一種獸用抗病毒組合物、凍干粉、制備方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種獸用抗病毒組合物、凍干粉、制備方法及應(yīng)用，屬于獸用飼料添加劑【技術(shù)領(lǐng)域】。該獸用抗病毒組合物主要由以下重量份數(shù)的組分組成：獸用抗病毒卵黃抗體85?100份、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、a-干擾素1?5份；優(yōu)選的，還包括以下重量份數(shù)的組分：黃苗多糖5?10份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。本發(fā)明將獸用抗病毒卵黃抗體、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子、a-干擾素與黃芪多糖、當(dāng)歸多糖、枸杞多糖、甘草多糖聯(lián)用，具有針對(duì)性強(qiáng)、抗體效價(jià)高、生物活性好等優(yōu)點(diǎn)，能夠提高機(jī)體的免疫力和抗病能力，有效預(yù)防獸類病毒性疾病。
【專利說(shuō)明】一種獸用抗病毒組合物、凍干粉、制備方法及應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明具體涉及一種獸用抗病毒組合物，同時(shí)還涉及獸用抗病毒凍干粉，以及該 凍干粉的制備方法和應(yīng)用，屬于獸用飼料添加劑【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 豬業(yè)在我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)中占有較重的份額，但是隨著豬肉需求的逐年遞增，養(yǎng)豬過(guò)程 中出現(xiàn)的問(wèn)題也越來(lái)越多，其中豬瘟、豬細(xì)小病毒病、豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病等病毒性疾病， 給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
[0003] 目前，人們主要通過(guò)中藥、西藥、接種免疫等方法來(lái)防治病毒性疾病。其中，中藥是 主要研究方向之一，但是中藥的種類較多，相同藥材對(duì)不同禽畜疾病的作用差異極大，因此 存在一定的局限性。而西藥如抗生素類易產(chǎn)生藥物殘留，給肉類產(chǎn)品帶來(lái)了極大的安全隱 患，且抗生素類藥物長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生抗性毒株。生物治療如接種免疫的早期效果較好，但需 要多次接種，操作麻煩，成本較高，容易使仔豬產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，且疫苗對(duì)保藏條件要求較高， 需要在2?8°C條件下冷藏，室溫條件下一段時(shí)間則失去效果。注射卵黃抗體也是較為常見(jiàn) 的一種方法，但是單一注射卵黃抗體的免疫效果有時(shí)候不能滿足實(shí)際需要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種獸用抗病毒組合物。
[0005] 同時(shí)，本發(fā)明還提供一種獸用抗病毒凍干粉。
[0006] 再者，本發(fā)明還提供一種獸用抗病毒凍干粉的制備方法。
[0007] 最后，本發(fā)明還提供一種獸用抗病毒凍干粉作為飼料添加劑的應(yīng)用。
[0008] 為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：
[0009] -種獸用抗病毒組合物，主要由以下重量份數(shù)的組分組成：獸用抗病毒卵黃抗體 85?100份、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、α -干擾素1?5份。
[0010] 優(yōu)選的，一種獸用抗病毒組合物，還包括以下重量份數(shù)的組分：黃芪多糖5?10 份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。
[0011] 一種獸用抗病毒凍干粉，主要由以下重量份數(shù)的組分組成：獸用抗病毒卵黃抗體 85?100份、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、α -干擾素1?5份、防腐劑0. 01?0. 02份、 滅活劑0. 2?0. 3份、耐熱凍干保護(hù)劑3?6份。
[0012] 優(yōu)選的，一種獸用抗病毒凍干粉，還包括以下重量份數(shù)的組分：黃芪多糖5?10 份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。
[0013] 所述的獸用抗病毒卵黃抗體與獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子所針對(duì)的病毒種類相同，如 抗豬瘟卵黃抗體與抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子、抗豬細(xì)小病毒卵黃抗體與抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子、抗 豬偽狂犬病卵黃抗體與抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因子、抗豬藍(lán)耳病卵黃抗體與抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因 子、抗豬口蹄疫卵黃抗體與抗豬口蹄轉(zhuǎn)移因子、抗犬瘟熱卵黃抗體與抗犬瘟熱轉(zhuǎn)移因子、抗 犬細(xì)小病毒卵黃抗體與抗犬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子等。
[0014] 所述的防腐劑為硫柳汞。
[0015] 所述的滅活劑為甲醛。
[0016] 所述的耐熱凍干保護(hù)劑由以下重量份數(shù)的組分組成：維生素 C0. 5?1份、維生素 E1?2份、聚乙烯吡咯烷酮1?2份、甘氨酸0. 5?1份。
[0017] 所述獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子可以為市售商品，也可以采用以下方法制備得到：
[0018] (1)用滅菌后的生理鹽水清洗采用獸病毒抗原免疫過(guò)的豬脾臟和/或胸腺，去其 表面筋、脂肪等組織，再用生理鹽水沖洗；
[0019] (2)將處理后的豬脾臟和/或胸腺破碎，加入2倍預(yù)冷的PBS緩沖液，用組織勻漿 儀勻質(zhì)得勻漿液；
[0020] (3)將勻漿液超聲破碎處理5?lOmin得破碎液；
[0021] (4)將破碎液調(diào)至pH值為5. 3?5. 7, 5000?6000rpm離心30min，收集上清液；
[0022] (5)將上清液用微濾膜過(guò)濾，截留分子量7000道爾頓的物質(zhì)，收集濾液；
[0023] (6)將濾液用除菌濾膜過(guò)濾，得到獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子原液，4°C保存或凍干備用。 [0024] 所述的黃芪多糖可以為市售商品，也可以通過(guò)常規(guī)方法提取制備。其中黃芪含皂 甙、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素。主要作用于腎，有利尿作用， 能促進(jìn)細(xì)胞中DNA的合成，加速肝的分化增殖，并能提高淋巴細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)白細(xì)胞誘生 干擾素的能力，從而間接提高和促進(jìn)機(jī)體免疫力功能。
[0025] 所述的當(dāng)歸多糖可以為市售商品，也可以通過(guò)常規(guī)方法提取制備。其中當(dāng)歸主要 作用于心、肝臟器，能調(diào)節(jié)氣血，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，還具有抗癌作用。
[0026] 所述的枸杞多糖可以為市售商品，也可以通過(guò)常規(guī)方法提取制備。其中枸杞主要 作用于肝、腎等臟器，可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，有效抑制腫瘤生長(zhǎng)和細(xì)胞突變，具有延緩衰 老、抗脂肪肝、調(diào)節(jié)血脂和血糖、促進(jìn)造血功能等功效。
[0027] 所述的甘草多糖可以為市售商品，也可以通過(guò)常規(guī)方法提取制備。其中甘草主要 作用于脾臟，能補(bǔ)益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛，調(diào)和諸藥；用于脾胃虛弱、倦怠乏 力、心悸氣短、咳嗽痰多等，還能緩解藥物毒性。
[0028] -種獸用抗病毒凍干粉的制備方法，包括以下步驟：
[0029] (1)分離毒株制備疫苗：取病毒株增殖、滅活后制得乳油劑疫苗備用；
[0030] (2)免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1)制備的疫苗免疫接種健康雞群，當(dāng)抗體 效價(jià)達(dá)到1:256時(shí)，收集高免蛋清理、消毒后晾干備用；
[0031] (3)分離高免蛋卵黃：取步驟（2)制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無(wú)菌水， 充分?jǐn)嚢柚令伾l(fā)白得卵黃溶液，將卵黃溶液置于60?65°C水浴中加熱20?30min，再加 入pH值為4. 9?5. 2的預(yù)冷酸化水，加入量為卵黃溶液體積的6?8倍，混勻后室溫下靜 置沉淀，取上清液離心分離；
[0032] (4)取步驟（3)離心后的上清液，濾過(guò)，使濾液中獸用抗病毒卵黃抗體的干重為 85?100份，濃縮，以重量份數(shù)計(jì)，在濃縮液中加入防腐劑0. 01?0. 02份、滅活劑0. 2? 〇. 3份、耐熱凍干保護(hù)劑3?6份，混勻后預(yù)凍、凍干備用；
[0033] (5)以重量份數(shù)計(jì)，在步驟（4)的干粉中加入獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、α -干 擾素1?5份即得。
[0034] 所述步驟（2)中每7天對(duì)健康雞群免疫一次，共免疫三次，于第二次免疫后開(kāi)始檢 測(cè)抗體效價(jià)。優(yōu)選的，第一次免疫接種滅活疫苗1. 5mL，第二次、第三次免疫增加1倍量。
[0035] 所述步驟（3)中離心分離的轉(zhuǎn)速為15000rpm，離心時(shí)間為20min。
[0036] 所述步驟（4)中濾過(guò)先采用0. 45 μ m的濾膜，以截留分子量大于200KD的大分子 物質(zhì)，再采用〇. 22 μ m的濾膜過(guò)濾。
[0037] 所述步驟（5)中加入的獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子為經(jīng)凍干處理后得到的粉末，也可以 在步驟（4)的濃縮液中加入以干重?fù)Q算后的轉(zhuǎn)移因子原液。
[0038] 優(yōu)選的，一種獸用抗病毒凍干粉的制備方法，以重量份數(shù)計(jì)，在步驟（5)的干粉中 再加入黃芪多糖5?10份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30 份。
[0039] 用法與用量：肌注，每100ml注射液中含有抗病毒凍干粉2g，每日2次，連用5日。 [0040] 一種獸用抗病毒凍干粉作為飼料添加劑的應(yīng)用，包括以下步驟：以重量百分比計(jì)， 將獸用抗病毒凍干粉以〇. 2?0. 6%的量加入獸用飼料中即可。
[0041] 本發(fā)明的有益效果：
[0042] 本發(fā)明的獸用抗病毒組合物主要由獸用抗病毒卵黃抗體、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子、 α -干擾素組成，其中卵黃抗體是一種免疫球蛋白，是由機(jī)體受到外界抗原刺激而產(chǎn)生的一 種應(yīng)激產(chǎn)物，可以與相應(yīng)抗原結(jié)合，消除病因；轉(zhuǎn)移因子攜帶有致敏淋巴細(xì)胞的特異性免疫 信息，能夠?qū)⑻禺愋悦庖咝畔⒊蔬f給受體淋巴細(xì)胞，使受體無(wú)活性的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺?性致敏淋巴細(xì)胞，從而激發(fā)受體細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)；α -干擾素可通過(guò)細(xì)胞表面受體作 用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，同時(shí)還可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞（ΝΚ細(xì)胞)、巨噬細(xì)胞和Τ淋巴細(xì)胞 的活力，從而起到免疫調(diào)節(jié)作用，并增強(qiáng)抗病毒能力。本發(fā)明將上述三者聯(lián)用可以增強(qiáng)機(jī)體 抗病毒活性，大大提高攻守作用，對(duì)獸類病毒性疾病具有良好的防治功效。
[0043] 本發(fā)明采用黃芪多糖、當(dāng)歸多糖、枸杞多糖、甘草多糖共4種多糖類物質(zhì)，具有提 高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)機(jī)體適應(yīng)力和抵抗力等作用，還能抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)機(jī)體代謝等。上述 4種物質(zhì)覆蓋了機(jī)體的心、肝、脾、肺、腎、脾等臟器，保證了機(jī)體臟器之間的平衡運(yùn)轉(zhuǎn)，比單 一運(yùn)用的療效強(qiáng)，不僅能加強(qiáng)機(jī)體臟器機(jī)能，還能加強(qiáng)機(jī)體免疫能力及調(diào)節(jié)機(jī)能，保證機(jī)體 健康。
[0044] 本發(fā)明將獸用抗病毒卵黃抗體、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子、α-干擾素與黃芪多糖、當(dāng) 歸多糖、枸杞多糖、甘草多糖聯(lián)用，具有針對(duì)性強(qiáng)、抗體效價(jià)高、生物活性好等優(yōu)點(diǎn)，能夠提 高機(jī)體的免疫力和抗病能力，有效預(yù)防獸類病毒性疾病。本發(fā)明通過(guò)試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)其防 治效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于單一使用或者兩兩聯(lián)合。
[0045] 本發(fā)明將上述活性成分與耐熱凍干保護(hù)劑復(fù)配，能延長(zhǎng)凍干粉在常溫下的保存時(shí) 間，保證抗體效價(jià)及生物活性，安全有效，無(wú)毒副作用、無(wú)殘留危害。將其按一定比例加入飼 料配方中，可以預(yù)防和治療獸類病毒性疾病，提高機(jī)體免疫力和成活率，使用方便。
[0046] 本發(fā)明制備獸用抗病毒凍干粉的方法簡(jiǎn)單，易于操作，適于大規(guī)模生產(chǎn)及推廣應(yīng) 用。采用健康雞群作為免疫對(duì)象，能降低毒株返祖的可能性，同時(shí)可以快速提高抗體效價(jià)至 1: 256,通過(guò)雞強(qiáng)化免疫后制成的卵黃抗體對(duì)病毒性疾病的防治效果突出，見(jiàn)效快、療效顯 著、針對(duì)性強(qiáng)。

【具體實(shí)施方式】
[0047] 下述實(shí)施例僅對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制。
[0048] 實(shí)施例1
[0049] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬瘟卵黃抗體85 份、抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子5份、α -干擾素1份、黃芪多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、 甘草多糖10份。
[0050] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬瘟卵黃抗體85 份、抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子5份、α -干擾素1份、黃芪多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、 甘草多糖10份、硫柳汞〇. 02份、甲醛0. 2份、維生素 C1份、維生素 Ε1份、聚乙烯吡咯烷酮 2份、甘氨酸0. 5份。
[0051] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法，包括以下步驟：
[0052] (1)分離毒株制備疫苗：取國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬瘟病毒株增殖、滅活后制得乳油劑疫苗備 用；
[0053] (2)免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1)制備的疫苗免疫接種健康雞群，每7天 對(duì)健康雞群免疫一次，共免疫三次，第一次免疫接種滅活疫苗1. 5mL，第二次、第三次免疫增 加1倍量，于第二次免疫后開(kāi)始檢測(cè)抗體效價(jià)，當(dāng)抗體效價(jià)達(dá)到1:256時(shí)，收集高免蛋清理、 消毒后晾干備用；
[0054] (3)分離高免蛋卵黃：取步驟（2)制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無(wú)菌水， 充分?jǐn)嚢柚令伾l(fā)白得卵黃溶液，將卵黃溶液置于63°C水浴中加熱30min，再加入pH值 為5. 0的4°C酸化水，加入量為卵黃溶液體積的6倍，混勻后室溫下靜置沉淀，取上清液在 15000rpm的轉(zhuǎn)速下離心分離20min ;
[0055] (4)取步驟（3)離心后的上清液，先采用0. 45 μ m的濾膜，以截留分子量大于200KD 的大分子物質(zhì)，再采用〇. 22 μ m的濾膜過(guò)濾，使濾液中抗豬瘟卵黃抗體的干重為85份，濃 縮，在濃縮液中加入硫柳汞、甲醛、維生素 C、維生素 E、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸，混勻后經(jīng) 預(yù)凍、凍干備用；
[0056] (5)在步驟（4)的干粉中加入抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子、α-干擾素、黃芪多糖、當(dāng)歸多糖、 枸杞多糖及甘草多糖粉末，混勻即得。
[0057] 所述的抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子的制備方法為：
[0058] (1)用滅菌后的生理鹽水清洗采用豬瘟病毒抗原免疫過(guò)的豬脾臟，去其表面筋、月旨 肪等組織，再用生理鹽水沖洗；
[0059] (2)將處理后的豬脾臟破碎，加入2倍預(yù)冷的PBS緩沖液，用組織勻漿儀勻質(zhì)得勻 漿液；
[0060] (3)將勻漿液超聲破碎處理lOmin得破碎液；
[0061] (4)將破碎液調(diào)至pH值為5. 5, 5500rpm離心30min，收集上清液；
[0062] (5)將上清液用微濾膜過(guò)濾，截留分子量7000道爾頓的物質(zhì)，收集濾液；
[0063] (6)將濾液用除菌濾膜過(guò)濾，得到抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子原液，凍干備用。
[0064] 所述的α -干擾素購(gòu)自長(zhǎng)春生物制品研究所。
[0065] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉作為飼料添加劑的應(yīng)用，包括以下步驟：以重量百 分比計(jì)，將抗豬瘟凍干粉以0. 4%的量加入豬飼料中即可。
[0066] 實(shí)施例2
[0067] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬細(xì)小病毒卵黃 抗體90份、抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子2份、α -干擾素3份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸 杞多糖15份、甘草多糖20份。
[0068] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬細(xì)小病毒卵黃 抗體90份、抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子2份、α -干擾素3份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸 杞多糖15份、甘草多糖20份、硫柳汞0. 015份、甲醛0. 25份、維生素 C0. 8份、維生素 Ε1. 5 份、聚乙烯吡咯烷酮1. 5份、甘氨酸0. 7份。
[0069] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法及應(yīng)用同實(shí)施例1，在制備方法的步驟 (1)中采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬細(xì)小病毒毒株。
[0070] 實(shí)施例3
[0071] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬偽狂犬病卵黃 抗體95份、抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因子3份、α -干擾素4份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸 杞多糖16份、甘草多糖25份。
[0072] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬偽狂犬病卵黃 抗體95份、抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因子3份、α -干擾素4份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸 杞多糖16份、甘草多糖25份、硫柳汞0. 016份、甲醛0. 22份、維生素 C0. 7份、維生素 Ε1. 4 份、聚乙烯吡咯烷酮1. 6份、甘氨酸0. 9份。
[0073] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法及應(yīng)用同實(shí)施例1，在制備方法的步驟 (1)中米用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬偽狂犬病毒株。
[0074] 實(shí)施例4
[0075] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬藍(lán)耳病卵黃抗 體97份、抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因子2份、α -干擾素2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多 糖17份、甘草多糖23份。
[0076] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬藍(lán)耳病卵黃抗 體97份、抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因子2份、α -干擾素2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多 糖17份、甘草多糖23份、硫柳汞0. 013份、甲醛0. 28份、維生素 C0. 9份、維生素 Ε1. 2份、 聚乙烯吡咯烷酮1. 8份、甘氨酸0. 6份。
[0077] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法及應(yīng)用同實(shí)施例1，在制備方法的步驟 (1)中采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬藍(lán)耳病毒株。
[0078] 實(shí)施例5
[0079] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬口蹄疫卵黃抗 體1〇〇份、抗豬口蹄疫轉(zhuǎn)移因子1份、α -干擾素5份、黃芪多糖5份、當(dāng)歸多糖10份、枸杞 多糖10份、甘草多糖30份。
[0080] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗豬口蹄疫卵黃抗 體1〇〇份、抗豬口蹄疫轉(zhuǎn)移因子1份、α -干擾素5份、黃芪多糖5份、當(dāng)歸多糖10份、枸杞 多糖10份、甘草多糖30份、硫柳汞0. 01份、甲醛0. 3份、維生素 C0. 5份、維生素 Ε2份、聚 乙烯吡咯烷酮1份、甘氨酸1份。
[0081] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法及應(yīng)用同實(shí)施例1，在制備方法的步驟 (1)中米用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬口蹄疫病毒株。
[0082] 實(shí)施例6
[0083] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗犬瘟熱卵黃抗體 95份、抗犬瘟熱轉(zhuǎn)移因子1份、α -干擾素2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17 份、甘草多糖23份。
[0084] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗犬瘟熱卵黃抗體 95份、抗犬瘟熱轉(zhuǎn)移因子1份、α -干擾素2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17 份、甘草多糖23份、硫柳汞0. 013份、甲醛0. 28份、維生素 C0. 9份、維生素 Ε1. 2份、聚乙烯 吡咯烷酮1.8份、甘氨酸0.6份。
[0085] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法及應(yīng)用同實(shí)施例1，在制備方法的步驟 (1)中米用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)犬癌熱病毒株。
[0086] 實(shí)施例7
[0087] 本實(shí)施例中獸用抗病毒組合物，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗犬細(xì)小病毒卵黃 抗體94份、抗犬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子2份、α -干擾素1份、黃芪多糖5份、當(dāng)歸多糖10份、 枸杞多糖20份、甘草多糖20份。
[0088] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉，由以下重量份數(shù)的組分組成：抗犬細(xì)小病毒卵黃 抗體94份、抗犬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子2份、α -干擾素1份、黃芪多糖5份、當(dāng)歸多糖10份、枸 杞多糖20份、甘草多糖20份、硫柳汞0. 015份、甲醛0. 25份、維生素 C0. 7份、維生素 Ε1. 5 份、聚乙烯吡咯烷酮1. 5份、甘氨酸0. 7份。
[0089] 本實(shí)施例中獸用抗病毒凍干粉的制備方法及應(yīng)用同實(shí)施例1，在制備方法的步驟 (1)中采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)犬細(xì)小病毒毒株。
[0090] 對(duì)比例1
[0091] 本對(duì)比例中抗豬癌凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬癌卵黃抗體85份、黃苗 多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例 中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0092] 對(duì)比例2
[0093] 本對(duì)比例中抗豬瘟凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子5份、黃芪 多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例 中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0094] 對(duì)比例3
[0095] 本對(duì)比例中抗豬瘟凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：α -干擾素1份、黃芪多糖10 份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干 粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0096] 對(duì)比例4
[0097] 本對(duì)比例中抗豬瘟凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：黃芪多糖10份、當(dāng)歸多糖5 份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采 用常規(guī)方法。
[0098] 對(duì)比例5
[0099] 本對(duì)比例中抗豬癌凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬癌卵黃抗體85份、抗豬 瘟轉(zhuǎn)移因子5份、黃芪多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分 同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0100] 對(duì)比例6
[0101] 本對(duì)比例中抗豬瘟凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬瘟卵黃抗體85份、 α -干擾素1份、黃芪多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分 同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0102] 對(duì)比例7
[0103] 本對(duì)比例中抗豬瘟凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子5份、α -干 擾素1份、黃芪多糖10份、當(dāng)歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實(shí)施 例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0104] 對(duì)比例8
[0105] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬細(xì)小病毒卵黃抗 體90份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖20份，其他組分同實(shí)施例 1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0106] 對(duì)比例9
[0107] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因 子2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖20份，其他組分同實(shí)施例 1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0108] 對(duì)比例10
[0109] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：α -干擾素3份、黃芪 多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖20份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例 中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0110] 對(duì)比例11
[0111] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：黃芪多糖8份、當(dāng)歸 多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖20份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備 方法采用常規(guī)方法。
[0112] 對(duì)比例12
[0113] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬細(xì)小病毒卵黃抗 體90份、抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸杞多糖15份、甘草 多糖20份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0114] 對(duì)比例13
[0115] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬細(xì)小病毒卵黃抗 體90份、α -干擾素3份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖20份， 其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0116] 對(duì)比例14
[0117] 本對(duì)比例中抗豬細(xì)小病毒凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因 子2份、α -干擾素3份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖20份，其 他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0118] 對(duì)比例15
[0119] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬偽狂犬病卵黃抗 體95份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸杞多糖16份、甘草多糖25份，其他組分同實(shí)施例 1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0120] 對(duì)比例16
[0121] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因 子3份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸杞多糖16份、甘草多糖25份，其他組分同實(shí)施例 1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0122] 對(duì)比例17
[0123] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：α -干擾素4份、黃芪 多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸杞多糖16份、甘草多糖25份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例 中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0124] 對(duì)比例18
[0125] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：黃芪多糖6份、當(dāng)歸 多糖8份、枸杞多糖16份、甘草多糖25份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備 方法采用常規(guī)方法。
[0126] 對(duì)比例19
[0127] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬偽狂犬病卵黃抗 體95份、抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因子3份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸杞多糖16份、甘草 多糖25份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0128] 對(duì)比例20
[0129] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬偽狂犬病卵黃抗 體95份、α -干擾素4份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸杞多糖16份、甘草多糖25份， 其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0130] 對(duì)比例21
[0131] 本對(duì)比例中抗豬偽狂犬病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因 子3份、α -干擾素4份、黃芪多糖6份、當(dāng)歸多糖8份、枸杞多糖16份、甘草多糖25份，其 他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0132] 對(duì)比例22
[0133] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬藍(lán)耳病卵黃抗體 97份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖23份，其他組分同實(shí)施例1。 本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0134] 對(duì)比例23
[0135] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因子2 份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖23份，其他組分同實(shí)施例1。本 對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0136] 對(duì)比例24
[0137] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：α -干擾素2份、黃芪多 糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖23份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中 凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0138] 對(duì)比例25
[0139] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：黃芪多糖8份、當(dāng)歸多 糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖23份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方 法采用常規(guī)方法。
[0140] 對(duì)比例26
[0141] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬藍(lán)耳病卵黃抗體 97份、抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因子2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖 23份，其他組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0142] 對(duì)比例27
[0143] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬藍(lán)耳病卵黃抗體 97份、α -干擾素2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖23份，其他 組分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0144] 對(duì)比例28
[0145] 本對(duì)比例中抗豬藍(lán)耳病凍干粉包括以下重量份數(shù)的組分：抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因子2 份、α -干擾素2份、黃芪多糖8份、當(dāng)歸多糖6份、枸杞多糖17份、甘草多糖23份，其他組 分同實(shí)施例1。本對(duì)比例中凍干粉的制備方法采用常規(guī)方法。
[0146] 試驗(yàn)例1
[0147] 本發(fā)明實(shí)施例1?7制備凍干粉的質(zhì)量檢測(cè)。
[0148] 試驗(yàn)方法：取本發(fā)明實(shí)施例1?7制備的凍干粉，置于37°C培養(yǎng)箱中，保存24個(gè) 月，分別于1周、2周、1月、2月、4月、8月、12月、16月、20月、24月后采用瓊脂擴(kuò)散（AGP) 法，測(cè)定每個(gè)時(shí)間點(diǎn)凍干粉樣品中卵黃抗體的效價(jià)，試驗(yàn)結(jié)果詳見(jiàn)下表1。
[0149] 表1實(shí)施例1?7制備凍干粉中卵黃抗體的效價(jià)變化
[0150]

【權(quán)利要求】
1. 一種獸用抗病毒組合物，其特征在于：主要由以下重量份數(shù)的組分組成：獸用抗病 毒卵黃抗體85?100份、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、α -干擾素1?5份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸用抗病毒組合物，其特征在于：還包括以下重量份數(shù)的組 分：黃芪多糖5?10份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的獸用抗病毒組合物，其特征在于：所述的獸用抗病毒卵 黃抗體和獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子為抗豬瘟卵黃抗體與抗豬瘟轉(zhuǎn)移因子、抗豬細(xì)小病毒卵黃抗 體與抗豬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子、抗豬偽狂犬病卵黃抗體與抗豬偽狂犬病轉(zhuǎn)移因子、抗豬藍(lán)耳 病卵黃抗體與抗豬藍(lán)耳病轉(zhuǎn)移因子、抗豬口蹄疫卵黃抗體與抗豬口蹄轉(zhuǎn)移因子、抗犬瘟熱 卵黃抗體與抗犬瘟熱轉(zhuǎn)移因子或抗犬細(xì)小病毒卵黃抗體與抗犬細(xì)小病毒轉(zhuǎn)移因子。
4. 一種獸用抗病毒凍干粉，其特征在于：主要由以下重量份數(shù)的組分組成：獸用抗病 毒卵黃抗體85?100份、獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、α -干擾素1?5份、防腐劑0. 01? 0. 02份、滅活劑0. 2?0. 3份、耐熱凍干保護(hù)劑3?6份。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的獸用抗病毒凍干粉，其特征在于：還包括以下重量份數(shù)的組 分：黃芪多糖5?10份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的獸用抗病毒凍干粉，其特征在于：所述的耐熱凍干保護(hù) 劑由以下重量份數(shù)的組分組成：維生素 C0. 5?1份、維生素 Ε1?2份、聚乙烯吡咯烷酮1? 2份、甘氨酸0. 5?1份。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的獸用抗病毒凍干粉，其特征在于：所述的獸用抗病毒轉(zhuǎn) 移因子的制備方法為： (1) 用滅菌后的生理鹽水清洗采用獸病毒抗原免疫過(guò)的豬脾臟和/或胸腺，去其表面 筋、脂肪組織，再用生理鹽水沖洗； (2) 將處理后的豬脾臟和/或胸腺破碎，加入2倍預(yù)冷的PBS緩沖液，用組織勻漿儀勻 質(zhì)得勻漿液； (3) 將勻漿液超聲破碎處理5?lOmin得破碎液； (4) 將破碎液調(diào)至pH值為5. 3?5. 7, 5000?6000rpm離心30min，收集上清液； (5) 將上清液用微濾膜過(guò)濾，截留分子量7000道爾頓的物質(zhì)，收集濾液； (6) 將濾液用除菌濾膜過(guò)濾，得到獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子原液，4°C保存或凍干備用。
8. -種獸用抗病毒凍干粉的制備方法，其特征在于：包括以下步驟： (1) 分離毒株制備疫苗：取病毒株增殖、滅活后制得乳油劑疫苗備用； (2) 免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1)制備的疫苗免疫接種健康雞群，當(dāng)抗體效價(jià) 達(dá)到1:256時(shí)，收集高免蛋清理、消毒后晾干備用； (3) 分離高免蛋卵黃：取步驟（2)制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無(wú)菌水，充分 攪拌至顏色發(fā)白得卵黃溶液，將卵黃溶液置于60?65°C水浴中加熱20?30min，再加入pH 值為4. 9?5. 2的預(yù)冷酸化水，加入量為卵黃溶液體積的6?8倍，混勻后室溫下靜置沉淀， 取上清液離心分離； (4) 取步驟（3)離心后的上清液，濾過(guò)，使濾液中獸用抗病毒卵黃抗體的干重為85? 100份，濃縮，以重量份數(shù)計(jì)，在濃縮液中加入防腐劑〇. 01?〇. 02份、滅活劑0. 2?0. 3份、 耐熱凍干保護(hù)劑3?6份，混勻后預(yù)凍、凍干備用； (5) 以重量份數(shù)計(jì)，在步驟（4)的干粉中加入獸用抗病毒轉(zhuǎn)移因子1?5份、α -干擾 素1?5份即得。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的獸用抗病毒凍干粉的制備方法，其特征在于：以重量份數(shù)計(jì)， 在步驟（5)的干粉中再加入黃芪多糖5?10份、當(dāng)歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、 甘草多糖10?30份。
10. -種如權(quán)利要求4或5所述的獸用抗病毒凍干粉作為飼料添加劑的應(yīng)用，其特征在 于：包括以下步驟：以重量百分比計(jì)，將獸用抗病毒凍干粉以0. 2?0. 6%的量加入獸用飼 料中即可。
【文檔編號(hào)】A61K9/19GK104208678SQ201310462849
【公開(kāi)日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2013年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月30日
【發(fā)明者】郭俊清, 徐進(jìn), 陳建暉 申請(qǐng)人:鄭州后羿制藥有限公司