一種復(fù)合抗凝血材料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供的一種復(fù)合抗凝血材料，至少由絲素蛋白和桑黃多糖制成。本發(fā)明還提供了上述復(fù)合抗凝血材料的制備方法。該復(fù)合抗凝血材料制備工藝簡單、成本低廉，其具有優(yōu)異的抗凝血作用，同時具有較好的力學(xué)相容性和組織相容性；此外，采用桑黃多糖配合絲素蛋白，從而得到的復(fù)合抗凝血材料毒副作用小。
【專利說明】一種復(fù)合抗凝血材料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)用材料領(lǐng)域，特別涉及一種復(fù)合抗凝血材料，還涉及該復(fù)合抗凝血材料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]與生物組織相接觸的醫(yī)用材料應(yīng)該具有良好的生物相容性，包括組織相容性、血液相容性和力學(xué)相容性。組織相容性是指材料與生物體組織及體液接觸后不引起細胞突變、畸變、癌變以及排異反應(yīng)。血液相容性是指材料和血液接觸后不引起血漿蛋白質(zhì)的變性，不破壞血液的有效成分，不導(dǎo)致血液的凝固和血栓的形成。力學(xué)相容性是對于植入體內(nèi)承受負荷，以及要求其彈性形變和植入部位的組織的彈性形變相協(xié)調(diào)的生物材料的力學(xué)性能。其中，血液相容性(抗凝血性)是評價材料性能的重要指標。
[0003]抗凝血材料是生物材料的重要組成部分，被廣泛應(yīng)用于與人體血液和組織相接觸的醫(yī)療器械或組織工程化材料上，例如人工心臟瓣膜、血液透析系統(tǒng)、體外循環(huán)系統(tǒng)、血管栓塞劑、心臟起搏器、人工血管、血管支架、介入導(dǎo)管、外科手術(shù)線等。與血液直接接觸的抗凝血材料不僅要求具有組織相容性，不會對生物體組織引起炎癥，而且要求具有血液相容性，能夠抗血栓，不會在材料表面發(fā)生凝血現(xiàn)象，還要求具有與人體組織相似的彈性、延展性及良好的耐疲勞性等生物即力學(xué)相容性。因此，研制一種無需注射抗凝劑、抗血栓作用強而致凝作用弱、生物相容性和力學(xué)性能俱佳的醫(yī)用抗凝血生物材料具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。`
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]發(fā)明目的:本發(fā)明的目的在于提供一種組織相容性、血液相容性和力學(xué)相容性俱佳的復(fù)合抗凝血材料。
[0005]本發(fā)明的第二目的在于提供該復(fù)合抗凝血材料的制備方法。
[0006]技術(shù)方案:本發(fā)明提供的一種復(fù)合抗凝血材料，至少由絲素蛋白和桑黃多糖制成。
[0007]優(yōu)選地，所述復(fù)合抗凝血材料，至少由以下重量份的組分制成:絲素蛋白10-40份、桑黃多糖60-90份。
[0008]本發(fā)明還提供了上述復(fù)合抗凝血材料的制備方法，包括以下步驟:
[0009](I)將絲素蛋白和桑黃多糖于50_70°C真空干燥20_30h ；
[0010](2)將干燥的絲素蛋白分散于堿溶液中，35_40°C保溫0.5-lh，冷卻，滴加至酸溶液中，得絲素蛋白溶液；
[0011](3)將桑黃多糖溶于酸溶液中，過濾、離心脫氣，即得桑黃多糖溶液；
[0012](4)將絲素蛋白溶液和桑黃多糖溶液混勻，離心脫氣，得絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液；
[0013](5)將絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液烘干后，加入氨水浸泡，洗凈、晾干，即得。
[0014]其中，步驟(2)中，所述堿溶液為質(zhì)量百分比濃度為5-10%的氫氧化鈉水溶液；所述酸溶液為質(zhì)量百分比濃度為0.1-0.5%的醋酸溶液；所述絲素蛋白、堿溶液和酸溶液的用量比為(1-3) g:(10-40) ml:(60-90) ml。
[0015]其中，步驟(3)中，所述酸溶液為質(zhì)量百分比濃度為0.1-0.5%的醋酸溶液；所述桑黃多糖和酸溶液的用量比為(1-3) g:100ml ;離心速率為4000-6000rpm。
[0016]其中，步驟(4)中，所述絲素蛋白溶液和桑黃多糖溶液的體積比為(10-40):(60-90)。
[0017]其中，步驟(5)中，烘干溫度為40_60°C ;氨水的質(zhì)量百分比濃度為5-10%，浸泡時間為 5-10min。
[0018]有益效果:本發(fā)明提供的復(fù)合抗凝血材料制備工藝簡單、成本低廉，其具有優(yōu)異的抗凝血作用，同時具有較好的力學(xué)相容性和組織相容性；此外，采用桑黃多糖配合絲素蛋白，從而得到的復(fù)合抗凝血材料毒副作用小。 【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1為不同止血材料的凝血指數(shù)對比。
[0020]圖2為不同止血材料的止血時間對比。
[0021]圖3為不同止血材料的出血量對比。
【具體實施方式】
[0022]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做出進一步說明。
[0023]實施例1
[0024]復(fù)合抗凝血材料，由以下重量份的組分制成:絲素蛋白10份、桑黃多糖90份。
[0025]復(fù)合抗凝血材料的制備方法，包括以下步驟:
[0026](I)將絲素蛋白和桑黃多糖于60°C真空干燥25h ；
[0027](2)將3g干燥的絲素蛋白分散于40ml質(zhì)量百分比濃度為10%的氫氧化鈉水溶液中，37°C保溫0.5h，冷卻，滴加至60ml質(zhì)量百分比濃度為0.5%的醋酸溶液中，得絲素蛋白溶液；
[0028](3)將3g桑黃多糖溶于100ml質(zhì)量百分比濃度為0.5%的醋酸溶液中，過濾、離心脫氣，即得桑黃多糖溶液；
[0029](4)將IOml絲素蛋白溶液和90ml桑黃多糖溶液混勻，6000rpm離心脫氣，得絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液；
[0030](5)將絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液烘干后，加入質(zhì)量百分比濃度為10%氨水浸泡5min,洗凈、晾干，即得。
[0031]實施例2
[0032]復(fù)合抗凝血材料，由以下重量份的組分制成:絲素蛋白20份、桑黃多糖80份。
[0033]復(fù)合抗凝血材料的制備方法，包括以下步驟:
[0034](I)將絲素蛋白和桑黃多糖于50°C真空干燥20h ；
[0035](2)將Ig干燥的絲素蛋白分散于IOml質(zhì)量百分比濃度為5%的氫氧化鈉水溶液中，35°C保溫lh，冷卻，滴加至90ml質(zhì)量百分比濃度為0.1%的醋酸溶液中，得絲素蛋白溶液；[0036](3)將Ig桑黃多糖溶于100ml質(zhì)量百分比濃度為0.1%的醋酸溶液中，過濾、離心脫氣，即得桑黃多糖溶液；
[0037](4)將20ml絲素蛋白溶液和80ml桑黃多糖溶液混勻，4000rpm離心脫氣，得絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液；
[0038](5)將絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液烘干后，加入質(zhì)量百分比濃度為5%氨水浸泡IOmin,洗凈、晾干，即得。
[0039]實施例3
[0040]復(fù)合抗凝血材料，由以下重量份的組分制成:絲素蛋白40份、桑黃多糖60份。
[0041]復(fù)合抗凝血材料的制備方法，包括以下步驟:
[0042](I)將絲素蛋白和桑黃多糖于70°C真空干燥30h ；
[0043](2)將2g干燥的絲素蛋白分散于20ml質(zhì)量百分比濃度為8%的氫氧化鈉水溶液中，40°C保溫0.5h，冷卻，滴加至80ml質(zhì)量百分比濃度為0.3%的醋酸溶液溶液中，得絲素蛋白溶液；
[0044](3)將2g桑黃多糖溶于100ml質(zhì)量百分比濃度為0.3%的醋酸溶液中，過濾、離心脫氣，即得桑黃多糖溶液；
[0045](4)將40ml絲素蛋白溶液和60ml桑黃多糖溶液混勻，5000rpm離心脫氣,得絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液；
[0046](5)將絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液烘干后，加入質(zhì)量百分比濃度為7%氨水浸泡6min,洗凈 、晾干，即得。
[0047]實施例4本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料體外凝血效果測試
[0048]分別測試本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料體外凝血指數(shù)、止血時間、出血量。
[0049]1.本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料體外凝血指數(shù)的測定
[0050]抽取家兔心臟新鮮血液并加入自制的檸檬酸鈉抗凝血劑(血液與抗凝血儀劑的體積比為9:1)待用。
[0051]以普通紗布和明膠海綿作為對照。
[0052]將本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料樣品剪成lcm2小塊，平放在燒杯中，放入水浴鍋37°C溫5min，將0.1mL家兔新鮮血液滴加到樣品上后，立即滴加0.2mol/L CaC12溶液0.02mL開始凝血過程，5min后加入20mL去離子水，37°C恒溫下振蕩5min，隨后取出溶液用紫外分光光度計測其0D(415nm)值。
[0053]將0.1mL血液用去離子水稀釋為20mL后的0D(415nm)值假定為100做參考值，BCI=100*0D(415nm)/參考0D(415nm)。BCI越低，凝血效過越好。各樣品的凝血指數(shù)如圖1所示。由圖可知，普通紗布、明膠海綿的凝血指數(shù)分別為86%和67%，而本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料凝血指數(shù)為24%，明顯優(yōu)于其他兩種止血材料。
[0054]2.本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料凝血測試
[0055]將本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料樣品剪成2*2cm2小塊，稱量后備用。
[0056]以普通紗布和明膠海綿作為對照。
[0057]12只供試家兔隨機普通紗布對照組、明膠海綿對照組、本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料組,每組4只家兔6個耳動脈出血試驗點；將3種止血材料上分別覆蓋稱量過的醫(yī)用棉球，壓迫止血IOs后拿開棉花，觀察各種材料的止血效果。[0058](I)止血時間的測定:無更多血液從材料滲出時記錄時間為Tl，以后每5s觀察I次，直至完全止血，記錄時間為T2 ;止血時間為Tl和T2平均值。各樣品的止血時間如圖2所示。
[0059]由圖可知，普通紗布、明膠海綿的止血時間分別為127秒和115秒；本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料止血時間為65秒，止血時間大大縮短。
[0060](2)出血量的測定:止血前,精確稱量棉球質(zhì)量ml ;止血完成后，精確稱量吸入血液的棉球質(zhì)量m2 ;計算出血量(m):m=m2-ml ;結(jié)果如圖3所示。由圖可知,使用普通紗布、明膠海綿止血的出血量分別為52克和43克；而本發(fā)明的復(fù)合抗凝血材料的止血時間為15克，出血量明顯減少。`
【權(quán)利要求】
1.一種復(fù)合抗凝血材料，其特征在于:至少由絲素蛋白和桑黃多糖制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合抗凝血材料，其特征在于:至少由以下重量份的組分制成:絲素蛋白10-40份、桑黃多糖60-90份。
3.—種權(quán)利要求1所述的復(fù)合抗凝血材料的制備方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)將絲素蛋白和桑黃多糖于50-70°C真空干燥20-30h； (2)將干燥的絲素蛋白分散于堿溶液中，35-40°C保溫0.5-lh，冷卻，滴加至酸溶液中，得絲素蛋白溶液； (3)將桑黃多糖溶于酸溶液中，過濾、離心脫氣，即得桑黃多糖溶液； (4)將絲素蛋白溶液和桑黃多糖溶液混勻，離心脫氣，得絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液； (5)將絲素蛋白溶液-桑黃多糖共混液烘干后，加入氨水浸泡，洗凈、晾干，即得。
4.權(quán)利要求3所述的一種復(fù)合抗凝血材料的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，所述堿溶液為質(zhì)量百分比濃度為5-10%的氫氧化鈉水溶液；所述酸溶液為質(zhì)量百分比濃度為0.1-0.5%的醋酸溶液；所述絲素蛋白、堿溶液和酸溶液的用量比為(1-3) g:(10-40) ml:(60-90) ml。
5.權(quán)利要求3所述的一種復(fù)合抗凝血材料的制備方法，其特征在于:步驟(3)中，所述酸溶液為質(zhì)量百分比濃度為0.1-0.5%的醋酸溶液；所述桑黃多糖和酸溶液的用量比為(1-3) g:100ml ;離心速率為 4000-6000rpm。
6.權(quán)利要求3所述的一種復(fù)合抗凝血材料的制備方法，其特征在于:步驟(4)中，所述絲素蛋白溶液和桑黃多糖溶液的體積比為(10-40): (60-90)。
7.權(quán)利要求3所述的一種復(fù)合抗凝血材料的制備方法，其特征在于:步驟(5)中，烘干溫度為40-60°C ;氨水的質(zhì)量百分比濃度為5-10%，浸泡時間為5-10min。
【文檔編號】A61L33/12GK103736157SQ201310714966
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月20日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月20日
【發(fā)明者】聞燕, 姚雪妍, 杜博瑋, 柳聰聰, 江明珠, 許曉風(fēng) 申請人:江蘇科技大學(xué)