藥物劑型的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物劑型，特別是在靶部位具有增強的和/或延長的藥物化合物之分布的pH依賴性藥物劑型。更具體地，本發(fā)明涉及控釋陰道內(nèi)藥物劑型，并且更特別地，涉及包含封裝和/或包埋在生物可腐蝕聚合物基質(zhì)內(nèi)之微球的藥物劑型，所述微球與所述基質(zhì)一起形成囊片劑和/或片劑。
【專利說明】藥物劑型

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物劑型，特別是在靶部位具有增強的和/或延長的藥物化合物的分 布的pH依賴性藥物劑型。
[0002] 特別地，本發(fā)明涉及控釋陰道內(nèi)藥物劑型，并且更特別地，涉及包含封裝和/或包 埋在生物可腐蝕聚合物基質(zhì)內(nèi)的微粒（優(yōu)選微球）的藥物劑型，所述微球與所述基質(zhì)一起 形成囊片劑和/或片劑。該藥物劑型適于遞送藥物化合物，其中，微球攜帶藥物化合物，并 且當在使用中陰道內(nèi)施用該藥物劑型時，隨著基質(zhì)的腐蝕，微球以速率調(diào)節(jié)的部位特異的 方式釋放所述化合物。

【背景技術】
[0003] 過去幾十年，見證了關于殺微生物劑及其在藥理應用中的相關用途之研究的顯著 增加。研究增加的一個特別的領域是HIV/AIDS研究。
[0004] 近幾年，已經(jīng)對陰道內(nèi)使用以預防性傳播疾?。ò℉IV-ι)的傳播的殺微生物化 學劑進行了大量研究。進行該研究的主要動機之一是這些藥劑可將性傳播感染（sexually transmitted infection，STI)預防領域從男性轉(zhuǎn)移到女性。
[0005] 許多這樣的殺微生物化學劑已經(jīng)被證明在體外有效，但是在體內(nèi)卻并非如此，因 此，市場上沒有可用的抗HIV-1殺微生物劑。殺微生物劑轉(zhuǎn)移失敗已歸因于多種因素，其中 有以下事實：一些殺微生物劑盡管有效地阻止HIV-1病毒，但是也削減宿主的防御機制，以 壬苯醇醚-9凝膠為例，其破壞陰道粘膜的阻隔性能（Van damme等，2002)。該研究領域面 臨的其他挑戰(zhàn)包括：以使抗HIV-1殺微生物劑保持其效力的方式遞送這些強效抗HIV-1殺 微生物劑的能力，將所述藥劑調(diào)整為以部位特定的方式（特別是陰道內(nèi)）成功分布以及控 制其在特定部位的停留時間以使得其在量上足以有效防止HIV-1傳播。
[0006] 已經(jīng)發(fā)明了多種藥用抗HIV-ι殺微生物制劑，包括陰道片劑、環(huán)、膜和凝膠制劑， 其大部分是在性交前后使用的快速并且短期作用的遞送系統(tǒng)。需要開發(fā)在其靶部位具有延 長的停留時間的藥物劑型。還需要開發(fā)相對于市場上的現(xiàn)有陰道內(nèi)藥物劑型（包括被報道 為骯臟而粘稠的凝膠）更符合人體工程學（ergonomic)的藥物劑型。依然重要的是藥物劑 型廣泛地并且專一地在特定靶部位遞送至少一種藥物化合物。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 根據(jù)本發(fā)明的第一個方面，提供了用于在人陰道內(nèi)的靶部位以受控并且速率調(diào)節(jié) 的方式釋放藥物化合物的藥物劑型，所述藥物劑型包含：
[0008] 至少一個微粒，優(yōu)選微球，所述微球包含為該微球提供剛性的果膠（PEC)框架和 基本封裝和/或包埋在該果膠（PEC)框架內(nèi)的豬胃粘蛋白（MUC)，使得在使用中，將該藥物 劑型插入到陰道內(nèi)，果膠（PEC)和豬胃粘蛋白（MUC)調(diào)節(jié)該藥物化合物在靶部位以pH依賴 的方式釋放，其中pH升高促進該藥物化合物從該微球中釋放的速率提高，并且其中pH降低 促進該藥物化合物從該微球中釋放的速率降低。
[0009] 在本發(fā)明的一個作為實例的實施方案中，所述藥物劑型包含多個微球。
[0010] 所述藥物劑型可以以pH依賴的方式釋放藥物化合物，其中堿性pH促進藥物化合 物從微球中釋放的速率提高，并且其中酸性pH促進藥物化合物從微球中釋放的速率降低。
[0011] 微球可以以pH依賴的方式釋放藥物化合物，其中pH升高促進豬胃粘蛋白（MUC) 構(gòu)象的改變，導致微球的結(jié)構(gòu)完整性下降，從而釋放藥物化合物。
[0012] 微球可以以pH依賴的方式釋放藥物化合物，其中pH下降有助于保持微球的結(jié)構(gòu) 完整性，使得藥物化合物的釋放通過基于擴散的方式進行。因微球結(jié)構(gòu)完整性下降而發(fā)生 的釋放大于相對于通過基于擴散的方式進行的釋放。
[0013] 靶部位可以是陰道壁（優(yōu)選后穹窿區(qū)）或子宮頸的表面。
[0014] 所述藥物劑型還可包含聚乙二醇（PEG)，使得當在陰道內(nèi)使用時，聚乙二醇（PEG) 為微球提供中性電荷親水涂層，所述中性電荷親水涂層促進微球穿過靶部位處（lining) 的陰道粘液層，所述靶部位位于陰道壁上。在一個可選實施方案中，所述藥物劑型還可包含 聚乙二醇（PEG)，使得所形成的PEC-MUC-PEG微球在性質(zhì)上是整體，S卩，PEC、MUC和PEG共混 以形成微球，PEC-MUC-PEG微球的PEG組分具有中性電荷，并促使PEC-MUC-PEG微球穿過靶 部位處的陰道粘液層。
[0015] 所述聚乙二醇（PEG)可以是低分子量聚乙二醇（PEG)，優(yōu)選分子量為約400g/mol 的低分子量聚乙二醇（PEG)。所述豬胃粘蛋白（MUC)優(yōu)選III型豬胃粘蛋白。
[0016] 在本發(fā)明一個作為具體實例的實施方案中，提供了微球，其各自包含果膠（PEC) 框架、豬胃粘蛋白（MUC)(優(yōu)選MUC III)和低分子量聚乙二醇（PEG)(優(yōu)選分子量為約 400g/mol的低分子量聚乙二醇（PEG))，從而形成PEC-MUC-PEG微球。在使用中，果膠（PEC) 有助于為微球提供剛性，并調(diào)節(jié)藥物化合物以pH依賴的方式在陰道內(nèi)釋放，其中pH升高促 進藥物化合物的釋放速率提高，并且其中pH降低促進藥物化合物的釋放速率降低。在使用 中，果膠（PEC)框架還促使微球滲透到位于靶部位處的陰道組織內(nèi)，從而幫助微球分布到 靶部位周圍。在使用中，豬胃粘蛋白（MUC)調(diào)節(jié)藥物化合物以pH依賴的方式在陰道內(nèi)釋放， 其中pH升高促進藥物化合物的釋放速率提高，并且其中pH降低促進藥物化合物的釋放速 率降低。在使用中，豬胃粘蛋白（MUC)也通過與位于靶部位處的陰道固有粘蛋白的相互作 用來促進微球滲透到位于所述靶部位處的陰道組織內(nèi)部。另外，在使用中，低分子量聚乙二 醇（PEG)為微球提供中性電荷親水組分或涂層，所述中性電荷親水組分或涂層促進微球穿 過靶部位處的陰道粘液層，所述靶部位位于陰道壁上。在使用中，聚乙二醇（PEG)還促進微 球滲透到位于靶部位處的陰道組織內(nèi)，從而幫助微球分布到靶部位周圍。
[0017] 所述藥物劑型還可包含與微球締合和/或結(jié)合和/或連接的生物可腐蝕聚合物基 質(zhì)，使得在使用中，將所述藥物劑型插入到陰道內(nèi)，優(yōu)選后穹窿內(nèi)，生物可腐蝕聚合物基質(zhì) 經(jīng)過預定時間段被腐蝕，從其中釋放微球，所述微球進而在陰道內(nèi)釋放藥物化合物。
[0018] 所述生物可腐蝕基質(zhì)可以是基本疏水的，而微球可以是基本親水的，從而抑制通 過基于擴散的方式釋放藥物化合物。
[0019] 可選擇生物可腐蝕聚合物基質(zhì)以便以預定速率生物腐蝕，從而促進微球的釋放， 所述微球進而促進藥物化合物的釋放，以在靶部位取得期望的微球和藥物化合物的釋放曲 線。
[0020] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可包含陰道內(nèi)微環(huán)境pH保持劑，使得在使用中，基質(zhì)的生 物腐蝕有助于保持酸性的陰道內(nèi)pH，阻礙性傳播感染或疾病并進一步調(diào)節(jié)藥物化合物自微 球的釋放。
[0021] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可具有生物粘附性質(zhì)，使得在使用中，所述藥物劑型粘附 于陰道壁，優(yōu)選后穹窿區(qū)，或者子宮頸的表面。
[0022] 所述藥物劑型可包含粘合劑以促進生物可腐蝕基質(zhì)與微球之間的結(jié)合。
[0023] 還提供了待形成囊片劑或片劑的藥物劑型，所述囊片劑或片劑包含基本封裝和/ 或包埋多個微球的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，使得在使用中，基質(zhì)的生物腐蝕導致微球的釋 放，其進而釋放藥物化合物。所述囊片劑或片劑可以是復合聚合物囊片劑或片劑。
[0024] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可包含親水聚合物或疏水聚合物，或者親水聚合物和疏水 聚合物的共混物，并且對于包含至少一種聚合物的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，所述至少一種 聚合物選自包含以下的組：聚（丙烯酸）（PAA)、聚（乳酸）（PLA)、卡拉膠、聚磺苯乙烯、聚 酰胺、聚環(huán)氧乙烷、纖維素、聚（乙烯吡咯烷酮）（PVP)、聚（乙烯醇）（PVA)、殼聚糖、聚（丙 烯酸乙酯）、甲基丙烯酸甲酯、氯三甲基銨甲基丙烯酸甲酯（chlorotrimethyl ammonium methylmethacrylate)、輕基磷灰石、果膠、豬胃粘蛋白、聚（癸二酸）（PSA)、輕丙基甲基纖 維素（HPMC)、鄰苯二甲酸乙酸纖維素（CAP)、硬脂酸鎂、聚乙二醇、膠基聚合物（如黃原膠） 及其變體、聚-D，L-丙交酯（PDLL)、Kollidon SR(KSR)和Carbopol 794P NF及所述組的衍 生物。提供了可包含經(jīng)美國食品和藥品管理局（the Food&Drug Administration of the United States of America)批準的化合物或組合物的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)。
[0025] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，提供了可包含陰道內(nèi)微環(huán)境pH保持劑聚（癸二 酸）的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，使得在使用中，基質(zhì)被生物腐蝕成其組分酸，且二酸化學部 分有助于保持酸性陰道內(nèi)PH，其阻礙性傳播感染并進一步調(diào)節(jié)藥物化合物自微球的釋放。
[0026] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可包含羥丙基甲基纖維素，使得在使用中，所述羥丙基甲 基纖維素通過充當生物粘附劑來促進所述藥物劑型粘附于陰道壁（優(yōu)選后穹窿）處的陰道 粘液和/或通過充當粘合劑促進基質(zhì)內(nèi)微球的結(jié)合。
[0027] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可包含聚（丙烯酸），使得在使用中，所述聚（丙烯酸）通 過充當生物粘附劑來促進所述藥物劑型粘附于陰道壁處的陰道粘液。
[0028] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可包含聚（乙烯吡咯烷酮），使得在使用中，所述聚（乙烯 吡咯烷酮）通過充當粘合劑來促進基質(zhì)內(nèi)的微球的結(jié)合。
[0029] 生物可腐蝕基質(zhì)可包含鄰苯二甲酸乙酸纖維素和/或其衍生物，使得在使用中， 所述鄰苯二甲酸乙酸纖維素和/或其衍生物調(diào)節(jié)基質(zhì)以pH依賴的方式生物腐蝕。
[0030] 生物可腐蝕基質(zhì)可包含疏水聚合物聚-D，L-丙交酯（PDLL)，使得在使用中，所述 聚-D，L-丙交酯是生物可腐蝕基質(zhì)的主要組分，促使持續(xù)釋放微球，并進而持續(xù)釋放藥物 化合物。聚-D，L-丙交酯（PDLL)也是陰道內(nèi)微環(huán)境pH保持劑，使得在使用中，所述聚-D， L-丙交酯通過酯鍵的水解降解過程降解形成乳酸，乳酸然后有助于保持酸性陰道內(nèi)pH，其 阻止性傳播感染或疾病。另外，在使用中，聚-D，L-丙交酯在較高pH ( S卩，在暴露于精液（約 pH 7.4)時）下比在較低pH(S卩，在暴露于正常陰道液（約pH 4.5))下水解得更快。
[0031] 生物可腐蝕基質(zhì)可包含硬脂酸鎂（MS)，使得在使用中，所述硬脂酸鎂充當潤滑劑 以在劑型生產(chǎn)過程中使聚合物基質(zhì)與機器之間的粘附力最小化。
[0032] 另外，在使用中，硬脂酸鎂（MS)對基質(zhì)硬度有貢獻，其中增加硬脂酸鎂的量導致 基質(zhì)硬度降低，而降低硬脂酸鎂的含量導致基質(zhì)硬度提高。
[0033] 另外，在使用中，硬脂酸鎂（MS)是由囊片劑基質(zhì)釋放微球和藥物的調(diào)節(jié)劑。
[0034] 生物可腐蝕基質(zhì)可包含Kollidon SR(KSR)，其為聚（乙烯吡咯烷酮）和聚（乙酸 乙烯酯）的共混物，使得在使用中，所述Kollidon SR充當劑型的粉末粘合劑。在使用中， Kollidon SR(KSR)也賦予劑型有利的粉末流動性能。另外，在使用中，Kollidon SR(KSR) 促進藥物化合物的持續(xù)釋放，這是因為聚（乙酸乙烯酯）對聚合物基質(zhì)的疏水性有貢獻。另 夕卜，在使用中，Kollidon SR(KRS)提供了好的壓縮性能，其主要由Kollidon SR的聚（乙酸 乙烯酯）部分貢獻。
[0035] 在使用中，Kollidon SR(KSR)還促進聚合物基質(zhì)的腐蝕，這是因為Kollidon SR的 聚（乙烯吡咯烷酮）部分是親水的，因此一旦暴露于水性陰道環(huán)境，聚（乙烯吡咯烷酮）溶 解并被從聚合物基質(zhì)中濾除而形成孔，陰道液可通過所述孔進入聚合物基質(zhì)的內(nèi)部，并且 可釋放微球和藥物化合物。這導致微球和藥物化合物自聚合物基質(zhì)的基于滲透的釋放。
[0036] 生物可腐蝕基質(zhì)可包含Carbopol 794P NF，使得在使用中，所述Carbopol 794P NF為聚合物基質(zhì)提供生物粘附性，從而有利于在靶部位的生物粘附。另外，在使用中， Carbopol 794P NF在水性陰道環(huán)境中吸收陰道液并膨脹，從而調(diào)節(jié)藥物化合物的釋放。
[0037] 另外，在使用中，Carbopol 794P NF對調(diào)節(jié)藥物化合物之釋放的pH有貢獻，因為 在約4. 5的較低陰道pH下，包含羧基的Carbopol不離子化，具有正常的陰道液的吸收和藥 物化合物的釋放，而一旦暴露于pH 7. 4的精液，包含羧酸基團的Carbopol離子化,引起它 們的排斥，這進而導致對周圍流體的吸收增加和藥物化合物的釋放增加。
[0038] 在本發(fā)明的一個具體實施方案中，生物可腐蝕基質(zhì)包含聚-D，L-丙交酯（PDLL)、 硬脂酸鎂（MS)、Kollidon SR(KSR)和 Carbopol 794P NF。
[0039] 所述藥物化合物可以是抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥，優(yōu)選但不限于以下組的至少一種：齊多 夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、洛匹那韋、利托那韋、恩曲他濱、依法韋侖和泰諾福韋。藥物化合 物可以是抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥的可藥用鹽和/或包含抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥的組合物。
[0040] 所述藥物化合物可以是殺微生物劑，優(yōu)選但不限于以下組的至少一種卡拉 膠、卡波姆膠、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、癸酸、聚磺苯乙烯、卡拉膠、單癸酸甘油酯、聚丙烯 酸、乳桿菌、纖維素硫酸鹽、萘磺酸鹽、硫酸化聚乙烯醇、乳酸、鯨蠟基甜菜堿、肉豆蘧胺氧化 物、stampidine、藍藻抗病毒蛋白η、單克隆抗體、脂質(zhì)體、血小板反應蛋白-1、酸橙汁、酸 奶、替諾福韋、齊多夫定、樹狀聚合物、硫脲、銀、聚苯乙烯和十二烷基硫酸鈉。所述藥物化合 物可以是殺微生物劑的可藥用鹽和/或包含殺微生物劑的組合物。
[0041] 在本發(fā)明一個作為實例的實施方案中，所述藥物劑型包含抗逆轉(zhuǎn)錄化合物和殺微 生物化合物。藥物化合物可包含多種藥物化合物和/或佐劑和/或賦形劑。
[0042] 微球的直徑可以為約0. 2至約0. 5微米，以便在陰道內(nèi)使用時促進微球穿過靶部 位處的陰道粘液層，所述靶部位位于陰道壁上。
[0043] 提供了可提供從生物可腐蝕聚合物基質(zhì)持續(xù)釋放微球的藥物劑型，以及從微球暴 露于陰道液的時間開始提供藥物化合物至少24小時或48小時內(nèi)之持續(xù)釋放的微球。
[0044] 優(yōu)選地，從將劑型插入陰道腔（優(yōu)選后穹窿區(qū)）的那天開始，在持續(xù)約30天的時 期中從生物可腐蝕基質(zhì)持續(xù)釋放微球，因此也從微球持續(xù)釋放藥物化合物。
[0045] 在本發(fā)明的一個具體實施方案中，其中生物可腐蝕基質(zhì)包含聚-D，L-丙交酯 (TOLL)、硬脂酸鎂（MS)、Kollidon SR(KSR)和Carbopol 794P NF。微球的持續(xù)釋放以及 進而藥物化合物的持續(xù)釋放可能是由于聚-D，L-丙交酯（PDLL)的水解降解、腐蝕以及在 Kollidon SR(KSR)被從聚合物基質(zhì)中濾出時的滲透。釋放機制在約pH 4. 5時可能近似 Makoid-Banakar 模型，在約 pH 7. 4 時近似 Weibull 模型。
[0046] 根據(jù)本發(fā)明的第二個方面，提供了生產(chǎn)本發(fā)明第一個方面所述藥物劑型的方法， 所述方法包括在反應容器中使果膠（PEC)和粘蛋白（MUC)締合和/或結(jié)合和/或連接以形 成微球。
[0047] 果膠（PEC)與粘蛋白（MUC)的締合和/或結(jié)合和/或連接通過交聯(lián)過程進行，其 中使用交聯(lián)劑以促進交聯(lián)過程。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，交聯(lián)劑可以是氯化鈣。
[0048] 所述方法還可包括向反應容器中添加至少一種藥物化合物的步驟，使得每個微球 包含至少一種藥物化合物。
[0049] 所述方法還可包括向反應容器中添加聚乙二醇（PEG)的步驟，以產(chǎn)生如上文本發(fā) 明第一方面所述的PEC-MUC-PEG微球。
[0050] 所述方法還可包括將微球基本封裝和/或包埋在本發(fā)明第一方面的如上所述生 物可腐蝕聚合物基質(zhì)中的步驟，從而形成具有基本封裝和/或包埋了多個微球之生物可腐 蝕聚合物基質(zhì)的藥物劑型。
[0051] 所述方法還可包括機械地使藥物劑型形成片劑或囊片劑之形狀和/或尺寸的步 驟，在使用中，將片劑或囊片劑插入到人的陰道內(nèi)，優(yōu)選陰道的后穹窿內(nèi)。
[0052] 根據(jù)本發(fā)明的第三個方面，提供了本公開內(nèi)容限定的藥物劑型，其用于治療性傳 播感染/疾病和/或用于預防性傳播感染/疾病，其包括向有此需要的人陰道內(nèi)施用該藥 物劑型。
[0053] 根據(jù)本發(fā)明的第四個方面，提供了用于治療性傳播感染/疾病的方法和/或用于 預防性傳播感染/疾病的方法，其包括陰道內(nèi)施用本公開內(nèi)容限定的藥物劑型。
[0054] 附圖簡述
[0055] 下文將僅以舉例的方式并參照附圖描述本發(fā)明的實施方案，其中：
[0056] 圖1示出了根據(jù)本發(fā)明第一方面之藥物劑型的最佳制劑，其表現(xiàn)出合意性、自變 量和計算的響應性；
[0057] 圖2A示出了將獨立制劑參數(shù)（粒徑（PS))與制劑響應性（超聲處理時間（ST)、表 面活性劑濃度（SC)和藥物：聚合物比率D : P比率）相關聯(lián)的響應面圖；
[0058] 圖2B示出了將獨立制劑參數(shù)（ζ電位（ZP))與制劑響應性（超聲處理時間（ST)、 表面活性劑濃度（SC)和藥物：聚合物比率D : Ρ比率）相關聯(lián)的響應面圖；
[0059] 圖2C示出了將獨立制劑參數(shù)（平均溶出時間（MDT))與制劑響應性（超聲處理時 間（ST)、表面活性劑濃度（SC)和藥物：聚合物比率D : Ρ比率）相關聯(lián)的響應面圖；
[0060] 圖3Α示出了在為獲得粒徑響應性而出現(xiàn)的自變量的相互作用圖；
[0061] 圖3Β示出了在為獲得ζ電位響應性而出現(xiàn)的自變量的相互作用圖；
[0062] 圖3C示出了在為獲得平均溶出時間響應性而出現(xiàn)的自變量的相互作用圖；
[0063] 圖4Α示出了根據(jù)本發(fā)明第一方面的負載有ΑΖΤ的PEC-MUC-PEG微球的由 Box-Behnken設計確定的粒徑的殘余物圖；
[0064] 圖4B示出了根據(jù)本發(fā)明第一方面的負載有AZT的PEC-MUC-PEG微球的由 Box-Behnken設計確定的ζ電位的殘余物圖；
[0065] 圖4C示出了根據(jù)本發(fā)明第一方面的負載有ΑΖΤ的PEC-MUC-PEG微球的由 Box-Behnken設計確定的平均溶出時間的殘余物圖；
[0066] 圖5 (a)和（b)示出了 MUC-PEC-PEG微球在JEOL S100透射電子顯微鏡40000X 放大率下的透射電子顯微圖；
[0067] 圖6示出了最佳PEC-MUC-PEG微球的粒徑分布和強度；
[0068] 圖7示出了最佳PEC-MUC-PEG微球的ζ電位分布；
[0069] 圖 8Α不出 了制劑F1-F5 在pH 4. 5 的模擬陰道液（simulated vaginal fluid，SVF) 中的溶出曲線；
[0070] 圖8B示出了制劑F6-F10在pH 4. 5的模擬陰道液（SVF)中的溶出曲線；
[0071] 圖8C示出了制劑F11-F15在pH 4.5的模擬陰道液（SVF)中的溶出曲線；
[0072] 圖8D示出了最佳劑型在pH 4. 5的模擬陰道液（SVF)中和pH 7. 4的磷酸鹽緩沖 鹽水（PBS)中的溶出曲線；
[0073] 圖9A示出了負載的PEC-MUC-PEG微球在pH 4. 5的SVF中釋放的AZT與 PEC-MUC-PEG微球在pH 7. 4的PBS中釋放的AZT的比較；
[0074] 圖9B示出了均在SVF中自負載的交聯(lián)PEC微球和未交聯(lián)PEC微球釋放的AZT的 比較；
[0075] 圖9C示出了在SVF中自負載的PEC-MUC-PEG微球和PEC-MUC微球釋放的AZT的 比較；
[0076] 圖9D示出了自負載的PEC-MUC-PEG微球和PEC-PEG微球釋放的AZT的比較；
[0077] 圖 10 示出 了以下物質(zhì)的 ATR-FTIR 光譜：（a)PEG、（b)MUC、（c)PEC、（d)AZT 和（e) 負載有 AZT 的 PEC-MUC-PEG ;
[0078] 圖11示出了以下物質(zhì)的DSC熱譜圖：（a)負載有AZT的PEC-MUC-PEG、（b)MUC、（c) PEC、（d)AZT ;
[0079] 圖12A示出了負載有AZT的PEC-MUC-PEG的TGA (實線）和DTGA (虛線）熱譜圖；
[0080] 圖12B示出了以下物質(zhì)的TGA熱譜圖：（i)MUC、（ii)PEC、（iii)AZT、（iv)負載有 AZT 的 PEC-MUC-PEG 微球和（v) PEG ;
[0081] 圖12C示出了 PEC的TGA(實線）和DTGA(虛線）熱譜圖；
[0082] 圖12D示出了 MUC的TGA(實線）和DTGA(虛線）熱譜圖；
[0083] 圖12E示出了 AZT的TGA(實線）和DTGA(虛線）熱譜圖；
[0084] 圖12F示出了 PEG的TGA(實線）和DTGA(虛線）熱譜圖；
[0085] 圖13示出了鋼沖頭和模具組以及使用所述組沖壓的聚合物囊片劑的攝影圖像；
[0086] 圖14不出了與南非1蘭特硬幣和商業(yè)Bayer Pharmaceuticals的Canesten陰道 片劑比較的囊片劑的攝影圖像；
[0087] 圖15示出了最佳制劑，其表現(xiàn)出生產(chǎn)聚合物囊片劑中的合意性、自變量和計算的 響應性；
[0088] 圖16A不出了將重量增加分數(shù)（fractional of weight increase，F(xiàn)WI)與聚合物 囊片劑生產(chǎn)中使用的硬脂酸鎂（MS)、Kollidon SR(KSR)和聚-D，L-丙交酯（PDLL)的重量 相關聯(lián)的響應面圖；
[0089] 圖16B示出了將基質(zhì)硬度（Η)與聚合物囊片劑生產(chǎn)中使用的硬脂酸鎂（MS)、 Kollidon SR(KSR)和聚-D，L-丙交酯（PDLL)的重量相關聯(lián)的響應面圖；
[0090] 圖16C示出了將藥物釋放分數(shù)（FDR)與聚合物囊片劑生產(chǎn)中使用的硬脂酸鎂 (MS)、Kollidon SR(KSR)和聚-D，L-丙交酯（PDLL)的重量相關聯(lián)的響應面圖；
[0091] 圖17A示出了在復合聚合物囊片劑的優(yōu)化中為了獲得重量增加分數(shù)（FWI)響應而 出現(xiàn)的自變量的相互作用圖；
[0092] 圖17B示出了在復合聚合物囊片劑的優(yōu)化中為了獲得各自的響應基質(zhì)硬度⑶而 出現(xiàn)的自變量的相互作用圖；
[0093] 圖17C示出了在復合聚合物囊片劑的優(yōu)化中為了獲得各自的響應藥物釋放分數(shù) (FDR)而出現(xiàn)的自變量的相互作用圖；
[0094] 圖18A示出了直接壓縮囊片劑的由Box-Behnken設計確定的7天中的重量增加分 數(shù)的殘余物圖；
[0095] 圖18B示出了直接壓縮囊片劑的由Box-Behnken設計確定的基質(zhì)硬度的殘余物 圖；
[0096] 圖18C示出了直接壓縮囊片劑的由Box-Behnken設計確定的在7天中的藥物釋放 分數(shù)的殘余物圖；
[0097] 圖19A示出了聚合物囊片劑的最佳制劑在SVF和PBS中釋放的AZT的分數(shù)；
[0098] 圖19B示出了在pH 4. 5的SVF中AZT自囊片劑的釋放曲線，其符合 Makoid-Banakar 模型。
[0099] 圖19C示出了在pH 7.4的磷酸鹽緩沖鹽水中AZT自囊片劑的釋放曲線，其符合 Webull 模型；
[0100] 圖20示出了復合聚合物囊片劑硬度；
[0101] 圖21示出了聚合物囊片劑的圖像，從左至右為：暴露于SVF之前的含有1 %、2% 或3%Carbopol 974P NF的囊片劑，暴露于SVF 1個月后含有l(wèi)%Carbopol 974P NF的囊 片劑，暴露于SVF 1個月后含有2%Carbopol 974P NF的囊片劑和暴露于SVF 1個月后含 有3% Carbopol974P NF的囊片劑；并且
[0102] 圖22示出了在模擬陰道液中溶出30天后，carbopol 974p nf (c974)對囊片劑尺 寸的影響。 具體實施方案
[0103] 根據(jù)本發(fā)明的第一個方面，提供了用于在人陰道內(nèi)的靶部位以受控和速率調(diào)節(jié)的 方式釋放藥物化合物的藥物劑型，所述藥物劑型包含：至少一個微粒，優(yōu)選微球，所述微球 包含為微球提供剛性的果膠（PEC)框架和基本封裝和/或包埋在果膠框架內(nèi)的豬胃粘蛋白 (MUC)，使得在使用中，將所述至少一個PEC-MUC微球插入到陰道中，果膠（PEC)和豬胃粘蛋 白（MUC)調(diào)節(jié)藥物化合物在靶部位以pH依賴的方式釋放，其中pH升高促進藥物化合物從 微球中釋放的速率提高，并且其中pH降低促進藥物化合物從微球中釋放的速率降低。
[0104] 堿性pH促進藥物化合物從微球中釋放的速率提高，而酸性pH促進藥物化合物從 微球中釋放的速率降低。
[0105] PEC-MUC微球以pH依賴的方式釋放藥物化合物，其中pH升高促進豬胃粘蛋白 (MUC)構(gòu)象的改變，導致微球的結(jié)構(gòu)完整性下降，在這種情況下，釋放藥物化合物。基本上， PEC-MUC微球以pH依賴的方式釋放藥物化合物，其中pH下降有助于保持微球的結(jié)構(gòu)完整 性，使得藥物化合物的釋放通過基于擴散的方式進行。因微球結(jié)構(gòu)完整性下降所發(fā)生的釋 放大于通過基于擴散的方式進行的釋放。
[0106] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，PEC-MUC微球還包含聚乙二醇（PEG)以形成 PEC-MUC-PEG微球，使得當在陰道內(nèi)使用時，聚乙二醇（PEG)為微球提供中性電荷的親水涂 層，所述中性電荷的親水涂層促使微球穿過靶部位處的陰道粘液層，所述靶部位位于陰道 壁上。所述聚乙二醇（PEG)通常是低分子量聚乙二醇（PEG)，優(yōu)選分子量為約400g/mol的低 分子量聚乙二醇（PEG)。在一個可選實施方案中，所述藥物劑型還可包含聚乙二醇（PEG)， 使得所形成的PEC-MUC-PEG微球在性質(zhì)上是整體，S卩，PEC、MUC和PEG共混以形成微球， PEC-MUC-PEG微球的PEG組分具有中性電荷，并促使PEC-MUC-PEG穿過靶部位處的陰道粘液 層。
[0107] 在本發(fā)明一個作為具體實例的實施方案中，提供了微球，其各自包含果膠（PEC) 框架、豬胃粘蛋白（MUC)(優(yōu)選MUC III)和低分子量聚乙二醇（PEG)(優(yōu)選分子量為約 400g/mol的低分子量聚乙二醇（PEG))以形成PEC-MUC-PEG微球。在使用中，果膠（PEC) 有助于為微球提供剛性，并調(diào)節(jié)藥物化合物以pH依賴的方式在陰道內(nèi)釋放，其中pH升高促 進藥物化合物的釋放速率提高，并且其中pH降低促進藥物化合物的釋放速率降低。在使用 中，果膠（PEC)框架還促使微球滲透到位于靶部位的陰道組織內(nèi)，從而幫助微球分布到靶 部位周圍。在使用中，豬胃粘蛋白（MUC)調(diào)節(jié)藥物化合物以pH依賴的方式在陰道內(nèi)釋放， 其中pH升高促進藥物化合物的釋放速率提高，并且其中pH降低促進藥物化合物的釋放速 率降低。在使用中，豬胃粘蛋白（MUC)也通過與位于靶部位的陰道固有粘蛋白相互作用來 促進微球滲透到位于所述靶部位的陰道組織內(nèi)。另外，在使用中，低分子量聚乙二醇（PEG) 為微球提供中性電荷親水組分或涂層，所述中性電荷親水組分或涂層促進微球穿過靶部位 處的陰道粘液層，所述靶部位位于陰道壁上。在使用中，聚乙二醇（PEG)還促使微球滲透到 位于靶部位的陰道組織內(nèi)，從而幫助微球分布到靶部位周圍。
[0108] 通常，生物可腐蝕基質(zhì)與PEC-MUC微球和/或PEC-MUC-PEG微球締合和/或結(jié)合和 /或連接，使得在使用中，將所述藥物劑型插入到陰道內(nèi)，優(yōu)選后穹窿內(nèi)，生物可腐蝕聚合物 基質(zhì)經(jīng)過預定時間段被腐蝕，從其中釋放微球，其進而在陰道內(nèi)釋放藥物化合物。
[0109] 生物可腐蝕基質(zhì)通常是基本疏水的，而微球是基本親水的，使得藥物化合物通過 基于擴散的方式的釋放被抑制。選擇生物可腐蝕聚合物基質(zhì)以便以預定速率生物腐蝕，從 而促進微球的釋放，所述微球進而促進藥物化合物的釋放，以在靶部位達到期望的微球和 藥物化合物的釋放曲線。
[0110] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可包含陰道內(nèi)微環(huán)境pH保持劑，使得在使用中，基質(zhì)的生 物腐蝕有助于保持酸性的陰道內(nèi)PH，阻礙性傳播感染，并進一步調(diào)節(jié)藥物化合物自微球的 釋放。
[0111] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)可具有生物粘附性質(zhì)，使得在使用中，所述藥物劑型粘附 于陰道壁，優(yōu)選后穹窿區(qū)，或者子宮頸的表面。
[0112] 所述藥物劑型可包含粘合劑，以促進生物可腐蝕聚合物基質(zhì)與微球之間的結(jié)合。
[0113] 通常，如以下將進一步解釋的，將藥物劑型形成為囊片劑或片劑，所述囊片劑或片 劑包含基本封裝和/或包埋多個微球的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，使得在使用中，基質(zhì)的生 物腐蝕導致微球的釋放，其進而釋放藥物化合物。所述囊片劑或片劑是復合聚合物囊片劑 或片劑。
[0114] 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)包含親水聚合物或疏水聚合物，或者親水聚合物與疏水聚 合物的共混物，且對于包含至少一種聚合物的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，所述聚合物選自包 含以下的組：聚（丙烯酸）（PAA)、聚（乳酸）（PLA)、卡拉膠、聚磺苯乙烯、聚酰胺、聚環(huán)氧乙 烷、纖維素、聚（乙烯吡咯烷酮）（PVP)、聚（乙烯醇）（PVA)、殼聚糖、聚（丙烯酸乙酯）、甲 基丙烯酸甲酯、氯三甲基銨甲基丙烯酸甲酯、羥基磷灰石、果膠、豬胃粘蛋白、聚（癸二酸） (PSA)、羥丙基甲基纖維素（HPMC)、鄰苯二甲酸乙酸纖維素（CAP)、硬脂酸鎂、聚乙二醇、諸 如黃原膠及其變體的膠基聚合物、聚-D，L-丙交酯（PDLL)、Kollidon SR(KSR)和Carbopol 794P NF及所述組的衍生物。提供了可包含經(jīng)美國食品和藥品管理局批準的化合物或組合 物的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)。
[0115] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，提供了包含陰道內(nèi)微環(huán)境pH保持劑聚（癸二 酸）的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，使得在使用中，基質(zhì)被生物腐蝕成其組分酸，且二酸化學部 分有助于保持酸性的陰道內(nèi)PH，其阻礙性傳播感染并進一步調(diào)節(jié)藥物化合物自微球的釋 放。
[0116] 可選地或附加地，生物可腐蝕聚合物基質(zhì)包含羥丙基甲基纖維素，使得在使用中， 所述羥丙基甲基纖維素通過充當生物粘附劑來促進所述藥物劑型粘附于陰道壁（優(yōu)選后 穹窿）處的陰道粘液層和/或通過充當粘合劑來促進基質(zhì)內(nèi)微球的結(jié)合。
[0117] 進一步可選地或附加地，生物可腐蝕聚合物基質(zhì)包含聚（丙烯酸），使得在使用 中，所述聚（丙烯酸）通過充當生物粘附劑來促進所述藥物劑型粘附于陰道壁處的陰道粘 液層。
[0118] 進一步可選地或附加地，生物可腐蝕聚合物基質(zhì)包含聚（乙烯吡咯烷酮），使得在 使用中，所述聚（乙烯吡咯烷酮）通過充當粘合劑來促進基質(zhì)內(nèi)微球的結(jié)合。
[0119] 進一步可選地或附加地，生物可腐蝕基質(zhì)包含鄰苯二甲酸乙酸纖維素和/或其衍 生物，使得在使用中，所述鄰苯二甲酸乙酸纖維素和/或其衍生物調(diào)節(jié)基質(zhì)以pH依賴的方 式生物腐蝕，其中基質(zhì)被生物腐蝕成其組分酸，且二酸化學部分有助于保持酸性的陰道內(nèi) pH，其阻礙性傳播感染并進一步調(diào)節(jié)藥物化合物自微球的釋放。
[0120] 在本發(fā)明一個具體的優(yōu)選實施方案中，生物可腐蝕基質(zhì)包含疏水聚合物聚-D， L-丙交酯（PDLL)，使得在使用中，所述聚-D，L-丙交酯是生物可腐蝕基質(zhì)的主要組分，促使 持續(xù)釋放微球，進而持續(xù)釋放藥物化合物。聚-D，L-丙交酯（PDLL)也是陰道內(nèi)微環(huán)境pH 保持劑，使得在使用中，所述聚_D，L-丙交酯通過酯鍵的水解降解過程降解形成乳酸，乳酸 然后有助于保持酸性陰道內(nèi)PH，其阻止性傳播感染。另外，在使用中，聚-D，L-丙交酯在較 高pH(S卩，在暴露于精液（約pH 7.4)時）下比在較低pH(S卩，在暴露于正常陰道液（約pH 4. 5)時）下水解得更快。還應當理解的是，提供了這樣的本發(fā)明的實施方案，其中生物可腐 蝕基質(zhì)不僅包含聚-D，L-丙交酯（PDLL)，而且還可包含至少一種另外的聚合物和/或化合 物。
[0121] 附加地或可選地，生物可腐蝕基質(zhì)包含硬脂酸鎂（MS)，使得在使用中，所述硬脂酸 鎂充當潤滑劑以在劑型生產(chǎn)過程中使聚合物基質(zhì)與機器之間的粘附最小化。另外在使用 中，硬脂酸鎂（MS)對基質(zhì)硬度有貢獻，其中增加硬脂酸鎂的量導致基質(zhì)硬度降低，而降低 硬脂酸鎂的含量導致基質(zhì)硬度提高。另外，在使用中，硬脂酸鎂（MS)是由囊片劑基質(zhì)釋放 的微球和藥物的調(diào)節(jié)劑。
[0122] 進一步附加地或可選地，生物可腐蝕基質(zhì)包含Kollidon SR(KSR)，其為聚（乙烯 吡咯烷酮）和聚（乙酸乙烯酯）的共混物，使得在使用中，所述Kollidon SR充當劑型的粉 末粘合劑。在使用中，Kollidon SR(KSR)還賦予劑型有利的粉末流動性能。另外，在使用 中，Kollidon SR(KSR)促進藥物化合物的持續(xù)釋放，這是因為聚（乙酸乙烯酯）對聚合物 基質(zhì)的疏水性有貢獻。另外，在使用中，Kollidon SR(KRS)提供了好的壓縮性能，其主要由 Kollidon SR的聚（乙酸乙烯酯）部分貢獻。在使用中，Kollidon SR(KSR)還促進聚合物 基質(zhì)的腐蝕，這是因為Kollidon SR的聚（乙烯吡咯烷酮）部分是親水的，因此在暴露于水 性陰道環(huán)境時，聚（乙烯吡咯烷酮）溶解并被從聚合物基質(zhì)中濾除而形成孔，陰道液可通過 所述孔進入聚合物基質(zhì)的內(nèi)部，并且可釋放微球和藥物化合物。這導致微球和藥物化合物 自聚合物基質(zhì)的基于滲透的釋放。
[0123] 進一步附加地或可選地，生物可腐蝕基質(zhì)包含Carbopol 794P NF，使得在使用中， 所述Carbopol 794P NF為聚合物基質(zhì)提供生物粘附性，從而有利于生物粘附于靶部位。另 夕卜，在使用中，Carbopol 794P NF在水性陰道環(huán)境中吸收陰道液并膨脹，從而調(diào)節(jié)藥物化合 物的釋放。另外，在使用中，Carbopol 794P NF對藥物化合物的pH調(diào)節(jié)釋放有貢獻，因為 在約4. 5的較低陰道pH下，包含羧基的Carbopol不離子化，具有正常的陰道液的吸收和藥 物化合物的釋放，而在暴露于pH 7. 4的精液時，包含羧基的Carbopol離子化，導致其排斥， 這進而導致對周圍流體的吸收增加和藥物化合物的釋放增加。
[0124] 在本發(fā)明的一個具體實施方案中，生物可腐蝕基質(zhì)包含聚-D，L-丙交酯（PDLL)、 硬脂酸鎂（MS)、Kollidon SR(KSR)和 Carbopol 794P NF。
[0125] 所述藥物化合物可以是抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥，優(yōu)選但不限于以下組的至少一種：齊多 夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、洛匹那韋、利托那韋、恩曲他濱、依法韋侖和泰諾福韋。藥物化合 物可以是抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥的可藥用鹽和/或包含抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥的組合物。
[0126] 所述藥物化合物可以是殺微生物劑，優(yōu)選但不限于以下組的至少一種：K卡 拉膠、卡波姆膠、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、癸酸、聚磺苯乙烯、卡拉膠、單癸酸甘油酯、聚 丙烯酸、乳桿菌、纖維素硫酸鹽、萘磺酸鹽、硫酸化聚乙烯醇、乳酸、鯨蠟基甜菜堿（cetyl betaine)、肉豆蘧胺氧化物、stampidine、藍藻抗病毒蛋白η、單克隆抗體、脂質(zhì)體、血小板反 應蛋白-1、酸橙汁、酸奶、替諾福韋、齊多夫定、樹狀聚合物、硫脲、銀、聚苯乙烯和十二烷基 硫酸鈉。所述藥物化合物可以是殺微生物劑的可藥用鹽和/或包含殺微生物劑的組合物。
[0127] 在本發(fā)明一個作為實例的實施方案中，所述藥物劑型包含抗逆轉(zhuǎn)錄病毒化合物和 殺微生物化合物。該藥物化合物可包含多種藥物化合物和/或佐劑和/或賦形劑。
[0128] 微球的直徑可以為約0. 2至約0. 5微米，以便在陰道內(nèi)使用時促使微球穿過靶部 位處的陰道粘液層，所述靶部位位于陰道壁上。
[0129] 提供了可提供從生物可腐蝕聚合物基質(zhì)持續(xù)釋放微球的藥物劑型，以及從微球暴 露于陰道液的時間開始的至少24小時或48小時內(nèi)提供藥物化合物之持續(xù)釋放的微球。
[0130] 優(yōu)選地，從將劑型插入陰道腔（優(yōu)選后穹窿區(qū)）的這天開始，在持續(xù)約30天的時 期中從生物可腐蝕基質(zhì)持續(xù)釋放微球，因此也從微球持續(xù)釋放藥物化合物。
[0131] 在本發(fā)明的一個具體實施方案中，其中生物可腐蝕基質(zhì)包含聚_D，L-丙交酯 (TOLL)、硬脂酸鎂（MS)、Kollidon SR(KSR)和Carbopol 794P NF，微球的持續(xù)釋放以及 進而藥物化合物的持續(xù)釋放可能是由于聚-D，L-丙交酯（PDLL)的水解降解、腐蝕以及當 Kollidon SR(KSR)從聚合物基質(zhì)中被濾出時的滲透。釋放機制在pH 4. 5時接近于遵循 Makoid-Banakar模型（調(diào)整后R2 = 0· 9973,圖19b)，在pH 7. 4時接近于遵循Weibull模 型（調(diào)整后 R2 = 〇· 9960,圖 19c)。
[0132] 根據(jù)本發(fā)明的第二個方面，提供了生產(chǎn)本發(fā)明第一個方面所述藥物劑型的方法， 所述方法包括在反應容器中使果膠（PEC)與粘蛋白（MUC)締合和/或結(jié)合和/或連接以形 成PEC-MUC微球。
[0133] 果膠（PEC)與粘蛋白（MUC)的締合和/或結(jié)合和/或連接通過交聯(lián)過程進行，其 中使用交聯(lián)劑以促進交聯(lián)過程。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，交聯(lián)劑可以是氯化鈣。
[0134] 所述方法還可包括向反應容器中添加至少一種藥物化合物的步驟，使得每個微球 包含至少一種藥物化合物。
[0135] 所述方法還可包括向反應容器中添加聚乙二醇（PEG)的步驟，以產(chǎn)生如上文本發(fā) 明第一方面所述的PEC-MUC-PEG微球。
[0136] 所述方法還可包括將微球基本封裝和/或包埋在如上文本發(fā)明第一方面所述的 生物可腐蝕聚合物基質(zhì)中的步驟，從而形成具有基本封裝和/或包埋了多個微球的生物可 腐蝕聚合物基質(zhì)的藥物劑型。
[0137] 所述方法還可包括機械地使藥物劑型成形為囊片劑或片劑之形狀和/或尺寸的 步驟，在使用中，將片劑或囊片劑插入到人的陰道內(nèi)，優(yōu)選陰道的后穹窿內(nèi)。
[0138] PEC-MUC-PEG微球適合于在陰道內(nèi)應用中使用。
[0139] 通過交聯(lián)乳化技術制備復合PEC-MUC-PEG微球，所述技術在此概括描述如下：
[0140] 將0. 01g質(zhì)量的粘蛋白（MUC)添加到13mL去離子水中，同時在300rpm下攪拌。攪 拌持續(xù)15分鐘，之后添加0.4g果膠（PEC)并再攪拌30分鐘。為了使果膠-粘蛋白深入地 相互滲透，滴加2mL 0. 01M氯化鈣（CaCl2)作為交聯(lián)劑，同時在300rpm下再攪拌30分鐘。 然后添加0. lmL體積的PEG 400,同時在300rpm下攪拌15分鐘以在乳劑中產(chǎn)生水相。然后 使用水：油比率為1 : 4的作為水相的PEC-MUC-PEG交聯(lián)溶液和作為油相的環(huán)己烷來制備 油包水（W/0)乳劑。將Span 85用作表面活性劑。首先，將1.125mL Span 85滴加到含有 60mL環(huán)己烷的燒杯中，同時在300rpm下攪拌15分鐘以獲得均勻的表面活性劑分布。然后 使用超聲發(fā)生器對該含有表面活性劑的環(huán)己烷在100%振幅下超聲處理2分鐘，同時使用 注射劑滴加 PEC-MUC-PEG水溶液，得到白色乳劑。然后將該乳劑在4000rpm下離心1分鐘 以使微球和環(huán)己烷有效分離。這使得在輕輕倒出環(huán)己烷后，白色濃縮乳劑保留在離心管底 部。向濃縮乳劑中添加凍干保護劑，例如葡萄糖、甘露醇或HP β-環(huán)糊精（1 % w/v)，之后將 所述乳劑在低于_70°C下冷凍24小時，然后凍干48小時以產(chǎn)生PEC-MUC-PEG微球。
[0141] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，藥物劑型是控釋陰道內(nèi)復合雙峰藥物劑型， 更特別地，復合雙峰聚合物藥物劑型，其中所述復合物包含上述PEC-MUC-PEG微球，其包埋 和/或封裝在生物可腐蝕聚合物基質(zhì)中。使微球和基質(zhì)一起形成囊片劑和/或片劑，使得 基質(zhì)外層基本封裝和/或包埋多個微球。所述復合雙峰藥物劑型適合于遞送藥物化合物， 其中微球攜帶藥物化合物，并且在使用中，當陰道內(nèi)施用所述劑型時，隨著基質(zhì)的腐蝕，微 球以速率調(diào)節(jié)部位特異的方式釋放所述化合物。所述劑型是雙峰的，因為基質(zhì)和微球二者 都具有獨特功能，其在提供藥物化合物之速率調(diào)節(jié)的部位特異的遞送中均有貢獻。
[0142] 為了形成所述劑型，用生物可腐蝕基質(zhì)基本封裝和/或包埋所述PEC-MUC-PEG微 球，然后模塑和/或定型和/或定尺寸為片劑或囊片劑。生物可腐蝕基質(zhì)應具有生物粘附 性質(zhì)以確保劑型有效停留在陰道腔（優(yōu)選后穹窿）內(nèi)部的區(qū)域，或者子宮頸的表面。
[0143] 由于粘蛋白（MUC)和果膠（PEC)各自以及組合的pH敏感性，所述PEC-MUC-PEG微 球是pH響應的。通常，MUC是III型豬胃粘蛋白，糖蛋白，其構(gòu)象結(jié)構(gòu)根據(jù)環(huán)境pH而改變。 在酸性PH，例如在正常健康人陰道腔中發(fā)現(xiàn)的pH下，其聚集，這在使用中有助于保持微球 結(jié)構(gòu)。當pH高時，例如在性交期間當堿性精液進入陰道腔的情況下，粘蛋白（MUC)經(jīng)過構(gòu) 象轉(zhuǎn)變成為伸展形式。該構(gòu)象改變造成PEC-MUC微球或PEC-MUC-PEG微球失去結(jié)構(gòu)完整性 或甚至破裂，導致釋放可對抗通過精液引入的病毒和/或微生物的藥物化合物。PEC和MUC 二者均為陰離子聚合物，并具有在低或酸性pH下不離子化的羧基。當精液射入陰道腔后 pH突然改變?yōu)閴A性時，果膠（PEC)和粘蛋白（MUC)都離子化，導致兩種聚合物之間的靜電 排斥，導致微球不穩(wěn)定甚至破裂，造成由各個微球攜帶的藥物化合物的釋放。生物可腐蝕基 質(zhì)通常包含聚癸二酸，其在水性陰道環(huán)境中水解成癸二酸，從而有助于保持期望的酸性陰 道微環(huán)境pH。因此，生物可腐蝕基質(zhì)充當pH保持劑，以在其被腐蝕時幫助保持陰道的酸性 pH。酸性pH的保持阻止性傳播疾病的傳播，這是因為酸性pH不利于許多通常造成性傳播 疾病的病原體。另外，聚癸二酸是疏水的，因此僅表面暴露于水的酯鍵以受控的方式水解， 而不從內(nèi)部結(jié)合的微球中泄露藥物化合物。這導致一旦從基質(zhì)中釋放,微球以pH響應的方 式釋放藥物化合物至少24小時?；旧?，從各個微球自基質(zhì)中釋放的時間開始，藥物化合 物自微球的釋放可持續(xù)長達24小時或48小時。
[0144] 包含在PEC-MUC微球和/或PEC-MUC-PEG微球中的藥物化合物通常是與治療和/ 或預防性傳播感染或疾病相關的藥物化合物。更特別地，所述藥物化合物是與治療和/或 預防HIV/AIDS相關的化合物。還應理解的是，本發(fā)明不限于用于治療和/或預防性傳播疾 病的藥物劑型，本文所述微球和劑型可用于治療和/或預防其他醫(yī)學和/或生理學和/或 生物學病癥。
[0145] 根據(jù)本發(fā)明的第三個方面，提供了本公開內(nèi)容限定的藥物劑型，其用于治療性傳 播感染/疾病和/或用于預防性傳播感染/疾病，其包括向有此需要的人陰道內(nèi)施用所述 藥物劑型。
[0146] 根據(jù)本發(fā)明的第四個方面，提供了用于治療性傳播感染/疾病的方法和/或用于 預防性傳播感染/疾病的方法，其包括陰道內(nèi)施用本公開內(nèi)容限定的藥物劑型。
[0147] 如上所述，本發(fā)明提供了藥物劑型，所述藥物劑型以pH依賴的方式提供藥物化合 物的部位特異和速率調(diào)節(jié)的陰道內(nèi)遞送。本發(fā)明至少緩解與現(xiàn)有技術相關的至少一個問 題。
[0148] 實施例
[0149] 部分1.根據(jù)本發(fā)明的果膠-粘蛋白-聚乙二醇（PEC-MUC-PEG)微球的制備、優(yōu)化 和表征。
[0150] 部分2.藥物劑型的制備，其中PEC-MUC-PEG微球與生物可腐蝕基質(zhì)一起形成復合 聚合物囊片劑。
[0151] 部分1 :用于陰道內(nèi)抗HIV-1藥物遞送的果膠-粘蛋白-聚乙二醇（PEC-MUC-PEG) 微球的制備、優(yōu)化和表征。
[0152] 目的：
[0153] 制備和優(yōu)化負載有AZT的PEC-MUC-PEG微球
[0154] 材料和方法
[0155] 材料
[0156] 具有1%至1.5%的結(jié)合的唾液酸的III型豬胃粘蛋白（MUC III)和聚乙二醇 400(PEG Mw 400)購自 AldHch^· (Sigma-Aldrich Inc.，St.Louis，USA)。商品級果 膠 GENU?,果膠 USP/100 型（PEC)(酯化度（DE)55-65 % )獲自 CP Kelco ApS，Lille Skensved，Denmark。模式抗HIV-1活性藥物成分（API)齊多夫定（AZT)獲自Glaxo Smith Kline, Middlesex, UK。包括氯化I丐、葡糖糖和環(huán)己燒在內(nèi)的其他材料和賦形劑是分析級的 并獲得后直接使用。模擬陰道液（SVF)由分析級試劑根據(jù)Owen和Katz的配方（Owen和 Katz，1999)制備。
[0157] 方法：
[0158] 負載有AZT的PEC-MUC-PEG微球的配制
[0159] 使用交聯(lián)乳化技術制備了微球。使PEC、MUC、PEG和AZT相繼分散并溶解在去離 子水中以形成水相，同時攪拌15分鐘，然后通過滴加氯化鈣來交聯(lián)。通過超聲處理以交 聯(lián)PEC-MUC-PEG-AZT(20%v/v)分散體作為水相并以環(huán)己烷作為油相制備了油包水（W/ 〇)乳劑。W : 0比為1 : 4,添加 span 85作為表面活性劑。將乳劑在4000rpm下離心1 分鐘，然后輕輕倒出過量的環(huán)己烷。將剩余的濃縮微球乳劑在_80°C下冷凍12小時，之 后凍干48小時。微球的表征包括：微球粒徑的測量、使用（Zetasizer Nano ZS，Malvern Instruments Ltd, Worcestershire,英國）測量ζ電位以及在透射電子顯微鏡（(TEM) (JE0L SlOOTransmission Electron Microscope，Tokyo, Japan)下觀察形狀、外觀和大小。
[0160] PEC-MUC-PEG 微球的 Box-Behnken 設計優(yōu)化
[0161] 在MINITAB? (V14, State College, Pennsylvania, USA)上使用三因素三水 平（33) Box-Behnken統(tǒng)計設計優(yōu)化了負載有AZT的PEC-MUC-PEG微球。由于其在制備微球 中的重要性，選擇了三個獨立參數(shù)的上限水平和下限水平：超聲處理時間（ST)、表面活性 齊U濃度（ST)和藥物：聚合物比率（D : P比率）。如表1所述，探索了響應性：粒徑、ζ電 位、平均溶出時間。表2示出了由Box-Behnken設計產(chǎn)生的15個制劑。對這些制劑進行實 驗室測試并將所得結(jié)果輸入到軟件中，然后計算經(jīng)優(yōu)化的制劑。
[0162] 表1.用于PEC-MUC-PEG微球優(yōu)化的Box-Behnken統(tǒng)計設計
[0163]

【權利要求】
1. 藥物劑型，其用于在人陰道內(nèi)的靶部位以受控和速率調(diào)節(jié)的方式釋放藥物化合物， 所述藥物劑型包含： 至少一個微粒，優(yōu)選微球，所述微球包含為所述微球提供剛性的果膠（PEC)框架和基 本封裝和/或包埋在所述果膠（PEC)框架內(nèi)的豬胃粘蛋白（MUC)，使得在使用中，將所述藥 物劑型插入到陰道中，所述果膠（PEC)和所述豬胃粘蛋白（MUC)調(diào)節(jié)所述藥物化合物在所 述革El部位以pH依賴的方式釋放，其中pH升高促進所述藥物化合物從所述微球中釋放的速 率提高，并且其中pH降低促進所述藥物化合物從所述微球中釋放的速率降低。
2. 根據(jù)權利要求1所述的藥物劑型，其還包含聚乙二醇（PEG)，使得當在陰道內(nèi)使用 時，所述聚乙二醇（PEG)提供中性電荷以促進所述微球穿過所述靶部位處的陰道粘液層， 所述靶部位位于陰道壁上。
3. 根據(jù)權利要求2所述的藥物劑型，其中所述聚乙二醇（PEG)為所述微球周圍的親水 涂層的形式，以形成PEC-MUC-PEG微球。
4. 根據(jù)權利要求2所述的藥物劑型，其中所述聚乙二醇（PEG)與所述微球共混以形成 整體的PEC-MUC-PEG微球。
5. 根據(jù)權利要求1至4中任一項所述的藥物劑型，其中所述聚乙二醇（PEG)是低分子 量聚乙二醇（PEG)，優(yōu)選分子量為約400g/mol的低分子量聚乙二醇（PEG)，且所述豬胃粘蛋 白（MUC)是III型豬胃粘蛋白（MUC III)。
6. 根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的藥物劑型，其中所述藥物劑型包含多個微球。
7. 根據(jù)權利要求1至6中任一項所述的藥物劑型，其中所述微球各自具有約0. 2至約 〇. 5微米的直徑，以便在陰道內(nèi)使用時促進所述微球穿過所述靶部位處的陰道粘液層，所述 靶部位位于陰道壁上。
8. 根據(jù)權利要求1至7中任一項所述的藥物劑型，其還包含與所述微球締合和/或結(jié) 合和/或連接的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，使得在使用中，將所述藥物劑型插入到陰道中，優(yōu) 選后穹窿中，所述生物可腐蝕聚合物基質(zhì)經(jīng)過預定時間段被腐蝕，從其中釋放所述微球，所 述微球進而在陰道內(nèi)釋放所述藥物化合物。
9. 根據(jù)權利要求8所述的藥物劑型，其中所述生物可腐蝕聚合物基質(zhì)包含以下組中的 至少一種：親水聚合物、疏水聚合物、聚（丙烯酸）（PAA)、聚（乳酸）（PLA)、卡拉膠、聚磺苯 乙烯、聚酰胺、聚環(huán)氧乙烷、纖維素、聚（乙烯吡咯烷酮）（PVP)、聚（乙烯醇）（PVA)、殼聚糖、 聚（丙烯酸乙酯）、甲基丙烯酸甲酯、氯三甲基銨甲基丙烯酸甲酯、羥基磷灰石、果膠、豬胃 粘蛋白、聚（癸二酸）（PSA)、羥丙基甲基纖維素（HPMC)、鄰苯二甲酸乙酸纖維素（CAP)、硬 脂酸鎂、聚乙二醇、諸如黃原膠及其變體的膠基聚合物、聚-D，L-丙交酯（PDLL)、Kollidon SR(KSR)和Carbopol 794P NF及所述組的衍生物。
10. 根據(jù)權利要求8或9所述的藥物劑型，其中使所述藥物劑型成形為囊片劑或片劑， 所述囊片劑或片劑包含基本封裝和/或包埋微球的所述生物可腐蝕聚合物基質(zhì)，使得在使 用中，所述基質(zhì)的生物腐蝕導致所述微球的釋放，所述微球進而釋放所述藥物化合物。
11. 根據(jù)權利要求1至10中任一項所述的藥物劑型，其中所述藥物化合物是抗逆轉(zhuǎn)錄 病毒藥和/或殺微生物劑。
12. 根據(jù)權利要求11所述的藥物劑型，其中所述抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥選自以下組中的至少 一種：齊多夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、洛匹那韋、利托那韋、恩曲他濱、依法韋侖和泰諾福韋 和/或所述抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥的可藥用鹽和/或包含所述抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥的組合物。
13. 根據(jù)權利要求11所述的藥物劑型，其中所述殺微生物劑選自以下組中的至少一 種：κ卡拉膠、卡波姆膠、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、癸酸、聚磺苯乙烯、卡拉膠、單癸酸甘油 酯、聚丙烯酸、乳桿菌、纖維素硫酸鹽、萘磺酸鹽、硫酸化聚乙烯醇、乳酸、鯨蠟基甜菜堿、肉 豆蘧胺氧化物、stampidine、藍藻抗病毒蛋白N、單克隆抗體、脂質(zhì)體、血小板反應蛋白-1、 酸橙汁、酸奶、替諾福韋、齊多夫定、樹狀聚合物、硫脲、銀、聚苯乙烯和十二烷基硫酸鈉和/ 或所述殺微生物劑的可藥用鹽和/或包含所述殺微生物劑的組合物。
14. 藥物劑型，其用于在人陰道內(nèi)的靶部位以受控和速率調(diào)節(jié)的方式釋放藥物化合 物，所述藥物劑型包含：多個微球，其各自由PEC、MUC和PEG組成，其中所述多個微球與由 PDLL、MS、KSR、carb〇p〇l 794P NF組成的生物可腐蝕聚合物基質(zhì)共混以形成囊片劑，使得在 使用中，將所述囊片劑插入到陰道中，優(yōu)選后穹窿中，所述生物可腐蝕聚合物基質(zhì)經(jīng)過預定 時間段被腐蝕，從其中釋放多個微球，微球各自進而在陰道內(nèi)釋放所述藥物化合物。
15. 根據(jù)權利要求1至14中任一項所限定的藥物劑型，其用于治療性傳播感染/疾病 和/或用于預防性傳播感染/疾病，包括向有此需要的人陰道內(nèi)施用所述藥物劑型。
16. -種治療性傳播感染/疾病的方法和/或預防性傳播感染/疾病的方法，其包括向 有此需要的人陰道內(nèi)施用根據(jù)權利要求1至14中任一項所限定的藥物劑型。
【文檔編號】A61K9/16GK104203219SQ201380016176
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2013年2月8日 優(yōu)先權日:2012年2月8日
【發(fā)明者】維內(nèi)斯·皮萊, 葉海亞·埃索普·朱納拉, 費利克斯·馬欣加伊德塞, 普拉迪普·庫馬爾 申請人:約翰內(nèi)斯堡威特沃特斯蘭德大學