一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法
【專利摘要】一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，以市售脫脂大米蛋白以及膠原蛋白原料，先制備小分子大米蛋白肽溶液、再制備小分子膠原蛋白肽溶液、然后制備復(fù)合蛋白液、最后制備復(fù)合蛋白面貼膜。本發(fā)明生產(chǎn)的復(fù)合蛋白面貼膜不僅將有效成分大米蛋白-膠原蛋白復(fù)合蛋白經(jīng)縮水甘油醚的醚鍵結(jié)合在纖維素?zé)o紡布面膜紙上，結(jié)合牢固且不易脫落，可反復(fù)使用，降低成本，還結(jié)合了大米蛋白無過敏性與膠原蛋白親膚性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)皮膚溫和無刺激，此外對(duì)營(yíng)養(yǎng)及功能性因子的吸附力弱，易滲透進(jìn)入到皮膚中，可及時(shí)補(bǔ)充肌膚營(yíng)養(yǎng)。將本發(fā)明制備出的復(fù)合蛋白面貼膜加入一定量的保濕劑、抗氧化劑、乳化劑和香精等營(yíng)養(yǎng)因子，裝袋即制備出不同類型的面膜成品，用途廣泛。
【專利說明】一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法
一、【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于面膜制備領(lǐng)域，具體涉及一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法。
二、【背景技術(shù)】
[0002]面膜是現(xiàn)代女性護(hù)膚品中必不可少的保養(yǎng)用品，它覆蓋于皮膚表面，起到隔離空氣、浸潤(rùn)、軟化角質(zhì)層、擴(kuò)張毛孔和汗腺口、促進(jìn)皮膚血液循環(huán)及面膜中活性成分滲入皮膚等作用，受到越來越多消費(fèi)者的喜愛。目前市場(chǎng)上的面貼膜均以人造纖維無紡布或天然纖維無紡布經(jīng)折疊、裝袋、注入浸泡液、封口等工序制造而成的，如臺(tái)灣統(tǒng)一藥品有限公司自創(chuàng)的我的美麗日記系列面膜和美即控股國(guó)際有限公司的MG牌面膜。這些面膜雖能達(dá)到一定的美容護(hù)膚效果，但是也存在如下明顯缺陷:(I)無紡布面膜與皮膚親和力不佳，僅僅是精華液的載體，皮膚與之接觸時(shí)有明顯異樣反應(yīng)；(2)無紡布面膜吸附量低，致使大量精華液殘留于面膜袋或滴落，未能得到有效利用；(3)添加了化學(xué)防腐劑如煙酰胺、水楊酸、維生素A醇等，存在安全隱患。
[0003]現(xiàn)有的制備無紡布面膜的方法，如申請(qǐng)?zhí)枮?01010563458.X的“一種復(fù)合型美容面膜的配方及其制作工藝”專利，公開的方法是:配方為，青瓜:10 ;蘋果:25 ;葡萄:20 ;苦瓜:10 ;梨子:15 ;西瓜:20 ;香蕉:5 ;絲瓜:5 ;櫻桃:5 ;檸檬:5 ;馬鈴薯:5 ;芹菜:5(按公斤計(jì))。制備工藝是，按照配方選擇材料并榨取果蔬精液100公斤，浸于復(fù)合無紡布上經(jīng)無紡布吸收、再經(jīng)成型、無菌包裝，制成美容面膜。該方法的主要缺點(diǎn)是:制備果蔬精液需要消耗大量的水果以及蔬菜，這些果蔬并不同季上市，這就需要對(duì)果蔬進(jìn)行特殊的保存處理，生產(chǎn)成本增高；果蔬榨汁后留下大量殘?jiān)催M(jìn)行處理，污染環(huán)境；果蔬精液用無紡布吸收，僅僅只是物理吸附，不同果蔬的吸附性不同，無法使其緊密的結(jié)合在無紡布上，導(dǎo)致取出使用時(shí)大量果蔬精液殘留在面膜袋中，敷面膜時(shí)也會(huì)造成大量精液滴落，不能使果蔬精液得到有效利用；果蔬精液由于含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，極易變質(zhì)，必須添加防腐劑等以保證面膜不腐敗，而防腐劑對(duì) 皮膚會(huì)有一定的損害。
三、
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有面膜制備方法的不足，提供一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，其特點(diǎn)在于無紡布纖維與復(fù)合蛋白膜共價(jià)結(jié)合、不易脫落，具有親膚性好、吸附量大、補(bǔ)水美白、營(yíng)養(yǎng)、表皮修護(hù)等美容護(hù)膚功效。
[0005]本發(fā)明的主要原理是:大米蛋白是公認(rèn)的優(yōu)質(zhì)植物蛋白，顏色淺，必需氨基酸組成平衡并且谷氨酰胺的含量豐富，屬于人體無過敏反應(yīng)的低抗原型蛋白。在蛋白酶作用下，大米蛋白水解，塵成大米蛋白水解物；膠原蛋白是一種白色、不透明、無支鏈的纖維性蛋白質(zhì)，賴氨酸含量高，親膚性強(qiáng)，可以補(bǔ)充皮膚各層所需的營(yíng)養(yǎng)，使皮膚中膠原活性增強(qiáng)；在蛋白酶作用下，膠原蛋白水解成膠原蛋白水解物；轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)多肽的交聯(lián)反應(yīng)，在適宜情況下，可催化大米蛋白水解物中谷氨酰胺的Y-酰胺基團(tuán)與膠原蛋白水解物中的賴氨酸ε-氨基反應(yīng)，塵成ε-(Y-谷胺?；?賴氨酸衍塵物，g卩合成大米蛋白水解物-膠原蛋白水解物復(fù)合蛋白。膠原蛋白、大米蛋白中的羥基氨基酸和無紡布基材纖維素中的羥基在弱堿性條件下均可以與縮水甘油醚發(fā)生醚化反應(yīng)，于是就制備出通過醚鍵連接的無紡布-復(fù)合蛋白面貼膜。
[0006]實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是:一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，以市售脫脂大米蛋白為原料，先制備小分子大米蛋白肽溶液、再制備小分子膠原蛋白肽溶液、然后制備復(fù)合蛋白液、最后制備出復(fù)合蛋白面貼膜。其具體的步驟如下:
[0007](I)制備小分子大米蛋白肽溶液
[0008]以市售脫脂大米蛋白為原料，按照脫脂大米蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 8~12的比例，先向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2000~3000r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為8~10，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至50~60°C，加入0.5~4%堿性蛋白酶，進(jìn)行酶解I~2h，再加入0.5~3%風(fēng)味蛋白酶繼續(xù)酶解2~4h。酶解完成后將溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為2500~3500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集離心上清液和離心沉淀，對(duì)收集的離心上清液，即為分子量為500~1000Da的小分子大米蛋白肽溶液，用于制備復(fù)合蛋白液；對(duì)收集的離心沉淀，含有大量蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用于制造發(fā)酵飼料。
[0009](2)制備小分子膠原蛋白肽溶液
[0010]以市售脫脂膠原蛋白為原料，按照脫脂膠原蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 10~15的比例，向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2000~3000r/min的條件下投入脫脂膠原蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為8~10，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至50~60°C,加入0.5~4%的堿性蛋白酶酶解I~2h,接著加入0.5~3%木瓜蛋白酶繼續(xù)酶解2~4h，酶解完成后將此溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為2500~3500r/min 的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集上清液和沉淀，對(duì)于收集的上清液，即為分子量是800~2000Da的小分子膠原蛋白肽溶液,用于下一步制備復(fù)合蛋白液；對(duì)于收集的沉淀，含有大量蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用于制造發(fā)酵飼料。
[0011](3)制備復(fù)合蛋白液
[0012]第(I)、第(2)步完成后，先將第(I)步制備出的小分子大米蛋白肽溶液與第(2)步制備出的小分子膠原蛋白肽溶液等比例混合，再投入反應(yīng)釜中，在攪拌下向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至35~45°C，然后加入0.5~5%的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，在攪拌下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)3~4h，就制備出復(fù)合蛋白液，收集復(fù)合蛋白液，用于下一步制備復(fù)合蛋白面貼膜。
[0013](4制備復(fù)合蛋白面貼膜
[0014]第(3)步完成后，先將第(3)步制備出的復(fù)合蛋白液置于不銹鋼盤，再將市售纖維無紡布面膜紙浸沒于其中，纖維無紡布面膜紙數(shù)量(張)與復(fù)合蛋白液體積(HiL)之比為
I: 20~35。將盛有復(fù)合蛋白液和纖維無紡布面膜紙的不銹鋼盤固定于恒溫震蕩水浴上，控制震蕩頻率為30~90次/min，水浴溫度為50~70°C，加入縮水甘油醚，進(jìn)行醚化反應(yīng)I~2h。反應(yīng)完成后，分別收集盤中的溶液和醚化后的纖維無紡布面膜紙。對(duì)收集的盤中溶液，補(bǔ)充復(fù)合蛋白液和縮水甘油醚，可用于下一批次復(fù)合蛋白膜的制備；對(duì)收集的醚化后的纖維無紡布面膜紙，置于純凈水中反復(fù)洗滌，直至洗滌液中無蛋白質(zhì)時(shí)止，就制備出復(fù)合蛋白面貼膜。此處縮水甘油醚指1，2_環(huán)己二醇二縮水甘油醚，或1，4 丁二醇二縮水甘油醚，或乙二醇二縮水甘油醚，或丙三醇縮水甘油醚,或烯丙基縮水甘油醚。[0015]本發(fā)明采用上述技術(shù)方案后，主要有以下效果:
[0016](I)本發(fā)明生產(chǎn)的復(fù)合蛋白面貼膜結(jié)合了大米蛋白無過敏性與膠原蛋白親膚性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)皮肽溫和無刺激；復(fù)合面貼膜對(duì)營(yíng)養(yǎng)及功能性因子的吸附力弱，易滲透進(jìn)入到皮膚中，達(dá)到及時(shí)補(bǔ)充肌膚營(yíng)養(yǎng)，舒緩皮膚，減少細(xì)小皺紋的效果；
[0017](2)本發(fā)明生產(chǎn)的面貼膜將有效成分大米蛋白-膠原蛋白復(fù)合蛋白經(jīng)縮水甘油醚的醚鍵結(jié)合在纖維素?zé)o紡布面膜紙上，結(jié)合牢固使得有效成分不易脫落，可反復(fù)使用，降低了成本；
[0018](3)本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單。本發(fā)明使用常規(guī)的生產(chǎn)設(shè)備在溫和的條件下進(jìn)行生產(chǎn)，操作簡(jiǎn)便且易于控制，能源消耗少，塵產(chǎn)成本低，便于推廣。
[0019]本發(fā)明方法可廣泛用于制備復(fù)合蛋白面貼膜。將本發(fā)明制備出的復(fù)合蛋白面貼膜加入一定量的保濕劑、抗氧化劑、乳化劑和香精等營(yíng)養(yǎng)因子，裝袋即制備出不同類型的面貼膜成品，用途廣泛。
四、【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，進(jìn)一步說明本發(fā)明。
[0021]實(shí)施例1
[0022]一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，所述方法的具體步驟如下:
[0023](I)制備小分子大米蛋白肽溶液
[0024]以市售脫脂大米蛋白為原料，按照脫脂大米蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 8的比例，先 向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2000r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為8，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至50°C，加入0.5%堿性蛋白酶，進(jìn)行酶解lh，再加入0.5%風(fēng)味蛋白酶繼續(xù)酶解2h，酶解完成后將溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為2500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集離心上清液和離心沉淀，對(duì)收集的離心上清液，即為分子量為1000Da的小分子大米蛋白肽溶液，用于制備復(fù)合蛋白液；對(duì)收集的離心沉淀，含有大量蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用于制造發(fā)酵飼料。
[0025](2)制備小分子膠原蛋白肽溶液
[0026]以市售脫脂膠原蛋白為原料，按照膠原蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為
I: 10的比例，向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2000r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為8，然后再向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至50°C，加Λ 0.5%的堿性蛋白酶酶解lh，接著加入0.5%木瓜蛋白酶繼續(xù)酶解2h，酶解完成后將此溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為2500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集上清液和沉淀，對(duì)于收集的上清液，即為分子量是2000Da的小分子膠原蛋白肽溶液，用于下一步制備復(fù)合蛋白液；對(duì)于收集的沉淀，含有大量蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用于制造發(fā)酵飼料。
[0027](3)制備復(fù)合蛋白液
[0028]第(I)、(2)步完成后，先將第(I)步制備出的小分子大米蛋白肽溶液與第(2)步制備出的小分子膠原蛋白肽溶液等比例混合，再投入反應(yīng)釜中，在攪拌下向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至35 V，然后加入0.5 %的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，在攪拌下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)3h，就制備出復(fù)合蛋白液，收集復(fù)合蛋白液，用于下一步制備復(fù)合蛋白面貼膜。[0029](4制備復(fù)合蛋白面貼膜
[0030]第(3)步完成后，先將第(3)步制備出的復(fù)合蛋白液置于不銹鋼盤，再將市售纖維無紡布面膜紙浸沒于其中，纖維無紡布面膜紙數(shù)量(張)與復(fù)合蛋白液體積(HiL)之比為
I: 20，將盛有復(fù)合蛋白液和纖維無紡布面膜紙的不銹鋼盤固定于恒溫震蕩水浴上，控制震蕩頻率為30次/min，水浴溫度為50°C，加入縮水甘油醚，進(jìn)行醚化反應(yīng)lh，反應(yīng)完成后，分別收集盤中的溶液和醚化后的纖維無紡布面膜紙，對(duì)收集的盤中溶液，補(bǔ)充復(fù)合蛋白液和縮水甘油醚，可用于下一批次復(fù)合蛋白膜的制備，對(duì)收集的醚化后的纖維無紡布面膜紙，置于純凈水中反復(fù)洗滌，直至洗滌液中無蛋白質(zhì)時(shí)止，就制備出復(fù)合蛋白面貼膜，此處縮水甘油醚指1，2-環(huán)己二醇二縮水甘油醚，或1，4 丁二醇二縮水甘油醚，或乙二醇二縮水甘油醚，或丙三醇縮水甘油醚，或烯丙基縮水甘油醚。
[0031]實(shí)施例2
[0032]一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，同實(shí)施例1，其中:
[0033]第⑴步中，按照脫脂大米蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 10的比例，先向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2500r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為9，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至55°C，加入2.5%堿性蛋白酶，進(jìn)行酶解1.5h，再加入2%風(fēng)味蛋白酶繼續(xù)酶解3h，酶解完成后將溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為3000r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集離心上清液和離心沉淀，對(duì)收集的離心上清液，即為分子量為613Da的小分子大米蛋白肽溶液，用于制備復(fù)合蛋白液。
[0034]第⑵步中，，按照膠原蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 13的比例，向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2500r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)p H為9，然后再向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至55°C，加入2.5 %的堿性蛋白酶酶解1.5h，接著加入2%木瓜蛋白酶繼續(xù)酶解3h，酶解完成后將此溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為3000r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集上清液和沉淀，對(duì)于收集的上清液，即為分子量是1362Da的小分子膠原蛋白肽溶液，用于下一步制備復(fù)合蛋白液。
[0035]第(3)步中，先將第(I)步制備出的小分子大米蛋白肽溶液與第(2)步制備出的小分子膠原蛋白肽溶液等比例混合，再投入反應(yīng)釜中，在攪拌下向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至40°C，然后加入3.5%的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，在攪拌下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)3.5h。
[0036]第(4)步中，先將第(3)步制備出的復(fù)合蛋白液置于不銹鋼盤，再將市售纖維無紡布面膜紙浸沒于其中，纖維無紡布面膜紙數(shù)量(張)與復(fù)合蛋白液體積(HiL)之比為1: 28。將盛有復(fù)合蛋白液和纖維無紡布面膜紙的不銹鋼盤固定于恒溫震蕩水浴上，控制震蕩頻率為60次/min，水浴溫度為60°C，加入縮水甘油醚，進(jìn)行醚化反應(yīng)1.5h。
[0037]實(shí)施例3
[0038]一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，同實(shí)施例1，其中:
[0039]第⑴步中，按照脫脂大米蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 12的比例，先向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為3000r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為10，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至60°C，加入4%堿性蛋白酶，進(jìn)行酶解2h，再加入3%風(fēng)味蛋白酶繼續(xù)酶解4h。酶解完成后將溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為3500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，對(duì)收集的離心上清液，即為分子量為500Da的小分子大米蛋白肽溶液，用于制備復(fù)合蛋白液。
[0040]第⑵步中，按照膠原蛋白質(zhì)量(kg):純凈水體積(L)之比為1: 15的比例，向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為3000r/min的條件下投入膠原蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)PH為10，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至60°C，加入4%的堿性蛋白酶酶解2h，接著加入3%木瓜蛋白酶繼續(xù)酶4h，酶解完成后將此溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為3500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集上清液和沉淀，對(duì)于收集的上青液，即為分子量是SOODa的小分子膠原蛋白肽溶液。
[0041]第(3)步中，先將第(I)步制備出的小分子大米蛋白肽溶液與第(2)步制備出的小分子膠原蛋白肽溶液等比例混合，再投入反應(yīng)釜中，在攪拌下向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至45 V，然后加入5 %的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，在攪拌下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)4h，就制備出復(fù)合蛋白液，收集復(fù)合蛋白液，用于下一步制備復(fù)合蛋白面貼膜。
[0042]第(4)步中，先將第(3)步制備出的復(fù)合蛋白液置于不銹鋼盤，再將市售纖維無紡布面膜紙浸沒于其中，纖維無紡布面膜紙數(shù)量(張)與復(fù)合蛋白液體積(HiL)之比為1: 35。將盛有復(fù)合蛋白液和纖維無紡布面膜紙的不銹鋼盤固定于恒溫震蕩水浴上，控制震蕩頻率為90次/min，水浴溫 度為70°C，加入縮水甘油醚，進(jìn)行醚化反應(yīng)2h。
【權(quán)利要求】
1.一種制備親膚性復(fù)合蛋白面貼膜的新方法，其特征在于所述方法的具體步驟如下: (1)制備小分子大米蛋白肽溶液 以市售脫脂大米蛋白為原料，按照脫脂大米蛋白質(zhì)量:純凈水體積之比為Ikg: 8~12L的比例，先向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2000~3000r/min的條件下投入脫脂大米蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為8~10，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至50~60°C，加入0.5~4%堿性蛋白酶，進(jìn)行酶解I~2h，再加入0.5~3%風(fēng)味蛋白酶繼續(xù)酶解2~4h，酶解完成后將溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為2500~3500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集離心上清液和離心沉淀，對(duì)收集的離心上清液，即為分子量為500~1000Da的小分子大米蛋白肽溶液； (2)制備小分子膠原蛋白肽溶液 以市售脫脂膠原蛋白為原料，按照脫脂膠原蛋白質(zhì)量:純凈水體積之比為Ikg: 10~15L的比例，向反應(yīng)罐中泵入純凈水，再在轉(zhuǎn)速為2000~3000r/min的條件下投入脫脂膠原蛋白，邊攪拌邊加入稀NaOH溶液調(diào)節(jié)pH為8~10，然后向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至50~60°C，加入0.5~4%的堿性蛋白酶酶解I~2h，接著加入0.5~3%木瓜蛋白酶繼續(xù)酶解2~4h，酶解完成后將此溶液泵入臥式螺旋離心機(jī)中，在轉(zhuǎn)速為2500~3500r/min的條件下進(jìn)行離心分離，分別收集上清液和沉淀，對(duì)于收集的上清液，即為分子量是800~2000Da的小分子膠原蛋白肽溶液； (3)制備復(fù)合蛋白液 第(I)、(2)步完成后，先將第(I)步制備出的小分子大米蛋白肽溶液與第(2)步制備出的小分子膠原蛋白肽溶液等比例混合，再投入反應(yīng)釜中，在攪拌下向反應(yīng)釜夾層通入蒸汽，升溫至35~45°C，然后加入0.5~5 %的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶，在攪拌下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)3~4h ； (4制備復(fù)合蛋白面貼膜 第(3)步完成后，先將第(3)步制備出的復(fù)合蛋白液置于不銹鋼盤，再將市售纖維無紡布面膜紙浸沒于其中，按照纖維無紡布面膜紙數(shù)量與復(fù)合蛋白液體積之比為I張:20~35mL，將盛有復(fù)合蛋白液和纖維無紡布面膜紙的不銹鋼盤固定于恒溫震蕩水浴上，控制震蕩頻率為30~90次/min，水浴溫度為50~70°C，加入縮水甘油醚，進(jìn)行醚化反應(yīng)I~2h，反應(yīng)完成后，分別收集盤中的溶液和醚化后的纖維無紡布面膜紙，對(duì)收集的盤中溶液，補(bǔ)充復(fù)合蛋白液和縮水甘油醚，可用于下一批次復(fù)合蛋白膜的制備，對(duì)收集的醚化后的纖維無紡布面膜紙，置于純凈水中反復(fù)洗滌，直至洗滌液中無蛋白質(zhì)時(shí)止，此處縮水甘油醚指1，2-環(huán)己二醇二縮水甘油醚，或1，4 丁二醇二縮水甘油醚，或乙二醇二縮水甘油醚，或丙三醇縮水甘油醚，或烯丙基縮水甘油醚。
【文檔編號(hào)】A61K8/64GK103845228SQ201310297098
【公開日】2014年6月11日 申請(qǐng)日期:2013年7月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月8日
【發(fā)明者】余文琴, 周小華, 顏李秀, 萬玉萍, 馮琳, 陸文立 申請(qǐng)人:重慶大學(xué)