一種含有溶菌酶的飼料添加劑、藥物組合物及其用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及了一種含有微生物溶菌酶的飼料添加劑、藥物及其用途，通過把溶菌酶與復(fù)合油脂、中藥組合物結(jié)合使用，并且控制溶菌酶的用量，對飼料中的添加量作相應(yīng)的調(diào)整，通過三者的協(xié)同作用，利用溶菌酶具有的良好的抗菌殺菌效果，復(fù)合油脂、中藥組合物對于機體的免疫調(diào)節(jié)、自由基調(diào)節(jié)和輔助作用，從內(nèi)而外調(diào)整機體，能夠有效對抗炎癥、感染、增強自身抵抗力、抗病性，對抗生素已產(chǎn)生耐藥性的菌株也有很強的殺滅作用，保證動物的腸道的健康，防治動物下痢，提高動物生產(chǎn)性能。使用本方法療效好、安全性高，成本低廉，無耐藥性、無藥物殘留、無毒副作用、是綠色環(huán)保的活性物質(zhì)。
【專利說明】一種含有溶菌酶的飼料添加劑、藥物組合物及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種畜禽飼料添加劑和藥物組合物，尤其涉及一種含有溶菌酶的飼料添加劑及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002]仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的一種典型的多因素疾病，據(jù)統(tǒng)計，仔豬腹瀉的發(fā)病率為35%，其間接損失又表現(xiàn)在治愈仔豬生長發(fā)育遲緩，飼料轉(zhuǎn)化率低，嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。自2006年5月以來，在全國各地先后爆發(fā)流行豬高熱病，引起大批豬只發(fā)病死亡，造成重大的經(jīng)濟損失。直至目前，高熱病仍在全國22個省份的豬群中發(fā)生流行，危害豬只的健康生長，威脅著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。抗生素在養(yǎng)殖中的使用所帶來的不良后果大家都已充分認(rèn)識。許多專家都認(rèn)為在全國很多地區(qū)廣泛流行的“豬高熱病”的一個重要原因是豬的免疫力低下，抗病力低，而長期地、大劑量地使用抗生素是導(dǎo)致豬免疫力低下的一個重要原因。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)中公開了溶菌酶用于治療家畜感染，CN101612393A公開了一種微生物溶菌酶在預(yù)防豬疾病的藥物及添加劑中的應(yīng)用方法，通過溶菌酶或與氟本尼考結(jié)合使用，達(dá)到治療效果；CN101611765A通過添加較高劑量的溶菌酶達(dá)到預(yù)防、治療仔豬腹瀉的效果。但是，之前的研究對于溶菌酶的運用手段有限、溶菌酶使用量高，成本較高，并且氟本尼考等抗生素的使用對于機體的恢復(fù)有影響。研究還發(fā)現(xiàn)，動物體內(nèi)的益生菌對溶菌酶有一定的耐受性，在25mg / kg濃度下，溶菌酶不會影響嗜熱乳桿菌和鏈球菌的生長，但如果超過益生菌的耐受濃度范圍，溶茵酶對益生菌就會有一定的抑制作用。由此，如何改進(jìn)現(xiàn)有技術(shù)的溶菌酶藥效是需要解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種含有溶菌酶的飼料添加劑、藥物組合物及其用途，利用該添加劑能有效降低溶菌酶的使用量，減少不良作用，在不使用抗生素的前提下得到更好的抗菌效果，更加安全、有效地治療豬的感染，同時達(dá)到促生長、提高豬免疫力的作用，感染復(fù)發(fā)率低。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
[0006]本發(fā)明所提供的一種動物飼料添加劑，所述添加劑中含有溶菌酶，濃度為25-300ppm，添加劑中還含有添加劑總量1_10%復(fù)合油脂和1_5%中藥組合物。
[0007]所述復(fù)合油脂為DHA和亞麻油，DHA與亞麻油的比例為1:2?1:20。
[0008]所述中藥組合物采用白術(shù)、葛根、連翹、虎掌草、山楂和苦參為原料制成，所述中藥組合物的重量份為白術(shù)10-30份、葛根10-18份、連翹5-15份、虎掌草1_8、山楂1_8份、苦參1-8份。
[0009]稱取所需重量份的白術(shù)、葛根、連翹、虎掌草、山楂和苦參，混合后超微粉碎，過100-200目篩，按所需比例添加到飼料添加劑或藥物中。
[0010]所述動物為畜禽，優(yōu)選為家畜，更優(yōu)選為豬、仔豬。[0011]為了達(dá)到較好的效果，同時降低成本，優(yōu)選的動物飼料添加劑含有50ppm溶菌酶，3%復(fù)合油脂和2%中藥組合物；復(fù)合油脂為DHA和亞麻油，DHA與亞麻油的比例為1:10 ;白術(shù)10-30份、葛根10-18份、連翹5-15份、虎掌草1-8、山楂1-8份、苦參1-8份。
[0012]本申請還提供了一種預(yù)防或治療豬痢疾、豬高熱病的藥物組合物，由原料藥和藥學(xué)上可接受的載體組成，原料藥為50ppm的溶菌酶、3%的復(fù)合油脂和2%的中藥組合物；所述復(fù)合油脂為DHA和亞麻油，DHA與亞麻油的比例為1:10 ;所述中藥組合物原料為白術(shù)25份、葛根14份、連翹11份、虎掌草2、山楂3份、苦參2份。
[0013]溶菌酶是能溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的一種酶，是一類物質(zhì)的的總稱。作為非特異性免疫的重要成員，溶菌酶在防御外源微生物入侵方面發(fā)揮重要的作用，其在動物的免疫細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中含量比較高。溶菌酶對革蘭氏陽性菌、好氣性孢子形成的菌、枯草桿菌、耐輻射微球菌均具有良好的分解作用，對大腸桿菌、沙門氏菌和副血性弧菌等革蘭氏陰性菌也具有溶解作用?；诖耍景l(fā)明將溶菌酶添加于飼料添加劑中，來預(yù)防和治療豬的細(xì)菌性疾病。
[0014]DHA是常用的神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞生長因子，然而，本申請出乎意料地發(fā)現(xiàn)，DHA對于溶菌酶緩解炎癥、提高的抗力方面具有增效作用，可能是由于DHA會抑制發(fā)炎前驅(qū)動物質(zhì)的形成，從而發(fā)揮相關(guān)作用；亞麻油富含α-亞麻酸、DHA和EPA，添加亞麻油能夠降低DHA的用量，降低成本；另外，DHA、亞麻油能夠提供機體所需多不飽和脂肪酸，比如0mega3脂肪酸，能夠降低機體自由基水平，達(dá)到提高機體抵抗力的作用。
[0015]中藥白術(shù)、葛根、連翹、虎掌草、山楂和苦參具有清熱解毒、健脾和胃、活血通絡(luò)、增強體質(zhì)的作用，不僅達(dá)到輔助治療的目的，而且增強消化系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)功能，緩解愈后機體損傷，增強畜類抗病力。
[0016]本發(fā)明提供了所述飼料添加劑在用于制備預(yù)防或治療動物感染的飼料中的用途；提供了所述藥物組合物在用于制備預(yù)防或治療動物感染的藥物中的用途。
[0017]所述動物感染為豬高熱病或豬痢疾。
[0018]本發(fā)明所述的飼料添加劑，以0.5?20%的比例添加于飼料中，用于飼料常規(guī)飼喂；也可直接口服。
[0019]本發(fā)明的有益效果如下:
[0020]1、本發(fā)明有效治療豬的細(xì)菌性疾病、豬痢疾及高熱病，緩解癥狀，顯著提高豬的免疫力，減緩應(yīng)激反應(yīng)，改善維護胃腸道菌群平衡。療效好、安全性高，成本低廉，無耐藥性、無藥物殘留、無毒副作用、是綠色環(huán)保的活性物質(zhì)。
[0021]2、通過溶菌酶、復(fù)合油脂和中藥組合物三者的協(xié)同作用，利用溶菌酶具有的良好抑菌殺菌效果，復(fù)合油脂、中藥組合物對于機體的免疫調(diào)節(jié)、自由基調(diào)節(jié)、提高抵抗力和輔助消炎的效果，從內(nèi)而外調(diào)整機體，能夠有效對抗炎癥、感染、增強自身抵抗力、抗病性，對抗生素已產(chǎn)生耐藥性的菌株也有很強的殺滅作用，保證動物的腸道的健康，防治動物下痢，提高動物生產(chǎn)性能。
[0022]3、完善了溶菌酶的使用，通過與其他活性成分配伍使用，有效地降低了溶菌酶的用量，并且達(dá)到更好的治療效果。
[0023]4、采用積極的療法，副作用低，在治療的同時激發(fā)機體免疫水平，通過自身免疫力的提高達(dá)到治療和提高抗病性的效果，同時飼喂發(fā)病動物和易感動物，能夠同時達(dá)到預(yù)防和治療效果。
[0024]5、溶菌酶是在食品工業(yè)中是優(yōu)良的天然防腐劑，對革蘭陽性菌、枯草桿菌、耐輻射微球菌等均有強力溶壁作用。對大腸桿菌、普通變形菌和副溶血弧菌等革蘭氏陰性菌等也有一定的溶解作用，添加在飼料中不會破壞飼料中的營養(yǎng)成分，在飼料中添加溶菌酶可防止霉變，延長飼料的貯存期，降低攝入霉變飼料的幾率，從源頭預(yù)防動物感染。
【具體實施方式】
[0025]實施例一:溶菌酶的抑菌試驗
[0026]本申請所用的溶菌酶的要求為:通過藥敏試驗,在IOOppm時應(yīng)有明顯的抑菌圈，即抑菌圈的直徑> 10mm。藥敏試驗方法如下:做不同細(xì)菌的藥敏試驗可選擇不同的培養(yǎng)基，如做大腸桿菌的藥敏試驗可選擇普通營養(yǎng)瓊脂或麥糠凱培養(yǎng)基。做沙門氏菌可選擇血
清培養(yǎng)基。
[0027]—、一般LB培養(yǎng)基的配制
[0028]1、液體培養(yǎng)基的配制
[0029]蛋白胨lg、NaCllg、酵母提取物0.5g(建議選用國外公司產(chǎn)品)溶于IOOml水中。
[0030]2、固體培養(yǎng)基的配制
[0031]在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上每IOOml中添加瓊脂1.7g或瓊脂粉2g。
[0032]二、滅菌
[0033]整個實驗過程中所用的培養(yǎng)基、平板、槍頭、棉簽、生理鹽水以及緩沖溶液均需要滅菌。
[0034]三、操作過程
[0035]1、將指示菌(大腸桿菌、沙門氏菌等等)從培養(yǎng)液(基)中接種于平板活化培養(yǎng)，待菌落長出后在平板上挑選典型菌落接種于試管中的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)4-6小時后比濁。
[0036]2、用涂菌棒(或者滅菌棉簽)將待檢細(xì)菌混懸液涂抹于平皿培養(yǎng)基表面，要求涂布均勻致密。
[0037]3、以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管(也可用玻璃管、瓷管)，放置在培養(yǎng)基上打孔，將孔中的培養(yǎng)基用針頭挑出，并以火焰封底，使培養(yǎng)基能充分的與平皿融合(以防藥液滲漏，影響結(jié)果)。
[0038]4、將配制好的待測樣品液80微升加入樣孔中，樣品加完后放入30_37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12-18小時后觀察結(jié)果。
[0039]注意:試驗的過程在無菌的條件下操作。
[0040]四、溶菌酶樣品液的配制
[0041]1、粉狀樣品的配制:
[0042]取溶菌酶樣品用滅菌好的生理鹽水逐級稀釋到濃度梯度為400ppm，300ppm,200ppm, IOOppm, 50ppm, 25ppm然后分別取80微升稀釋好的溶液置于樣品孔中。(注:在溫度較低的情況下，可能會出現(xiàn)稍微的不溶的情況，可加熱至35-40°C即可溶解)
[0043]2、注意事項
[0044]I)配置好的樣品液不要放在冷凍的條件下保存，也不能放在無菌操作臺上被紫外線照射；[0045]2)樣品液在配制稀釋過程中注意要逐級稀釋。
[0046]為了確定溶菌酶在藥物及添加劑中的加入量，我們進(jìn)行了如下藥敏實驗:選擇400ppm, 300ppm, 200ppm, IOOppm, 50ppm, 25ppm六個濃度進(jìn)行試驗，試驗方法同上，以埃希氏大腸桿菌為試驗菌種，通過檢測檢測抑菌圈的大小檢驗試驗結(jié)果，具體如表1。
[0047]表1抑菌試驗結(jié)果
[0048]
【權(quán)利要求】
1.一種飼料添加劑，所述添加劑中含有溶菌酶，濃度為25-300ppm，其特征在于，添加劑中還含有添加劑總量1-10%復(fù)合油脂和1-5%中藥組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于，所述復(fù)合油脂為DHA和亞麻油，DHA與亞麻油的比例為1:2?1:20。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的飼料添加劑，其特征在于，所述中藥組合物采用白術(shù)、葛根、連翹、虎掌草、山楂和苦參為原料制成，所述中藥組合物的重量份為白術(shù)10-30份、葛根10-18份、連翹5-15份、虎掌草1-8、山楂1-8份、苦參1-8份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的飼料添加劑，其特征在于，所述動物為畜禽，優(yōu)選為家畜，更優(yōu)選為豬。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的飼料添加劑，其特征在于，優(yōu)選含有50ppm溶菌酶，3%復(fù)合油脂和2%中藥組合物；復(fù)合油脂中DHA與亞麻油的比例為1:10 ;白術(shù)25份、葛根14份、連翹11份、虎掌草2、山楂3份、苦參2份。
6.權(quán)利要求1至5中任一項所述的飼料添加劑在制備預(yù)防或治療動物感染的飼料中的用途。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述動物感染為豬高熱病。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述動物感染為豬痢疾。
9.根據(jù)權(quán)利要求6至8之一所述的用途，其特征在于，所述飼料添加劑在飼料中的添加量為 0.5-20% ο
10.一種預(yù)防或治療豬痢疾、豬高熱病的藥物組合物，由原料藥和藥學(xué)上可接受的載體組成，其特征在于，以組合物總量計，原料藥為50ppm的溶菌酶、3%的復(fù)合油脂和2%的中藥組合物；所述復(fù)合油脂為DHA和亞麻油，DHA與亞麻油的比例為1:10 ;所述中藥組合物原料為白術(shù)25份、葛根14份、連翹11份、虎掌草2、山楂3份、苦參2份。
【文檔編號】A61P29/00GK103461676SQ201310434915
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月18日
【發(fā)明者】潘宏濤 申請人:杭州康源飼料科技有限公司