一種新型天然活性藥物及其制備與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體來(lái)說(shuō)，涉及一種新型天然活性藥物及其制備與應(yīng)用。本發(fā)明所述新型天然活性藥物的分子式為：CwH380n，具體制法為：取五味子的莖或葉，乙醇常溫浸提，得浸膏；取浸膏，用水混懸后依次用石油醚、乙酸乙酯萃??；取乙酸乙酯萃取物，用SEPHDEXLH-20柱色譜分離；取55-65%甲醇/水部分溶劑后再用硅膠柱色譜分離；合并80:20-50:50石油醚/乙酸乙酯提取物，再用半制備高效液相色譜進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為270-280nm，收集45:55-55:45的甲醇/水部分，結(jié)晶，得到新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B。本發(fā)明所述新型天然活性藥物用于抗菌、抗癌藥物的制備。
【專利說(shuō)明】一種新型天然活性藥物及其制備與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體來(lái)說(shuō)，涉及一種新型天然活性藥物及其制備與應(yīng) 用。

【背景技術(shù)】
[0002] 五味子為木蘭科五味子屬和南五味子屬植物的泛稱。全世界約有50種，主要分布 在東亞地區(qū)。在我國(guó)五味子屬約有20種，南五味子屬有10種，分布于西南、華南至東北地 區(qū)。其中，有19種可供藥用，最具經(jīng)濟(jì)價(jià)值的是五味子屬中的五味子，其次為華中五味子。 長(zhǎng)期以來(lái)，人們根據(jù)產(chǎn)地不同，習(xí)饋地把產(chǎn)于東北三省及內(nèi)蒙古的稱北五味子；產(chǎn)于南方的 稱南五味子；產(chǎn)于西北地區(qū)的稱西五味子。中藥五味子為五味子的干燥成熟果實(shí)，味酸、 甘，性溫，有收斂固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心的功能，用于久嗽虛喘、夢(mèng)遺滑精、遺尿尿頻、久 瀉不止、自汗、盜汗、津傷口渴、短氣脈虛、內(nèi)熱消渴、心悸失眠等癥。五味子在中醫(yī)臨床中應(yīng) 用廣泛，近年來(lái)對(duì)五味子化學(xué)和藥理的深人研究，對(duì)認(rèn)識(shí)五味子及其成分多方面的藥理作 用及臨床傳統(tǒng)應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。
[0003] 現(xiàn)代科學(xué)研究證明，五味子中含有揮發(fā)油、有機(jī)酸。維生素、木脂素、三萜、倍半萜 及多糖等多種化學(xué)成分。五味子對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥、保護(hù)腦神經(jīng)細(xì)胞、 促進(jìn)腦內(nèi)蛋白質(zhì)的合成及改善智力體力等作用，對(duì)心血管系統(tǒng)具有降壓、鈣拮抗活性、抗心 動(dòng)過(guò)速、抗缺氧、抗急性心肌缺血損傷作用，以及抗氧化、延緩衰老、抗腫瘤、抗菌、抗?jié)兊?作用。目前，五味子大部分的功效都得到了相關(guān)物質(zhì)基礎(chǔ)的支持，但在抗菌與抗腫瘤方面還 有所欠缺，有待進(jìn)行深入的研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)上述問(wèn)題，通過(guò)實(shí)驗(yàn)與研究，本發(fā)明提供了一種新型天然活性藥物及其制備 與應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明所述新型天然活性藥物命名為五味子雙內(nèi)酯酮B，分子式為：C3tlH 38O11，結(jié)構(gòu) 式如圖1。
[0006] 本發(fā)明所述新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B的制備方法，所述方法具體為： 取五味子的莖或葉，粉碎后干燥，用乙醇常溫提取，提取液減壓回收去除甲醇，得浸膏；取浸 膏，用水混懸后依次用石油醚、乙酸乙酯萃??；取乙酸乙酯萃取物，用SEPHDEX LH-20柱色 譜分離，洗脫劑依次為水、20-28%甲醇/水、55-65%甲醇/水及100%甲醇；取55-65%甲醇 /水部分減壓去除溶劑后，再用硅膠柱色譜分離，洗脫系統(tǒng)為石油醚：乙酸乙酯，比例依次 為100 :0、80:20、65:35、50:50、0:100 ;合并80:20-50:50石油醚/乙酸乙酯提取物，再用半 制備高效液相色譜進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為270-280nm，流動(dòng)相依次為30:70 - 80:20的甲 醇/水系統(tǒng)，收集45:55 - 55:45的甲醇/水部分，濃縮至將混濁，加熱后放置，析出晶體，甲 醇/水重結(jié)晶，得到新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B。
[0007] 本發(fā)明所述新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B的應(yīng)用，所述新型天然活性藥物 五味子雙內(nèi)酯酮B用于抗菌藥物的制備。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0008] 圖1 :表示新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B的結(jié)構(gòu)式。
[0009] 圖2 :表示新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B的圓二色光譜，為虛線。
[0010] 圖3 :表不五味子雙內(nèi)酯酮B與空白對(duì)照的抑大腸桿菌效果圖。
[0011] 圖4 :表示五味子雙內(nèi)酯酮B與空白對(duì)照的抑葡萄球菌效果圖。
[0012] 圖5 :表示核磁共振數(shù)據(jù)的表1及抑菌直徑的表2。

【具體實(shí)施方式】
[0013] 下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明所述的制備方法做進(jìn)一步說(shuō)明，但是本發(fā)明的保 護(hù)范圍并不限于此。
[0014] 實(shí)施例1 :取5 kg五味子的莖或葉，粉碎后干燥，用40L乙醇常溫浸提3次，每次 浸泡7 d，提取液減壓回收去除甲醇，得浸膏631g;取浸膏，用2 L水混懸后依次用2 L石油 醚、2 L乙酸乙酯萃取兩次；取乙酸乙酯萃取物86 g，用SEPHDEX LH-20柱色譜分離，洗脫劑 依次為水、20%甲醇/水、55%甲醇/水及100%甲醇，薄層跟蹤成分變化；取55%甲醇/水部 分減壓去除溶劑后，得32 g膏狀物，再用硅膠柱色譜分離，洗脫系統(tǒng)為石油醚：乙酸乙酯， 比例依次為100:0、80:20、65:35、50:50、0:100 ;合并80:20-50:50石油醚/乙酸乙酯提取 物，再用半制備高效液相色譜進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為278nm，流動(dòng)相依次為30:70、45:55、 80:20的甲醇/水系統(tǒng)，收集45:55的甲醇/水部分，濃縮至將混濁，加熱后放置，析出晶體， 取晶體用5:1的甲醇/水重結(jié)晶，得到新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B 8mg。
[0015] 實(shí)施例2 :取5 kg五味子的莖或葉，粉碎后干燥，用35L乙醇常溫浸提3次，每次 浸泡8 d，提取液減壓回收去除甲醇，得浸膏601g;取浸膏，用2 L水混懸后依次用2 L石油 醚、2 L乙酸乙酯萃取兩次；取乙酸乙酯萃取物81 g，用SEPHDEX LH-20柱色譜分離，洗脫劑 依次為水、25%甲醇/水、65%甲醇/水及100%甲醇，薄層跟蹤成分變化；取65%甲醇/水部 分減壓去除溶劑后，得36 g膏狀物，再用硅膠柱色譜分離，洗脫系統(tǒng)為石油醚：乙酸乙酯， 比例依次為100:0、80:20、65:35、50:50、0:100 ;合并80:20-50:50石油醚/乙酸乙酯提取 物，再用半制備高效液相色譜進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為278nm，流動(dòng)相依次為30:70、50:50、 80:20的甲醇/水系統(tǒng)，收集50:50的甲醇/水部分，濃縮至將混濁，加熱后放置，析出晶體， 取晶體用5:1的甲醇/水重結(jié)晶，得到新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B llmg。
[0016] 五味子雙內(nèi)酯酮B:白色無(wú)定形粉末；[a]24D = +24 (c=0. 02 in MeOH) ; ECD (MeOH), Amax [nm] (Δε), c = 0.001) : 307 (18.28), 271 (- 14.47) nm; IR (KBr): v = 3421，2918，2850，1764，1701，1630，1460，1077，475 cnf1; UV λ _ (Ioge) 278 (+3.24) nm; 1H and 13C NMR (C5D5N),見表 I; HR-ESMS m/z: [M+Na]+，597.2312。
[0017] 藥理實(shí)驗(yàn)：將牛肉膏蛋白胨熔化倒入平板，劃線，制成分別含大腸桿菌、金黃色葡萄 球菌平板；取直徑6mm的無(wú)菌濾紙放入飽和五味子雙內(nèi)酯酮B溶液中浸泡5min，用無(wú)菌鑷子 取出浸泡過(guò)的濾紙片，并在容器內(nèi)壁上濾去多余的藥液，貼在含菌平板上，每皿貼3片，每菌 做2次重復(fù);將貼好濾紙片的平板倒置于37°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h，取出測(cè)定抑菌圈直徑。以空 白作對(duì)照，五味子雙內(nèi)酯酮B對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的作用見圖3、圖4及表2。
【權(quán)利要求】
1. 一種新型天然活性藥物，其特征在于，所述新型天然活性藥物命名為五味子雙內(nèi)酯 酮B，分子式為：C 3tlH38O11,結(jié)構(gòu)式如下：
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B的制備方法，其特征在 于，所述方法具體為：取五味子的莖或葉，粉碎后干燥，用乙醇常溫提取，提取液減壓回收去 除甲醇，得浸膏；取浸膏，用水混懸后依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取物，用 SEPHDEX LH-20柱色譜分離，洗脫劑依次為水、20-28%甲醇/水、55-65%甲醇/水及100% 甲醇；取55-65%甲醇/水部分減壓去除溶劑后，再用硅膠柱色譜分離，洗脫系統(tǒng)為石油醚： 乙酸乙酯，比例依次為100:0、80:20、65:35、50:50、0:100 ;合并80:20-50:50石油醚/乙酸 乙酯提取物，再用半制備高效液相色譜進(jìn)行分離，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為270-280nm，流動(dòng)相依次為 30:70 - 80:20的甲醇/水系統(tǒng)，收集45:55 - 55:45的甲醇/水部分，濃縮至將混濁，加熱后 放置，析出晶體，甲醇/水重結(jié)晶，得到新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B的應(yīng)用，其特征在于，所述 新型天然活性藥物五味子雙內(nèi)酯酮B用于抗菌藥物的制備。
【文檔編號(hào)】A61K31/365GK104211711SQ201310219596
【公開日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2013年6月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月5日
【發(fā)明者】李林福 申請(qǐng)人:贛南醫(yī)學(xué)院