Chukrasone B在治療肝癌藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了Chukrasone?B在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用，屬于藥物新用途【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明通過體外MTT抗腫瘤活性評價發(fā)現(xiàn)，Chukrasone?B對人肝癌細(xì)胞株HepG2、MHCC-LM3、Bel-7402和HuH-7的生長也具有顯著的抑制作用。因此，Chukrasone?B能用于制備抗肝癌藥物，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。本發(fā)明涉及Chukrasone?B在制備治療肝癌藥物中的用途屬于首次公開，由于骨架類型屬于全新的骨架類型，而且其對于肝癌細(xì)胞的抑制活性強(qiáng)得意想不到。
【專利說明】Chukrasone B在治療肝癌藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化合物Chukrasone B的新用途,尤其涉及Chukrasone B在制備抗肝癌藥物中的應(yīng)用。
技術(shù)背景
[0002]癌癥是對人類生命健康危害最大的疾病之一，毎年都有大量的人死于癌癥?？拱┧幬锏难邪l(fā)一直是藥學(xué)研究的熱點(diǎn)?？鼓[瘤藥物中有74%是天然產(chǎn)物或其衍生物，如紫杉醇及其衍生物就是目前臨床上應(yīng)用效果比較好的抗腫瘤藥物。因此，從天然產(chǎn)物中尋找抗癌化合物或先導(dǎo)化合物具有重要的意義。
[0003]本發(fā)明涉及的化合物Chukrasone B是ー個2012年發(fā)表(Liu, Η.Β.et al., 2012.Chukrasones A and B:Potential Kvl.2Potassium Channel Blockers with NewSkeletons from Chukrasia tabularis.0rganic Lettersl4(17)，4438 - 4441.)的新骨架化合物，該化合物擁有全新的骨架類型，目前的用途僅僅涉及鉀離子通道抑制活性，對于本發(fā)明涉及的在制備治療肝癌藥物中的用途屬于首次公開，而且由于骨架類型屬于全新的骨架類型，不存在由其他化合物給出任何啟示的可能，具備突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)，同時用于肝癌的防治顯然具有顯著的進(jìn)步。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供化合物Chukrasone B在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:Chukrasone B在制備抗肝癌藥物中的應(yīng)用，Chukrasone B的結(jié)構(gòu)式如式(I )所示:
[0006]
KO
n.r = ? f
1 "OH1

OH
式(I )
[0007]本發(fā)明通過體外MTT抗腫瘤活性評價發(fā)現(xiàn),Chukrasone B對人肝癌細(xì)胞株HepG2、MHCC-LM3、Bel-7402和HuH_7的生長也具有顯著的抑制作用，抑制這4株細(xì)胞生長的IC50 值分別為 4.21±0.48μΜ、3.23±0.43μΜ、5.47±0.57 μ Μ 和 7.13±0.79 μ Μ。因此，Chukrasone B能用于制備抗肝癌藥物,具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
[0008]本發(fā)明涉及Chukrasone B在制備治療肝癌藥物中的用途屬于首次公開，由于骨架類型屬于全新的骨架類型，而且其對于肝癌細(xì)胞的抑制活性強(qiáng)得意想不到，不存在由其他化合物給出任何啟示的可能，具備突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)，同時用于肝癌的防治顯然具有顯著的進(jìn)步。
[0009]以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)ー步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí)施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0010]本發(fā)明所涉及化合物Chukrasone B的制備方法參見文獻(xiàn)(Liu, Η.Β.et al., 2012.Chukrasones A and B:Potential Kvl.2Potassium Channel Blockers with NewSkeletons from Chukrasia tabularis.0rganic Lettersl4(17)，4438 - 4441.)。
[0011]以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)ー步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí)施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
[0012]實(shí)施例1:本發(fā)明所涉及化合物Chukrasone B片劑的制備:
[0013]取20克化合物Chukrasone B,加入制備片劑的常規(guī)輔料180克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成1000片。
[0014]實(shí)施例2:本發(fā)明所涉及化合物Chukrasone B膠囊劑的制備:
[0015]取20克化合物Chukrasone B,加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉180克，混勻，裝膠囊制成1000片。
[0016]下面通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來進(jìn)ー步說明其藥物活性。
[0017]實(shí)驗(yàn)例:采用MTT法評價化合物Chukrasone B對人肝癌細(xì)胞株的生長抑制作用
[0018]1.方法:處于生長對數(shù)期的細(xì)胞:人肝癌細(xì)胞株Η印G2、MHCC-LM3、Bel-7402和HuH-7(購買自中國科學(xué)院細(xì)胞庫)以1.5X104濃度種于96孔板中。細(xì)胞培養(yǎng)24h貼壁后吸去原來的培養(yǎng)基。試驗(yàn)分為空白對照組、藥物處理組?？瞻捉M更換含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)基；藥物處理組更換含濃度為100μΜ,50μΜ, 10μΜ, ΙμΜ,Ο.1 μ Μ，0.01 μ Μ和0.001 μ Μ的Chukrasone Β的培養(yǎng)基。培養(yǎng)48h后，加入濃度5mg/mL的MTT，繼續(xù)放于C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)4h，然后沿著培養(yǎng)液上部吸去100 μ L上清，加入100 μ L DMS0，暗處放置lOmin，利用酶標(biāo)儀(Sunrise公司產(chǎn)品)測定吸光值(波長570nm)，并根據(jù)吸光值計(jì)算細(xì)胞存活情況，每個處通設(shè)6個重見孔。細(xì)胞存活率(%) = Δ 0D藥物處理/ Δ(?空白對照X100。
[0019]2.結(jié)果:Chukrasone B 對人肝癌細(xì)胞株 Η 印 G2、MHCC-LM3、Bel_7402 和 HuH_7 的生長具有顯著的抑制作用。該化合物抑制人肝癌細(xì)胞株Η印G2、MHCC-LM3、Bel-7402和HuH_7生長的 IC50值分別為:4.21 ±0.48μΜ、3.23±0.43μΜ、5.47±0.57μM和7.13±0.79 μ Μ。
[0020]由上述實(shí)施例表明，本發(fā)明的Chukrasone B對人肝癌細(xì)胞株HepG2、MHCC-LM3、Bel-7402和HuH-7的生長具有很好的抑制作用。由此證明，本發(fā)明的Chukrasone B具有抗肝癌活性，能用于制備抗肝癌藥物。
【權(quán)利要求】
1.Chukrasone B在治療肝癌藥物中的應(yīng)用，所述化合物Chukrasone B結(jié)構(gòu)如式(I )所示:
【文檔編號】A61P35/00GK103446101SQ201310383542
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年8月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月29日
【發(fā)明者】張廣, 吳俊藝, 江春平, 吳俊華 申請人:南京大學(xué)