一種新型殺菌液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種殺菌液，重量份數(shù)組成如下：天麻粉，山茱萸提取物，透骨草提取物，枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物，黃芩提取物，含氯化氫36%—38%的濃鹽酸，碘酒，水；本發(fā)明采用多種生物為原料制成生物制劑，采用患處低濃度藥液清洗、高濃度藥液擦拭的雙管齊下的治療方法，具有治愈率高、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、復(fù)發(fā)率低、無任何毒性等特點(diǎn)。
【專利說明】一種新型殺菌液【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明是涉及一種治療頑固性皮膚病殺菌液制劑，尤其是涉及治療牛皮癬、破裂性奇癢癥、顆粒性奇癢癥、癩痢、梅毒、肛周炎等外科皮膚病的殺菌液制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]破裂性奇癢癥，是平常人們無法對付的病癥，常見有一個(gè)或幾個(gè)指頭皮膚變厚、發(fā)黃、干燥、開裂、流血、奇癢難受，有的雙手掌、雙腳掌也變厚、發(fā)黃、干燥、開裂、流血、裂縫如同六月干旱的大田一樣四分五裂，深處奇癢難受，坐臥不安，無法工作。除了手腳，其他部位也有發(fā)作的。
[0003]肛周炎目前世界各國都沒有根治的藥物，它時(shí)而發(fā)作，越搔越癢，變來變?nèi)?，形成肛裂、化膿，有的拖延久了，夾帶了危險(xiǎn)的病毒，發(fā)作為直腸癌，成為終生之恨。
[0004]牛皮癬(銀屑病)是一種常見的易反復(fù)發(fā)作的皮膚頑癥，我國屬高發(fā)區(qū)，并較難治愈。此病雖然不危及生命，但卻使患者皮肉搔癢、鱗屑脫落，甚至血痕斑斑，既影響患者的美觀，又給患者的精神和身體帶來不可言喻的痛苦，許多患者因得不到及時(shí)有效的治療，使病情拖延日久，身體衰弱，引起各種并發(fā)癥，影響心、肝、腎等功能，有的還把病遺傳給后代。
[0005]對于牛皮癬，目前國內(nèi)多采用中西醫(yī)結(jié)合的方法進(jìn)行治療，如煎中藥湯洗，外抹藥膏藥水、睡眠療法、放血療法、注射等等；國外還有采用激素治療等，上述各種治療方法雖有一定的療效，可是見效 快復(fù)發(fā)也快，并且有一定的副作用。
[0006]痔瘡，這是目前困擾中老年人的常見疾病，患病時(shí)痛苦難受，病情嚴(yán)重時(shí)，有的無法坐凳，有的靡爛流膿，有的甚至演變成癌癥。目前較為常見的治療方法有:手術(shù)切除息肉，用黃胺結(jié)晶治療、肌肉注射青霉素，外敷痔瘡膏，內(nèi)服抗菌素類等。
[0007]以上種種長期用藥，無論中醫(yī)或西醫(yī)均對肝、腎損害極大。目前存在的專利技術(shù)殺菌液配方工藝相對復(fù)雜，用料價(jià)高。
[0008]_一種治療皮膚癬、濕疹的中藥殺菌液及其制備方法，CN201010010113，一種治療皮膚癬、濕疹的中藥殺菌液，它是由下述重量配比的原料制成的藥劑:白鮮皮:土荊皮、土茯苓:地榆:60度白酒=15-20: 5-10: 8-15: 10-15: 50-70。本發(fā)明一種治療皮膚癬、濕疹的中藥殺菌液是將白鮮皮、土荊皮、土茯苓、地榆切片浸泡在60度白酒內(nèi)制成的，為外用制劑，大大減小了不良反應(yīng)，直接用于患處加快吸收，使患者盡快脫離皮膚疾患。本發(fā)明區(qū)別于現(xiàn)有中草藥復(fù)方制劑，通過實(shí)驗(yàn)及試驗(yàn)證實(shí):該產(chǎn)品無毒副作用，療效短，見效快，作用明顯，不復(fù)發(fā)，經(jīng)濟(jì)簡便，比較現(xiàn)在臨床治療由真菌癬菌引起的皮膚疾病的內(nèi)服藥及外用方法有著本質(zhì)的差異，從根本上解除病痛。
[0009]水合聯(lián)氨治療灰指甲的新用途CN200410023073，本發(fā)明公開了一種水合聯(lián)氨治療灰指甲的新用途，主要是采用一定比例的水合聯(lián)氨和一定比例的蒸餾水混合配制成灰指甲殺菌液，涂抹于患甲上，能在最短時(shí)間內(nèi)，殺死真菌，徹底根治灰指甲。
[0010]一種消毒殺菌液和消炎粉CN03128044，一種消毒殺菌液和消炎粉，其重量組成為:食用酒精(乙醇含量68-70%) IOkg;活蜈蚣0.8-1.2kg;活蝮蛇0.8_1.2kg;活烏蛇0.8-1.2kg;蜂王漿 0.4-0.6kg;三七 0.4-0.6kg;金銀花 0.4-0.6kg;竹葉 0.4-0.6kg;仙人掌0.8-1.2kg。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是利用食用酒精提取具有毒性的野生動物的活性物質(zhì)，所制成的藥液具有較強(qiáng)殺滅多種致病病菌的功能，通過多家醫(yī)院臨床試驗(yàn)，對創(chuàng)傷性感染、病毒、真菌和細(xì)菌所導(dǎo)致的皮膚潰爛都具有較好的治療效果，制造成本低。
[0011]一種克癬浸涂液CN96118672，本發(fā)明涉及一種織物經(jīng)藥液浸涂后，能治療各類真菌引起的癬癥一種克癬浸涂液，其浸涂液由殺菌液和殺菌緩釋劑組成，其殺菌液由苦參、百部、冰片、蛇床子、烏洛托品加入酒精等構(gòu)成，其殺菌緩釋劑由明礬和銅綠構(gòu)成，織物經(jīng)殺菌液浸涂后，再經(jīng)殺菌緩釋劑固化，經(jīng)過浸涂后的織物能在長時(shí)間內(nèi)治療由真菌引起的各類癬癥，其有效率達(dá)98%以上，經(jīng)過多次洗滌，其藥效能達(dá)一年以上。
[0012]多功能牛皮癬殺菌液CN200310105020，本發(fā)明涉及到一種可治療牛皮癬等多種皮膚病的殺菌液，即多功能牛皮癬殺菌液。長期以來象牛皮癬之類的許多皮膚病一直缺乏較好的藥物，療效差而多有反復(fù)性。本發(fā)明采用多種生物為原料制成生物制劑的辦法取得良好效果，此即多功能牛皮癬殺菌液。采用的生物原料有海紅、海螺、牡蠣、蛤殼、柳樹菇、蜈蚣。本制劑可殺滅多種皮膚病菌，特別對頑固性牛皮癬，還有濕疹、腋臭、灰指甲、疥癬、瘙癢、植物性過敏等都有良好治療效果且無任何毒副作用。本發(fā)明不含任何無機(jī)化學(xué)添加劑而只用水做浸出劑，是一種綠色藥物。
[0013]透骨草民間用全草入藥，治感冒、跌打損傷，外用治毒瘡、濕疹、疥瘡。根及葉的鮮汁或水煎液對菜粉蝶、家蠅和三帶喙庫蚊的幼蟲有強(qiáng)烈的毒性。根含透骨草素(phrymarolin)及透骨草醇乙酸酯(leptostachyol acetate),后者為殺蟲成分。民間用全草煎水消滅蠅蛆和菜青蟲。
[0014]山茱萸(學(xué)名:Cornus officinalis),山茱萸科落葉灌木或小喬木。其成熟果實(shí)為中藥，別名山萸肉、藥棗、棗皮、蜀酸棗、肉棗、薯?xiàng)?、雞足、實(shí)棗、萸肉、藥棗、天木籽、山芋肉、實(shí)棗兒；山茱萸味酸、澀性，微溫。歸肝、腎經(jīng)。補(bǔ)益肝腎，澀精固脫。用于眩暈耳鳴，腰膝酸痛，陽痿遺精，遺尿尿頻，崩漏帶下，大汗虛脫，內(nèi)熱消渴，為固澀藥，它含有山茱萸甙、莫羅甙、7-0-甲基莫羅甙、山茱萸新甙、當(dāng)藥甙、番木鱉甙等環(huán)烯醚萜甙類及皂甙、熊果酸、酒石酸、沒食子酸、蘋果酸、山茱萸鞣質(zhì)1、2、3等多種有效成份。有明顯的利尿、降壓、抗菌與升高血液白細(xì)胞的作用。山茱萸，為我國常用名貴中藥材，應(yīng)用歷史悠久。它以其補(bǔ)力平和、壯陽而不助火，滋陰而不膩膈，收斂而不留邪等特殊功效被歷代醫(yī)學(xué)所喜用。張仲景以山茱萸為君創(chuàng)制了 “金匱腎氣丸”。據(jù)化學(xué)分析，山茱萸含有生理活性較強(qiáng)的山茱萸甙、酒石酸、沒食子酸、蘋果酸、樹酯、鞣質(zhì)和多種維生素等有效成分，具有增強(qiáng)免疫、抗炎、抗菌等藥理作用，是中醫(yī)臨床中常用的一味藥。
[0015]沒藥，別名:末藥明沒藥沒藥末藥制沒藥炙沒藥醋炒沒藥生沒藥生明沒藥。拉丁文名:Commiphora myrrha Engl.為橄欖科植物地丁樹或哈地丁樹的干燥樹脂,又名末藥。主產(chǎn)于非洲索馬里、埃塞俄比亞以及印度等地。采集由樹皮裂縫處滲出的白色油膠樹脂，于空氣中變成紅棕色而堅(jiān)硬的圓塊。打碎后，炒至焦黑色應(yīng)用。主治胸腹瘀痛、痛經(jīng)、經(jīng)閉、癥瘕、跌打損傷、癰腫瘡瘍、腸癰、目赤腫痛。有活血止痛、消腫生肌等功效。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0016] 本發(fā)明的目的在于提供一種針對真菌感染的皮膚病具有高效、快捷、復(fù)發(fā)率低等特點(diǎn)的殺菌液藥劑，采用患處低濃度藥液清洗、高濃度藥液擦拭的雙管齊下的療法。它既省錢又療效快，治療非常簡單方便。
[0017]本發(fā)明所述殺菌液的重量份數(shù)組成如下:
[0018]沒藥粉5-8份，山茱萸提取物8-15份，透骨草提取物10_15份，枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物10-20份，黃芩提取物3-15份，含氯化氫36% — 38%的濃鹽酸15-25份，高錳酸鉀0.05-0.15 份，水 10-30 份；
[0019]所述透骨草提取物制備方法如下: [0020]稱取透骨草；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3-6倍重量的水，控制溫度70°C _90°C保持2-4h，添加混合物料2-3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C _78°C保持3-4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得透骨草提取物。
[0021]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.2 ;乙醇濃度為95% ;丙醇濃度為100% ；
[0022]所述山茱萸提取物的制備方法如下:
[0023]將山茱萸粉碎至粒徑為2毫米以下置于容器中，添加3-6倍重量的水，控制溫度400C _60°C保持2-4h，控制溫度至65°C _75°C保持3_5h，添加混合物料2_3倍重量的乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至30°C _40°C保持3-8h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得山茱萸提取物。
[0024]所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1:2，乙醇濃度85-95%。甲醇濃度100%.[0025]所述黃芩提取物制備方法如下:
[0026]稱取黃芪；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后置于容器中添加3-6倍重量的水，控制溫度75°C~80°C保持2~4h，然后降溫至45-60°C，加入混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5_3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C~78°C保持3~4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得黃芪提取物。
[0027]所述混合酶制劑添加量為混合物料總重量的5_10%。
[0028]所述混合酶制劑的重量份數(shù)組成為:內(nèi)β -葡聚糖酶10-20份，外β -葡聚糖酶10-20份，β-葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，β -淀粉酶10-15份，中性蛋白酶10-15 份。
[0029]所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物制備方法如下:
[0030]所述菌株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏號為CICC23091，購于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。
[0031](I)菌種活化
[0032]將保存完好的枯草芽孢桿菌CICC23091的斜面菌種接種于斜面培養(yǎng)基，37_45°C培養(yǎng)24-36h進(jìn)行菌種活化，如此活化2-3次；
[0033]所述斜面培養(yǎng)基組成為:牛肉膏3-10g，氯化鈉5_12g，蛋白胨10_20g，葡萄糖2-5g,瓊脂 15-20g，蒸餾水 1000mL, pH 值 5-7，121°C 滅菌 20min ；
[0034](2)液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)
[0035]①一級種子培養(yǎng):將步驟(1)活化后的斜面菌種1-2環(huán)接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度38-43°C，培養(yǎng)時(shí)間10_15h ；
[0036]②二級種子培養(yǎng):將一級種子按照10%的接種量接入500毫升二級種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級種子相同；[0037]③三級種子培養(yǎng):將二級種子以10%接種量接入5000毫升三級種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度38-43°C，培養(yǎng)時(shí)間10_15h ；
[0038]④一級種子罐培養(yǎng):將三級種子以10%接種量接入總?cè)莘e為150L的一級種子罐，培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度37-45°C，攪拌速度200-400rpm，通風(fēng)量(V/V) 1:1-2，罐壓0.05Mpa,培養(yǎng)時(shí)間 10-20h ；
[0039]一級、二級、三級種子培養(yǎng)基重量組成為:
[0040]酵母粉0.3-0.5%，葡萄糖1-1.5%，蛋白胨0.3-0.5%，牛肉膏0.5-0.8%，磷酸氫二鉀0.8-1.5%，硫酸鈣1%，氯化鎂2%，檸檬酸鈉1-3%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值3_7，121-123? 滅菌 30-40min。
[0041]所述種子罐培養(yǎng)基重量組成為:
[0042]麥芽糊精5-15%，酵母粉0.4-0.8%，蛋白胨0.1-0.5%，玉米漿0.1-0.5%，磷酸氫二鉀0.8-1.5%，硫酸鎂0.05-0.1%，檸檬酸鈉0.1-0.5%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值3-7,121-123? 滅菌 30-40min。
[0043]所述種子罐發(fā)酵液菌體濃度為7.0x108-8.0x108個(gè)/ml ；
[0044](3)發(fā)酵罐發(fā)酵
[0045]將步驟(2)中一級種子罐發(fā)酵液以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度30_38°C，攪拌速度 200-700r/m，通風(fēng)量(V/V) 1:1-3,培養(yǎng)時(shí)間 36_48h。
[0046]溶解氧控制:通過調(diào)整攪拌轉(zhuǎn)速及通風(fēng)量，控制溶解氧15-30% ；
[0047]pH控制:通過補(bǔ)氨水或稀磷酸，控制發(fā)酵過程中pH值保持在3-7 ；
[0048]補(bǔ)料控制:當(dāng)發(fā)酵液中的還原糖含量降至3mg/mL-8mg/mL時(shí)，開始添加補(bǔ)料培養(yǎng)基，補(bǔ)料量以維持發(fā)酵液還原糖含量為2mg/mL-5mg/mL為準(zhǔn)；
[0049]放罐標(biāo)準(zhǔn):30-50%菌體衰老自溶。
[0050]所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:麥芽糊精50_150g，玉米粉50_60g，豆餅粉15_25g，透骨草10_20g，黃芩10_30g，酵母粉4-8g，玉米漿l_5g，硫酸銨l_3g，磷酸氫二鉀l_2g，磷酸二氫鉀l_2g，檸檬酸鈉l_5g，消泡劑0.Ι-lg,純凈水1000mL, pH值3-7，121°C滅菌20min ；
[0051]所述補(bǔ)料培養(yǎng)基重量組成為:麥芽糊精20-30%，玉米粉10-20%，豆粉15_25%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值3-7，121-123°C滅菌30_40min。
[0052]所述發(fā)酵培養(yǎng)基的調(diào)配方法為:
[0053]按比例準(zhǔn)確稱取原料，將原料中的純凈水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調(diào)節(jié)pH值3-7，加入中溫淀粉酶(3u/g玉米粉)與高溫淀粉酶(30u/g玉米粉)，同時(shí)邊攪拌邊升溫至70°C保溫15-30min，然后緩慢升溫至90°C保溫15_30min進(jìn)行液化，最后加入其它原料，攪拌均勻，調(diào)初始pH3-7，121-123°C滅菌30_40min備用。
[0054]菌種特征如下:
[0055]1.菌體細(xì)胞呈直桿狀、芽孢中生或近端生的革蘭氏陽性。
[0056]2.菌落特征為白色圓形，隆起，表面光滑，不透明，濕潤，挑起粘連。
[0057]3.能夠利用多種糖類，如葡萄糖、半乳糖、木糖、纖維二糖、棉籽糖等；產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、能夠水解明膠，V.P、甲基紅陽性。
[0058]4.最適培養(yǎng)溫度37°C,最適ρΗ7.0。
[0059]所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物是枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中含有的抑菌物質(zhì)，所述抑菌物質(zhì)可以有效抑制牛皮癬的復(fù)發(fā)。1%濃度的抑菌物質(zhì)溶液可以有效抑制牛皮癬的復(fù)發(fā)。
[0060]從發(fā)酵液中提取抑菌物質(zhì)的方法為有機(jī)溶劑沉淀法:
[0061 ] 首先將發(fā)酵液高速離心，溫度0-4°C，轉(zhuǎn)速為7000轉(zhuǎn)/分鐘，離心十分鐘，保留上清液；上清液中加入等體積有機(jī)溶劑(甲醇:乙醇=1:3)，充分溶解后置于三口燒瓶中，水浴控制溫度50攝氏度，攪拌速度為40rpm，時(shí)間為4小時(shí)，收集有機(jī)相，采用真空蒸餾法除去有機(jī)溶劑。蒸餾溫度45-65°C，蒸餾20分鐘，將有機(jī)溶劑去除。收集沉淀物質(zhì)即得。
[0062]本菌種分類地位如下:細(xì)菌域(Bacteria);厚壁菌門(Firmicutes);芽孢桿菌綱(Bacillales)；芽孢桿菌目(Bacillaceae)；芽孢桿菌科(Bacillus)；芽孢桿菌屬(Bacillus);枯草芽抱桿菌種(Bacillus subtilis)。
[0063]所述殺菌液的制備方法如下:
[0064]將上述幾種物質(zhì)按照比例混合均勻，灌裝，殺菌包裝即可。
[0065]有益效果:
[0066]1、藥物滲透性極佳，殺菌面深而廣；藥物化解能力極強(qiáng)，真菌入侵產(chǎn)生的毒素，瞬間就被解除；達(dá)到聞效、聞速。
[0067]2、操作雖然嚴(yán)格，但是治療簡單，在專業(yè)人員指導(dǎo)下易于掌握。
[0068]3、藥物廉價(jià)， 使用時(shí)只要極少的藥量，治療一個(gè)部位僅需0.5-lg，病人經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。
[0069]4、沒有任何毒性，且治愈率很高。
[0070]5、本發(fā)明產(chǎn)品采用中藥材有效提取成分和枯草芽孢桿菌發(fā)酵提取物，進(jìn)行有機(jī)組合，組合產(chǎn)物對治療常見牛皮癬等皮膚病療效顯著。
【具體實(shí)施方式】
[0071]下面的實(shí)施例可以使本領(lǐng)域技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0072]菌株具體為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏號為CICC23091，購于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。
[0073]本發(fā)明所獲得菌株在調(diào)整條件進(jìn)行發(fā)酵時(shí)，意外發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液提取物中含有高效殺菌物質(zhì)，殺菌物質(zhì)具有良好的預(yù)防和治療牛皮癬皮膚病的效果，發(fā)明人進(jìn)而利用本發(fā)明開發(fā)了此款產(chǎn)品。
[0074]實(shí)施例1:
[0075]殺菌液的重量份數(shù)組成如下:
[0076]沒藥粉7份，山茱萸提取物10份，透骨草提取物12份，枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物15份，黃芩提取物10份，含氯化氫36% — 38%的濃鹽酸20份，高錳酸鉀0.1份，水20份；
[0077]所述透骨草提取物制備方法如下:
[0078]稱取透骨草；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加5倍重量的水，控制溫度80°C保持3h，添加混合物料3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至75°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得。
[0079]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1 ;乙醇濃度為95% ;丙醇濃度為100% ；
[0080]所述山茱萸提取物的制備方法如下:[0081 ] 將粉碎至粒徑為2毫米以下山茱萸置于容器中，添加5倍重量的水，控制溫度50°C保持3h，控制溫度至70°C保持4h，添加混合物料3倍重量乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至35°C保持5h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得山茱萸提取物。
[0082]所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1:2，乙醇濃度85%，甲醇濃度100%。
[0083]黃芩提取物制備方法如下:
[0084]稱取黃芪；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中添加5倍重量的水，控制溫度75°C保持3h，然后降溫至55°C，加入混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為6，酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至70°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得。
[0085]所述混合酶添加量為混合物料總重量的6%。
[0086]所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶15份，外β-葡聚糖酶10份，β-葡萄糖苷酶10份，木聚糖酶15份，β-淀粉酶10份，中性蛋白酶10份。
[0087]枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物制備方法如下:
[0088]所述菌株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏號為CICC23091，購于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。
[0089](I)菌種活化
[0090]將保存完好的枯草芽孢桿菌的斜面菌種接種于斜面培養(yǎng)基，40°C培養(yǎng)30h進(jìn)行菌種活化，如此活化2-3次；`
[0091]所述斜面培養(yǎng)基組成為:牛肉膏6g,氯化鈉IOg,蛋白胨15g,葡萄糖3g,瓊脂18g,蒸懼水 1000mL, pH 值 6,121°C滅菌 20min ；
[0092](2)液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)
[0093]①一級種子培養(yǎng):將步驟(1)活化后的斜面菌種1-2環(huán)接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度40°C，培養(yǎng)時(shí)間12h ；
[0094]②二級種子培養(yǎng):將一級種子按照10%的接種量接入500毫升二級種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級種子相同；
[0095]③三級種子培養(yǎng):將二級種子以10%接種量接入5000毫升三級種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度40°C，培養(yǎng)時(shí)間12h ；
[0096]④一級種子罐培養(yǎng):將三級種子以10%接種量接入總?cè)莘e為150L的一級種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度40°C，攪拌速度300rpm，通風(fēng)量(V/V) 1:1,罐壓0.05Mpa,培養(yǎng)時(shí)間15h ；
[0097]所述一級、二級、三級種子培養(yǎng)基重量組成為:
[0098]酵母粉0.3%，葡萄糖1.5%，蛋白胨0.3%，牛肉膏0.5%，磷酸氫二鉀0.8%，硫酸鈣Ig,氯化鎂2g,檸檬酸鈉lg，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值5,121°C滅菌30min。
[0099]所述種子罐培養(yǎng)基重量組成為:
[0100]麥芽糊精10%，酵母粉0.4%，蛋白胨0.3%，玉米漿0.4%，磷酸氫二鉀1.0%，硫酸鎂0.08%，檸檬酸鈉0.3%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值6，121°C滅菌30min。
[0101]所述種子罐發(fā)酵液菌體濃度為7.0x108個(gè)/ml ；
[0102](3)發(fā)酵罐發(fā)酵
[0103]將步驟(2)中一級種子罐發(fā)酵液以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度36°C，攪拌速度300r/m,通風(fēng)量(V/V) 1: 2，培養(yǎng)時(shí)間36h。
[0104]溶解氧控制:通過調(diào)整攪拌轉(zhuǎn)速及通風(fēng)量，控制溶解氧20% ；
[0105]PH控制:通過補(bǔ)氨水或稀磷酸，控制發(fā)酵過程中pH值保持在5 ；
[0106]補(bǔ)料控制:當(dāng)發(fā)酵液中的還原糖含量降至3mg/ml時(shí),開始添加補(bǔ)料培養(yǎng)基,補(bǔ)料量以維持發(fā)酵液還原糖含量為4mg/ml ；
[0107]放罐標(biāo)準(zhǔn):40%菌體衰老自溶。
[0108]所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:麥芽糊精100g，玉米粉50g，豆餅粉25g，透骨草10g，黃芩20g，酵母粉6g，玉米漿3g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀lg，磷酸二氫鉀lg，檸檬酸鈉3g，消泡劑0.1g,純凈水 1000mL，pH 值 6，121°C滅菌 20min ；
[0109]所述補(bǔ)料培養(yǎng)基重量組成為:麥芽糊精25%，玉米粉15%，豆粉20%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值6,121°C滅菌30min。
[0110]所述發(fā)酵培養(yǎng)基的調(diào)配方法為:
[0111]按比例準(zhǔn)確稱取原料，將原料中的純凈水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調(diào)節(jié)PH值6，加入中溫淀粉酶(3u/g玉米粉)與高溫淀粉酶(30u/g玉米粉)，同時(shí)邊攪拌邊升溫至70°C保溫15min，然后緩慢升溫至90°C保溫30min進(jìn)行液化，最后加入其它原料，攪拌均勻，調(diào)初始pH6,121°C滅菌30min備用。
[0112]從發(fā)酵 液中提取抑菌物質(zhì)方法為有機(jī)溶劑沉淀法:
[0113]首先將發(fā)酵液高速離心，溫度2°C，轉(zhuǎn)速為7000轉(zhuǎn)/分鐘，離心十分鐘，保留上清液；
[0114]上清液中加入等體積有機(jī)溶劑(甲醇:乙醇=1:3)，充分溶解后置于三口燒瓶中，水浴控制溫度50攝氏度，攪拌速度為40rpm，時(shí)間為4小時(shí)，收集有機(jī)相，采用真空蒸餾法除去有機(jī)溶劑。蒸餾溫度55°C，蒸餾20分鐘，將有機(jī)溶劑去除。收集沉淀物質(zhì)即得。
[0115]所述殺菌液的制備方法如下:將上述幾種物質(zhì)按照比例混合均勻，灌裝，殺菌包裝即可。
[0116]實(shí)施例2:
[0117]殺菌液的重量份數(shù)組成如下:
[0118]沒藥粉8份，山茱萸提取物8份，透骨草提取物10份，枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物20份，黃芩提取物15份，含氯化氫36%的濃鹽酸15份，高錳酸鉀0.15份，水30份。
[0119]所述透骨草提取物制備方法如下:
[0120]稱取透骨草；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3倍重量的水，控制溫度70°C保持2h，添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C保持4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得。
[0121]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1.2 ;乙醇濃度為95% ;丙醇濃度為100% ；
[0122]所述山茱萸提取物的制備方法如下:
[0123]將粉碎至粒徑為2毫米以下山茱萸置于容器中，添加3倍重量的水，控制溫度40°C保持2h，控制溫度至65°C保持3h，添加混合物料2倍重量乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至30°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得山茱萸提取物。
[0124]所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1:2，乙醇濃度95%，甲醇濃度100%。
[0125]黃芩提取物制備方法如下:[0126]稱取黃芪；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中添加3倍重量的水，控制溫度80°C保持2h，然后降溫至45°C，加入混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，酶解2h，最后添加混合物料0.5倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C保持4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得。
[0127]所述混合酶添加量為混合物料總重量的5%。
[0128]所述混合酶的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶10份，外β-葡聚糖酶15份，β -葡萄糖苷酶12份，木聚糖酶18份，β -淀粉酶12份，中性蛋白酶12份。
[0129]枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物制備方法如下:
[0130]所述菌株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏號為CICC23091，購于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。
[0131](I)菌種活化
[0132]將保存完好的枯草芽孢桿菌的斜面菌種接種于斜面培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)36h進(jìn)行菌種活化，如此活化2-3次；
[0133]所述斜面培養(yǎng)基組成為:牛肉膏3g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，葡萄糖2g，瓊脂15-20g，蒸餾水 1000mL，pH 值 5-7，121°C 滅菌 20min ；
[0134](2)液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)
[0135]擴(kuò)大培養(yǎng)方法基本同實(shí)施例1 ;
[0136]所述一級、二級、三級種子培養(yǎng)基重量組成為:
[0137]酵母粉0.5%，葡萄糖1%，蛋白胨0.5%，牛肉膏0.8%，磷酸氫二鉀1.5%，硫酸鈣Ig,氯化鎂2g，檸檬酸鈉3g，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值3，123°C滅菌30min。
[0138]所述種子罐培養(yǎng)基重量組成為:
[0139]麥芽糊精5%，酵母粉0.8%，蛋白胨0.1%，玉米漿0.1%，磷酸氫二鉀0.8%，硫酸鎂0.05%，檸檬酸鈉0.1%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值3，123°C滅菌30min。
[0140]所述種子罐發(fā)酵液菌體濃度為8.0xlO8個(gè)/ml ；
[0141](3)發(fā)酵罐發(fā)酵
[0142]將步驟(2)中一級種子罐發(fā)酵液以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度30°C，攪拌速度200r/m，通風(fēng)量(V/V) 1:1，培養(yǎng)時(shí)間36h。
[0143]溶解氧控制:通過調(diào)整攪拌轉(zhuǎn)速及通風(fēng)量，控制溶解氧15% ；
[0144]pH控制:通過補(bǔ)氨水或稀磷酸，控制發(fā)酵過程中pH值保持在3 ；
[0145]補(bǔ)料控制:當(dāng)發(fā)酵液中的還原糖含量降至3mg/ml時(shí),開始添加補(bǔ)料培養(yǎng)基,補(bǔ)料量以維持發(fā)酵液還原糖含量為5mg/ml ；
[0146]放罐標(biāo)準(zhǔn):30%菌體衰老自溶。
[0147]所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:麥芽糊精150g，玉米粉60g，豆餅粉25g，透骨草20g，黃芩30g，酵母粉Sg，玉米漿5g，硫酸銨3g，磷酸氫二鉀2g，磷酸二氫鉀2g，檸檬酸鈉5g，消泡劑Ig,純凈水 1000mL, pH 值 3，121°C滅菌 20min ；
[0148]所述補(bǔ)料培養(yǎng)基重量組成為:麥芽糊精20%，玉米粉10%，豆粉15%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值3,121°C滅菌30min。
[0149]所述發(fā)酵培養(yǎng)基的調(diào)配方法為:
[0150]按比例準(zhǔn)確稱取原料，將原料中的純凈水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調(diào)節(jié)pH值3，加入中溫淀粉酶(3u/g玉米粉)與高溫淀粉酶(30u/g玉米粉)，同時(shí)邊攪拌邊升溫至70°C保溫30min，然后緩慢升溫至90°C保溫20min進(jìn)行液化，最后加入其它原料，攪拌均勻，調(diào)初始pH3,121°C滅菌30min備用。
[0151]從發(fā)酵液中提取抑菌物質(zhì)方法基本同實(shí)施例1。
[0152]所述殺菌液的制備方法如下:將上述幾種物質(zhì)按照比例混合均勻，灌裝，殺菌包裝即可。
[0153]實(shí)施例3:
[0154]殺菌液重量份數(shù)組成如下:沒藥粉5份，山茱萸提取物15份，透骨草提取物15份，枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物10份，黃芩提取物3份，含氯化氫36% — 38%的濃鹽酸25份，高錳酸鉀0.05份，水30份。
[0155]所述透骨草提取物制備方法如下:
[0156]稱取透骨草；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加6倍重量的水，控制溫度90°C保持4h，添加混合物料3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至78°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得透骨草提取物。
[0157]所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1 ;乙醇濃度為95% ;丙醇濃度為100% ；
[0158]所述山茱萸提取物的制備方法如下: [0159]將山茱萸粉碎至粒徑為2毫米以下置于容器中，添加6倍重量的水，控制溫度60°C保持4h，控制溫度至75°C保持5h，添加混合物料3倍重量的乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至40°C保持8h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得山茱萸提取物。
[0160]所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1:2，乙醇濃度90%，甲醇濃度100%。
[0161]所述黃芩提取物制備方法如下:
[0162]稱取黃芪；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后置于容器中添加6倍重量的水，控制溫度78°C保持4h，然后降溫至60°C，加入混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為6.8，酶解4h，最后添加混合物料3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至78°C保持3h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得黃芪提取物。
[0163]所述混合酶制劑添加量為混合物料總重量的10%。
[0164]所述混合酶制劑的重量份數(shù)組成為:內(nèi)葡聚糖酶20份，外β_葡聚糖酶20份，β-葡萄糖苷酶15份，木聚糖酶20份，β-淀粉酶15份，中性蛋白酶15份。
[0165]所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物制備方法如下:
[0166]所述菌株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏號為CICC23091，購于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。
[0167](I)菌種活化
[0168]將保存完好的枯草芽孢桿菌CICC23091的斜面菌種接種于斜面培養(yǎng)基，45°C培養(yǎng)24h進(jìn)行菌種活化，如此活化2-3次；
[0169]所述斜面培養(yǎng)基組成為:牛肉膏10g，氯化鈉12g，蛋白胨20g，葡萄糖5g，瓊脂20g，蒸餾水 1000mL，pH 值 7，121°C滅菌 20min ；
[0170](2)液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)
[0171]擴(kuò)大培養(yǎng)方法基本同實(shí)施例1 ;
[0172]—級、二級、三級種子培養(yǎng)基重量組成為:[0173]酵母粉0.4%，葡萄糖1.2%，蛋白胨0.4%，牛肉膏0.56%，磷酸氫二鉀1.0%，硫酸鈣1%,氯化鎂2%，檸檬酸鈉2%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值7，121°C滅菌40min。
[0174]所述種子罐培養(yǎng)基重量組成為:
[0175]麥芽糊精15%，酵母粉0.5%，蛋白胨0.5%，玉米漿0.5%，磷酸氫二鉀1.5%，硫酸鎂
0.1%，檸檬酸鈉0.5%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值7，121°C滅菌40min。
[0176]所述種子罐發(fā)酵液菌體濃度為8.0xlO8個(gè)/ml ；
[0177](3)發(fā)酵罐發(fā)酵
[0178]將步驟(2)中一級種子罐發(fā)酵液以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度38°C，攪拌速度700r/m，通風(fēng)量(V/V) 1:3,培養(yǎng)時(shí)間48h。
[0179]溶解氧控制:通過調(diào)整攪拌轉(zhuǎn)速及通風(fēng)量，控制溶解氧30% ；
[0180]pH控制:通過補(bǔ)氨水或稀磷酸，控制發(fā)酵過程中pH值保持在7 ；
[0181]補(bǔ)料控制:當(dāng)發(fā)酵液中的還原糖含量降至3mg/mL-8mg/mL時(shí)，開始添加補(bǔ)料培養(yǎng)基，補(bǔ)料量以維持發(fā)酵液還原糖含量為2mg/mL-5mg/mL為準(zhǔn)；
[0182]放罐標(biāo)準(zhǔn):50%菌體衰老自溶。
`[0183]所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:麥芽糊精50g，玉米粉55g，豆餅粉15g，透骨草15g，黃芩IOg,酵母粉4g，玉米漿lg，硫酸銨lg，磷酸氫二鉀1.5g，磷酸二氫鉀1.5g，檸檬酸鈉lg，消泡劑 0.5g,純凈水 1000mL, pH 值 7，121°C滅菌 20min ；
[0184]所述補(bǔ)料培養(yǎng)基重量組成為:麥芽糊精30%，玉米粉20%，豆粉25%，不足部分純凈水補(bǔ)足，pH值7,121滅菌40min。
[0185]所述發(fā)酵培養(yǎng)基的調(diào)配方法基本同實(shí)施例1。
[0186]從發(fā)酵液中提取抑菌物質(zhì)的方法基本同實(shí)施例1。
[0187]所述殺菌液的制備方法如下:將上述幾種物質(zhì)按照比例混合均勻，灌裝，殺菌包裝即可。
[0188]實(shí)施例4:實(shí)驗(yàn)效果
[0189]實(shí)例一:治療牛皮癬
[0190]2007年浙江松陽縣齋坦鄉(xiāng)花橋頭村的周玉法，年齡28歲。觀察到的病情，左面項(xiàng)頸連肩部附近，約有10平方厘米的表面，有銀白色燥皮屑脫落，時(shí)間有8年了。里面發(fā)癢，十分難受。一搔才知皮下紅腫發(fā)炎。右面項(xiàng)頸連肩部附近約有10多平方厘米的表面，跟左面不同，卻是一片黑色，撕開少量的黑皮，皮下也紅腫發(fā)炎，不堪忍受?；颊哒f到鄉(xiāng)衛(wèi)生院、縣醫(yī)院求醫(yī)多年均無效。
[0191]診斷:屬于重癥牛皮癬。①先用防蔓延抗復(fù)發(fā)的清洗液擦洗一次。②由于患者年輕力壯，承受力強(qiáng)，病歷也較長。為了高速治病，清洗隔10分鐘，馬上用此高檔殺菌液對患部擦拭5— 7秒鐘。值得提醒的是:取藥棉時(shí)必須十分小心，先用鑷子夾住I立方厘米大小的棉球，打開瓶口，即插入藥劑中，然后拉至瓶口稍稍揉壓，濕度如同酒精棉。先蓋好瓶口，再到患部擦拭?？炻悦脶樧邉拥乃俣葹闇?zhǔn)。第二次施藥中間隔2天。以此類推，左頸患部治療4次，右頸患部也治療4次，一共8次。幾年了，周玉法頸部安然無恙，一直在松陽縣城做工。
[0192]采用此方法用本發(fā)明產(chǎn)品先后治愈100多例此類病人。
[0193]實(shí)例二:治療破裂性奇癢癥用同例I的方法治療此類病人50多例，85%以上治療成功。
[0194]實(shí)例三:治療顆粒性搔癢癥用同例I的方法治療此類病人60多例，治療成功。
[0195]實(shí)例四:治療小兒癩痢
[0196]2003年4月，浙江松陽大竹溪村九歲的葉廷軍，前額上部約有七八個(gè)平方厘米的面積不長黑發(fā)了，患部有很多白色碎皮屑，邊沿生著一圈紅腫的顆粒，真菌還在侵蝕其它黑發(fā)。
[0197]治療方案:用殺菌液3毫升，治療時(shí)先用清洗液洗一次，10分鐘后，用殺菌液擦拭5— 7秒，30分鐘后，把患部用溫開水弄濕，用其他消炎膏敷上。中間隔2天后，以此類推，第二次上藥。因?yàn)閷ΠY用藥，頭部真菌滅得快，頭發(fā)也長得快。2次也不過共用藥14秒。2天后患處全面開始生長黑發(fā)。至今十年了，孩子已長大，沒有任何復(fù)發(fā)的訴苦。同樣方法治療同類病人85例。
[0198]從那么多的巧妙治療頑固性皮膚病成功的經(jīng)歷，聯(lián)想起過去，立足于現(xiàn)在，才找到了本發(fā)明的配方依據(jù):人們皮膚患上形形色色難以攻克的頑癥，主要是真菌作怪造成，因?yàn)檎婢鈱拥慕M成份為特種鈣類化合物，防水性能極佳，所以溶解于水的抗生素或其他中藥、西藥外敷，都很難滲入真菌體內(nèi)，真菌就無損毫毛?，F(xiàn)在找到的既能適合人體又能突破真菌菌體的最佳酸類是含氯化氫的稀鹽酸。人體本身每天制造所含有的輕度鹽酸就是人體內(nèi)抗菌免疫的重要一環(huán)，只是人體外部表面所含的鹽酸濃度非常低。尤其是軀干的表面、四肢的末端、人體頭部。這些部位最易被攻，最易得病。軀干末端的排污肛門首當(dāng)其沖。本發(fā)明提倡在患者皮膚表面上使用濃度較高或較低的高檔殺菌液，正是彌補(bǔ)了人體先天的不足，又能輕而易舉地殺滅真菌， 從而達(dá)到治療皮膚病的目的。
【權(quán)利要求】
1.一種新型殺菌液，其特征在于，所述新型殺菌液重量份數(shù)組成如下:沒藥粉5-8份，山茱萸提取物8-15份，透骨草提取物10-15份，枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物10-20份，黃芩提取物3-15份，含氯化氫36% — 38%的濃鹽酸15-25份，高錳酸鉀0.05-0.15份，水10-30份；所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物制備方法如下:將枯草芽孢桿菌CICC23091菌種活化，液體種子擴(kuò)大培養(yǎng),發(fā)酵罐發(fā)酵:將種子罐發(fā)酵液以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度30-38°C，攪拌速度200-700r/m，通風(fēng)量(V/V) 1:1-3,培養(yǎng)時(shí)間36_48h ;放罐標(biāo)準(zhǔn):30-50%菌體衰老自溶； 從發(fā)酵液中提取抑菌物質(zhì)方法為有機(jī)溶劑沉淀法:首先將發(fā)酵液高速離心，溫度0-4°C，轉(zhuǎn)速為7000轉(zhuǎn)/分鐘，離心十分鐘，保留上清液；上清液中加入等體積有機(jī)溶劑，所述有機(jī)溶劑為甲醇:乙醇=1:3，充分溶解后置于三口燒瓶中，水浴控制溫度50攝氏度，攪拌速度為40rpm，時(shí)間為4小時(shí)，收集有機(jī)相，采用真空蒸餾法除去有機(jī)溶劑；蒸餾溫度45-65°C，蒸餾20分鐘，將有機(jī)溶劑去除；收集沉淀物質(zhì)即得； 所述透骨草提取物的制備方法如下:稱取透骨草；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3-6倍重量的水，控制溫度70 V -90°C保持2-4h，添加混合物料2-3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C _78°C保持3-4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得；所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.2 ;乙醇濃度為95%，丙醇濃度為100% ； 所述山茱萸提取物的制備方法如下:將山茱萸粉碎至粒徑為2毫米以下置于容器中，添加3-6倍重量的水，控制溫度40°C _60°C保持2-4h，控制溫度至65°C _75°C保持3_5h，添加混合物料2-3倍重量的乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至30°C _40°C保持3-8h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得山茱萸提取物；所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1:2，乙醇濃度85-95%,甲醇濃度100%。 所述黃芩提取物的制備方法如下:稱取黃芪；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后置于容器中添加3-6倍重量的水，`控制溫度75°C~80°C保持2~4h，然后降溫至45_60°C，加入混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)PH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C~78°C保持3~4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得；所述混合酶制劑的添加量為混合物料總重量的5-10%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型殺菌液，其特征在于，所述透骨草提取物的制備方法如下:稱取透骨草；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3-6倍重量的水，控制溫度70°C _90°C保持2-4h，添加混合物料2-3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C _78°C保持3-4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得；所述乙醇和丙醇的質(zhì)量比例為1:1-1.2 ;乙醇濃度為95%，丙醇濃度為100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型殺菌液，其特征在于，所述山茱萸提取物的制備方法如下:將山茱萸粉碎至粒徑為2毫米以下置于容器中，添加3-6倍重量的水，控制溫度400C _60°C保持2-4h，控制溫度至65°C _75°C保持3_5h，添加混合物料2_3倍重量的乙醇和甲醇的混合物，控制溫度至30°C _40°C保持3-8h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得山茱萸提取物；所述乙醇和甲醇的質(zhì)量比例為1:2，乙醇濃度85-95%，甲醇濃度100%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型殺菌液，其特征在于，所述黃芩提取物的制備方法如下:稱取黃芪；將其粉碎至粒徑為2毫米以下，然后置于容器中添加3-6倍重量的水，控制溫度75°C~80°C保持2~4h，然后降溫至45-60°C，加入混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)PH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量的乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60°C~78°C保持3~4h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得；所述混合酶制劑的添加量為混合物料總重量的5-10%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種新型殺菌液，其特征在于，所述混合酶制劑的重量份數(shù)組成為:內(nèi)β -葡聚糖酶10-20份，外β -葡聚糖酶10-20份，β -葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，β -淀粉酶10-15份，中性蛋白酶10-15份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型殺菌液，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液提取物制備方法如下:將枯草芽孢桿菌CICC23091菌種活化，液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)，發(fā)酵罐發(fā)酵:將種子罐發(fā)酵液以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度30-38°C，攪拌速度200-700r/m，通風(fēng)量(V/V) 1:1-3,培養(yǎng)時(shí)間36-48h ;放罐標(biāo)準(zhǔn):30-50%菌體衰老自溶； 從發(fā)酵液 中提取抑菌物質(zhì)方法為有機(jī)溶劑沉淀法:首先將發(fā)酵液高速離心，溫度.0-4°C，轉(zhuǎn)速為7000轉(zhuǎn)/分鐘，離心十分鐘，保留上清液；上清液中加入等體積有機(jī)溶劑，所述有機(jī)溶劑為甲醇:乙醇=1:3，充分溶解后置于三口燒瓶中，水浴控制溫度50攝氏度，攪拌速度為40rpm，時(shí)間為4小時(shí)，收集有機(jī)相，采用真空蒸餾法除去有機(jī)溶劑；蒸餾溫度45-65°C，蒸餾20分鐘，將有機(jī)溶劑去除；收集沉淀物質(zhì)即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種新型殺菌液，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:麥芽糊精50-150g，玉米粉50-60g，豆餅粉15-25g，透骨草10_20g，黃芩10_30g，酵母粉4_8g，玉米漿l_5g，硫酸銨l_3g，磷酸氫二鉀l_2g，磷酸二氫鉀l_2g，檸檬酸鈉l_5g，消泡劑.0.Ι-lg,純凈水1000mL, pH值3-7，121°C滅菌20min。8.如權(quán)利要求1-7任一所述的一種新型殺菌液的制備方法，所述制備方法如下:將所述殺菌液組成物質(zhì)按照比例混合均勻，灌裝，殺菌包裝即可。
【文檔編號】A61K36/40GK103585270SQ201310524778
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年10月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月29日
【發(fā)明者】潘志榮 申請人:潘志榮