一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分及其提取分離方法、應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分及其提取分離、應(yīng)用。該促凝血補(bǔ)骨脂有效成分由補(bǔ)骨脂中提取分離得到，同時(shí)，該有效成分可以縮短血漿復(fù)鈣時(shí)間，從而起到促凝血的作用，可應(yīng)用于制備促凝血藥物。
【專利說明】一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分及其提取分離方法、應(yīng)用
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】
本發(fā)明屬于中藥提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分及其提取分離方法、應(yīng)用。
[0002]【背景技術(shù)】
補(bǔ)骨脂F(xiàn)ructus為豆科植物補(bǔ)骨脂corylifolia Linn.的干燥果實(shí)，又名破故紙、黑故子等，為常用中藥，味辛、苦、性溫，歸腎、脾經(jīng)，具有補(bǔ)腎助陽，納氣平喘，溫脾止瀉的功效。現(xiàn)代研究表明，補(bǔ)骨脂含黃酮類、香豆素類、脂肪酸類和單萜酚類等多種化學(xué)成分，具有抗氧化、降血糖、擴(kuò)張血管、保肝、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、雌激素樣和抑制葡萄糖苷酶等作用。
[0003]補(bǔ)骨脂甲素(bavachin)，別名:補(bǔ)骨脂二氫黃酮；分子式=C2tlH2tlO4 ;分子量:324.37 ；CAS登錄號:19879_32_4 ;本品為一種查爾酮類化合物，其開環(huán)生成的查耳酮具有擴(kuò)張冠脈的作用；能顯著提高ALP活性，并能促進(jìn)骨細(xì)胞的增殖和分化的作用，可用于骨質(zhì)疏松的治療。另外，補(bǔ)骨脂甲素對豬油有一定的抗氧化作用；能直接抑制sinilan病毒SV40DNA聚合酶的復(fù)制；其為補(bǔ)骨脂的主要抑菌活性成分，對蘋果腐爛病菌具有很高的抑制活性，其EC5tl為6.144 g/L，EC9tl為89.631 g/L，顯示出一定的農(nóng)用價(jià)值。此外，補(bǔ)骨脂甲素有較強(qiáng)的由于毒性所至的抗誘變活性。
[0004]大豆苷元(da idzein)，別名:大豆甙元、黃豆苷元、大豆素、大豆黃酮；分子式:C15H10O4 ;分子量:254.24 ；CAS登錄號:486_66_8 ;本品是一種異黃酮類植物雌激素，呈白色粉狀，無毒、無味、不溶于水，在醇、酮類溶劑中有一定的溶解度，極易溶于二甲亞砜中，主要存在于黃豆、鷹嘴豆、小扁豆和蠶豆等豆類中，具有抗氧化、抗動脈粥樣硬化、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖、抗心律失常、保護(hù)急性心肌缺血和腦缺血、弱雌激素樣(在內(nèi)源性雌激素水平低時(shí))與抗雌激素樣作用(體內(nèi)雌激素水平較高時(shí))、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抑制前列腺增生等作用。另有研究證實(shí)可抑制嗜酒大鼠的酒精消耗，顯著抑制豚鼠離體膽囊肌條自發(fā)性收縮活動，使收縮力降低，緊張性下降，還可對抗乙酰膽堿、組胺引起的離體膽囊肌條收縮運(yùn)動。目前，大豆苷元主要以口服制劑應(yīng)用，用于高血壓、冠心病、骨質(zhì)疏松、前列腺癌、乳腺癌、腦血栓、眩暈癥、突發(fā)性耳聾的輔助治療，也可用于婦女更年期綜合征。
[0005]紫云英苷(astragalin),別名:黃苗苷、茨非醇K-葡萄糖苷、山柰酹-3-葡萄糖苷、百蕊草素II ;分子式=C21H20O11 ;分子量:448.38 ；CAS登錄號:480-10_4，具有降血壓、解痙、利尿、利膽和鎮(zhèn)咳劑等作用。
[0006]血液為人體重要的物質(zhì)，臨床上各種原因引起的出血較為常見，如不及時(shí)有效的制止，致使血液耗損，而造成機(jī)體衰弱，甚至危及生命。一些臨床癥狀，如①先天性缺陷癥:凝血因子珊、IX、XI先天性缺乏或蛋白分子異常癥、凝血因子VI1、X、V先天性缺乏癥或蛋白分子異常癥、纖維蛋白原或凝血酶原先天性缺乏癥或蛋白分子異常癥。②獲得性缺乏癥:嚴(yán)重肝病使凝血因子合成減少，如重癥肝炎、慢性肝炎、肝硬化；維生素K缺乏或利用障礙，如吸收不良綜合癥、脂肪瀉、阻塞性黃疸、廣譜抗生素治療、口服抗凝劑；消耗過多，如原發(fā)性或繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)。③循環(huán)抗凝物增加或肝素治療等均可導(dǎo)致血漿復(fù)鈣時(shí)間延長，使血液不停地流。止血藥可通過收縮小動脈及毛細(xì)血管，或增強(qiáng)血小板功能，或加速、加強(qiáng)血液凝固過程，或抑制血塊溶解過程而產(chǎn)生止血作用。目前臨床應(yīng)用的止血藥除少量傳統(tǒng)藥物如維生素K、氨甲環(huán)酸、卡巴克絡(luò)等，大部分為生化藥物如從動物血中提取的凝血酶、從動物器官中提取的抑肽酶，使用這些藥品可能會發(fā)生過敏、出現(xiàn)血清肌酐一過性增高等不良反應(yīng)。
[0007]目前尚無來自于補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂甲素、大豆苷元和紫云英苷對血漿復(fù)鈣時(shí)間影響的報(bào)道。
[0008]
【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的在于提供一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分，同時(shí)提供一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分的提取分離方法和應(yīng)用。
[0009]為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分的提取分離方法，包括以下步驟:
1)補(bǔ)骨脂粉碎，用甲醇浸提，浸提液合并、過濾、濃縮得補(bǔ)骨脂甲醇浸膏，補(bǔ)骨脂甲醇浸膏分散于(75-85%v/v)甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，所得乙酸乙酯萃取物即為乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即為正丁醇部位；
2)乙酸乙酯部位進(jìn)行200-300目硅膠柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，體積比例為80:1飛:5，以TLC檢測合并，各組分反復(fù)經(jīng)硅膠H柱色譜、LC3000型高效液相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜和重結(jié)晶得到化合物I和化合物2 ； 3)正丁醇部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，用氯仿-甲醇梯度洗脫，體積比例為100:f 7:3，經(jīng)LC3000型高效液相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜分離得到化合物3。
[0010]按照以上提取分離方法得到的促凝血補(bǔ)骨脂有效成分。
[0011]促凝血補(bǔ)骨脂有效成分在促凝血方面的應(yīng)用。
[0012]促凝血補(bǔ)骨脂有效成分在制備促凝血藥物方面的應(yīng)用。
[0013]所述補(bǔ)骨脂甲醇浸膏的具體制備方法為:補(bǔ)骨脂粉碎后，用甲醇(90% v/v以上)室溫浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、過濾、濃縮得補(bǔ)骨脂甲醇浸膏。
[0014]化合物1、2、3分別是補(bǔ)骨脂甲素、大豆苷元和紫云英苷，其結(jié)構(gòu)如下:
【權(quán)利要求】
1.一種促凝血補(bǔ)骨脂有效成分的提取分離方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)補(bǔ)骨脂粉碎，用甲醇浸提，浸提液合并、過濾、濃縮得補(bǔ)骨脂甲醇浸膏，補(bǔ)骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，所得乙酸乙酯萃取物即為乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即為正丁醇部位； 2)乙酸乙酯部位進(jìn)行200-300目硅膠柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，比例為80:1飛:5，以TLC檢測合并，各組分反復(fù)經(jīng)硅膠H柱色譜、LC3000型高效液相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜和重結(jié)晶得到化合物I和化合物2 ； 3)正丁醇部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，用氯仿-甲醇梯度洗脫，比例為100:廣7:3，經(jīng)LC3000型高效液相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜分離得到化合物3 ;化合物1、2、3即為促凝血補(bǔ)骨脂有效成分。
2.利用權(quán)利要求1提取分離方法得到的促凝血補(bǔ)骨脂有效成分。
3.—種權(quán)利要求2所述的促凝血補(bǔ)骨脂有效成分在促凝血方面的應(yīng)用。
4.一種權(quán)利要求2 所述的促凝血補(bǔ)骨脂有效成分在制備促凝血藥物方面的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K31/7048GK103626732SQ201310540242
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月5日
【發(fā)明者】張偉, 康文藝, 尹震花, 彭濤 申請人:黃河科技學(xué)院