用于治療白血病的方法和組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供可用于抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)并用于治療多種癌癥的組合和治療性治療方法，具體提供用于治療白血病的方法和組合，所述組合包含BCR-ABL抑制劑和刺猬(hedgehog)途徑抑制劑。
【專利說(shuō)明】用于治療白血病的方法和組合物
[0001]發(fā)明背景
[0002]本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2010年8月11日、發(fā)明名稱為“用于治療白血病的方法和組合物”的中國(guó)專利申請(qǐng)201080045836.3的分案申請(qǐng)。
發(fā)明領(lǐng)域
[0003]用于治療白血病的BCR-ABL抑制劑和刺猬(hedgehog)途徑抑制劑的組合。
[0004]相關(guān)【背景技術(shù)】
[0005]本領(lǐng)域已描述了刺猬(hedgehog)信號(hào)傳導(dǎo)途徑(參見(jiàn)例如Nybakken等人,Curr.0pin.Genet.Dev.2002，12:503-511 ;和 Lum 等人，Science2003, 299:2039-2045)。簡(jiǎn)言之，在不存在刺猬(hedgehog)配體的情況下，跨膜受體Patched (Ptch)結(jié)合Smoothened (Smo)并阻斷Smo的功能。在配體存在時(shí)，這種抑制作用有所緩解，這使Smo引發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)，而導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子Glis從融合的胞質(zhì)蛋白(cytoplasmic proteins fused) (Fu)和Suppressorof Fused(SuFu)釋放。在失活情況下，SuFu防止Glis轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核。在活性情況下，F(xiàn)u抑制SuFu,從而Glis被釋放。Gli蛋白轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核中并控制祀基因轉(zhuǎn)錄。
[0006]BCR-ABL致癌基因是費(fèi)城染色體(Ph) 22q的產(chǎn)物，并編碼嵌合BCR-ABL蛋白，該嵌合BCR-ABL蛋白已組成型激活A(yù)BL酪氨酸激酶活性。(Lugo等人，Sciencel990, 247:1079-1082)。BCR-ABL是慢性髓性白血病(aka慢性髓性白血病或CML)的潛在原因。210kDa BCR-ABL蛋白在CML患者中表達(dá)，但是從BCR基因中的替代斷裂點(diǎn)產(chǎn)生的190kDa BCR-ABL蛋白在Ph陽(yáng)性(Ph+)急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)患者中表達(dá)。(Bartram 等人，Naturel983, 306:277-280 ；Chan 等人，Naturel987, 325:635-637)。
[0007]已經(jīng)顯示BCR-ABL通過(guò)各種機(jī)制在定型髓樣或淋巴樣祖細(xì)胞或3T3成纖維細(xì)胞中誘導(dǎo)增殖和抗-細(xì)胞凋亡。(Pendergast 等人，Celll993, 75:175-85 ;Ilaria 等人,J.Biol.Chem.1996，271:31704-10 ;Chai 等人，J.1mmunol.1997，159:4720-8 ;和 Skorski 等人，EMBOJ.1997，16:6151-61)。然而，關(guān)于BCR-ABL對(duì)造血干細(xì)胞(HSC)種群的作用知之甚少。最近的出版物表明發(fā)育途徑如Wnt信號(hào)傳導(dǎo)途徑或Polycomb基因BMIl可能與白血病干細(xì)胞的調(diào)節(jié)和擴(kuò)增有關(guān)(Mohty 等人，Blood, 2007 ；Hosen 等人，Stem Cells, 2007)。BMIl 和β -連環(huán)蛋白在CML原始細(xì)胞危象(blast crisis)中均得以上調(diào),且它們的表達(dá)與疾病的進(jìn)展相關(guān)。具有獲得性β -連環(huán)蛋白表達(dá)的BCR-ABL陽(yáng)性粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞祖細(xì)胞是原始細(xì)胞危象CML中的候選白血病干細(xì)胞。自我更新途徑與慢性期BCR-ABL陽(yáng)性白血病干細(xì)胞的擴(kuò)增有關(guān)，這種擴(kuò)增導(dǎo)致惡性克隆的初期擴(kuò)增。
[0008]發(fā)明簡(jiǎn)述
[0009] 本發(fā)明提供可用于抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)并用于治療多種癌癥的組合和治療性治療方法。
[0010]一方面，本發(fā)明提供包含抑制刺猬(hedgehog)信號(hào)傳導(dǎo)途徑的第一活性劑和抑制BCR-ABL的第二活性劑的組合。另一方面，本發(fā)明提供包含治療有效量的抑制刺猬(hedgehog)信號(hào)傳導(dǎo)途徑的第一活性劑、抑制BCR-ABL的第二活性劑和藥學(xué)上可接受載體的藥物組合物。
[0011]本發(fā)明還提供用于治療癌癥、特別是BCR-ABL陽(yáng)性白血病如CML的方法，其包括向系統(tǒng)或?qū)ο笫┯弥委熡行Я康陌种拼题?hedgehog)信號(hào)傳導(dǎo)途徑的第一活性劑和抑制BCR-ABL的第二活性劑或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥物組合物的組合物，由此治療所述BCR-ABL陽(yáng)性白血病。例如，本發(fā)明的組合物可用于治療慢性髓性白血病或急性淋巴細(xì)胞白血病。
[0012]而且，本發(fā)明提供治療有效量的包含抑制刺猬(hedgehog)信號(hào)傳導(dǎo)途徑的第一活性劑和抑制BCR-ABL的第二活性劑或其藥學(xué)上可接受的鹽的組合或其藥物組合物在制備用于治療細(xì)胞增殖性病癥、特別是BCR-ABL陽(yáng)性白血病的藥劑中的用途。
[0013]在上述組合物和使用本發(fā)明的組合物的方法中，本發(fā)明組合物中的第一活性劑可結(jié)合Smo。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物中的第二活性劑是ABL抑制劑、ABL/Scr抑制劑、極光(Aurora)激酶抑制劑或BCR-ABL的非-ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。
[0014]在上述組合、組合物和使用本發(fā)明的組合物的方法中，可給包括細(xì)胞或組織的系統(tǒng)施用本發(fā)明組合物。在一些實(shí)施方案中，可給人患者或動(dòng)物對(duì)象施用本發(fā)明組合物。
[0015]附圖簡(jiǎn)述
[0016] 圖1表示“第一次再接種”實(shí)驗(yàn)，其中用遞增濃度的化合物A處理3天后，由原代CML細(xì)胞的單菌落形成的第二代菌落的總數(shù)。結(jié)果表示為未處理對(duì)照的百分比。
[0017]圖2表示在圖1的“第二次再接種”后形成的原代CML細(xì)胞的菌落總數(shù)。結(jié)果表示為未處理對(duì)照的百分比。表明第二次再接種后形成的菌落總數(shù)。
[0018]圖3描述了在三次重復(fù)中所得第二代菌落的總數(shù)，表示為未處理對(duì)照的百分比。
[0019]圖4是在用化合物A或尼羅替尼(nilotinib)或這兩種藥物處理3天的原代CML細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中第二代菌落總數(shù)的示例性實(shí)施例。結(jié)果表示為未處理對(duì)照的百分比。
[0020]圖5表明在暴露于化合物A、尼羅替尼或兩者組合7天后，在“第一次再接種”實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的第二代菌落的總數(shù)。結(jié)果表示為未處理對(duì)照的百分比。
[0021]圖6表明在暴露于化合物A、尼羅替尼或兩者組合3天后，在“第一次再接種”試驗(yàn)中產(chǎn)生的第二代菌落的總數(shù)。結(jié)果表示為未處理對(duì)照的百分比。
[0022]圖7表明通過(guò)計(jì)算曲線下面積(AUC)而得的原代CML細(xì)胞用化合物A、尼羅替尼或這兩種藥物處理后的增殖指數(shù)(PD。該P(yáng)I既反映了產(chǎn)生的菌落也反映了它們的滅絕率。
[0023]圖8是將2.5 X IO5個(gè)感染有Bcr_abl逆轉(zhuǎn)錄病毒的小鼠骨髓細(xì)胞以400ul/每孔(48孔板)接種于存在所示濃度的AMN107和化合物A的OPT1-MEM培養(yǎng)基(10%FBS，
0.1%2-巰基乙醇，50ng/ml SCF，25ng/ml mIL_3 和 25ng/ml mIL_6)中。培養(yǎng) 3 天后，以 1500個(gè)細(xì)胞/35_板的濃度將細(xì)胞接種在甲基纖維素中。在接種后10天對(duì)菌落形成進(jìn)行評(píng)分。
[0024]圖9:將由圖8的第一次接種試驗(yàn)獲得的菌落重懸浮，在含10%FCS的PBS中洗滌。將細(xì)胞重懸浮在OPT1-MEM培養(yǎng)基中，以5000個(gè)細(xì)胞/35mm板的濃度接種在甲基纖維素中。在接種后10天對(duì)菌落形成進(jìn)行評(píng)分。
[0025]圖10比較了在小鼠CML模型中對(duì)照媒介物、化合物A、AMN107及化合物A與ANM107的組合的存活率。
[0026]發(fā)明詳述
[0027]通過(guò)下面代表性實(shí)例非限制性地進(jìn)一步例證本發(fā)明，這些實(shí)例旨在闡述本發(fā)明且不被理解為局限于此。
[0028]式I化合物-Smo抑制劑
[0029]一方面，本發(fā)明提供式I化合物:
[0030]
【權(quán)利要求】
1.組合，其包含為Smo抑制劑的第一活性劑和為BCR-ABL抑制劑的第二活性劑， 其中所述第一活性劑是式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽:本

2.權(quán)利要求1的組合，其中所述第一活性劑是2-甲基-4’-三氟甲氧基-聯(lián)苯基-3-甲酸[6_(順式-2，6- 二甲基-嗎啉-4-基)_吡啶-3-基]-酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
3.權(quán)利要求1的組合，其中所述第一活性劑是2-[(R)-4-(6-芐基-4，5-二甲基-噠嗪-3-基)-2-甲基-3，4，5，6-四氫-2H- [ I，2’ ]聯(lián)吡嗪基-5’ -基]-丙-2-醇或其藥學(xué)上可接受的鹽。
4.權(quán)利要求1的組合，其中所述第二活性劑是ABL抑制劑、ABL/Scr抑制劑、極光激酶抑制劑或BCR-ABL的非-ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。
5.權(quán)利要求1的組合，其中所述第二活性劑選自:尼羅替尼(AMN107)、伊馬替尼(STI571)、2，6，9-三取代的嘌呤類似物(例如AP23464)、AZD-0530、博舒替尼(SK1-606)、CPG070603、吡啶并[2，3-d]嘧啶化合物(例如達(dá)沙替尼(BMS-354825))、PD166326、PD173955、PD180970)、0N012380、3_ 取代的苯甲酰胺衍生物(例如 INN0-406)、MK-0457(VX-680)、PHA-739358、鹽酸瑞他霉素(IP1-504)和 GNF-2。
6.權(quán)利要求5的組合，其中所述第二活性劑是尼羅替尼。
7.權(quán)利要求6的組合，其中所述第一活性劑是2-甲基-4’-三氟甲氧基-聯(lián)苯基-3-甲酸[6_(順式-2，6- 二甲基-嗎啉-4-基)_吡啶-3-基]-酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽。
8.權(quán)利要求6的組合，其中所述第一活性劑是2-[(R)-4-(6-芐基-4，5-二甲基-噠嗪-3-基)-2-甲基-3，4，5，6-四氫-2H- [ I，2’ ]聯(lián)吡嗪基-5’ -基]-丙-2-醇或其藥學(xué)上可接受的鹽。
9.藥物組合物，其包含為Smo抑制劑的第一活性劑和為BCR-ABL抑制劑的第二活性劑， 其中所述第一活性劑是式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽:
10.權(quán)利要求1的組合在制備用于治療BCR-ABL陽(yáng)性白血病的藥劑中的用途。
11.權(quán)利要求10的用途，其中所述BCR-ABL陽(yáng)性白血病是慢性髓性白血病、急性髓性白血病或急性淋巴細(xì)胞白血病。
12.權(quán)利要求11的用途 ，其中所述BCR-ABL陽(yáng)性白血病是慢性髓性白血病。
【文檔編號(hào)】A61P35/02GK103736094SQ201310751285
【公開(kāi)日】2014年4月23日 申請(qǐng)日期:2010年8月11日 優(yōu)先權(quán)日:2009年8月12日
【發(fā)明者】M·科普蘭德, M·多施, D·歐文, P·W·曼雷, S·波伊克特 申請(qǐng)人:諾華股份有限公司, 格拉斯哥大學(xué)董事會(huì)