專利名稱：一種具有抗氧化作用的紅豆杉枝葉提取物、其提取方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種紅豆杉的提取，更具體涉及一種具有抗氧化作用的紅豆杉枝葉提取物、其提取方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
紅豆杉是集觀賞、材用、藥用為一體的經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高的樹種。到目前為止，化學(xué)家們已從該屬植物中提取得到300多個(gè)紫杉烷二萜類化合物及許多生物堿類化合物，其中有些成分如紫杉次堿也具有類似紫杉醇的抗癌活性，另一些成分如1-羥基巴卡亭I可通過化學(xué)修飾來合成紫杉醇。除此之外，一些學(xué)者還從該屬植物中分離得到蛻皮留酮I種、三萜5種、木脂素7種、苷類3種、雙黃酮8種、黃酮類化合物山柰素-4-甲醚、其他有機(jī)酸和醛等14種、糖苷類及多糖類化合物等?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)紅豆杉還能提高人體免疫力，使人體的自然功能恢復(fù)。它不但對(duì)高血壓、高血糖、高血脂、腎臟病和經(jīng)痛等有顯著效果，還能減少尿蛋白流失。同時(shí)，紅豆杉中含有大量的鞣質(zhì)，這些物質(zhì)具有抑菌、消炎作用，不但對(duì)上呼吸道炎癥具有治療作用，還對(duì)腎炎、胃炎、腸炎、類風(fēng)濕等有顯著療效。由于紅豆杉屬植物資源稀缺，因此對(duì)紅豆杉枝葉進(jìn)行提取，通過選擇科學(xué)合理的提取方法篩選特定的有效成分應(yīng)用于抗癌防癌一直是相關(guān)研發(fā)人員的研究熱點(diǎn)，如:中國(guó)專利ZL200410043649.8公開了一種紅豆杉屬植物提取物和該提取物的提取方法及其應(yīng)用。所述提取物是以東北紅豆杉的枝葉為原料提取而成的，它包括下述成分:紫杉烷二萜化合物、總木脂素、總 黃酮，所述紫杉烷二萜化合物占三種成分總體積的18 68%、總木脂素占三種成分總體積的14 61 %、總黃酮占三種成分總體積的10 50%。其提取方法按照下述步驟進(jìn)行制備:a、將紅豆杉屬植物藥材的枝葉用體積濃度為40 95%的乙醇溶劑回提I 3小時(shí)，濃縮成原浸膏；b、然后加入原浸膏重量30 80倍的蒸餾水，在60 80°C或超聲的條件下溶解原浸膏，靜置后過濾離心、沉淀；c、用體積濃度為50 90%的乙醇在60 80°C或超聲的條件下提取上述沉淀物，提取三次，乙醇每次的加入量為沉淀物重量的5 15倍，靜置后過濾、離心；d、合并乙醇提取液，向提取液中加入乙醇，配制成含醇量為20 40%、體積為上述原浸膏30 70倍的溶液；e、將上述溶液通過大孔吸附樹脂層析柱，大孔吸附樹脂的用量為原浸骨重量的10 20倍；f、用體積濃度為20 40%的乙醇溶液上柱，沖洗至色淡，乙醇用量為柱體積的8 12倍，流速0.5 1.5柱體積/小時(shí)；g、然后用體積濃度為40 60%的乙醇溶液上柱，沖洗至色淡，乙醇用量為柱體積的8 15倍，流速0.5 1.5柱體積/小時(shí)；h、再用體積濃度為65 80%的乙醇溶液上柱，沖洗至色淡，乙醇用量為柱體積的10 15倍，流速0.5 1.5柱體積/小時(shí)；1、分別收集洗脫液，減壓濃縮至干，得到紅豆杉屬植物的提取物。該提取物可以作為抗癌藥物的有效成分。其抗癌效果不低于紫杉醇，同時(shí)又實(shí)現(xiàn)了紅豆杉屬植物的永續(xù)利用，而且副作用極低。在保證療效的前提下，提高了紅豆杉屬植物的利用率，從單一提取紫杉醇利用率不足萬分之二提高到千分之五以上，利用率提高25倍以上。
中國(guó)專利ZL200910157034.0公開了一種南方紅豆杉葉片的提取物及制備方法，該提取物為淡黃色粉末，該粉末中含有重量含量為65 70%的紫杉黃酮，紫杉黃酮包括下述5種成分:3-0-蘆丁 -槲皮素、3-0-蘆丁 -山奈酚、3-0-蘆丁 -楊梅酮、7-0-葡萄糖-山奈酚和7-0-葡萄糖-槲皮素，紫杉黃酮中上述5種成分的總重量含量為40 60%，該提取物以新鮮的南方紅豆葉片為原料，經(jīng)過烘干、粉碎過篩、浸入乙醇溶劑、攪拌下超聲提取、提取液減壓濃縮去醇、氯仿萃取脫脂、水相濃縮干燥的制備方法制得；本發(fā)明是一種具有改善心微循環(huán)，抗心律失常，降低心肌氧耗等，對(duì)心血管系統(tǒng)疾病的治療和保健作用的南方紅豆杉葉片的提取物和能耗低，提取時(shí)間短，雜質(zhì)少，提取率較高的制備方法。中國(guó)專利ZL03129421.9公開了一種紅豆杉枝葉中的提取物及提取方法。該提取物為多糖組分，主要為由D —葡萄糖及少量的D —木糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖醛酸以β - 1，3糖苷鍵組成的雜多糖，在其β - 1，3葡聚糖主鏈上，存在少量β - 1，6糖苷鍵分支；它具有免疫調(diào)節(jié)和直接抑制腫瘤細(xì)胞等抗癌作用，并且其本身的毒副作用很小，通過體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)研究其抗腫瘤效果，其對(duì)昆明鼠S180腹水癌具有很好的抑制作用，用于研制抗癌藥物方面具有良好的應(yīng)用前景。上述技術(shù)方案均是基于紅豆杉枝葉提取物在抗癌防癌等方面的藥理活性及應(yīng)用提出的，現(xiàn)有技術(shù)中，對(duì)紅豆杉枝葉提取物化學(xué)成分的研究對(duì)象也多限于對(duì)紫杉烷類化合物的研究，而紅豆杉除了含有紫杉烷類化合物外，還有其他非紫杉烷類化合物如黃酮類、多糖類、其他有機(jī)酸和醛及大量的鞣質(zhì)等。進(jìn)一步研究上述活性成分，探索其在其他方面如抗氧化等的藥理活性具有重要意義，有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一目的在于提供一種紅豆杉枝葉提取物，通過對(duì)紅豆杉枝葉進(jìn)行提取，篩選其中具有抗氧化作用的活性成分，得到一種具有顯著抗氧化作用的紅豆杉枝葉提取物，使紅豆杉類藥材能充分發(fā)揮其潛在優(yōu)勢(shì)和資源優(yōu)勢(shì)。

為實(shí)現(xiàn)第一目的，采用如下技術(shù)方案:一種紅豆杉枝葉提取物，以南方紅豆杉的枝和/或葉為原料制備而成，所述紅豆杉枝葉提取物中包括12% 58%的黃酮，9% 47%的酚類木脂素，其余為鞣質(zhì)。其中，所述黃酮包括山奈酚，所述酚類木脂素包括鐵杉脂素。上述紅豆杉枝葉提取物的提取方法包括如下步驟:(I)制備浸膏:取紅豆杉枝和/或葉，浸潰于質(zhì)量濃度為70%_75%的醇溶液中，用醇溶液提取，剩余藥渣繼續(xù)用水提取，合并水和醇溶液，用石油醚回流，索氏提取回收溶劑，得到浸膏；(2)梯度洗脫:將浸膏用水溶解，上ΗΡ20大孔樹脂，按順序用水、15-25%的醇液、35-45%的醇液、55-65%的醇液，75-85%的醇液梯度洗脫，收集并合并各洗脫液，即得紅豆杉枝葉提取物。其中，步驟2中各洗脫液優(yōu)選分別為水液、20%的醇液、40%的醇液、60%的醇液，80%的醇液。此時(shí)收集各段洗脫液，即得純度和產(chǎn)率最理想的紅豆杉枝葉提取物。其中，步驟2中各洗脫液的用量均為8-10倍柱體積，流速為1-1.5mL/min。優(yōu)選各洗脫液的用量均為9倍柱體積，流速為1.2mL/min。
其中，所述步驟I和步驟2中的醇優(yōu)選為乙醇。其中，所述的提取方法還包括對(duì)紅豆杉枝葉提取物進(jìn)行濃縮除溶劑得到提取物浸膏的步驟。所述的濃縮除溶劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所掌握。本發(fā)明對(duì)此不作特別限定，本領(lǐng)域技術(shù)人員可采用現(xiàn)有技術(shù)公開的任一種濃縮方法除去洗脫液中的溶劑，得到紅豆杉提取物浸膏或進(jìn)一步得到粉末。本發(fā)明的另一目的在于提供紅豆杉提取物作為抗氧化美容化妝品中活性成分的應(yīng)用。皮膚是人接觸環(huán)境、接受各種刺激包括紫外線照射的最先、最大的器官，故皮膚的老化也最明顯、最易發(fā)生。延緩皮膚老化的三個(gè)途徑是:抗干燥、抗紫外線、抗氧化。幾乎所有的抗氧化劑及促成體內(nèi)抗氧化劑的物質(zhì)，絕大部分存在于自然界植物中。天然植物提取物通常具有多重作用、功效持久穩(wěn)定、作用溫和、適用面廣、無副作用或副作用很小的優(yōu)勢(shì)，對(duì)其研究開發(fā)已成為順應(yīng)回歸自然、科學(xué)美容、科學(xué)護(hù)理觀念的最新趨勢(shì)。本發(fā)明順應(yīng)這個(gè)趨勢(shì)，從紅豆杉中尋找抗氧化活性成分，為進(jìn)一步開發(fā)化妝品奠定基礎(chǔ)。本發(fā)明所述紅豆杉抗氧化成分應(yīng)用于制備抗氧化劑和添加于抗氧化美容化妝品中，其中含有的多酚類物質(zhì)作為添加劑添加到護(hù)膚品中，對(duì)自由基有清除能力，具有抗衰老、美白、活化和保濕的作用，還具有抗UVB、UVA的作用。采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明紅豆杉抗氧化成分篩選的方法操作簡(jiǎn)單方便，宜大規(guī)模生產(chǎn)，收集效果好，所提取的產(chǎn)品可用于設(shè)置祛痘、抗菌、抗衰老、保濕、防曬、美白、祛斑等具有特定功效的化妝品的，添加相應(yīng)的功效型成分，制成合適的劑型，開發(fā)相應(yīng)的產(chǎn)品。


圖1為DPPH溶液濃度的篩選；圖2為DPPH溶液加樣量的篩選；圖3為紅豆杉葉氧化活性測(cè)定結(jié)果圖；圖4為紅豆杉枝氧化活性測(cè)定結(jié)果圖；圖5為顯色劑為2%A13C13乙醇溶液顯色的硅膠薄層層析結(jié)果；圖6為顯色劑為茚三酮顯色的硅膠薄層層析結(jié)果；圖7為展開劑為:BAW(4:1:5)上層液的硅膠薄層層析結(jié)果；圖8為甲醇:水(40:1)的聚酰胺紙層析結(jié)果；圖9為顯色劑為:2%A13C13的硅膠薄層層析結(jié)果；圖10為顯色劑為Fe3Cl3鹽酸溶液的聚酰胺紙層析鑒別結(jié)果；圖11為多酚的含量測(cè)定結(jié)果分布曲線。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。由于工業(yè)生產(chǎn)要求成本低，盡量不使用有機(jī)溶劑，考慮到盡可能提取完全及工業(yè)化生產(chǎn)工藝的可操作性及成本等問題，本發(fā)明從溶劑的選擇、層析材料的選擇、洗脫溶劑的選擇及工業(yè)化生產(chǎn)的要求方面考慮，采用75%乙醇分別對(duì)枝和葉中活性成分進(jìn)行提取，回收溶劑得浸膏，應(yīng)用HP20大孔樹脂柱層析對(duì)提取物進(jìn)行分離純化，依次用水、15-25%的醇液、35-45%的醇液、55-65%的醇液，75-85%的醇液梯度洗脫，優(yōu)選蒸餾水，20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇約8-10倍柱體積(一般根據(jù)顏色判斷)梯度洗脫，洗脫液流速1.5mL/min，收集各個(gè)組分的洗脫液，洗脫液回收溶劑得供試組分待測(cè)活。將紅豆杉葉的提取液依次命名為提取液Y-2’、Υ_3’、Υ_4’、Υ_5’和Υ_6’，紅豆杉葉的提取液依次命名為Ζ-3 ’、Ζ-4 ’、Ζ-5 ’、Ζ-6 ’、。測(cè)試后結(jié)果顯示抗氧化活性成分主要集中在極性較大部位，抗氧化有效(清除率50% 以上)葉為 Υ-3，、Υ-4，，枝為 Ζ-3，、Ζ-4，、Ζ-5，、Ζ-6，。天然抗氧化劑主要來源于植物多酚，由于其酚羥基中鄰位酚羥基極易被氧化，且對(duì)活性氧等自由基有較強(qiáng)捕捉能力，使植物多酚具有很強(qiáng)抗氧化性和清除自由基能力。已從很多植物中發(fā)現(xiàn)的多酚類抗氧化活性成分，比如茶多酚、葡萄籽多酚、可可豆多酚等。研究表明，植物多酚含量及種類與抗氧化性功效有關(guān)。紅豆杉中主要的抗氧化活性成分主要為多酚類化合物，本發(fā)明采用Folin-ciocalteu試劑光度分析法對(duì)紅豆杉枝和葉以及抗氧化活性組分中的多酹含量進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果顯示:枝中總酚的含量為3.25%，葉中總酚的含量為2.35%，大孔樹脂柱色譜工藝富集多酚的抗氧化活性部位中多酚含量最高可以達(dá)到51.60%，各個(gè)組分多酚含量大小順序?yàn)?Z-3’ (51.6%) > Z-4’ (48.33%) > Z-5’ (40.05%) > Y-4’ (28.72%) > Y-3’(26.42%)> Z-6，(25.86%)> Y-5，(16.61%);而在各個(gè)組分濃度為 0.5mg/mL，各個(gè)組分抗氧化活性(清除率40%以上)大小順序?yàn)?Z-4’ > Z-3’ > Y-4’ > Z-6’ > Z_5’ > Y_3’ >Υ-5’。說明多酚含量高的部位，其抗氧化活性也相對(duì)較強(qiáng)，植物多酚其抗氧化活性的大小不僅和多酚的含量有關(guān)，還和其種類有關(guān)，不同的酚類化合物其抗氧化活性大小不同，一般酚類化合物的抗氧化活性隨著鄰位二羥基基團(tuán)的增加而增加。

工業(yè)生產(chǎn)常用大孔樹脂，大孔樹脂為一種有機(jī)高聚吸附劑，中草藥有效成分在大孔樹脂上的吸附是大孔樹脂與有效成分形成以范德華力和氫鍵為主的一分子間作用力的結(jié)果。大孔樹脂是大孔徑的高分子分離材料，具有選擇性吸附有機(jī)化合物的能力應(yīng)用于天然化學(xué)成分的富集純化有較好的效果，但其吸附性能及解吸、純化條件參數(shù)因化合物的理化性質(zhì)不同而不同。如何應(yīng)用大孔吸附樹脂制備中藥供試液關(guān)鍵在于正確選擇吸附樹脂型號(hào)和解吸用乙醇濃度(洗脫劑)。工業(yè)生產(chǎn)中對(duì)于制備脂溶性成分留體類、二萜和三萜類、黃酮、木脂素、香豆素、生物堿常選用非極性和弱極性的樹脂如D101、AB-8，HP20是日本三菱公司生產(chǎn)的以聚苯乙烯基苯為基體的吸附樹脂，是一種以吸附量高、顆粒均勻、機(jī)械強(qiáng)度好、不易破碎、殘留物少、預(yù)處理方便而聞名的大孔吸附樹脂，故本發(fā)明選用HP20這種型號(hào)的樹脂作為層析材料。本發(fā)明所述紅豆杉抗氧化成分采用硅膠薄層層析、聚酰胺薄層層析法，利用顯色劑來鑒定；采用反相硅膠柱層析對(duì)洗脫液Z-4’ /Y-4’進(jìn)行分離，再采用HP-20凝膠柱層析對(duì)洗脫液Z-4’ /Y-4’、Z-3’ /Y-3’進(jìn)行分離，對(duì)各分離組分進(jìn)行定性鑒別，紅豆杉枝中抗氧化活性成分主要為多酚類化合物和氨基酸類，紅豆杉葉中抗氧化活性成分有多酚類和黃酮類化合物。實(shí)施例1
紅豆杉抗氧化成分的提取:(I)浸膏I的制備:取紅豆杉枝，浸潰于質(zhì)量濃度為72%的醇溶液中，用醇溶液提取，剩余藥渣繼續(xù)用水提取，合并水和醇溶液，用石油醚回流，索氏提取回收溶劑，得到浸膏Z-1 ；或紅豆杉葉，操作步驟同紅豆杉枝，對(duì)應(yīng)的浸膏為Y-1 ；(2)梯度洗脫:按質(zhì)量濃度計(jì):將制備的浸膏用水溶解，上HP20大孔樹脂，按順序用水液、20%的醇液、40%的醇液、60%的醇液，80%的醇液梯度洗脫，依次得到洗脫液Z-2’、Z-3’、Z-4’、Z-5’和Z-6’，即為產(chǎn)品紅豆杉抗氧化成分；洗脫液均為8-10倍柱體積，流速為1.2mL/min ；或紅豆杉葉，操作步驟同紅豆杉枝，對(duì)應(yīng)的洗脫液依次為￥-2’、￥-3’、￥-4’、￥-5’和Y-6，；合并即得紅豆杉抗氧化成分。其中所述黃酮占三種成分總體積的32%，酚類木脂素占總體積的47%，其余為鞣質(zhì)。實(shí)施例2紅豆杉抗氧化成分的提取:( I)浸膏I的制備:取紅豆杉枝，浸潰于質(zhì)量濃度為70%的醇溶液中，用醇溶液提取，剩余藥渣繼續(xù)用水提取，合并水和醇溶液，用石油醚回流，索氏提取回收溶劑，得到浸膏Z-1 ；或紅豆杉葉，操作步驟同紅豆杉枝，對(duì)應(yīng)的浸膏為Y-1 ；(2)梯度洗脫:按質(zhì)量濃度計(jì):將制備的浸膏用水溶解，上HP20大孔樹脂，按順序用水液、25%的醇液、45%的醇液、65%的醇液，85%的醇液梯度洗脫，依次得到洗脫液Z-2’、Z-3’、Z-4’、Z-5’和Z-6’，即為產(chǎn)品紅豆杉抗氧化成分；洗脫液均為10倍柱體積，流速為
1.5mT,/miη ；或紅豆杉葉，操作步驟同紅豆杉枝，對(duì)應(yīng)的洗脫液依次為Υ-2’、Υ-3’、Υ-4’、Υ_5’和Υ-6，；合并即得紅豆杉抗氧化成分。其中所述黃酮占三種成分總體積的12%，酚類木脂素占總體積的44%，其余為鞣質(zhì)。實(shí)施例3紅豆杉抗氧化成分的提取:(I)浸膏I的制備:取紅豆杉枝，浸潰于質(zhì)量濃度為75%的醇溶液中，用醇溶液提取，剩余藥渣繼續(xù)用水提取，合并水和醇溶液，用石油醚回流，索氏提取回收溶劑，得到浸膏Z-1 ；或紅豆杉葉，操作步驟同紅豆杉枝，對(duì)應(yīng)的浸膏為Y-1 ；(2)梯度洗脫:按質(zhì)量濃度計(jì):將制備的浸膏用水溶解，上ΗΡ20大孔樹脂，按順序用水液、15%的醇液、 35%的醇液、55%的醇液，75%的醇液梯度洗脫，依次得到洗脫液Ζ-2’、2-3’、2-4’、2-5’和2-6’，即為產(chǎn)品紅豆杉抗氧化成分；洗脫液均為8倍柱體積，流速為ImL/min ；
或紅豆杉葉，操作步驟同紅豆杉枝，對(duì)應(yīng)的洗脫液依次為Y-2’、Υ_3’、Υ_4’、Υ_5’和Y-6，；合并即得紅豆杉抗氧化成分。其中所述黃酮占三種成分總體積的34%，酚類木脂素占總體積的42%，其余為鞣質(zhì)。為了進(jìn)一步驗(yàn)證本發(fā)明所述紅豆杉枝葉提取物的活性，發(fā)明人進(jìn)一步展開了大量試驗(yàn)，此處由于篇幅所限，僅例舉部分供參考。試驗(yàn)例I紅豆杉枝葉提取物抗氧化測(cè)定方法的選擇與建立目前，抗氧化活性的測(cè)定主要從體外抗氧化體系和體內(nèi)抗氧化體系兩方面開展，本發(fā)明的目的是開發(fā)抗衰老的化妝品，故采用體外抗氧化體系。通過文獻(xiàn)研究，本發(fā)明采用國(guó)外現(xiàn)在較普遍用于體外測(cè)定物質(zhì)總抗氧化能力的分光光度法DPPH(I, l-diphenyl-2-picrylhydrazyl)法對(duì)紅豆杉中成分進(jìn)行抗氧化活性方面的研究,并對(duì)DPPH法進(jìn)行了方法學(xué)考察，本法具有靈敏度高、穩(wěn)定性及重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確性高及操作簡(jiǎn)易的特點(diǎn)。

試驗(yàn)例2紅豆杉抗氧化成分的定性分析取紅豆杉枝和葉，枝和葉分開，于室內(nèi)陰干。分別取陰干后的紅豆杉枝和葉各50g，用石油醚熱回流索氏提取，石油醚提取液回收溶劑后，得枝和葉石油醚供試組分Z-1和Y-1;剩余藥渣分別用乙酸乙酯熱回流索氏提取，提取液回收溶劑后得枝和葉乙酸乙酯供試組分z-2和Y-2 ;剩余藥渣分別用甲醇熱回流索氏提取，提取液回收溶劑后得枝和葉供試組分部位Z-3和Y-3 ;剩余藥渣分別用水熱回流提取，蒸干水分得枝和葉水提液供試組分Z-4和Y-4。(此處Z1-Z4及Y1-Y4不同于實(shí)施例1 所述的 ΖΓ -Z4’ 及 ΥΓ -Y4’)1、DPPH溶液濃度的篩選吸取0.125mg/mLVC 溶液(以 100mmol/LpH7.4Tris_HCl 緩沖液溶解)200 μ I 分別與等體積300、250、200、150、100、5(^11101/10 !1溶液加入同一具塞試管中，搖勻，室溫下于暗處放置30min后，用無水乙醇作參比測(cè)定其吸光度Ai，同時(shí)測(cè)定不同濃度DPPH溶液與等體積無水乙醇混合液的吸光度Ac，以及VC液與等體積lOOmmol/LTris-HCl緩沖液(pH7.4)混合液的吸光度Aj，計(jì)算清除率，測(cè)定數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果如表I及圖1。表IDPPH溶液濃度的篩選(Aj為0.0401)
權(quán)利要求
1.一種具有抗氧化作用的紅豆杉枝葉提取物，其特征在于:以南方紅豆杉的枝和/或葉為原料制備而成，所述紅豆杉枝葉提取物中包括129Γ58%的黃酮，99Γ47%的酚類木脂素，其余為鞣質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的紅豆杉枝葉提取物，其特征在于:所述黃酮包括山奈酚。
3.如權(quán)利要求1所述的紅豆杉枝葉提取物，其特征在于:所述酚類木脂素包括鐵杉脂素。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述紅豆杉枝葉提取物的提取方法，其特征在于:包括如下步驟: (O制備浸膏:取紅豆杉枝和/或葉，浸潰于質(zhì)量濃度為70%-75%的醇溶液中，用醇溶液提取，剩余藥渣繼續(xù)用水提取，合并水和醇溶液，用石油醚回流，索氏提取回收溶劑，得到浸膏； (2)梯度洗脫:將浸膏用水溶解，上ΗΡ20大孔樹脂，按順序用水、15-25%的醇液、35-45%的醇液、55-65%的醇液，75-85%的醇液梯度洗脫，收集并合并各洗脫液，即得紅豆杉枝葉提取物。
5.如權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于:步驟2中各洗脫液分別為水液、20%的醇液、40%的醇液、60%的醇液，80%的醇液。
6.如權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于:步驟2中各洗脫液的用量均為8-10倍柱體積，流速為1-1.5mL/min。
7.如權(quán)利要求2所述紅豆杉枝葉提取物的提取方法，其特征是:所述步驟I和步驟2中的醇為乙醇。
8.如權(quán)利要求2所述紅豆杉枝葉提取物的提取方法，其特征是:所述的提取方法還包括對(duì)紅豆杉枝葉提取物進(jìn)行濃縮除溶劑得到提取物浸膏的步驟。
9.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的紅豆杉枝葉提取物作為抗氧化美容化妝品中活性成分的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種紅豆杉枝葉提取物，以南方紅豆杉的枝和/或葉為原料制備而成，所述紅豆杉枝葉提取物中包括12%~58%的黃酮，9%~47%的酚類木脂素，其余為鞣質(zhì)。所述紅豆杉抗氧化成分應(yīng)用于制備抗氧化劑和添加于抗氧化美容化妝品中，其中含有的多酚類物質(zhì)作為添加劑添加到護(hù)膚品中，對(duì)自由基有清除能力，具有抗衰老、美白、活化和保濕的作用，還具有抗UVB、UVA的作用。
文檔編號(hào)A61K8/49GK103191041SQ201310135889
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月18日
發(fā)明者王瓊, 喻瓊林, 蔡強(qiáng), 葛月蘭 申請(qǐng)人:江蘇紅豆杉藥業(yè)有限公司