一種羅布麻酸性多糖在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種羅布麻酸性多糖在治療糖尿病藥物方面的應(yīng)用，以羅布麻葉為原材料，經(jīng)過提取，純化，精制，制備出具有改善beta胰島細(xì)胞功能和促進(jìn)胰島素分泌作用的羅布麻酸性多糖。本發(fā)明涉及的羅布麻酸性多糖可制備具有降血糖作用羅布麻酸性多糖的各種制劑。
【專利說明】一種羅布麻酸性多糖在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥植物多糖的生物活性領(lǐng)域，具體涉及一種羅布麻酸性多糖的降血 糖的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 羅布麻（Apocynum venetum L.，AV.，又名野麻、紅麻）為夾竹桃科羅布麻屬植物， 是1952年董正鈞先生在新疆最初發(fā)現(xiàn)的，并證明其纖維具有優(yōu)良品質(zhì)，進(jìn)而根據(jù)其生長 極盛的羅布平原而定名。深入研究發(fā)現(xiàn)，中國擁有3種羅布麻即羅布麻(紅麻，Apocynum venetumLinn);白麻（中花羅布麻，Poacynumpictum Baill)和白麻(大花羅布麻，Poacynum hendersonii Woodson)。羅布麻廣泛分布在北方廣大鹽堿沙漠地區(qū)如新疆、甘肅、青海、寧 夏、山東、內(nèi)蒙、江蘇、安徽、遼寧、吉林等省、區(qū)。其適應(yīng)性強(qiáng)、資源豐富，是西北地區(qū)最重要 最具特色的一種纖維植物資源。羅布麻纖維細(xì)長、柔軟而有光澤、韌性強(qiáng)。其桿可作造紙?jiān)?料，葉汁可作飲料，根莖枝葉所含乳膠液可提煉橡膠，是一種良好的植物資源。羅布麻適合 于低溫、鹽堿及干旱沙荒地區(qū)種植，對(duì)于綠化大量荒地有積極意義。現(xiàn)代研究認(rèn)為，羅布麻 可預(yù)防和治療感冒、老年高血糖和高血壓，對(duì)增強(qiáng)肌體抗病能力有一定作用，是可用于延年 益壽、養(yǎng)生之藥。
[0003] 隨著社會(huì)的日益發(fā)展，人們的生活水平日益提高，我國糖尿病的發(fā)病率也在逐年 上升。20年來，我國糖尿病患病率顯著增加。1980年全國14省市30萬人的流行病學(xué)調(diào) 查結(jié)果顯示，糖尿病患病率0. 67%。1994年全國19省市21萬人的調(diào)查，25?64歲年齡段 糖尿病的患病率為2. 5% (人口標(biāo)化率為2. 28%)，糖耐量減低（IGT)為3. 2% (人口標(biāo)化率為 2. 12%)。這一數(shù)字與同等發(fā)展水平國家的數(shù)據(jù)相近，比1980年增加了近3倍。中國中醫(yī)科 學(xué)院糖尿病研究總院調(diào)查資料顯示，我國的糖尿病患者人數(shù)已達(dá)4000萬左右，占世界糖尿 病人群總數(shù)的五分之一，患病率居世界第二位，并且以每天至少3000人的速度增加，每年 增加超過120萬人，預(yù)測(cè)至2010年我國糖尿病人口總數(shù)將猛增至8000萬至1億人。根據(jù) 《中國糖尿病控制現(xiàn)狀》報(bào)告表明，我國已成為糖尿病發(fā)病的"重災(zāi)區(qū)"，是全球糖尿病第二 大國，更讓人憂心的是，越來越多的孩子也成了糖尿病患者。據(jù)《中國糖尿病及用藥市場(chǎng)分 析》披露，中國目前服用糖尿病治療藥物的人數(shù)為800萬人，其中長期服用中高價(jià)日消費(fèi)在 3-4. 10元和高價(jià)日消費(fèi)4. 90-13. 6元，占服用糖尿病藥物的患者比例近6成。根據(jù)這組數(shù) 字可以推算出，目前中國的糖尿病用藥市場(chǎng)規(guī)模為130億人民幣。
[0004] 糖尿病分1型糖尿?。╰ypeldiabetes)和2型糖尿?。╰ype2diabetes)，1型糖尿 病和2型糖尿病均有不同程度的beta胰島細(xì)胞損傷。現(xiàn)有的降血糖藥物，比如胰島素，格列 本脲，羅格列酮，阿卡波糖等，均具有不同程度的副作用，并且不能從根本上改善胰腺功能。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明以改善beta胰島細(xì)胞活力為模型，旨在研究無毒副作用的羅布麻酸性多 糖在治療糖尿病方面的應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明可以通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：
[0007] 1.羅布麻總多糖的提?。?00°C條件下用蒸餾水煮提羅布麻葉4小時(shí)。提取物經(jīng)4 層紗布過濾。過濾得到的殘?jiān)谙嗤瑮l件下重復(fù)提取兩次。合并三次提取所得濾液，離心 去除其中的不溶物，上清液加入6倍體積的95%乙醇沉淀過夜，離心，收集沉淀，常規(guī)干燥后 得到羅布麻總多糖。
[0008] 2. Sevag法脫蛋白：向10%的羅布麻多糖水溶液中加入1/4體積的Sevag試劑，充 分震蕩兩個(gè)小時(shí)，離心去除蛋白層和氯仿層，水層重復(fù)操作至不再出現(xiàn)蛋白層為止，所得水 溶液經(jīng)乙醇沉淀和常規(guī)干燥得到脫蛋白級(jí)分羅布麻多糖。
[0009] 3.羅布麻酸性糖的分離：將10%的脫蛋白級(jí)分羅布麻多糖經(jīng)DEAE-纖維素離子交 換柱（C1-型）分級(jí)，用兩倍柱體積的蒸餾水洗脫，去除未結(jié)合的中性糖級(jí)分，收集由兩倍柱 體積的〇. 5M氯化鈉水溶液洗脫得到的酸性糖級(jí)分，經(jīng)蒸餾水透析、冰凍干燥得到氯化鈉洗 脫的結(jié)合級(jí)分羅布麻酸性多糖。
[0010] 4.多糖樣本經(jīng)苯酚-硫酸法測(cè)得其總糖含量，間羥基聯(lián)苯法測(cè)得糖醛酸含量，采 用HPLC測(cè)定單糖組成和分子量范圍。
[0011] 羅布麻各級(jí)分總糖和糖醛酸含量，單糖組成如表1所示：
[0012] 表1-羅布麻多糖總糖和糖醛酸含量，單糖組成 [0013]

【權(quán)利要求】
1.羅布麻酸性多糖在制備降血糖藥物中的應(yīng)用，其特征在于羅布麻酸性多糖通過以下 步驟制備： a) 羅布麻總多糖的提?。?00°C條件下用蒸餾水煮提羅布麻葉4小時(shí)，提取物經(jīng)4層紗 布過濾，過濾得到的殘?jiān)谙嗤瑮l件下重復(fù)提取兩次，合并三次提取所得濾液，離心去除其 中的不溶物，上清液加入6倍體積的95%乙醇沉淀過夜，離心，收集沉淀，常規(guī)干燥后得到羅 布麻總多糖； b) Sevag法脫蛋白：向10%的羅布麻多糖水溶液中加入1/4體積的Sevag試劑，充分震 蕩兩個(gè)小時(shí)，離心去除蛋白層和氯仿層，水層重復(fù)操作至不再出現(xiàn)蛋白層為止，所得水溶液 經(jīng)乙醇沉淀和常規(guī)干燥得到脫蛋白級(jí)分羅布麻多糖； c) 羅布麻酸性糖的分離：將10%的脫蛋白級(jí)分羅布麻多糖經(jīng)C1-型DEAE-纖維素離子 交換柱分級(jí)，用兩倍柱體積的蒸餾水洗脫，去除未結(jié)合的中性糖級(jí)分，收集由兩倍柱體積的 0. 5M氯化鈉水溶液洗脫得到的酸性糖級(jí)分，經(jīng)蒸餾水透析、冰凍干燥得到氯化鈉洗脫的結(jié) 合級(jí)分羅布麻酸性多糖。
【文檔編號(hào)】A61P3/10GK104107187SQ201310136288
【公開日】2014年10月22日 申請(qǐng)日期:2013年4月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月18日
【發(fā)明者】范玉瑩, 臺(tái)桂花, 周義發(fā), 孫成新, 李新志, 魏檸檸 申請(qǐng)人:東北師范大學(xué)