一種鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗菌藥物鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體及制備方法，利用鹽酸左氧氟沙星與烏梅兩者的協(xié)同作用，通過復(fù)合脂質(zhì)體使鹽酸左氧氟沙星與烏梅作用效果顯著增強(qiáng)，由于大腸桿菌是革蘭氏陰性菌，外膜外葉層主要有LPS組成，內(nèi)部流動(dòng)性極低，能夠有效的排斥部分抗生素，將鹽酸左氧法沙星與烏梅做成復(fù)合脂質(zhì)體制劑后，脂質(zhì)體能夠有效的粘附在大腸桿菌細(xì)胞壁上，破壞細(xì)胞壁的生成，侵入到細(xì)胞外膜上，進(jìn)而通過與外膜結(jié)合進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部，達(dá)到較好的抑菌效果。
【專利說明】一種鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明提供一種鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體，同時(shí)還公開了其制備方法，屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]在我國醫(yī)藥市場(chǎng)中，抗感染藥物的銷售額始終居于首位，年銷售額約為300多億元，約占全國藥品市場(chǎng)的30%左右，目前在抗感染藥物市場(chǎng)中，喹諾酮類藥物在臨床上的用量已超過青霉素類，成為第二大抗菌藥物。據(jù)估計(jì)，進(jìn)入市場(chǎng)的新型抗菌藥物產(chǎn)品中，有I / 3為氟喹諾酮類。目前世界氟喹諾酮類藥物主要以左氧氟沙星和環(huán)丙沙星為主導(dǎo)，兩者總和約占氟喹諾酮類藥物全球銷售額的65%左右，其中左氧氟沙星在國內(nèi)2003年的銷售金額為18.83億元，名列喹諾酮類抗生素藥品之首。目前左氧氟沙星的市場(chǎng)銷售額仍然保持快速增長的勢(shì)頭，因此開發(fā)更加優(yōu)良的左氧氟沙星制劑有著巨大的市場(chǎng)前景。
[0003]微生物感染是危害人類生命健康的重要疾病，左氧氟沙星是日本第一制藥株式會(huì)社于1986年開發(fā)，1994年推向日本市場(chǎng)的氟喹諾酮類抗菌藥。其特別對(duì)難治性、復(fù)雜性的較深部位的感染顯示出優(yōu)異的效果，臨床上主要用于敏感菌引起的呼吸、泌尿、生殖、皮膚軟組織等輕、重度感染。但同時(shí)也存在許多不良反應(yīng)，如胃腸道反應(yīng)，腹部不適或疼痛、腹瀉、惡心或嘔吐；中樞神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)可有頭昏、頭痛、嗜睡或失眠；過敏反應(yīng)有皮疹、皮膚瘙癢，偶可發(fā)生滲出性多形性紅斑及血管神經(jīng)性水腫。目前鹽酸左氧氟沙星在國內(nèi)上市的劑型主要有片劑、膠囊劑、注射劑和滴眼劑等普通制劑，暫無具有緩釋、促滲作用的新型制劑出現(xiàn)。
[0004]而脂質(zhì)體是近年來發(fā)展起來來的一種新型載藥系統(tǒng)，由磷脂和膽固醇組成，可包封水溶性藥物，又可包封脂溶性藥物。以硫酸銨梯度為基礎(chǔ)的遠(yuǎn)程載藥技術(shù)制備的脂質(zhì)體，具有不易滲漏，較傳統(tǒng)方法制備的脂質(zhì)體穩(wěn)定。脂質(zhì)體還具有親和性、緩釋性、減低藥物毒性、增加藥物穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)。因此，作為藥物傳遞系統(tǒng)具有很大的優(yōu)勢(shì)。
[0005]中草藥所含有的抗菌物質(zhì)具有不易產(chǎn)生耐藥性，毒副作用小，安全性高等特點(diǎn)，其中，烏梅可以收斂生津，安蛔驅(qū)蟲.治久咳，虛熱煩渴，久瘧，久瀉，痢疾，便血，尿血，血崩，蛔厥腹痛，嘔吐，鉤蟲病，牛皮癬，胬肉等。其所含的有機(jī)酸對(duì)侵入胃腸道中的霉菌等病原菌有很強(qiáng)的殺滅作用。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】
:
本發(fā)明公開了一種鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體，其特征在于是由以下原料按重量份數(shù)比制成的:
鹽酸左氧氟沙星2、磷脂:10-20、膽固醇:10、表面活性劑:廣2、烏梅提取物0.0f 2。
[0007]其中，烏梅提取物是通過以下制備工藝獲得的:
在烏梅中加入5倍量的水浸泡2~3h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮4(T60min，過濾，收集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡2~3h，再煎3(T60min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。[0008]本發(fā)明提供的鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體是通過以下制備工藝獲得的:
將上述混合物加入17倍量(g/ml)乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將該溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液。
[0009]本發(fā)明還公開了該復(fù)合脂質(zhì)體混懸液在制備抗菌藥物中的應(yīng)用，制成片劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、口服液等口服制劑，用于治療敏感菌引起的呼吸、泌尿、生殖、皮膚軟組織等輕、重度感染。
[0010]本發(fā)明的積極效果在于:
利用鹽酸左氧氟沙星與烏梅兩者的協(xié)同作用，通過復(fù)合脂質(zhì)體使鹽酸左氧氟沙星與烏梅作用效果顯著增強(qiáng)，由于大腸桿菌是革蘭氏陰性菌，外膜外葉層主要有LPS組成，內(nèi)部流動(dòng)性極低，能夠有效的排斥部分抗生素，將鹽酸左氧法沙星與烏梅做成復(fù)合脂質(zhì)體制劑后，脂質(zhì)體能夠有效的粘附在大腸桿菌細(xì)胞壁上，破壞細(xì)胞壁的生成，侵入到細(xì)胞外膜上，進(jìn)而通過與外膜結(jié)合進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部，達(dá)到較好的抑菌效果。
【具體實(shí)施方式】
[0011]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的解釋。應(yīng)當(dāng)理解的是，以下實(shí)施例僅用于解釋本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0012]實(shí)施例1
本實(shí)施例為烏梅提取物的制備。
[0013]取烏梅50g，加入250ml的水浸泡2h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮40min，過濾，收集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡2h，再煎30min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
[0014]實(shí)施例2
本實(shí)施例制備的脂質(zhì)體混懸液，其組成為鹽酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，膽固醇，司盤80，烏梅提取物。
[0015]取烏梅100g加入500ml的水浸泡2.5h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮40min，過濾，收集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡2h，再煎30min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
[0016]將鹽酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)20g，膽固醇IOg,司盤80:2g，烏梅提取物2g加入650ml乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將該溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液。
[0017]實(shí)施例3
本實(shí)施例制備的脂質(zhì)體混懸液，其組成為鹽酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，膽固醇，吐溫80，烏梅提取物。
[0018]取烏梅200g加入1000ml的水浸泡2h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮60min，過濾，
收集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡2h，再煎30min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
[0019]將鹽酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)20g，膽固醇，吐溫80:2g,烏梅提取物2g加入650ml乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液。
[0020]實(shí)施例4
本實(shí)施例制備的脂質(zhì)體混懸液，其組成為鹽酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，膽固醇，司盤80，烏梅提取物。
[0021]取烏梅100g加入500ml的水浸泡3h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮60min，過濾，收
集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡2h，再煎30min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
[0022]將鹽酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)10g，膽固醇IOg,司盤802g，烏梅提取物2g加入450ml乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置 于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液。
[0023]實(shí)施例5
本實(shí)施例制備的脂質(zhì)體混懸液，其組成為鹽酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，膽固醇，司盤80，烏梅提取物。
[0024]取烏梅100g加入500ml的水浸泡2h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮50min，過濾，收
集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡3h，再煎40min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
[0025]將鹽酸左氧氟沙星lg，磷脂(大豆卵磷脂)20g，膽固醇IOg,司盤80:2g，烏梅提取物1.5g加入600ml乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液。
[0026]實(shí)施例6
本實(shí)施例制備的脂質(zhì)體混懸液，其組成為鹽酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，膽固醇，司盤80，烏梅提取物。
[0027]取烏梅100g加入500ml的水浸泡3h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮60min，過濾，收
集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡3h，再煎40min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
[0028]將鹽酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)10g，膽固醇IOg,司盤80:2g，烏梅提取物0.5g加入450ml乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液。[0029]下列實(shí)驗(yàn)表明了本發(fā)明復(fù)方脂質(zhì)體的有益效果 1.實(shí)驗(yàn)材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)材料
大腸桿菌(中檢所140732)，蛋白胨(北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司)，酵母提取物(北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司)，氯化鈉(北京化工廠)，瓊脂粉(中國惠世生化試劑有限公司)，鹽酸左氧氟沙星(武漢東康源科技有限公司)，烏梅提取物(上述實(shí)驗(yàn)所得)，鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體(本發(fā)明所得)。本實(shí)驗(yàn)所使用的試劑，用具均經(jīng)過高壓蒸汽滅菌，所有操作均在無菌室的超凈試驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行。
[0030]1.2實(shí)驗(yàn)方法:
1.2.1 LB培養(yǎng)基的制備:
LB液體培養(yǎng)基:取蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉IOg溶于IL去離子水中，于121°C滅菌20min。LB固體培養(yǎng)基:取蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，瓊脂粉15g，溶于IL去離子水中，于121°C滅菌20min。LB半固體培養(yǎng)基:取蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化鈉10g，瓊脂粉7.5g，溶于IL去離子水中，于121°C滅菌20min。
[0031]1.2.2抑菌實(shí)驗(yàn):
將培養(yǎng)6小時(shí)后的大腸桿菌菌液(處于對(duì)數(shù)生長期)與上層瓊脂培養(yǎng)基混合均勻(含菌量為1%)后，倒平板蓋上平皿蓋，室溫靜置片刻。
[0032]取固體培養(yǎng)基20ml做為底層培養(yǎng)基，取半固體培養(yǎng)基(含菌量為1%) 5.5ml作為上層培養(yǎng)基，待凝固后，將鹽酸左氧氟沙星化藥溶液(A)，烏梅提取液(B)，鹽酸左氧氟沙星與烏梅提取物(重量比1:1)混合液(C)，鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體混懸液(分別為實(shí)施例2，實(shí)施例3，實(shí)施例4，實(shí)施例5)，各液體取相同體積分別各自注入到對(duì)應(yīng)平板的牛津杯中(50mg/ml),蓋上平皿蓋，置恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24小時(shí)后，觀察結(jié)果，用菌落計(jì)數(shù)儀測(cè)量抑菌環(huán)直徑，記錄下數(shù)據(jù)，單位是mm。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
[0033]2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表1不同抗菌劑的抑菌圈直徑大小
【權(quán)利要求】
1.一種鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體，其特征在于是由以下藥物按重量份數(shù)比制成的: 鹽酸左氧氟沙星:廣2、磷脂:10-20、膽固醇:10、表面活性劑:廣2、烏梅提取物0.0f 2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽酸左氧氟沙星復(fù)合脂質(zhì)體制備方法，其特征在于: 將上述混合物加入17倍量(g/ml)乙醇，并進(jìn)行超聲處理使其充分溶解至澄清；將該溶有藥物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸銨的水溶液中，同時(shí)轉(zhuǎn)速為500rpm，攪拌3min，溶液呈淡藍(lán)色乳光，將裝有該溶液的透析袋置于PH7.4，溫度為37°C的PBS緩沖溶液中，透析24h，除去硫酸銨，既得脂質(zhì)體混懸液； 所述的烏梅提取物制備方法如下: 在烏梅中加入5倍量的水浸泡2~3h，強(qiáng)火加熱至沸再以文火煎煮4(T60min，過濾，收集濾液，置于4°C保存，殘?jiān)?倍量水，浸泡2~3h，再煎3(T60min，過濾，合并2次濾液，噴霧干燥。
【文檔編號(hào)】A61P31/04GK103585318SQ201310592827
【公開日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月22日
【發(fā)明者】滕樂生, 曲娜, 逯家輝, 李玉婧, 彭小君, 孟慶繁, 劉艷, 王貞佐, 程瑛琨, 沈畏 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)