專利名稱：用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉防治，尤其是一種防治雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉癥的合生元中藥復(fù)方。
背景技術(shù)：
雞肉是提高國(guó)民生活水平的菜籃子工程的主要指標(biāo)，也是影響物價(jià)波動(dòng)的重要因素。2010年我國(guó)雞肉供需失衡，導(dǎo)致肉價(jià)物價(jià)上漲，引起國(guó)家對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的關(guān)注。養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展關(guān)鍵在雛雞，曾有“養(yǎng)好雛雞大半收”的說(shuō)法，雛雞健壯，肉雞出欄率高。雛雞出生后兩個(gè)星期稱為雛雞期，此時(shí)最易發(fā)生大腸桿菌性腹瀉?；加写竽c桿菌性腹瀉的雛雞瘦小，不肯進(jìn)食，最初拉稀，有傳染性，腸黏膜有卡他性炎癥，腸系膜淋巴結(jié)輕度腫脹，少數(shù)病雞腹腔內(nèi)有少量膠胨樣物質(zhì)，膀胱黏膜輕度出血，不及時(shí)治療雛雞會(huì)死亡。雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉癥“以防為主、防重于治”，但是目前尚無(wú)較好的預(yù)防和治療藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一在于提供以一種中藥組合物，其具有防治雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉癥的功效。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥35-50份、白頭翁3-8份、甘草5-15份、蒲公英8_25份。進(jìn)一步，所述的中藥組合物，由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥45份、白頭翁6份、甘草13份、蒲公英 22份。本發(fā)明的目的之二在于提供以一種合生元組合物及其制劑和含有該制劑的飼料，它們?cè)谒鲋兴幗M合物的基礎(chǔ)上添加合生元元素，協(xié)同防治雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉癥。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:由所述中藥組合物和合生元按照55-90: 5-10的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制劑和寡糖按照3-5: 5-10的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為200-450億個(gè)，所述寡糖為果寡糖、低聚木糖、異麥芽低聚糖和大豆低聚糖中的任一種或多種。進(jìn)一步，所述的合生元組合物，由所述中藥組合物和合生元按照80: 7的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制劑和寡糖按照5: 8的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為400億個(gè)，所述寡糖為大豆低聚糖所述的合生元組合物的制劑。含有所述的合生元組合物的制劑的飼料。進(jìn)一步,所述飼料中含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8-15%的所述合生元組合物的制劑。本發(fā)明的目的之三在于提供合生元組合物的制劑的制備方法，該方法操作簡(jiǎn)單，工藝穩(wěn)定，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:所述的制劑的制備方法，具體包括以下步驟:將雙歧桿菌按培養(yǎng)基體積的4-6%接種，在PH值為6.0-8.0，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24-72小時(shí)，得雙歧桿菌制劑；雙歧桿菌培養(yǎng)基按重量份計(jì)算由以下組分組成:蛋白胨0.1-1.0份，牛肉膏0.1-0.5份，半胱氨酸
0.1-0.2份,氯化鈉0.1-0.5份,葡萄糖1-1.5份,肝粉0.1-0.2份,水介質(zhì)90-99份,滅菌；將配方量的雙歧桿菌制劑和配方量的寡糖充分混合，得所述合生元；將配方量的所述合生元和所述中藥組合物制得的中藥煎煮液混合，得合生元組合物的制劑，所述合生元組合物的制劑中雙歧桿菌的濃度大于等于I X IO7個(gè)/mL。進(jìn)一步，6所述的制備方法中，所述雙歧桿菌制劑具體包括以下步驟:A擴(kuò)大種子菌取斜面上菌種接種入裝有雙歧桿菌培養(yǎng)基的試管內(nèi)，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24小時(shí)，得到一級(jí)種子菌，冷藏保存；B 二級(jí)種子菌的制備將一級(jí)種子菌按雙歧桿菌培養(yǎng)基體積的4-6%的比例，接種到已滅菌并冷卻的雙歧桿菌培養(yǎng)基內(nèi)，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24h，得到二級(jí)種子菌；冷藏保存；將雙歧桿菌培養(yǎng)基倒入微生物發(fā)酵罐內(nèi)，滅菌并冷卻；C發(fā)酵培養(yǎng)將步驟B所得二級(jí)種子菌按已滅菌并冷卻的雙歧桿菌培養(yǎng)基體積的6-8 %的比例接種，攪拌均勻，37 °C恒溫靜置培養(yǎng)48-72h，得培養(yǎng)液；D離心脫水 將步驟C所得培養(yǎng)液冷卻后于3000r/min離心20min，去掉上清液，取菌泥，添加相當(dāng)于菌泥重量1-2倍的填充劑混合均勻，置于40-50°C條件下烘干，得雙歧桿菌制劑。進(jìn)一步，所述的制備方法中:雙歧桿菌培養(yǎng)基配方:蛋白胨0.6份，牛肉膏0.3份，半胱氨酸0.15份，氯化鈉0.5份，葡萄糖1.2份，肝粉0.2份，水介質(zhì)95份。本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明的用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，由瞿麥、白頭翁、甘草、蒲公英制成，采用水煮法獲得藥液再加入合生元而成。在雛雞出殼后兩個(gè)星期內(nèi)，用該藥與飼料混合喂食雛雞，可起到預(yù)防作用；發(fā)病后加大藥量可治療痊愈。其中，瞿麥性滑利，能降陰火，除五淋，利血脈，兼涼藥。白頭翁味苦，性寒；歸胃、大腸經(jīng)，具有清熱解毒，涼血止痢，燥濕殺蟲(chóng)的功效。甘草具有清熱解毒，脘腹等功效。蒲公英具有清熱解毒，消腫散結(jié)的功效。幾位中藥聯(lián)合運(yùn)用，對(duì)治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉有顯著療效療效，且可提高食欲。加入合生元制劑后，具有協(xié)同功能。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的制劑的制備一、稱取寡糖為果寡糖、低聚木糖、異麥芽低聚糖和大豆低聚糖各IOKg備用；二、雙歧桿菌制劑的制備:菌種為凍干保存的雙歧桿菌(Bifidobacterium);雙歧桿菌培養(yǎng)基按重量份計(jì)算由以下組分組成:蛋白胨0.6份，牛肉膏0.3份，半胱氨酸0.15份，氯化鈉0.5份，葡萄糖
1.2份，肝粉0.2份，水介質(zhì)95份，pH6.8，115°C高壓蒸汽滅菌30min ；
①擴(kuò)大種子菌，取斜面上菌種(如一接種環(huán))接種入裝有雙歧桿菌培養(yǎng)基的試管內(nèi)，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24h，得到一級(jí)種子菌，取出冰箱保存，待用；②二級(jí)種子菌的制備:將一級(jí)種子菌按雙歧桿菌培養(yǎng)基的體積的5%的比例，接種到雙歧桿菌菌培養(yǎng)基內(nèi)，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24h，得到二級(jí)種子菌；③生產(chǎn)用的雙歧桿菌培養(yǎng)基的制備:按雙歧桿菌培養(yǎng)基的成份比例稱取各成分加水溶解，倒入微生物發(fā)酵罐內(nèi)，于115°C蒸氣滅菌30分鐘；④接種:待生產(chǎn)用的雙歧桿菌培養(yǎng)基冷至37°C左右，在火焰控制下加入二級(jí)種子菌，按雙歧桿菌培養(yǎng)基體積的6-8%的比例接種，攪拌均勻；⑤培養(yǎng):關(guān)閉所有通氣閥，37 °C恒溫培養(yǎng)60h ；⑥離心脫水:從生物發(fā)酵罐內(nèi)取出培養(yǎng)液，冰箱暫存，待培養(yǎng)液冷卻后于3000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘，去掉上清液，取菌泥加入2倍糠粉混合均勻，裝入磁盤，置于45°C鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘干，按GB4789-2012方法進(jìn)行雙歧桿菌鑒定，并計(jì)算總活菌數(shù)，密封包裝，得雙歧桿菌制劑，在陰涼干燥處避光保存?zhèn)溆?。三用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的制劑的制備I用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物配方用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，簡(jiǎn)稱中藥組合物1:由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥35份、白頭翁3份、甘草15份、蒲公英25份。用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，簡(jiǎn)稱中藥組合物2:由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥50份、白頭翁8份、甘草5份、蒲公英8份。

用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，簡(jiǎn)稱中藥組合物3:由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥45份、白頭翁6份、甘草13份、蒲公英22份。2含有所述的中藥組合物的合生元組合物的配方含有上述中藥組合物I的合生元組合物，簡(jiǎn)稱合生元組合物1:由所述中藥組合物和合生元按照55: 10的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制和寡糖按照3: 10的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為200億個(gè)，所述寡糖為低聚木糖。含有上述中藥組合物2的合生元組合物，簡(jiǎn)稱合生元組合物2:由所述中藥組合物和合生元按照90: 5的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制和寡糖按照1:1的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為450億個(gè)，所述寡糖為果寡糖。含有上述中藥組合物3的合生元組合物，簡(jiǎn)稱合生元組合物3:由所述中藥組合物和合生元按照80: 7的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制劑和寡糖按照5: 8的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為400億個(gè)，所述寡糖為大豆低聚糖。3用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的制劑的制備將實(shí)施例1制備的雙歧桿菌制劑和實(shí)施例3的所述合生元組合物3中配方量的大豆低聚糖充分混合，得所述合生元；將實(shí)施例3的所述合生元組合物3配方量的所述合生元和所述中藥組合物制得的中藥煎煮液混合，得合生元組合物的制劑，所述合生元組合物的制劑中雙歧桿菌的等于I X IO7個(gè)/mL。上述中草藥添加劑中的各組分，詳見(jiàn)《全國(guó)中草藥匯編》(謝宗萬(wàn)主編，人民衛(wèi)生出版社，1996-1052)及《中藥大辭典》(南京中醫(yī)藥大學(xué)編著，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社出版時(shí)間:2006-3-1 第二版。實(shí)施例2用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的制劑的效果一治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的效果在基礎(chǔ)飼料中添加實(shí)施例1制備的合生元組合物的制劑，得含有所述的合生元組合物的制劑的飼料。所述飼料中含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8-15%的所述合生元組合物的制劑均可。1)160只雛雞(每只雛雞獨(dú)立飼養(yǎng))，分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組80只，用上述合生元組合物的制劑280克與2000克基礎(chǔ)飼料混合，喂雛雞7天。對(duì)照組80只，用基礎(chǔ)飼料喂雛雞7天。其中，實(shí)驗(yàn)組雛雞未發(fā)生腸道大腸桿菌性腹瀉；對(duì)照組大腸桿菌性腹瀉的發(fā)生率為為20%。2對(duì)對(duì)照組發(fā)病的20只雛雞按每只每餐IlOg含有所述的合生元組合物的制劑的飼料的標(biāo)準(zhǔn)喂食5天，14只雛雞大腸桿菌性腹瀉治愈，此后不復(fù)發(fā)。雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的診斷參照莊琰《雛雞致病性大腸桿菌病的診斷》一文。二進(jìn)食效果比較160只同齡雛雞，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組80只，用上述合生元組合物的制劑160克與2000克基礎(chǔ)飼料混合，喂雛雞5天。對(duì)照組80只，用基礎(chǔ)飼料喂雛雞5天。

喂食五天完成后，分別記錄喂食完成第2天、第3天和第5天的日進(jìn)食量。日進(jìn)食量的計(jì)算為對(duì)照組或?qū)嶒?yàn)組進(jìn)食總量除以雛雞數(shù)量，即每只雛雞的日平均進(jìn)食量。表I雛雞的日平均進(jìn)食量
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對(duì)照74±3,2 ±δ.Π試驗(yàn)96±6. 98±1.0107±7.1最后說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。
權(quán)利要求
1.用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，其特征在于:由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥35-50份、白頭翁3-8份、甘草5-15份、蒲公英8_25份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于:由以下重量份的干燥藥材組成:瞿麥45份、白頭翁6份、甘草13份、蒲公英22份。
3.含有權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物的合生元組合物，其特征在于:由所述中藥組合物和合生元按照55-90: 5-10的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制劑和寡糖按照3-5: 5-10的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為200-450億個(gè)，所述寡糖為果寡糖、低聚木糖、異麥芽低聚糖和大豆低聚糖中的任一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的合生元組合物，其特征在于:由所述中藥組合物和合生元按照80: 7的重量比配比而成；所述合生元是由雙歧桿菌制劑和寡糖按照5: 8的重量比配比而成，所述每克合生元中含雙歧桿菌活菌數(shù)為400億個(gè)，所述寡糖為大豆低聚糖。
5.權(quán)利要求3所述的合生元組合物的制劑。
6.權(quán)利要求5所述的制劑的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟:將雙歧桿菌按培養(yǎng)基體積的4-6 %接種，在pH值為6.0-8.0，37 °C恒溫靜置培養(yǎng)24-72小時(shí)，得雙歧桿菌制劑；雙歧桿菌培養(yǎng)基按重量份計(jì)算由以下組分組成:蛋白胨0.1-1.0份，牛肉膏0.1-0.5份，半胱氨酸0.1-0.2份，氯化鈉0.1-0.5份，葡萄糖1-1.5份，肝粉0.1-0.2份，水介質(zhì)90-99份，滅菌；將配方量的雙歧桿菌制劑和配方量的寡糖充分混合，得所述合生元；將配方量的所述合生元和所述中藥組合物制得的中藥煎煮液混合，得合生元組合物的制劑，所述合生元組合物的制劑中雙歧桿菌的濃度大于等于I X IO7個(gè)/mL。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述雙歧桿菌制劑具體包括以下步驟: A擴(kuò)大種子菌 取斜面上菌種接種入裝有雙歧桿菌培養(yǎng)基的試管內(nèi)，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24小時(shí)，得到一級(jí)種子菌，冷藏保存； B 二級(jí)種子菌的制備 將一級(jí)種子菌按雙歧桿菌培養(yǎng)基體積的4-6 %的比例，接種到已滅菌并冷卻的雙歧桿菌培養(yǎng)基內(nèi)，37°C恒溫靜置培養(yǎng)24h，得到二級(jí)種子菌；冷藏保存；將雙歧桿菌培養(yǎng)基倒入微生物發(fā)酵罐內(nèi)，滅菌并冷卻； C發(fā)酵培養(yǎng) 將步驟B所得二級(jí)種子菌按已滅菌并冷卻的雙歧桿菌培養(yǎng)基體積的6-8%的比例接種，攪拌均勻，37 °C恒溫靜置培養(yǎng)48-72h，得培養(yǎng)液； D離心脫水 將步驟C所得培養(yǎng)液冷卻后于3000r/min離心20min，去掉上清液，取菌泥，添加相當(dāng)于菌泥重量1-2倍的填充劑混合均勻，置于40-50°C條件下烘干，得雙歧桿菌制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于:雙歧桿菌培養(yǎng)基配方:蛋白胨0.6份，牛肉膏0.3份，半胱氨酸0.15份，氯化鈉0.5份，葡萄糖1.2份，肝粉0.2份，水介質(zhì)95份。
9.含有權(quán)利要求 5所述的合生元組合物的制劑的飼料。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的飼料，其特征在于，所述飼料中含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8-15%的所述合生元 組合物的制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉防治，尤其是一種防治雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉癥的合生元中藥復(fù)方，用于治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉的中藥組合物，由瞿麥、白頭翁、甘草和蒲公英組成；中藥組合物的合生元組合物由所述中藥組合物和合生元按照55-90∶5-10的重量比配比而成；在雛雞出殼后兩個(gè)星期內(nèi)，用該藥與飼料混合喂食雛雞，可起到預(yù)防作用；發(fā)病后加大藥量可治療痊愈；幾位中藥聯(lián)合運(yùn)用，對(duì)治療雛雞腸道大腸桿菌性腹瀉有顯著療效療效，且可提高食欲；加入合生元制劑后，具有協(xié)同功能。
文檔編號(hào)A61K36/71GK103191207SQ20131010834
公開(kāi)日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月29日
發(fā)明者楊金龍, 劉作華, 黃勇, 張素輝, 殷素會(huì), 周俊 申請(qǐng)人:重慶市畜牧科學(xué)院, 楊晶旭