專利名稱：治療腫瘤的龍葵果的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥品，特別涉及治療腫瘤的龍葵果，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
龍葵Solanum nigrumL.系爺科(Solanaceace)爺屬一年生草本植物。別名野葡萄、老鴉眼睛草、苦菜、苦葵。龍葵全草入藥，味苦、性寒、微甘，有小毒，歸肺、胃、膀胱經(jīng)，有清熱解毒、活血散瘀、利水消腫、止咳祛痰的功效。用于瘡癰腫毒，跌打扭傷，慢性氣管炎，急性腎炎，皮膚濕疹，小便不利，老年性慢性氣管炎，白帶過(guò)多，前列腺炎，痢疾等疾病。龍葵及其復(fù)方制劑在臨床上被廣泛用于治療各類腫瘤，被中醫(yī)學(xué)列為十大抗腫瘤中草藥之一，其抗腫瘤作用引起了研究人員的重視，并成為了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究熱點(diǎn)。經(jīng)過(guò)試驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)，龍葵果抗癌活性高于龍葵全草。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物。以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所述的藥物含有龍葵果。本發(fā)明所述的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所述的藥物是由單一味龍癸果制備。本發(fā)明所述的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于龍葵果直接服用。本發(fā)明所述的以龍葵果為果原料制備治療腫瘤的藥物，是在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，采用中藥制劑常規(guī)方法制備成任何可藥用的制劑。例如，將龍葵果粉碎，制成散劑沖服；將龍葵果通過(guò)進(jìn)一步提取，提取物加入輔料制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑，但這并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明所述的提取是低溫提??；用水、乙醇、甲醇或它們的溶液回流、浸潰、滲漉提取。本發(fā)明所述的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，是以龍葵果為原料制備治療肺癌、膀胱癌、子宮頸癌、食道癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、乳癌等多種癌癥的藥物。下面通過(guò)試驗(yàn)例說(shuō)明本發(fā)明的有益之處。一、曬干龍葵全草和龍葵果水溶性浸出物和生物堿含量比較
1、制備曬干龍葵全草和龍葵果
制備曬干龍葵全草:取龍葵全草除去雜質(zhì)，切段，曬干。制備曬干龍葵果:取與制備曬干龍葵全草同一地塊，同一時(shí)間的未成熟的龍葵果除去雜質(zhì),曬干。1)采用《中國(guó)藥典》2010年版一部，附錄XA方法進(jìn)行水溶性浸出物含量測(cè)定，結(jié)果:曬干龍葵全草水浸出物含量為13.21%，曬干龍葵果水溶性浸出物含量為16.54%。2)用以下方法測(cè)定曬干龍葵全草和曬干龍葵果的生物堿含量。取曬干龍葵全草和曬干龍葵果細(xì)粉各約2.0g，精密稱定，分別加入無(wú)水乙醇50ml,浸泡過(guò)夜(12時(shí))，超聲提取40min，濾過(guò)，濾液置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)?0mll0%醋酸溶液使溶解，用等體積石油醚多次萃取，至石油醚層無(wú)色，水層轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿中，用濃氨水調(diào)PH至9-10，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)?0mllmol鹽酸乙醇溶液使溶解，回流水解Ih,取出，放冷，用濃氨水調(diào)PH至9-10，再用氯仿萃取3次(30ml, 20ml, 10ml),合并氯仿萃取液，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)寐确罗D(zhuǎn)移至IOml容量瓶中，氯仿定容，取5ml轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入7ml0.1%的溴甲酚綠乙醇溶液顯色，收集氯仿層，多次萃取至氯仿層無(wú)色，合并氯仿層，置50°C恒溫水浴上蒸干，殘?jiān)勇确律倭慷啻稳芙獠⒍ㄈ葜?0ml，各在414nm處測(cè)吸光度值，計(jì)算生物堿含量。結(jié)果:曬干龍葵全草和曬干龍葵果的生物堿含量分別為0.6%和2.65%，龍葵果生物堿含量是龍葵全草的4.4倍。龍葵中含有多種生物活性，水溶性浸出物具有抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體的免疫作用，水溶性浸出物常被作為評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的重要指標(biāo)。龍葵中的生物堿是抗腫瘤的主要有效成分，其含量越高生物活性越高。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出龍葵果水溶性浸出物含量明顯高于龍葵全草，龍葵果生物堿含量明顯高于龍葵全草，進(jìn)而可知龍葵果抗腫瘤的藥理活性高于龍葵全草。二、龍葵全草和龍葵果對(duì)人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721，！fepG2和胃癌細(xì)胞株MGC-803增殖的抑制作用試驗(yàn)。1、龍葵全草和龍葵果葵提取物分別取龍葵全草和龍葵果粉碎，各加水煎煮兩次，第一次加水8倍量，煎煮2小時(shí)，第二次加水8倍量，煎煮I小時(shí)，合并藥液，藥液濾過(guò)，取濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.10 (60°C)時(shí)，加入乙醇使含醇量達(dá)到75%，沉淀，靜置36小時(shí)，吸取上清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎；得龍葵全草和龍葵果提取物。2、方法MTT法SMMC-7721、!fepG2和MGC-803三種細(xì)胞株用含有10%滅活新生小牛血清，100U/ml的青霉素和100 μ g/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基在37°C，5%C02條件下培養(yǎng)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。分別取濃度為2X 106/ml的SMMC-7721、HepG2和MGC-803細(xì)胞株90 μ I于96孔板中培養(yǎng)，空白對(duì)照組加入10 μ 1PBS，給藥組分別加入10 μ I不同劑量的受試藥液，藥物終濃度(按生藥計(jì)算)。設(shè)陰性對(duì)照組，陰性對(duì)照組是在不含細(xì)胞的培養(yǎng)液中加入不同劑量的藥液。設(shè)6個(gè)平行孔，細(xì)胞給藥后培養(yǎng)24 h，每孔加入5.0 mg/mlMTT溶液20 μ 1，振蕩混勻后，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4h，棄去各孔中的上清液，再加入100 μ 1DMS0中止反應(yīng)，振蕩混勻lOmin，待其各孔中的紫色結(jié)晶完全溶解后，用酶標(biāo)儀在490nm處測(cè)定其吸光值(A490)。按下面公式計(jì)算細(xì)胞抑制率:
生長(zhǎng)抑制率(%) = (N組OD均值-B組OD均值)一 (T組OD均值-TC組OD均值)/N組OD均值-B組OD均值X 100%。3、結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。表I 對(duì)SMMC-7721的抑制率結(jié)果__
抑制率(％) 10 ( μ g/ml) 30 (μ g/ml) 50 (μ g/ml)
_ 龍葵果 ^ 65.7074.8681.19—
_龍葵全草 |55.23|63.84卜9.67
表2對(duì)SHepG2和的抑制率結(jié)果 __
抑制率(％) 10 ( μ g/ml) 30 (μ g/ml) 50 (μ g/ml)`_龍葵果|61.22卜4.93|82.6權(quán)利要求
1.以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物含有龍葵果。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物由單一味龍葵果制備。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物是龍葵果直接服用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所制備的藥物采 用中藥制劑常規(guī)方法制備成任何可藥用的制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及以龍葵果為原料制備治療腫瘤的藥物，特征在于所述的藥物含有龍葵果，其療效好于龍葵全草。
文檔編號(hào)A61P35/00GK103181985SQ201310065770
公開(kāi)日2013年7月3日 申請(qǐng)日期2013年3月3日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月3日
發(fā)明者蘇靜, 張為勝, 李詩(shī)標(biāo), 孫志芳, 趙建東, 牛鳳菊 申請(qǐng)人:濟(jì)南康眾醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司