游離酸形式的ω-3多不飽和脂肪酸的富含dpa組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供采用游離酸形式的多不飽和脂肪酸的富含DPA的藥物組合物、它們應(yīng)用的治療方法、和從魚油中精制這些組合物的工藝。還提供通過他汀類與本發(fā)明中所描述藥物組合物的輔助給藥來治療高甘油三酯血癥(200mg/dL-500mg/dL)的方法。其中更多的治療方法包括：增加血漿EPA:AA比率的治療、降低載脂蛋白CⅢ(Apo CⅢ)水平的治療、和降低并防止對血小板聚集抑制劑的耐藥性的治療。
【專利說明】游離酸形式的Ω-3多不飽和脂肪酸的富含DPA組合物 1.相關(guān)申請的交叉引用
[0001] 依據(jù)35美國法典§ 119(e)，本申請要求2012年1月6日提交的美國臨時專利申請 61/583,796、2012年6月25日提交的美國臨時專利申請61/664,047、2012年7月10日提交 的美國臨時專利申請61/669,940、2012年8月7日提交的美國臨時專利申請61/680,622、 2012年10月5日提交的美國臨時專利申請61/710, 517、和2012年10月12日提交的美國 臨時專利申請61/713, 388的權(quán)益，這些專利申請的全部內(nèi)容通過援引并入本文中。 2.【背景技術(shù)】
[0002] 業(yè)界正在開發(fā)富含Ω -3 (ω -3或η-3)多不飽和脂肪酸（PUFA)的藥物組合物用以 治療多種臨床指征。
[0003] 從天然來源（通常是魚油）中獲得的這些產(chǎn)品是異質(zhì)的組合物并且包含各種類的 Q-3PUFA、Q-6PUFA和其他小組分（包括單不飽和及飽和脂肪酸）。所觀察的臨床療效通 常歸因于該組合物整體，盡管存在于該混合物中的最普遍的PUFA種類（通常是EPA和DHA) 被認(rèn)為貢獻(xiàn)了所觀察臨床療效中的大部分。因為它們是異質(zhì)的組合物，所以定義這些產(chǎn)品 含有某些必要的多不飽和脂肪酸種類，各在規(guī)定的百分率容許（tolerance)范圍內(nèi)。進(jìn)一 步定義該組合物限制某些不希望有的組分，包括來自天然來源（例如某些環(huán)境污染物）的 那些和有可能在精制工藝中產(chǎn)生的那些組分。
[0004] 最佳組成可能隨將應(yīng)用的臨床指征而變化。然而，甚至對于第一個獲批準(zhǔn)的臨床 指征，用于嚴(yán)重高甘油三酯血癥（TGs>500mg/dl)的治療的最佳組成仍未確定。
[0005] 因此，用于治療嚴(yán)重高甘油三酯血癥的第一個獲批準(zhǔn)的藥物組合物以大約 46:38(EPA:DHA)的重量百分比含有采用乙基酯類形式的Q-3PUFA種類二十碳五烯酸 (EPA)和二十二碳六烯酸（DHA)，其中EPA與DHA -起占到該組合物中全部PUFA種類的大 約84%。相反，新近獲批準(zhǔn)的產(chǎn)品Vascepa? (以前稱為AMR101)，其被批準(zhǔn)用于相同的臨床 指征，是乙基酯形式的純EPA>96%的，基本上沒有DHA。作為膳食補(bǔ)充劑銷售并且部分宣傳 有助于降低甘油三酯水平的營養(yǎng)食品產(chǎn)品0MAX3,以大約4. 1:1的重量比含有EPA和DHA， 其中EPA和DHA同樣地采用乙基酯的形式，該制劑具有多于84%重量的EPA和DHA及大于 90%重量的Ω-3脂肪酸。
[0006] 組合物中的這些寬范圍變化反映出用于此臨床指征的最優(yōu)組成的持續(xù)不確定性。
[0007] 該不確定性部分是由于相互矛盾的臨床目的所致。例如，已知Q-3PUFA種類 DHA在降低血清甘油三酯方面比EPA更強(qiáng)效，但已知其在提高低密度脂蛋白（LDL)水平方 面具有更強(qiáng)的傾向，Mori 等人，Am. J. Clin. Nutr. 71:1085 - 94 (2000)，Grimsgaard 等人， Am. J. Clin. Nutr. 66:649 - 59(1997) ;LDL的升高被認(rèn)為在臨床上對于具有升高的心血管 病風(fēng)險的受試者是不利的。盡管利用Q-3PUFA降低血小板聚集和血栓形成在臨床上常常 是期望的，但可能的出血時間延長促使某些人提出向富含Q-3PUFA的藥物組合物中添加 一定量的Q-6PUFA種類，花生四烯酸（AA)。參見美國核準(zhǔn)前公開第2010/0160435號。
[0008] 確定最優(yōu)組成的困難也部分是由于在某些Q-3PUFA種類中的酶互換、以及Ω-3 與Ω -6多不飽和脂肪酸之間在它們各自從中鏈膳食PUFA的生物合成途徑中對公用酶的競 爭所致（見圖1)。
[0009] 設(shè)計最優(yōu)組成中的另一個問題是口服給藥的PUFA組合物的生物利用度的變 化。已知采用乙基酯類形式的PUFA的吸收例如取決于胰脂肪酶的存在，該胰脂肪酶 響應(yīng)脂肪的攝入而釋放。因此PUFA乙基酯類的吸收是低效率的，并且在各受試者和 任何單獨(dú)受試者中基于脂肪的飲食攝入量而有大幅變化。參見Lawson等人的"采用 甘油三酯類、游離酸類或乙基酯類形式的魚油脂肪酸的人體吸收（Human absorption of fish oil fatty acids as triacyglycerols, free acids, or ethyl esters)，'， Biochem Biophys Res Commun. 152:328-35(1988) ;Lawson 等人，Biochem Biophys Res Commun. 156:960-3(1988)。尤其在低脂肪飲食的受試者中PUFA的吸收減少，該低脂肪飲食 是對具有升高的血清甘油三酯水平或患有心血管疾病的受試者提倡的飲食。
[0010] 就任何特別理想的PUFA藥物組合物而言，通過設(shè)計精制工藝而生產(chǎn)最終產(chǎn)品，該 最終產(chǎn)品具有在預(yù)定百分率容許范圍內(nèi)的必要脂肪酸組分并且將某些不希望有的組分限 制到低于某些預(yù)定容許限的水平，并且具有足夠的產(chǎn)率以便使該工藝可適用于工業(yè)規(guī)模生 產(chǎn)且在環(huán)境上是可持續(xù)的。期望的最終組成中的差異決定了精制工藝中的差異。
[0011] 然而，各種已知的工藝步驟中存在著權(quán)衡，該權(quán)衡使精制工藝的組成特定的調(diào)整 和優(yōu)化變得困難。例如，在乙醇存在下的尿素包合絡(luò)合（包合作用）經(jīng)常用于去除飽和及 單不飽和長鏈脂肪酸，從而增加期望的長鏈Ω-3多不飽和脂肪酸在所形成組合物中的相 對比例。太少的尿素降低長鏈Q(jìng)-3PUFA的富集。然而，過量的尿素可導(dǎo)致無用組分的濃度， 并且具有在任何給定的溫度和反應(yīng)時間下導(dǎo)致氨基甲酸乙酯的產(chǎn)生增加的可能性，氨基甲 酸乙酯是不允許超過某些規(guī)定低限的致癌物。然而，尿素包合的現(xiàn)有替代方法中存在著其 他困難。
[0012] 因此，對于富含特別是用于治療高甘油三酯血癥和混合性血脂異常的Ω-3多不 飽和脂肪酸的改進(jìn)藥物組合物存在著需求，并對從魚油中精制這種組合物的改進(jìn)工藝存在 著需求。 3.
【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 在第一方面，本公開提供采用游離酸形式的Ω-3多不飽和脂肪酸的富含DPA藥物 組合物。DPA含量的富集是工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)過程的非預(yù)期和意外的后果。這些富含DPA的藥 物組合物已被證明在體外實驗和人類臨床試驗中具有優(yōu)異的藥理功效和臨床療效。
[0014] 因此，在另一方面，本公開提供治療的方法。在一個系列的治療實施方式中，提供 用于治療嚴(yán)重高甘油三酯血癥（TG>500mg/dL)的方法。在另一個系列的治療實施方式中， 提供通過他汀類與本文中所描述藥物組合物的輔助給藥來治療高甘油三酯血癥（200mg/ dL-500mg/dL)的方法。其他治療方法尤其包括：增加血漿EPA:AA比率的治療、降低載脂蛋 白CIII (Ap0CIII)水平的治療、和降低或防止對血小板聚集抑制劑的耐藥性的治療。
[0015] 本文中還公開了以工業(yè)規(guī)模制造所述藥物組合物的方法，包括包含尿素包合步驟 的方法，在該尿素包合步驟中組成約束批次的經(jīng)酯交換中間原料經(jīng)歷采用在由新工藝算法 所確定范圍內(nèi)的尿素量的尿素包合步驟。 4.【專利附圖】

【附圖說明】
[0016] 圖1示出了由中間（中等）鏈長度必需脂肪酸生物合成Ω-3和Ω-6長鏈多不飽 和脂肪酸的已知人體內(nèi)途徑。
[0017] 圖2是用于制備PUFA乙基酯類中間原料的示例性工藝的流程圖。
[0018] 圖3A中繪出了通過尿素包合步驟對各類脂肪酸的平均相對純化，在該尿素包合 步驟中將算法確定量的尿素加入到PUFA乙基酯類的組成規(guī)定的中間原料中。
[0019] 圖3B中示出了在將算法確定量的尿素加入到PUFA乙基酯類的組成規(guī)定的中間原 料中時各類Ω-3和Q-6PUFA乙基酯類的平均差別純化。
[0020] 圖4是說明實施例7中進(jìn)一步描述的ECLIPSE臨床研究的設(shè)計的治療流程圖。
[0021] 圖5中對在高脂肪和低脂肪餐期中在L〇VaZa' s' 的單次給藥（4g)后總EPA+DHA(基 線調(diào)整后變化）的生物利用度進(jìn)行了比較。
[0022] 圖6中對在高脂肪飲食期中在（4g)的Lovaza? ( "EE-FA"）或Epanova?的單次給 藥后總EPA+DHA(基線調(diào)整后變化）的生物利用度進(jìn)行了比較，Lovaz，或Epanwa11是一種 采用游離酸形式（"FFA"）的Q-3PUFA的富含DPA組合物。
[0023] 圖7中對在低脂肪飲食期中在（4g)的Lovaza*或Epamwali單次給藥后的總血漿 EPA+DHA濃度（基線調(diào)整后變化）進(jìn)行了比較。
[0024] 圖8中對在低脂肪飲食期中在（4g)的Lovaza1"或Epanovae單次給藥后的總血漿 EPA濃度（基線調(diào)整后變化）進(jìn)行了比較。
[0025] 圖9中對在低脂肪飲食期中在（4g)的Lovaza+*或Epanova s單次給藥后的總血漿 DHA濃度（基線調(diào)整后變化）進(jìn)行了比較。
[0026] 圖IOA和圖IOB給出了在低脂肪和高脂肪餐期間單獨(dú)受試者的AUCVt反應(yīng)，以低 脂肪AUC Q_t與高脂肪AUCQ_t的比率（％ )表示。未繪出負(fù)的比率。
[0027] 圖11是說明在實施例8中進(jìn)一步描述的14天對比生物利用度試驗的設(shè)計的治療 流程圖（時間線中未標(biāo)上刻度）。
[0028] 圖12A繪出了在實施例8中進(jìn)一步描述的14天對比生物利用度試驗中Lovazali的 治療對比Epanovasi的治療的平均未調(diào)整總EPA+DHA濃度與時間（線性刻度）的關(guān)系圖。
[0029] 圖12B是顯示在圖12A中括號中的點(diǎn)的未調(diào)整EPA+DHA(nmol/mL)的差異的柱狀 圖。
[0030] 圖13中繪出了在14天對比生物利用度研究中Lovaza?的治療相對于Epanova?的 治療的EPA+DHA平均基線調(diào)整的血漿總EPA+DHA濃度與時間（線性刻度）的關(guān)系圖。
[0031] 圖14A是繪出在14天對比生物利用度研究的Lovaza*和Epaiiovas組中EPA+DHA的 未調(diào)整血濃度從基線增加到穩(wěn)態(tài)的柱狀圖。
[0032] 圖14B是繪出在14天對比生物利用度研究的L0vaza*:和Epanova?組中EPA+DHA的 未調(diào)整Cavg從基線增加到穩(wěn)態(tài)的柱狀圖。
[0033] 圖15A是繪出在14天對比生物利用度研究的Lovaza11'和Epanova?組中DHA的總血 濃度從基線增加到穩(wěn)態(tài)的柱狀圖。
[0034] 圖15B是繪出在14天對比生物利用度研究中Epanovas組群與L〇 vaza?組群比較 的DHACavg水平從基線增加到穩(wěn)態(tài)的柱狀圖。
[0035] 圖16A是繪出在14天對比生物利用度研究的u?vazaa:和Epanova v組中血中總EPA 水平從基線增加到穩(wěn)態(tài)的柱狀圖。
[0036] 圖16B中繪出了在14天對比生物利用度研究的Epamwae和Ltmmf:組群中 EPACavg水平從基線增加到穩(wěn)態(tài)。
[0037] 圖17提供說明在實施例10中進(jìn)一步描述的EVOLVE研究的設(shè)計的治療流程圖。
[0038] 圖18更詳細(xì)地總結(jié)了 EVOLVE試驗設(shè)計，其中進(jìn)一步確定了研究訪問的時間安排。
[0039] 圖19示出了在EVOLVE試驗中受試者的處置。
[0040] 圖20A-圖20D中示出了在EVOLVE試驗中各治療組的EPA (圖20A)、DHA (圖20B)、 DPA (圖20C)和AA (圖20D)的平均基線和治療結(jié)束時（"EOT"）血漿水平（單位μ g/mL)。
[0041] 圖20E中對實施例7中所描述ECLIPSE試驗的平均基線和EOTEPA水平、實施例8 中所描述的14天生物利用度研究、實施例11中所描述他汀類的藥物-藥物相互作用研究 (STATINDDI)、實施例10中所描述EVOLVE試驗的各治療組及對照組、和使用不同的Ω -3組 合物的不相關(guān)JELIS試驗（JELIS)的文獻(xiàn)中早期報道值進(jìn)行了比較。
[0042] 圖 21A-圖 21D 中繪出了在 EVOLVE 試驗中 EPA(圖 21A)、DHA(圖 21B)、DPA(圖 21C)和AA(圖21D)的中值基線和治療結(jié)束時（EOT)血漿水平（單位為μ g/mL)。
[0043] 圖22A和圖22B中繪出了 EVOLVE試驗的每個治療組的AA、DHA、EPA和DPA的絕對 血漿水平（單位為μ g/mL)從基線到EOT的變化。圖22A繪出了平均值變化；圖22B繪出 了中值變化。
[0044] 圖23A中繪出了在EVOLVE試驗的每個治療組中AA、DHA、EPA和DPA從基線到EOT 的平均值變化，用基線值的百分率表示。圖23B中繪出了從基線到EOT的中值百分率變化。
[0045] 圖24A-圖241中繪出了在EVOLVE試驗中甘油三酯類（圖24A)、非一 HDL-C(圖 24B)、HDL-C (圖 24C)、V-LDL-C (圖 24D)、LDL-C (圖 24E)、ApoB (圖 24F)、ApoC III (圖 24G)、 RLP (圖24H)、LpPLA2 (圖241)的平均基線和EOT血漿水平（單位為mg/dL，除了 LpPLA2以 ng/mL為單位表示）。
[0046] 圖25A-圖251中繪出了在EVOLVE試驗中甘油三酯類（圖25A)、非-HDL-C(圖 25B)、HDL-C (圖 25C)、V-LDL-C (圖 2?)、LDL-C (圖 25E)、ApoB (圖 25F)、ApoC III (圖 25G)、 RLP (圖25H)、LpPLA2 (圖251)的中值基線和EOT血漿水平（單位為mg/dL，除了 LpPLA2以 ng/mL為單位表示）。
[0047] 圖26A和圖26B中繪出了 EVOLVE試驗的各治療組的甘油三酯類（TG)、 非-HDL-C ( "NHDL-C"）、HDL-C、VLDL-C和LDL-C的絕對血漿水平（單位為mg/dL)從基線 至Ij EOT的變化，其中圖26A中繪出了平均值變化并且圖26B中示出了中值變化。
[0048] 圖27中繪出了 2g劑量和4g劑量Epanova?的、由Y軸給出的EVOLVE試驗中受試 者的百分比，這些受試者的甘油三酯水平降低了由X軸給出的標(biāo)示百分率。
[0049] 圖 28A 繪出了在 EVOLVE 試驗的各治療組中 TG、非-HDL-C (NHDL-C)、HDL-C、 VLDL-C、LDL-C、ApoB、ApoClII、LpLPA2和RLP從基線到EOT的平均值變化，該變化以基線值 的百分率表示，并且圖28B中繪出了從基線到EOT的中值變化百分率。
[0050] 圖 29 中繪出了在 EVOLVE 試驗中 2g 和 4g 劑量的 Epaiuwat'之間EPA、DHA、DPA、AA、 TG、NHDL-C和HDL-C的血漿水平相對于基線的中值變化百分率的變化率（絕對值）。
[0051] 圖30示出了在EVOLVE試驗中測量的Epanova?在標(biāo)示劑量下和由其他人報道的 AMR-101 (Vasc印a)的數(shù)據(jù)相對甘油三酯（TG)水平的比較數(shù)據(jù)。
[0052] 圖31示出了 Epjnova :(如EVOLVE試驗中所測量的）和AMR-101 (Vasc印a)對于 各種血脂參數(shù)的比較數(shù)據(jù)。AMR-101的數(shù)據(jù)是由其他人報道。（*)表示小于0. 05的p值， (**)表示小于0. 01的P值，〇**)表示小于0. 001的P值。
[0053] 圖32示出了 Epanova? 2g和4g劑量（如EVOLVE試驗中測定的）和L〇vaza? 4g齊[J 量對于各種血脂參數(shù)的比較數(shù)據(jù)。Lovaza*?的數(shù)據(jù)是由其他人報道。（*)表示小于0.05的 P值，（**)表示小于0. 01的P值，（***)表示小于0. 001的P值。
[0054] 圖33示出了 Epanova? 2g和4g劑量（如EVOLVE試驗中確定的）和Lwaza* 4g劑 量（由其他人報道）對于甘油三酯水平的比較數(shù)據(jù)。上標(biāo)表示來源于（DEVOLVE試驗、（2) 來自Lovaza?新藥申請（NDA)的元分析、（3) Lovaza?的獲FDA批準(zhǔn)的產(chǎn)品標(biāo)簽、和（4)武田 (Takeda)研究的數(shù)據(jù)。〇)表示小于0. 05的p值，〇*)表示小于0. 01的p值，〇**)表示 小于0.001的p值。
[0055] 圖34中繪出了在EVOLVE試驗中測量的LDL的變化百分率與ApoC III的變化百分 率之間的相互關(guān)系。
[0056] 圖35中繪出了如實施例10中進(jìn)一步描述的EVOLVE研究的標(biāo)示治療組的具有大 于或等于750mg/dL的TG基線水平的EVOLVE試驗受試者亞群中的相對于基線的最小二乘 (LS)平均值變化百分率。（*)表示小于0. 05的p值，（**)表示小于0. 01的p值，（***)表 示小于0.001的p值。
[0057] 圖36中繪出了如實施例10中所描述的EVOLVE研究的指示治療組的、患有II型糖 尿病的受試者亞群中的相對于基線的最小二乘（LS)平均值變化百分率。（*)表示小于0. 05 的P值，（**)表示小于〇. 01的P值，（***)表示小于〇. 001的P值。
[0058] 圖37中繪出了如實施例10中所描述的EVOLVE研究的指示治療組的、經(jīng)歷同時他 汀類治療的受試者亞群中相對于基線的最小二乘（LS)平均值變化百分率。（*)表示小于 0. 05的p值，（**)表示小于0. 01的p值，（***)表示小于0. 001的p值。
[0059] 圖38中繪出了相對于對照的甘油三酯類（TG)、非HDL膽固醇（NHDL-C)、HDL-C、 LDL-C、TC、VLDL-C和TC/HDL-C的最小二乘（LS)平均值變化百分率，圖中對實施例10中所 描述EVOLVE研究的使用2g劑量Epanova?進(jìn)行治療同時接受（他?。┗蛘卟唤邮埽ǚ撬??。┧☆愔委煹氖茉囌哌M(jìn)行了比較。（*)表示小于〇. 05的p值，（**)表示小于0. 01的 P值，（***)表示小于〇· 001的P值。
[0060] 圖39中繪出了在實施例10中進(jìn)一步描述的EVOLVE研究的指示治療組中經(jīng)歷同 時他汀類治療的受試者亞群的TG、NHDL-C、HDL-C、LDL-C、TC、VLDL-C和TC/HDL-C相對于基 線的中值變化百分率。（*)表示小于0. 05的P值，（**)表示小于0. Ol的P值，（***)表示 小于0.001的P值。
[0061] 圖40提供了說明實施例12中進(jìn)一步描述的ESPRIT研究的設(shè)計的治療流程圖。
[0062] 圖41示出了在ESPRIT試驗中受試者的處置。
[0063] 圖42A和圖42B中繪出了來自實施例12中進(jìn)一步描述的ESPRIT研究的EPA(圖 42A)和DHA(圖42B)相對于基線的中值最小二乘變化百分率。（*)表示小于0. 05的p值， (**)表示小于0. 01的P值，〇**)表示小于0. 001的P值。
[0064] 圖43中繪出了 TG、非-HDL-C和HDL-C相對于基線的最小二乘平均值變化百分率。 顯示的數(shù)據(jù)是來自實施例12中進(jìn)一步描述的ESPRIT研究。（*)表示小于0. 05的p值，（**) 表示小于〇. 01的P值，（***)表示小于〇. 001的P值。
[0065] 圖44中繪出了 ApoB、LDL-C、VLDL-C和TC/HDL-C相對于基線的最小二乘平均值變 化百分率。顯示的數(shù)據(jù)是來自實施例12中進(jìn)一步描述的ESPRIT研究。（*)表示小于0.05 的P值，（**)表示小于〇. 01的P值，（***)表示小于〇. 001的P值。
[0066] 圖45中繪出了 ESPRIT試驗中受試者的相對于基線的TG中值變化百分率，其中基 于基線TG水平將受試者分組入三分位（tertile)。
[0067] 圖46中繪出了 ESPRIT試驗中受試者的非-HDL-C相對于基線的中值變化百分率， 其中基于基線非-HDL-C水平將受試者分組入三分位。
[0068] 圖47中繪出了 ESPRIT試驗中受試者的LDL-C相對于基線的中值變化百分率，其 中基于基線LDL-C水平將受試者分組入三分位。
[0069] 圖48中繪出了 ESPRIT試驗的各治療組的TG相對于基線的中值變化百分率，其中 根據(jù)同時治療中所服用他汀類的特征將受試者分組。
[0070] 圖49中繪出了 ESPRIT試驗的各治療組的TG相對于基線的中值變化百分率，其中 根據(jù)低或高效能的同時他汀類治療將受試者分組入兩組。
[0071] 圖50中繪出了 ESPRIT試驗的各治療組的非-HDL-C相對于基線的中值變化百分 率，其中根據(jù)低或高效能的同時他汀類治療將受試者分組。
[0072] 圖51中繪出了 ESPRIT試驗的每個治療組的LDL-C相對于基線的中值變化百分 率，其中根據(jù)低或高效能的同時他汀類治療將受試者分組入兩組。
[0073] 圖52中繪出了 TG相對于基線的中值變化百分率，其中根據(jù)高基線TG、高基線 EPA、或者同時的羅蘇伐他汀治療將ESPRIAT試驗的各治療組中的受試者分組入三組。
[0074] 圖53中繪出了根據(jù)如ESPRIT試驗中所測定粒徑進(jìn)行分組的V-LDL顆粒的粒徑分 布相對于基線的最小二乘平均值變化百分率。（*)表示小于0.05的p值，（**)表示小于 〇· 01的P值，（*#)表示小于〇· 001的P值。
[0075] 圖54中繪出了 ESPRIT試驗的各治療組的根據(jù)粒徑進(jìn)行分組的LDL顆粒的粒徑分 布相對于基線的最小二乘平均值變化百分率。（*)表示小于〇. 05的p值，（**)表示小于 〇· 01的P值，（*林）表示小于〇· 001的P值。
[0076] 圖55中繪出了 LDL粒徑中的最小二乘中值變化百分率，其中根據(jù)ESPRITE0T甘油 三酯水平將受試者分組入三組。
[0077] 圖56A示出了實施例11中進(jìn)一步描述的臨床試驗中的根據(jù)在rsl74546SNP處的 基因型進(jìn)行分組的受試者的基線花生四烯酸（AA)血漿水平（單位μ g/mL)。圖56B示出了 根據(jù)在rsl74546SNP處的基因型進(jìn)行分組的受試者在用Epanova?治療的第15天AA血漿水 平相對于基線的變化百分率。就各基因型而言，由方框表示四分位距，四分位方框內(nèi)部的水 平線表示中值，由菱形框表示平均值。開放的圓表示離群值。觸須線（whisker)延伸到最 小和最大非離群值的值。評分1標(biāo)示在主要等位基因處是純合子的受試者；評分3標(biāo)示在 次要等位基因處是純合子的受試者；評分2表示雜合子。 5.發(fā)明詳述 5. 1.概述：游離酸形式的Ω-3多不飽和脂肪酸藥物組合物，其意外地富含具有優(yōu)異的 臨床療效的DPA
[0078] 尿素包合絡(luò)合（包合作用（clathration))是魚油精制中經(jīng)常采用的標(biāo)準(zhǔn)步驟，用 于去除飽和及單不飽和長鏈脂肪酸，因此在所形成組合物中使期望的長鏈Ω-3多不飽和 脂肪酸富集。盡管有長期應(yīng)用，但被設(shè)計用來描述各種生理化學(xué)參數(shù)對工藝影響的特征的 研究中，尿素包合使長鏈多不飽和脂肪酸的單獨(dú)種類富集的程度仍然是不可預(yù)知的。尿素 包合步驟中的這種殘余的不可預(yù)知性，外加產(chǎn)生不允許的高水平的氨基甲酸乙酯的可能性 (這將會使其他處理成為必須），這最初使得傾向于從用于生產(chǎn)符合某些理想組成規(guī)格的 游離酸形式的Q-3PUFA的醫(yī)藥級組合物的工業(yè)規(guī)模精制工藝中省略去尿素包合。
[0079] 然而，如實施例1中的進(jìn)一步描述，開發(fā)無尿素工業(yè)規(guī)模工藝的早期努力已證明 這種工藝不能可靠地生產(chǎn)具有符合要求規(guī)格的組成的批次產(chǎn)品。因此，尋找到一種采用尿 素包合的工藝，據(jù)發(fā)現(xiàn)通過對存在于中間乙基酯原料中的PUFA種類實行嚴(yán)格的組成控制 外加使用算法確定量的尿素，可以可靠地生產(chǎn)符合要求規(guī)格且不超過可接受的氨基甲酸乙 酯限值的批次產(chǎn)品。
[0080] 如實施例2中所描述，利用尿素包合步驟制備四個示例性生產(chǎn)批次的采用游離酸 形式的多不飽和脂肪酸。將嚴(yán)格的組成控制應(yīng)用于乙基酯中間原料，僅使用其中規(guī)定的多 不飽和脂肪酸種類落在定義的范圍限值內(nèi)的批次產(chǎn)品，并且采用落在尿素計算器算法所要 求范圍內(nèi)的尿素量。確定全部四個生產(chǎn)批次的藥物組合物均符合期望的組成規(guī)格。
[0081] 正如預(yù)期的，尿素包合步驟大幅降低所形成組合物中飽和脂肪酸和單不飽和脂肪 酸的百分率，由此大幅地富集多不飽和脂肪酸。參見圖3A。但意外地，實施使用落在算法確 定范圍內(nèi)的尿素量的尿素包合對Ω-3多不飽和脂肪酸和Ω-6多不飽和脂肪酸的特定種類 的富集具有差別的作用。
[0082] 如下面實施例3中的描述，發(fā)現(xiàn)富集了 Ω-3二十二碳五烯酸種類DPA(C22:5n_3)， 而具有相同鏈長度和不飽和度的相應(yīng)的Ω-6種類二十二碳五烯酸（C22:5n-6)則占優(yōu)勢地 被減少。尿素包合對這兩種異構(gòu)體的富集的不同影響，連同它們在乙基酯中間原料中的相 對濃度的差異，導(dǎo)致它們在最終游離酸藥物組合物（API)中的濃度產(chǎn)生對數(shù)級的差異。
[0083] 制備其他生產(chǎn)批次，并且如實施例4中所描述，對10個批次API的組成分析證明 最終組合物中存在可再現(xiàn)地升高水平的DPA。如實施例5中所描述，對利用尿素包合所制備 的21個批次的組成分析證明：與其Ω-6異構(gòu)體二十二碳五烯酸（C22:5n-6)相比存在可再 現(xiàn)的Ω -3種類DPA的濃度中的10倍差異。
[0084] 在21個生產(chǎn)批次中，在4. 44% (a/a)的平均濃度下，DPA是API中第三最占 優(yōu)勢的多不飽和脂肪酸種類，僅被EPA和DHA超過。在此水平下，DPA濃度也是被稱為 Purepa的采用游離酸形式的Ω-3多不飽和脂肪酸的較早的藥物組合物所報道濃度的大 約10倍，Pur印a中據(jù)報道DPA是以0. 5 %的濃度存在。參見Belluzzi等人，Dig. Dis. Sci. 39(12) :2589-2594(1994)。
[0085] 盡管DPA是從EPA到DHA的生物合成途徑中的一個中間體（見圖1)，但出人意料 地對于DPA的具體生物學(xué)效應(yīng)卻了解不多。為了澄清DPA對所述藥物組合物的臨床療效的 潛在貢獻(xiàn)，進(jìn)行了使用HepG2肝癌細(xì)胞的表達(dá)概況分析實驗。
[0086] 正如實施例6中的進(jìn)一步描述，DPA對肝細(xì)胞基因表達(dá)的影響預(yù)測富含DPA組合 物的更大臨床療效。
[0087] 表達(dá)概況分析實驗表明DPA在相關(guān)的體外濃度下具有顯著的生物活性。這些作用 明顯不同于使用EPA和DHA所看到的作用。
[0088] 在相關(guān)的濃度下，觀察到DPA在多種代謝途徑中影響基因的表達(dá)，包括已知與 Ω-3多不飽和脂肪酸的臨床療效相關(guān)類別中的基因：與脂類代謝有關(guān)的基因、與心血管生 理有關(guān)的基因、和與炎癥有關(guān)的基因?？紤]到編碼自身影響基因表達(dá)的蛋白質(zhì)的基因表達(dá) 中、和在編碼影響轉(zhuǎn)錄后修飾的蛋白質(zhì)的基因中所觀察到的變化，也可預(yù)測產(chǎn)生顯著的二 級效應(yīng)。
[0089] 對與脂類代謝有關(guān)的若干基因的表達(dá)的特定作用表明DPA，在類似的體內(nèi)濃度下， 應(yīng)當(dāng)有貢獻(xiàn)于各種臨床相關(guān)脂類參數(shù)的改善。特別是，所觀察到的DPA驅(qū)動的ACADSB(短 鏈/支鏈?；o酶A脫氫酶）的上調(diào)，預(yù)測較低的血清甘油三酯水平；DPA驅(qū)動的HMGCR的 下調(diào)，類似于他汀類對編碼的HMG-輔酶A還原酶的抑制，將會被預(yù)測導(dǎo)致總膽固醇：HDL比 率的有利下降；由于DPA對SQLE (留醇合成中的速率限制步驟）的下調(diào)，類似地可預(yù)測總膽 固醇水平的下降。
[0090] 表達(dá)概況分析實驗也揭示了 DPA作用的閾劑量。被選擇用來模擬比較早的游離酸 Ω _3制劑（Pur印a)中的DPA濃度低10倍的較低的測試濃度，實現(xiàn)是較高DPA濃度的1/10 的基因表達(dá)，被選擇用來模擬本文中所描述的預(yù)測來自藥物組合物的暴露，從而證明較低 的DPA濃度提供閾下暴露，并且被期望能提供體內(nèi)次治療劑量。
[0091] 人臨床試驗確認(rèn)了采用游離酸形式的Ω-3多不飽和脂肪酸的富含DPA藥物組合 物具有優(yōu)異的臨床療效。
[0092] 實施例7中給出了 ECLIPSE臨床試驗的結(jié)果，該臨床試驗是一項開放標(biāo)簽、單劑 量、隨機(jī)分組4-通路交叉研究，該研究對在高脂肪和低脂肪膳食兩種條件下4g劑量的 Lovaza?的生物利用度與4g劑量的本文中所描述采用游離酸形式的Ω -3PUFA的富含DPA 藥物組合物（在下文中稱為"Epawwa?"）的生物利用度進(jìn)行了比較。根據(jù)獲FDA批準(zhǔn)的 產(chǎn)品標(biāo)簽，各1克Lwaza?膠囊中含有至少900mg來源于魚油的Ω -3脂肪酸的乙基酯類，該 乙基酯類主要是二十碳五烯酸（EPA，大約465mg)與二十二碳六烯酸（DHA，大約375mg)的 乙基酯類的組合。該試驗中所使用----的批次產(chǎn)品包含57. 3% (a/a)的EPA、19. 6% (a/a)的DHA、和6.2% (a/a)的DPA，各基本上是采用游離酸的形式。
[0093] 在高脂肪飲食期中，使用Epanova? (采用游離酸形式的Ω -3PUFA)的總EPA+DHA 及單獨(dú)的EPA和DHA吸收曲線（AUC)中的基線調(diào)整后變化顯著大于使用Lovazal (Ω-3-PUFA乙基酯類）的基線調(diào)整后變化，并且在低脂肪餐期中明顯地更好。此外，膳食 中的脂肪含量對Lovaza?的生物利用度具有深刻的影響，但由于僅適度的食物效應(yīng)因而 Epanova?的生物利用度的可預(yù)測性要高得多。
[0094] 鑒于NCEPATPIII建議患有高甘油三酯血癥和血脂異常的受試者在輔助治療期間 堅持低脂肪飲食，Epanova?比LOTaZa?優(yōu)越的脂肪不依賴性生物利用度在臨床上具有重要 意義。
[0095] 實施例8中給出了來自14天生物利用度研究的結(jié)果，該研究表明在2周的給藥期 間在單劑量ECLIPSE試驗中所觀察到的生物利用度的提高得以維持，甚至被增強(qiáng)。另外，解 集的（disaggregated)受試者特定數(shù)據(jù)表明對Epanova?具有最小反應(yīng)的受試者仍然具有 與對Lovaza?具有最佳反應(yīng)的受試者相比更大的14天EPA+DHAC max。
[0096] 實施例10中給出了 EVOLVE試驗的結(jié)果，該試驗是基于在500-2, 000mg/dL范圍內(nèi) 高甘油三酯水平進(jìn)行選擇的患者（嚴(yán)重高甘油三酯血癥）的12周、雙盲、橄欖油對照研究。 主要研究終點(diǎn)是血漿甘油三酯水平從基線到治療結(jié)束時（EOT)的變化百分率。次要研究終 點(diǎn)是血漿非高密度脂蛋白膽固醇（non-HDL-C)從基線到EOT的變化百分率。
[0097] 如圖20-圖23中所見,使用Epanova?的12周治療導(dǎo)致EPA、DHA和DPA的血漿水 平顯著增加。
[0098] EPA、DHA和DPA的血漿水平增加伴隨著血漿AA水平的顯著降低，并且4g給藥方 案實現(xiàn)18%的平均值下降、25. 9%的中值下降、和23. 2%的最小二乘（LS)平均值下降。盡 管有外源性花生四烯酸的給藥但觀察到這些血漿花生四烯酸水平下降，花生四烯酸在此試 驗中所使用Epanova^批次中是以2.446% (a/a)的含量而存在。
[0099] 在4g劑量的治療結(jié)束時（EOT)，EPA血漿水平的增加連同同時發(fā)生的AA血 漿水平下降導(dǎo)致EPA/AA比的顯著提高，在基線處從大約0. 10提高到大約0.67(平 均值）和0.62(中值）。已有報道EPA/AA比率構(gòu)成冠狀動脈粥樣硬化的一個獨(dú)立 危險因素，Nakamua&Maegawa, Endocrine Abstracts (2012) 290C19. 1，在用他汀類治 療的冠狀動脈疾病患者中較低的該比率與冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)展有關(guān)，Nozue等 人，AmJCardiol. 2013Janl ;111 (1) :6-1 (印刷出版前的電子版）。
[0100] 而且，使用Epancwa*^^治療導(dǎo)致甘油三酯水平的大幅下降（見圖26A和圖26B)、 非-HDL-C和VLDL-C的下降、和HDL-C的增加。LDL-C水平是升高的，這是在治療時有助于 LDL粒徑增加的觀察（在實施例12中進(jìn)一步論述）。
[0101] EVOLVE試驗還表明Epantwav治療大幅降低載脂蛋白C III (ApoC III)。已發(fā)現(xiàn) ApoCIII的水平升高是心血管疾?。–HD)危險的一個獨(dú)立預(yù)測因素，而在基因方面ApoCIII的 水平下降與心血管疾病的防護(hù)有關(guān)并且也與壽命增加相關(guān)。
[0102] Epmovae中Ω -3PUFA的極高生物利用度顯示了以前未知且非預(yù)期的各種PUFA種 類中藥代動力學(xué)反應(yīng)中的差異。
[0103] 圖 29 中繪出了在 2g 與 4g 劑量的 Epanwa"之間 EPA、DHA、DPA、AA、TG、#-HDL-C、 和HDL-C (絕對值）血漿水平相對于基線的中值變化百分率中的變化率。在將Epanova?的 齊U量從2g/日加倍到4g/日時DHA和DPA的血漿水平有小幅增加或者沒有增加，相對于基 線的中值變化百分率的變化率（斜率）接近零，預(yù)測如果進(jìn)一步增加劑量將會實現(xiàn)DHA和 DPA血漿水平進(jìn)一步的小幅提高。在甘油三酯水平、HDL-C水平、和非-HDL-C水平（數(shù)據(jù)未 示出）中看到類似的反應(yīng)穩(wěn)定狀態(tài)。
[0104] 相反，EPA的變化率仍然高，具有0. 59的斜率；預(yù)測通過將Epanova8的劑量增加到 超過4g/日可獲得EPA血漿水平的進(jìn)一步增加。顯著地，當(dāng)把Epamw,的劑量從2g加倍到 4g/日時AA水平的變化率（下降）甚至高于EPA;當(dāng)把Epmova?的劑量增加到超過4g/日 時，預(yù)測AA的血漿水平會進(jìn)一步下降。因此，Epanova'#在升高EPA水平、降低AA水平的能 力方面顯示出前所未有的效能，并且提高EPA:AA比。
[0105] 如圖38中所示，與2g治療組中不接受同時他汀類治療的受試者相比較，EVOLVE 試驗的2g治療組中正在接受同時他汀類治療的受試者亞群相對于對照顯示TG、非-HDL-C、 HDL-C、LDL-C、TC、VLDL-C和TC/HDL-C的更大幅度的變化百分率（最小二乘差平均值）。接 受同時他汀類治療的受試者顯示對Epanova?的劑量依賴性反應(yīng)，如圖39中Epanova+m 2g與 Epanova? 4g的比較數(shù)據(jù)中所示。
[0106] 實施例12描述了 ESPRIT臨床試驗，通過實施該臨床試驗對在基線他汀類治療中 的患者進(jìn)行研究，這些患者具有在200-500mg/dL之間的甘油三酯水平，該水平低于參加實 施例10中所描述EVOLVE研究的患有嚴(yán)重高甘油三酯血癥的患者。
[0107] 當(dāng)與橄欖油安慰劑進(jìn)行比較時，觀察到甘油三酯類的劑量依賴性下降、非-HDL-C 的下降、和HDL-C的增加（參見圖43)。而且，觀察到VLDL-C和TC/HDL-C的劑量依賴性下 降（參見圖44)。合起來看，這些結(jié)果（匯總于圖42-圖44中）證明在甘油三酯水平在 200-500mg/dL之間的患者中Epanova?作為他汀類治療的附加治療的效能。
[0108] 圖45-圖52說明了在基線患者病癥范圍內(nèi)Epanovae作為低效能和高效能他汀類 的附加治療是有效的。如圖48中所見，就接受同時羅蘇伐他汀、阿托伐他汀、和辛伐他汀治 療的患者而言，觀察到甘油三酯水平的下降。無論是否有低效能或者高效能他汀類的聯(lián)合 給藥，均觀察到對甘油三酯類、非-HDL-C和LDL-C水平的有統(tǒng)計學(xué)意義的作用，如圖49-圖 51中所示。 5. 2采用游離酸形式的富含DPA的Ω -3組合物
[0109] 因此，在第一方面，本公開提供采用游離酸形式的多不飽和脂肪酸（PUFA)的改進(jìn) 組合物。在各種實施方式中，該組合物是適合于口服給藥的藥物組合物。在多種實施方式 中，該組合物是適合于口服給藥的營養(yǎng)食品組合物。 5. 2. 1典型的實施方式
[0110] 所述組合物包含多種Q-3PUFA種類，各基本上以游離酸的形式存在。
[0111] 該組合物包含二十碳五烯酸（C20:5n_3) (EPA，也稱為timnodonic acid)、二十二 碳六烯酸（C22:6n-3) (DHA，也稱為 cervonic acid)、和二十二碳五烯酸（C22:5n-3) (DPA， 也稱為clupodonic acid)，各自基本上采用游離酸的形式。
[0112] 所述組合物以至少約45% (45% (a/a))的量含有EPA,該量是以所述組合物中所 有脂肪酸的氣相色譜的面積的百分比計算的。在各種實施方式中，該組合物以至少約46% (a/a)47% (a/a)、48% (a/a)、49% (a/a)、或至少約 50% (a/a)的量含有 EPA。在某些實施 方式中，該組合物以至少約51% (a/a)、至少約52% (a/a)、至少約53% (a/a)、至少約54% (&/&)、至少約55|%(3/^)、至少約56(%(3/^)、至少約57 (%(3/^)、至少約58(%(3/^)，甚至 至少約 59% (a/a)、至少約 60% (a/a)、至少約 61% (a/a)、62% (a/a)、63% (a/a)、64% (a/a)、或 65% (a/a)的量含有 EPA。
[0113] 在某些實施方式中，所述組合物以約45至約65% (a/a)的量含有EPA。在具體實 施方式中，EPA是以約50至約60% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，EPA是以約52 至約58.0% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，EPA是以約55% (a/a)至約56% (a/ a)的量而存在。在一些實施方式中，EPA是以約55% (a/a)的量而存在。
[0114] 在各種實施方式中，所述組合物以約50% (m/m)至約60% (m/m)的量含有EPA，該 量是以該組合物中所有脂肪酸的質(zhì)量的百分率的形式進(jìn)行計算(m/m))。在某些實施方 式中，EPA是以約55% (m/m)的量而存在。
[0115] 所述組合物以至少約13% (a/a)的量含有DHA。在各種實施方式中，所述組合物以 至少約14% (a/a)、至少約15% (a/a)、至少約16% (a/a)、至少約17% (a/a)、至少約18% (a/a)、至少約19% (a/a)、或者至少約20% (a/a)的量含有DHA。在所選擇的實施方式中， 所述組合物以至少約21% (a/a)、至少約22% (a/a)、至少約23% (a/a)、至少約24% (a/ a)、甚至至少約25% (a/a)的量含有DHA。
[0116] 在各種實施方式中，所述組合物以約13% (a/a)至約25% (a/a)的量含有DHA。 在某些實施方式中，DHA是以約15% (a/a)至約25% (a/a)的量而存在。在若干個實施方 式中，DHA是以約17% (a/a)至約23% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，DHA是以約 19% (a/a)至約20% (a/a)的量而存在。
[0117] 在各種實施方式中，所述組合物以約15% (m/m)至約25% (m/m)的量含有DHA。 在某些實施方式中，DHA是以約17% (m/m)至約23% (m/m)的量而存在。在某些實施方式 中，DHA是以約20% (m/m)的量而存在。
[0118] 所述組合物以至少約1% (a/a)的量含有DPA。在各種實施方式中，所述組合物以 至少約 1.5% (a/a)、2% (a/a)、2.5% (a/a)、3% (a/a)、3.5% (a/a)、4% (a/a)、4.5% (a/ a)、甚至至少約5% (a/a)的量含有DPA。在所選擇的實施方式中，所述組合物以至少約6% (a/a)、至少約7% (a/a)、至少約8% (a/a)、或者至少約9% (a/a)的量含有DPA。
[0119] 在多種實施方式中，所述組合物以約1% (a/a)至約8% (a/a)的量含有DPA。在 某些實施方式中，所述組合物以約2% (a/a)至約7% (a/a)的量含有DPA。在所選擇的實 施方式中，所述組合物以約3% (a/a)至約6% (a/a)的量含有DPA。在【具體實施方式】中，所 述組合物以約4% (a/a)至約5% (a/a)的量含有DPA。
[0120] 在各種實施方式中，以在該組合物中全部脂肪酸的質(zhì)量的百分率的形式進(jìn)行計 算，所述組合物以不小于約1% (m/m)的量含有DPA。在各種實施方式中，所述組合物以約 1% (m/m)至約8% (m/m)的量含有DPA。在【具體實施方式】中，所述組合物以不大于約10% (m/m)的量含有DPA。
[0121] 所述組合物以至少約60% (a/a)的總量含有EPA和DHA。在各種實施方式中，所 述組合物以至少約 61% (a/a)、62% (a/a)、63% (a/a)、64% (a/a)、65% (a/a)、66% (a/ a)、67% (a/a)、68% (a/a)、69% (a/a)、或至少約 70% (a/a)的總量含有 EPA 和 DHA。在具 體實施方式中，所述組合物以至少約71% (a/a)、72% (a/a)、73% (a/a)、74% (a/a)、75% (a/a)、76% (a/a)、77% (a/a)、78% (a/a)、79% (a/a)、甚至至少約 80% (a/a)的總量含有 EPA和DHA。在某些實施方式中，所述組合物以至少約81% (a/a)、82% (a/a)、至少約83% (a/a)、84% (a/a)、甚至至少約85% (a/a)的總量含有EPA和DHA。
[0122] 在各種實施方式中，所述組合物以約70. 0% (m/m)至約80. 0% (m/m)的量含有 EPA和DHA。在某些實施方式中，所述組合物包含約75% (m/m)的EPA加 DHA。
[0123] 所述組合物以至少約61% (a/a)的總量含有EPA、DHA和DPA。在典型的實施方式 中，所述組合物以至少約 62% (a/a)、63% (a/a)、64% (a/a)、65% (a/a)、66% (a/a)、至少 約67% (a/a)、至少約68% (a/a)、至少約69% (a/a)、或者至少約70% (a/a)的總量含有 EPA、DHA和DPA。在某些實施方式中，所述組合物以至少約71% (a/a)、72% (a/a)、73% (a/ a), 74 % (a/a),75% (a/a),76% (a/a),77% (a/a),78% (a/a),79% (a/a),80% (a/a), 甚至至少約 81% (a/a)、82% (a/a)、83% (a/a)、84% (a/a)、85% (a/a)、86% (a/a)、87% (a/a)、甚至至少約88% (a/a)的總量含有EPA、DHA和DPA。
[0124] 在各種實施方式中，所述組合物以在約70% (a/a)至約90% (a/a)之間的總量含 有 EPA、DHA 和 DPA。
[0125] 在一個特定系列的實施方式中，EPA是以約55% (a/a)至約56% (a/a)的量而存 在；DHA是以約19% (a/a)至約20 % (a/a)的量而存在；DPA是以約4% (a/a)至約5 % (a/ a)的量而存在。
[0126] 在某些實施方式中，所述組合物還包含選自以下組的一種或多種Ω-3多不飽和 脂肪酸種類：α -亞麻酸（C18:3n-3)、十八碳四烯酸（C18:4n-3,也稱為十八碳四烯酸）、 二十碳三烯酸（C20:3n-3)、二十碳四烯酸（C20:4n-3)、和二i^一碳五烯酸（C21: 5n_3)。
[0127] 在【具體實施方式】中，所述組合物包含EPA、DHA、DPA和十八碳四烯酸，各自基本上 采用游離酸的形式。在多種實施方式中，所述組合物包含EPA、DHA、DPA、十八碳四烯酸、和 二i^一碳五烯酸，各自基本上采用游離酸的形式。在【具體實施方式】中，所述組合物包含EPA、 DHA、DPA、十八碳四烯酸、二i^一碳五烯酸、和二十碳四烯酸，各自基本上采用游離酸的形 式。在所選擇的實施方式中，所述組合物包含EPA、DHA、DPA、α-亞麻酸（C18:3n-3)、十八 碳四烯酸（C18:4n-3)、二十碳三烯酸（C20:3n-3)、二十碳四烯酸（C20:4n-3)、和二i^一碳 五烯酸（C21:5n-3)。
[0128] 在各種實施方式中，定義為α-亞麻酸（C18:3n_3)、十八碳四烯酸（C18:4n_3)、 二十碳三烯酸（C20:3n-3)、二十碳四烯酸（C20:4n-3)、二十碳五烯酸（EPA) (C20:5n-3)、 二i 碳五烯酸（C21:5n-3)、二十二碳五烯酸（C22:5n-3)和二十二碳六烯酸（DHA) (C22:6n-3)的總和的總Ω-3脂肪酸構(gòu)成所述組合物中所有脂肪酸的約80% (a/a)至約 95% (a/a)。在多種實施方式中，總Ω-3脂肪酸構(gòu)成所述組合物中全部脂肪酸的約80至約 95% (m/m) 〇
[0129] 在各種實施方式中，所述組合物還包含一種或多種Q-6PUFA種類，各種類基本上 是以游離酸的形式存在。
[0130] 在某些實施方式中，所述組合物包含選自以下組的一種或多種Q-6PUFA的種類： 亞油酸（C18:2n-6)、Y-亞麻酸（C18:3n-6)、二十碳二烯酸（C20:2n-6)、二高-Y-亞麻 酸（C20:3n-6) (DGLA)、花生四烯酸（C20:4n-6) (AA)、和二十二碳五烯酸（C22:5n-6,也稱為 osbond acid)ο
[0131] 在【具體實施方式】中，所述組合物包含亞油酸（C18:2n-6)、γ-亞麻酸（C18:3n-6)、 二十碳二烯酸（C20:2n-6)，二高-Y-亞麻酸（C20:3n-6) (DGLA)、花生四烯酸（C20:4n-6) (AA)、和二十二碳五烯酸（C22:5n-6)，各自基本上是采用游離酸的形式存在。
[0132] 在各種實施方式中，AA是以不大于所述組合物中脂肪酸的約5% (a/a)量而存在。 在某些實施方式中，AA構(gòu)成不大于約4.5% (a/a)的所述組合物中的脂肪酸。在具體實施 方式中，AA是以不大于所述組合物中脂肪酸的約4% (a/a)的量而存在。
[0133] 在某些實施方式中，AA是以不大于所述組合物中脂肪酸的約5% (m/m)的量而存 在。在某些實施方式中，AA包含不大于約4.5% (m/m)的所述組合物中的脂肪酸。在具體 實施方式中，AA是以不大于所述組合物中脂肪酸的約4% (m/m)的量而存在。
[0134] 在某些實施方式中，被定義為亞油酸（C18:2n-6)、Y-亞麻酸（C18:3n-6)、二十碳 二烯酸（C20:2n-6)、二高-Y-亞麻酸（C20:3n-6)、花生四烯酸（C20:4n-6)和二十二碳五 烯酸（C22:5n-6)的總和的總Ω-6多不飽和脂肪酸構(gòu)成不大于約10% (a/a)的所述組合 物中的脂肪酸。在某些實施方式中，被定義為亞油酸（C18:2n-6)、Y-亞麻酸（C18:3n-6)、 二十碳二烯酸（C20:2n-6)、二高-Y-亞麻酸（C20:3n-6)、花生四烯酸（C20:4n-6)和 二十二碳五烯酸（C22:5n-6)的總和的總Ω-6多不飽和脂肪酸構(gòu)成不大于約10% (m/m)的 所述組合物中的脂肪酸。
[0135] 在【具體實施方式】中，由表11給出組成，并且本文中確定的PUFA的各種類分別落在 所列舉平均值的約-3SD至約+3SD的范圍內(nèi)。在某些實施方式中，其中所確定的各PUFA種 類分別落在所列舉平均值的約-2SD至約+2SD的范圍內(nèi)。在某些實施方式中，各種類分別 落在所列舉平均值的約-ISD至約+ISD的范圍內(nèi)。
[0136] 在所選擇的實施方式中，由表13給出組成，并且其中所確定的各PUFA種類分別落 在所列舉平均值的約-3SD至約+3SD的范圍內(nèi)。在某些實施方式中，各種類分別落在所列 舉平均值的約-2SD至約+2SD范圍內(nèi)。在某些實施方式中，各PUFA種類分別落在所列舉平 均值的約-ISD至約+ISD的范圍內(nèi)。
[0137] 在某些實施方式中，除Ω-3和Ω-6多不飽和脂肪酸以外的多不飽和脂肪酸是以 不大于約5% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，除Ω-3和Ω-6多不飽和脂肪酸以外 的多不飽和脂肪酸是以不大于約5% (m/m)的量而存在。
[0138] 在多種實施方式中，所述組合物中多種Q-3PUFA種類中的各種類的至少90%是 采用游離酸的形式。在某些實施方式中，所述組合物中各Q-3PUFA種類的至少91%、至少 92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、甚至至少99%是以 游離酸的形式存在。在示例性實施方式中，所述組合物中Ω-3多不飽和脂肪酸總含量的至 少90%是以游離酸的形式存在。在某些實施方式中，所述組合物中總Ω-3多不飽和脂肪酸 含量的至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、甚至至少99 %是以游離酸的形式存在。
[0139] 在各種實施方式中，所述組合物中多種Q-6PUFA種類中的各種類的至少90%是 以游離酸的形式存在。在某些實施方式中，所述組合物中各Q-6PUFA種類的至少91%、至 少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、甚至至少99% 是以游離酸的形式存在。在示例性實施方式中，所述組合物中至少90%的總Ω-6多不飽和 脂肪酸含量是以游離酸的形式存在。
[0140] 在各種實施方式中，所述組合物中至少90%的總多不飽和脂肪酸是采用游離酸的 形式存在。在某些實施方式中，所述組合物中至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、 至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少98 %、甚至至少99 %的總多不飽和脂肪酸是以游離酸 的形式存在。
[0141] 在典型的實施方式中，所述組合物包含不大于約3.0% (a/a)的飽和脂肪酸、和 不大于約5.0% (a/a)的單不飽和脂肪酸。在各種實施方式中，所述組合物包含不大于約 3.0% (m/m)的飽和脂肪酸、和不大于約5.0% (m/m)的單不飽和脂肪酸。
[0142] 在典型的實施方式中，所述組合物有用地還包含抗氧化劑。在某些實施方式中，抗 氧化劑是丁基羥基苯甲醚（BHA)。在一些實施方式中，抗氧化劑是α-生育酚。在一些實施 方式中，α -生育酚是以約〇. 20%至0. 40% (m/m)的量而存在。在各種實施方式中，α -生 育酚是以約0.25%至約0.35% (m/m)的量而存在。在【具體實施方式】中，α-生育酚是以約 0.27 %至約0.33% (m/m)的量而存在。
[0143] 在典型的實施方式中，所述組合物包含不大于約0. Ippm的氨基甲酸乙酯。在一些 實施方式中，所述組合物包含不大于〇. Ippm的氨基甲酸乙酯。在各種實施方式中，所述組 合物包含小于0. Ippm的氨基甲酸乙酯。 5. 2. 2其他實施方式
[0144] 在某些其他實施方式中，以所述組合物中所有脂肪酸的氣相色譜的面積的百分比 計算，所述組合物以約45. 0% -約65. 0% (a/a)的量含有EPA，。在某些實施方式中，EPA 是以約50. 0%至約60. 0% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，EPA是以約52. 0%至約 58.0% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，EPA是以約55.0% (a/a)的量而存在。
[0145] 在某些實施方式中，EPA是以約55.0%至約58.4% (a/a)的量而存在。在各種實 施方式中，EPA是以約55. 6%至約57.9% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，EPA是以 約56.7% (a/a)的量而存在。
[0146] 在各種實施方式中，以全部脂肪酸在所述組合物中的質(zhì)量百分率計算，所述組合 物以約50. 0 - 60. 0% (m/m)的量含有EPA。在某些實施方式中，EPA是以約55% (m/m)的 量而存在。
[0147] 在某些其他實施方式中，以所述組合物中的所有脂肪酸的氣相色譜的面積的百 分比計算，所述組合物以約13.0%至約25.0% (a/a)的量含有DHA。在某些實施方式中， DHA是以約15. 0%至23. 0% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，DHA是以約17. 0%至 21.0% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，DHA是以約19.0%至約20.0% (a/a)的量 而存在。
[0148] 在某些實施方式中，DHA是以約17. 7%至約22. 2% (a/a)的量而存在。在各種實 施方式中，DHA是以約18. 4%至約21.4% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，DHA是以 約19.9% (a/a)的量而存在。
[0149] 在各種實施方式中，以所有脂肪酸在所述組合物中的質(zhì)量百分率計算，所述組合 物以約15. 0 - 25. 0% (m/m)的量含有DHA。在某些實施方式中，DHA是以約20. 0% (m/m) 的量而存在。
[0150] 在各種其他實施方式中，以所述組合物中所有脂肪酸的氣相色譜的面積的百分比 計算，所述組合物以約67. 0% -約81. 0% (a/a)的總量含有EPA和DHA。在某些實施方式 中，所述組合物包含約69.0 %至約79.0 % (a/a)的總量的EPA和DHA。在各種實施方式中， 所述組合物包含約71. 0% -約77. 0% (a/a)的總量的EPA加 DHA。在某些實施方式中，所 述組合物包含約74. 0% -約75. 0% (a/a)的總量的EPA+DHA。
[0151] 在各種實施方式中，以全部脂肪酸在所述組合物中的質(zhì)量百分率的形式計算，所 述組合物以約70. 0-80.0% (m/m)的總量含有EPA+DHA。在某些實施方式中，所述組合物包 含約 75. 0% (m/m)的 EPA 加 DHA。
[0152] 在還包含α -亞麻酸（C18:3n_3)的其他實施方式中，α -亞麻酸是以約〇. 07%至 約1.10% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，α-亞麻酸是以約0.24%至約0.91% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，α-亞麻酸是以約0.40%至約0.80% (a/a)的量 而存在。在某些實施方式中，α-亞麻酸是以約0.50%至約0.600% (a/a)的量而存在。
[0153] 在還包含十八碳四烯酸（C18:4n_3)的其他那些實施方式，十八碳四烯酸是以約 0.01%-約7.90% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，十八碳四烯酸是以約0.25%-約 6.40% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，十八碳四烯酸是以約1.70%-約4. 90% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中，十八碳四烯酸是以約3.25% (a/a)的量而存在。
[0154] 在還包含二十碳三烯酸（C20:3n_3)的其他那些實施方式中，二十碳三烯酸是 以約0.75%-約3.50% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，二十碳三烯酸是以約 1.20%-約3.00% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，二十碳三烯酸是以約1.60%-約 2.60% (a/a)量而存在。在某些實施方式中，二十碳三烯酸是以約2.10% (a/a)的量而存 在。
[0155] 在還包含二十碳四烯酸（C20:4n_3)的其他那些實施方式中，二十碳四烯酸是 以約0.01%-約0.40% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，二十碳四烯酸是以約 0.01%-約0.30% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，二十碳四烯酸是以約0.03%-約 0.22% (a/a)的而存在量。在一些實施方式中，二十碳四烯酸是以約0.12% (a/a)的量而 存在。
[0156] 在還包含二i^一碳五烯酸（C21:5n_3)的其他實施方式中，二i^一碳五烯酸 是以約0. 01 %-4. 10% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，二^^一碳五烯酸是以 約0.01% -約3.20% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中，二^^一碳五烯酸是以約 0. 60% -約2. 35% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，二^^一碳五烯酸是以約1. 50% (a/a)的量而存在。
[0157] 在各種其他實施方式中，DPA是以約0.90% -約7. 60% (a/a)的量而存在。在多 種實施方式中，DPA是以約2.00%-約6. 50% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，DPA 是以約3. 10%-5.40% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，DPA是以約4. 25% (a/a) 的量而存在。
[0158] 在各種其他實施方式中，DPA是以約2. 13% -約8. 48% (a/a)的量而存在。在某 些實施方式中，DPA是以約3. 19%-約7. 42% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，DPA 是以約4. 25%-約6. 37% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，DPA是以約5.31% (a/ a)的量而存在。
[0159] 在各種實施方式中，總Ω -3脂肪酸構(gòu)成約80. 0-約95% (m/m)的所述藥物組合物 中的全部脂肪酸。
[0160] 在包含DGLA的其他實施方式中，以所述組合物中所有脂肪酸的氣相色譜的面積 百分比計算，DGLA是以約0.01%至約4.40% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，DGLA 是以約0.01%至約3.30% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，DGLA是以約0.01%至 約2.20% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，DGLA是以約1.10% (a/a)的量而存在。
[0161] 在一些實施方式中，DGLA是以約0.28%至約0.61% (a/a)的量而存在。在某些 實施方式中，DGLA是以約0.33%至約0.56% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，DGLA 是以約0.44% (a/a)的量而存在。
[0162] 在包含AA的其他實施方式中，AA是以約0.01%至約6.90% (a/a)的量而存在， 該量是以所述組合物中所有脂肪酸的氣相色譜的面積百分比的形式進(jìn)行計算。在各種實施 方式中，AA是以約0.01%至約5.40% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，AA是以約 0.70%至約3.80% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，AA是以約2.25% (a/a)的量 而存在。
[0163] 在各種實施方式中，AA是以約1.41%至約4.87% (a/a)的量而存在。在某些實 施方式中，AA是以約1.99%至約4.30% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，AA是以約 2. 57%至約3.72% (a/a)的量而存在。
[0164] 在各種實施方式中，所述組合物以不大于約4.5% (a/a)的量含有AA。在一些實 施方式中，所述組合物以不大于約3. 14% (a/a)的量含有AA。
[0165] 在還包含亞油酸（C18:2n_6)的其他那些實施方式中，亞油酸是以約0. 25%至約 1.30% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，亞油酸是以約0.40%至約1.20% (a/a)的 量而存在。在各種實施方式中，亞油酸是以約0.60%至約0.95% (a/a)的量而存在。在具 體實施方式中，亞油酸是以約0.80% (a/a)的量而存在。
[0166] 在還包含Y-亞麻酸（C18:3n_6)的其他實施方式中，Y-亞麻酸是以約0. 01%至 約0.65% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，Y-亞麻酸是以約0.03%至約0.51% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，Y-亞麻酸是以約0.15%至約0.40% (a/a)的量 而存在。在數(shù)個實施方式中，Y-亞麻酸是以約0.27% (a/a)的量而存在。
[0167] 在還包含二十碳二烯酸（C20:2n_6)的其他那些實施方式中，二十碳二烯酸是以 約0.01%至約0.30(a/a)的量而存在。在各種實施方式中，二十碳二烯酸是以約0.04%至 約0.24% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，二十碳二烯酸是以約0.09%至約0.20% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，二十碳二烯酸是以約0.14% (a/a)的量而存在。
[0168] 在還包含二十二碳五烯酸（C22:5n_6)的其他那些實施方式中，二十二碳五烯酸 是以約0. 01%-0. 95% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，二十二碳五烯酸（C22:5n-6) 是以約0.01 % -約1.05% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，二十二碳五烯酸 (C22:5n-6)是以約0. 05-約0. 71% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，二十二碳五烯 酸（C22:5n-6)是以約0. 01-約0. 48% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中，二十二碳五 烯酸（C22:5n-6)是以約0.24% (a/a)的量而存在。
[0169] 在一些實施方式中，二十二碳五烯酸（C22:5n_6)是以約0. 01%至約1. 19% (a/a) 的量而存在。在某些實施方式中，二十二碳五烯酸（C22:5n-6)是以約0.16%至約0.98% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中，二十二碳五烯酸（C22:5n_6)是以約0. 57% (a/a) 的量而存在。
[0170] 在某些實施方式中，所述組合物包含不大于約10. 0% (a/a)的總Ω-6脂肪酸。
[0171] 在這些其他實施方式中的典型實施方式中，所述組合物包含不大于約3.0% (a/ a)的飽和脂肪酸、不大于約5.0% (a/a)的單不飽和脂肪酸、和不大于約0. Ippm的氨基甲 酸乙酯。在一些實施方式中，所述組合物包含不大于0. Ippm的氨基甲酸乙酯。在各種實施 方式中，所述組合物包含小于〇. Ippm的氨基甲酸乙酯。 5. 3單位劑型
[0172] 在另一方面，將上面部分5. 2中描述的富含DPA的采用游離酸形式的Q-3PUFA的 藥物或營養(yǎng)食品組合物有用地封裝在用于口服給藥的單位劑型中。
[0173] 在【具體實施方式】中，劑型是膠囊。在某些實施方式中，劑型是明膠膠囊。在具體實 施方式中，明膠膠囊是硬明膠膠囊。在其他實施方式中，劑型是軟明膠膠囊。
[0174] 在各種實施方式中，膠囊包含A型明膠。在一些實施方式中，膠囊包含A型和B型 明膠兩者。用于生產(chǎn)A型或B型明膠的膠原的來源包括但不限于牛、豬和魚。
[0175] 在各種實施方式中，膠囊是軟明膠膠囊，該膠囊包含足夠的A型明膠使得在40°C 下貯存至少3個月后膠囊在純化水中于37°C在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩解。在某些實 施方式中，膠囊是軟明膠膠囊，該膠囊包含足夠的豬A型明膠使得在40°C下貯存6個月后膠 囊在純化水中于37°C在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩解。在某些實施方式中，膠囊是軟明膠 膠囊，該膠囊包含充分的豬A型明膠使得在40°C下貯存12個月后膠囊在純化水中于37°C 在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩解。
[0176] 在各種實施方式中，膠囊是軟明膠膠囊，該膠囊包含足夠的豬A型明膠使得在 30°C下貯存至少3個月后該膠囊在純化水中于37°C在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩解。在 某些實施方式中，膠囊是軟明膠膠囊，該膠囊包含足夠的豬A型明膠使得在30°C下貯存6個 月后膠囊在純化水中于37°C在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩解。在一些實施方式中，膠囊是 軟明膠膠囊，該膠囊包含足夠的豬A型明膠使得在30°C下貯存12個月后膠囊在純化水中于 37°C在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩解。
[0177] 在某些實施方式中，膠囊是軟明膠膠囊，該膠囊包含豬A型明膠和B型明膠的混 合物。在各種此類實施方式中，至少1%、2%、3%、4%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、 40%、甚至至少約50% (w/w)的明膠是豬A型明膠。在所選擇的實施方式中，至少約55%、 60%、65%、70%、75% (w/w)的明膠是豬A型明膠。在【具體實施方式】中，至少80%、85%、 90%、甚至95% (w/w)的明膠是豬A型明膠。
[0178] 在各種實施方式中，膠囊是軟明膠膠囊，其中明膠基本上是由豬A型明膠構(gòu)成。
[0179] 在一些實施方式中，膠囊是還原的交聯(lián)明膠膠囊，例如美國專利7, 485, 323中所 描述的，該專利的全部內(nèi)容以參考的方式并入本文中。
[0180] 在某些實施方式中，膠囊包含琥珀酰明膠。
[0181] 在多種實施方式中，膠囊是由并非動物副產(chǎn)品的物質(zhì)制成，例如瓊脂、角叉菜聚 糖、果膠、魔芋、瓜爾膠、食物淀粉、改性玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、木薯淀粉。可以用于制造可 用于本文中所描述口服單位劑型的膠囊的非動物來源材料描述于美國專利2011/0117180 中，該專利的內(nèi)容以參考的方式并入本文中。在一些實施方式中，使用Vegic aps56膠囊 (Catalent) 〇
[0182] 在某些膠囊狀口服單位劑型的實施方式中，膠囊未被包衣。
[0183] 在其他膠囊狀口服單位劑型的實施方式中，膠囊被包衣。
[0184] 在某些包衣膠囊的實施方式中，以時間依賴性方式釋放所述脂肪酸組合物。在各 種實施方式中，在攝入后至少30分鐘內(nèi)沒有PUFA組合物的大量釋放。在某些實施方式中， 當(dāng)進(jìn)行體外釋放測試時，至少在30分鐘內(nèi)沒有PUFA組合物的大量釋放。在某些實施方式 中，當(dāng)進(jìn)行體外測試時，不大于約20%的PUFA組合物在前30分鐘內(nèi)被釋放。在所選擇的實 施方式中，當(dāng)進(jìn)行體外測試時，不大于約25 %、30 %、甚至不大于約35 %的PUFA組合物在前 30分鐘內(nèi)被釋放。在【具體實施方式】中，依照由Bharat Mehta于2013年1月4日提交的名 稱為"用于Ω-3多不飽和脂肪酸的釋放測試方法"的臨時專利申請61/749, 124中所描述 的步驟對體外釋放性能進(jìn)行評估，該專利申請的全部公開內(nèi)容以參考的方式并入本文中。
[0185] 在【具體實施方式】中，到攝入后約60分鐘時大量的PUFA組合物被釋放。在某些實 施方式中，當(dāng)進(jìn)行體外測試時，到約60分鐘時大量的PUFA組合物被釋放。在所選擇的實施 方式中，當(dāng)進(jìn)行體外測試時，到約60分鐘時至少約40%的PUFA組合物被釋放。在各種實施 方式中，當(dāng)進(jìn)行體外測試時，到約60分鐘時至少約45 %、50 %、55 %、60 %、甚至至少約65 % 的PUFA組合物被釋放。在【具體實施方式】中，依照由Mehta于2013年1月4日提交的題目 為" Ω-3多不飽和脂肪酸的釋放測試的方法"的臨時專利申請61/749, 124中所描述的步驟 對體外釋放性能進(jìn)行評估，該專利申請的全部公開內(nèi)容以參考的方式并入本文中。
[0186] 在某些實施方式中，以如美國專利5, 792, 795和5, 948, 818中所描述的方式將 膠囊包衣，這些專利的公開內(nèi)容以參考的方式并入本文中。在各種包衣的實施方式中， 包衣材料是聚（丙烯酸乙酯-丙烯酸甲酯）共聚物。在一些實施方式中，包衣材料是 EudragitNE30_D (Evonik Industries AG),該材料具有約 800, 000 的平均分子量。
[0187] 在其他包衣膠囊的實施方式中，將膠囊用腸溶包衣材料進(jìn)行包衣，該包衣材料防 止膠囊在胃中溶解或崩解但在小腸中所遇到的PH值下溶解。
[0188] 在各種實施方式中，口服單位劑型含有約IOOmg至約2000mg的PUFA組合物。在一 些實施方式中，口服劑型含有約250mg的PUFA組合物。在一些實施方式中，口服劑型含有 約500mg的PUFA組合物。在某些實施方式中，口服劑型含有約750mg的PUFA組合物。在 一些實施方式中，口服劑型含有約IOOOmg的PUFA組合物。在其他實施方式中，口服進(jìn)行含 有約1500mg的PUFA組合物。在某些實施方式中，單位劑型含有在IOOmg和2000mg之間的 非整數(shù)的重量的PUFA組合物。 5. 4給藥套件
[0189] 在另一方面，可將如上所述的多個單位劑型有用地共同封裝在一個給藥套件中以 提高易用性和患者依從性。
[0190] 在某些實施方式中，給藥套件是藥瓶。在其他實施方式中，將多個劑型封裝在泡罩 包裝中，任選地可將多個泡罩包裝共同封裝在藥盒或其他殼套（enclosure)中。通常，無論 是否在一個藥瓶或者一個或多個泡罩包裝中，多個單位劑型足夠用于30天、60天、或90天 的給藥。因此，在所選擇的實施方式中，單位劑型是含有大約1克的如上所述的藥物組合物 的膠囊，給藥套件中包含30、60、90、120、150、180、240、270、或300粒這種膠囊。
[0191] 在各種實施方式中，在惰性氣體（例如氮?dú)饣蛳∮袣怏w）中將多個單位劑型進(jìn)行 封裝，或者在真空中進(jìn)行封裝。 5. 5治療的方法
[0192] 在另一方面，提供治療的方法。 5. 5. 1嚴(yán)重甘油三酯血癥（>500mg/dL)的治療
[0193] 在第一系列的治療實施方式中，提供治療嚴(yán)重高甘油三酯血癥的方法。
[0194] 這些方法包括：以足以將血清或血漿甘油三酯水平降低到低于治療前水平的量和 持續(xù)時間，向具有> 500mg/dL的治療前血清或血漿甘油三酯水平的患者口服給予上面部 分5. 2中描述的藥物組合物。在典型的實施方式中，以一個或多個的上面部分5. 3中所描 述單位劑型的方式給予各劑量的所述藥物組合物。
[0195] 在各種實施方式中，以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低到比治療前水平低至 少約5%、6%、7%、8%或者至少約9%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施 方式中，以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低到比治療前水平低至少1〇%、11%、12%、 13%、14%、15%、16%、17%、18%或19%的量和持續(xù)時間給予所述組合物。在具體實施方 式中，以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低到比治療前水平低至少約20%的量和持續(xù)時 間給予所述組合物。在各種實施方式中，以將血清或血漿甘油三酯類有效降低至比治療前 水平低至少約25%、30%、35%、40%、45%、甚至至少約50%的量和持續(xù)時間給予所述藥 物組合物。
[0196] 在一系列實施方式中，以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低至少約50mg/dL、 60mg/dL、70mg/dL、80mg/dL、90mg/dL、甚至至少約100mg/dL的量和持續(xù)時間給予所述藥 物組合物。在某些實施方式中，以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低至少約llOmg/dL、 120mg/dL、130mg/dL、140mg/dL、甚至至少約150mg/dL的量和持續(xù)時間給予所述組合物。 在【具體實施方式】中，以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低至少約160mg/dL、170mg/dL、 180mg/dL、甚至至少約190mg/dL或200mg/dL的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0197] 在一些實施方式中，以將非-HDL-C水平有效降低到比治療前水平低至少約1%、 2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、甚至至少約10%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合 物。
[0198] 在各種實施方式中，以將HDL-C水平有效提高到比治療前水平高至少約1%的量 和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以足以將HDL-C增加到比治療前水 平高至少約2%、3%、4%、甚至至少約5%、6%、7%、8%、9%、或10%的量和持續(xù)時間給予 所述藥物組合物。
[0199] 在某些實施方式中，以將總膽固醇：HDL_C(TC/HDL)比有效降低到比治療前水平 低至少約1%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以足以將TC/HDL 比降低到比治療前水平低至少約2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、甚至至少約9%或至少 約10%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0200] 在一些實施方式中，以將VLDL-c水平有效降低到比治療前水平低至少約5%、 6%、7%、8%、9%、或者至少約10%的量和持續(xù)時間而給予所述藥物組合物。在某些實施 方式中，以足以將VLDL-c水平降低至比治療前水平低至少約11%、12%、13%、14%、15%、 16%、17%、甚至至少約18%、19%、或20%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在具體 實施方式中，以足以將VLDL-c水平降低到比治療前水平低至少約21%、22%、23%、24%、 甚至至少約25%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0201] 在多種實施方式中，以有效降低ApoC III水平的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合 物。在某些實施方式中，以足以將ApoCIII水平降低到比治療前水平低至少約H213%、 4%、5%、6%、7%、甚至至少約8%、9%或10%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0202] 在一些實施方式中，以將血漿EPA水平有效提高到比治療前水平高至少100 %的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以將血漿EPA水平比治療前水平 有效提高至少約200%、250%、300%、甚至至少約350%、400%、450%、或至少約500%的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在所選擇的實施方式中，以將血漿EPA水平比治療前 水平有效提高至少約550%、600%、650%、甚至至少約700%的時間和量給予所述藥物組 合物。
[0203] 在各種實施方式中，以將血漿DHA水平比治療前水平有效提高至少約50%的量和 持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在【具體實施方式】中，以將血漿DHA水平比治療前水平有效 提高至少約55 %、60 %、65 %、70 %、甚至至少約75 %、80 %、85 %、或90 %的量和持續(xù)時間 給予所述藥物組合物。
[0204] 在一系列實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前水平有效提高至少約50%的量 和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前水平有 效提高至少約 55%、60%、65%、70%、75%，甚至至少約80%、85%、90%、95%、或100%的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在所選擇的實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前 水平有效提高至少約110%、120%、甚至至少約125%量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0205] 在一系列實施方式中，以將血漿中花生四烯酸（AA)濃度有效降低到比治療前水 平低至少約5%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以將血漿中的 花生四烯酸（AA)濃度有效降低到比治療前水平低至少約6%、7%、8%、9%、10%、甚至至 少約 11%，12%、13%、14%、甚至至少約15%、16%、17%、18%、19%、20%、或21%、22%、 23 %、24%、甚至至少約25 %的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0206] 在某些實施方式中，以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約25 μ g/mL量和持 續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以足以將血漿AA水平降低至少約50 μ g/ mL、55 μ g/mL、60 μ g/mL、65 μ g/mL、甚至至少約 70 μ g/mL、75 μ g/mL、80 μ g/mL、85 μ g/mL、 90 μ g/mL、甚至至少約95 μ g/mL或100 μ g/mL的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0207] 在某些實施方式中，有效量為至少約2g/日。在各種實施方式中，有效量為至少約 3g/日。在【具體實施方式】中，有效量為至少約4g/日。在典型的實施方式中，有效量為約2g/ 日。在某些實施方式中，有效量為約4g/日。
[0208] 在典型的實施方式中，將所述藥物組合物給藥至少30天。在某些實施方式中，將 所述藥物組合物給藥至少60天。在【具體實施方式】中，將所述藥物組合物給藥至少90天、120 天、180天、240天、或至少360天。在某些實施方式中，不確定地給予所述藥物組合物。
[0209] 在一些實施方式中，每天給予所述藥物組合物。在其他實施方式中，每隔一天給予 所述藥物組合物。
[0210] 在【具體實施方式】中，以單一每日劑量給予每日劑量的藥物組合物。在其他實施方 式中，以分劑量給予所述藥物組合物，并且將每日劑量劃分為一天中的二次給藥、三次給 藥、或者甚至四次給藥。
[0211] 在某些實施方式中，與食物一起給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，與低脂 肪膳食一起給予所述藥物組合物。在其他實施方式中，在無食物的情況下給予所述藥物組 合物。在某些實施方式中，在禁食狀態(tài)下給予所述藥物組合物。
[0212] 在某些實施方式中，所述方法還包括給予他汀類。在【具體實施方式】中，他汀類藥 物是選自以下：普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、羅蘇伐他汀、替伐他 汀、和匹伐他汀。 5. 5. 2高甘油三酯血癥的治療（200-500mg/dL)
[0213] 在另一系列治療實施方式中，提供治療具有約200mg/dL至約500mg/dL的治療前 血清或血漿甘油三酯水平的患者的方法。在某些實施方式中，這些患者已接受他汀類治療； 在這些患者中，治療前血清或血漿甘油三酯水平是在上面部分5. 2中所描述藥物組合物的 給藥之前在他汀類治療期間所測量的水平。
[0214] 所述方法包括口服給予有效量的他汀類，并且進(jìn)一步以足以將血清或血漿甘油三 酯水平降低到低于用本文中所描述藥物組合物治療前測量水平的量和持續(xù)時間口服給予 本文部分5. 2中描述的藥物組合物。在相同的給藥計劃中或者甚至在同一天，部分5. 2中 描述的藥物組合物和他汀類藥物無需在相同時間給藥?？梢栽诨颊咄瑫r從這兩種藥物獲得 治療益處的充分接近的時間，給予這兩種藥物。
[0215] 在某些實施方式中，以足以將血清或血漿甘油三酯水平降低到比治療前水平低至 少約5%的量和持續(xù)時間給予部分5. 2中所描述的藥物組合物。在各種實施方式中，以足以 將血清或血漿甘油三酯水平降低到比治療前水平低至少約6%、7%、8%、9%、10%、11%、 12%、13%、14%、15%、甚至至少約16%、17%、18%、19%、或至少約20%的量和持續(xù)時間 給予所述藥物組合物。
[0216] 在一些實施方式中，以足以將非-HDL-膽固醇降低到比治療前水平低至少約1%、 至少約2 %、至少約3 %、4%、5 %、甚至至少約7 %、8 %、9 %、或至少約10 %的量和持續(xù)時間 給予本文部分5. 2中所描述的藥物組合物。
[0217] 在一系列實施方式中，以足以將HDL-c水平提高到至少比治療前水平高約1%、 2%、3%、或更高的量和持續(xù)時間給予本文部分5. 2中所描述的藥物組合物。
[0218] 在一些實施方式中，以將血漿EPA水平比治療前水平有效提高至少100%的量和 持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以將血漿EPA水平比治療前水平有效 提高至少約200%、250%、300%、甚至至少約350%、400%、450%、或至少約500%的量和 持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在所選擇的實施方式中，以將血漿EPA水平比治療前水平 有效提高至少約550%、600%、650%、甚至至少約700%的時間和量給予所述藥物組合物。
[0219] 在各種實施方式中，以將血漿DHA水平有效提高到比治療前水平高至少約50%的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在【具體實施方式】中，以將血漿DHA水平比治療前水平 有效提高至少約55%、60%、65%、70%、甚至至少約75%、80%、85%、或90%量和持續(xù)時 間給予所述藥物組合物。
[0220] 在一系列實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前水平有效提高至少約50%的量 和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前水平有 效提高至少約 55%、60%、65%、70%、75%、甚至至少約80%、85%、90%、95%、或100%的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在所選擇的實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前 水平有效提高至少約110%、120%、甚至至少約125%量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0221] 在一系列實施方式中，以將血漿中的花生四烯酸（AA)濃度有效降低到比治療前 水平低至少約5%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以將血漿中的 花生四烯酸（AA)濃度有效降低到比治療前水平低至少約6%、7%、8%、9%、10%、甚至至 少約 11%、12%、13%、14%、甚至至少約15%、16%、17%、18%、19%、20%、或21%、22%、 23%、24%、甚至至少約25%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0222] 在某些實施方式中，以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約25 μ g/mL的量 和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以足以將血漿AA水平降低至少 約 50μ g/mL、55y g/mL、60y g/mL、65y g/mL、甚至至少約 70μ g/mL、75y g/mL、80y g/mL、 85 μ g/mL、90 μ g/mL、甚至至少約95 μ g/mL或100 μ g/mL的量和持續(xù)時間給予所述藥物組 合物。
[0223] 在各種實施方式中，在如上面部分5. 3中所描述的單位劑型中給予文中部分5. 2 中描述的藥物組合物。
[0224] 在各種實施方式中，以至少約Ig/日的量給予所述藥物組合物。在一些實施方式 中，以至少約2g/日的量給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以至少約3g/日的量給 予所述藥物組合物。在【具體實施方式】中，以至少約4g/日的量給予所述藥物組合物。在典 型的實施方式中，以約2g/日的量給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以約3g/日或 約4g/日的量給予所述藥物組合物。 5. 5. 3增加血漿EPA: AA比的治療
[0225] 還提供用于無論患者治療前血漿甘油三酯水平如何均可提高EPA:AA比的方法。 所述方法包括：以足以將患者的EPA:AA比提高到至少約0. 25的量和持續(xù)時間，向具有低于 約0. 25的EPA = AA比的患者給予本文部分5. 2中描述的藥物組合物。在一些實施方式中， 以足以將患者的EPA = AA比提高到至少約0. 3、至少約0. 35、至少約0. 40、至少約0. 45、至少 約0. 50、甚至至少約0. 55、0. 60、0. 61、0. 62、0. 63、0. 64、或0. 65的量和持續(xù)時間給予所述 藥物組合物。
[0226] 在某些實施方式中，所述方法包括以將血漿EPA水平有效提高到比治療前水平高 至少100%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以將血漿EPA水平比 治療前水平有效提高至少約200%、250%、300%、甚至至少約350%、400%、450%、或至少 約500%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在所選擇的實施方式中，以將血漿EPA水平 比治療前水平有效提高至少約550%、600%、650%、甚至至少約700%的時間和量給予所 述藥物組合物。
[0227] 在各種實施方式中，以將血漿DHA水平比治療前水平有效提高至少約50%的量和 持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在【具體實施方式】中，以將血漿DHA水平比治療前水平有效 提高至少約55 %、60 %、65 %、70 %、甚至至少約75 %、80 %、85 %、或90 %的量和持續(xù)時間 給予所述藥物組合物。
[0228] 在一系列實施方式中，以將血漿DPA水平有效提高到比治療前水平高至少約50% 的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以將血漿DPA水平比治療前 水平有效提高至少約55%、60%、65%、70%、75%、甚至至少約80%、85%、90%、95%、或 100%量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在所選擇的實施方式中，以將血漿DPA水平比治 療前水平提高至少約110%、120%、甚至至少約125%量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0229] 在一系列實施方式中，以將血漿中的花生四烯酸（AA)濃度有效降低到比治療前 水平低至少約5%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以將血漿中的 花生四烯酸（AA)濃度有效降低到比治療前水平低至少約6%、7%、8%、9%、10%、甚至至 少約 11%、12%、13%、14%、甚至至少約15%、16%、17%、18%、19%、20%、或21%、22%、 23%、24%、甚至至少約25%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
[0230] 在某些實施方式中，以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約25 μ g/mL的量 和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。在一些實施方式中，以足以將血漿AA水平降低至少 約 50μ g/mL、55y g/mL、60y g/mL、65y g/mL、甚至至少約 70μ g/mL、75y g/mL、80y g/mL、 85 μ g/mL、90 μ g/mL、甚至至少約95 μ g/mL或100 μ g/mL的量和持續(xù)時間給予所述藥物組 合物。
[0231] 在各種實施方式中，在如上面部分5. 3中描述的單位劑型中給予本文部分5. 2中 描述的藥物組合物。
[0232] 在各種實施方式中，以至少約Ig/日的量給予所述藥物組合物。在一些實施方式 中，以至少約2g/日的量給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以至少約3g/日的量給 予所述藥物組合物。在【具體實施方式】中，以至少約4g/日的量給予所述藥物組合物。在典 型的實施方式中，以約2g/日的量給予所述藥物組合物。在某些實施方式中，以約3g/日或 約4g/日的量給予所述藥物組合物。 5. 5. 4.用于降低血清或血漿ApoC III水平的治療
[0233] 也提供用于無論患者治療前血漿甘油三酯水平如何提高患者血清或血漿ApoC III 水平的方法。這些方法包括：以足以降低患者血清或血漿ApoC III水平的量和持續(xù)時間，向 需要較低ApoC III水平的患者給予本文部分5. 2中描述的藥物組合物。在典型的實施方式 中，患者具有患心血管疾病的危險。
[0234] 在某些實施方式中，以足以將ApoC III水平降低到比治療前水平低至少約1%、 2%、3%、4%、5%、6%、7%、甚至至少約8%、9%或10%的量和持續(xù)時間給予所述藥物組 合物。 5. 5. 5.其他治療方法
[0235] 在另一方面，將本文中描述的藥物組合物用于治療其他病癥，包括非酒精性脂肪 肝炎（NASH)、商脂蛋白血癥（包括III型1?脂蛋白血癥）、和代謝綜合癥中的一種或多種疾 病。
[0236] 在某些實施方式中，將所述藥物組合物用于降低對血小板聚集抑制劑（例如 Plavix)的耐藥性，包括使用于美國專利申請13/620, 312中所描述方法的血小板聚集抑制 齊U，該專利的全部公開內(nèi)容以參考的方式并入本文中。 5. 6方法
[0237] 在另一方面，提供一種用于將魚油精制成包含采用游離酸形式的PUFA的藥物組 合物，尤其是用于將魚油精制成本文部分5. 2中所描述藥物組合物的改進(jìn)方法。 5.6. 1中間原料的制備
[0238] 中間原料是通過利用在本領(lǐng)域眾所周知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)對從魚（例如來自鍉科、鯡科 和鯖科的魚）中所獲得魚體油進(jìn)行酯交換而制備，其中對方法參數(shù)進(jìn)行調(diào)整以便獲得落在 下面部分5. 6. 2中所描述容限內(nèi)的組成。
[0239] 合適的標(biāo)準(zhǔn)方法步驟描述于例如美國專利5, 656, 667、5, 719, 302、5, 945, 318、 6, 204, 401、6, 518, 049、6, 528, 669、7, 491，522、7, 550, 613、7, 678, 930、7, 718, 698、 7,732,488 以及美國專利 5, 472, 705、5, 750, 572、5, 776, 978、5, 869, 714、7, 541，480、 7, 553, 870、和7, 619, 002,這些專利的內(nèi)容以參考的方式并入本文中。
[0240] 在一個示例性方法中，從魚（例如鍉魚、沙丁魚、鯖魚和鯡魚）中提取粗甘油三酯 油。然后對該粗甘油三酯油進(jìn)行堿精制，例如使用氫氧化鈉，并進(jìn)行除臭、研磨和干燥。然 后通過酯交換將PUFA轉(zhuǎn)變成酯類，例如甲基酯類或乙基酯類。可以例如通過在乙醇和乙醇 鈉存在下的乙醇解反應(yīng)來進(jìn)行酯交換，以產(chǎn)生乙基酯類。在酯交換之后至少是一次通常多 次的蒸餾。
[0241] 在另一個示例性方法中，對甘油三酯油進(jìn)行堿精制和除臭，與乙醇進(jìn)行酯交換，例 如通過在乙醇和乙醇鈉存在下的乙醇解反應(yīng)，然后經(jīng)過一次或多次的蒸餾。
[0242] 圖2給出了用于生產(chǎn)中間原料的示例性方法的流程圖。在此方法中，將魚在水中 煮并且將所形成的液體與固體的混合物過濾，再將液體部分離心以去除水相。將從前面的 步驟余留下的油組分用堿處理以中和任何存在的游離脂肪酸，接著進(jìn)行水洗。此后，例如通 過蒸餾對采用甘油三酯形式的堿精制魚油進(jìn)行除臭，并且減少環(huán)境污染物。利用與乙醇的 反應(yīng)，通過使用乙醇鈉進(jìn)行催化，將干燥的除臭魚油轉(zhuǎn)變成乙基酯形式。反應(yīng)結(jié)束后，通過 蒸餾去除過量的乙醇，將乙基酯類用檸檬酸溶液洗滌然后用水洗滌。在此示例性方法中，將 乙基酯類蒸餾以獲得要求濃度的用作中間原料的EPA乙基酯類（EPA-EE)和DHA乙基酯類 (DHA-EE)。在一些實施方式中，實施多次蒸餾?；谳斎胍一ソM合物的組成來調(diào)整所采用 的提取條件，從而獲得要求濃度的用作中間原料的EPA-EE和DHA-EE，正如下面部分5. 6. 2 中的詳細(xì)描述。
[0243] 這些方法步驟的替代步驟是眾所周知的，并且只要所形成中間原料的組成落在下 面部分5. 6. 2中定義的容現(xiàn)內(nèi)便可視情況而采用。 5. 6. 2中間原料組合物 5. 6. 2. 1典型實施方式
[0244] 中間原料組合物包含多種的Ω -3PUFA種類，各種類基本上采用乙基酯的形式存 在。
[0245] 中間原料組合物包含EPA、DHA和DPA，各種類基本上采用乙基酯的形式。
[0246] 在各種實施方式中，中間原料組合物以分別落在表9中所列舉平均值的-3SD至 +3SD范圍內(nèi)的量含有EPA乙基酯類（EPA-EE)、DHA-EE、和DPA-EE，該量是以該組合物中所 有脂肪酸乙基酯類的氣相色譜的面積百分比方式計算。在某些實施方式中，每個EPA-EE、 DHA-EE和DPA-EE分別落在所列舉平均值的-2SD至+2SD內(nèi)。在某些實施方式中，每個 EPA-EE、DHA-EE和DPA-EE分別落在所列舉平均值的-ISD至+ISD內(nèi)。在某些實施方式中， 中間原料組合物在由表8中所描述批次中的各自最小和最大面積百分比所設(shè)定范圍內(nèi)的 量含有 EPA-EE、DHA-EE 和 DPA-EE。
[0247] 在某些實施方式中，所述組合物還包含一種或多種Ω-3多不飽和脂肪酸，各自 基本上采用乙基酯的形式，選自以下：α -亞麻酸（C18:3n-3)、十八碳四烯酸（C18:4n-3)、 二十碳三烯酸（C20:3n-3)、二十碳四烯酸（C20:4n-3)、和二i^一碳五烯酸（C21: 5n_3)。在 各種實施方式中，一種或多種其他Ω-3-EE種類，若存在，是以分別落在表9中所列舉平均 值的-3SD至+3SD范圍內(nèi)的量而存在，該量是以組成中所有脂肪酸乙基酯類的氣相色譜的 面積百分比的形式而計算。在某些實施方式中，各種類分別落在所列舉平均值的-2SD至 +2SD內(nèi)。在某些實施方式中，各種類分別落在所列舉平均值的-ISD至+ISD的范圍內(nèi)。在 某些實施方式中，一種或多種其他Ω-3-ΕΕ種類，若存在，是以落在由表8中所描述批次中 的各自最小和最大面積百分比所設(shè)定范圍內(nèi)的量而存在，該量是以組合物中所有脂肪酸乙 基酯類的氣相色譜的面積百分比的形式而計算。
[0248] 在某些實施方式中，中間原料組合物還包含至少一種Q-6PUFA種類。在各種實 施方式中，所述組合物包含選自以下組的一種或多種Ω-6多不飽和脂肪酸的乙基酯類：亞 油酸（C18:2n-6)、Y-亞麻酸（C18:3n-6)，二十碳二烯酸（C20:3n-6)、二高-Y-亞麻酸 ("DGLA"）（C20:3n-6)、花生四烯酸（C20:4n-6) ( "AA"）、和 DPA(C22:5n-6)。各 Q-6PUFA 種類基本上是以乙基酯形式存在。
[0249] 在各種實施方式中，Ω-6-ΕΕ的一種或多種種類，若存在，是以分別落在表9中所 列舉平均值的-3SD至+3SD范圍內(nèi)的量而存在，該量是以組合物中所有脂肪酸乙基酯類的 氣相色譜的面積百分比的形式進(jìn)行計算。在某些實施方式中，各種類分別落在所列舉平均 值的-2SD至+2SD內(nèi)。在某些實施方式中，各種類分別落在所列舉平均值的-ISD至+ISD 內(nèi)。在某些實施方式中，一種或多種其他的Ω-3-ΕΕ種類，若存在，是以落在由表8中所描 述批次的各自最小和最大面積百分比所設(shè)定的范圍內(nèi)的量而存在，該量是以組合物中所有 脂肪酸乙基酯類的氣相色譜的面積百分比的方式而計算。 5. 6. 2. 2其他實施方式
[0250] 在各種其他實施方式中，中間原料組合物以約45. 0%至約53. 0% (a/a)的量含有 EPA乙基酯類（EPA-EE)，該量是以組合物中所有脂肪酸乙基酯類的氣相色譜的面積百分比 的方式進(jìn)行計算。在某些實施方式中，EPA-EE是以約48. 40%至約50.04% (a/a)的量而 存在。在各種實施方式中，EPA-EE是以約48. 67%至約49. 77% (a/a)的量而存在。在一 些實施方式中，中間原料組合物以約48. 95%至約49.49% (a/a)的量含有EPA-EE。在某些 實施方式中，中間原料組合物以約49. 22% (a/a)的量含有EPA-EE。
[0251] 在各種實施方式中，EPA-EE是以約44. 20% (a/a)至約46. 92% (a/a)的量而存 在。在一些實施方式中，EPA-EE是以約45. 56% (a/a)的量而存在。
[0252] 在各種實施方式中，EPA-EE是以約425_460mg/g的量而存在。
[0253] 在各種其他實施方式中，中間原料組合物以約13. 0%至約20. 0% (a/a)的量含有 DHA乙基酯類（DHA-EE)，該量是以組合物中所有脂肪酸乙基酯類的氣相色譜的面積百分比 的形式而計算。在各種實施方式中，DHA-EE是以約16. 43%至18. 28% (a/a)的量而存在。 在各種實施方式中，中間原料以約16. 74%至約17. 98% (a/a)的量含有DHA-EE。在一些實 施方式中，中間原料組合物以約17. 05%至約17. 67% (a/a)的量含有DHA-EE。在某些實施 方式中，中間原料以約17.4% (a/a)的量含有DHA-EE。
[0254] 在一些實施方式中，中間原料以約14. 77% (a/a)_約17. 87% (a/a)的量含有 DHA。在一些實施方式中，中間原料以約16. 32% (a/a)的量含有DHA。
[0255] 在一些實施方式中，中間原料以150至170mg/g的量含有DHA。
[0256] 在各種其他實施方式中，DPA-EE是以約4. 10%至約6. 74% (a/a)的量而存在。在 一些實施方式中，DPA-EE是以約4. 54%至約6.30% (a/a)的量而存在。在各種實施方式 中，DPA-EE是以約4. 98%至約5.86% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，DPA-EE是以 約5.42% (a/a)的量而存在。
[0257] 在各種實施方式中，DPA-EE是以約0.41 %至約0.70% (a/a)的量而存在。在某 些實施方式中，DPA-EE是以約0.56% (a/a)的量而存在。
[0258] 在各種實施方式中，中間原料組合物還包含花生四烯酸（C20:4n_6)的乙基酯。在 各種實施方式中，AA-EE是以約1.72%至約2.81% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中， 花生四烯酸乙基酯是以約1.9%至約2.63% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，花生 四烯酸乙基酯是以約2. 09%至約2.45% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，花生四烯 酸乙基酯是以約2.27% (a/a)的量而存在。
[0259] 在某些實施方式中，花生四烯酸乙基酯是以不大于3.0% (a/a)的量而存在。在一 些實施方式中，花生四烯酸乙基酯是以不大于4.0% (a/a)的量而存在。
[0260] 在還包含α-亞麻酸乙基酯的中間原料的實施方式中，在某些實施方式中，α-亞 麻酸乙基酯是以約0.3%至約0.45% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，α-亞麻酸 乙基酯是以約0.4% (a/a)的量而存在。
[0261] 在一些實施方式中，α -亞麻酸乙基酯是以約〇· 24% (a/a)至0· 62% (a/a)的量 而存在。
[0262] 在一些實施方式中，α-亞麻酸乙基酯是以約0.43% (a/a)的量而存在。
[0263] 在還包含十八碳四烯酸（C18:4n_3)乙基酯的中間原料的某些實施方式中，十八 碳四烯酸乙基酯是以約0.60%至約2.03% (a/a)的量而存在，該量是以組合物中所有脂肪 酸乙基酯類的氣相色譜的面積百分比的形式而計算。在一些實施方式中，十八碳四烯酸乙 基酯是以約0.84%至約1.80% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中，十八碳四烯酸乙基 酯是以約1. 10%至約1.60% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中，十八碳四烯酸乙基酯 是以約L 32% (a/a)的量而存在。
[0264] 在各種實施方式中，十八碳四烯酸乙基酯是以約0. 64%至約1. 93% (a/a)的量而 存在。在【具體實施方式】中，十八碳四烯酸乙基酯是以約1.28% (a/a)的量而存在。
[0265] 在還包含二十碳三烯酸（C20:3n_3)乙基酯的中間原料的多種實施方式中，二十 碳三烯酸乙基酯是以小于約〇. 1% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，二十碳三烯酸乙 基酯是以小于約0.4% (a/a)的量而存在。
[0266] 在還包含二十碳四烯酸（C20:4n_3)乙基酯的中間原料的實施方式中，在某些實 施方式中二十碳四烯酸乙基酯是以約1.57%至約2.10% (a/a)的量而存在。在一些實施 方式中，二十碳四烯酸乙基酯是以約1.66至約2.02% (a/a)的量而存在。在某些實施方 式中，二十碳四烯酸乙基酯是以1.75至約1.93% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中， 二十碳四烯酸乙基酯是以約1.84% (a/a)的量而存在。
[0267] 在某些實施方式中，二十碳四烯酸乙基酯是以約1.42%至約2.49% (a/a)的量而 存在。在一些實施方式中，二十碳四烯酸乙基酯是以約1.95% (a/a)的量而存在。
[0268] 在還包含二i^一碳五烯酸（C21:5n_3)乙基酯的中間原料的多種實施方式中， 二i^一碳五烯酸乙基酯是以約2. 25%至約2.36% (a/a)的量而存在。在各種實施方式中， 二i^一碳五烯酸乙基酯是以約2. 27%至約2. 34% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中， 二i^一碳五烯酸乙基酯是以約2. 29%至約2. 32% (a/a)的量而存在。在【具體實施方式】中， 二i^一碳五烯酸乙基酯是以約2. 31% (a/a)的量而存在。
[0269] 在一些實施方式中，二i^一碳五烯酸乙基酯是以約1. 42%至約2. 76% (a/a)的量 而存在。在【具體實施方式】中，二i^一碳五烯酸乙基酯是以約2.09% (a/a)的量而存在。
[0270] 在還包含Q-6PUFA即亞油酸（C18:2n-6)乙基酯（亞油酸一 EE)的中間原料的一 系列實施方式中，亞油酸乙基酯是以約0.53%至約0.56% (a/a)的量而存在。在一些實施 方式中，亞油酸乙基酯是以約0.53%至約0.55% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中， 亞油酸乙基酯是以約0.54%至約0.55% (a/a)的量而存在。在某些實施方式中，亞油酸乙 基酯是以約0.54% (a/a)的量而存在。
[0271] 在一些實施方式中，亞油酸乙基酯是以約0. 38%至約0. 83% (a/a)的量而存在。 在某些實施方式中，亞油酸乙基酯是以約0.60% (a/a)的量而存在。
[0272] 在還包含Y-亞麻酸（C18:3n_6)乙基酯U-亞麻酸一EE)的中間原料的實施方 式中，在示例性實施方式中，Y-亞麻酸乙基酯是以小于0.1% (a/a)的量而存在。在還包 含Y-亞麻酸（C18:3n-6)的乙基酯的中間原料的實施方式中，Y-亞麻酸乙基酯是以小于 0.4% (a/a)的量而存在。
[0273] 在還包含二十碳二烯酸（C20:2n_6)乙基酯（二十碳二烯酸一 EE)的中間原料的 實施方式中，在各種示例性實施方式中二十碳二烯酸乙基酯是以約〇. 〇〇%至約〇. 63% (a/ a)的量而存在。在一些實施方式中，二十碳二烯酸乙基酯是以約0.00%至約0.45% (a/a) 的量而存在。在某些實施方式中，二十碳二烯酸乙基酯是以約〇.〇〇%至約0.27% (a/a)的 量而存在。在【具體實施方式】中，二十碳二烯酸乙基酯是以約0.09% (a/a)的量而存在。
[0274] 在某些實施方式中，二十碳二烯酸乙基酯是以約0. 00%至約0. 54% (a/a)的量而 存在。在【具體實施方式】中，二十碳二烯酸乙基酯是以約0.25% (a/a)的量而存在。
[0275] 在還包括二高-Y-亞麻酸（C20:3n-6)乙基酯（DGLA-EE)的中間原料的多個實 施方式中，DGLA-EE是以約0.35%至約0.68% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，二 高-Y-亞麻酸乙基酯是以約0.41 %至約0.63% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中， 二高-Y-亞麻酸乙基酯是以約0.46%至約0.57% (a/a)的量而存在。
[0276] 在一些實施方式中，二高-Y-亞麻酸乙基酯是以約0.26%至約0.55% (a/a)的 量而存在。在一些實施方式中，二高-Y-亞麻酸乙基酯是以約0.40% (a/a)的量而存在。
[0277] 某些其他實施方式還包含采用乙基酯形式的二十二碳五烯酸（C22:5n_6)的中間 原料。在多種這些實施方式中，二十二碳五烯酸-EE是以約0.54%至約0.80% (a/a)的量 而存在。在一些實施方式中，二十二碳五烯酸-EE是以約0.59%至約0.76% (a/a)的量而 存在。在各種實施方式中，二十二碳五烯酸-EE是以約0.63%至約0.72% (a/a)的量而存 在。在【具體實施方式】中，二十二碳五烯酸-EE是以約0.67% (a/a)的量而存在。
[0278] 在一些實施方式中，二十二碳五烯酸（C22:5n-6)_EE是以約1. 45%至約7. 21% (a/a)的量而存在。在一些實施方式中，二十二碳五烯酸（C22:5n-6)-EE是以約4. 33% (a/ a)的量而存在。 5. 6. 3尿素包合
[0279] 具有如上定義組成的中間經(jīng)酯交換的原料進(jìn)行尿素包合。在典型實施方式中，用 于包合的尿素的量落在算法確定的范圍內(nèi)。
[0280] 因此，在另一方面，提供一種用于將魚油精制成包含采用游離酸形式的PUFA的藥 物組合物的改進(jìn)方法、尤其是用于將魚油精制成本文中所描述藥物組合物的改進(jìn)方法。改 進(jìn)包括使在規(guī)定百分率范圍內(nèi)含有各種Ω-3和Q-6PUFA種類的乙基酯類的酯交換魚油 的中間原料經(jīng)歷尿素包合步驟，其中用于包合的尿素的量是在根據(jù)（i)式1(a)、或（ii)根 據(jù)式1(b)、或者（iii)根據(jù)式I (a)和式1(b)兩者，并且將尿素量設(shè)定為在由公式I (a)和 1(b)的結(jié)果所設(shè)定范圍內(nèi)（包括端值）的值，例如其平均值，其中公式如下：
[尿素 ]=F富集-麗*((DHA 目標(biāo)一DHA-EE輸入 VDHA-EEfi^)) (Ia)
[尿素 ]=F 富集-EPA* ((EPA 目標(biāo)一EPA-EE輸入）/EPA-EE輸入）） （Ib)。
[0281] 基于期望的最終組成來選擇DHA和EPA目標(biāo)值。富集因子FSft_DHA和F Sft_EPA可以 是相同或不同的。在一個典型的實施方式中，F(xiàn)Sft_ DHA與FSft_EPA是相同的，具有約100/0. 34 或者約300的值。
[0282] 使用算法確定量的尿素并按照標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)進(jìn)行包合。參見例如美國專利4, 377, 526、 5, 106, 542、5, 243, 046、5, 679, 809、5, 945, 318、6, 528, 669、6, 664, 405、7, 541，480、 7, 709, 668、和8, 003, 813,這些專利的公開內(nèi)容以參考的方式并入本文中。
[0283] 在一個示例性實施方式中，將中間原料與尿素的乙醇溶液混合。于60°C-80°C下 進(jìn)行包合，然后使該混合物冷卻，此后將該混合物過濾或離心以取出尿素包合物。通過蒸饋 去除乙醇，將油用水洗脫數(shù)次。 5. 6. 4.包合后的后處理
[0284] 在取出尿素包合物后，通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)將未包合的PUFA酯類水解成游離脂肪酸。在 水解之前或者之后通過蒸餾將該組合物進(jìn)一步純化，并且利用一種或多種的以下標(biāo)準(zhǔn)技術(shù) 做進(jìn)一步處理：使用活性炭的處理、層析純化、溶劑去除、漂白（例如用漂白粘土）、和超臨 界提取。添加抗氧化劑，例如BHA或α-生育酚。 6. 實施例 6. 1實施例1 :滿足規(guī)格要求的采用游離酸形式的Q-3PUFA組合物的可靠生產(chǎn)需要尿 素包合
[0285] 尿素包合絡(luò)合（包合）是魚油精制中經(jīng)常采用的標(biāo)準(zhǔn)步驟，用以去除飽和及單不 飽和長鏈脂肪酸，因此在所形成組合物中富集期望的長鏈Ω-3多不飽和脂肪酸。盡管長期 應(yīng)用，但（參見例如美國專利4, 377, 526)，和設(shè)計用來表征各種生理化學(xué)參數(shù)對工藝的影 響的特征的研究（參見例如Hayes等人的"Triangular Phase Diagrams To Predict The Fractionation Of Free Fatty Acid Mixtures Via Urea ComplexFormation，'，Separation Sci.Technol.36(l):45_ 58(2001)和 Hayes 的"Purirfication of Free Fatty Acids via Urea Inclusion Compounds，' 〈<功會生月旨類白勺手冊(Handbook of Functional Lipids))) (Taylor &Francis Group) (2005))，尿素包合富集包含 Q-3PUFA 和 Q-6PUFA 兩種類的長 鏈多不飽和脂肪酸的單獨(dú)種類的程度仍然是不可預(yù)測的。尿素包合步驟中此殘余的不可預(yù) 測性、和尿素包合產(chǎn)生不允許水平的氨基甲酸乙酯（這將會必須做進(jìn)一步處理）的可能性， 最初使得傾向于從用于生產(chǎn)符合下面表1中所述規(guī)格的采用游離酸形式的Q-3PUFA的醫(yī) 藥級組合物的工業(yè)規(guī)模精制工藝中省略尿素包合。
【權(quán)利要求】
1. 一種藥物組合物，其包含： 以至少約50% (a/a)的量含有基本上是游離酸形式的EPA ; 以至少約15% (a/a)的量含有基本上是游離酸形式的DHA ; 以至少約1% (a/a)的量含有基本上是游離酸形式的DPA。
2. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中DPA是以至少約2% (a/a)的量存在。
3. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中DPA是以至少約2. 5% (a/a)的量存在。
4. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中DPA是以至少約3% (a/a)的量存在。
5. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中DPA是以至少約3. 5% (a/a)的量存在。
6. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中EPA是以至少約51% (a/a)的量存在。
7. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中EPA是以至少約52% (a/a)的量存在。
8. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中EPA是以至少約53% (a/a)的量存在。
9. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中EPA是以至少約54% (a/a)的量存在。
10. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中DHA是以至少約16% (a/a)的量存在。
11. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中DHA是以至少約17% (a/a)的量存在。
12. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中 EPA是以約55% (a/a)至約56% (a/a)的量存在； DHA是以約19% (a/a)至約20% (a/a)的量存在；和 DPA是以約4% (a/a)至約5% (a/a)的量存在。
13. -種藥物組合物，其包含： 以約50% (m/m)至約60% (m/m)的量，基本上是游離酸形式的EPA ; 以約15% (m/m)至約25% (m/m)的量，基本上是游離酸形式的DHAJP 以不小于約1% (m/m)的量，基本上是游離酸形式的DPA。
14. 如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中： EPA和DHA是以約70% (m/m)至約80% (m/m)的總量存在。
15. 如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其中： Ω-3多不飽和脂肪酸是以80% (m/m)至約95% (m/m)的總量存在。
16. 如權(quán)利要求15所述的藥物組合物，其中： Ω-6多不飽和脂肪酸是以不大于約10% (m/m)的總量存在。
17. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中： 氨基甲酸乙酯，若存在，是以不大于約0. Ippm的量的氨基甲酸乙酯存在。
18. 適合于口服給藥的單位劑型，其包含： 月父囊； 其中所述膠囊中包封至少250mg的權(quán)利要求1所述的藥物組合物。
19. 如權(quán)利要求18所述的單位劑型，其中： 所述膠囊包封至少500mg的權(quán)利要求1所述的藥物組合物。
20. 如權(quán)利要求18所述的單位劑型，其中： 所述膠囊包封約IOOOmg的權(quán)利要求1所述的藥物組合物。
21. 如權(quán)利要求18所述的單位劑型，其中所述膠囊殼包含明膠。
22. 如權(quán)利要求21所述的單位劑型，其中所述膠囊是軟明膠膠囊。
23. 如權(quán)利要求22所述的單位劑型，其中所述軟明膠膠囊殼包含豬A型明膠。
24. 如權(quán)利要求23所述的單位劑型，其中所述軟明膠膠囊殼包含充足的豬A型明膠，使 得在40°C下貯存至少3個月后所述膠囊在純化水中于37°C在不大于30分鐘的時間段內(nèi)崩 解。
25. 如權(quán)利要求23所述的單位劑型，其中所述軟明膠膠囊殼的明膠包含至少5%的豬 A型明膠。
26. 如權(quán)利要求23所述的單位劑型，其中所述軟明膠膠囊殼的明膠包含至少25%的豬 A型明膠。
27. 如權(quán)利要求26所述的單位劑型，其中所述軟明膠膠囊殼包含至少50%的豬A型明 膠。
28. 如權(quán)利要求22所述的單位劑型，其中所述軟明膠膠囊具有外部包衣。
29. 如權(quán)利要求28所述的單位劑型，其中所述包衣不是pH敏感的。
30. 如權(quán)利要求29所述的單位劑型，其中所述包衣包含聚（丙烯酸酯-甲基丙烯酸甲 酯）共聚物。
31. 如權(quán)利要求30所述的單位劑型，其中所述聚（丙烯酸酯-甲基丙烯酸甲酯）共聚 物是 EudragitNE_30D。
32. 如權(quán)利要求29所述的單位劑型，其中在攝入后30分鐘之內(nèi)無包封藥物組合物的大 幅度釋放。
33. 如權(quán)利要求32所述的單位劑型，其中在攝入后約60分鐘之內(nèi)有包封藥物組合物的 顯著釋放。
34. 如權(quán)利要求28所述的單位劑型，其中所述包衣是pH依賴性腸溶衣。
35. 劑量套件，其包含： 多個如權(quán)利要求18所述的單位劑型。
36. 如權(quán)利要求35所述的劑量套件，其中： 所述劑量套件含有至少60個單位劑型。
37. 如權(quán)利要求35所述的劑量套件，其中： 所述劑量套件含有至少120個單位劑型。
38. 治療嚴(yán)重高甘油三酯血癥的方法，其包括： 以將血清或血漿甘油三酯有效降低到低于治療前水平的量和持續(xù)時間， 向具有> 500mg/dL的治療前血清或血漿甘油三酯水平的患者口服給予如權(quán)利要求1 所述的藥物組合物。
39. 如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述有效量為至少約每日2g。
40. 如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述有效量為至少約每日3g。
41. 如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述有效量為至少約每日4g。
42. 如權(quán)利要求38所述的方法，其中所述有效量為約每日2g。
43. -種治療嚴(yán)重高甘油三酯血癥的方法，其包括： 以將血清或血漿甘油三酯水平有效降低到低于治療前水平的量和持續(xù)時間， 向具有> 500mg/dL的治療前血清或血漿甘油三酯水平的患者口服給予如權(quán)利要求13 所述的藥物組合物。
44. 如權(quán)利要求43所述的方法，其中所述有效量為至少約每日2g。
45. 如權(quán)利要求38所述的方法，其中每日給予所述藥物組合物達(dá)至少30天。
46. 如權(quán)利要求43所述的方法，其中每日給予所述藥物組合物達(dá)至少30天。
47. 如權(quán)利要求38所述的方法，其中采用一個或多個如權(quán)利要求20所述的單位劑型的 形式而給予所述藥物組合物。
48. 如權(quán)利要求38所述的方法，還包括： 口服給予有效量的他汀類。
49. 如權(quán)利要求48所述的方法，其中所述他汀類選自：普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、 阿托伐他汀、氟伐他汀、羅蘇伐他汀、和匹伐他汀。
50. 通過他汀類療法來治療具有約200mg/dL至約500mg/dL的血清或血漿甘油三酯水 平的患者的方法，其包括： 口服給予有效量的他汀類，和 口服給予有效量的權(quán)利要求1所述的藥物組合物。
51. 在通過他汀類療法來治療具有約200mg/dL至約500mg/dL的血清或血漿甘油三酯 水平的患者的方法中，所述改進(jìn)包括： 輔助地給予有效量的權(quán)利要求1所述的藥物組合物。
52. 如權(quán)利要求50所述的方法，其中權(quán)利要求1所述的藥物組合物的有效量為至少約 每日2g。
53. 如權(quán)利要求50所述的方法，其中權(quán)利要求1所述的藥物組合物的有效量為至少約 每日3g。
54. 如權(quán)利要求50所述的方法，其中權(quán)利要求1所述的藥物組合物的有效量為至少約 每日4g。
55. 如權(quán)利要求50所述的方法，其中權(quán)利要求1所述的藥物組合物的有效量為約每日 2g。
56. -種治療具有升高的治療前血清或血漿甘油三酯的患者的方法，所述方法包括： 以將血漿中花生四烯酸（AA)濃度有效降低至少約5%的量和持續(xù)時間，給予權(quán)利要求 1所述的藥物組合物。
57. 如權(quán)利要求56所述的方法，其中以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約10%的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
58. 如權(quán)利要求56所述的方法，其中以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約20%的 量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
59. 治療具有升高的治療前血清或血楽甘油三酯的患者的方法,所述方法包括： 以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約50 μ g/mL的量和持續(xù)時間給予權(quán)利要求1 所述的藥物組合物。
60. 如權(quán)利要求59所述的方法，其中以將血漿花生四烯酸濃度有效降低至少約75 μ g/ mL的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
61. 治療具有升高的治療前血清或血漿甘油三酯的患者的方法，所述方法包括： 以將血漿EPA/AA的比率有效提高到至少約0. 25的量和持續(xù)時間給予權(quán)利要求1所述 的藥物組合物。
62. 如權(quán)利要求61所述的方法，其中以將血漿EPA/AA的比率有效提高到至少約0. 50 的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
63. 如權(quán)利要求62所述的方法，其中以將血漿EPA/AA的比率有效提高到至少約0. 65 的量和持續(xù)時間給予所述藥物組合物。
64. 降低血清或血漿ApoC III水平的方法，其包括： 以足以從治療前水平降低血清或血漿ApoC III的量和持續(xù)時間給予權(quán)利要求1所述的 藥物組合物。
65. 在制備游離酸形式的多不飽和脂肪酸的藥物組合物的方法中，所述改進(jìn)包括： 使經(jīng)酯交換魚油的中間原料經(jīng)過尿素包合絡(luò)合的步驟，所述魚油包含下列的乙基酯 類： EPA，至少約44% (a/a)的量 DHA，至少約14% (a/a)的量，和 DPA，至少約1% (a/a)的量， 其中用于絡(luò)合的尿素的量是根據(jù)式I (a)、或者根據(jù)式I (b)、或者根據(jù)式I (a)和式I (b) 兩者進(jìn)行計算，其中所述尿素量被設(shè)定為在由式1(a)和1(b)的結(jié)果所設(shè)定并包括其的范 圍內(nèi)的值， [尿素 ]=F 富集_DHAX ((DHA 目標(biāo)一DHA-EE輸入 VDHA-EE輸入）） (Ia) [尿素]=F 富集-EPAX (GiPA 目標(biāo)-EPA-EE 輸入）/EPA-EE 輸入）） （Ib), 其中F富集-醒和F富集-EPA各自為約100/0· Μ。
66. 如權(quán)利要求65所述的方法，其中： EPA-EE是以至少約45% (a/a)的量存在于所述中間原料中， DHA-EE是以至少約15% (a/a)的量存在于所述中間原料中，和 DPA-EE是以至少約2.5% (a/a)的量存在于所述中間原料中。
67. 如權(quán)利要求65所述的方法，其中所述藥物組合物是根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組 合物。
68. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其通過權(quán)利要求66所述的方法制造。
【文檔編號】A61P9/00GK104321055SQ201380012754
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2013年1月4日 優(yōu)先權(quán)日:2012年1月6日
【發(fā)明者】T.J.邁恩斯, B.N.M.馬基爾斯, B.M.梅塔, G.維斯勒, M.戴維森, P.R.伍德 申請人:翁特拉制藥公司, 克利塞利斯醫(yī)藥有限公司