一類雙子型陽離子類脂的制備及其在藥物或基因轉運中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種雙子型陽離子類脂及其制備方法。該陽離子類脂應用于轉運藥物或基因的載體的制備。本發(fā)明運用化學合成的方法制備了雙子型陽離子類脂化合物，合成方法簡單，產物收率較高。本發(fā)明的雙子型陽離子類脂化合物與類脂助劑混合，可制備包括懸浮液，乳濁液，微膠粒和脂質體等組合物。這些組合物具有低毒、細胞相容性好、轉染效率高、使用方便等優(yōu)點，是一種新型的高效的基因載體和轉運試劑。
【專利說明】—類雙子型陽離子類脂的制備及其在藥物或基因轉運中的應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一類陽離子類脂及其制備方法和應用，尤其涉及一類雙子型陽離子類月旨、其制備方法以及該類雙子型陽離子類脂在藥物或基因在胞內轉運中的應用。
【背景技術】
[0002]基因治療作為一種全新的、革命性的治療手段，它的有效性已得到許多研究的驗證，已經(jīng)成為化學、生物學和醫(yī)藥工程等最活躍的研究領域之一，是對傳統(tǒng)醫(yī)學治療手段的一場變革，將對傳統(tǒng)制藥業(yè)產生深遠影響，具有廣闊的應用前景?；虻陌邢蜣D運是基因治療的關鍵技術之一，在基因轉運過程中，通過適當?shù)妮d體將治療基因輸送到靶細胞內，以使細胞產生內源性的目的蛋白質或多肽，發(fā)揮其特異的生物治療作用。然而，其核心技術-基因轉運的難題一直限制著基因治療的發(fā)展和臨床試驗，因此，近年來基因轉運載體的研究倍受關注[1，2]。 [0003]基因載體可分為病毒基因載體和非病毒基因載體，病毒基因載體是利用病毒侵染細胞的能力，以病毒為基礎構建的一種運載遺傳物質的載體，與此相對應，不使用病毒進行基因轉運的載體統(tǒng)稱為非病毒基因載體。雖然病毒基因載體用于基因的轉運具有效率高的優(yōu)點，但存在免疫原性高、容量小、變異性和致癌性等缺點[3]。與病毒基因載體相比，非病毒基因載體雖然具有安全性高、容易制備以及能夠裝載大體積DNA等優(yōu)點。然而，非病毒基因載體的轉染效率與病毒載體相比還有一定的差距，成為制約其臨床試驗的瓶頸。開發(fā)高效、低毒的非病毒基因載體已成為基因治療的重要研究內容之一。到目前為止，人們已經(jīng)制備了多種新型陽離子類脂、陽離子高聚物和多肽等非病毒基因載體材料[4-8]。
[0004]陽離子脂質體作為基因載體的研究很受重視，陽離子脂質體的主要組分是陽離子類脂。Feigner在1987年合成的第一個陽離子類脂是單價D0TMA[9]。由于單價陽離子類脂不能有效壓縮基因，轉染效率不能達到治療的要求。所以人們又開發(fā)了一系列多價陽離子類脂，如D0GS[10]，DPPES[10]和D0SPA[11]等，這些化合物的轉染效率較DOTMA等單價陽離子類脂有一定的提高，但還是不能滿足臨床試驗的要求。
[0005]本發(fā)明利用新的化學合成方法，制備出一系列滿足運載藥物(包括遺傳物質)以及相關物質等需要的高效低毒的雙子型陽離子類脂。
[0006]參考文獻
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【發(fā)明內容】

[0018]本發(fā)明提供一類雙子型陽離子類脂化合物，具有通式I的結構:
[0019]
【權利要求】
1.一類雙子型陽離子類脂化合物，具有通式I的結構:

2.根據(jù)權利要求1所述的雙子型陽離子類脂化合物，其特征在于，所述X—選自F_、cr、Br_、r、no3_、hso3_、ch3coo_、葡萄糖酸根、半乳糖酸根、半乳糖醒酸根、丙酸根和甲磺酸根。
3.根據(jù)權利要求1所述的雙子型陽離子類脂化合物，其特征在于，所述R1選自C12_18烷基、十八烯基和膽固醇基。
4.根據(jù)權利要求1所述的雙子型陽離子類脂化合物，其特征在于，所述R2選自CV3烷基、C^3輕烷基、半乳糖基、甘露糖基和葉酸酷基。
5.如權利要求1~4的任一項所述的雙子型陽離子類脂化合物的制備方法，包括如下步驟: (1)羰基二咪唑和式i的化合物按照摩爾比8:1~1:8反應，制備式ii化合物:


6.一種陽離子類脂組合物，其特征在于，該組合物包括權利要求1~4的任一項所述的雙子型陽離子類脂化合物和類脂助劑； 所述類脂助劑選自卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、溶血卵磷脂、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、鞘髓磷脂、腦磷脂、心肌磷脂、磷脂酸、糖脂、磷酸三十二烷酯、二油酰磷脂酰氯、二棕櫚酰磷脂酰氯、棕櫚酰油酰磷脂酰氯、二油酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、棕櫚酰油酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺和二油酰磷脂酰乙醇胺4- (N-馬來酰亞胺基-甲基)環(huán)己烷-1-羧酸酯、硬脂酰胺、十六烷胺、十四烷胺、十二烷胺、乙酰十六酸酯、甘油蓖麻醇酸酯、硬脂酸十六烷酯、肉豆蘧酸異丙酯、兩性丙烯酸聚合物、三乙醇胺-十二烷基硫酸鹽、烷基-芳基硫酸酯聚乙氧化的脂肪酸酰胺、二十八烷基二甲基溴化銨、麥角留醇B1，B2和B3、麥角留醇、膽固醇、雄留醇、膽酸、脫氧膽酸、鵝脫氧膽酸、石膽酸、殼聚糖、蔗糖酯中的一種或兩種以上的混合物。
7.根據(jù)權利要求6所述的陽離子類脂組合物，其特征在于，所述組合物為懸浮液，乳濁液，微膠?；蛑|體。
8.根據(jù)權利要求6所述的陽離子類脂組合物，其特征在于，所述的雙子型陽離子類脂化合物與類脂助劑的質量比為10:1~1:10。
9.如權利要求6所述的陽離子類脂組合物向細胞內傳遞藥物或/和遺傳物質中的應用，其中所述藥物為阿霉素、阿巴瑞克、5-氟尿嘧啶、干擾素、絲裂霉素、多肽中的一種或兩種以上的混合物；所述遺傳物質為多核苷酸、DNA、RNA、MicroRNA、siRNA中的一種或兩種以上的混合物。
10.一種陽離子類脂復合物，其特征在于，所述復合物包括藥物或/和遺傳物質和權利要求I~4的任一項所述的雙子型陽離子類脂化合物。
【文檔編號】A61K47/48GK103613516SQ201310604241
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月22日 優(yōu)先權日:2013年11月22日
【發(fā)明者】張樹彪, 支德福, 趙軼男, 崔韶暉, 陳會英 申請人:大連民族學院