同模板分子具有識(shí)別和緩釋性能的細(xì)胞培養(yǎng)多孔凝膠膜支架，用于調(diào)控細(xì)胞的生長，在組織工程領(lǐng)域有很好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61L27/20GK103041445SQ20131002067
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2013年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月21日
發(fā)明者趙孔銀, 林貝貝, 闞伯紅, 范文佳, 王霞 申請(qǐng)人:天津工業(yè)大學(xué)