無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合、葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合用于促進(jìn)血小板生成的新用途
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合、葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合用于促進(jìn)血小板生成的新用途，具體地說(shuō)，這種新用途是基于無(wú)機(jī)銅鹽和葉綠素銅鈉鹽可明顯對(duì)抗血小板降低的作用，可以被制成藥物并用于治療因血小板減少造成的貧血癥。本發(fā)明提供的新用途中，無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合后，以及葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合后，在一定劑量的作用下，可明顯對(duì)抗血小板降低的癥狀和趨勢(shì)，作用十分顯著，且無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物或葉綠素銅鈉鹽的制備和獲取簡(jiǎn)單，制作成藥物的成本低下，可廣泛引用于因血小板降低導(dǎo)致的貧血癥以及單純的血小板降低的癥狀。
【專利說(shuō)明】無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合、葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合用于促進(jìn)血小板生成的新用途
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合、葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合用于促進(jìn)血小板生成的新用途，尤其是促進(jìn)血小板生成和治療由于血小板減小造成的貧血癥的新用途。
[0003]【背景技術(shù)】
[0004]血小板的主要功能是凝血和止血，修補(bǔ)破損的血管。血小板的表面糖衣能吸附血漿蛋白和凝血因子III，血小板顆粒內(nèi)含有與凝血有關(guān)的物質(zhì)。當(dāng)血管受損害或破裂時(shí)，血小板受刺激，由靜止相變?yōu)闄C(jī)能相，迅即發(fā)生變形，表面粘度增大，凝聚成團(tuán)；同時(shí)在表面第III因子的作用下，使血漿內(nèi)的凝血酶原變?yōu)槟?，后者又催化纖維蛋白原變成絲狀的纖維蛋白，與血細(xì)胞共同形成凝血塊止血。血小板顆粒物質(zhì)的釋放，則進(jìn)一步促進(jìn)止血和凝血。血小板還有保護(hù)血管內(nèi)皮、參與內(nèi)皮修復(fù)、防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用。血液中的血小板數(shù)低于10萬(wàn)/y 1 (100X 109/L)為血小板減少，低于5萬(wàn)/i!L(50X 109/L)則有出血危險(xiǎn)。血小板過(guò)低會(huì)有自發(fā)性出血的可能，輕者皮下出血，也就是皮膚紫癜或是牙齦出血，鼻出血，嚴(yán)重就是內(nèi)臟出血，是有生命危險(xiǎn)。
[0005]蠶砂提取物是一種墨綠色結(jié)晶性粉末藥劑，主要成分為鐵葉綠酸鈉，葉綠酸鈉等葉綠素衍生物。益氣補(bǔ)血，用于輕、中度缺鐵性貧血，屬氣血兩虛證者。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:蠶砂提取物能促進(jìn)小鼠骨髓紅系祖細(xì)胞和粒-巨噬系祖細(xì)胞的增殖；可提高小鼠外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分率和促進(jìn)失血性大鼠紅細(xì)胞、血紅蛋白和網(wǎng)織紅細(xì)胞的恢復(fù)，并能提高血清鐵含量和轉(zhuǎn)鐵蛋白的飽和度。蠶砂提取物的功能與主治:益氣補(bǔ)血，用于輕、中度缺鐵性貧血，屬氣血兩虛證者，證見(jiàn):面部、肌膚萎黃或蒼白，神疲乏力，眩暈耳鳴，心悸氣短，舌淡或胖，脈弱等。
[0006]葉綠素銅鈉鹽又稱銅葉綠素鈉鹽，是一種具有很高穩(wěn)定性的金屬卟啉，呈墨綠色粉末，著色力強(qiáng)，色澤亮麗，其水溶液呈藍(lán)綠色澄清透明液，鈣離子存在時(shí)則有沉淀析出。在日常生活及臨床中用作空氣清新劑，特別是抗癌癥及抗腫瘤方面研究尤為突出，對(duì)銅鈉鹽中起到作用的組分進(jìn)行研究分析得出含量較大的e4和e6的結(jié)構(gòu)其到關(guān)鍵的作用，單未能明確是哪種結(jié)構(gòu)起的作用。
[0007]無(wú)機(jī)銅鹽是指銅的化合物，如硫酸銅、氯化銅、氧化銅等都是無(wú)機(jī)銅鹽。無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物，是指無(wú)機(jī)銅鹽與蠶砂提取物的混合物。
[0008]現(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)有蠶砂提取物以及用于促進(jìn)血小板的生成方面、無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物或葉綠素銅鈉鹽用于促進(jìn)血小板生成的報(bào)道。
[0009]
【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目的是提供無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合、葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合用于促進(jìn)血小板生成的新用途。具體地說(shuō)，這種新用途是基于無(wú)機(jī)銅鹽和葉綠素銅鈉鹽可明顯對(duì)抗血小板降低的作用，可以被制成藥物并用于治療因血小板減少造成的貧血癥。
[0011]本發(fā)明提供的新用途中，無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合后，以及葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合后，在一定劑量的作用下，可明顯對(duì)抗血小板降低的癥狀和趨勢(shì)，作用十分顯著，且無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物或葉綠素銅鈉鹽的制備和獲取簡(jiǎn)單，制作成藥物的成本低下，可廣泛引用于因血小板降低導(dǎo)致的貧血癥以及單純的血小板降低的癥狀。
[0012]
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1為對(duì)小鼠進(jìn)行環(huán)磷酰胺給藥后不同時(shí)間對(duì)小鼠白細(xì)胞數(shù)量的影響，其中橫坐標(biāo)為天數(shù)，縱坐標(biāo)為白細(xì)胞的數(shù)量；
圖2為對(duì)小鼠進(jìn)行環(huán)磷酰胺給藥后不同時(shí)間對(duì)小鼠紅細(xì)胞數(shù)量的影響，其中橫坐標(biāo)為天數(shù),縱坐標(biāo)為紅細(xì)胞的數(shù)量；
圖3為對(duì)小鼠進(jìn)行環(huán)磷酰胺給藥后不同時(shí)間對(duì)小鼠血小板數(shù)量的影響，其中橫坐標(biāo)為天數(shù)，縱坐標(biāo)為血小板的數(shù)量。 【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
[0015]無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物或葉綠素銅鈉鹽用于促進(jìn)血小板生成的應(yīng)用:
一)動(dòng)物性試驗(yàn)材料
1)受試藥物:
無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物、葉綠素銅鈉鹽
2)動(dòng)物品種:SPF級(jí)昆明種小鼠，來(lái)源于武漢大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心，體重為18— 22g，雌雄
各半
3)是試劑與藥品:
環(huán)磷酰胺，規(guī)格0.2g/瓶，批號(hào)21156-21160，由江西恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字H32020857。
[0016]4)儀器與設(shè)備:
1700型美國(guó)雅培公司血球計(jì)數(shù)儀
二)試驗(yàn)內(nèi)容
1)用環(huán)磷酰胺建立小鼠貧血模型
2)觀察無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物、葉綠素銅鈉鹽對(duì)小鼠貧血的影響。
[0017]三)試驗(yàn)主要步驟
I)小鼠環(huán)磷酰胺貧血模型的建立 1.1)試驗(yàn)分組即處理
昆明種SPF級(jí)小白鼠30只，隨機(jī)分為以下兩組:a、模型對(duì)照組:每Ikg的小鼠，每天腹腔注射IOOmg(20ml)環(huán)磷酰胺；
b、空白對(duì)照組:每Ikg的小鼠,每天腹腔注射IOOmg(20ml)生理鹽水；
1.2)試驗(yàn)方法
給小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺建立貧血模型。SPF級(jí)昆明種小鼠按照上述方法分組后，模型對(duì)照組的小鼠腹腔注射IOOmg (20ml)環(huán)磷酰胺，連續(xù)注射3天；空白對(duì)照組的小鼠腹腔注射IOOmg (20ml)生理鹽水，連續(xù)3天。
[0018]于首次給藥后的第7天、第10天、第12天、第15天、第20天，分別進(jìn)行眼眶取血，采用1700型美國(guó)雅培公司血球計(jì)數(shù)儀自動(dòng)測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量。
[0019]1.3)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
[0020]1.4)試驗(yàn)結(jié)果:
試驗(yàn)結(jié)果參見(jiàn)圖1、圖2和圖3，首次給藥7天后，與空白對(duì)照組對(duì)比，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量明顯降低， 表明小鼠環(huán)磷酰胺貧血模型建立成功。于給藥后7 — 20天，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量有不同程度的恢復(fù)，甚至反彈，所以以下試驗(yàn)于首次環(huán)磷酰胺給藥后的第7天，眼眶取血進(jìn)行測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的數(shù)量。
[0021]1.5)試驗(yàn)結(jié)論:
給SPF級(jí)昆明種小鼠腹腔注射IOOmg (20ml)環(huán)磷酰胺，連續(xù)注射3天，可成功建立小鼠環(huán)磷酰胺貧血模型。于首次環(huán)磷酰胺給藥后的第7天，眼眶取血，經(jīng)1700型美國(guó)雅培公司血球計(jì)數(shù)儀進(jìn)行測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的數(shù)量，可作為受試物作用的觀察時(shí)間點(diǎn)。環(huán)磷酰胺對(duì)紅細(xì)胞的作用，不如白細(xì)胞和血小板作用明顯，且對(duì)紅細(xì)胞的作用時(shí)間短。
[0022]2)觀察無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物、葉綠素銅鈉鹽對(duì)小鼠貧血的影響。
[0023]2.1)試驗(yàn)分組及處理
A組:空白對(duì)照組:每Ikg的小鼠,每天腹腔注射IOOmg (20ml, ig) ig生理鹽水；
B組:模型對(duì)照組:每Ikg的小鼠，每天腹腔注射IOOmg (20ml) ig生理鹽水；
C組:無(wú)機(jī)銅鹽食用量小劑量組:每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg加入無(wú)機(jī)銅鹽70.0u g (20ml)；
D組:無(wú)機(jī)銅鹽食用量大劑量組:每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg加入無(wú)機(jī)銅鹽140.0u g (20ml)；
E組:葉綠素銅鈉鹽藥用量小劑量組--每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg加入葉綠素銅鈉鹽3.5mg (20ml)；
F組:葉綠素銅鈉鹽藥用量大劑量組--每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg加入葉綠素銅鈉鹽7.0mg (20ml)；
G組:葉綠素銅鈉鹽食用量大劑量組--每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg加入葉綠素銅鈉鹽 70.0iig (20ml)；
H組:葉綠素銅鈉鹽食用量大劑量組:每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg加入葉綠素銅鈉鹽 140.0iig (20ml)；
I組:蠶砂提取物組，每Ikg的小鼠，ig蠶砂提取物50.0mg (20ml)。
[0024]2.2)試驗(yàn)方法
SPF級(jí)昆明種小鼠126個(gè)按照上述方法，隨機(jī)分為9組，加入葉綠素銅鈉鹽或無(wú)機(jī)銅鹽的蠶砂提取物，灌胃SPF級(jí)昆明種小鼠，連續(xù)21天；空白對(duì)照組及模型對(duì)照組灌胃同等量的生理鹽水。于給予受試物第14天，每Ikg小鼠腹腔每天注射環(huán)磷酰胺lOOmg，連續(xù)3天，空白對(duì)照組注射等量的生理鹽水，于首次給環(huán)磷酰胺后第7天，末次給藥后I個(gè)小時(shí)，眼眶取血，經(jīng)1700型美國(guó)雅培公司血球計(jì)數(shù)儀進(jìn)行測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的數(shù)量，并按照煌焦油染色法測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞的數(shù)量。
[0025]2.3)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差反洗，P < 0.05為差異有顯著性。
[0026]2.4)試驗(yàn)結(jié)果
結(jié)果可見(jiàn)，首次給予環(huán)磷酰胺后第7天，模型小組的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的數(shù)量均明顯降低，而網(wǎng)織紅細(xì)胞呈代償性升高，表明小鼠環(huán)磷酰胺貧血模型建立成功。結(jié)果還表明，無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合后藥用大劑量，以及葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合后藥用大劑量，可顯著對(duì)抗環(huán)磷酰胺所致血小板降低，尤其以葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合后藥用大劑量的作用效果更加顯著。無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合后食用小劑量，以及葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合后食用小劑量，與模型組相比，無(wú)顯著差別，但是有升高趨勢(shì)，如表1和表2所不。
[0027]表1含銅鹽蠶砂提取物對(duì)環(huán)磷酰胺所致小鼠白細(xì)胞降低的影響
分鐵 n WBCuLYM MIOGlAN


(G/L)

14 7.0 ±2.468.8±7.S19.5 ±5.311.7±3.9
WMM 13 3.3 i 1.8**S2.4 土 13.1"MJ 土 7,5**19.3 土 8.8*
蛋雜取雛 12 1.9+1.159 J土 ILS2S.7 士 9.014.4±4.5

無(wú)襯稱食用糊 M: 12 2.9 ±1.74*.5±15,430.9±8.720.5+8.3
大細(xì)體 M 2 Ji 1.352.2±I1J33.0±6.0M.靠 ±5.9
葉綠* 霸 iRJl 小鋪量 ?2 3,5+2,25M±11.S30.1+9.211.5+5.0
人親量 M 3.5+2.8S7J±11.630.4土S.<*12.1±4.6
嫌素錫食用小劑量 12 3.5 ±3.451.f±11.530.0 土 WJ11.2±3.7
大鑛置 13 3.0土養(yǎng).5§1.3±10.§31.1 ±9.57J±25 與Sft親比較，*P<0.05, **/?<0.01;與模蟹銪比較，*i?<0.05, ttPCOm.表2含銅鹽蠶砂提取物對(duì)環(huán)磷酰胺所致小鼠紅細(xì)胞以及血小板降低的影響
【權(quán)利要求】
1.無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合在制備用于促進(jìn)血小板生成的藥物中的應(yīng)用。
2.葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合在制備用于促進(jìn)血小板生成的藥物中的應(yīng)用。
3.無(wú)機(jī)銅鹽和蠶砂提取物混合在制備用于治療貧血癥的藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述貧血癥的病因之一是血小板缺乏。
4.葉綠素銅鈉鹽和蠶砂提取物混合在制備用于治療貧血癥的藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述貧血癥的病因之一是血小板缺乏。
【文檔編號(hào)】A61K35/64GK103751219SQ201310701441
【公開(kāi)日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2013年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月19日
【發(fā)明者】余作平, 王根才, 周紅暉, 汪勤, 吳瑜, 付雯 申請(qǐng)人:武漢聯(lián)合藥業(yè)有限責(zé)任公司