專利名稱：峨眉雙蝴蝶提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物的制備方法，具體指從蛾眉雙蝴蝶中提取口山酮和皂甙類化合物等有效成分的方法。
背景技術(shù)：
蛾眉雙蝴蝶為多年生纏繞草本，屬龍膽科、雙蝴蝶屬，主要分布于海拔700-3200米的山坡林下、林緣、灌木叢中及低山河谷，我國(guó)的云南、四川、陜西、湖北、貴州、湖南等地資源較多。蛾眉雙蝴蝶以全草入藥，有清熱解毒、抗高血壓、抗血液外溢等活性，常用于治療淋巴腺炎、無(wú)名腫毒、乳癰、蛇毒和蜂毒等。蛾眉雙蝴蝶入藥的主要活性成分為口山酮類化合物和皂甙類化合物，這兩類化合物的水溶性和熱穩(wěn)定性均不是很好，而蛾眉雙蝴蝶入藥通常是通過(guò)水煎后外敷或內(nèi)服，水煎過(guò)程由于經(jīng)過(guò)高溫水煮，往往破壞較多活性成分，同時(shí)也存在藥材中很多有效成分提取不完全的弊病，藥效因此大打折扣。因此，開發(fā)蛾眉雙蝴蝶中口山酮和皂甙類化合物等有效成分的提取技術(shù)，對(duì)于提高蛾眉雙蝴蝶藥材的利用度，開拓 蛾眉雙蝴蝶提取物市場(chǎng)，促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化都具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述從蛾眉雙蝴蝶中提取有效成分的現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量的科學(xué)實(shí)踐，終于發(fā)明出一種提高了原料藥材的利用度、低能耗、低成本、操作簡(jiǎn)便且收率高的從蛾眉雙蝴蝶中提取口山酮和皂甙類化合物等有效成分的生產(chǎn)方法。本發(fā)明包括以下幾個(gè)步驟:
(I)原料藥材的處理。將干凈、干燥的蛾眉雙蝴蝶藥材粉碎后,加入4 一 15倍量的酶解液在35 - 55度的溫度下酶解2 - 8小時(shí)后過(guò)濾，備用。(100克藥材加入400 — 1500毫升酶解液)酶解液制備方法為:將I 一 15克植物提取酶溶于500ml pH值為4 一 7的緩沖液中即得。植物提取酶中纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)占60 — 80%，其余為果膠酶。用酶處理后可破壞植物細(xì)胞壁，提高口山酮和皂甙類化合物等有效成分的提取率。(2)蛾眉雙蝴蝶口山酮和皂甙類化合物等有效成分的提取。往過(guò)濾后的蛾眉雙蝴蝶藥材中加入3 - 12倍量濃度為60 - 95%的乙醇(100克藥材加入300 — 1200毫升濃度為60 — 95%的乙醇)，進(jìn)行索式提取I 一 5小時(shí)，提取完后再用3 - 12倍量的飲用水索式提取I 一 5小時(shí)，將兩次提取液和酶解液一起合并，真空濃縮回收酒精并繼續(xù)濃縮至膏狀，最后冷凍干燥得蛾眉雙蝴蝶提取物。兩次索式提取過(guò)程中均用超聲波輔助提取，利用超聲波的空化效應(yīng)縮短提取時(shí)間和提聞?dòng)行С煞值奶崛÷?。利用本發(fā)明得到的蛾眉雙蝴蝶提取物，其中口山酮類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5 -20%、皂甙類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 - 30%。蛾眉雙蝴蝶提取物廣泛應(yīng)用于原料藥、醫(yī)藥中間體和保健食品領(lǐng)域，市場(chǎng)前景廣闊。
本發(fā)明的特點(diǎn)是將植物提取酶應(yīng)用于蛾眉雙蝴蝶提取物領(lǐng)域，利用纖維素酶和果膠酶的復(fù)合體系破壞植物細(xì)胞壁，增加有效成分的溶出，再配以超聲波輔助萃取和索式提取技術(shù)，較之現(xiàn)有技術(shù)(直接用水煎)，不僅提高了原料藥材的利用度，還提高了口山酮和皂甙類化合物的收率(較水煎法提高30 - 50%)，具有提取時(shí)間短、效率高的特點(diǎn)，用酶處理后的提取液具有容易過(guò)濾的特點(diǎn)，降低了能耗、節(jié)省了成本，保證提取物的質(zhì)量更好。
具體實(shí)施例方式以下對(duì)蛾眉雙蝴蝶提取物的具體制備方法進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1: 1、將干凈、干燥的蛾眉雙蝴蝶藥材粉碎后，加入4.5倍量的酶解液在45度的溫度下酶解3小時(shí)后過(guò)濾，備用。酶解液制備方法為:將3克植物提取酶溶于500ml pH值為5.4的緩沖液中即得。植物提取酶中纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)占62%，其余為果膠酶。2、往過(guò)濾后的蛾眉雙蝴蝶藥材中加入5倍量濃度為75%的乙醇進(jìn)行索式提取2小時(shí)，提取完后再用5倍量的飲用水索式提取2.5小時(shí)，將兩次提取液和酶解液一起合并，真空濃縮回收酒精并繼續(xù)濃縮至膏狀，最后冷凍干燥得蛾眉雙蝴蝶提取物。利用本發(fā)明得到的蛾眉雙蝴蝶提取物，其中口山酮類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.6%、皂甙類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14.3%。實(shí)施例2
1、將干凈、干燥的蛾眉雙蝴蝶藥材粉碎后，加入10倍量的酶解液在48度的溫度下酶解6小時(shí)后過(guò)濾，備用。酶解液制備方法為:將11克植物提取酶溶于500ml pH值為6.3的緩沖液中即得。植物提取酶中纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)占72%，其余為果膠酶。2、往過(guò)濾后的蛾眉雙蝴蝶藥材中加入9倍量濃度為95%的乙醇進(jìn)行索式提取4.5小時(shí)，提取完后再用8倍量的飲用水索式提取4小時(shí)，將兩次提取液和酶解液一起合并，真空濃縮回收酒精并繼續(xù)濃縮至膏狀，最后冷凍干燥得蛾眉雙蝴蝶提取物。利用本發(fā)明得到的蛾眉雙蝴蝶提取物，其中口山酮類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10.7%、皂甙類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為21.6%。實(shí)施例3
1、將干凈、干燥的蛾眉雙蝴蝶藥材粉碎后，加入8倍量的酶解液在50度的溫度下酶解4小時(shí)后過(guò)濾，備用。酶解液制備方法為:將7克植物提取酶溶于500ml pH值為4.8的緩沖液中即得。植物提取酶中纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)占70%，其余為果膠酶。2、往過(guò)濾后的蛾眉雙蝴蝶藥材中加入8倍量濃度為90%的乙醇在超聲波輔助下進(jìn)行索式提取3小時(shí)，提取完后再用6倍量的飲用水在超聲波輔助下索式提取3.5小時(shí)，將兩次提取液和酶解液一起合并，真空濃縮回收酒精并繼續(xù)濃縮至膏狀，最后冷凍干燥得蛾眉雙蝴蝶提取物。利用本發(fā)明得到的蛾眉雙蝴蝶提取物，其中口山酮類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14.5%、皂甙類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為22.9%。實(shí)施例4
1、將干凈、干燥的蛾眉雙蝴蝶藥材粉碎后，加入14倍量的酶解液在52度的溫度下酶解7小時(shí)后過(guò)濾，備用。酶解液制備方法為:將14克植物提取酶溶于500ml pH值為5.6的緩沖液中即得。植物提取酶中纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)占78%，其余為果膠酶。2、往過(guò)濾后的蛾眉雙蝴蝶藥材中加入11倍量濃度為85%的乙醇在超聲波輔助下進(jìn)行索式提取2.5小時(shí)，提取完后再用11倍量的飲用水在超聲波輔助下索式提取2小時(shí)，將兩次提取液和酶解液一起合并，真空濃縮回收酒精并繼續(xù)濃縮至膏狀，最后冷凍干燥得蛾眉雙蝴蝶提取物。利用本發(fā)明得到的蛾眉雙蝴蝶提取物，其中口山酮類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為17.4%、皂甙類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 26.2%。
權(quán)利要求
1.一種制備蛾眉雙蝴蝶提取物的方法，其特征在于包括以下幾個(gè)步驟: (1)原料藥材的處理,將干凈、干燥的蛾眉雙蝴蝶藥材粉碎后,加入4-15倍量的酶解液在35 - 55度的溫度下酶解2 - 8小時(shí)后過(guò)濾，備用，酶解液制備方法為:將I 一 15克植物提取酶溶于500ml pH值為4 一 7的緩沖液中即得； (2)蛾眉雙蝴蝶口山酮和皂甙類化合物等有效成分的提取，往過(guò)濾后的蛾眉雙蝴蝶藥材中加入3 - 12倍量濃度為60 - 95%的乙醇，進(jìn)行索式提取I 一 5小時(shí)，提取完后再用3 - 12倍量的飲用水索式提取I 一 5小時(shí)，將兩次提取液和酶解液一起合并，真空濃縮回收酒精并繼續(xù)濃縮至膏狀，最后冷凍干燥得蛾眉雙蝴蝶提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛾眉雙蝴蝶提取物的制備方法，其特征在于:所述植物提取酶組成為纖維素酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60 - 80%，其余為果膠酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛾眉雙蝴蝶提取物的制備方法，其特征在于:所述蛾眉雙蝴蝶口山酮和皂甙類化合物的索式提取過(guò)程中，使用超聲波輔助提取。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制得的蛾眉雙蝴蝶提取物，其特征在于:蛾眉雙蝴蝶提取物中口山酮類化 合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5 - 20%、皂甙類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 - 30%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種峨眉雙蝴蝶提取物及其制備方法，該方法包括(1)峨眉雙蝴蝶原料藥材的處理，包括對(duì)原料藥材進(jìn)行粉碎和酶解。(2)峨眉雙蝴蝶口山酮和皂甙類化合物的提取，在超聲波輔助下分別用乙醇和飲用水索式提取后，將兩次提取液和酶解液一起合并，回收酒精并濃縮至膏狀，再冷凍干燥即得峨眉雙蝴蝶提取物，其中含口山酮類化合物5－20％、含皂甙類化合物10－30％。本發(fā)明的特點(diǎn)是將植物提取酶應(yīng)用于峨眉雙蝴蝶提取物領(lǐng)域，利用纖維素酶和果膠酶的復(fù)合體系破壞植物細(xì)胞壁，增加有效成分的溶出，再配以超聲波和索式提取技術(shù)，提高原料藥材的利用度，峨眉雙蝴蝶提取物廣泛應(yīng)用于原料藥、醫(yī)藥中間體和保健食品領(lǐng)域，前景廣闊。
文檔編號(hào)A61P15/14GK103142684SQ201310099450
公開日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2013年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月27日
發(fā)明者田宏現(xiàn) 申請(qǐng)人:吉首大學(xué)