一種核殼結(jié)構(gòu)的生物粘附微球及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種殼核雙層結(jié)構(gòu)的生物粘附微球及其制備方法，以左金丸總生物堿為模型藥物，殼聚糖、海藻酸鈉、明膠等天然高分子聚合物作為載體材料，構(gòu)建具有生物黏附性的智能水凝膠藥物釋放系統(tǒng)。本發(fā)明的核殼結(jié)構(gòu)的生物粘附微球延長(zhǎng)了藥物的胃內(nèi)滯留時(shí)間，增加藥物吸收，改善口服用藥治療胃潰瘍的生物利用度。為古方賦予現(xiàn)代研究方法，開(kāi)發(fā)出更合理有效的抗胃潰瘍藥物新劑型。本發(fā)明還闡明了此微球的體外藥物釋放性能及其體外生物粘附作用。
【專利說(shuō)明】一種核殼結(jié)構(gòu)的生物粘附微球及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種殼核雙層結(jié)構(gòu)的左金丸總生物堿生物粘附微球，其制備方法、藥物處方抗炎作用研究以及其藥劑學(xué)研究。

【背景技術(shù)】
[0002]左金丸是出于朱丹溪《丹溪心法.火六》的名方，用于肝經(jīng)火旺所致之脅肋脹痛，嘔吐吞酸、噯氣口干，舌紅苔黃，脈象弦數(shù)等癥，有清瀉肝火，降逆止嘔之功。左金丸原方由黃連六兩(用姜汁炒)和吳茱萸一兩(或半兩，用鹽水泡)組成，共為末，做成水丸或蒸餅為丸，白湯服下。現(xiàn)代常取末，以水泛為丸，每次服3g ;或按原比例入湯劑服用。
[0003]左金丸中的有效成分為生物堿，其中主要成分是鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀、藥根堿、吳茱萸堿和吳茱萸次堿。左金丸對(duì)于消化系統(tǒng)具有廣泛的藥理作用，并且可以抗炎、抑菌及鎮(zhèn)痛，其制劑廣泛應(yīng)用于臨床。消化性潰瘍屬中醫(yī)“胃脘痛”、“腹脹”、“痞滿”的范疇，這些正好符合左金丸的傳統(tǒng)適應(yīng)癥；并且通過(guò)現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明左金丸能夠通過(guò)抑制幽門螺桿菌、調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子分泌、減少胃酸分泌、保護(hù)胃粘膜等途徑有效地治療消化性潰瘍；還能通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對(duì)抗應(yīng)激性潰瘍。
[0004]左金丸古方以丸劑入藥，“丸藥以舒緩為治”，“丸者緩也”。丸劑服用后在胃腸道崩解緩慢，逐漸釋放藥物，作用持久，但是研究發(fā)現(xiàn)大多數(shù)口服藥物主要在小腸中上部十二指腸至回腸遠(yuǎn)端的無(wú)菌部位吸收，藥物通過(guò)無(wú)菌部位后，將被逐漸增多的細(xì)菌所分解，進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，只有代謝物和極少量藥物被吸收。釋放的藥物以溶液狀態(tài)到達(dá)無(wú)菌部位的量越大，吸收就越多，滯留時(shí)間越長(zhǎng)，吸收時(shí)間也愈長(zhǎng)。藥物通過(guò)無(wú)菌部位的最短時(shí)間即藥物吸收的最短時(shí)間，約為一小時(shí)。因此在消化性潰瘍口服給藥治療中，常用的藥物劑型遇到了挑戰(zhàn)，片劑、膠囊劑等劑型給藥對(duì)幽門螺桿菌的根滅率很低。為延長(zhǎng)藥物的胃內(nèi)滯留時(shí)間，增加藥物吸收，改善口服用藥治療胃潰瘍的生物利用度，胃內(nèi)滯留漂浮型給藥系統(tǒng)和胃腸道生物黏附給藥系統(tǒng)，是近年來(lái)治療消化道系統(tǒng)疾病研究的熱點(diǎn)。
[0005]胃腸道生物黏附給藥系統(tǒng)是利用高分子輔料的生物黏附特性，緊密附著在胃、腸粘膜層/上皮細(xì)胞表面，延長(zhǎng)藥物制劑在胃腸道的停留時(shí)間，增加藥物與胃腸粘膜的接觸及對(duì)胃腸道上皮細(xì)胞的穿透力，從而促進(jìn)藥物吸收，提高藥物的生物利用度。
[0006]殼聚糖是天然多糖中唯一的堿性多糖，是甲殼素的脫乙?；a(chǎn)物，又稱脫乙酰甲殼素、甲殼胺，它的來(lái)源廣泛，性質(zhì)穩(wěn)定。殼聚糖的結(jié)構(gòu)中包含葡糖胺和N-乙酰基葡糖胺，由甲殼質(zhì)經(jīng)脫乙酰反應(yīng)得到。殼聚糖及其分解產(chǎn)物無(wú)毒性，具有生物相容性和生物可降解性，有抗菌消炎、促進(jìn)傷口愈合、抗酸、抗?jié)?、降血脂和降膽固醇等多種作用。水凝膠是具有親水性但不溶于水的聚合物，它們?cè)谒锌扇苊浿烈黄胶怏w積仍能保持聚合物的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。殼聚糖基材料屬于陽(yáng)離子型PH-敏感性水凝膠，其pH敏感性主要來(lái)自于氨基的質(zhì)子化，氨基越多，水凝膠水化作用越強(qiáng)；在PH值較低時(shí)，由于氨基(-NH3+)的質(zhì)子化作用，使得其分子結(jié)構(gòu)中主要帶陽(yáng)離子，易粘附于胃粘膜表面。
[0007]選用殼聚糖等天然高分子聚合物作為載體材料，構(gòu)建具有生物黏附性的智能水凝膠藥物釋放系統(tǒng)。為古方賦予現(xiàn)代研究方法，開(kāi)發(fā)出更合理有效的抗胃潰瘍藥物新劑型奠定基礎(chǔ)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有藥物左金丸的技術(shù)難題，提供一種殼核雙層結(jié)構(gòu)的左金丸生物粘附微球的制備方法及由該方法制備的左金丸生物粘附微球，本發(fā)明方法制備的左金丸生物粘附微球，延長(zhǎng)藥物左金丸在胃內(nèi)滯留時(shí)間，增加藥物吸收，提高了其生物利用度。
[0009]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明一方面提供一種核殼結(jié)構(gòu)的生物粘附微球的制備方法，包括如下順序進(jìn)行的步驟:
[0010]I)制備載體微球核
[0011]1-A):將明膠與海藻酸鈉的水溶液加入到混合乳化液中，進(jìn)行兩次乳化處理，然后加入異丙醇，進(jìn)行第三次乳化處理，制得第一載體乳化液；
[0012]1-B):將第一載體乳化液滴加到第一交聯(lián)液中，接著進(jìn)行兩次交聯(lián)反應(yīng)后進(jìn)行靜置沉淀，然后將沉淀進(jìn)行冷凍干燥處理，制得載體微球核；
[0013]2)制備載藥微球核
[0014]2-A):將原料藥黃連和吳茱萸加入到乙醇溶液中，加熱回流提取，對(duì)提取液進(jìn)行濃縮、干燥處理，制得總生物堿提取物；
[0015]2-B):將總生物堿提取物加入到無(wú)水乙醇中，進(jìn)行超聲處理，制得總生物堿乙醇液；
[0016]2-C):將載體微球核浸泡于總生物堿乙醇液中，加熱回收乙醇，使總生物堿吸附于載體微球核上，得到載藥微球核；
[0017]3)制備生物粘附微球
[0018]3-A):首先將載藥微球核浸泡于殼聚糖溶液中，攪拌，使載藥微球核吸附殼聚糖，然后進(jìn)行離心處理，得到殼聚糖-載藥微球核；
[0019]3-B):將殼聚糖-載藥微球核浸泡于第二交聯(lián)液中進(jìn)行第三次交聯(lián)處理，即得。
[0020]其中，步驟1-A)中所述第一次乳化處理溫度高于第二次乳化處理溫度；所述混合乳化液由Span80、Tween80和液體石臘組成。
[0021]特別是，所述Span80與Tween80的體積之比為3-5:1 ;所述Span80和Tween80的總體積與所述液體石蠟的體積之比為1:90-110。
[0022]其中，步驟1-A)中所述明膠與海藻酸鈉的水溶液與混合乳化液的體積之比為4-6:1。
[0023]特別是，將所述明膠與海藻酸鈉的水溶液滴加到混合乳化液中，其中所述滴加的速率為 5-10ml/min。
[0024]其中，所述第一次乳化處理的溫度為35-55°C;所述第二次乳化處理的溫度為(TC。所述第一次乳化處理的處理時(shí)間為10-30min ;所述第二次乳化處理時(shí)間為10_30min。
[0025] 特別是，在攪拌狀態(tài)下進(jìn)行所述的乳化處理。
[0026]尤其是，所述攪拌狀態(tài)下的攪拌速率為300-500rpm。
[0027]其中，所述明膠與海藻酸鈉的水溶液中明膠與海藻酸鈉的重量之比為6-8:2-4 ；明膠與海藻酸鈉的總重量與水的體積之比為2-10:100(g/ml)，即每10ml水中含有明膠與海藻酸鈉的總重量為2-10g。
[0028]其中，第三次乳化處理的溫度為0°C，乳化時(shí)間為5_15min。
[0029]特別是，所述第三次乳化處理過(guò)程中加入的異丙醇與明膠與海藻酸鈉的水溶液的體積之比為1:1-3。
[0030]其中，步驟1-B)中所述第一交聯(lián)液由碳二亞胺(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)與2-(N-嗎啡啉)乙磺酸(MES)緩沖液混合而成；
[0031]特別是，所述第一交聯(lián)液中碳二亞胺(EDC)與N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)的重量之比為3-5:1。
[0032]特別是，所述第一交聯(lián)液中所述碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺的總重量與所述2- (N-嗎啡啉)乙磺酸(MES)緩沖液的體積之比為50-70: l(g/ml),即向每1ml所述2- (N-嗎啡啉)乙磺酸(MES)緩沖液中混合的碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺的總重量是50-70g。
[0033]尤其是，所述2- (N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液的濃度為50mM，pH為5-7。
[0034]特別是，所述滴加的速率為5-10ml/min。
[0035]其中，步驟1-B)中所述第一次交聯(lián)反應(yīng)溫度低于第二次交聯(lián)反應(yīng)溫度。
[0036]特別是，所述第一次交聯(lián)反應(yīng)的溫度為0°C ;所述第二次交聯(lián)反應(yīng)的溫度為10-30°C ;所述第一次交聯(lián)反應(yīng)的時(shí)間為45-75min ;所述第二次交聯(lián)反應(yīng)的時(shí)間為3_5h。
[0037]特別是，在攪拌狀態(tài)下進(jìn)行所述的交聯(lián)反應(yīng)，其中，所述攪拌的速率為300-500rpmo
[0038]其中，所述靜置沉淀的溫度為0_4°C，析出沉淀。
[0039]特別是，還包括將靜置后的沉淀物依次進(jìn)行離心處理、干燥處理、溶脹處理之后再進(jìn)行所述冷凍干燥處理。
[0040]其中，所述的離心處理過(guò)程中離心的轉(zhuǎn)速為3500-4500rpm,離心時(shí)間10_30min,優(yōu)選為1min ;所述干燥處理過(guò)程中干燥溫度為50-60°C，干燥至含水率低于5% ;所述溶脹處理是將干燥后含水率低于5%的沉淀浸泡在純水中至少24h。
[0041]特別是，所述溶脹處理時(shí)間為24-48h。
[0042]特別是，所述冷凍干燥處理過(guò)程中溫度為_(kāi)45°C，絕對(duì)壓力為13Pa。
[0043]特別是，還包括步驟1-C):向第二次交聯(lián)反應(yīng)混合物中加入交聯(lián)終止劑丙酮，終止交聯(lián)反應(yīng)，其中，丙酮與第一載體乳化液的體積之比為1:1-3。
[0044]其中，步驟2-A)中所述黃連與吳茱萸的重量份配比為4-8:1，優(yōu)選為6:1 ;乙醇溶液的質(zhì)量百分比濃度為60-75% ;加熱回流提取次數(shù)為3-5次，每次的提取時(shí)間為1.5-2h ；每次提取時(shí)黃連、吳茱萸的總重量與乙醇溶液的體積之比為l:8-12(g/ml或kg/L)，優(yōu)選為I:10,即每Ig黃連與吳茱萸混合原料藥中加入乙醇溶液8-12ml或每Ikg黃連與吳茱萸混合原料藥中加入乙醇溶液8-12L ;濃縮后的提取液的相對(duì)密度為1.10-1.30，優(yōu)選為1.20 ；所述干燥為真空冷凍干燥，干燥過(guò)程中的溫度為_(kāi)45°C，絕對(duì)壓力為13Pa。
[0045]其中，步驟2-B)中所述總生物堿提取物的重量與無(wú)水乙醇的體積之比為5-25:100 (g/ml或kg/L)，優(yōu)選為4-20:100，進(jìn)一步優(yōu)選為12:100 ;即每10ml的無(wú)水乙醇中加入5-25g左金丸總生物堿提取物或每100L的無(wú)水乙醇中加入5-25kg左金丸總生物堿提取物。
[0046]特別是，步驟2-B)中所述超聲處理過(guò)程中超聲處理時(shí)間為20_60min，超聲處理溫度為 15-30°C。
[0047]尤其是，所述超聲處理過(guò)程中超聲波的頻率為20_25kHz，優(yōu)選為20kHz ;所述超聲波的脈沖時(shí)間為I~1s: l_10s(on/off),優(yōu)選為I~5s: I~5s(on/off),進(jìn)一步優(yōu)選為2s: 2s (on/off)，即超聲波持續(xù)發(fā)生時(shí)間為(on) I~10s，超聲波停止發(fā)生時(shí)間(SP間歇時(shí)間)(off)為I~10s。
[0048]其中，步驟2-C)中所述載體微球核的總重量與總生物堿乙醇液的體積之比為1:5-8 (g/ml )，即每Ig載體微球核浸泡于5-8ml的總生物堿乙醇液中。
[0049]其中，步驟3-A)中所述攪拌處理的攪拌速率為100_200rpm，攪拌溫度為40_50°C，攪拌時(shí)間為20-40min。
[0050]特別是，步驟3-A)中所述殼聚糖溶液是將殼聚糖溶解于質(zhì)量百分比濃度為
0.1-1%的冰醋酸溶液制成的混合溶液，其中殼聚糖的重量與冰醋酸溶液的體積之比為1:20-200 (g/ml),即每Ig的殼聚糖溶解于20_200ml的冰醋酸溶液中。
[0051]其中，步驟3-B)中所述第三次交聯(lián)處理的時(shí)間為2_4h，交聯(lián)處理的溫度為10-30。。。
[0052]特別是，步驟3-B)中所述第二交聯(lián)液由碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺與2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液-無(wú)水乙醇的溶液(MES乙醇溶液)混合組成。
[0053]尤其是，所述 MES乙醇溶液是將MES緩沖液中加入到無(wú)水乙醇中混合而成，其中MES緩沖液與無(wú)水乙醇的體積之比為1:1-4。
[0054]特別是，所述第二交聯(lián)液中的碳二亞胺與N-羥基琥珀酰亞胺的重量之比為
3-5:1。
[0055]其中，所述2-(N_嗎啡啉)乙磺酸緩沖液-無(wú)水乙醇混合溶液中2-(N_嗎啡啉)乙磺酸緩沖液與無(wú)水乙醇的體積之比為1:1-4。
[0056]特別是，所述2- (N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液的濃度為50mM，pH為5_7。
[0057]特別是，所述第二交聯(lián)液中碳二亞胺與N-羥基琥珀酰亞胺的總重量與所述
2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液-無(wú)水乙醇混合溶液的體積之比為40-100:1 (mg/ml),即每Iml2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液-無(wú)水乙醇混合溶液中混合的碳二亞胺與N-羥基琥珀酰亞胺的總重量為40-100mg。
[0058]特別是，第三次交聯(lián)處理過(guò)程中進(jìn)行攪拌，攪拌速率為150-250rpm ；
[0059]特別是，第三交聯(lián)處理后對(duì)交聯(lián)反應(yīng)后的混合物進(jìn)行離心處理，離心沉淀物干燥至恒重。
[0060]尤其是，所述離心處理過(guò)程中離心速率為3500-4500rpm，離心時(shí)間為5-lOmin ;所述干燥溫度為35-45°C。
[0061]本發(fā)明另一方面提供一種按照上述方法制備而成的左金丸核殼結(jié)構(gòu)生物粘附微球。
[0062]本發(fā)明制備的左金丸生物粘附微球具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0063]1、本發(fā)明制備的左金丸生物微球具有殼核雙層結(jié)構(gòu)，藥物負(fù)載于內(nèi)部核心球表面，藥物載藥量高，藥物的外層包裹殼聚糖，將藥物固定，減少藥物損失。
[0064]2、本發(fā)明方法制備的左金丸生物粘附微球的外層殼為殼聚糖，具有良好的粘膜粘附性，能在胃液的酸性環(huán)境下很好的粘附于胃粘膜表面，能長(zhǎng)時(shí)間定位停留在胃粘膜表面，即能在胃粘膜表面定位停留較長(zhǎng)時(shí)間，持續(xù)釋放藥物，藥效持久，突釋效應(yīng)減小，避免了短時(shí)間內(nèi)藥物濃度過(guò)大，增加了藥物吸收，藥物利用率高，改善口服用藥治療胃潰瘍的生物利用度，體外釋藥表明，左金丸粘附微球能在8-10h內(nèi)持續(xù)釋放，藥物累積釋放率達(dá)到:鹽酸藥根堿61.34%，鹽酸巴馬汀72.00%,鹽酸小檗堿72.39%，吳茱萸堿82.16%，吳茱萸次堿58.29%ο
[0065]3、本發(fā)明方法制備左金丸生物粘附微球的過(guò)程中采用冷凍干燥微球核，微球核的表面布滿裙皺與凹陷，利于藥物分子的吸附，藥物載藥量大，左金丸粘附微球中5種主要生物堿的載藥量分別為:鹽酸藥根堿的載藥量為2.653-2.895mg/g ;鹽酸巴馬汀的載藥量為3.792-4.161mg/g ;鹽酸小檗堿的載藥量為21.06-23.12mg/g ;吳茱萸堿的載藥量為
1.401-1.510mg/g ;吳茱萸次堿的載藥量為 0.9164- 09820mg/g。
[0066]4、本發(fā)明制備的左金丸粘附微球具有較好的胃粘附特性，平均胃粘附百分率為89.33%，因此在消化性潰瘍口服給藥治療中，本發(fā)明的粘附微球粘附于胃潰瘍患處，藥物直接作用于患處，在固定部位長(zhǎng)效釋放藥物，持續(xù)作用，促進(jìn)潰瘍面愈合。
[0067]5、本發(fā)明左金丸粘附微球的制備過(guò)程中采用“零長(zhǎng)度交聯(lián)劑”碳二亞胺(EDC)，在交聯(lián)中并不構(gòu)成藥物的組成部分，制得的左金丸生物粘附微球中幾乎不存在EDC成分，毒性小。
[0068]6、本發(fā)明制備的左金丸粘附微球的外層殼為殼聚糖，其為pH敏感型陽(yáng)離子型水凝膠材料，具有良好的粘膜粘附性能、生物相容性和生物可降解性，并且其對(duì)于機(jī)體無(wú)毒，有抗菌消炎、促進(jìn)傷口愈合、抗酸、抗?jié)兊茸饔谩?
[0069]7、本發(fā)明的制備方法工藝條件容易控制，制備的產(chǎn)品質(zhì)量可控，適宜工業(yè)化大生產(chǎn)。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0070]圖1為微球掃描電鏡圖:其中Ia)實(shí)施例1制備的載體微球核；lb)實(shí)施例1制備的載藥微球核；lc)實(shí)施例1制備的生物粘附微球；ld)實(shí)施例2制備的生物粘附微球；
[0071]圖2為殼聚糖包裹前后微球的粒徑分布圖:其中2a)實(shí)施例1制備的載體微球核；2b)實(shí)施例1制備的生物粘附微球；
[0072]圖3為傅里葉變換紅外光譜圖:3a)明膠-海藻酸鈉物理共混物(7: 3w/w) ；3b)實(shí)施例I制備的載體微球核；3c)實(shí)施例1制備的生物粘附微球；
[0073]圖4為差示掃描量熱分析圖譜:其中4a)載體微球核；4b)載藥微球核；4c)實(shí)施例I制備的生物粘附微球；
[0074]圖5左金丸生物粘附微球的體外的溶出曲線圖。

【具體實(shí)施方式】
[0075]本發(fā)明實(shí)施例中使用的試劑如下:
[0076]

【權(quán)利要求】
1.一種核殼結(jié)構(gòu)的生物粘附微球的制備方法，包括如下順序進(jìn)行的步驟: 1)制備載體微球核 1-A):將明膠與海藻酸鈉的水溶液加入到混合乳化液中，進(jìn)行兩次乳化處理，然后加入異丙醇，進(jìn)行第三次乳化處理，制得第一載體乳化液； 1-B):將第一載體乳化液滴加到第一交聯(lián)液中，接著進(jìn)行兩次交聯(lián)反應(yīng)后進(jìn)行靜置沉淀，然后將沉淀進(jìn)行冷凍干燥處理，制得載體微球核； 2)制備載藥微球核 2-A):將原料藥黃連和吳茱萸加入到乙醇溶液中，加熱回流提取，對(duì)提取液進(jìn)行濃縮、干燥處理，制得總生物堿提取物； 2-B):將總生物堿提取物加入到無(wú)水乙醇中，進(jìn)行超聲處理，制得總生物堿乙醇液； 2-C):將載體微球核浸泡于總生物堿乙醇液中,加熱回收乙醇,使總生物堿吸附于載體微球核上，得到載藥微球核； 3)制備生物粘附微球 3-A):首先將載藥微球核浸泡于殼聚糖溶液中，攪拌，使載藥微球核吸附殼聚糖，然后進(jìn)行離心處理，得到殼聚糖-載藥微球核； 3-B):將殼聚糖-載藥微球核浸泡于第二交聯(lián)液中進(jìn)行第三次交聯(lián)處理，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是步驟1-A)中所述第一次乳化處理溫度高于第二次乳化處理溫度。
3.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟1-A)中所述異丙醇與明膠與海藻酸鈉的水溶液的體積之比為1:1-3。
4.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟1-B)中所述第一次交聯(lián)反應(yīng)溫度低于第二次交聯(lián)反應(yīng)溫度。
5.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟1-B)中所述第一交聯(lián)液由碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺與2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液混合而成。
6.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟2-C)中所述載體微球核的總重量與總生物堿乙醇液的體積之比為1:5-8。
7.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟3-A)中所述攪拌的速率為100-200rpm，攪拌溫度為40_50°C，攪拌時(shí)間為20_40min。
8.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟3-B)中所述第三次交聯(lián)處理的時(shí)間為2-4h，交聯(lián)處理的溫度為10-30°C。
9.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征是步驟3-B)中所述第二交聯(lián)液由碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺與2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液-無(wú)水乙醇的溶液混合組成。
10.一種核殼結(jié)構(gòu)的生物粘附微球，其特征是按照如權(quán)利要求1-9任一所述方法制備--? 。
【文檔編號(hào)】A61K36/754GK104069228SQ201310108525
【公開(kāi)日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2013年3月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月29日
【發(fā)明者】崔元璐, 董天驕, 高秀梅, 王強(qiáng)松, 葉磊 申請(qǐng)人:天津中醫(yī)藥大學(xué)