專利名稱：一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備方法，屬于中獸藥制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中藥黃酮類化合物具有多方面的功效，具有良好的增強(qiáng)免疫和抗病毒、抗炎、抗氧化等作用，實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)許多中藥黃酮成分對(duì)多數(shù)動(dòng)物疫病都具有良好的防治作用，其清除氧自由基的能力更達(dá)維生素E的10倍以上。但是由于黃酮成分大多難溶于水，對(duì)于許多制劑類型使用均很不便，且在體內(nèi)代謝失活快、作用時(shí)間短，尤其是胃內(nèi)的強(qiáng)酸環(huán)境容易被破壞，也使機(jī)體對(duì)黃酮類化合物的利用率大大降低，限制了其生物功效的發(fā)揮。而由于集約化養(yǎng)殖的發(fā)展，獸醫(yī)臨床用藥基本都以拌料或飲水添加為主。因此，這就極大地限制了中藥黃酮成分在獸醫(yī)臨床上的開發(fā)利用。所以，研究提高中藥黃酮類化合物生物利用度的方法非常必要。采用現(xiàn)代制劑學(xué)技術(shù)，將其制備成緩釋和控釋劑，是提高其生物利用度，方便臨床應(yīng)用的有效方法。緩釋制劑指的是用藥后能夠在機(jī)體內(nèi)緩慢釋放的藥物，藥物在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)保持有效血藥濃度的制劑。控釋制劑則指藥物能夠恒速或者接近恒速釋放的制劑。祖國(guó)醫(yī)學(xué)早在800年前有過(guò)記載:丸者緩也，舒緩而治之。中藥中傳統(tǒng)的劑型蜜丸和蠟丸是緩釋、控釋制劑的雛形。藥物微囊化技術(shù)是近代制劑學(xué)中十分重要的研究?jī)?nèi)容，也是實(shí)現(xiàn)藥物緩釋和控釋目的的主要手段之一。微囊直接具有緩釋和腸溶兩種特性，與相應(yīng)的普通制劑比較，微囊直接能夠減少給藥頻率，增加動(dòng)物對(duì)藥物的順應(yīng)性，并且能夠避免藥物在胃內(nèi)失活和減少對(duì)胃的刺激。中藥的微囊化既具有藥物微囊普遍的生物活性，同時(shí)由于中藥本身的復(fù)雜性，使中藥的微囊化具有其特殊性。當(dāng)藥物經(jīng)過(guò)血液系統(tǒng)時(shí)，傳統(tǒng)的藥物劑型并不能有效的調(diào)整中藥在體內(nèi) 的代謝情況，而中藥的成分又是根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)的完整性而發(fā)揮其生物活性如組織或血液蛋白親和力，膜受體誘導(dǎo)親和力，酶轉(zhuǎn)化的敏感性等。而將中藥微囊化可以暫時(shí)隱藏中藥的生物活性，達(dá)到緩釋、控釋和遲釋的效果。目前已有多種中藥采用了微囊化技術(shù)。中藥微囊化的主要目的在于:掩蓋中藥的不良?xì)馕痘蚩谖叮绱┬纳弮?nèi)酯，黃連小檗喊等；提聞中藥中一些成分的穩(wěn)定性，如揮發(fā)油類；便于臨床應(yīng)用和存穩(wěn)定性；提聞生物利用度和藥物靶向作用。能否達(dá)到這些目的主要取決于微囊囊材和制備方法的選擇。本發(fā)明前期研究發(fā)現(xiàn)由淫羊藿、三七、野菊花、黃芩等中藥總黃酮成分組成的中藥黃酮成分復(fù)方可以有效提高雞新城疫疫苗免疫效果，增強(qiáng)雞群對(duì)新城疫強(qiáng)毒攻擊的抵抗，有效降低雞群發(fā)病率和死亡率。但在臨床應(yīng)用時(shí)發(fā)現(xiàn)，雖然我們?cè)谥苽湓搹?fù)方時(shí)加入了一些助溶劑增加其水溶解性，可是，在將其加入雞群飲水中飲喂時(shí)，還是有部分黃酮成分析出，難于保證雞群飲服藥量均一，也造成了藥物的浪費(fèi)。因此，改進(jìn)或改變其制劑類型，以便于臨床應(yīng)用和進(jìn)一步提高其臨床效果就變得非常必要。本發(fā)明首次將由淫羊藿、三七、野菊花、黃芩等中藥總黃酮組成中藥黃酮成分復(fù)方制備成黃酮成分復(fù)方微囊，在人工胃液中2h微囊累積溶出的中藥黃酮成分僅1.7%，微囊在酸性介質(zhì)中幾乎不釋放藥物；在人工腸液中，微囊在35min內(nèi)釋放中藥黃酮成分接近于勻速，沒(méi)有明顯的突釋現(xiàn)象，且在2h內(nèi)達(dá)98.68%，幾乎完全釋放藥物，具有顯著緩釋和控釋效果。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問(wèn)題本發(fā)明針對(duì)黃酮成分大多難溶于水，對(duì)于許多制劑類型使用均很不便，且在體內(nèi)代謝失活快、作用時(shí)間短，尤其是胃內(nèi)的強(qiáng)酸環(huán)境容易被破壞，也使機(jī)體對(duì)黃酮類化合物的利用率大大降低，限制了其生物功效的發(fā)揮；而且本發(fā)明前期研究發(fā)現(xiàn)的一種由淫羊藿、三七、野菊花、黃芩等中藥總黃酮組成中藥黃酮成分復(fù)方，雖然具有良好的增強(qiáng)雞體免疫和抗病毒作用，但在臨床飲喂雞群時(shí)，難于保證雞群飲服藥量均一等問(wèn)題，提供一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備方法，達(dá)到顯著緩釋和控釋效果，以提高其生物利用度。技術(shù)方案采用液中干燥法制備中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊。精密稱取羥丙基甲基纖維素酞酸酯(HPMCP) lg，溶于15ml丙酮中，緩慢加入IOml中藥黃酮成分復(fù)方乙醇溶液(含0.4g中藥黃酮成分)，混合，超聲除去氣泡即為分散相。精密量取160.55ml液體石蠟倒入燒杯中，緩慢加入14.45ml SpanSO，磁力攪拌均勻后，控制轉(zhuǎn)速，再緩緩加入6g分散劑硬脂酸鎂，使硬脂酸鎂均勻擴(kuò)散在液體石蠟中，繼續(xù)攪拌15min形成油相，即為連續(xù)相。10°C冰浴下將分散相按1: 7比例緩慢分散加至連續(xù)相中，繼續(xù)攪拌30min形成均乳，緩慢升溫至35°C，以300r/min速度持續(xù)攪拌30min至有機(jī)溶媒全部揮發(fā)和微囊形成；抽濾，以石油醚洗滌至無(wú)液體石蠟，繼續(xù)抽濾，待揮發(fā)至無(wú)石油醚味，以無(wú)水乙醇洗滌微囊表面殘留黃酮，保存濾液，自然干燥得黃酮成分微囊。按此方法制備的中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊外觀規(guī)整，粒徑大小在11-50 μ m之間，平均粒徑為35.77 μ m，平均包封率為91.72% ;且微囊在人工胃液中2h累積溶出的中藥黃酮成分少于2%，微囊在酸性介質(zhì)中幾乎不釋放藥物；在人工腸液中，微囊在35min內(nèi)釋放中藥黃酮成分接近于勻速，沒(méi)有明顯的突釋現(xiàn)象，且在2h內(nèi)幾乎完全釋放藥物，具有顯著的緩釋和控釋效果。

有益效果中藥黃酮類化合物具有良好的增強(qiáng)免疫和抗病毒、抗炎、抗氧化等作用，許多中藥黃酮成分對(duì)多數(shù)動(dòng)物疫病都具有良好的防治作用。但是由于黃酮成分大多難溶于水，在體內(nèi)代謝失活快、作用時(shí)間短，尤其是胃內(nèi)的強(qiáng)酸環(huán)境容易被破壞，大大降低使了機(jī)體對(duì)其的利用率。而伴隨著養(yǎng)殖業(yè)的高度集約化發(fā)展，獸醫(yī)臨床用藥基本以拌料或飲水添加為主，這就極大地限制了中藥黃酮成分在獸醫(yī)臨床上的開發(fā)利用。本項(xiàng)目前期研究發(fā)現(xiàn)的一種由淫羊藿、三七、野菊花、黃芩等中藥總黃酮成分組成中藥黃酮成分復(fù)方飲喂雞群，雖然可以有效提高雞新城疫疫苗免疫效果，增強(qiáng)雞群對(duì)新城疫強(qiáng)毒攻擊的抵抗，有效降低雞群發(fā)病率和死亡率，但在將其加入雞群飲水中飲喂時(shí)，還是有部分黃酮成分析出，難于保證雞群飲服藥量均一，也造成了藥物的浪費(fèi)。所以，采用現(xiàn)代制劑學(xué)技術(shù)，將其制備成緩釋和控釋劑，避免口服時(shí)胃酸破壞，提高其生物利用度，方便臨床應(yīng)用，非常必要。本發(fā)明利用現(xiàn)代藥劑學(xué)中微囊技術(shù)具有緩釋和腸溶的特性，將由淫羊藿、三七、野菊花、黃芩等中藥總黃酮成分組成中藥黃酮成分復(fù)方，采用液中干燥法制備成中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊。微囊外觀規(guī)整，粒徑大小均勻，平均粒徑為35.77 μ m，平均包封率達(dá)91.72%。不僅達(dá)到了緩釋和控釋目的，而且掩蓋黃酮成分的某些不良?xì)馕痘蛭兜?，并避免中藥黃酮成分在胃內(nèi)失活，同時(shí)也更便于臨床應(yīng)用。本發(fā)明作為一種中獸藥新劑型，沒(méi)有副作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)如下:1.中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道，本發(fā)明提供了一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備方法及其優(yōu)化的條件，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)外研究的空白。2.通過(guò)本發(fā)明的實(shí)施所獲得的中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊，不僅外觀規(guī)整，粒徑大小均一，平均包封率達(dá)91.72% ;而且微囊在酸性介質(zhì)中幾乎不釋放藥物，避免了中藥黃酮成分在胃內(nèi)失活，在人工腸液中沒(méi)有明顯的突釋現(xiàn)象，且在2h內(nèi)幾乎完全釋放藥物，具有顯著的緩釋和控釋效果。3.通過(guò)本發(fā)明的實(shí)施所獲得的中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊，分散性好，呈均勻的分散球狀顆粒，便于制成散劑，臨床拌料使用和保存運(yùn)輸均很方便，為研制新型中獸藥提供了材料和示范。
具體實(shí)施例方式1.中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備采用液中干燥法制備中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊。精密稱取適量羥丙基甲基纖維素酞酸酯(HPMCP)按0.8 1.2: 15 (Μ/V)溶解于丙酮中，再按1.5 3: I (M/M)與黃酮成分復(fù)方乙醇溶液混合，混勻后超聲除去氣泡即為分散相。取定量液體石蠟倒入燒杯中，力口入9% 11% Span80，磁力攪拌均勻后，控制轉(zhuǎn)速，緩緩加入分散劑硬脂酸鎂2% 5% (M/V)，使硬脂酸鎂均勻擴(kuò)散在液體石蠟中，繼續(xù)攪拌15min形成油相，即為連續(xù)相。10°C水浴下按1: 6 8的比例將分散相緩慢分散加至連續(xù)相中，繼續(xù)攪拌30min形成均乳，緩慢升溫至35°C，持續(xù)攪拌一定時(shí)間至有機(jī)溶媒全部揮發(fā)微囊形成；抽濾，以石油醚洗滌至無(wú)液體石蠟，繼續(xù)抽濾，待揮發(fā)至無(wú)石油醚味，以無(wú)水乙醇洗滌微囊表面殘留黃酮，保存濾液，自然干燥得黃酮成分微囊。首先以包封率和微囊形態(tài)為指標(biāo)，根據(jù)單因素篩選原則，考察了黃酮:HPMCP(M/M) ,HPMCP:丙酮(M/V，g/mL)、分散相:連續(xù)相(V/V)、硬脂酸鎂:液體石蠟、升溫至35°C后持續(xù)攪拌時(shí)間等5個(gè)單因素，確定黃酮:HPMCP(M/M)=1: 2 3時(shí)微囊包封率較高，分散性好、不粘結(jié)(表I) ；HPMCP:丙酮(M/V，g/mL) = 1.0: 15時(shí)，微囊形態(tài)呈球形，包封率也較好(表2);分散相:連續(xù)相(V/V) =1:7時(shí)，微囊形態(tài)呈球形，包封率和也高(表3);硬脂酸鎂的用量為液體石蠟的4%時(shí)，微囊呈分散、均勻流動(dòng)狀，且包封率也較高(表4);升溫至35°C后持續(xù)攪拌時(shí)間最宜為30min，時(shí)間過(guò)短過(guò)長(zhǎng)均使微囊形態(tài)不佳(表5)。表I不同黃酮:HPMCP(M/M)對(duì)微囊形成的影響
權(quán)利要求
1.一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備方法，用液中干燥法制備一種中藥黃酮成分復(fù)方(由淫羊藿、三七、野菊花、黃芩總黃酮組成)腸溶微囊，以單因素結(jié)合正交試驗(yàn)法優(yōu)化制備中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊。
(1)采用液中干燥法制備一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊。將適量羥丙基甲基纖維素酞酸酯(HPMCP)按0.8 1.2: 15 (Μ/V)溶解于丙酮中，再按1.5 3: I (M/M)與黃酮成分復(fù)方乙醇溶液混合，混勻后超聲除去氣泡即為分散相。取定量液體石蠟倒入燒杯中，加入9% 11% Span80(V/V)，磁力攪拌均勻后，控制轉(zhuǎn)速，緩緩加入分散劑硬脂酸鎂2% 5%(M/V)，使硬脂酸鎂均勻擴(kuò)散在液體石蠟中，繼續(xù)攪拌15min形成油相，即為連續(xù)相。10°C水浴下按1: 6 8的比例將分散相緩慢分散加至連續(xù)相中，繼續(xù)攪拌30min形成均乳，緩慢升溫至35°C，持續(xù)攪拌一定時(shí)間至有機(jī)溶媒全部揮發(fā)微囊形成；抽濾，以石油醚洗滌至無(wú)液體石蠟，繼續(xù)抽濾，待揮發(fā)至無(wú)石油醚味，以無(wú)水乙醇洗滌微囊表面殘留黃酮，保存濾液，自然干燥得黃酮成分微囊。
(2)按照上述方法制備中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的條件為=HPMCP:丙酮(Μ/V)為1.0: 15，黃酮:HPMCP(M/M)為1: 2.5，Span80用量為液體石蠟的9%，硬脂酸鎂用量為液體石蠟的4%，分散相:連續(xù)相為1: 7，升溫至35°C后持續(xù)攪拌時(shí)間為30min，攪拌速度為 300r/min。
(3)采用最佳條件制備的黃酮成分復(fù)方微囊外觀規(guī)整，粒徑大小在11-50μ m之間，平均粒徑為35.77 μ m，平均包封率為91.72%。
(4)采用最佳條件制備的黃酮成分復(fù)方微囊在人工胃液中2h微囊累積溶出的中藥黃酮成分僅1.7 %，微囊在酸性介質(zhì)中幾乎不釋放藥物；在人工腸液中，微囊在35min內(nèi)釋放中藥黃酮成分接近于勻速，沒(méi)有明顯的突釋現(xiàn)象，且在2h內(nèi)達(dá)98.68%，幾乎完全釋放藥物，具有顯著的緩釋 和控釋效果。
2.權(quán)利要求1所述方法獲得的中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊具有顯著緩釋和控釋效果。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊的制備方法，屬于中獸藥制備技術(shù)領(lǐng)域。用液中干燥法制備中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊，以包封率和微囊形態(tài)為指標(biāo)，先用單因素法篩選確定HPMCP∶丙酮＝1.0∶15，分散相∶連續(xù)相＝1∶7，硬脂酸鎂占液體石蠟的4％，攪拌時(shí)間30min，再以正交試驗(yàn)法優(yōu)選了3個(gè)關(guān)鍵因素，確定最佳條件為黃酮HPMCP＝1∶2.5，Span80占液體石蠟9％，攪拌速度300r/min。按最佳條件制備的黃酮成分復(fù)方腸溶微囊外觀規(guī)整，粒徑為11-50μm，平均包封率91.72％；在人工胃液和腸液中呈明顯的緩釋和控釋效應(yīng)。本發(fā)明中藥黃酮成分復(fù)方腸溶微囊具有顯著的緩釋和控釋效果。
文檔編號(hào)A61K36/539GK103239508SQ20131020250
公開日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2013年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月28日
發(fā)明者劉家國(guó), 孫占鰲, 王德云, 武毅, 胡元亮, 黃兵, 馬秀麗, 蘭鄒然, 王靜, 方信, 王璐 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)