專利名稱：一種含胸腺法新的注射用凍干組合物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，特別是涉及胸腺法新的一種注射用凍干組合物及其制備方法。
背景技術：
1965年Goldstein等首先從動物胸腺中分離到有生物活性的多肽，命名為胸腺肽，之后人們對胸腺肽認識不斷深入，并作為人類疾病的一種新的治療方法，特別是免疫缺陷、腫瘤和感染性疾病中的治療，尤其受到人們關注。目前從胸腺分離出來并稱為胸腺激素的多肽已有很多，其中認識得最清楚之一的是胸腺素第5組分(TF5)。動物實驗和人體試驗表明，TF5可以糾正許多因胸腺功能所致的免疫缺陷，還用于治療病毒性、感染性疾病，在腫瘤治療中加用TF5可以增強治療的效果。TF5的主要活性成分是胸腺肽a I (Thymosin α 1，Tal);胸腺肽α I也成為胸腺法新(Thymalfasin)。胸腺法新是由28個氨基酸組成的多肽，其N末端絲氨酸被乙?；?；其結構式為AC-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-1le-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH ;分子式為 C129H215N33O55 ;分子量為 3108。胸腺法新在病毒性疾病治`療中已被廣泛使用，目前在乙型肝炎、丙型肝炎的治療上有著良好的效果。胸腺法新還作為艾滋病重要治療方法——雞尾酒方案的組成成分，在HIV的治療領域起著重要的作用。胸腺法新作為免疫調節(jié)劑應用于腫瘤免疫治療的作用也越來越多的受到人們的關注，臨床上已用于許多腫瘤的治療，如非小細胞肺癌、惡性黑色素細胞瘤、肝癌、非霍杰金淋巴瘤及其他腫瘤。胸腺法新作為疫苗佐劑，對免疫系統功能受損或抑制者，包括接受慢性血液透析和老年病患者，可增強患者對病毒性疫苗，例如流感疫苗或乙肝疫苗的免疫應答。目前市售的商品名為日達仙(Zadaxin)的注射用胸腺法新為皮下注射制劑，其組成為每瓶含胸腺法新1.6mg、甘露醇50mg，并用磷酸鈉緩沖液調pH值至6.85。公開號為CN1840177A的中國專利申請公開了一種胸腺法新的小容量注射液，注射液的PH為5.(Γ7.5。注射液的組成包括0.029Γ約1.0%(w/v)胸腺法新、約0.029Γ約
5.0%(w/v)緩沖劑(如磷酸氫二鈉緩沖劑)、約(λ 59Γ約5.0%(w/v)等滲調節(jié)劑(如甘露醇)、約0.19Γ約5.0%(w/v)穩(wěn)定劑(如甘氨酸)、防腐劑(如間甲酚)。公開號為CN102813632A的中國專利申請公開了一種胸腺法新的凍干粉，所述凍干粉由下述溶液冷凍干燥獲得:0.lmg/mL^lOmg/mL胸腺法新、10mg/mL"l00mg/mL甘露醇、磷酸鹽緩沖溶液調節(jié)PH至6.6^7.2。公開號為CN102441160A的中國專利申請公開了一種胸腺法新注射制劑。同時公開了賦形劑對制劑穩(wěn)定性的影響，其公開的內容表明兩種填充糖組合物優(yōu)于一種填充糖，具體為:山梨醇+乳糖 > 山梨醇+甘露醇 > 山梨醇+蔗糖 > 山梨醇 > 甘露醇 > 蔗糖。公開號為CN102247319A的中國專利申請公開了一種含有胸腺法新的藥物組合物，其組成為胸腺法新、甘露醇、山梨醇的重量比為16:25 75:25 75，并使用0.0lM醋酸-醋酸鈉緩沖溶液調節(jié)PH值至3.8^4.2。目前對于胸腺法新凍干粉制劑穩(wěn)定性的研究多是針對其中的賦形劑、或者是pH調節(jié)劑的選擇，雖然取得了一定的成果，但是其穩(wěn)定性仍然不能滿足注射劑在長期放置后穩(wěn)定性的要求，從而造成注射劑的保存周期縮短，臨床用藥存在安全隱患
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提高胸腺法新的凍干粉制劑的穩(wěn)定性，為了達到這一目的，本發(fā)明提供了一種新的含胸腺法新的注射用凍干組合物及其制備方法，同時本發(fā)明還提供了一種更簡便、節(jié)能并易于工業(yè)化生產的凍干工藝。本發(fā)明提供了一種含胸腺法新的注射用凍干組合物，由胸腺法新、賦形劑、pH緩沖劑組成；所述組合物的制備方法為:
步驟(I):將賦形劑、PH緩沖劑溶解于水中，通過活性炭過濾，得第一濾液。其中優(yōu)選地步驟(I)中水的添加量以體積計算為配液總體積的6(Γ80%。步驟(2):在4 25°C的條件下，將胸腺法新加入第一濾液或第一濾液與水的混合液，攪拌，溶解。優(yōu)選地，步驟(2)中所述第一濾液或第一濾液與水的混合溶液以體積計算為配液總體積的80 90%。步驟(3):向步驟(2)所得溶液中加水至配液總體積，微孔濾膜除菌過濾得第二濾液。優(yōu)選地所述微孔濾膜為0.22 μ m微孔濾膜。步驟(4):將第二濾液分裝于藥用容器中，冷凍干燥，得含胸腺法新的注射用凍干組合物。其中，優(yōu)選的藥用容器為西林瓶。賦形劑可以選自糖和多元醇，包括但不限于蔗糖、海藻糖、甘油、甘露醇、山梨醇；優(yōu)選地為甘露醇。優(yōu)選地pH緩沖劑選自檸檬酸和檸檬酸鈉的組合、醋酸和醋酸鈉的組合、磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的組合中的一種；更優(yōu)選地為為磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉的組合。進一步優(yōu)選地步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為1.5^2.5mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.5 1.7mg胸腺法新、47 53mg甘露醇、0.69 0.73mg磷酸氫二鈉、0.58 0.62mg磷酸二氫鈉。最優(yōu)選地步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為2mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.6mg胸腺法新、50mg甘露醇、0.71mg磷酸氫二鈉、0.6mg磷酸二氫鈉。所述磷酸氫二鈉的質量按照Na2HPO4計算，所述磷酸二氫鈉的質量按照NaH2PO4計算。同時，本發(fā)明還公開了一種優(yōu)選的冷凍干燥的方法為:(a)將制品溫度降低至零下40°C或以下，保溫f 3小時；(b)將制品所處壓力降至20Pa或以下，加熱，對制品進行升華干燥，整個升華過程中控制壓力不高于30Pa ； (c)當制品溫度升至23 27°C，壓力在IOPa或以下，保持該溫度繼續(xù)干燥4 6小時即得所述注射用凍干組合物。本發(fā)明同時提供了一種含胸腺法新的注射用制劑的制備方法:步驟(I):將賦形劑、PH緩沖劑溶解于水中，通過活性炭過濾，得第一濾液。優(yōu)選地步驟(I)中水的添加量以體積計算為配液總體積的6(Γ80%。步驟(2):在4 25°C的條件下，將胸腺法新加入第一濾液或第一濾液與水的混合溶液，攪拌，溶解。優(yōu)選地步驟(2)中所述第一濾液或第一濾液與水的混合液的量以體積計算為配液總體積的80 90%。步驟(3):向步驟(2)所得溶液中加水至配液總體積，微孔濾膜除菌過濾得第二濾液。優(yōu)選地所述微孔濾膜為0.22 μ m微孔濾膜。步驟(4):將第二濾液分裝于藥用容器中，冷凍干燥，得含胸腺法新的注射用凍干組合物。優(yōu)選藥用容器為西林瓶。賦形劑可以選自糖和多元醇，包括但不限于蔗糖、海藻糖、甘油、甘露醇、山梨醇；優(yōu)選地為甘露醇。優(yōu)選地pH緩沖劑選自檸檬酸和檸檬酸鈉的組合、醋酸和醋酸鈉的組合、磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的組合中的一種；更優(yōu)選地為為磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉的組合。同時，本發(fā)明公開了優(yōu)選的添加量為:步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為1.5^2.5mL,每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.5^1.7mg胸腺法新、47 53mg甘露醇、0.69 0.73mg磷酸氫二鈉、0.58 0.62mg磷酸二氫鈉。最優(yōu)選地，在步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為2mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.6mg胸腺法新、50mg甘露醇、0.7Img磷酸氫二鈉、0.6mg磷酸二氫鈉。所述磷酸氫二鈉的質量按照Na2HPO4計算,所述磷酸二氫鈉的質量按照NaH2PO4計算。優(yōu)選地步驟(4)中所述冷凍干燥的方法為:(a)將制品溫度降低至零下40°C或以下，保溫廣3小時；(b)將制品所處壓力降至20Pa或以下，加熱，對制品進行升華干燥，整個升華過程中控制壓力不高于30Pa; (c)當制品溫度升至23 27°C，壓力在IOPa或以下，保持該溫度繼續(xù)干燥4 6小時即得所述注射用制劑。本發(fā)明還提供了所述含胸腺法新的注射用凍干組合物在制備治療乙型肝炎、丙型肝炎藥物中的應用，以及在制備用于艾滋病治療藥物中的應用，同時還公開了所述含胸腺法新的注射用凍干組合物在制備用于腫瘤免疫治療藥物，以及作為疫苗佐劑中的應用。本發(fā)明中所述藥用容器優(yōu)選為帶有彈性塞和卷邊鋁制蓋的琥珀色或無色的玻璃藥瓶或任何適用于即時使用系統的琥珀色或無色容器。包括但不限于安瓿或西林瓶；優(yōu)選為西林瓶。本發(fā)明的有益效果在于:
本發(fā)明通過改變含胸腺法新的注射用凍干組合物的制備流程，先將賦形劑與pH調節(jié)劑溶于水中，再將所得輔料溶液控制在較低溫度下，使得胸腺法新在合適的溫度與PH下攪拌溶解，從而得到具有較高穩(wěn)定性和較高質量可靠性的胸腺法新的注射用凍干組合物。同時避免了輔料與胸腺法新在同時溶解配液的過程中，局部短時出現PH調節(jié)劑濃度過高的情況。利用本發(fā)明所公開的制備方法 ，操作和后處理更加簡便，整個制備過程能量消耗少，有利于凍干工藝的工業(yè)化；同時通過本發(fā)明所獲得的含胸腺法新的注射用凍干組合物殘留水分少，穩(wěn)定度高，保存周期長。
具體實施例以下實施例是為了對本發(fā)明做進一步的說明，而不是對本發(fā)明的限制。以下所用試劑、藥品非特殊說明外，均為市售產品。實施例1
稱取甘露醇50g、磷酸氫二鈉(以Na2HPO4計)0.71g、磷酸二氫鈉(以NaH2PO4計)0.6g加入輔料罐中，加入1200mL注射用水，攪拌溶解。加入潤濕處理好的活性炭，攪拌吸附20分鐘后，關閉攪拌，以潔凈壓縮空氣為動力，將溶液通過鈦棒，脫炭，至配液罐中，并用注射用水沖洗輔料，得到第一濾液。向配料罐中加注射用水至1800mL，控制水溫在25°C以下，攪拌，檢測溶液pH為6.Γ7.2后，將1.6g胸腺法新緩慢加入配料罐中，攪拌溶解。檢測溶液pH為6.Cl.2后，繼續(xù)加注射用水至2000mL，攪拌5 15分鐘后，將藥液經0.22 μ m微孔濾膜除菌過濾，得第二濾液，濾液分裝于西林瓶中，每瓶2mL。凍干過程:對制品制冷，待制品溫度達零下40°C以后，保溫2小時。確定冷凝器溫度達零下45°C以下，開啟真空泵，確認前箱真空在20Pa以下，開啟電加熱，對制品進行升華干燥，在整個升華過程中真空度應控制在30Pa以內，冷凝器溫度不高于零下40°C，制品溫度應平緩均勻上升。當制品溫度達25 土 2°C，真空度在IOPa以內，即表示升華干燥階段已結束。保持該溫度繼續(xù)干燥4 6小時后 ，壓緊膠塞，放入過濾后無菌空氣出箱，軋蓋。實施例2
稱取甘露醇50g、磷酸氫二鈉(以Na2HPO4計)0.71g、磷酸二氫鈉(以NaH2PO4計)0.6g加入輔料罐中，加入IOOOmL注射用水，攪拌溶解。加入潤濕處理好的活性炭,攪拌吸附20分鐘后，關閉攪拌，以潔凈壓縮空氣為動力，將溶液通過鈦棒，脫炭，至配液罐中，并用注射用水沖洗輔料，得第一濾液。向配料罐中加注射用水至1300mL，控制水溫在25°C以下，攪拌，將1.6g胸腺法新緩慢加入配料罐中，攪拌溶解。繼續(xù)加注射用水至1500mL，繼續(xù)攪拌5 15分鐘后，將藥液經0.22 μ m微孔濾膜除菌過濾，得第二濾液，將濾液分裝于西林瓶中，每瓶1.5mL0凍干過程:與實施例1相同。實施例3
稱取甘露醇50g、磷酸氫二鈉(以Na2HPO4計)0.71g、磷酸二氫鈉(以NaH2PO4計)0.6g加入輔料罐中，加入2200mL注射用水，攪拌溶解。加入潤濕處理好的活性炭，攪拌吸附20分鐘后，關閉攪拌，以潔凈壓縮空氣為動力，將溶液通過鈦棒，脫炭，至配液罐中，并用注射用水沖洗輔料，得第一濾液?？刂扑疁卦?5°C以下，攪拌，將1.6g胸腺法新緩緩加入配料罐中，攪拌溶解。繼續(xù)加注射用水至2500mL，繼續(xù)攪拌5 15分鐘后，將藥液經0.22 μ m微孔濾膜除菌過濾，濾液分裝于西林瓶中，每瓶2.5mL。凍干過程:與實施例1相同。對照例I
稱取胸腺法新1.6g、甘露醇50g、磷酸氫二鈉(以Na2HPO4計)0.71g、磷酸二氫鈉(以NaH2PO4計)0.6g加入配液罐中，加入1800mL注射用水，攪拌溶解。加入潤濕處理好的活性炭，攪拌吸附20分鐘后，關閉攪拌，以潔凈壓縮空氣為動力，將溶液通過鈦棒，脫炭，至配液罐中，并用注射用水沖洗輔料。檢測溶液PH為6.0.2后，加注射用水至2000mL，繼續(xù)攪拌5^15分鐘后，將藥液經0.22 μ m微孔濾膜除菌過濾，濾液分裝于西林瓶中，每瓶2mL。 凍干過程:與實施例1相同。對照例2
溶液的配制過程與實施例1相同。凍干過程:對制品制冷，待制品溫度達零下40°C以后，保溫2小時。確定冷凝器溫度達零下45°C以下，開啟真空泵，確認前箱真空在20Pa以下，開啟電加熱，使制品以3°C /小時的速率升溫，至溫度升至共熔點以下約7°C時，停止升溫，保溫I小時，然后繼續(xù)以5°C /小時對制品進行升溫。當制品溫度達約30°C，保持該溫度繼續(xù)干燥4 6小時后，壓緊膠塞，放入過濾后無菌空氣出箱，軋蓋。實施例4
分別取實施例1、對照例I和對照例2獲得的產品進行殘留水分的測定。測定方法:按照2010年版中國藥典二部附錄珊M第一法測定產品殘留水分。測定結果:實施例1、對照例I和對照例2獲得的產品殘留的水分分別為0.8%、
1.5% 和 2.9%ο實施例5
對實施例1、對照例1、對照例2中獲得產品在溫度為25±2°C，相對濕度為60%±5%的恒溫恒濕條件下進行為期3個月的穩(wěn)定性考察。結果見表I。表I
時間t月！ρη.總雜旗％ 含m
O ~ ea1,3 — 9S.9
實施例1I&7 ~ 15m2
B6,82.19&0
O6.62.497.9
對照例往52.S97.4
__I__m_____
Q6,71.89S.5 對照例 I I m ~ 2.3 97.9 _ 3 &8 3.0 細
*注:每瓶凍干產品溶于5mL純水中測量。
權利要求
1.一種含胸腺法新的注射用凍干組合物，其特征在于注射用凍干組合物由胸腺法新、賦形劑、PH緩沖劑組成；所述注射用凍干組合物的制備方法為: (1)將賦形劑、PH緩沖劑溶解于水中，通過活性炭過濾，得第一濾液； (2)在4 25°C的條件下，將胸腺法新加入第一濾液或第一濾液與水的混合溶液，攪拌，溶解； (3)向步驟(2)所得溶液中加水至配液總體積，微孔濾膜除菌過濾得第二濾液； (4)將第二濾液分裝于藥用容器中，冷凍干燥，得含胸腺法新的注射用凍干組合物。
2.根據權利要求1所述的注射用凍干組合物，其特征在于獨立地選自以下任一條件: (a)所述賦形劑為甘露醇； (b)所述pH緩沖劑為磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉的組合物； (c)步驟(I)中水的添加量以體積計算為配液總體積的6(Γ80%; (d)步驟(2)第一濾液或第一濾液與水的混合溶液以體積計算為配液總體積的80^90% ； (e)步驟(3)中所述微孔濾膜為0.2 2 μ m微孔濾膜； (f)所述藥用容器為西林瓶。
3.根據權利要求2所述的注射用凍干組合物，其特征在于:所述步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為1.5^2.5mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.5^1.7mg胸腺法新、47 53mg甘露醇、0.69 0.73mg磷酸氫二鈉、0.58 0.62mg磷酸二氫鈉；所述磷酸氫二鈉的質量按照Na2HPO4計算，所述磷酸二氫鈉的質量按照NaH2PO4計算。
4.根據權利要求2所述的注射用凍干組合物，其特征在于:所述步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為2mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.6mg胸腺法新、50mg甘露醇、0.7Img磷酸氫二鈉、0.6mg磷酸二氫鈉；所述磷酸氫二鈉的質量按照Na2HPO4計算，所述磷酸二氫鈉的質量按照NaH2PO4計算。
5.根據權利要求1所述的注射用凍干組合物，其特征在于，所述步驟(4)中冷凍干燥的方法如下: (a)將制品溫度降低至零下40°C或以下，保溫f3小時； (b)將制品所處壓力降至20Pa或以下，加熱，對制品進行升華干燥，整個升華過程中控制壓力不高于30Pa ； (c)當制品溫度升至23 27°C，壓力在IOPa或以下，保持該溫度繼續(xù)干燥4 6小時即得所述藥物組合物。
6.一種如權利要求1至5中任意一項所述的含胸腺法新的注射用凍干組合物的制備方法，其特征是包括以下步驟: (1)將賦形劑、PH緩沖劑溶解于水中，活性炭過濾，得第一濾液； (2)在4 25°C的條件下，將胸腺法新加入第一濾液或第一濾液與水的混合溶液，攪拌，溶解； (3)向步驟(2)所得溶液中加水至配液總體積，微孔濾膜除菌過濾得第二濾液； (4)將第二濾液分裝于藥用容器中，冷凍干燥，得含胸腺法新的注射用凍干組合物。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于任意獨立地選自以下任一條件: (a)所述賦形劑為甘露醇；(b)所述pH緩沖劑為磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉的組合； (c)步驟(I)中水的添加量以體積計算為配液總體積的6(Γ80%; (d)步驟(2)中所述第一濾液或第一濾液與水的混合溶液以體積計算為配液總體積的80^90% ； (e)步驟(3)中所述微孔濾膜為0.22 μ m微孔濾膜； (f)所述藥用容器為西 林瓶。
8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于:步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為1.5^2.5mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.5^1.7mg胸腺法新、47 53mg甘露醇、0.69 0.73mg磷酸氫二鈉、0.58 0.62mg磷酸二氫鈉；所述磷酸氫二鈉的質量按照Na2HPO4計算，所述磷酸二氫鈉的質量按照NaH2PO4計算。
9.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于:步驟(4)中每一藥用容器中分裝的第二濾液的量為2mL，每一藥用容器中分裝的第二濾液含1.6mg胸腺法新、50mg甘露醇、0.7 Img磷酸氫二鈉、0.6mg磷酸二氫鈉；所述磷酸氫二鈉的質量按照Na2HPO4計算，所述磷酸二氫鈉的質量按照NaH2PO4計算。
10.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述冷凍干燥的具體方法為: (a)將制品溫度降低至零下40V或以下，保溫f3小時； (b)將制品所處壓力降至20Pa或以下，加熱，對制品進行升華干燥，整個升華過程中控制壓力不高于30Pa ； (c)當制品溫度升至23 27°C，壓力在IOPa或以下，保持該溫度繼續(xù)干燥4 6小時即得所述注射用制劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，特別是涉及含胸腺法新的注射用凍干組合物及其制備方法。通過改變含胸腺法新的注射用凍干組合物的制備流程，先從而得到具有較高穩(wěn)定性和較高質量可靠性的胸腺法新的注射用凍干組合物。同時避免了輔料與胸腺法新在同時溶解配液的過程中，局部短時出現pH調節(jié)劑濃度過高的情況。本發(fā)明提供的胸腺法新注射用凍干組合物具有質量可靠性高、易于工業(yè)化生產、節(jié)能等優(yōu)點。
文檔編號A61P31/18GK103142514SQ20131009893
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月26日 優(yōu)先權日2013年3月26日
發(fā)明者陳慶財, 蔡繼蘭, 趙硯榮, 楊奇珍 申請人:江蘇奧賽康藥業(yè)股份有限公司